UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA

ESCUELA DE CIENCIAS BASICAS TECNOLOGIA E INGENIERIA

GUA COMPONENTE PRCTICO

201101 BIOLOGIA CARMEN EUGENIA PIA LOPEZ Director Nacional

BIBIANA AVILA Acreditador

BOGOTA Octubre 2010

2. ASPECTOS DE PROPIEDAD INTELECTUAL Y VERSIONAMIENTO La presente gua fue diseada en el ao 2005 por Carmen Eugenia Pia Lpez, MSc. Ciencias Biolgicas; MSc. Docencia Universitaria; Especialista en Nutricin Animal Sostenible; Especialista en Informtica y Multimedia. Docente de la UNAD desde 1986 La presente gua ha tenido tres actualizaciones con la participacin de las tutoras Yurby Salazar y Bibiana vila durante los cuales se han realizado mejoramientos acadmico-pedaggicos y didcticos con la incorporacin de Objetos Virtuales de Aprendizaje Con el fin de que el estudiante tenga una preparacin previa del material a utilizar y de los procedimiento a seguir se incorporaron links a videos demostrativos donde se muestra paso a paso cada uno de los procedimientos que el estudiante debe realizar en la prctica presencial. Cada video cuenta con su respectivo formato de observacin lo cual le facilitar la comprensin y el desarrollo de la prctica. http://www.unad.edu.co/curso_biologia/multimedia.htm Se dise una simulacin de microscopa en donde el estudiante puede manipular el microscopio de manera virtual y de esta manera realizar un entrenamiento previo al desarrollo de los laboratorios. El link donde est publicado el simulador: http://canal.unad.edu.co/laboratorio/index/main.html

3. INDICE DE CONTENIDO

Pg. INTRODUCCIN CARACTERISTICAS GENERALES DESCRIPCIN DE PRCTICAS PRCTICA No. 02 MICROSCOPA PRACTICA No. 03 LA CLULA PRACTICA No. 04 DIVERSIDAD MICROBIANA PRACTICA No. 05- MITOSIS Y MEIOSIS PRACTICA No. 06 TEJIDOS VEGETALES 5 5 8 13 40 51 58 64

4. LISTADO DE TABLAS 1 Equivalencia de milmetros en micras 2 Observaciones realizadas 29 34

4.1 LISTADO DE GRFICOS Y FIGURAS 1El Microscopio y sus partes 2 Objetivos 3 Ocular 4 Platina 5 Condensador y Diafragma 6 Tornillos Macromtrico y Micromtrico 7 Poder de aumento 8 Poder de definicin 9 Poder de penetracin o profundidad 10 Poder de resolucin 11 Objetivo donde se visualiza el aumento y la apertura numrica 12 Distancia Focal 13 Formacin de la imagen invertida 14 Refraccin de la Luz 15 Correccin de la refraccin de la Luz 16 Campo de visin 17 montaje de papel milimetrado 18 Papel milimetrado con aumento de 4X 15 15 16 17 17 18 20 20 21 22 22 23 25 26 27 27 28 28

18 Papel milimetrado con aumento de 4X

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5. CARACTERSTICAS GENERALES

Introduccin

Las guas para las prcticas de biologa, son un importante dispositivo de ayuda pedaggica y didctica en el proceso de formacin profesional que inician los estudiantes de los programas de pregrado de Ingeniera de Alimentos, Regencia de Farmacia, Zootecnia, Agronoma, Ingeniera Agroforestal y Psicologa. Estas guas estn descritas de manera clara y sencilla con el fin de que la ejecucin prctica pueda hacerse completamente. Antes de realizar la parte prctica se recomienda ver cada uno de los videos presentados en el curso de Biologa en el link Multimedia, http://www.unad.edu.co/curso_biologia/multimedia.htm para hacerse una idea del material a utilizar y procedimiento a seguir lo cual le facilitar la comprensin y el desarrollo de la prctica Quienes deseen descargar los videos en su computador pueden hacerlo ver orientaciones al final de la gua.

Justificacin

Un aspecto importante de la formacin profesional en los campos de Ciencias Agrarias, Psicologa, Ingeniera de Alimentos, Regencia de Farmacia, corresponde al saber hacer, evidenciado en competencias psicomotoras que facilitan el ejercicio profesional, por representar un dominio de procesos complejos necesarios para la realizacin cotidiana de actividades sistmicas y la resolucin de problemas, en las cuales se integran la aplicacin de procedimientos y estrategias (saber hacer) con la comprensin del contexto (saber conocer) y con el despliegue de iniciativa y creatividad (saber ser). Un ejemplo especfico de este tipo de competencia es el aprendizaje procedimental del manejo del microscopio, ya que en todo lo relacionado con la observacin de componentes o muestras microbiolgicas como base para diagnsticos y toma de decisiones, es fundamental poseer

la competencia de manipulacin del microscopio en un nivel de automatizacin o de experticia. Una manera efectiva de alcanzar esta experticia en el manejo del microscopio es el desarrollo de laboratorios para una ejercitacin personal. Intencionalidades formativas Propsitos Integrar al perfil de formacin profesional del estudiante la capacidad de desempearse con seguridad y con experticia en los procedimientos propios de un laboratorio de biologa. Objetivos Identificar y aplicar las normas de bioseguridad, identificar los componentes del microscopio ptico y los procedimientos correctos de manipulacin del microscopio para observacin de muestras biolgicas, as como la identificacin de componentes celulares y microorganismos. Metas Que cada estudiante al terminar la prctica pueda desarrollar el cuestionario evaluativo y presentar un informe correcto de los procedimientos aplicados. Competencias Comportamiento bio seguro en el laboratorio Manipulacin correcta del microscopio ptico Identificacin correcta de componentes celulares, microorganismos Denominacin de prcticas Prctica 1: Normas de seguridad en el laboratorio Practica 2: Microscopa Practica 3: La clula Prctica 4 : Diversidad Microbiana

Prctica 5: Mitosis y Meiosis Prctica 6. Los tejidos Vegetales Nmero de horas Porcentaje 12 18 % NO __X__

Curso Evaluado por SI___ proyecto Seguridad industrial

La primera prctica hace referencia a las Normas de seguridad en el laboratorio. Se entrega reglamento de prcticas de laboratorio

6. DESCRIPCIN DE PRCTICAS PRACTICA No. 01 Normas de seguridad en el laboratorio

Tipo de practica Presencial Otra Cul Autodirigida X Remota

Porcentaje de evaluacin Horas de la prctica Temticas de la prctica Intencionalidades formativas

1% 0.15 Bioseguridad e higiene en el laboratorio Propsito(s) Desarrollar en el estudiante la competencia de comportamiento bioseguro en el laboratorio de biologa. Objetivo(s) Conocer y cumplir las principales normas de seguridad e higiene que se deben seguir en el laboratorio, con el fin de evitar posibles riesgos, tanto para las personas como para el medio ambiente. Meta(s) Observar el video normas de seguridad en el laboratorio y contestar las preguntas presentadas en el formato de observacin del video Competencia(s) Se basan en el dominio la relacin cognitivoprocedimental orientada a: 1. Argumentar el concepto de bioseguridad aplicado al uso del laboratorio de biologa. 2 .Transferir a situaciones concretas las normas bsicas de bioseguridad en el laboratorio de biologa 3. Aplicar la capacidad de evitar en el laboratorio

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daos a su salud

Fundamentacin Terica La bioseguridad, es la aplicacin del conocimiento, de las normas y tcnicas en el desarrollo de las prcticas que se realizan en el laboratorio para prevenir la exposicin del personal y del medio ambiente a cualquier riesgo. Los riesgos pueden estar relacionados con las propias instalaciones, con las muestras de origen biolgico, con los procedimientos y manipulaciones que se realicen. Principales Normas Las principales normas a tener en cuenta para el desarrollo de prcticas en el laboratorio de Biologa son las siguientes: En la zona de trabajo del laboratorio no se debe consumir alimentos ni bebidas para evitar riesgos de contaminacin. Est prohibido fumar en el rea del laboratorio o sus alrededores. Recordemos que se trabaja con gas y que algunos qumicos generan vapores inflamables. No se deben llevar a la boca lpices, etiquetas o cualquier otro material utilizado en el laboratorio. Se debe mantener el laboratorio limpio y aseado. Por consiguiente al terminar la prctica se debe descontaminar la superficie de trabajo. Las manos se deben lavar despus de manipular material infeccioso, as como al abandonar el laboratorio. Todo estudiante debe hacer uso de la bata blanca, esto le proteger la ropa del contacto con reactivos y colorantes empleados en el laboratorio. Slo se debe permitir el paso a la zona de trabajo del laboratorio a las personas autorizadas. Durante el trabajo se mantendrn cerradas las puertas del laboratorio. No se debe pipetear con la boca. Debe utilizarse siempre un dispositivo de pipeteo Todas las pipetas deben tener tapones de algodn para reducir la contaminacin de los dispositivos de pipeteo. Todo el personal debe poner especial cuidado en evitar el contacto de la piel con materiales potencialmente infecciosos. Con este fin deben usarse guantes. Los guantes deben ser desechados antes de salir del rea de trabajo. Jams se debe salir de la misma con los guantes puestos, ni con ellos se debe coger el telfono.

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Marque y rotule adecuadamente las lminas. Deben llevar claramente escrito en un lugar visible, el nombre o identificacin del grupo de trabajo, practica realizada y fecha. Una vez concluida la prctica, proceda a organizar el sitio de trabajo, desinfectando el mesn con toallas de papel humedecidas con hipoclorito de sodio o alcohol y dejando tanto el material como el equipo utilizado limpio y en el lugar adecuado. Es importante conocer los agentes, sustancias y productos peligrosos que existen en el laboratorio. Antes de utilizar un compuesto hay que fijarse en la etiqueta para asegurarse de que es el que se necesita y de los posibles riesgos de su manipulacin. Es necesario conocer el manejo de cada uno de los equipos existentes en el laboratorio. Todo el material, especialmente los aparatos delicados, como lupas y microscopios, deben manejarse con cuidado evitando los golpes o el forzar sus mecanismos. Cualquier material de vidrio no debe enfriarse bruscamente justo despus de haberlos calentado con el fin de evitar roturas. En neveras que no posean un sistema de proteccin antideflagracin no deben almacenarse reactivos que contengan compuestos voltiles inflamables como ter etlico. Los productos inflamables como gases, alcohol, ter, entre otros deben mantenerse alejados de la llama del mechero. Si hay que calentar tubos de ensayo con estos productos, se har al bao Mara, nunca directamente a la llama. Si se manejan mecheros de gas se debe tener mucho cuidado de cerrar las llaves de paso al apagar la llama. Se debe lavar muy bien la cristalera que se utilice. Preste atencin y cuidado al manipular cristalera mojada. En el laboratorio habr un recipiente plstico, para cristalera rota y para plsticos que hayan estado en contacto con cultivos de clulas o virus. Por favor, deseche cada cosa en el envase apropiado. Mantenga despejadas las reas. Trate de traer la menor cantidad posible de pertenencias al laboratorio. Coloque sus pertenencias en un rea designada o donde no estorben. Descripcin de la prctica Para el desarrollo de esta prctica el estudiante debe observar el video normas de seguridad en el laboratorio y contestar las preguntas presentadas en el formato de observacin del video Recursos a utilizar en la prctica (Equipos / instrumentos) Observacin del video sobre normas de bioseguridad http://www.unad.edu.co/curso_biologia/videoseguridad.htm

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Software a utilizar en la prctica u otro tipo de requerimiento para el desarrollo de la prctica. Computador y observacin del video. Seguridad Industrial La presentacin del video evita riesgos fsicos y psicolgicos al estudiante. Metodologa Conocimiento previo para el desarrollo de la prctica: la fundamentacin terica sobre normas de bioseguridad. Forma de trabajo: El estudiante puede observar slo o en grupo el video desde su computador personal o desde un computador institucional bajo la gua de tutores regionales si tiene esa facilidad. Procedimiento: Aplicacin de cada paso de esta gua en su secuencia. Sistema de Evaluacin La evaluacin se llevar a cabo por medio de las siguientes actividades 1. Presentacin del pre-informe sobre los laboratorios, el cual incluye las respuestas a las preguntas sobre observacin de videos y las respuestas a los cuestionarios de cada prctica. 2. Evaluaciones parciales presenciales al iniciar la prctica 3. Presentacin de informes de prcticas realizadas en el laboratorio, el cual incluye tambin el pre-informe 3. Resolucin de cuestionarios para medir el rendimiento despus de las prcticas Informe o productos a entregar La respuesta a las siguientes preguntas: Cuestionario para el pre-informe 1.1 Que es bioseguridad? 1.2 Cules seran para usted las normas bsicas de bioseguridad en el

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laboratorio de biologa? 1.3 Cmo puede usted evitar en el laboratorio daos a su salud? 1.4 Conclusiones Los puntos del Informe final son: Titulo Objetivos Resumen de la informacin terica Esquema o diagrama de flujo en orden riguroso por cada observacin Respuesta a cuestionario que encuentre en la gua de prctica. Conclusiones Referencias bibliogrficas

Rbrica de evaluacin Cumplimiento de todos los puntos del informe y las evaluaciones= 5.0 Informe completo de los procedimientos de la prctica sin solucin completa del cuestionario = 3.5 Informe incompleto de procedimientos y del cuestionario = 2.0 No presentacin del informe de procedimientos ni del cuestionario = 0.0 Retroalimentacin A cargo del tutor regional

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PRACTICA No. 02 Microscopa Tipo de practica Presencial x Autodirigida Remota

Porcentaje de evaluacin Horas de la practica Temticas de la prctica

Intencionalidades formativas

3,5% 2,20 Identificacin de componentes y manipulacin del microscopio para observacin de muestras previamente preparadas. Propsitos: comprender el funcionamiento del microscopio y el procedimiento para su manipulacin correcta. Objetivos Sealar los componentes mecnicos y pticos que constituyen el microscopio. Realizar montajes hmedos Comprobar las propiedades que posee el microscopio. Realizar correctamente el manejo del microscopio ptico Calcular el dimetro del campo de visin Comprobar los principios en que se basa la microscopa ptica. Desarrollar en trabajo colaborativo el informe de laboratorio

Metas El estudiante debe explicar con fluidez los tipos de microscopio existentes, los componentes del microscopio ptico, sus poderes y los principios generales de la microscopa. Competencias Son competencias con nfasis procedimental, referidas a: 1. Capacidad de identificar y manipular los

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componentes del microscopio. 2. Realizar montajes hmedos 3. Preparar y observar muestras biolgicas. 4. Comprobar las propiedades que posee el microscopio.

Fundamentacin Terica video:_El microscopio parte 1

video:_EL microscopio parte 2 Tipos de Microscopio El Microscopio ptico simple Constituido por una lente biconvexa nica o lupa que hace converger los rayos luminosos que la atraviesan en un punto denominado foco y a una distancia focal muy corta. El Microscopio ptico Compuesto El microscopio se define como un instrumento ptico formado por un sistema de lentes: objetivos y oculares que amplan los objetos extremadamente pequeos para posibilitar su observacin. La lente del objetivo proporciona una imagen intermedia ampliada del objeto, es decir, funciona como una lente simple, y la lente del ocular que recoge la imagen dad por el objetivo y la aumenta. El Microscopio electrnico Este microscopio en lugar de una fuente de luz, utiliza un haz de electrones que se desplazan en el vaco y en lnea recta. Con el microscopio electrnico es posible observar objetos muy pequeos como los virus que no pueden ser resueltos con el microscopio ptico. En el microscopio ptico en lugar de lentes se emplean campos magnticos que enfocan los haces de electrones. El Microscopio ptico Compuesto: componentes A continuacin se describen las partes que lo conforman:

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Figura 1 El Microscopio y sus partes Los objetivos: estn localizados en la parte inferior del tubo insertados en una pieza metlica, denominada revlver o porta objetivos, que permite cambiarlos fcilmente. Estos generan una imagen real, invertida y aumentada, esta imagen intermedia es captada y sufre una nueva ampliacin por el ocular.

Figura 2 Objetivos

Los objetivos ms frecuentes son los de 4X, 10X, 40X y 100X aumentos. Este ltimo de 100x se llama de inmersin ya que para su utilizacin se necesita aplicar aceite de cedro sobre la preparacin. Y se utiliza para observar lminas coloreadas completamente secas. El poder de aumento de cada objetivo se indica en el nmero grabado en la manga del lente. Generalmente el objetivo de 4X se encuentra marcado por un

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anillo rojo, el de 10X por un anillo de color amarillo, el de 40=x con un anillo de color azul y el de 100X con un anillo de color blanco. La abertura numrica se encuentra (A.N.) se encuentra grabada en la manga del objetivo, junto a la indicacin del aumento. 0,30 0,65 1,30 En el objetivo de 10X En el objetivo de 40X En el objetivo de 100X

A medida que aumenta la A.N. disminuyen las dimensiones de la lente frontal, montada en la base del objetivo. La lente del objetivo de 100x tiene el tamao de una cabeza de alfiler es mayor el poder de resolucin. Adems a medida que aumenta A.N. es mayor el poder de resolucin. Cuanto mayor sea el poder de resolucin del objetivo, ser ms clara la imagen y aumentar la capacidad de poner de manifiesto detalles adyacentes muy cercanos, separndolos y aclarndolos. El poder de resolucin mximo de un buen microscopio es aproximadamente 0,25 nanmetros, el poder de resolucin del ojo humano es de 0,25 milmetros

Figura 3 Ocular

Los oculares se denominan as porque estn muy cercanos al ojo. Su funcin es la de captar y ampliar la imagen formada en los objetivos. El poder de aumento del ocular se encuentra marcado en el ocular. Un ocular por 4 aumenta 4 veces la imagen que produce el objetivo. Un ocular por 6 la aumenta 6 veces. Un ocular por 10 la aumenta 10 veces Nunca se deben tocar las lentes con las manos. Si se ensucian, se deben limpiar muy suavemente con un papel de ptica

El tubo ptico: es una cmara oscura unida mediante una cremallera. Tiene el revlver con los objetivos en su parte inferior y los oculares en el extremo superior. El Brazo: es una columna perpendicular al pie. Puede ser arqueado o vertical y une al pie con el tubo.

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Platina

Figura 4 Platina

Es una plataforma horizontal con un orificio central, sobre el que se coloca la preparacin, que permite el paso de los rayos procedentes de la fuente de iluminacin situada por debajo. Dos pinzas sirven para retener el portaobjetos sobre la platina y un carro con un sistema de cremallera guiado por dos tornillos de desplazamiento que permite mover la preparacin de delante hacia atrs o de izquierda a derecha y viceversa. Est dotado de una escala graduada para medir de forma precisa las observaciones.

El condensador: es un sistema de lentes convergentes situadas bajo la platina, su funcin es la de concentrar la luz generada por la fuente de iluminacin hacia la preparacin.

Figura 5 Condensador y Diafragma Diafragma-iris Es una cortinilla que regula la cantidad de luz que entra en el condensador, eliminando los rayos demasiado desviados. Se acciona mediante una perilla. Esta situado debajo de la platina, inmediatamente debajo del condensador. La disminucin del diafragma permite visualizar partes de protozoos u hongos se utiliza en las preparaciones frescas

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Figura 6 Tornillos Macromtrico y Micromtrico Tornillo Macromtrico: Se encuentra en la parte inferior del microscopio. Sirve para alejar o acercar el tubo y la platina movindola de arriba hacia abajo y viceversa. Permite un enfoque aproximado o grueso de la muestra Tornillo micromtrico: Generalmente se encuentra incorporado al tornillo macromtrico. Sirve para dar claridad a la imagen al lograr un ajuste fino y preciso, mediante movimiento de la platina hacia arriba y hacia abajo de forma lenta. Ambos tornillos llevan incorporado un mando de bloqueo que fija la platina a una determinada altura. La fuente de iluminacin: se trata de una lmpara halgena de intensidad graduable. Est situada en el pie del microscopio. Se enciende y se apaga con un interruptor y en su superficie externa puede tener una especie de anillo para colocar filtros que facilitan la visualizacin. Por ltimo definimos el pie o base: sirve como base del microscopio y tiene un peso suficiente para dar estabilidad al aparato. En l se integra la fuente luminosa.

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Poderes o capacidades del microscopio

Poder de aumento: Permite magnificar la imagen. Corresponde al aumento (A) dado por la relacin: Tamao de la imagen / tamao del objeto. La ampliacin es igual al producto del aumento del lente ocular por el del objetivo. Cada objetivo y cada ocular tienen grabado el nmero de veces que aumentan la imagen. Si la imagen del objeto, se hace aumentar 40 veces mediante el objetivo y enseguida 10 mediante el ocular, su aumento total ser 10X40= 400

Figura 7 Poder de aumento

Cmo se calcula el aumento de una muestra? Se multiplica el aumento que seala el ocular por el aumento del objetivo dando como resultado el aumento total de la muestra o nmero de veces en que el objeto se encuentra ampliado con respecto a su tamao original. Aumento total = aumento del ocular X aumento del objetivo

Poder de definicin Es la capacidad del microscopio para formar imgenes ntidas y con contornos definidos

Figura 8 Poder de definicin

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Figura 9 Poder de penetracin o profundidad Poder de penetracin o profundidad Permite visualizar los diferentes planos de una preparacin y est dado por el ajuste de precisin que se logra con el tornillo micromtrico Poder de resolucin es la capacidad de presentar dos puntos que se encuentran muy cercanos entre s como separados, lo cual permite observar detalles de los objetos que con el ojo humano no se podran ver. El ojo humano no puede ver separados dos puntos cuando su distancia es menor a una dcima de milmetro. Con el Microscopio ptico, el poder separador mximo es de 0,2 dcimas de micra. Mejora la visin unas 500 veces con relacin a la del ojo humano

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Figura 10 Poder de resolucin

En la imagen de la izquierda se observan espacios blancos entre la tinta negra que a simple vista no seran vistos En la imagen de la derecha se observan varias fibras de hilo que a simple vista no seran vistas.

Figura 11 Objetivo donde se visualiza el aumento y la apertura numrica El poder de resolucin depende de la longitud de onda ( ) y de la apertura numrica del objetivo (A.N.)

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El Poder de resolucin esta dado por la formula:

Poder de resolucin= 2x A.N. A.N: relaciona el ngulo de apertura de los rayos de luz, que provienen de la muestra, con el ndice de refraccin.

Principios generales de microscopa Principios pticos Una lente sencilla (biconvexa) posee dos focos, uno a cada lado de la lente (F y F). Cuando los rayos luminosos pasan a travs de la lente se concentran en el foco. La distancia focal es la distancia entre el centro de la lente y el punto en donde convergen los rayos. La distancia focal de una lente depende del ndice de refraccin del material del cual est hecha, y del medio que envuelve la lente. Por eso, es diferente la distancia focal de una lente en el agua, que esta misma en el aire. Como tambin es diferente la distancia focal de una lente de vidrio en comparacin con una construida en plstico.

Figura 12 Distancia Focal

http://micro.magnet.fsu.edu/primer/java/lenses/simplethinlens/index.html

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Cuanto ms pequea es la distancia focal de una lente tanto mayor es su aumento. Si el objeto se coloca a distancia mayor del foco, se obtiene una imagen real invertida, mientras que si el objeto se localiza a una distancia menor del foco la imagen ser virtual. A medida que se aleja el objeto del foco, la imagen se percibe ms pequea.

Figura 12 Distancia Focal

http://micro.magnet.fsu.edu/primer/java/lenses/simplethinlens/index.html

La distancia de trabajo focal de un objetivo, es el espacio que existe entre la superficie de la lente del objetivo y la laminilla, una vez se encuentre enfocada la preparacin. A mayor aumento del objetivo la distancia de trabajo disminuye. Como determinar la posicin de los objetos observados Los objetos que se observan en el campo microscpico se pueden localizar en

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relacin con las manecillas del reloj.

Los objetos que aparecen en la parte inferior del fondo del campo microscpico se encuentran realmente en la parte superior. Los objetos en el lado izquierdo del campo microscpico se encuentran realmente al lado derecho. Desplazamiento del objeto Si se mueve el portaobjetos hacia la derecha, el objeto examinado se desplazar hacia la izquierda. Si se mueve el portaobjetos hacia usted, el objeto examinado se alejar. Formacin de la imagen real invertida

Figura 13 Formacin de la imagen invertida

Las imgenes se observan invertidas por las lentes.

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Refraccin de la luz

Figura 14 Refraccin de la Luz La distancia focal de una lente depende del ndice de refraccin del material del cual est hecha y del medio que envuelve la lente. Cuando los rayos de luz se mueven en un medio homogneo como el aire, se propagan en lnea recta, pero cuando caen sobre la superficie de un medio de diferente densidad, a la del medio en el cual se vena propagando, cambian de direccin y de velocidad a estos cambios se les conoce como refraccin de la luz. Los rayos de luz procedentes de los objetos sumergidos en el agua se desvan al atravesar dos medios de diferente densidad (agua-aire), originando este efecto de refraccin. Por ejemplo si introducimos un lpiz en un vaso con agua, el lpiz se ver cortado al pasar del agua al aire.

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En la prctica de microscopa encontramos diferentes medios: aire, agua aceite de inmersin y vidrio, cuyos ndices de refraccin son 1.0, 1.33, 1.51, .1.54 respectivamente. Al observar una muestra a travs del microscopio, los rayos de luz tienen que atravesar estos medios y son refractados cambiando su direccin.

Figura 15 Correccin de la refraccin de la Luz Al aplicar el aceite inmersin se entre el preparado y la lente, aceite de inmersin, que tiene un ndice de refraccin igual al de la lente y evita la refraccin de los rayos luminosos.

Campo de Visin

Figura 16 Campo de visin

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El campo de visin de un microscopio es la zona circular que se observa al mirar la preparacin bajo un determinado aumento. Para medir el campo de visin de un microscopio, se debe usar una unidad llamada micra. Una micra equivale a 0,0001 mm; en otras palabras, hay 1000 micras en un milmetro. El dimetro de este campo es su medida. Para calcular el dimetro del campo de visin para un determinado aumento hay que seguir los siguientes pasos:

Figura 17 montaje de papel milimetrado a) Recortar un cuadrado de 1 cm de lado de papel milimetrado. b) Ponerlo sobre la abertura central del portaobjetos c) Observando por el ocular y con el objetivo de 4X, mover la muestra hasta lograr que la lnea 0 mm quede en el borde izquierdo del campo visual

Figura 18 Papel milimetrado con aumento de 4X d) Enfocar con el objetivo de menor aumento 4X hasta que se vea con claridad. Enfocar la preparacin quiere decir situarla a la distancia del objetivo que permite su observacin ntida. Esta distancia s e conoce como distancia de trabajo y es tanto menor cuanto mayor es el poder de aumento del objetivo e) Medir el campo visual haciendo coincidir una de las lneas del papel

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milimetrado con el borde del campo de visin.

Figura 18 Papel milimetrado con aumento de 4X f) Contar el nmero de milmetros que se ven (recuerde que la distancia entre dos lneas es un milmetro) y estimar aproximadamente la fraccin sobrante, si la hay. El resultado ser el dimetro del campo visual para ese aumento (objetivo x ocular). g) Si queremos calcular el dimetro del campo de visin para aumentos mayores, hay que tener en cuenta que cuanto mayor sea el aumento, el campo ser menor, es decir, se ver menos de la muestra que estemos observando. De forma que, si el aumento es el doble, el campo ser la mitad, si el aumento es el triple, el dimetro ser la tercera parte, etc. (inversamente proporcionales). Por tanto, bastar con realizar un sencillo clculo matemtico para saber el nuevo dimetro. As se puede calcular los dimetros de objetos microscpicos, clulas, amibas, vistos. Recuerde que aunque la escala est marcando mm usted lo leer en micras. Tabla 1 Equivalencia mm en micras Medida en mm (escala del portaobjetos) 1mm 0.1 mm 0.01mm Equivalencia en m 1000 m 100 m 10 m Tamao de las marcas (divisiones) grandes medianas ms pequeas

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Preparaciones Las preparaciones pueden ser de varios tipos: a. Frescas: Son montajes generalmente hmedos. La muestra se observa sin modificar, diluida o concentrada. Permite observar la movilidad de los microorganismos vivos. Se utiliza tambin para observar procesos como la mitosis, meiosis, la formacin d esporas. Para realizar un montaje hmedo se debe verter una gota de agua o del lquido que contiene los microorganismos en el centro de una lmina portaobjetos y cubrirlo con una laminilla cubreobjetos. Para evitar la evaporacin se puede sellar el espacio que hay entre el portaobjetos y el cubreobjetos con vaselina o alguna sustancia similar. Frescas ligeramente modificadas: Las muestras se pueden diluir con agua o con agua con sal, esta ltima evita que la presin osmtica del medio no sea demasiado baja. Se puede aplicar un colorante o reactivo para observar mejor las estructuras. b. Fijadas y teidas: Se coloca una suspensin homognea de microorganismos en una gota de agua sobre el portaobjetos y se fija (mediante calor o agentes qumicos) y despus se tien mediante diferentes tcnicas. Estas preparaciones se observan sin cubreobjetos y, habitualmente, con objetivos de inmersin. Manejo del Microscopio Para realizar las preparaciones se deben alistar los siguientes elementos. MATERIALES QUE DEBEN LLEVAR Bata Blanca, Guantes. Papel absorbente, Paos de cocina Jabn Tapabocas. Papel y lpiz para tomar apuntes Resueltas las preguntas sobre la observacin de videos y las que se solicite en cada prctica Agua estancada o de solucin de tierra de infusorios Papel milimetrado Hilos de colores Tela de cuadros 2 centmetros Recorte de peridico con la letra asimtrica: Pude ser la letra e o la letra a Lminas portaobjetos, Laminillas (por grupo)

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papel absorbente MATERIALES QUE LE SERN SUMINISTRADOS EN EL LABORATORIO Lamina con extendido coloreada Microscopio Aceite de inmersin Papel de Arroz o de ptica Alcohol isoproplico
Descripcin de la practica

3. Uso del microscopio Organizacin del proceso paso a paso

Tome una gota de la muestra de agua estancada

Colquela sobre una lmina portaobjetos, y cbrala con una laminilla.

Retire el exceso de agua por los bordes, usando papel absorbente.

Dibuje sus observaciones anotando el aumento utilizado

Observe el montaje realizado al microscopio en 4x, 10x y 40x.

Realizacin de Montaje hmedo

Tome con una pipeta agua estancada o de solucin de tierra de infusorios Coloque la gota de agua estancada o de solucin de tierra de infusorios sobre una lmina porta-objeto Tome una laminilla cubreobjetos, en posicin oblicua, (45 grados) y apoyando una arista sobre la lmina al lado de la gota, djela caer suavemente.

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Manejo del microscopio Encienda el microscopio Coloque el objetivo de menor aumento 4X Baje la platina completamente girando el tornillo macromtrico. Si el microscopio se recogi correctamente en el uso anterior, ya debera estar en esas condiciones Tome la lmina con la preparacin fjese que est completamente seca en la parte inferior Coloque la lmina con la preparacin sobre la platina sujetndola con las pinzas. Procure que la preparacin quede centrada, girando el tornillo para desplazamiento del carro mvil Gire el tornillo macromtrico en sentido contrario a las agujas del reloj para subir la platina hasta el tope. Debe hacerlo mirando directamente y no a travs del ocular, ya que se corre el riesgo de incrustar el objetivo en la preparacin. Cierre o abra el diafragma hasta una posicin intermedia, accionando su perilla en sentido contrario a las agujas del reloj para que la luz no sea ni muy brillante ni demasiado tenue. Inicie la observacin con el objetivo de 4X. Mirando a travs de los oculares, separe lentamente el objetivo de la preparacin con el tornillo macromtrico en sentido de las agujas del reloj. Hasta lograr observar la imagen Cuando se observe algo ntida la muestra, gire el tornillo micromtrico hasta obtener un enfoque fino Gire el revolver Coloque el objetivo de 10X Visualice con el objetivo de 10X y detalle las estructuras Gire el revlver y visualice con el objetivo de 40X enfoque con el tornillo micromtrico y detalle las estructuras

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Detalle como el campo se reduce y el alga y el protozoo se observan mejor. Observacin con el objetivo de inmersin 100X Se utiliza para la observacin de muestras fijadas, no para muestras frescas Coloque el objetivo de inmersin de manera que el orificio de la platina quede entre el objetivo de 100X y el de 40X Suba totalmente el condensador para ver claramente el crculo de luz que nos indica la zona que se va a visualizar y donde habr que aplicar el aceite Coloque una gota de aceite de inmersin sobre la preparacin en el crculo de luz Coloque una lmina coloreada sobre la platina Ubique el objetivo el objetivo de 100x Suba la platina lentamente hasta que la lente toque la gota de aceite Observe la imagen con aumento de 100X En esta preparacin se muestran eosinfilos un tipo de clulas sanguneas coloreados con colorante de Wright Limpie el objetivo de inmersin con un papel especial para ptica y alcohol isoproplico Deje el objetivo de menor aumento en posicin de trabajo 3.1. De la muestra de agua estancada tome una gota y colquela en una lmina portaobjetos, cubra con una laminilla. 3.2 Retire el exceso de agua por los bordes usando papel absorbente. 3.3 Observe el montaje realizado al microscopio con aumentos de 4x, 10x y 40x. En el informe debe incluirse el siguiente cuadro que debe registrar las observaciones realizadas. Tabla 2 Observaciones realizadas

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OBJETO OBSERVADO Agua estancada

AUMENTO UTILIZADO 4X 10X

DIBUJO

ANLISIS Y CONCLUSIONES

40X

3.4 Qu organismos pueden observarse en la gota de agua estancada? 3.5 Son todos de igual tamao y forma? 3.6 Se observan organismos mviles o estticos?

4. Comprobacin de los poderes o capacidades del microscopio ptico 4.1 Realice un montaje hmedo con la letra asimtrica y obsrvela al microscopio siguiendo los pasos anteriores. 4.2 Calcule el aumento del tamao del objeto observado para cada objetivo del microscopio con el cual le correspondi trabajar. 4.3 Cmo se manifiesta el poder de aumento al observar la letra? 5. Realice un montaje hmedo con un centmetro cuadrado de papel milimetrado y obsrvelo al microscopio 5.1 Calcule el dimetro del campo de visin para un aumento de 4x en un cuadrado de 1 cm de lado de papel milimetrado. Para calcular el dimetro del campo de visin para un determinado aumento hay que seguir los siguientes pasos:

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a) Recortar un cuadrado de 1 cm de lado de papel milimetrado. b) Ponerlo sobre la abertura central del portaobjetos C) Observando por el ocular y con el objetivo de 4X, mover la muestra hasta lograr que la lnea 0 mm quede en el borde izquierdo del campo visual

d) Enfocar con el objetivo de menor aumento 4X hasta que se vea con claridad. Enfocar la preparacin quiere decir situarla a la distancia del objetivo que permite su observacin ntida. Esta distancia s e conoce como distancia de trabajo y es tanto menor cuanto mayor es el poder de aumento del objetivo

e) Medir el campo visual haciendo coincidir una de las lneas del papel milimetrado con el borde del campo de visin.

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f) Contar el nmero de milmetros que se ven (recuerde que la distancia entre dos lneas es un milmetro) y estimar aproximadamente la fraccin sobrante, si la hay. El resultado ser el dimetro del campo visual para ese aumento (objetivo x ocular). g) Si queremos calcular el dimetro del campo de visin para aumentos mayores, hay que tener en cuenta que cuanto mayor sea el aumento, el campo ser menor, es decir, se ver menos de la muestra que estemos observando. De forma que, si el aumento es el doble, el campo ser la mitad, si el aumento es el triple, el dimetro ser la tercera parte, etc. (inversamente proporcionales). Por tanto, bastar con realizar un sencillo clculo matemtico para saber el nuevo dimetro. As se puede calcular los dimetros de objetos microscpicos, clulas, amibas, vistos. 5.2 Calcule el dimetro del campo de visin para aumentos de 10X, 40X del mismo cuadrado de 1 cm de lado de papel milimetrado. 5.3 Compare la anchura del campo visual con cada uno de los tres objetivos 5.4 Con cul objetivo el campo de visin es mayor con el de mayor o menor aumento? 6. Realice un montaje hmedo con tres hebras de hilo superpuestas y obsrvelas al microscopio 6.1 Para las muestras de la letra, la hebra de hilo observadas determine: a. b. c. d. Cmo se manifiesta el poder de resolucin? Cmo se manifiesta el poder de aumento? Cmo se manifiesta el poder de definicin? Cmo se manifiesta el poder de penetracin o profundidad?

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6.2 Cul es la utilidad del microscopio? 6.3 En qu montaje se observ mejor el poder de penetracin? 7. Comprobacin de los principios pticos del microscopio Despus de observar la letra asimtrica, Conteste las siguientes preguntas: 7.1 Al observar la letra asimtrica: Se ve invertida, o en la misma posicin en que estara si se viera a simple vista? Parece como si se viera por un espejo? 7.2 Al mover la preparacin hacia la derecha. Hacia dnde se mueve la imagen? 7.3 Al alejara el portaobjeto o la muestra de usted hacia donde se nueve la imagen? 7.4 Si la distancia focal es mayor el tamao del objeto es mayor o menor? 8. Tome la lmina con el extendido coloreado y obsrvela en el microscopio enfocando primero con el objetivo de 10x, luego ponga una gota de aceite de inmersin sobre el extendido y ubique el objetivo de 100x. Describa los detalles observados con cada objetivo. Al finalizar el trabajo deje el microscopio en su correcta posicin, limpie los objetivos, colquele la funda y guarde en su puesto. Al terminar de desarrollar las prcticas usted debe ingresar al foro colaborativo del curso y participar con sus 4 compaeros de grupo colaborativo en la elaboracin del informe de laboratorio respondiendo a las anteriores preguntas compare las respuestas de los 5 integrantes y consoldelas en un solo documento que enviarn al foro para la retroalimentacin y calificacin por parte de su tutor.
Recursos a utilizar en la prctica (Equipos / instrumentos)

Observacin del video sobre microscopa

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MATERIALES QUE DEBEN LLEVAR Bata Blanca, Guantes. Papel absorbente, Paos de cocina Jabn Tapabocas. Papel y lpiz para tomar apuntes Resueltas las preguntas sobre la observacin de videos y las que se solicite en cada prctica Agua estancada o de solucin de tierra de infusorios Papel milimetrado Hilos de colores Tela de cuadros 2 centmetros Recorte de peridico con la letra asimtrica: Pude ser la letra e o la letra a Lminas portaobjetos, Laminillas (por grupo) papel absorbente MATERIALES QUE LE SERN SUMINISTRADOS EN EL LABORATORIO Lamina con extendido coloreada Microscopio Aceite de inmersin Papel de Arroz o de ptica Alcohol isoproplico
Software a utilizar en la practica Simulador de Microscopa

Metodologa Previo al desarrollo de la prctica: leer detenidamente la fundamentacin terica relacionndola con los objetivos y metas de aprendizaje Procedimiento: seguir las actividades del video y presentar la evaluacin. Al terminar de desarrollar las prcticas usted debe ingresar al foro colaborativo del curso y participar con sus 4 compaeros de grupo colaborativo en la elaboracin del informe de laboratorio respondiendo a las anteriores preguntas compare las respuestas de los 5 integrantes y consoldelas en un solo documento que enviarn al foro para la retroalimentacin y calificacin por parte de su tutor.

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Sistema de Evaluacin Se calificar el informe del laboratorio con las respuestas al cuestionario: Preguntas adicionales para el informe final 2.15 Observe cul es el valor de los oculares_________________

2.16 Observe cual es el valor de cada uno de los objetivos_____,______,________,______ 2.17 Calcule el aumento logrado para cada objeto observado en su prctica de laboratorio (Al multiplicar el valor del ocular por el valor del objetivo se obtiene el aumento del tamao del objeto que observamos).

Informe o productos a entregar Trabajo colaborativo y presentacin de informe con las respuestas al cuestionario Rbrica de evaluacin Debe seguir estrictamente las instrucciones dadas en el procedimiento para la prctica y entregar el informe al tutor respectivo. Retroalimentacin El tutor le entregar oportunamente tanto la calificacin como la retroalimentacin sobre logros y errores del informe.

7. FUENTES DOCUMENTALES Curso de biologa. UNAD. Gua de laboratorio de biologa. UNAD.

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PRACTICA No. 03 LA CLULA

Tipo de practica Presencial X Autodirigida Otra Cul Remota

Porcentaje de evaluacin Horas de la practica Temticas de la prctica Intencionalidades formativas

3,5% 2, 20 Propsito(s) Al terminar el laboratorio sobre la clula, el estudiante estar capacitado para: Elaborar montajes de clulas Diferenciar clulas vegetales de clulas animales a travs del microscopio Identificar orgnulos celulares con base en la capacidad de ampliacin del microscopio. Describir las diferentes formas y tamaos de las clulas Determinar la relacin que existe entre estructura y funcin Observar la ciclosis o movimiento del citoplasma Objetivo(s) Describir las diferentes formas y tamaos de las clulas Identificar las diferentes estructuras y organelos que posee una clula, con base en la capacidad de ampliacin del microscopio ptico. Describir las diferentes formas y tamaos de una clula Sealar las diferencias fundamentales entre

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una clula animal y una vegetal Reconocer que una clula puede constituir un organismo. Describir la ciclosis o movimiento del citoplasma

Meta(s) Dominio del procedimiento para observacin celular al microscopio e identificacin precisa de organelos celulares. Competencia(s) Capacidad de manejo procedimental del microscopio para la observacin celular Capacidad de identificar, dibujar y explicar el rol de los organelos celulares observados al microscopio

Fundamentacin Terica
Observar los siguientes videos:
Video: Clula parte 1 http://www.unad.edu.co/curso_biologia/video_celula-1.htm

Vdeo: Clula parte 2 http://www.unad.edu.co/curso_biologia/video_celula_2.htm

Leer del mdulo:

http://www.unad.edu.co/curso_biologia/tcelular.htm http://www.unad.edu.co/curso_biologia/esfunorganeuc.htm http://www.unad.edu.co/curso_biologia/tejorgsist.htm#ancla2

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Descripcin de la prctica Antes de iniciar las prcticas usted debe haber ledo el captulo correspondiente en el curso de biologa, observado los videos de preparacin previa y resuelto las preguntas sobre la observacin de videos y lo que se solicite en cada prctica. Recursos a utilizar en la prctica (Equipos / instrumentos)
MATERIALES QUE DEBEN LLEVAR:

Bata Blanca, Guantes. Papel absorbente, Paos de cocina, Jabn, Lminas y laminillas Tapabocas. Papel y lpiz para tomar apuntes Bulbo de cebolla Allium cepa, Papa, Tomate, Hojas de Elodea, Laminas portaobjetos y Laminillas, Cuchilla o bistur, Pinza, Tijeras pequeas, hisopos
MATERIALES QUE LE SERN SUMINISTRADOS EN EL LABORATORIO:

1 caja de petri, Aguja o asa recta, Algodn, Alcohol, Lancetas, Lugol Solucin salina, Aceto carmn, Azul de metileno, Safranina, Colorante de Wright Microscopio Software a utilizar en la prctica u otro tipo de requerimiento para el desarrollo de la prctica.

Metodologa Observacin de tejido epidermal de cebolla 1. Tome la cebolla y sobre la epidermis de la misma utilizando la cuchilla, haga un corte 2. Levante suavemente con la pinza una capa delgada y transparente de la parte interna, ste es el tejido epidermal. 3. Extindalo sin invertirlo sobre una lmina porta objetos. 4. Coloque una gota de lugol sobre el tejido epidermal. O si prefiere adicione una gota de agua. 5. Deje actuar el colorante lugol durante 5 minutos. 6. Acerque una laminilla, en posicin oblicua, y apoyando una arista sobre la lmina al lado de la gota, djela caer suavemente sobre la gota.

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7. Enseguida proceda a la observacin de la preparacin con pequeo aumento de 10x. Anote sus observaciones 8. A continuacin revise la preparacin con el objetivo de 40x .Anote sus observaciones Observacin de tejido parenquimatoso en un corte transversal de papa: Elabore un montaje para observacin del tejido parenquimatoso en un corte transversal de papa: 1. Tome el bistur y haga un corte transversal de la papa, este corte debe ser tan fino que la apariencia de la porcin que obtenga sea transparente. 2. En una caja de petri con agua, enjuague el corte para sacar el exceso de almidn, contenido en las clulas de los tejidos de la papa. 3. Elabore un montaje hmedo como se indic anteriormente. 4. Observe con el objetivo de 10x. Anote sus observaciones

5. Observe el montaje con el objetivo de 40x Observacin de tejido epidermal y parnquima cloroflico en hoja de Elodea Para observacin de tejido epidermal y parnquima cloroflico utilice una hoja de Elodea , planta acutica comn en lagos y acuarios 1. Tome con la pinza una ramita de Elodea y corte con las tijeras una hojita. 2. Extindala sin invertirla sobre una lmina portaobjetos, adicione una gota de agua y cbrala con una laminilla. 3. Observe detenidamente a travs del microscopio con aumento 10x, 40x Anote sus observaciones 4. Observe el movimiento del citoplasma Observacin de cromoplastos en pulpa de tomate Para continuar realice un montaje con pulpa de tomate e identifique los cromoplastos: 1. Con una hoja de afeitar o bistur, haga una incisin y separe la cscara. 2. Extraiga una pequea porcin de pulpa con el extremo de una aguja y esprzalo sobre un porta objetos seco. No adicione agua.

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3. Coloque encima un cubreobjetos y comprima suavemente con los dedos hasta obtener un completo aplastamiento del fragmento de pulpa de tomate. 4. Identifique las clulas con el objetivo de 10X 5. Seleccione el mejor grupo de clulas y luego pase al objetivo de 40x. Anote sus observaciones Observacin de clulas escamosas epiteliales 1. Coloque una pequea gota de solucin salina en el centro del portaobjetos. 2. Con un palillo raspe suavemente el interior de su mejilla, de abajo hacia arriba. 3. Coloque el producto de este raspado en la gota de solucin salina. 4. Coloree con una gota de acetocarmin, azul de metileno o safranina. 6. Coloque el cubre objetos y observe al microscopio con objetivo de 40x y 100x e identifique las clulas de forma irregular Anote sus observaciones Observacin de clulas sanguneas A continuacin realice un extendido para observacin de clulas sanguneas: 1. Desinfecte con un algodn humedecido en alcohol la punta del dedo anular o ndice, deje secar el alcohol y con la lanceta, haga una puncin en la yema del dedo. 2. Coloque una pequea gota en una lmina portaobjetos limpia y seca. 3. Coloque otra lmina en ngulo agudo sobre la primera, acrquela a la sangre y deslice suavemente en forma continua hasta formar una capa o frotis delgado. 4. Deje secar la preparacin al medio ambiente. 5. Una vez seca la lamina aplique sobre el frotis el colorante de Wright y djelo actuar durante cuatro minutos. Con este procedimiento el colorante fijar la preparacin. 6. Lave el exceso de colorante con agua de la llave y deje secar la lmina verticalmente. 7. Observe al microscopio con el objetivo de pequeo y mediano aumento e identifique los glbulos rojos, leucocitos y plaquetas. 8. Posteriormente observe la preparacin con el objetivo de 100X y detalle la forma de los eritrocitos, plaquetas y neutro filos. Anote sus observaciones Formato de observaciones y datos importantes. Epidermis de Cebolla.

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Dibuje lo que observa y describa cmo son las clulas

10X sin colorante

10 X con colorante

40 X sin colorante

40 x con colorante

Parnquima de papa. Dibuje lo que observa y describa cmo son las clulas

10X sin colorante

10 X con colorante

40 X sin colorante

40 x con colorante

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Epidermis y parnquima de Elodea. Dibuje lo que observa y describa cmo son las clulas

10X

40 X

Cromoplastos en pulpa de tomate. Dibuje lo que observa y describa cmo son las clulas

10X

40 X

Clulas escamosas epiteliales. Dibuje lo que observa y describa cmo son las clulas

40X

100 X

Clulas sanguneas Dibuje lo que observa y describa cmo son las clulas

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40X

100 X

Conclusiones: Deben estar relacionadas con la diferencia entre las clulas epidrmicas vegetales y parenquimatosas vegetales; diferencias entre las clulas animales y vegetales, (forma tamao, distribucin, entre otros)

Sistema de Evaluacin La evaluacin se llevar a cabo por medio de las siguientes actividades 1. Presentacin del pre-informe sobre los laboratorios, el cual incluye las respuestas a las preguntas sobre observacin de videos y las respuestas a los cuestionarios de cada prctica. Los puntos del pre-informe son: Titulo Objetivos Resumen de la informacin terica Esquema o diagrama de flujo en orden riguroso por cada observacin Respuesta a cuestionario que encuentre en la gua de prctica

2. Evaluaciones parciales presenciales al iniciar algunas prcticas 3. Presentacin de informes de prcticas realizadas en el laboratorio, el cual incluye tambin el pre-informe 3. Resolucin de cuestionarios para medir el rendimiento despus de las prcticas

Informe o productos a entregar

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Aspectos mnimos que debe llevar un informe final (que se entregar al tutor tradicional para su calificacin) 1. Titulo 2. Objetivos 3. Resumen de la informacin terica 4. Esquema de pasos para las observaciones en el laboratorio o diagrama de flujo en orden riguroso por cada observacin 5. Respuesta a cuestionario de cada prctica 5. Descripcin detallada de las observaciones 6. Conclusiones 7. Referencias bibliogrficas

Rbrica de evaluacin Informe completo con todos los cuestionarios resueltos = 5.0 Informe con todos los procedimientos seguidos y cuestionario parcialmente resuelto = 3.5 Informe incompleto en procedimientos y en solucin del cuestionario = 2.0 Ausencia de informe = 0.0 Retroalimentacin A cargo del tutor regional

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PRACTICA No. 04 DIVERSIDAD MICROBIANA

Tipo de practica Presencial X Autodirigida Otra Cul Remota

Porcentaje de evaluacin Horas de la practica Temticas de la prctica Intencionalidades formativas

3,5 % 2, 20 Propsito(s) Aprender a identificar microorganismos de las diversas clases taxonmicas. Objetivo(s) Reconocer en placas de cultivo diferentes tipos de microorganismos, en especial Colonias de bacterias y hongos. Conocer y aplicar la tcnica de tincin de Gram Identificar bacterias Gram positivas y Gram negativas Observar microscpicamente bacterias con endosporas (Bacillus) Observar microscpicamente hongos. Observar microscpicamente levaduras. Observar microorganismos de fermentacin cido lctica y fermentacin alcohlica a partir del kumis o yogurt. Observar protozoarios y algas en muestras de agua

Meta(s) Identificacin correcta de los microorganismos observados al seguir las instruciones de la gua de laboratorio. Presentar el informe correspondiente

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Competencia(s) Montar muestras de microorganismos para observarlas al microscopio Reconocer en diferentes habitats y sustrator la diversidad biolgia de microorganismos Realizar frotis fijo con tincin de Gram

Fundamentacin Terica Leer el captulo sobre microorganismos, en el curso virtual de biologa de UNAD http://www.unad.edu.co/curso_biologia/intromicrorg.htm http://www.unad.edu.co/curso_biologia/bacterias.htm http://www.unad.edu.co/curso_biologia/protozoos.htm http://www.unad.edu.co/curso_biologia/algas.htm http://www.unad.edu.co/curso_biologia/hongos.htm Descripcin de la practica A travs de esta prctica el estudiante podr realizar una descripcin macroscpica de las colonias bacterianas y de hongos, de microorganismos como protozoos y micro algas, adems de adquirir destrezas en tcnicas de tincin. Recursos a utilizar en la prctica (Equipos / instrumentos) Material suministrado Cultivos de diversos hongos y bacterias en cajas de petri, Cultivo de Bacillus Levadura de panadera, Solucin salina, Agua destilada Coloracin de Gram (cristal violeta, lugol, alcohol acetona y safranina) Verde de Malaquita, Safranina 0.5%, Lactofenol, Azul de Metileno, Rojo neutro Alcohol o Metanol, Aceite de inmersin, Mechero, Asa recta y de argolla

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Papel de filtro, Tubo de ensayo, Papel de filtro, Tubo de ensayo, Microscopio Varilla de vidrio Material que deben llevar Yogur casero o probitico, Agua estancada , Agua azucarada, Tajada de pan Software a utilizar en la prctica u otro tipo de requerimiento para el desarrollo de la prctica.

Metodologa Entre los principales grupos de microorganismos se encuentran: bacterias, hongos, algas y protozoarios. PROCEDIMIENTO: 1. Observacin macroscpica de colonias; Realice una descripcin macroscpica de las colonias bacterianas y de hongos que le son entregadas en las cajas de petri. Haga un cuadro donde describa la forma (puntiforme, circular, rizoide, irregular y filamentosa), el borde (entero, ondulado o filamentoso), la elevacin (plana, elevada, convexa, crateriforme y acuminada) y la superficie (lisa o rugosa, mate o brillante, seca o cremosa, invasiva o superficial)

Colonia

Forma

Borde

Elevacin

Superficie

COLORACION DE GRAM desarrolle el siguiente diagrama de flujo antes de su ingreso al laboratorio

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A partir de una de las colonias de los cultivos dados realice un frotis de la siguiente manera: 1. Tome una lamina portaobjetos limpia y en ella coloque una gota de solucin salina. 2. Con un asa previamente esterilizada a la llama del mechero, obtenga una pequea muestra de las colonias observadas. Mzclela en la gota de solucin salina que coloco en el portaobjetos. 3. Djela secar al aire libre y fjela pasndola por la llama del mechero. Posteriormente proceda a colorear con la tincin de gram de la siguiente manera: 1. Cubra la preparacin con cristal violeta y djela actuar por 1 minuto. Lave con agua corriente. 2. Cubra la preparacin con lugol y djelo actuar por 1 minuto. Lave con agua corriente. 3. Agregue alcohol acetona y djelo actuar por 5 segundos. Lave con agua corriente. 4. Adicione safranina y djela actuar por 30 segundos. Lave con agua corriente y ponga a secar la lmina. 5. Ubique la lmina en el microscopio, localice las bacterias con el objetivo de menor aumento y observe en detalle a mayor aumento. 6. Identifique las clulas observadas. Anote sus observaciones. OBSERVACION DE ESPORAS desarrolle el siguiente diagrama de flujo antes de su ingreso al laboratorio A partir del cultivo en caja de petri marcado como Bacillus, prepare un extendido del microorganismo. 1. Fije por calor y cubra todo el portaobjetos con una solucin de verde de Malaquita. 2. Caliente hasta emisin de vapores y siga dicho calentamiento durante 3 minutos. 3. Lave con agua y cubra con solucin de safranina. Deje actuar 30 segundos. Lave con agua y deje secar la lmina. 4. Enfoque con el objetivo de inmersin y observe los bacilos y en su interior las esporas ubicadas en un extremo. Anote sus observaciones. BACTERIAS DE LA CAVIDAD BUCAL desarrolle el siguiente diagrama de flujo antes de su ingreso al laboratorio

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1. Prepare una lmina portaobjetos limpia y sin grasa. 2. Tome un escotilln desechable, pselo por el borde de la enca en la parte que hace contacto con los dientes. 3. La muestra extrada con el escotilln colquela sobre una lmina portaobjetos. 4. Deje secar por s sola la lmina durante unos minutos con el fin de definir el frotis. 5. Pase lentamente el portaobjetos a travs de la llama del mechero, con esto se fija el frotis. 6. Deje enfriar y coloree con la tincin de Gram como se indic anteriormente. 7. Deje secar la lmina y ubique las clulas con el objetivo de menor aumento y luego observe con el objetivo de inmersin. 8. Tenga en cuenta que las bacterias Gram positivas toman coloracin violeta y las Gram negativas coloracin roja. Anote sus observaciones. OBSERVACION DE MOHOS Desarrolle el siguiente procedimiento en casa 8 das antes del laboratorio

Prepare una solucin de agua azucarada y agregue 20 gotas de esta a una tajada de pan, djela por espacio de media hora al aire libre.

Almacene en una bolsa plstica cerrada. Gurdela en un lugar oscuro a 30C y obsrvela diariamente.

Selle hermticamente y transporte al laboratorio el da

1. Prepare una solucin de agua azucarada y agregue 20 gotas de esta a una tajada de pan, djela por espacio de media hora al aire libre. 2. Almacnela en una bolsa plstica y cirrela. Gurdela en un lugar oscuro a 30C y obsrvela diariamente. 3. Cuando el pan est enmohecido, coloque en un portaobjetos una pequea gota de

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solucin de lactfenol. 4. Luego con un trozo de cinta adhesiva transparente de aproximadamente 2 cm toque la superficie del pan enmohecido. 5. Pegue la cinta adhesiva sobre la gota del portaobjetos. Elimine el colorante sobrante con un papel de filtro. 6. Observe al microscopio con objetivo de 40X e identifique el micelio y las hifas. El procedimiento anterior tambin puede hacerlo con frutas u hortalizas daadas que presenten en su superficie mohos. Anote sus observaciones. OBSERVACION DE LEVADURAS desarrolle el siguiente diagrama de flujo antes de su ingreso al laboratorio 1. Tome un poco de levadura de panadera y colquela en un tubo de ensayo que contenga agua con azcar. 2. Incube a 37 C durante 15 minutos esto producir el desarrollo de las levaduras. 3. Con una varilla de vidrio tome una gota del cultivo anterior y extindala en el portaobjetos. Deje secar al aire 4. Adicione dos gotas de azul de metileno y deje actuar durante tres minutos 5. Coloque una laminilla y elimine el exceso de colorante con papel de filtro. 6. Observe al microscopio e identifique las levaduras por su forma ovalada. Observe que algunas presentan gemaciones. Anote sus observaciones. BACTERIAS DEL YOGUR desarrolle el siguiente diagrama de flujo antes de su ingreso al laboratorio 1. Tome una lmina portaobjetos y en ella coloque una gota de agua destilada. 2. Con un asa de argolla, obtenga una gota de yogur y mzclela con la gota de agua colocada en el portaobjetos. 3. Deje secar completamente la lmina. Psela 3 veces por la llama del mechero. Tenga cuidado de no sobre calentar la muestra. 4. Cubra la preparacin con alcohol o metanol por unos segundos para eliminar la parte grasa.

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5. Escurra el alcohol y deje secar al aire. Luego cubra el extendido con azul de metileno durante 2 minutos. Lave el exceso de colorante y deje secar. 6. Enfoque el microscopio con el objetivo de mayor aumento e identifique los estreptococos y los lactobacilos. Anote sus observaciones. BACTERIAS DEL SUELO desarrolle el siguiente diagrama de flujo antes de su ingreso al laboratorio 1. Entierre horizontalmente un portaobjetos en la tierra de una maceta o de un jardn, djela all durante 5 das. 2. Transcurrido este tiempo saque la lamina y fjela pasndola tres veces por la llama del mechero. 3. Limpie los bordes del portaobjetos y la parte que no va a teir. 4. Luego coloree la lamina con safranina al 0.5% durante 1 minuto. Lave el exceso de colorante y deje secar. 5. Observe al microscopio con el objetivo de mayor aumento y anote sus observaciones. ALGAS Y PROTOZOOS desarrolle el siguiente diagrama de flujo antes de su ingreso al laboratorio 1. Tome una muestra de agua estancada con un cuentagotas y depostela en el centro de un portaobjetos. Coloque un cubreobjetos. 2. Observe la preparacin al microscopio. Mueva lentamente la preparacin, e identifique las algas y los protozoos. 3. Aada unas gotas de rojo neutro por el borde del cubre para que penetre en la preparacin y puedas ver los microorganismos, que por su transparencia son difciles de observar. 5. Anote sus observaciones. Sistema de Evaluacin La evaluacin se llevar a cabo por medio de las siguientes actividades 1. Presentacin del pre-informe sobre los laboratorios, el cual incluye las respuestas a las preguntas sobre observacin de videos y las respuestas a los cuestionarios de cada prctica.

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2. Evaluacin parcial presencial al iniciar la prctica 3. Presentacin del informe de prcticas realizadas en el laboratorio, el cual incluye tambin el pre-informe 3. Resolucin de cuestionarios para medir el rendimiento despus de las prcticas Informe o productos a entregar Cumplimiento de todos los puntos del informe y la evaluacin = 5.0 Informe completo de los procedimientos de la prctica sin solucin completa del cuestionario = 3.5 Informe incompleto de procedimientos y del cuestionario = 2.0 No presentacin del informe de procedimientos ni del cuestionario = 0.0 Diligenciamiento de los formatos para cada uno de los diagramas: FORMATO #1

bacterias

tincin

Enfoque Enfoque forma 100X 40X

Gran Gram (-) (-)

Observaciones

FORMATO #2

hongos

tincin

Enfoque Enfoque Estructuras nombre 100X 40X

Observaciones

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FORMATO #3

levaduras

tincin

Enfoque 40X

Enfoque 100X

Reproduccin

Observaciones

(Utilice lpices de colores)

Anlisis de resultados conclusiones bibliografa

A cargo del tutor regional

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PRACTICA No. 05 MITOSIS Y MEIOSIS Tipo de practica Presencial X Autodirigida Otra Cul Remota

Porcentaje de evaluacin Horas de la practica Temticas de la prctica Intencionalidades formativas

3,5% 2, 15 Propsito(s) Aprender a diferenciar los periodos del ciclo celular Objetivo(s) Manejar correctamente los materiales y reactivos especficos de la prctica. Identificar cada uno de los periodos que comprende el ciclo celular Relacionar cada cambio presente en las clulas meristemticas, con las diferentes fases de la mitosis. Reconocer los procesos de la meiosis con base en el material suministrado.

Meta(s) Poder explicar el ciclo celular con ilustraciones de observaciones reales al microscopio Competencia(s) Dominio de la observacin celular en sus diferentes ciclos de mitosis y meiosis

Fundamentacin Terica

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Divisin celular contenido del mdulo: http://www.unad.edu.co/curso_biologia/divcelular.htm Videos http://www.unad.edu.co/curso_biologia/video_mitosis1.htm http://www.unad.edu.co/curso_biologia/video_mitosis2.htm Descripcin de la practica El estudiante observar el ciclo celular con ilustraciones de observaciones reales al microscopio Recursos a utilizar en la prctica (Equipos / instrumentos) SE LE SUMINISTRAR: Microscopio , aceite de inmersin, Pipeta Pasteur, Vaso de precipitado , cubeta de diseccin, Aceto orceina, Eosina Metanol, Bistur, micropreparados que ilustran los procesos de mitosis y meiosis Software a utilizar en la prctica u otro tipo de requerimiento para el desarrollo de la prctica.

Metodologa Desarrolle el siguiente diagrama de flujo antes de su ingreso al laboratorio; Coloque la preparacin al microscopio e inicie la observacin con el objetivo de 10x e identifique las clulas, cambie al objetivo de 40X para detallar las clulas. Observe los ncleos y cromosomas en color rosceo morado. Ubique el objetivo de 100 x y anote sus observaciones diferenciando cada uno de los aumentos mencionados. Detenidamente y distinga clulas en interfase, en divisin celular, las diferentes etapas de la mitosis y meiosis, no olvide hacer dibujos de lo observado.

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Para el desarrollo de esta prctica utilice bulbos de cebolla, Allium cepa y realice preparaciones con la raz de material fijado y teido, una vez obtenidos los extendidos de clulas obsrvelos al microscopio ptico. 1. Con ayuda de una pinza retire la capa externa marronacea o roscea y lave con abundante agua, esto se realiza para eliminar restos de sustancias con las que frecuentemente han sido tratadas para inhibir o retardar la germinacin de las raicillas. 2. Llene un vaso de precipitados con agua y coloque un bulbo de cebolla sujeto con dos o tres palillos de manera que la parte inferior quede inmersa en el agua. 3. Pngalo a germinar a 25 C o a temperatura ambien te durante 3 das, al cabo de estos aparecern numerosas raicillas en crecimiento de unos 3 o 4 cm. de longitud. 4. Revise diariamente y procure que la corona no se deseque para lo cual es necesario rellenar con agua cada 24 horas. 5. Cuando las races tengan entre 0.5 y 1 cm de longitud, realice cortes de raz de aproximadamente 2 3 mm a partir del pice. 6. colquelas en una lmina portaobjetos. Adiciona una gota del colorante aceto orceina o eosina. 7. Coloque el cubreobjetos con mucho cuidado sobre la raz. Con ayuda de la punta de una lanceta, de unos golpecitos sobre el cubre objetos sin romperlo, de modo que la raz quede extendida. 8. Use papel de filtro para retirar el exceso de colorante realice una suave presin, evitando que l cubre objetos resbale. Si la preparacin est bien asentada no hay peligro de rotura por mucha presin que se realice. 9. Selle todos los bordes del cubre objetos con esmalte transparente, para evitar que se seque y de esta manera conservar la preparacin durante varios das. 10. Coloque la preparacin al microscopio e inicie la observacin con el objetivo de 10x e identifique las clulas. 11. Cambie al objetivo de 40X para detallar las clulas. Observe los ncleos y cromosomas en color rosceo morado. 12. Ubique el objetivo de 100 x y anote sus observaciones anotando las diferencias en cada uno de los aumentos mencionados.

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13. Trate de observar detenidamente las preparaciones y distinga clulas en interfase y clulas en divisin y dentro de estas, las diferentes etapas de la mitosis Realice dibujos de lo observado. Observaciones Coloque la preparacin al microscopio e inicie la observacin con el objetivo de 10x e identifique las clulas.

Escriba alguna anotacin importante

Cambie al objetivo de 40X para detallar las clulas. Observe los ncleos y cromosomas en color rosceo morado. Dibjelos

Escriba alguna anotacin importante

Ubique el objetivo de 100 x y anote las diferencias en cada uno de los aumentos mencionados. Trate de observar detenidamente las preparaciones y distinga clulas en interfase y clulas en divisin y dentro de estas, las diferentes etapas de la mitosis Realice dibujos de las fases que distinga, tenga en cuenta la posicin de los cromosomas para identificar las fases.

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Conclusiones. REFERIDAS A LOS OBJETIVOS

Sistema de Evaluacin Evaluaciones de los conceptos previos, presentadas nicamente durante el desarrollo de las prcticas Se calificar el informe final con las observaciones solicitadas en esta gua en la metodologa. El Informe Final, entregado al culminar el ltimo encuentro Evaluacin final, sobre todos los conceptos trabajados en las prcticas.

Informe o productos a entregar

PREINFORME Antes de la prctica, cada estudiante debe desarrollar la siguiente consulta bibliogrfica: Defina y explique de manera grafica la mitosis y meiosis, detallando sus etapas y las clulas en las que se presenta este proceso Los grficos y las descripciones de las observaciones pedidas, como parte del informe de la prctica. INFORME En el informe debe incluirse el siguiente cuadro que debe registrar las observaciones realizadas. Dibuje en su formato 2 o 3 de las clulas observadas, sealando en el dibujo a que tipo de tejidos pertenecen e identifique lo siguiente.

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OBJETO OBSERVADO

AUMENTO UTILIZADO

DIBUJO

ANLISIS Y CONCLUSIONES

Responda las siguientes preguntas a. b. c. d. e. Qu etapas de la meiosis y mitosis observo? Qu proceso se esta desarrollando en las etapas observadas? Que tipo de clulas se estn observando? Cuantos cromosomas poseen las clulas en mitosis? Cuntos cromosomas poseen las clulas en meiosis?

Rbrica de evaluacin Cumplimiento de todos los puntos del informe y las evaluaciones= 5.0 Informe completo de los procedimientos de la prctica sin solucin completa del cuestionario = 3.5 Informe incompleto de procedimientos y del cuestionario = 2.0 No presentacin del informe de procedimientos ni del cuestionario = 0.0 Retroalimentacin A cargo del tutor regional

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PRACTICA No. 06 TEJIDOS VEGETALES Tipo de practica Presencial x Autodirigida Otra Cul Remota

Porcentaje de evaluacin Horas de la practica Temticas de la prctica Intencionalidades formativas

3,5% 2, 15 Propsito(s) Esta prctica permite a los estudiantes comprobar la diversidad y especializacin de los tejidos vegetales , adems de adquirir la habilidad para realizar cortes a mano alzada Objetivo(s) Comprobar la diversidad y especializacin de las clulas vegetales y sus agrupaciones en tejidos. Agudizar el sentido de la observacin de las estructuras vegetales, aspecto importante para comprender la morfologa vegetal.

Meta(s) Diferenciar los tipos de tejido vegetal Competencia(s) Adquirir habilidad en la elaboracin de cortes a mano alzada y en coloracin

Fundamentacin Terica

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Mdulo de biologa UNAD en la parte correspondiente a tejidos vegetales. http://www.unad.edu.co/curso_biologia/tejorgsist.htm#ancla2 http://www.unad.edu.co/curso_biologia/video_Tej_vegetales.htm

Descripcin de la practica Esta prctica permite a los estudiantes comprobar la diversidad y especializacin de los tejidos vegetales , adems de adquirir la habilidad para realizar cortes a mano alzada Recursos a utilizar en la prctica (Equipos / instrumentos) Debe llevar: Hoja de lirio, Hoja de olivo, Hoja de Elodea, Rama de hiedra, Bulbo de cebolla Tomate, Papa, Pera, Races de cebolla, Lpiz de madera de cedro Bistur o cuchilla, Pinza, Lminas portaobjetos y Laminillas Se le suministrar: Fluoroglucina, Acido clorhdrico, Verde brillante, microscopio Software a utilizar en la prctica u otro tipo de requerimiento para el desarrollo de la prctica.

Metodologa En esta prctica observe a travs del microscopio la morfologa de los distintos tejidos vegetales. Antes de la prctica, cada estudiante debe desarrollar la siguiente consulta bibliogrfica: 1. Describa los diferentes tipos de tejidos vegetales explicando su funcin. 2. Nombre las diferencias en las plantas vasculares y no vasculares y entre plantas dicotiledneas y monocotiledones

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1. TEJIDO PROTECTOR Desarrolle el siguiente diagrama de flujo antes de su ingreso al laboratorio; 1. Tome una hoja de lirio y con un bistur haga una pequea incisin en el limbo 2. Con ayuda de una pinza levante la capa externa para obtener una lmina fina. 3. Coloque la lmina fina obtenida agua. en el portaobjetos y agregue una gota

4. Enfoque al microscopio con objetivo de 10x y 40x. Identifique los ostiolos y los cloroplastos. Anote sus observaciones. Observe otro ejemplo de tejido epidrmico realizando un montaje con cebolla como se explico en la prctica de la clula. Observe al microscopio con el objetivo de menor aumento e identifique la forma de las clulas epiteliales. Con el objetivo 40X identifique los nucleolos. Otro ejemplo de tejido protector puede observarlo en la hoja de olivo. Raspe el envs de una hoja de olivo. Coloque el raspado en una lmina y adicione una gota de agua. Observe los pelos escamiformes con forma de sombrilla. Anote sus observaciones

TEJIDO PARENQUIMTICO DE ALMACENAMIENTO. Desarrolle el siguiente diagrama de flujo antes de su ingreso al laboratorio Realice un montaje con pulpa de tomate como se explic en la prctica de la clula. Observe al microscopio y anote sus observaciones. Realice un montaje con el raspado de papa como se indico en la prctica de la clula. Observe al microscopio y anote sus observaciones. Realice un montaje con la hoja de Elodea como se indico en prcticas anteriores. Observe al microscopio y anote sus observaciones.

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TEJIDOS MECNICOS O DE SOSTN. Desarrolle el siguiente diagrama de flujo antes de su ingreso al laboratorio

Raspe con un cuchillo o bistur una parte pequea de mesocarpio de pera y colquela en un portaobjetos. Cubra la muestra con fluoroglucina durante 2 minutos. Elimine el exceso y cubra con cido clorhdrico. Coloque una lmina portaobjetos y observe el microscopio con objetivo de 40x. Anote sus observaciones.

TEJIDOS CONDUCTORES Desarrolle el siguiente diagrama de flujo antes de su ingreso al laboratorio Realice un corte longitudinal y fino de un lpiz de madera de cedro. Coloque las virutas en un portaobjetos, adicione agua. Coloque una laminilla y observe al microscopio. Realice finos cortes perpendiculares del pecolo de la hiedra, a la direccin del tallo; mnimo cuatro cortes. Depostelos en una lmina y adicione verde brillante durante 5 minutos. Lave con agua corriente. Cubra la lmina con fluoroglucina durante 2 minutos. Transcurridos los 2 minutos elimine el exceso de colorante. Cubra con cido clorhdrico, coloque un cubreobjetos y observe al microscopio. Anote sus observaciones.

TEJIDO MERISTEMATICO Desarrolle el siguiente diagrama de flujo antes de su ingreso al laboratorio Realice un montaje con la raz de la cebolla como se indico en la prctica de

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mitosis. Observe las clulas que se encuentran en mitosis.

Sistema de Evaluacin Se calificar el informe Informe o productos a entregar INFORME: EN EL INFORME DEBE INCLUIRSE EL SIGUIENTE CUADRO QUE DEBE REGISTRAR LAS OBSERVACIONES REALIZADAS.

OBJETO OBSERVADO

AUMENTO UTILIZADO

DIBUJO

ANLISIS Y CONCLUSIONES

Adems en el informe se deben responder as siguientes preguntas: MATERIAL BIOLGICO: OBSERVACIN DE TEJIDOS Dibuje en su formato 2 o 3 de las clulas observadas, sealando en el dibujo a que tipo de tejidos pertenecen e identifique lo siguiente. Qu forma tiene las clulas observadas? Seale las partes de cada una de las clulas observadas e identifquelas su nombre. Defina claramente la funcin de cada tejido?

Rbrica de evaluacin Cumplimiento de todos los puntos del informe y las evaluaciones= 5.0 Informe completo de los procedimientos de la prctica sin solucin completa del

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cuestionario = 3.5 Informe incompleto de procedimientos y del cuestionario = 2.0 No presentacin del informe de procedimientos ni del cuestionario = 0.0 Retroalimentacin A cargo del tutor regional