Replicacin en eucariotas

LEHNINGER, CAPTULO 25 ALBERTS, CAPTULO 17 BEKERS, CAPTULO 19

Replicacin en eucariotas
Mayor tamao de molculas de ADN y mayor grado de organizacin, mayor complejidad. Rasgos generales comunes con replicacin en bacterias. Asociacin a ciclo celular requiere algunas modificaciones. Existencia de ms de un origen de replicacin, no completamente definidos para todo eucariota.

Replicacin en eucariotas
Una vez por ciclo, regulada. Asociacin con ciclinas, quinasas dependientes de ciclinas (Cdk), y otras protenas que regulan ciclo celular. Protenas que dirigen los diferentes momentos del ciclo celular.
Lehninger 2009

Protenas de ciclo celular

Alberts, 2008

Protenas que regulan ciclo celular

Alberts, 2008

Replicacin asociada a ciclo celular

Formacin complejo de iniciacin.

Formacin complejo prerreplicativo

Alberts, 2008

Ensamblaje de complejos implicados

Ensamblaje complejo prerreplicativo (pre-RC)
Inhibido por actividad de Cdks y estimulado por actividad APC/C. Ocurre en mitosis tarda / G1 inicial, cuando actividad Cdks es baja y APC/C alta.

Ensamblaje complejo de iniciacin

Ocurre en inicio de fase S. Cdks de fase S promueven formacin de complejo de iniciacin que inicia la sntesis de ADN. Adems se desintegra parcialmente pre-RC.

Ensamblaje de complejos implicados

Formacin pre-RC
ORC (complejo de reconocimiento de origen), asociado a sitio de origen replicacin. Cdc6 y Cdt1 se asocian con ORC a inicio de G1. Asociacin de anillos Mcm inactivos (helicasa), concluye formacin de pre-RC.
Alberts, 2008

Ensamblaje de complejos implicados

Inicio replicacin (complejo de iniciacin)
Cdks de fase S favorecen reclutamiento de polimerasas y otras protenas, activacin anillos Mcm. Desenrollamiento e inicio de replicacin. Destruccin de Cdc6 e inactivacin ORC y Cdt1. Fosforilacin de ORC (inactivacin).

Alberts, 2008

Papel de ciclinas y CDK

Ciclinas S y M se mantienen altas inhibiendo formacin de nuevo pre-RC. Esto garantiza que no se forme pre-RC hasta final de mitosis / inicio G1. Regulacin de inicio de replicacin una sola vez por ciclo.
Alberts, 2008

Replicacin de eucariotas
Bidireccional. Mltiples orgenes de replicacin (separados por 30 a 300 kpb). Diversos tipos de ADN polimerasas, asociadas a diversas funciones.

Bekers 2012

Polimerasas eucariotas
ADN polimerasa
Multisubunidades, carece de actividad exonucleasa 3 5 correctora. Posiblemente acta en sntesis de cebadores (primers) para fragmentos de Okazaki.

ADN polimerasa
Multisubunidades, asociado a protena PCNA que lo estimula. PCNA con estructura similar a abrazadera de E. coli. Actividad 3 5 exonucleasa correctora, principal polimerasa de eucariotas.

Polimerasas eucariotas
ADN polimerasa
Reemplaza a ADN polimerasa en reparacin de ADN. Acta en horquilla de replicacin, papel anlogo a ADN polimerasa I de E. coli.

ADN polimerasa (sntesis ADN mitocondrial). Protena de replicacin A o RPA (anloga de SSB). Factor de replicacin C o RFC: cargador de abrazadera para PCNA (similar a subunidades )

Finalizacin de replicacin: telmeros

Bekers 2012

Accin de telomerasa

Bekers 2012