NORELAnimalNutrition

BoletnTcnicono.3

PREVENCION DE ENFERMEDADES INFECCIOSAS EN AVICULTURA POR MEDIO DE ADITIVOS

Pter Glfi Departmento de Farmacologa y Toxicologa, Facultad de Veterinaria, Universidad Szent Istvan, Budapest, Hungra Una enfermedad infecciosa est causada por la invasin de un patgeno que crece y se multiplica en el cuerpo. Las enfermedades infecciosas son, a menudo, contagiosas lo que significa que pueden ser propagadas directa o indirectamente de un organismo a otro. Los organismos infecciosos se clasifican en cuatro grupos: protozoos, bacterias, hongos y virus. Sin dejar de enfatizar que la prevencin de la infeccin en una granja avcola por medio de la aplicacin de buenas prcticas de manejo es muy importante, en este trabajo nos centraremos en las herramientas nutricionales disponibles. Habitualmente se utilizan medicamentos especficos para combatir infecciones por protozoos, bacterianas o fngicas; mientras que algunas infecciones vricas se pueden prevenir con la vacunacin. El epitelio intestinal es la primera lnea de defensa contra varios agentes qumicos, algunas bacterias, toxinas y el estrs oxidativo. De este modo, los componentes antimicrobianos pueden mejorar la eficiencia productiva de los animales sanos alimentados con unos requerimientos nutricionales ptimos. Los componentes antimicrobianos se administran en el pienso en dosis bajas, comparndolas con las altas dosis necesarias para obtener efectos teraputicos. Los antibiticos suministrados a dosis bajas en el pienso, usados como promotores del crecimiento, han tenido un extenso uso en produccin animal. Las ventajas de utilizar antibiticos a dosis bajas incluye una mejora en la ganancia media de peso diario y en el ndice de conversin (Dritz et al., 2002; Gaskins et al., 2002). Sin embargo, en los ltimos aos el uso de antibiticos en el pienso como promotores de crecimiento han sido prohibidos debido a la resistencia frente a los antibiticos que adquiran las bacterias patgenas. Por esta razn, hoy en da hay un creciente inters en el reemplazo del uso de estos antibiticos por medio de diferentes alternativas naturales, como puedan ser los prebiticos, los probiticos, los compuestos vegetales (extractos de plantas), y los cidos orgnicos. Los pre- y probiticos representan una de las alternativas ms prometedoras a los antibiticos desarrolladas en los ltimos aos para proteger la salud animal e incrementar la eficiencia de utilizacin de los nutrientes. Los probiticos han demostrado tener una eficacia equivalente a los antimicrobianos sintticos promotores del crecimiento, los cuales antes de ser prohibidos en Europa en Enero del 2006, eran usados como profilcticos para suprimir el crecimiento y la actividad de la microbiota del intestino. En particular, la prohibicin de los antibiticos ha dejado a la industria europea de los piensos para monogstricos en una situacin de desventaja financiera frente a pases extracomunitarios en

NORELAnimalNutrition

BoletnTcnicono.3

los que se permite el uso de antibiticos en los piensos para la proteccin contra enfermedades como la diarrea o la enteritis necrtica. De acuerdo con lo expuesto anteriormente, el mercado de los probiticos para la alimentacin animal est preparado para expandirse. Especialmente, en el caso de animales monogstricos, el uso de probiticos puede ayudar a reducir el incremento del uso de antibiticos con carcter teraputico administrados desde la prohibicin de los mismos. Las bacterias probiticas forman parte habitualmente de la microbiota intestinal sana y tambin estn presentes en algunos alimentos fermentados como el queso y la leche. Se ha demostrado que algunos lactobacilos y especies de Bacillus (por ejemplo B. amyloliquefaciens) ejercen efectos beneficiosos cuando se administran por via oral. Pueden mejorar el balance de la microbiota intestinal, confiriendo proteccin frente a bacterias enteropatognicas y previniendo o curando enfermedades intestinales (Brassart and Schiffrin, 1997; Campieri et al., 2000; Gionchetti et al., 2000). Estos efectos estn mediados por la produccin de metabolitos antimicrobianos como algunos cidos orgnicos (lactato, acetato y butirato), el peroxido de hidrgeno o las bacteriocinas; y por competicin con las bacterias patgenas por nutrientes o receptores de adhesin (Hudault et al., 1997; Cocconier et al., 2000; Malago et al., 2005). Los cidos orgnicos se han estudiado como una herramienta para reducir la concentracin de bacterias no deseadas durante el proceso de produccin avcola. Algunos de los cidos orgnicos mas importantes son los cidos grasos de cadena corta (AGCC), en particular el butirato, producido por la microbiota intestinal (la mayora bacterias probiticas), que juega un papel importante en la fisiologa y el metabolismo tanto del rumen como del intestino y en la mucosa ruminal e intestinal (Cummings and MacFarlane, 1991; Szylit and Andrieux, 1993; Glfi et al., 1981). Adems de servir como fuente de energa preferida para los colonocitos, el butirato ha estado implicado en la proteccin frente al cncer de colon y la colitis ulcerativa (Hague et al., 1997). De hecho, es deseable un aumento de la produccin de butirato en el intestino para mantener la salud del colon tanto en humanos como en animales. El butirato es producido por las bacterias intestinales a partir de carbohidratos prebiticos como el almidn resistente, la fibra de la dieta, la inulina y los fructooligosacaridos (Pryde et al., 2002; Topping and Clifton, 2001) que escapan de la digestin en el intestino delgado. Se han investigado los efectos de incrementar las cantidades en la dieta de carbohidratos de baja digestibilidad en animales experimentales. La carne de ave y los huevos son, a menudo, fuentes de patgenos para los humanos. Salmonella spp. es la principal causa de infeccin alimentara en el hombre por consumo de productos avcolas. La aspiracin original de la UE de erradicar los agentes zoonticos de la produccin animal ha sido sustituida por la aspiracin a reducir la presin de infeccin de los agentes zoonoticos especficos a todos los niveles de la cadena de produccin. Esto se puede llevar a cabo mediante la combinacin de medidas antes de la produccin, en la produccin y despus de la produccin. Los aditivos para piensos constituyen un grupo importante de

NORELAnimalNutrition

BoletnTcnicono.3

medidas para antes de la produccin, stos pueden ayudar a controlar Salmonella a nivel de granja. En algunos estudios, se aadieron cidos orgnicos al pienso para controlar la eliminacin de Salmonella a travs de las heces. Por ejemplo, se ha demostrado que el aditivo formulado con butirato de sodio parcialmente protegido (Gustor BP70) es el ms efectivo para disminuir la eliminacin fecal de Salmonella en broilers infectados con enteritis (Fernndez-Rubio et al., 2009). Los pollos suplementados con Gustor BP70 crecieron un 2.7% mas que el grupo control a los 42 das de edad y presentaron una menor mortalidad que los pollos del grupo control. En los pollos tratados se redujo la profundidad de la cripta y se obtuvo un ratio mas bajo de profundidad de cripta- longitud de vellosidades que los pollos del grupo control a los 42 das de edad. El butirato de sodio es un AGCC que tiene efectos a nivel molecular, celular y tisular. Es conocido por ser un inhibidor de la deacetilasa de histonas (HDACs). En las clulas, el butirato de sodio modifica la expresin de un grupo de genes que contienen elementos de respuesta al butirato. El butirato de sodio tambin induce la detencin del crecimiento, diferenciacin y apoptosis de clulas cancerosas, principalmente por su efecto sobre la actividad del HDAC (Domokos et al. 2010; Garczarczyk et al., 2010). Adems, suprime la inflamacin, en parte reduciendo la expresin de citoquinas pro- inflamatorias como el interferon-, la interluquina (IL)-6 y la IL-1 por medio de la inhibicin especfica de la ruta NF-B (Kim et al., 2004). Los AGCC protonados son lpido-solubles y se difunden a travs de las membranas de las clulas, mientras que la forma ionizada es lpido-insoluble y por lo tanto requiere diferentes rutas (intercambios aninicos con bicarbonato mediados por AGCC, interaccin entre AGCC y el transporte de Na+) para atravesar el epitelio (Wchtershuser and Stein, 2000). El butirato de sodio es una fuente de energa de rpida proliferacin en las clulas del epitelio ruminal y los enterocitos, y puede acelerar el crecimiento y la diferenciacin de la mucosa ruminal e intestinal (aumento de la longitud de las papilas en el epitelio ruminal e incremento del nmero de vellosidades intestinales, que incrementan el rea de absorcin), linfocitos activados (que mejoran el estado del sistema inmune), lo que puede asegurar una rpida reparacin de la mucosa daada. La presencia de butirato en el intestino delgado puede ser un factor esencial en el mantenimiento y reparacin de la mucosa (Wchtershuser y Stein, 2000). El butirato propicia efectos sistmicos indirectos, como la instilacin de los AGCC en el colon que estimula la proliferacin de clulas no solo en la mucosa del colon sino tambin en tejidos no expuestos, como el epitelio del colon adyacente, el ileon o el yeyuno. El butirato aumenta la produccin de hormonas enterotrpicas, y estimula el sistema nervioso entrico (Rombeau et al., 1995; Cook et al., 1998). El butirato estimula la secrecin de enzimas digestivas en el tracto gastrointestinal y en el pncreas y es un buen atrayente que puede aumentar significativamente el consumo de pienso por medio de receptores especficos de cidos grasos libres (AGL). Puede estimular el crecimiento de bacterias beneficiosas, como lactobacilos y bifidobacterias, e inhibir el crecimiento de bacterias perjudiciales (Salmonella spp., E. coli, Clostridium

NORELAnimalNutrition

BoletnTcnicono.3

spp.) en el tracto gastrointestinal, lo que produce una regulacin del balance de la microbiota intestinal. Adems de su actividad antineoplsica, el butirato de sodio induce cambios en la morfologa celular, modifica la expresin de genes celulares, regula la accin hormonal y los receptores de hormonas, as como los receptores de los factores de crecimiento. Finalmente, el butirato puede mejorar la salud y el crecimiento de los animales e incrementar los beneficios econmicos de los productores. Aumenta de una manera significativa el consumo de pienso y reduce el valor del pH en el tracto gastrointestinal, adems acta en contra de las bacterias perjudiciales y estimula el crecimiento del animal. El receptor de la protena G acoplada (GPR) 43 reconoce el propionato y el butirato y es expresada en abundancia en los granulocitos neutroflicos (Leucocitos polimorfonucleares (PMNs)). GPR43 es esencial para el acopio de neutrfilos durante la inflamacin intestinal (Sina et al., 2009). Adems GPR41 y GPR 43 median en los efectos de los AGCC en el desarrollo del rumen, en la secrecin de insulina y glucagn, en la motilidad gastrointestinal, y en el consumo de pienso en terneros (Wang et al., 2009). Los receptores de cidos grasos libres (FFAs /FFA1, FFA2, y FFA3, antes denominados GPR40, GPR43, and GPR41/) se activan por medio de cidos grasos de cadena media y larga y son expresados en las clulas productoras de insulina en el pncreas. Los receptores FFA2 y FFA3 son activados por los AGCC, sin embargo tienen diferencias clave en cuanto a las rutas de sealizacin que activan y en el patrn de expresin tisular (Stoddart et al., 2008). Nuestra investigacin Efectos en los microorganismos en el lumen gastrointestinal: Efecto antimicrobiano selectivo del butirato: Despus de introducirse las bacterias (protonadas/ lpido-solubles), los AGCC llevan a cabo su disociacin, lo que dificulta la salida de la clula bacteriana; como resultado, los AGCC se acumulan en la clula bacteriana y ejercen un efecto bactericida. Todas las cepas utilizadas en este estudio derivan del pollo. El efecto del butirato de sodio se prob a diferentes pHs. Las curvas de crecimiento microbiano se crearon usando valores OD en los casos de las cepas bacterianas investigadas. La mitad de la mxima concentracin inhibitoria (lC50) de butirato de sodio se calcul por regresin lineal de las curvas dosis-respuesta y por interpolacin basada en la frmula de regresin lineal (Fig 1.).

NORELAnimalNutrition

BoletnTcnicono.3

Fig. 1. Concentraciones de butirato que inhiben el crecimiento de diferentes cepas de bacterias en un 50%.

Butirato de sodio IC50 (mM)

100 75 50 25 0
7 6. 5

p. sp us ill ns ac ge ob in ct fr La er .p li C a co ric E. te en

S.

pH

Con respecto a los resultados, se puede concluir que el crecimiento de S. enterica enterica (2 cepas), E. coli (2 cepas) y C. perfringens (3 cepas) puede ser inhibido por el butirato. El decrecimiento del pH (incrementa la proporcin de acido butrico no disociado) provoca un incremento del efecto inhibitorio. El Lactobacillus spp. (2 cepas) examinado no puede ser inhibido por el butirato (Galfi et al. 2010). Por lo tanto los microorganismos estudiados pueden ser clasificados por su sensibilidad hacia el butirato (Salmonella enterica enterica>Escherichia coli>Clostridium perfringens>>>Lactobacillus spp.). Metabolismo: Una vez las clulas epiteliales del rumen o los colonocitos absorben los AGCC, stos se metabolizan localmente o bien entran en el torrente sanguneo porta y se metabolizan en el hgado. Para investigar este fenmeno, se obtuvieron clulas de hgado de pollo y rata por un procedimiento de perfusin en tres pasos; despus de centrifugar las clulas, se suspendieron en un medio de cultivo (106 clulas/ml de medio nutritivo). Despus, las clulas previamente incubadas durante 24 horas se expusieron a diferentes concentraciones de butirato de sodio [0 mM (control), 1.0, 2.5, 5.0, 7.5 y 10.0 mM] durante otras 24 horas en placas recubiertas de colgeno. Despus de la incubacin (24h) se midieron las concentraciones de butirato y acetato por cromatografa de gases.

5. 5

NORELAnimalNutrition

BoletnTcnicono.3

Fig. 2. Consumo relativo de butirato de los hepatocitos de pollo y rata in vitro

Tabla 1. Conversin de butirato a acetato en hepatocitos de pollo y rata in vitro

Produccin de acetato en Produccin de acetato en Butirato (mM) un cultivo de hepatocitos un cultivo de hepatocitos de rata (M/cultivo) de pollo (M/cultivo) 0 8.14 1.81 0 1 6.54 3.71 0 5 28.29 3.97* 0 10 26.18 7.98* 0 *Diferencias significativas (P<0.05) Basndonos en estos experimentos (Fig. 2., Tabla 1.), asumimos que el butirato transportado a los hepatocitos es metabolizado por -oxidacin. Esto inicialmente involucra su conversin a butyryl-CoA por medio de la enzima butyryl-CoA sintetasa y, en una serie de reacciones, se termina convirtiendo en acetyl-CoA. La acetyl CoA hidrolasa (3.1.2.1. CACH) citoplasmtica, expresada en el hgado humano y de rata, convierte el acetyl-CoA en acetato. El hgado de pollo carece de CACH. Efectos en el crecimiento y diferenciacin del epitelio del buche de pollo: se aadi butirato de sodio y NaCl (control) a dietas estndar para pollos de 5 das de edad a una concentracin final de 15 mM. Despus de un periodo de dos semanas, se midi el espesor relativo del estrato queratinizado del buche por microscopia de luz. Tambin se observaron las muestras por microscopio electrnico de barrido. El ratio de proliferacin del crecimiento de clulas epiteliales se obtuvo por determinacin cuantitativa de la incorporacin al ADN de 3H-timidina y autoradiografia.

NORELAnimalNutrition

BoletnTcnicono.3

Fig. 3. Fotografia de microscopio electrnico de barrido del epitelio del buche.

Izquierda control, tratado con 5 mM de NaCl; derecha tratado con 15 mM de butirato de sodio. La barra negra indica 40 m. El espesor del estrato queratinizado expresado como porcentaje del espesor de todo el epitelio fue el siguiente: NaCl (14.3%), butirato de sodio (38.4%). La microscopia electronica de barrido revel unas diferencias morfolgicas en la queratinizacion despues del tratamiento con butirato (Fig. 3.). La incorporacion de 3H-timidina en el ADN del epitelio del buche, determinado a los 10 dias, decreci despus del tratamiento con butirato en un 21.9% con respecto al valor del grupo control (NaCl). Tambin fue detectada la primera aparicin de los marcadores radiactivos en las distintas capas del epitelio del buche. Se puede concluir que hay un marcado incremento en el tiempo de trnsito en el epitelio del buche de los pollos alimentados con butirato (Galfi et al., 1985). Modificacin de la expresin gentica: Despus de la absorcin del butirato en el intestino, los procesos metablicos de los tejidos se pueden ver alterados debido a la actividad inhibidora de la deacetilasa de histonas. Adems de esta actividad, tambin afecta a la expresin de ciertas enzimas incluyendo las enzimas del citocromo (CYP450) del hgado. Por ello, el objetivo de nuestros experimentos fue el estudiar el efecto del butirato en la expresin de ciertas enzimas de CYP450 bajo condiciones in vitro, en un cultivo primario de hepatocitos aislados de pollo. Las clulas de hgado de pollo se obtuvieron por un procedimiento de perfusin de tres pasos, despus de centrifugar las clulas, se suspendieron en un medio de cultivo (106 clulas/ml de medio nutritivo). Despus, las clulas previamente incubadas durante 24 horas se expusieron a diferentes concentraciones de butirato de sodio [0 mM (control), 1.0, 2.5, 5.0, 7.5 y 10.0 mM] durante otras 24 horas en placas recubiertas de colgeno. Adicionalmente, se estudiaron los efectos que tenia un antibitico macrlido (eritromicina) sobre el efecto del butirato. Despus de finalizar la prueba, se extrajo el ARN total de las clulas. Usando las muestras previamente obtenidas, se determin la expresin de las subfamilias de citocromos: CYP1A1, CYP2H1, CYP3A37 por medio de RT-PCR cuantitativo, y se compar con los valores de expresin obtenidos de -actina.

NORELAnimalNutrition

BoletnTcnicono.3

Fig. 4. Efecto del butirato en la expresin gentica del citocromo (CYP) en cultivo de hepatocitos de pollo.

Expresin de CYP1A1

Expresin de CYP2H1

NORELAnimalNutrition

BoletnTcnicono.3

Expresin de CYP3A37

Una concentracin de butirato de 1.0 mM no tuvo influencia en la expresin de CYP2H1, mientras que una concentracin de butirato de 2.5 mM caus un incremento aproximadamente tres veces mayor (significativo) y las concentraciones de butirato de 5.0, 7.5 y 10.0 mM incrementaron 8 veces ms (significativo) la expresin de CYP2H1. En contraste con esto, la expresin de CYP3A37 y CYP1A1 decreci de una manera significativa en presencia de butirato. El ratio de este decrecimiento fue de un 3070% para CYP3A37 y de un 5080% para CYP1A1 a las concentraciones de butirato probadas. La eritromicina no tuvo un efecto significativo en la expresin gentica de la subfamilia de CYP1A1; sin embargo, caus un efecto significativo dependiente de la dosis en la regulacin de la subfamilia de CYP2H1. En presencia de 10M, 50M y 100M de eritromicina caus 2, 3 y 12 veces ms expresin de CYP2H1, respectivamente. En el caso de la subfamilia de CYP3A37 encontramos que el tratamiento de eritromicina caus una pequea regulacin en la expresin gentica (entre 1.2 y 1.6 veces mas). Este efecto moderado de la eritromicina en la regulacin redujo o en algunos casos elimin el efecto regulador del butirato. Basndonos en estos experimentos, suponemos que una administracin continua de butirato puede influenciar en la expresin de las enzimas de los citocromos hepticos tambin in vivo, y esto puede afectar al metabolismo de ambos sustratos y a los xenobioticos como la eritomicina.

NORELAnimalNutrition

BoletnTcnicono.3

Resumen n-Butirato puede verse como un biorregulador de la interaccin entre la dieta, los microorganismos, el intestino y el hospedador muy til, y adems como la principal seal del mantenimiento eubitico del intestino. La accin de los cidos grasos de cadena corta se ha desarrollado durante la filognesis de distintas especies, fue y es uno de los pasos ms importantes de la rpida o lenta adaptacin a los cambios del medio. Si la adaptacin no es rpida o lo suficientemente completa, la interaccin fisiolgica entre la dieta, el intestino, los microorganismos y el hospedador se ver daada. El proceso de adaptacin es muy importante no solo durante el desarrollo filogentico (evolucin) de las especies sino tambin durante el desarrollo individual (crecimiento) de los animales jvenes. Como la microbiota intestinal es inmadura en animales jvenes, el uso de n-butirato como aditivo en el pienso tiene una especial importancia, ya que de lo contrario, los daos en la flora gastrointestinal pueden resultar, entre otros, en una menor ganancia de masa corporal e incluso en el padecimiento de distintitas enfermedades gastrointestinales y metablicas. Referencias BRASSART, D. & SCHIFFRIN, E. J. (1997) The use of probiotics to reinforce mucosal defense mechanisms. Trends in Food Science and Technology, 9, 321-326. CAMPIERI, M., RIZZELLO, F., VENTURI, A., POGGIOLI, G., UGOLINI, F., HELWIG, U., AMADINI, C., ROMBOLI, E. & GIONCHETTI, P. (2000) Combination of antibiotic and probiotic treatment is efficacious in prophylaxis of post-operative recurrence of Crohns disease: a randomised controlled study vs mesalamine. Gastroenterology, 118:A781. COCCONIER, M. H., LIVIN, V., LORROT, M. & SERVIN, A. L. (2000) Antagonistic activity of Lactobacillus acidophilus LB against intracellular Salmonella enterica Serovar Typhimurium infecting human enterocytelike Caco-2/TC-7 cells. Applied and Environmental Microbiology, 66:1152-1157. COOK, SI., & SELLIN, JH. (1998) Review article: short chain fatty acids in health and disease. Aliment Pharmacol Ther 12: 499507 CUMMINGS, JH., & MACFARLANE, GT. (1991) The colonic flora, fermentation and large bowel digestive function. Philips SF Pemberton JH Shorter RG eds. The colonic flora, fermentation and large bowel digestive function. The large intestine: physiology, pathophysiology, and disease. pp:51-91 Raven Press New York. DOMOKOS, M., JAKUS, J., SZEKER, K., CSIZINSZKY, R., CSIKO, GY., NEOGRADY, ZS., CSORDAS, A., & GALFI, P. (2010) Butyrate-induced cell death and differentiation are associated with distinct patterns of ROS in HT29-derived human colon cancer cells. Digestive Diseases and Sciences. 55:920-30. DRITZ, S. S., TOKACH, M. D., GOODBAND, R. D. & NELSSEN, J.L. (2002) Effects of administration of antimicrobials in feed on growth rate and feed

10

NORELAnimalNutrition

BoletnTcnicono.3

efficiency of pigs in multisite production system. Journal of American Veterinary Medical Association, 220:1690-1695. FERNNDEZ-RUBIO, C., ORDEZ, C., ABAD-GONZLEZ, J., GARCIAGALLEGO, A., PILAR HONRUBIA, M., JOSE MALLO, J. & BALAAFOUCE, R. (2009) Butyric acid-based feed additives help protect broiler chickens from Salmonella Enteritidis infection. Poult Sci. 88:943-948. GALFI, P,, VERESEGYHAZY, T,, NEOGRADY, S. & KUTAS, F. (1981) Effect of sodium normal-butyrate on primary ruminal epithelial-cell culture. Zentralblatt fur Veterinarmedizin Reihe A. 28:259-261. GALFI, P., NEOGRADY, S,, VERESEGYHAZY, T. & KUTAS F (1985) Demonstration of keratinizing effect of n-butyrate on day-old chicken crop epithelium. Zentralblatt fur Veterinarmedizin Reihe A. 32:146-150. GARCZARCZYK, D., SZEKER, K., GALFI, P., CSORDAS, A., & HOFMANN, J. (2010) Protein kinase C in colon cancer cells: expression, Thr514 phosphorylation and sensitivity to butyrate-mediated upregulation as related to the degree of differentiation. Chemico-biological interactions. 185:25-32. GASKINS, H. R., COLLIER, C. T. & ANDERSON, D. B. (2002) Antibiotics as growth promotants: mode of action. Animal Biotechnology, 13:29-42. GIONCHETTI, P., RIZZELLO, F., VENTURI, A., BRIGIDI, P., MATTEUZZI, D., BAZZOCCHI, G., POGGIOLI, G., MIGLIOLI, M. & CAMPIERI, M. (2000) Oral bacteriotherapy as maintenance treatment in patients with chronic pouchitis: a double-blind, placebo-controlled trial. Gastroenterology, 119:305-309. HAGUE, A, SINGH, B. & PARASKEVA, C. (1997) Butyrate acts as a survival factor for colonic epithelial cells: further fuel for the in vivo versus in vitro debate. Gastroenterology. 112:1036-1040. KIM, H-S., WHANG, S-Y., WOO, M-S., PARK, J-S., KIM, W-K. & HAN I-O. (2004) Sodium butyrate suppresses interferon-gamma-, but not lipopolysaccharide-mediated induction of nitric oxide and tumor necrosis factor-alpha in microglia. Journal of Neuroimmunology, 151:85-93. HUDAULT, S., LIVIN, V., BERNET-CAMARD, M. F. & SERVIN, A. L. (1997) Antagonsitic activity exerted in vitro and in vivo by Lactobacillus casei (strain GG) against Salmonella typhimurium C5 infection. Applied and Environmental Microbiology, 63:513-518. MALAGO, J., KONINKX, J., TOOTEN, P., VAN LIERE E.A. & VAN DIJK, J. (2005) Anti--inflammatory properties of heat shock protein 70 and butyrate on Salmonella-induced interleukin-8 secretions in enterocytelike Caco-2 cells. Clinical and Experimental Immunology, 141:62-71. PRYDE, S.E., DUNCAN, S.H., HOLD, G.L., STEWART, C.S. & FLINT, H.J. (2002) The microbiology of butyrate formation in the human colon. FEMS Microbiol Letters. 217:133-139. ROMBEAU, J.L., REILLY, K.J. & ROLANDELLI, R.H. (1995) Short-chain fatty acids in intestinal surgery: rationale and clinical implications. In: Cummings JH, Rombeau JL, Sakata T (eds) Physiological and clinical aspects of short-chain fatty acids, Cambridge University Press, Great Britain, pp 401425.

11

NORELAnimalNutrition

BoletnTcnicono.3

SINA,

C., GAVRILOVA, O., FRSTER, M., TILL, A., DERER, S., HILDEBRAND, F., RAABE, B., CHALARIS, A., SCHELLER, J., REHMANN, A., FRANKE, A., OTT, S., HSLER, R., NIKOLAUS, S., FLSCH, U.R., ROSE-JOHN, S., JIANG, H-P., LI, J., SCHREIBER, S.. & ROSENSTIEL, P. (2009) G protein-coupled receptor 43 is essential for neutrophil recruitment during intestinal inflammation. The Journal of Immunology, 183:7514 -7522. STODDART, L.A., NICOLA J. SMITH, J.A. & MILLIGAN, G. (2008) International Union of Pharmacology. LXXI. Free Fatty Acid Receptors FFA1, -2, and 3: Pharmacology and Pathophysiological Functions. Pharmacological Reviews. 60: 405-417 SZYLIT, O. & ANDRIEUX, C. (1993) Physiological and pathophysiological effects of carbohydrate fermentation. World Review of Nutrition and Dietetics, 74:88-122. TOPPING, D.L. & CLIFTON, P.M. (2001) Short-chain fatty acids and human colonic function: roles of resistant starch and nonstarch polysaccharides. Physioogical Reviews 81:1031-1064. WANG, A., GU, Z., HEID, B., AKERS, R. M. & JIANG, H. (2009) Identification and characterization of the bovine G protein-coupled receptor GPR41 and GPR43 genes. J. Dairy Sci. 92:2696-2705. WCHTERSHUSER, A. & STEIN, J. (2000) Rationale for the luminal provision of butyrate in intestinal diseases. Eur J Nutr. 39:164171.

12