XXII ENCUENTRO DE INVESTIGACION VETERINARIA Y PRODUCCIN ANIMAL

TRABAJOS DE CLINICA VETERINARIA

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UNIVERSIDAD MICHOACANA DE SAN NICOLAS DE HIDALGO FACULTAD DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA

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PREVALENCIA DE Dirofilaria immitis EN 46 PERROS DE IXTAPA, ZIHUATANEJO, GUERRERO Galeana-Maciel T *, Galeana-Maciel A, Padilla-Arellanes S, Garate-Gallardo L y Aguado-Snchez M.
Universidad Michoacana de San Nicols de Hidalgo. Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia. Correo electrnico: togama_8@hotmail.com

RESUMEN La dirofilariasis es una enfermedad parasitaria causada por el nemtodo Dirofilaria immitis. Es el nico parsito intracardiaco que desempea cierto papel en los animales domsticos. La transmisin del parsito est limitada por las condiciones climticas principalmente en zonas tropicales y subtropicales (Ferrer et al., 2002). El objetivo del presente trabajo es estimar la prevalencia de D. immitis en perros de Ixtapa, Zihuatanejo, Guerrero. Se colectaron muestras de sangre de 46 perros en 4 reas de Ixtapa, Zihuatanejo, Guerrero, contando con la cooperacin de sus dueos durante el perodo del 3 al 7 de enero de 2011. El diagnstico se realiz por medio del kit de ELISA SNAP 4Dx Test, IDEXX Laboratories, la Prueba de Woo y por el Frotis gota gruesa. De las 46 muestras, 7 (15%) fueron positivas a antgenos de D. immitis, 4 (9%) fueron positivas a la prueba de Woo y 4(9%) por el frotis de gota gruesa. De las 7 muestras positivas a antgenos de D. immitis, 4 (43%) son amicrofilarmicos. Debido a que es una enfermedad zoontica, es importante la prevalencia obrtenida y por lo tanto la realizacin de mas estudios. INTRODUCCIN La dirofilariasis canina est distribuida en todo el mundo principalmente en zonas subtropicales , tropicales y templadas (Ferrer et al., 2002; Cordero del Campillo et al., 2003; Ching-Cheng y Ping-Chin., 2003 y Lee et al., 2007) y est estrechamente relacionada con la presencia de varias especies de mosquitos vectores de los gneros Culex y Aedes (Mendes et al., 2000; Quiroz, 2003 y Lee et al., 2007) los cuales necesitan zonas encharcadas (cuencas de ro, reas con abundante vegetacin, esteros, etc.) para el desarrollo de sus larvas, por lo tanto, tambin la dirofilariasis se limita en su distribucin a zonas con humedad constante (Cordero del Campillo et al., 2003). El principal reservorio del parsito es el perro domstico, aunque tambin son huspedes definitivos de D. immitis algunos canideos salvajes, tales como, el zorro, el coyote y el lobo (Soulsby, 1988; Ferrer et al., 2002; McCall et al., 2008). La dirofiliariasis en Mxico ha tenido gran importancia como enfermedad zoontica por lo que se han realizado estudios en diversos estados de la repblica en los ltimos aos. Ortiz (1992) menciona que Castillejos (1972) consider que el padecimiento no exista en Mxico y realiz estudios en perros provenientes del extranjero encontrando un 4% de casos positivos. Posteriormente, Smano en 1990, utilizando la prueba de Knott report una prevalencia de 3.8% (Ortiz, 1992). Por otro lado, como era de esperarse que en las zonas tropicales, por la mayor presentacin de mosquitos que son los huspedes intermediarios, esta parasitosis es ms frecuente (Ortiz, 1992 y McCall et al., 2008). As, en Yucatn, Nuez muestre 20 perrros en 1981 encontrando, con el mtodo modificado de Knott, un 10% de casos positivos a D. immitis. Posteriormente en 1984, Domnguez y Ramrez en la Ciudad de Mrida, reportaron una frecuencia del 8% en 100 perros utilizando la misma tcnica (Ortiz, 1998). En el estado de Quintana Roo, Rivero en 1983, seal 40% de perros positivos a D. immitis en Chetumal; por otro lado, en el Municipio de Felipe Carrillo Puerto, Snchez en 1984, encontr una frecuencia de 20.8% de perros positivos. Ambos estudios utilizaron la prueba

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de concentracin de microfilaria en suero. Prez, en 1989, al muestrear 72 perros en la Ciudad de Mazatln, Sinaloa report solo 2 perros positivos a D. immitis (Ortiz, 1992). Otro estudio realizado por Labarthe y Guerrero (2005) en 2599 perros de diferentes ciudades del pas report una prevalencia nacional de 7.5%. Recientemente, en el 2007 Nuez y Bolio en un estudio confirman la prevalencia nacional de 8.3%, resaltando que en las reas costeras la prevalencia llega a ser tan alta como de 19.6% (Labarthe y Guerrero, 2005 y McCall et al., 2008). Ortiz (1992) menciona que en Ciudad Victoria, Tamaulipas; Cuernavaca, Morelos; Guadalajara, Jalisco; Veracruz, Veracruz y Villahermosa, Tabasco presentan una prevalencia de 0.4, 2.7, 9.2, 13.0 y 15.6%, respectivamente. Sin embargo, el abuso continuo de las frmulas inyectables de ivermectina para bovinos por los dueos de los pacientes y los mismos veterinarios en nuestro pas ha contribuido indirectamente a controlar la incidencia de la enfermedad (Labarthe y Guerrero, 2005). La dirofilariasis canina es una enfermedad parasitaria potencialmente zoontica debido a que muchos de los vectores son antropoflicos siendo importante el control y prevencin de esta enfermedad en perros para que no repercutan en la salud humana. Se estima que en los lugares donde la prevalencia de la dirofilariasis canina es superior al 10%, en la poblacin humana ste valor se aproxima al 5%, pero al desconocerse la prevalencia de la enfermedad en una regin se contribuye al subdignstico en humanos (Gmez et al., 2006). Esto ltimo justifica la deteccin de la prevalencia de dicha enfermedad en el Puerto de Ixtapa, Zihuatanejo, debido a que no existen trabajos en esta rea que contribuyan a la medicina humana y veterinaria. Por lo tanto, en el presente estudio se pretende determinar la prevalencia de D. immitis en 46 perros en el Puerto de Ixtapa, Zihuatanejo, Guerrero, Mxico diagnosticado mediante la tcnica de frotis de gota gruesa, la prueba de Woo, y la prueba de ELISA. MATERIALES Y MTODOS Se colectaron muestras de sangre de 46 perros en Ixtapa, Zihuatanejo, Guerrero, contando con la cooperacin de sus dueos, durante el periodo del 3 al 7 de enero de 2011. De los cuales 29 eran machos y 17 hembras de diversas razas mayores de 6 meses de edad. De los 46 perros que se muestrearon 8 habitan en el Puerto de Ixtapa, Zihuatanejo; 10 en Playa Las Gatas; 17 en la Barra de Potosi y 11 en Playa Larga. Las muestras fueron obtenidas entre las 17:00 a 19:00 hrs; las pruebas de ELISA (SNAP 4Dx Test, IDEXX Laboratories) fueron realizadas a partir de las 20:00 hrs, de acuerdo a las indicaciones del fabricante, y las Pruebas de Woo y el Frotis de Gota Gruesa se efectuaron entre las 10:00 a 13:00 hrs del da siguiente, en el Laboratorio Solano de Ixtapa, Zihuatanejo. Se utilizaron jeringas de 3 ml para obtener sangre por puncin de las venas ceflica, safena o yugular; las cuales fueron colectadas en tubos con anticoagulante E.D.T.A, cada tubo fue identificado con el nombre del perro y se mantuvo refrigerada hasta el momento de realizar las pruebas. RESULTADOS De las 46 muestras, 7 (15%) fueron positivas a antgenos de D. immitis, 4 (9%) fueron positivas a la prueba de Woo y 4 (9%) al frotis de gota gruesa. De las 7 muestras positivas a antgenos de D. immitis, 4 tambin lo fueron para la Prueba de Woo y al frotis de gota gruesa; por lo tanto, esto indica que el 43% son amicrofilarmicos y 57% son microfilarmicos. De los 7 perros positivos a antgenos de D. immitis, 3 (43%) eran machos y 4 (57%) hembras. De los 8 que habitan en el Puerto de Ixtapa, Zihuatanejo ninguno fue positivo a ninguna de las pruebas. De los 10 perros muestreados en Playa Las Gatas, (10%) fue positivo a antgenos de D. immiitis y tambin lo fue para la prueba de woo y al frotis de

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gota gruesa. De los 17 en la Barra de Potosi, 2 (12%) fueron positivos a las tres pruebas diagnsticas y 3 (18%) slo fueron positivos a antgenos de D. immitis. Mientras que de los 11 perros muestreados en La Playa Larga slo 1 (9%) fue positivo a las tres pruebas diagnsticas. DISCUSIN Con respecto al Cuadro 1, en la literatura, no se reportan antecedentes de estudios sobre dirofilariasis en Ixtapa, Zihuatanejo aunque s en otras regiones con clima tropical con prevalencias similares como en Villahermosa con 16%, Veracruz con 9%, y Ciudad Victoria con 13%, excepto en las localidades con climas templados que tuvieron prevalencias menores como Guadalajara con 4% y la Ciudad de Mxico con un 3% (Samano, 1990) no obstante en ste estudio se realiz el diagnstico por medio de la Prueba de Knott. Bolio et al., (2007) encontr 56 (8%) de 676 perros infectados con D. immits en Mrida, Yucatn diagnosticados por la Prueba de Knott modificada. Por otro lado, Ortz (1992) reporta un 5% de prevalencia en Mazatln por medio de la Prueba de ELISA. Mientras que la prevalencia de 15% encontrada en este estudio contribuye lo que Labarthe y Guerrero (2005) y McCall et al., (2008) resaltan en sus estudios, que en las reas costeras la prevalencia llega a ser tan alta como de 19.6%. PRUEBA DIAGNSTICA ELISA PRUEBA DE WOO FROTIS DE GOTA GRUESA POSITIVOS 7 (15%) 4 (9%) 4(9%) NEGATIVOS 39 (75%) 42 (91%) 42(91%) TOTAL 46 46 46

Cuadro 1. Casos positivos a D. immitis diagnosticados por ELISA, Prueba de Woo y Frotis de Gota Gruesa. La transmisin del parsito est limitada por las condiciones climticas (Nelson y Couto, 2000) ya que se requiere de un clima propicio para la proliferacin del mosquito y la incubacin de microfilarias hasta la etapa infecciosa (Bonagura, 2001). El clima clido y hmedo del Puerto de Ixtapa, Zihuatanejo durante la mayor parte del ao proporciona las condiciones ecolgicas ideales para el desarrollo de las poblaciones del mosquito vector perteneciente a los gneros Culex spp, Psorophora spp, Mansonia spp y Anopheles spp segn en un estudio realizado por Garca y Pletsch (1976), los cuales son los gneros de mosquito que se reportan como vectores del parsito y que la ubicua presencia de uno o ms gneros de mosquitos vectores hace posible la transmisin siempre que existe un reservorio y las condiciones climticas favorables como es el caso del lugar de estudio donde se registra una temperatura media anual de 26C necesaria para la incubacin de las larvas infecciosas dentro del vector (Paul, et al., 2005). Por el otro lado, el Puerto de Ixtapa Zihuatanejo cuenta con otra condicionante para la presencia del parsito la cual es la existencia de zonas de agua estancada (lagunas, ros, esteros) necesarias para el desarrollo de las larvas del vector (Cordero del Campillo et al., 2003), principalmente en la Barra de Potos lo que explica los resultados representados en el Cuadro 2 donde hubo 5 casos positivos a antgenos de D. Immitis. Mientras que en Playa Las Gatas y Playa Larga hubo un caso positivo a todas las pruebas a pesar de haber una temperatura mayor a 26C durante la mayor parte del ao pero no existe la presencia de aguas estancadas cercanas como en la Barra de Potos para el desarrollo del vector. Por ltimo, en los perros muestreados en el Puerto de Ixtapa Zihuatanejo donde no hubo casos positivos principalmente porque existe un mayor control del mosquito vector y aunque los dueos desconocen la enfermedad del gusano de corazn suelen utilizar mensualmente ectoparasiticidas (ivermectina, selamectina) e indirectamente acta como quimioprofilctico para las microfilarias. Sin embargo, en ste estudio no se colectaron muestras de perros que viven cerca de la Laguna

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de Las Salinas y ms adelante sera importante completar el estudio porque seguramente se encuentra el vector y se desarrolla la D. immitis eficazmente para infectar a los perros del Puerto de Ixtapa, Zihuatanejo. LUGAR PUERTO DE IXTAPA ZIHUATANEJO. PLAYA LAS GATAS PLAYA LARGA BARRA DE POTOS TOTAL POSITIVOS PW GG ELISA 0 0 0 1 1 5 7 1 1 2 4 1 1 2 4 NEGATIVOS ELISA PW GG 8 8 8 9 10 12 39 9 10 15 42 9 10 15 42 TOTAL 8 10 11 17 46

Cuadro 2. Casos positivos a D. immitis en el Puerto de Ixtapa, Zihuatanejo, Guerrero y sus diferentes playas. Los resultados del Cuadro 3 concuerdan con lo reportado con Samano (1990) y Ortz (1992) quienes aseveran que la dirofilariasis no vara en su prevalencia con respecto al sexo de los perros.

SEXO POSITIVOS NEGATIVOS TOTAL MACHO 3 26 29 HEMBRA 4 13 17 TOTAL 7 39 46 Cuadro 3. Casos positivos a antgenos D.immits por sexo del animal. La prevalencia de dirofilariasis con amicrofilaremia en este estudio de 43% es elevada, aunque menciona Cordero del Campillo et al (2003) que puede ser de 25% hasta 80% en reas hiperendmicas o en reas dnde se abuse de los frmacos microfilaricidas como la ivermectina como ectoparasiticida (Bonagura, 2001; Cordero del Campillo et al., 2003). Esto ltimo sucede a menudo en el Puerto de Zihuatanejo donde los dueos acostumbran administrar ivermectina mensualmente para el control de pulgas y garrapatas. Tambin puede tratarse de infecciones que se componen de un slo sexo, por infecciones por gusanos adultos estriles o a una infeccin prepatente (Bonagura, 2001; Ware, 2007).

ELISA

PRUEBA DE WOO

FROTIS DE GOTA GRUESA

PORCENTAJE

+ + + 57% microfilarmicos + + + + + + + + + + 43% amicrofilarmicos + + Cuadro 4. Porcentaje de casos microfilarmicos y amicrofilarmicos. No obstante, en el caso de la infeccin oculta o amicrofilarmica, las pruebas de antgeno tienen una sensibilidad alta para infecciones que incluyen gusanos hembra pero no para detectar aquellas por gusanos macho. Las infecciones prepatentes producen a menudo una cantidad insuficiente de antgenos hasta unos 5.5 a 6 meses postinfeccin. Empero, cabe

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anticipar ciertos resultados falsos negativos hasta que los gusanos hembra alcanzan la madurez alrededor de 7 meses postinfeccin (Bonagura, 2001). Por otro lado, las pruebas para detectar las microfilarias circulantes no se recomienda realizarlas como pruebas nicas de rutina, pero si son tiles para detectar los pacientes reservorios y para conocer la carga parasitaria antes del tratamiento o de administrar un frmaco preventivo (Ware, 2007). CONCLUSIONES La prevalencia de D. immitis en 46 perros de Ixtapa, Zihuatanejo, Guerrero durante enero del 2011 por medio de la Prueba de ELISA fue de 15% y por medio de la Prueba de Woo y de la Gota Gruesa fue de 9% en ambos casos. Lo anterior nos indica un 57% de microfilaremia y un 43% de amicrofilaremia en los casos positivos. En la Barra de Potos fue donde se encontr el mayor nmero de casos (5 de 7 casos positivos) ya que la presencia de lagunas y aguas estancadas en la zona y la temperatura mayor a 26C durante el da favorece el desarrollo del vector y del parsito. Consideramos importante completar el estudio y colectar muestras de perros que vivan cerca de la Laguna de Las Salinas en el Puerto de Zihuatanejo y en las dems playas como Troncones, Playa La Ropa, La Principal, etc. por que se trata de una enfermedad parasitaria potencialmente zoontica, debido a que muchos de los vectores son antropoflicos siendo importante el control y prevencin de esta enfermedad en los perros para que no repercuta en la salud humana. LITERATURA CITADA Bolio G.M.E., Rodrguez V.R.I., Sauri A.C.H., Gutirrez B.E., Ortega P.A. y Colin F.R.F. 2007. Prevalence of the Dirofilaria immitis infections in dogs from Merida, Yucatan, Mexico. Veterinary Parasitology. 148: 166-169. Bonagura D.J. 2001. Teraputica veterinaria de pequeos animales. Vol. II. 13ed. Ed. McGrawHill- Interamericana. Madrid, Espaa. 830-835 p Cordero del Campillo, Gutirrez B.E y Guerrero J. 1999. Parasitologa Veterinaria. McGrawHill Interamericana. Madrid, Espaa. 679-689 p Ching-Cheng W and Ping-Chin F. 2003. Prevalence of canine dirofilariasis in Twain. Journal of Helminthology. 77: 83-88 Ferrer M.J., Sauri A.C.H. y McCall W.J., 2002. Diagnstico de dirofilariasis canina: Un estudio comparativo usando las pruebas de ELISA y de Woo. Revista Cientfica. FCV-LUZ 12(5): 351-357 Garca A.A.N. y Pletsch J.D. 1976. Fauna de mosquitos (Dipteria:Culicidae) en la zona turstica de Ixtapa, Guerrero. Instituto de Biologa, UNAM. Departamento de Zoologa. Folia Entomolgica Mexicana. 34: 71-83 Gmez G.L.F., Alzate J.G. y Orozco C.S. 2006 Reporte de un caso clnico de Dirofilaria immitis en un perro. Hallazgo de Antgenos y confirmacin del parsito a la necropsia. Rev Colombiana Ciencia Pecuarua 19:70-79 Labarthe, N. and Guerrero J. 2005. Epidemiology of heartworm: What is happening in South America and Mexico? Veterinary Parasitology. 133 :149-156.

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