NORMA TCNICA

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Nov/2007 21 PGINAS

Avaliao do uso de produtos biotecnolgicos para tratamento de efluentes lquidos, resduos slidos e remediao de solos e guas

Companhia Ambiental do Estado de So Paulo Avenida Professor Frederico Hermann Jr., 345 Alto de Pinheiros CEP 05459-900 So Paulo SP Tel.: (11) 3133 3000 Fax.: (11) 3133 3402 http: // w w w . c e t e s b . s p . g o v . b r

AVALIAO DO USO DE PRODUTOS BIOTECNOLGICOS PARA TRATAMENTO DE EFLUENTES LQUIDOS, RESDUOS SLIDOS E REMEDIAO DE SOLOS E GUAS
SUMRIO

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Introduo...................................................................................................................................... 1 1 Objetivo.......................................................................................................................................2 2 Documentos Complementares...................................................................................................2 3 Definies....................................................................................................................................3 4 Condies gerais.........................................................................................................................4 5 Condies especficas.................................................................................................................6 6 Monitoramento.........................................................................................................................11 7 Referncias................................................................................................................................12 Apndice A Fluxograma das etapas para avaliao do uso do produto biotecnolgico.....17 Apndice B Critrios para definio se o produto biotecnolgico contm microrganismos patognicos, geneticamente modificados, autctones ou alctones.........................................18 Apndice C Ensaios para avaliao toxicolgica, ecotoxicolgica e de patogenicidade..... 20 Introduo A capacidade dos microrganismos em degradar compostos orgnicos cientificamente reconhecida e vem sendo utilizada ao longo do tempo em processos de tratamento biolgico de efluentes lquidos e resduos slidos tanto domsticos como industriais. Devido a essa capacidade, tm sido desenvolvidos produtos biotecnolgicos destinados a diversas finalidades, dentre as quais se destacam a degradao de poluentes, a lixiviao de minerais, a desobstruo de poos de petrleo e a recuperao de locais contaminados (solo, guas superficiais e subterrneas). Em funo de seus riscos ambientais, tais produtos devem ser devidamente avaliados antes de sua aplicao para degradao de poluentes em sistemas de tratamento de resduos ou em locais contaminados, visando sua utilizao como prtica segura e eficaz do ponto de vista ambiental e sanitrio. Os produtos biotecnolgicos podem ser constitudos de microrganismos viveis, metablitos (como por exemplo enzimas), ou ainda misturas de microrganismos e metablitos contendo produtos orgnicos e inorgnicos, atuando como conservantes, estabilizantes, nutrientes, ativadores e outros. Os microrganismos viveis presentes no produto acabado podem reproduzirse, disseminar-se por novos locais e transferir material gentico para microrganismos naturalmente presentes no ambiente; enzimas podem catalisar reaes que interfiram no metabolismo normal de organismos originariamente existentes; e a introduo de nutrientes e outros compostos pode provocar desequilbrio no ecossistema. Levando-se em considerao esses fatores, torna-se necessria a avaliao dos efeitos sobre o

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ambiente do produto acabado e de seus componentes. Para que essa avaliao seja feita preciso estabelecer normas para identificao e quantificao de cada constituinte do produto biotecnolgico. Para produtos contendo microrganismos, alm da classificao taxonmica, deve-se conhecer a quantidade, a atividade, a infecciosidade, a patogenicidade e outros dados relevantes especficos para cada aplicao pretendida. Para produtos contendo metablitos so necessrias informaes sobre sua atividade e, a critrio da CETESB, sobre sua toxicidade. Alm disso, necessrio conhecer a toxicidade dos demais componentes presentes no produto. A CETESB, no cumprimento de suas atribuies como rgo responsvel pelo controle ambiental no Estado de So Paulo, houve por bem elaborar a presente Norma de Procedimento para avaliar a utilizao de produtos biotecnolgicos destinados ao tratamento de efluentes lquidos, resduos slidos e remediao de solo e guas, tendo em vista promover a melhoria e garantir a qualidade do meio ambiente no Estado de So Paulo, visando ao desenvolvimento social e econmico sustentvel. 1 Objetivo Esta norma fixa as condies necessrias para avaliar o uso de produtos biotecnolgicos quando destinados ao tratamento de efluentes lquidos, resduos slidos e remediao de solos e guas, exceto os bioestimuladores. Esta norma no se aplica a: 1.1 Produtos domissanitrios, os quais esto regulamentados por legislao especfica do Ministrio da Sade 1.2 Consrcios microbianos naturais enriquecidos de uma rea contaminada para emprego na mesma. 2 Documentos Complementares Os documentos relacionados a seguir contm disposies que constituem fundamento para esta norma. As edies indicadas estavam em vigor no momento desta publicao. Como toda norma est sujeita reviso e alteraes, aqueles que realizam procedimentos com base nesta, devem verificar a existncia de legislao superveniente aplicvel ou de edies mais recentes das normas citadas. Na aplicao desta norma, necessrio consultar:

BRASIL. Ministrio do Meio Ambiente. CONAMA. Resoluo n 314, de 29 de outubro de 2002. Dispe sobre o registro de produtos destinados remediao e d outras providncias. Dirio Oficial [da] Repblica Federativa do Brasil, Poder Executivo, Braslia, DF, 20 nov. 2002. Disponvel em: <http://www.mma.gov.br/port/conama/res/res02/res31402html>, Acesso em: abr. 2007 BRASIL. Ministrio da Sade. ANVISA. Resoluo RDC n 179, de 03 de outubro de 2006. Aprova o regulamento tcnico para produtos saneantes base de bactrias harmonizado no mbito do Mercosul atravs da Resoluo GMC n 25/06. Dirio Oficial da Unio: Repblica Federativa do Brasil, Poder Executivo, Braslia, DF, 04 out. 2006. Disponvel em:
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<http://elegis.anvisa.gov.br/leisref/public/showAct.php?id=24164&word=resolu%C3%A7%C 3%A3o%20rdc>. Acesso: abr. 2007.

SO PAULO (Estado). Secretaria do Meio Ambiente. Resoluo SMA 37 de 30 ago. 2006. Dispe sobre os requisitos dos laudos analticos submetidos aos rgos integrantes do Sistema Estadual de Administrao da Qualidade Ambiental, Proteo, Controle e Desenvolvimento do Meio Ambiente e Uso Adequado dos Recursos Naturais SEAQUA. Dirio Oficial Estado de So Paulo, Poder Executivo, So Paulo, v. 116, n. 166. 31 ago. 2006. Seo 1, p. 26.

3 Definies Para os efeitos desta norma, so adotadas as seguintes definies: 3.1 Biotecnologia Uso integrado da bioqumica, da microbiologia, da gentica e da engenharia, com o propsito de viabilizar a aplicao tecnolgica das potencialidades dos microrganismos, de clulas, de cultura de tecidos e de suas partes. 3.2 Gene Seqncia de ADN (cido desoxirribonucleico), responsvel pela sntese de uma ou mais cadeias polipeptdicas. 3.3 Infecciosidade Capacidade do microrganismo de invadir ou colonizar o hospedeiro. 3.4 Microrganismo alctone (no-indgeno) Microrganismo pertencente a espcie no nativa de determinada regio biogeogrfica, introduzido em um ecossistema, podendo persistir e at reproduzir-se por um tempo, participando ou no de interaes e transformaes ecolgicas. 3.5 Microrganismo autctone (indgeno) Microrganismo pertencente a espcie nativa de determinada regio biogeogrfica, em que se pretende sua aplicao, onde participa de funes reprodutivas, ciclo de nutrientes e fluxos de energia. 3.6 Microrganismo geneticamente modificado Microrganismo cujo material gentico, resposta gentica ou ambos tenham sido modificados de uma forma que no ocorreria naturalmente. 3.7 Patogenicidade
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Capacidade do microrganismo causar danos (doena) ao hospedeiro aps a infeco. 3.8 Patgeno Microrganismo (incluindo vrus ou plasmdeo) que tem a capacidade de causar doena ao hospedeiro, aps a infeco. 3.9 Produtos biotecnolgicos So os produtos resultantes da aplicao da biotecnologia, constitudos de microrganismos viveis, metablitos (como, por exemplo, enzimas), ou misturas de microrganismos e metablitos. 3.10 Recursos ambientais A atmosfera, as guas interiores, superficiais e subterrneas, os esturios, o mar territorial, o solo, o subsolo, os elementos da biosfera, a fauna e a flora. 3.11 Tecnologia de ADN recombinante Formao de novas combinaes de material gentico pela insero de molculas de cidos nucleicos, produzidas por quaisquer meios in vitro, utilizando vetores de clonagem (vrus, plasmdeos bacterianos ou outros sistemas de vetores), que so capazes de propagao contnua quando inseridos em organismo hospedeiro, nos quais tais vetores no ocorrem naturalmente. 3.12 Toxicidade Capacidade inerente de uma substncia qumica de produzir um efeito adverso em conseqncia de sua interao com um organismo vivo. 4 Condies gerais 4.1 Os produtos biotecnolgicos sujeitos a esta norma devem estar registrados no IBAMA segundo Resoluo CONAMA N 314, de 29 de outubro de 2002 (BRASIL, 2002). A aplicao desses produtos ser objeto de avaliao caso a caso, com base na sua identificao, classificao e seu uso pretendido e somente podero ser utilizados se aprovados pela CETESB. Este procedimento constitudo das etapas seqenciais e eliminatrias, descritas a seguir, que sero cumpridas e avaliadas uma a uma, conforme indicado no Apndice A. 4.2 No ser permitida a utilizao de produtos biotecnolgicos contendo microrganismos comprovadamente patognicos, conforme definido no Apndice B. O produtor dever informar CETESB a ocorrncia de infeces oportunistas relatadas na literatura associadas aos microrganismos contidos no produto. 4.3 Para o processo de avaliao o interessado dever apresentar CETESB a documentao estabelecida no item 5 da presente norma, cuja terminologia, numerao e seqncia no devem ser alteradas. O formulrio a ser utilizado est disponvel em: <http://www.cetesb.sp.gov.br>
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4.3.1 O formulrio devidamente assinado pelo representante legal e responsvel tcnico devidamente registrado em seu conselho profissional, juntamente com a documentao estabelecida, dever ser encaminhado Agncia Ambiental da CETESB em cuja rea de atuao est localizado o empreendimento no qual ser utilizado o produto. 4.3.2 A documentao dos ensaios requeridos, bem como quaisquer outros documentos ou informaes adicionais, podero ser solicitados ao empreendedor durante as etapas de avaliao. 4.3.2.1 O no atendimento sem justificativa tcnica por escrito no prazo previsto, implicar no arquivamento do processo, por despacho fundamentado, informando sobre a adoo das medidas cabveis. 4.3.3 Os ensaios para avaliao de uso de produtos biotecnolgicos somente sero aceitos quando realizados em laboratrios acreditados conforme Resoluo SMA No 37 de 30.08.06 (SO PAULO, 2006) . 4.3.4 A CETESB somente aceitar ensaios provenientes de laboratrios estrangeiros com traduo juramentada, acompanhados de documento emitido pelo organismo responsvel pela acreditao dos ensaios realizados em Boas Prticas de Laboratrio BPL (INMETRO, 2003) ou ISO/IEC 17025 (ISO; IEC, 2005) do pas onde foi conduzido o estudo. O referido documento dever ser assinado por responsvel pelo organismo de acreditao e dever conter as seguintes informaes:

Nome do laboratrio executor do estudo; Endereo completo; reas de atuao; Data da ltima inspeo; Informaes se o laboratrio sofreu algum tipo de penalidade entre as inspees.

4.3.5 Quaisquer modificaes a serem realizadas no produto, tais como, composio, condies de fabricao, fornecedores ou fabricantes, dosagem, indicaes de uso, especificaes enunciadas em rtulo, bula, embalagens, devero ser submetidas prvia aprovao do IBAMA e comunicadas CETESB. 4.3.5.1 Ser cancelada a aprovao do uso do produto sempre que constatada modificao no autorizada, omisso de informaes ou fornecimento de informaes incorretas, sujeitando ainda o infrator s sanes legais cabveis. 4.3.6 As embalagens, os rtulos e as bulas dos produtos biotecnolgicos devero atender aos requisitos da legislao especfica vigente. 4.3.6.1 As embalagens devem ser projetadas e fabricadas de forma a impedir qualquer vazamento, evaporao, perda ou alterao de seu contedo e de modo a facilitar as operaes de lavagem, classificao, reutilizao, reciclagem e destinao final adequada. 4.3.7 O licenciamento ambiental obtido para produo, fracionamento e reembalagem de produtos biotecnolgicos no desobriga o interessado do atendimento a esta norma no ato da aplicao do produto comercial.
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4.3.8 O fabricante, distribuidor e o usurio do produto so responsveis por sua preservao e cuidados necessrios para seu armazenamento, manuseio e destinao final, tanto das embalagens como do produto comercial quando inservvel. 5 Condies especficas No requerimento de solicitao de uso do produto, o interessado dever apresentar as informaes necessrias para a identificao, caracterizao e uso pretendido do produto biotecnolgico, que devero ser fornecidas CETESB em trs etapas seqenciais e eliminatrias, descritas a seguir. I Primeira Etapa 5.1 Informaes Gerais do Produto. 5.1.1 Nome comercial do produto (comum, fantasia, n de cdigo). 5.1.2 Identificao do fabricante e do distribuidor. 5.1.2.1 Nome e endereo completos dos fabricantes (formuladores, manipuladores) e do distribuidor. 5.1.2.2 Nmero do CNPJ. 5.1.2.3 Cpias das licenas ambientais, se houver. 5.1.3 Nome do responsvel tcnico e registro profissional. 5.1.4 Cpia autenticada do registro no IBAMA. 5.1.5 Descrio e forma de apresentao do produto. 5.1.6 Usos indicados para o produto. 5.1.7 Classificao taxonmica dos microrganismos e nome cientfico at nvel de espcie. 5.1.8 Caractersticas dos microrganismos presentes no produto utilizando os critrios definidos no Apndice B. 5.1.9 Composio do produto: concentrao e identificao de todos os componentes, com suas respectivas funes, comprovadas por laudos tcnicos, informando a metodologia de quantificao. 5.1.10 Teores de impurezas significativas do ponto de vista toxicolgico ou ambiental, comprovados por laudos tcnicos. 5.1.11 Descrio do processo de sntese, formulao ou ambos.
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5.1.12 Propriedades fsico-qumicas: aspecto (cor, forma); odor; pH; massa especfica; e, quando aplicvel, reatividade com outros compostos ou produtos e viscosidade. 5.1.13 Condies de segurana e proteo individual no armazenamento, manuseio e aplicao: descrio do Equipamento de Proteo Individual (EPI) e dos efeitos na sade. Orientao mdica, quando pertinente. Quando cabvel, apresentar as seguintes propriedades: ponto de ebulio (oC); presso de vapor a 20oC (mm Hg); ponto de fuso (oC); solubilidade ou miscibilidade em gua (g/100g gua); coeficiente de evaporao; ponto de fulgor (oC) e limites de inflamabilidade. 5.1.14 Descrio dos impactos ambientais potenciais decorrentes da aplicao do produto. 5.1.15 Descrio do modo de ao do produto no(s) substrato(s) atingido(s). 5.1.16 Controle de Qualidade do Produto: indicar o mtodo utilizado para garantir a ausncia de substncias ou microrganismos indesejados, uniformidade e padronizao do produto. 5.2 Informaes Especficas do Produto Dependendo das caractersticas do produto a ser utilizado e da sua origem, apresentar as informaes listadas nos itens 5.2.1, 5.2.2 ou ambos. 5.2.1 Produto contendo microrganismos 5.2.1.1 Identificao dos organismos presentes no produto incluindo, alm da classificao taxonmica e nome cientfico, a procedncia, informaes sobre ciclo biolgico, caractersticas especficas e mtodo de identificao (taxonomia convencional, molecular ou ambas), com os respectivos limites de quantificao, usando as tcnicas especficas mais adequadas. No caso de cultura depositada em coleo, informar o local e referncia: instituio, endereo completo e cdigo do depsito. 5.2.1.2 Descrio do habitat natural dos microrganismos ou de suas linhagens parentais, incluindo informaes sobre predadores naturais, parasitas e organismos competidores. a) Ocorrncia, distribuio geogrfica e local de isolamento; b) Funo ecolgica ou papel na cadeia alimentar dos organismos. 5.2.1.3 Informaes sobre as interaes dos microrganismos e os hospedeiros, especialmente infecciosidade e patogenicidade. 5.2.1.4 Informaes ou dados de literatura sobre a competitividade ambiental relativa do microrganismo. 5.2.1.5 Informaes ou dados de literatura sobre o potencial de sobrevivncia, sua capacidade de reproduo no ambiente e trocas genticas com outros microrganismos. 5.2.1.6 Identificao e quantificao dos demais componentes no microbianos do produto, adicionados ou utilizados como suporte, tais como solventes, estabilizantes, conservantes,
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nutrientes, emulsificantes, tensoativos (surfactantes), e outros. 5.2.1.7 Caso contenha Organismos Geneticamente Modificados (OGM), alm de atender na ntegra legislao pertinente, devem ainda ser fornecidas as seguintes informaes sobre o(s) microrganismo(s): a) Mtodos usados para a alterao gentica; b) Identidade e localizao do segmento do gene alterado, inserido ou deletado (origem, natureza, dados de seqncia); c) Regio de controle do gene e descrio do novo fentipo ou caractersticas que so expressas; d) Potencial de troca e transferncia gentica com outro organismo e estabilidade gentica de qualquer seqncia inserida; e) Competitividade ambiental relativa comparada com as linhagens parentais. 5.2.2 Produto contendo metablitos (enzimas, polmeros e biosurfactantes). 5.2.2.1 Identificao do produto metablito: nome, natureza, medida da atividade e formas de inativao. 5.2.2.2 Identificao do(s) microrganismo(s) utilizado(s) na obteno desse produto, conforme item 5.2.1. 5.2.2.3 Identificao e quantificao dos demais componentes no biolgicos do produto, adicionados ou utilizados como suporte, tais como solventes, estabilizantes, conservantes, nutrientes, emulsificantes, tensoativos (surfactantes), dentre outros. 5.2.2.4 Para produtos aplicados no solo, dever ser demonstrado, por meio de teste respiromtrico, que esses no interferem na atividade microbiana do solo. II Segunda Etapa A segunda etapa aplicvel somente para os produtos cujo uso foi aprovado na etapa anterior. 5.3 Informaes sobre a aplicao do produto. 5.3.1 Descrio do sistema ou local onde ser feita a aplicao. 5.3.2 Uso proposto do produto (sistema ou recurso ambiental onde ser utilizado). 5.3.3 Descrio da forma de aplicao: forma de preparo da diluio; dose de aplicao para cada uso pretendido; freqncia de aplicao; mtodo de aplicao e restries de uso (situaes onde no se recomenda o uso do produto). 5.3.4 Destinao do produto e seus derivados ou subprodutos aps utilizao.
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5.3.5 Eficincia estimada: relao entre quantidade aplicada e o resultado esperado. 5.3.6 Descrio do modo de ao do produto no(s) substrato(s) atingido(s). 5.3.7 Dados sobre a biodegradabilidade imediata (solos locais e gua). 5.3.8 Dados toxicolgicos e de patogenicidade em mamferos especificados no Apndice Citem C1. 5.3.9 Dados sobre a avaliao ecotoxicolgica conforme especificado no Apndice C item C2. 5.3.10 Descrio do recipiente utilizado na aplicao do produto: tipo, material, capacidade volumtrica, resistncia corroso. III Terceira Etapa 5.4 Avaliao ambiental da aplicao do produto. Esta etapa se destina apresentao de informaes referentes aos efeitos ambientais da aplicao do produto biotecnolgico, assim como toxicidade da mistura deste produto, contaminantes, metablitos e subprodutos. Para obter amostras representativas dos efluentes lquidos, resduos slidos e emisses gasosas que sero lanados, direta ou indiretamente, ao ambiente, devero ser realizados ensaios em escala reduzida (piloto ou bancada), para avaliao de potenciais riscos ambientais, com a aplicao do produto ao efluente, resduo ou material especfico a ser tratado, nas mesmas condies operacionais que se pretenda aprovar a utilizao. 5.4.1 Ensaios para avaliar os efeitos ambientais da aplicao do produto. 5.4.1.1 O interessado dever apresentar ensaios de avaliao dos efeitos ambientais de aplicao do produto. 5.4.1.2 Caso j tenham sido realizados ensaios com a aplicao do produto biotecnolgico para o uso ou tratamento especfico que se pretenda obter aprovao, o interessado dever apresentar um relatrio detalhado contendo todas as informaes sobre metodologia empregada, descrio dos resultados obtidos, avaliao das informaes obtidas na parte experimental e as concluses destes ensaios CETESB, para apreciao e manifestao. 5.4.1.3 Se a avaliao da CETESB concluir pela aceitao dos ensaios j realizados e aprovar o uso especfico do produto biotecnolgico em anlise, devero ser adotadas as orientaes descritas a partir do item 6. 5.4.1.4 Caso tais ensaios ainda no tenham sido efetuados, ou aqueles j realizados no tenham sido considerados adequados pela CETESB, o interessado em utilizar o produto biotecnolgico dever preparar uma Proposta de Ensaios para Avaliao de Efeitos Ambientais e submet-lo CETESB para apreciao e manifestao, previamente realizao destes estudos. As diretrizes para a realizao destes ensaios so as seguintes:
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a) Os ensaios devem ser planejados e executados para um conjunto de trs componentes:

Meio especfico em que o produto biotecnolgico ser aplicado (efluentes lquidos, resduos slidos, solo contaminado, etc.); Condio de aplicao pretendida; e Produto biotecnolgico a ser aplicado.

A alterao de qualquer um dos componentes do conjunto implica na necessidade de planejamento e realizao de novos ensaios. b) Os pareceres e resultados obtidos nos ensaios realizados sero nica e exclusivamente vlidos para as condies destes ensaios. c) As condies de todos os ensaios, bem como os critrios adotados para a definio das mesmas, devem ser descritas detalhadamente, incluindo:

A escala em que sero realizados os ensaios; A durao dos ensaios e critrios para avaliao de sua estabilidade operacional; O nmero de condies experimentais avaliadas e suas replicatas; Os parmetros de controle das variveis dos ensaios e do seu monitoramento; Destinao dos materiais (efluentes lquidos, resduos slidos, solo contaminado, etc) remanescentes e no utilizados e resduos gerados nos ensaios considerando sua caracterizao.

d) Os materiais nas correntes de sada dos sistemas de tratamento ou aplicao do produto biotecnolgico (como material tratado, subprodutos, resduos do tratamento, slidos, lquidos ou gasosos) devem ser caracterizados de forma representativa em sua composio e toxicidade. 5.4.1.5 Uma vez aprovada a Proposta de Ensaios para Avaliao de Efeitos Ambientais pela CETESB, o interessado dever executar a referida proposta e elaborar um Relatrio Tcnico que deve conter, no mnimo, as seguintes informaes:

Descrio das caractersticas do produto testado (resumo do item 5.1.); Descrio detalhada das condies dos ensaios e dos subprodutos gerados, incluindo as metodologias operacionais e analticas adotadas; Descrio de mtodos estatsticos utilizados; Apresentao de todos os resultados obtidos durante os ensaios, inclusive os laudos de determinaes analticas; Apresentao de uma discusso detalhada dos resultados obtidos, considerando tambm eventuais informaes j disponveis na literatura; Apresentao das concluses obtidas durante os ensaios; Identificao da entidade e/ou instituio onde se realizaram os ensaios e dos responsveis pelo contedo do relatrio.

5.4.1.6 O referido relatrio tcnico deve ser entregue CETESB que, aps sua anlise, se manifestar quanto aprovao ou no do uso pretendido para o produto biotecnolgico em questo.
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6 Monitoramento O produto aprovado, aps o cumprimento das etapas previstas nesta norma, deve ter sua aplicao no meio ambiente acompanhada por um programa de monitoramento previamente submetido aprovao da CETESB, ou seja, o interessado somente poder iniciar o uso do produto biotecnolgico quando este plano for aprovado pela CETESB. Caso sejam constatados danos ambientais no previstos, no decorrer do uso do produto, este ser imediatamente suspenso e o interessado/usurio dever adotar medidas emergenciais de conteno, informar CETESB e propor medidas de recuperao.

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7 Referncias ABNT. NBR 12713: ecotoxicologia aqutica: toxicidade aguda - mtodo de ensaio com Daphnia spp (Cladocera, Crustacea). Rio de Janeiro, 2004a. 21 p. ABNT. NBR 15088: ecotoxicologia aqutica: toxicidade aguda - mtodo de ensaio com peixes. Rio de Janeiro, 2004b. 19 p. ABNT. NBR 13373: ecotoxicologia aqutica: toxicidade crnica - mtodo de ensaio com Ceriodaphnia spp (Crustacea, Cladocera). Rio de Janeiro, 2005a. 15 p. ABNT. NBR 12648: ecotoxicologia aqutica: toxicidade crnica - mtodo de ensaio com algas. Rio de Janeiro, 2005b. 24 p. ABNT. NBR 15308: ecotoxicologia aqutica: toxicidade aguda - mtodo de ensaio com misidceos (Crustacea). Rio de Janeiro, 2005c. 17 p. ABNT. NBR 15411: ecotoxicologia aqutica - determinao do efeito inibitrio de amostras de gua sobre a emisso de luz de Vibrio fischeri (ensaio de bactria luminescente). Rio de Janeiro, 2006a. 18 p. Parte 1: mtodo utilizando bactrias recm-cultivadas. ABNT. NBR 15411: ecotoxicologia aqutica - determinao do efeito inibitrio de amostras de gua sobre a emisso de luz de Vibrio fischeri (ensaio de bactria luminescente). Rio de Janeiro, 2006a. Parte 2: mtodo utilizando bactrias desidratadas. 14 p. ABNT. NBR 15411: ecotoxicologia aqutica - determinao do efeito inibitrio de amostras de gua sobre a emisso de luz de Vibrio fischeri (ensaio de bactria luminescente). Rio de Janeiro 2006a. Parte 3: mtodo utilizando bactrias liofilizadas. 15 p. ABNT. NBR 15350: ecotoxicologia aqutica: toxicidade crnica de curta durao - mtodo de ensaio com ourio-do-mar (Echinodermata: Echinoidea). Rio de Janeiro, 2006b. 17 p. ADAMS, S.M. (Ed.). Biological indicators of stress in fish : symposium American Fish Society, 8. Maryland: American Fish Society, 1990. 1991 p. ANVER, M. R.; POND, C. Biology and diseases of amphibians. In: FOX, J. G.; COHEN, E. J.; LOEW, F.M. (Ed.). Laboratory animal medicine. Orlando: Academic Press, 1984. BRASIL. Ministrio do Meio Ambiente. CONAMA. Resoluo no 314, de 29 de outubro de 2002. Dispe sobre o registro de produtos destinados remediao e d outras providncias. Dirio Oficial [da] Repblica Federativa do Brasil, Poder Executivo, Braslia, DF, 20 nov. 2002. Disponvel em: < http://www.mma.gov.br/port/conama/res/res02/res31402.html>. Acesso em: abr. 2007. BRASIL. Ministrio da Cincia e Tecnologia. Comisso Tcnica Nacional de Biossegurana. Lei n 11.105, de 24 de maro de 2005. Regulamenta os incisos II, IV e V do 1 do art. 225 da Constituio Federal, estabelece normas de segurana e mecanismos de fiscalizao de atividades que envolvam organismos geneticamente modificados OGM e seus derivados, cria o
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Conselho Nacional de Biossegurana CNBS, reestrutura a Comisso Tcnica Nacional de Biossegurana CTNBio, dispe sobre a Poltica Nacional de Biossegurana PNB, revoga a Lei n 8.974, de 5 de janeiro de 1995, e a Medida Provisria n 2.191-9, de 23 de agosto de 2001, e os arts. 5, 6, 7, 8, 9, 10 e 16 da Lei n 10.814, de 15 de dezembro de 2003, e d outras providncias. Dirio Oficial da Unio: Repblica Federativa do Brasil, Poder Executivo, Braslia, DF, 28 mar. 2005. Seo 1, p. 1. Disponvel em: <http://www.mct.gov.br/index.php/content/view/1034.html>. Acesso em: abr. 2007. BRASIL. Ministrio da Cincia e Tecnologia. Comisso Tcnica Nacional de Biossegurana. Decreto no 5.591, de 22 de novembro de 2005. Regulamenta dispositivos da Lei n 11.105, de 24 de maro de 2005, que regulamenta os incisos II, IV e V do 1 do art. 225 da Constituio, e d outras providncias. Dirio Oficial da Unio: Repblica Federativa do Brasil, Poder Executivo, Braslia, DF, 23 nov. 2005. Seo 1, p. 1. Disponvel em: <http://www.mct.gov.br/index.php/content/view/1041.html>. Acesso em: abr. 2007. BRASIL. Ministrio da Sade. ANVISA. Resoluo RDC no 179, de 03 de outubro de 2006. Aprova o regulamento tcnico para produtos saneantes base de bactrias harmonizado no mbito do Mercosul atravs da Resoluo GMC n 25/06. Dirio Oficial da Unio: Repblica Federativa do Brasil, Poder Executivo, Braslia, DF, 04 out. 2006. Disponvel em: <http://elegis.anvisa.gov.br/leisref/public/showAct.php?id=24164&word=resolu%C3%A7%C3%A3o%2 0rdc>. Acesso: abr. 2007. BRENNER, D.J.; KRIEG, N.R.; STALEY, J.T. (Ed.). Bergey's manual of systematic bacteriology. 2nd ed. New York: Springer, 2005. v. 2: the proteobacteria. BUCHANAN, A. M. Veterinary microbiology. Amsterdam, Elsevier Scientific, 1982. CASTRO, V.L.S.S. et al. Protocolo: avaliao de agentes microbianos de controle de pragas para registro como biopesticidas. Vol. II Testes toxicopatolgicos em mamferos. Jaguarina, SP. EMBRAPA, 1999. 38 p. COLLIER, L.; BALOWS, A.; SUSSMAN, M. Microbiology and microbial infections. 9th ed. Edited by D. Brian, W. J. Mahy and Leslie Collier. London: Arnold, 1998. 1086 p. v. 1: virology. COLLIER, L.; BALOWS A.; SUSSMAN, M. Microbiology and microbial infections. 9th ed. Edited by Albert Balows and Brian I. Duerden. London: Arnold, 1998. 1501 p. v. 2: systematic bacteriology. COLLIER, L.; BALOWS A.; SUSSMAN, M. Microbiology and microbial infections. 9th ed. Edited by William J. Hausler Jr and Max Sussman. London: Arnold, 1998. 1163 p. v. 3: bacteriology infections. COLLIER, L.; BALOWS A.; SUSSMAN, M. Microbiology and microbial infections. 9th ed. Edited by Libero Ajello and Roderick J. Hay. London: Arnold, 1998. 711 p. v. 4: medical mycology. COLLIER, L.; BALOWS A.; SUSSMAN, M. Microbiology and microbial infections. 9th ed. Edited by Julius P. Kreier and Derek Wakelin. London: Arnold, 1998. 701 p. v. 5: parasitology.
13

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DAVIDSON, E. Pathogenesis of invertebrate microbial diseases. Osmun: Allanheld, 1981. DORNER, F.; DREWS, J. (Ed.). Pharmacology of bacterial toxins. In: BOVET, D.; SARTORELLI, A.C.; BOWMAN, W.C. (Ed.). International encyclopedia of pharmacology and therapeutics. Oxford: Pergamon, 1986. Section 119, 748 p. (Pharmacology and therapeutics, suppl. 19). ELLIS, A.E. Fish and shellfish pathology. London: Academic Press, 1985. EUROPA. Directiva 2001/18/CE del Parlamento Europeo y del Consejo, de 12 de marzo de 2001, sobre la liberacin intencional en el medio ambiente de organismos modificados genticamente y por la que se deroga la Directiva 90/220/CEE del Consejo. Dirio Oficial de Las Comidades Europeas, Bruselas, L 106, v. 44, 17 abr. 2001. 38 p. Disponvel em: <http://eur-lex.europa.eu/LexUriServ/site/es/oj/2001/l_106/l_10620010417es00010038.pdf>. Acesso em: abr. 2007. FEACHEM, R.G. et al. Sanitation and disease: health aspects of excreta and wastewater management. Chichester: John Wiley & Sons, 1983. FRIGHETTO, R.T.S.; VALARINI, P.J. Indicadores biolgicos e bioqumicos da qualidade do solo: manual tcnico. Jaguarina, SP. EMBRAPA: FUNEP, 2000. 198 p. HITCHNER, S.B. Isolation and identification of avian pathogens. 2nd ed. College Station: American Association of Avian Pathologists, 1980. INMETRO. NIT - DICLA 028: critrios para o credenciamento de laboratrios de ensaios segundo os princpios BPL - boas prticas de laboratrio. Rio de Janeiro, 2003. 30 p. Disponvel em: <http://www.inmetro.gov.br/credenciamento/laboratorios/bpl.asp>. Acesso em: abr. 2007. ISO; IEC. ISO/IEC 17025: general requirements for the competence of testing and calibration laboratories. [S.L.], 2005. LENNETTE, E.H. Manual of clinical microbiology. 4th ed. Washington: American Society for Microbiology, 1985. MARCUS, L.C. Veterinary biology and medicine of captive amphibians and reptiles. Philadelphia: Lea and Febiger, 1981. MILEWSKI, E.A. Field testing of microrganisms modified by recombinant DNA techniques: applications issues and development of Points to Considerdocument. Recombinant DNA. Technical Bulletin, v. 8, p. 102-108, 1985. NATIONAL ENVIRONMENTAL TECHNOLOGY APPLICATIONS CORPORATION (United States). Evaluation methods manual for oil spill response agents. Pittsburgh, PA: University of Pittsburgh: Applied Research Center, 1993. 53 p. OECD. OECD:207 - eathworm, acute toxicity tests. In: ____. Guidelines for testing of chemicals. Bedforshire, 1984. v. 1, n. 2, p.1-9.
14

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PAVANELLI, G.C.; EIRAS, J.C.; TAKEMOTO, R.M. Doenas de peixes: profilaxia, diagnstico e tratamento. 2.ed. Maring: EDUEM, 2002. 305 p. SO PAULO (Estado). Secretaria do Meio Ambiente. Resoluo SMA 37 de 30 ago. 2006. Dispe sobre os requisitos dos laudos analticos submetidos aos rgos integrantes do Sistema Estadual de Administrao da Qualidade Ambiental, Proteo, Controle e Desenvolvimento do Meio Ambiente e Uso Adequado dos Recursos Naturais SEAQUA. Dirio Oficial Estado de So Paulo, Poder Executivo, So Paulo, v. 116, n. 166, 31 ago. 2006. Seo 1, p. 26. SCHUHARDT, V.T. Pathogenic microbiology. Philadelphia: J.B. Lippincott, 1978. SIMBERLOFF, D. Community effects of introduced species. In: NITECKI, M.H. Biotic crises in ecological and evolutionary time. New York: Academic Press, 1981. p. 79-107. SPARKS, A.K. Synopsis of invertebrate pathology exclusive of insects. Holland: Elsevier, 1985. TRABULSI, L.R.; ALTERTHUM, F.; GOMPERTS, O.F. Microbiologia. Rio de Janeiro: Atheneu, 1999. UNITED STATES. Microbial products of biotechnology: final regulation under substances control act. Federal Register, v. 62, n. 72, apr. 1997. p. 17909-17958. the toxic

UNITED STATES. Departament of Health and Human Services Center for Disease Control and Prevention and National Institutes of Health. Biosafety in microbiological and biomedical laboratories (BMBL). 4th ed. Washington, 1999. Disponvel em: <http.www.cdc.gov/od/ohs/biosfty/bmbl4/bmbl4toc.htm>. Acesso em: abr. 2007. UNITED STATES. EPA. Accomplishments and goals in reducing toxic chemical risk: FY 1989 Report to Congress on the Toxic Substances Control Act (TSCA) - pesticides and toxic substances. Washington, DC, 1990. (TS-799). UNITED STATES. EPA. OPPTS. Ecological effects test guidelines. Washington, DC, 1996. (EPA 712-C-96-154). OPPTS 850.4200: seed germination/root elongation toxicity tests. Disponvel em: <http://www.epa.gov/opptsfrs/publications/OPPTS_Harmonized/850_Ecological_Effects_Test_ Guidelines/Drafts/850-4200.pdf>. Acesso em: abr. 2007. UNITED STATES. EPA. Microbial pesticide test guidelines. Washington, DC, [2006]. (Group C: toxicology test guidelines Series 885.3000). Disponvel em: <http://www.epa.gov/pesticides/biopesticides/regtools/guidelines/microbial_gdlns.htm>. Acesso em: abr. 2007. UNITED STATES. EPA. Biochemical pesticide test guidelines. Washington, DC, [2006]. (Biochemical pesticides toxicology data requirements: series 870). Disponvel em: <http://www.epa.gov/pesticides/biopesticides/regtools/guidelines/biochem_gdlns.htm>. Acesso em: abr. 2007.
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VERONESI, R. Doenas infecciosas e parasitrias. 6.ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 1976. WARREN, J.W. Diseases of hatchery fish. 6th ed. United States: Fish and Wildlife Service Pacific Region, 1991. 92 p. ... / Apndice A

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APNDICE A - Fluxograma das etapas para avaliao do uso do produto biotecnolgico

IDENTIFICAO DO PRODUTO

COMPLEMENTAO DE DADOS APROVA? NO REPROVA SIM PRIMEIRA ETAPA DE APROVAO

INFORMAO SOBRE APLICAO DO PRODUTO

COMPLEMENTAO DE DADOS APROVA? NO REPROVA SIM SEGUNDA ETAPA DE APROVAA AVALIAO AMBIENTAL DA APLICAO DO PRODUTO

COMPLEMENTAO DE DADOS APROVA? NO REPROVA SIM TERCEIRA ETAPA DE APROVAO

MONITORAMENTO

OCORRE DANO AMBIENTAL NO PREVISTO?

SIM

SUSPENDE USO, ADOTA MEDIDAS DE CONTENO, INFORMA CETESB E APRESENTA PROPOSTA RECUPERAO ETAPA DE MONITORAMENTO

NO

... / Apndice B
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APNDICE B -

Critrios para definies se o produto biotecnolgico contm microrganismos patognicos, geneticamente modificados, autctones ou alctones.

B1 Microrganismo patognico O microrganismo ser considerado patognico: a) Se pertencer a uma espcie patognica ou a espcie contendo linhagens patognicas de acordo com fontes tcnico-cientficas reconhecidas; b) Se for derivado ou intencionalmente modificado de forma a conter material gentico de um microrganismo patognico, exceto se o material transferido no contiver seqncias codificadoras de caractersticas diretamente associadas patogenicidade; c) Quando existirem dvidas ou controvrsias a respeito da patogenicidade, ele ser considerado patognico at que o fabricante, distribuidor, ou ambos demonstrem o contrrio. Nota: Os vrus ou qualquer microrganismo que contenha material gentico de vrus sero avaliados em relao sua patogenicidade por uma comisso tcnica de especialistas. Os patgenos oportunistas estaro excludos desse grupo, exceto se for observado um aumento no nmero de relatos de infeces oportunistas. B2 Microrganismo geneticamente modificado O microrganismo ser considerado geneticamente modificado se submetido a quaisquer tcnicas genticas que no ocorram no pareamento, recombinao natural ou ambos, a saber: a) Tcnicas de ADN recombinante; b) Tcnicas que utilizam incorporao direta em um organismo de material gentico preparado fora dele, incluindo microinjeo, macroinjeo e microencapsulamento; c) Tcnicas de fuso celular (envolvendo duas ou mais clulas) ou de hibridao, nas quais se formam clulas vivas com novas combinaes de material gentico por meio da utilizao de mtodos que no ocorrem naturalmente; d) Tcnicas que utilizam agentes fsicos e qumicos, ou ambos para induo e seleo de mutantes. B3 Microrganismo autctone (indgeno) Microrganismo pertencente espcie nativa dentro dos limites continentais geogrficos do Brasil e de seus arquiplagos e ilhas, reservadas as caractersticas ecolgicas locais.
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B4 Microrganismo alctone (no-indgeno) Um microrganismo ser considerado alctone se evoluiu ou foi isolado fora dos limites continentais geogrficos do Brasil e de seus arquiplagos e ilhas, reservadas as caractersticas ecolgicas locais. ... / Apndice C

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APNDICE C - Ensaios para avaliao toxicolgica, ecotoxicolgica e patogenicidade C1 Avaliao Toxicolgica e de Patogenicidade

de

As avaliaes toxicolgicas, para produtos que contenham metablitos, e de patogenicidade, para produtos que contenham microrganismos, devero ser realizadas por meio de uma srie de ensaios, divididos em duas fases distintas:

Fase I Ensaios de curta durao listados na Tabela C1 em mamferos empregando uma dose mxima nica do produto testado para avaliar a toxicidade, infecciosidade e patogenicidade. Se nenhum efeito adverso for observado na Fase I, no haver necessidade de se realizar nenhum dos outros ensaios da Fase II. Tabela C1 - Avaliao toxicolgica e de patogenicidade em mamferos Ensaio (E) / Informao (I) Mtodo (Bibliografia de Referncia) Toxicidade e patogenicidade oral aguda (E) EPA Series 885 Group C (USEPA on line) Toxicidade e patogenicidade pulmonar aguda (E) Toxicidade e patogenicidade intravenosa aguda (E) EPA Series 870 (USEPA on line) Protocolo 3-TTM EMBRAPA Incidentes de hipersensibilidade (I) (EMBRAPA, 1999) Toxicidade cutnea aguda (E) Irritao e Infeco ocular primria (E) Irritao drmica primria (E) Fase II Ensaios para avaliar uma situao particular, quando se observa toxicidade ou infectividade na Fase I, sem evidncias de patogenicidade. Nessa fase estudos de toxicidade e patogenicidade subcrnica sero solicitados e as vias de exposio devem ser correspondentes quelas em que foram observados os efeitos adversos na Fase I.

C2 Avaliao Ecotoxicolgica Os ensaios ecotoxicolgicos listados na Tabela C2 devem ser realizados para os ambientes que possam ser impactados pela aplicao do produto.

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Tabela C2 Ensaios ecotoxicolgicos Ambiente gua doce Ensaio Daphnia spp (CE(I)50) Peixes (CL(I)50) Ceriodaphnia spp Algas Hyalella spp Vibrio fischeri (CE 20) Marinho e estuarino Misidceos Ourio-do-mar Vibrio fischeri (CE 20) Solo Minhoca Plantas Mtodo (norma Referncia) NBR 12713 - ABNT, 2004a NBR 15088 - ABNT, 2004b NBR 13373 - ABNT, 2005a NBR 12648 - ABNT, 2005b NBR 15470 - ABNT, 2007 NBR 15411 - ABNT, 2006a NBR 15308 - ABNT, 2005c NBR 15350 - ABNT, 2006b NBR 15411 - ABNT, 2006a OECD:207 - OECD, 1984 EPA OPPTS 850.4200 - USEPA, 1996

Nota: Ensaios complementares podero ser solicitados de acordo com o uso especfico do produto.

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