ENDOCRINOLOGA Y ADOLESCENCIA: Descifrando la pubertad: nuevos socios, nuevos mecanismos Manuel Tena-Sempere1, 2,3 + Afiliaciones de los autores

1 Departamento de Biologa Celular, Fisiologa e Inmunologa de la Facultad de Medicina de la Universidad de Crdoba, Avenida Menndez Pidal s / n, 14004 Crdoba, Espaa

2CIBER Fisiopatologa de la Obesidad y Nutricin, Instituto de Salud Carlos III, 14004 Crdoba, Espaa y

3Instituto Maimnides de Investigaciones Biomdicas (IMIBIC) / Hospital Universitario Reina Sofa, 14004 Crdoba, Espaa (La correspondencia debe ser dirigida a M Tena-Sempere en el Departamento de Biologa Celular, Fisiologa e Inmunologa de la Facultad de Medicina de la Universidad de Crdoba; Email: fi1tesem@uco.es) Siguiente seccin Abstracto

La pubertad es una fase de desarrollo fascinante que implica la consecucin de la capacidad reproductiva y de la finalizacin de la maduracin sexual y somtica. Como un evento de cambio de vida, inicio de la pubertad se controla con precisin por las vas de regulacin interconectados que son sensibles a numerosas seales endgenas y seales ambientales. Los mecanismos de la pubertad normal y sus posibles desviaciones se han estudiado a fondo en los seres humanos y especies modelo. Sin embargo, la caracterizacin de las bases neurobiolgicas de la pubertad es an incompleta. El progreso en este frente no slo es importante desde un punto de vista fisiolgico, sino que tambin ayudar a desentraar las causas subyacentes de los cambios observados en el momento de la pubertad en los seres humanos, con una tendencia a la aparicin de la pubertad ms temprano, especialmente en las nias. En esta revisin, vamos a dar una visin sinptica de algunos desarrollos recientes en el campo que han profundizado nuestra comprensin de la base neuroendocrina y moleculares para el control de inicio de la pubertad.

Estos incluyen no slo la demostracin de la implicacin del sistema hipotalmico Kiss1 en el control de la pubertad y su modulacin por seales metablicas, sino tambin la identificacin de las funciones de otras vas de neuropptidos y mediadores moleculares en la regulacin de la pubertad. Adems, se analizar brevemente la contribucin potencial de los nuevos mecanismos de regulacin, como la epigentica, en el control central de la pubertad. La caracterizacin de estos nuevos actores y mecanismos de regulacin mejorar nuestra comprensin de las bases de la pubertad normal y sus eventuales modificaciones en varias condiciones patolgicas.

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La pubertad es un fenmeno clave en el desarrollo sexual y la maduracin somtica (1, 2, 3). En la pubertad, se consigue la capacidad de reproduccin y la madurez sexual fenotpica alcanzado. Adems, el crecimiento importante, los cambios de comportamiento, y psicolgicos se producen en la pubertad, lo que permite la adquisicin de un fenotipo adulto completa. El momento de la pubertad es el resultado final de la interaccin entre los determinantes genticos fuertes (4) y un gran nmero de reguladores, que incluyen diversos factores endgenos y seales ambientales, de la disponibilidad de nutrientes a las seales ftica (2). Es de destacar que estas interacciones no estn restringidos a la transicin de la pubertad, pero son ms bien iniciaron en etapas muy tempranas de desarrollo, por lo que la pubertad puede ser considerado como el punto final (y el sensor) de un continuo de maduracin formado por las interacciones dinmicas de los genes y el medio ambiente durante prenatal y el desarrollo postnatal (5). Debido a su importancia en la vida de cualquier persona, la fisiologa de la pubertad y la base de sus eventuales desviaciones se han analizado a fondo en numerosas especies, a travs de diferentes enfoques experimentales y metodolgicos. Sin embargo, a pesar de los considerables avances en el campo, los aspectos esenciales de la pubertad y sus mecanismos subyacentes siguen estando mal definidas.

Desde una perspectiva neurobiolgica, un sello distintivo de inicio de la pubertad es la intensificacin de la actividad neurosecretora de las neuronas GnRH en el cerebro anterior basal, que a su vez activa al mximo el eje gonadotrpica para conducir completa maduracin de las gnadas y la funcin adulto (3, 6). La secrecin episdica de la GnRH, que es obligatorio para la estimulacin adecuada de liberacin de gonadotropina y, por lo tanto, la funcin gonadal, es el resultado de la interaccin entre la naturaleza oscilatoria intrnseca de las neuronas de GnRH y una amplia gama de los aferentes excitatorias e inhibitorias que se integran en el as llamado generador de pulsos de la GnRH (1). En este ltimo, se ha documentado que los cambios de la pubertad en la secrecin pulstil de GnRH son causadas por las modificaciones concertadas en entradas de trans-sinpticas y gliales a la red neuronal de GnRH (1, 3, 6). Dentro de este complejo

circuito, neuronales aferentes a las neuronas GnRH probablemente funcionan como ltimo responsable de la activacin de la pubertad. Mientras que la naturaleza de este tipo de una red de transmisores neuronales se ha dilucidado parcialmente en los ltimos aos, nuestra comprensin de todo el conjunto de seales reguladoras que se proyectan en las neuronas de GnRH, as como de sus efectos y de los principales mecanismos de accin, sigue siendo incompleta. Del mismo modo, los mecanismos moleculares mediante el cual estas seales se integran a nivel de las neuronas GnRH para definir patrones especficos de la secrecin pulstil son an poco conocidos.

Es de destacar, enfoques de la biologa de sistemas han permitido recientemente para identificar conjuntos de genes / protenas que se activan en el momento de la pubertad. Esto ha llevado a la propuesta de que, en lugar de la consecuencia de la accin de un solo disparador (que se ha buscado durante mucho tiempo por generaciones de neuroendocrinlogos), la pubertad es probable que el punto final de la concertada y jerrquica de activacin / inactivacin de las redes de excitacin e inhibicin (3, 6), cuya regulacin temporizada requerira mecanismos de control precisos y multifactico que an no han sido totalmente expuesto. El reconocimiento de tal complejidad, y nuestro an escaso conocimiento de este fenmeno esencial en el curso de la vida de cualquier persona, ha impulsado la investigacin activa, tanto clnica como experimental, en esta rea de la biomedicina.

Como resultado de estas actividades, en los ltimos aos, hemos asistido a una expansin sustancial de nuestro conocimiento de las bases fisiolgicas de la pubertad. Sin duda, un gran avance en el campo lleg a la identificacin de kisspeptins (Kp) como guardianes esenciales de la pubertad, un papel que ha atrado considerable atencin en los ltimos aos (7, 8, 9, 10), y ser discutido en este documento , especialmente a la luz de los acontecimientos recientes que parecen desafiar el dogma de un papel indispensable de kisspeptins en la pubertad. Adems, se prestar atencin en esta revisin para resumir algunos ejemplos ilustrativos de la identificacin de los transmisores centrales adicionales y mecanismos de regulacin (supuestamente) que intervienen en el control de la pubertad y su modulacin por el estado metablico. De este modo, tenemos la intencin de ofrecer un "sabor" de la investigacin activa realizada en esta rea en los ltimos aos, las actividades que sern cruciales para mejorar nuestra comprensin de cmo se controla la pubertad (y eventualmente modificado) en los seres humanos y otros mamferos.

Seccin Seccin anterior Kisspeptins: grandes porteros de la pubertad

Entre los diferentes reguladores trans-sinptica de las neuronas GnRH, Kp han llamado la atencin considerable en los ltimos aos, como guardianes esenciales del inicio de la pubertad y la funcin reproductiva (7, 11, 12). De hecho, la identificacin de Kp es ahora considerado como uno de los grandes avances en la biologa de la reproduccin desde el aislamiento de la parte posterior de GnRH en la dcada de 1970 (7, 11). Como revewed ampliamente en otra parte, kisspeptins, que incluyen Kp-54 y KP-10, son una familia de pptidos estructuralmente relacionados, codificadas por el gen Kiss1, que actan a travs de la protena G-receptor acoplado a GPR54 (tambin denominado KISS1R) (7, 8 , 10). La primera evidencia sobre las funciones reproductivas de kisspeptins y GPR54 se remonta a finales de 2003, cuando la inactivacin de las mutaciones del receptor se han descrito en pacientes con hipogonadismo hipogonadotrpico (HH), una condicin patolgica de impuberism y la infertilidad de origen central (13, 14). Muy recientemente, se ha descrito la primera mutacin de inactivacin del gen KISS1 en los seres humanos con HH (15). Ratones modificados a la falta GPR54 funcional o Kiss1 han demostrado ser una fenocopia de los seres humanos afectados (13). Es importante destacar que los anlisis iniciales de los pacientes y ratones con mutaciones nulas de GPR54 sugirieron que kisspeptins son elementos clave en el control de la secrecin de GnRH (7, 16), una contienda que fue posteriormente corroborada por la demostracin de la expresin de GPR54 en las neuronas GnRH y por el capacidad probada de kisspeptins para activar enrgicamente las neuronas GnRH y la secrecin de GnRH en diferentes especies (7, 11, 12).

Los anlisis detallados han surgido los patrones de distribucin anatmica de las neuronas hipotalmicas Kiss1 con papeles importantes en el control del sistema de la GnRH. Estos patrones han sido bien caracterizados en roedores, donde se han identificado dos poblaciones importantes de neuronas Kiss1: uno situado en el ncleo arqueado (ARC) y el otro en la zona periventricular rostral del tercer ventrculo (RP3V) (7). En otros mamferos, incluidos los primates, un conjunto abundante de las neuronas Kiss1 est presente en la regin de ARC / infundibular, mientras que la existencia de una poblacin equivalente al grupo de RP3V Kiss1 neuronas en roedores es todava en debate (7, 10, 12). A pesar de su capacidad comn de producir kisspeptins, ARC y RP3V Kiss1 neuronas responden de manera diferente a los reguladores clave (por ejemplo, los esteroides sexuales) y parecen desempear papeles muy diferentes en el control de los diversos aspectos de la reproduccin (17). Las caractersticas funcionales y los mecanismos moleculares responsables de la regulacin divergente de Kiss1 neuronas en diferentes sitios hipotalmicos an no se han descifrado.

Una de las facetas del sistema Kiss1 que ha atrado ms atencin es su potencial implicacin en el control de la pubertad (18, 19). Esto fue sugerido por las observaciones originales de ausencia de la pubertad en los seres humanos y ratones con inactivacin gentica de GPR54 (7) y apoyada por los recientes hallazgos de impuberism en humanos con mutaciones nulas de KISS1 (15). Sin embargo, los datos de los modelos de inactivacin congnita de GPR54 o Kiss1 proporcionan poca

informacin sobre los mecanismos por los que kisspeptins participan en el control activacional de la pubertad. Estos mecanismos, sin embargo, han sido parcialmente divulgado recientemente por una combinacin de la expresin y anlisis funcionales, incluyendo los de nuestro grupo, que documenta el complejo patrn de activacin de desarrollo de Kiss1 neuronas a lo largo de la pubertad, que incluye lo siguiente (18, 20): i ) un aumento en el tono kisspectina endgena, suficiente per se para activar completamente el eje de GnRH / gonadotropina; ii) una elevacin en la sensibilidad a los efectos estimulantes de kisspectina en trminos de respuestas de GnRH / LH; iii) una mejora de la eficiencia y la sealizacin de GPR54 resistencia a la desensibilizacin a la estimulacin kisspectina continua, y iv) un aumento en el nmero de neuronas kisspectina y sus proyecciones a las neuronas de GnRH. En concordancia, los estudios de nuestro grupo han demostrado que el bloqueo farmacolgico de GPR54 es capaz de retrasar el inicio de la pubertad, los roedores (19).

A pesar de esta evidencia convincente, algunos aspectos de las funciones de la pubertad kisspeptins siguen siendo oscuros. Por ejemplo, las seales de accionamiento y mecanismos moleculares que subyacen en el programa activacional de Kiss1 neuronas durante la pubertad siguen siendo desconocidos, aunque los estudios en ratones han sugerido que los estrgenos son responsables de la expansin puberal de los Kiss1 poblaciones neuronales (10, 18); si el mismo mecanismo se aplica en los seres humanos an no se ha definido. Por otra parte, un informe reciente desafi a la opinin de consenso para un papel esencial de kisspeptins en el inicio de la pubertad en los roedores, mostrando que la fertilidad se puede alcanzar incluso despus de la ablacin congnita de Kiss1 neuronas en ratones hembra (21). Es de destacar, sin embargo, la eliminacin oportuna de Kiss1 neuronas durante el periodo juvenil temprana se inmut maduracin puberal y la infertilidad inducida (21). Una posible explicacin para estas observaciones desconcertantes es que un conjunto residual de Kiss1 neuronas despus de la ablacin congnita podra ser suficiente para conducir inicio de la pubertad, debido a los mecanismos de compensacin, como se ha sugerido anteriormente para las neuronas de GnRH, as (22). En conjunto, estos resultados ilustran las complejas funciones de desarrollo de Kiss1 neuronas que podran ser compensadas en las etapas de maduracin temprana, pero s son indispensables para los mecanismos que conducen a activacional inicio de la pubertad. De nota, un nmero de anlisis de expresin han sugerido papeles diferenciales para el ARC y RP3V Kiss1 neuronas en el momento de la pubertad, pero la naturaleza de tales acciones diferenciales y sus mecanismos de regulacin eventuales an no se han dilucidado (18, 20). Una recopilacin sinptico de la evidencia de apoyo, los datos que desafan, y las preguntas sobre el papel de Kiss1 vas en el control central de la pubertad abierto se presentan en la Tabla 1.

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Tabla 1 Compilacin sinptica de la evidencia experimental de apoyo, los datos que desafan, y las preguntas sobre el papel de Kiss1 vas en el control central de la pubertad abierto. Para ms detalles, consulte "Kisspeptins: los principales guardianes de la pubertad 'secciones y' medicina traslacional y el control de la pubertad: modelos preclnicos y diferencias de las especies.

Seccin Seccin anterior Socios interactivos de Kiss1: roles de neuroquinina B en el control de la pubertad

Una faceta del sistema Kiss1 que ha atrado considerable inters recientemente ha sido la identificacin de seales de regulacin y socios interactivas de kisspeptins. De hecho, los recientes acontecimientos en la zona se han ampliado nuestros conocimientos sobre cmo se regula la liberacin kisspectina supuestamente y Kiss1 actividad neuronal controlada (23). Los esfuerzos en este frente han permitido la identificacin de los neurotransmisores que se coexpressed con kisspeptins en poblaciones neuronales especficas. Como un ejemplo paradigmtico, la expresin de neuroquinina B (NKB) se ha demostrado en un subconjunto de neuronas Kiss1 en numerosas especies, incluyendo la oveja (24), la cabra, el ratn (25, 26), la rata (27), y el mono (28). La relevancia de traslacin de tales co-expresin, y de las acciones de NKB en el cerebro reproductiva, se ve reforzada por los datos de estudios en humanos que demostraron que las mutaciones de prdida de funcin en los genes que codifican ya sea NKB (TAC3 en los seres humanos) o de su receptor, NK3R (TAC3R en los seres humanos), estn asociados con impuberism y IHH (29, 30, 31), un fenotipo similar a la de GPR54 o nulos Kiss1 los seres humanos (10). Sin embargo, los ratones nulos NK3R parecen mostrar el tiempo normal de la pubertad en hombres y mujeres (32). Para aadir ms complejidad, dinorfina A (Dyn) y NK3R tambin se han encontrado en Kiss1/NKB neuronas que expresan (25); Kiss1/NKB/Dyn colocalizacin es una caracterstica especfica de la ARC / poblacin infundibular de Kiss1 neuronas, que ha sido rebautizado como kndy para enfatizar el uso potencial de estos tres neuropptidos (23).

De acuerdo con el fenotipo de los pacientes con hipogonadismo inactivacin de las mutaciones del sistema NKB, una serie de estudios en ovejas, monos, ratones y ratas han documentado acciones estimulantes del agonista NKB, senktide, sobre la secrecin de LH (28, 33, 34, 35). Es de destacar que los efectos estimulantes de la secrecin de LH senktide fueron derogadas en GPR54 nula ratones, lo que sugiere que estos requieren la integridad de kisspectina sealizacin de manifiesto (35), una afirmacin que tambin es apoyada por los hallazgos recientes en el mono (36). A pesar de estos datos farmacolgicos slidos, la evidencia de respuesta nula o incluso inhibidora a agonistas NKB tambin se ha presentado (37, 38). La base de estas observaciones discrepantes sigue siendo parcialmente desconocida, pero puede deberse a diferencias en la edad, el sexo, las

especies, y los niveles de gonadotropina prevalecientes. En efecto, la evidencia de efectos inhibitorios de senktide sobre la secrecin de LH proviene principalmente de modelos animales con concentraciones de LH pre-elevadas, a saber, la gonadectoma (GNX) sin reemplazo de esteroides sexuales adecuada (37, 38, 39). En este contexto, la prueba de la desensibilizacin de las respuestas inducidas por LH NKB se ha presentado en el mono (28). Esta desensibilizacin podra explicar el efecto nulo o incluso inhibidora de senktide en la secrecin de LH en los roedores GNX y ovejas (25, 33, 34, 37), ya que se espera que tengan pre-elevacin de los niveles endgenos, de NKB. De todos modos, el fenotipo hipogonadotrpico de los seres humanos con mutaciones de inactivacin de la va NKB, junto con los efectos de los agonistas NKB reportados en la liberacin de LH en condiciones fisiolgicas en diferentes especies, slidamente documentar el papel estimulador predominante de NKB en el control central del eje HPG.

Integracin de la neuroanatomical anterior, farmacolgicos, y los datos genmicos ha dado lugar a la propuesta de que las neuronas kndy en el ARC / ncleo infundibular son elementos clave en la unidad neuronal para la generacin de pulsos de GnRH (12). En esta red interconectada, kisspeptins operaran como una seal de salida principal, responsable de la activacin directa de las neuronas GnRH. A su vez, NKB puede actuar sobre las neuronas kndy de sintona fina (sobre todo, estimular) la liberacin kisspectina, por lo tanto, la induccin de la secrecin de GnRH de una manera indirecta. Esta posibilidad es, al menos parcialmente, con el apoyo de un cuerpo slido de evidencia experimental, incluyendo las siguientes observaciones: i) inyeccin central senktide induce la expresin de c-fos en ARC kndy neuronas (34); ii) senktide provoca la secrecin de LH en un GnRH que dependen de forma (28), iii) no se detectan los efectos de liberacin de LH-senktide en ausencia de sealizacin adecuada GPR54 (35), iv) la desensibilizacin a los efectos de la estimulacin NKB continua se lleva a cabo en un nivel aguas arriba de las neuronas de GnRH ( 28); v) la expresin sustancial NK3R se detecta en kndy, pero no en las neuronas de GnRH, en roedores y ovejas (23), y vi) senktide induce la activacin elctrica de las neuronas Kiss1, segn lo revelado por los registros electrofisiolgicos en ratones Kiss1-CreGFP (40 ). Para agregar un mayor refinamiento en el sistema, el tercer socio del tro kndy, Dyn, se ha reconocido desde hace tiempo como un inhibidor de la secrecin de gonadotropinas, probablemente a travs de su capacidad para reprimir la liberacin de kisspeptins en las neuronas GnRH (12). Por lo tanto, el equilibrio y las acciones recprocas de NKB y Dyn seran un determinante importante para la secrecin de la dinmica de kisspeptins y por lo tanto para la generacin de pulstil de GnRH y la secrecin de LH.

Teniendo en cuenta el papel relevante de la sealizacin de NKB en el control central del eje reproductivo, la participacin de NKB en el inicio de la pubertad ha comenzado a ser evaluado recientemente, sin embargo, el nmero de estudios sobre esta rea en particular sigue siendo escasa (39, 41, 42 ). No obstante, nuestros datos sobre ratas inmaduras demuestran que, como adultos, hembras cclicas, las ratas hembras prepuberales son capaces de responder al agonista NKB, senktide, con respuestas robustas de LH (41). Adems, como es el caso en la edad adulta,

durante la pubertad, la expresin de los genes que codifican NKB y NK3R se encuentra en reas hipotalmicas, tales como el ARC, con un papel clave en el control central del eje gonadotrpica. De hecho, la expresin hipotalmica de los ARNm que codifican para los aumentos NKB y NK3R durante la transicin infantil-a-juvenil, mientras que el bloqueo de NKB la sealizacin por el uso de un antagonista especfico induce un retraso modesto pero detectable en el momento de la pubertad (41) . En conjunto, la evidencia disponible sugiere que el sistema de regulacin NKB (auto) de las neuronas kndy, como se describe anteriormente para los animales sexualmente maduros, es operativo y que puedan desempear un papel en la maduracin puberal en los roedores. En efecto, la comparacin de perfiles de expresin de NKB y Kiss1 genes en el hipotlamo de ratas hembra durante el desarrollo postnatal podra sugerir que el aumento de expresin NKB se anticipa a la elevacin de los niveles de mRNA Kiss1, un fenmeno que se ha documentado recientemente en el ratn (43), y cuyas implicaciones funcionales an no se han dilucidado. En el mismo sentido, un papel modulador de NKB sealizacin en la pubertad se ha propuesto muy recientemente en las ovejas hembra (42), en el que aument inmunorreactividad fibra NKB, pero los nmeros no celulares, fue detectado en la post-pberes vs ovejas prepberes. Una cuestin interesante que justifica la investigacin es el dimorfismo sexual potencial en los papeles de NKB en el control de la pubertad, por lo menos en algunas especies, como los datos recientes sugieren que las respuestas de LH a senktide son ms bajos en magnitud en ratas macho frente a hembra antes de la pubertad, y, en contraste con las hembras, se convierten en nulo en ratas macho durante la transicin de la pubertad a la edad adulta (39). Una recopilacin sinptico de los datos clnicos y experimentales que apoyan un papel de las vas de NKB en el control central de la pubertad se presenta en la Tabla 2.

Ver esta tabla: En esta ventana En una nueva ventana Tabla 2 Compilacin sinptica de los datos clnicos y experimentales que apoyan un papel de las vas de NKB en el control central de la pubertad en diversas especies. Para ms detalles, consulte la seccin "socios interactivos de Kiss1: roles de neuroquinina B en el control de la pubertad.

Seccin Seccin anterior El control metablico de la pubertad: la leptina, kisspeptins, y ms all

Entre sus diferentes modificadores, la cantidad de reservas de energa (grasa) y el estado metablico del organismo son reguladores clave de inicio de la pubertad (44, 45). Esto es

especialmente evidente en la hembra, de modo que se necesitan reservas de energa de umbral para proceder a travs de la pubertad como la fertilidad, y especficamente el embarazo y la lactancia se acoplan a un drenaje metablica marcada. No obstante, este fenmeno tambin se produce en los hombres e incluso en situaciones de exceso de energa sostenida, como la obesidad, que tambin pueden estar relacionados con alteraciones pubertad (46). Teniendo en cuenta el aumento de la incidencia mundial de los trastornos de inicio temprano de peso corporal, que van desde la anorexia a la obesidad infantil, y las observaciones preocupantes tendencias alterados para el momento de la pubertad en los distintos pases (47, 48), el anlisis de los mecanismos moleculares y neurohormonal para el control conjunto del metabolismo, la homeostasis de la energa, y comienzo de la pubertad ha cobrado impulso y emocionantes desarrollos han tenido lugar recientemente en este frente.

Como ampliamente revisado en otro lugar, la evidencia clnica y experimental acumulada durante los ltimos 15 aos se ha documentado el papel esencial de la hormona adiposa, leptina, cuyos niveles en circulacin son proporcionales al tamao de las reservas de grasa del cuerpo, en el control metablico de la pubertad y la fertilidad ( 44, 49). Sin embargo, cmo ya travs de qu vas de leptina conductas como funcin biolgica todava no se han resuelto por completo. Sin embargo, la evidencia convincente, procedentes de diferentes especies, incluyendo los seres humanos (46, 50), ha demostrado que, en lugar de un gatillo, la leptina funciona como un factor permisiva que permite la pubertad de proceder si se alcanzan suficientes reservas de energa del cuerpo. En cuanto a los sitios y los mecanismos de accin de la leptina, la situacin es menos clara. Por un lado, se supone que la leptina es capaz de modular en ltima instancia, el sistema neuronal de GnRH (51). Por otra parte, esta accin parece ser llevado a cabo indirectamente, a travs de las fibras aferentes intermedios, como las neuronas de GnRH estn desprovistos de receptores de leptina funcionales, como fue anticipado por los estudios de expresin en roedores y primates (52, 53), y confirmado recientemente por enfoques genmicos funcionales , lo que demuestra que la eliminacin selectiva de los receptores de leptina finalmente expresados en las neuronas de GnRH no abiertamente perjudique la pubertad o la fertilidad (54). Adems, la leptina no lograron inducir la activacin de STAT3, que es el principal efector de las acciones de efectos hipotalmicos de leptina en el hipotlamo, en las neuronas de GnRH. En conjunto, la evidencia disponible sugiere que, en condiciones fisiolgicas, las acciones de regulacin de la leptina sobre la secrecin de GnRH, y por lo tanto en la pubertad, se llevan a cabo a travs de mecanismos indirectos (54).

Reconocimiento de un modo tan indirecta de la accin de la leptina en las neuronas GnRH plante la cuestin de cules son los objetivos principales de la leptina en el cerebro y reproductiva a travs de las vas que son los efectos de la leptina transportada. El reconocimiento inicial de las funciones esenciales de kisspeptins como guardianes del inicio de la pubertad se le solicite anlisis sobre la regulacin metablica de Kiss1 neuronas en general y de los efectos especficos de la leptina en el sistema hipotalmico Kiss1. En el primer caso, la acumulacin de pruebas ha

demostrado que Kiss1 neuronas en el hipotlamo son sensibles a las diferentes formas de estrs metablico y por lo tanto pueden funcionar como conductos para la transmisin de seales metablicas a los centros de control de la pubertad (18, 46). Como un ejemplo, se ha demostrado que las situaciones de balance negativo de energa, tales como el ayuno aguda, para suprimir Kiss1 la expresin de ARNm y el contenido kisspectina en el hipotlamo de ratas pberes (55, 56). Por el contrario, la administracin de kisspectina es suficiente para revertir parcialmente el estado de hypogonadotropism y retrasa la pubertad causada por la desnutricin crnica en ratas hembras prepberes (55). Observaciones similares se han realizado en modelos adultos de estrs metablico (57, 58, 59, 60), donde el tono hipotlamo Kiss1 supuestamente bloqueado y el estado de hipogonadismo rescatado por kisspectina exgena.

En este contexto, el reconocimiento de la expresin del ARNm que codifica el receptor de leptina funcional, LepRb o Ob-Rb, en ARC Kiss1 neuronas en el ratn y ovejas (59, 61), y la demostracin de la capacidad de la leptina, a altas dosis , para aumentar la expresin hipotalmica del gen Kiss1 en diferentes modelos de estrs metablico grave, tales como la leptina deficiente en ratn ob / ob y la rata diabtica, alimentado la hiptesis de que la leptina acta directamente sobre las neuronas Kiss1 para llevar a cabo su estimulador / efectos permisivas en las neuronas GnRH (57, 58, 59). Esta posibilidad fue apoyada adicionalmente por la demostracin de la capacidad de la leptina para mejorar Kiss1 niveles de mRNA en lneas de clulas neuronales (58) y para inducir la activacin elctrica de las neuronas Kiss1 travs de la activacin de los canales de TRPC en el conejillo de indias (62).

A pesar de esta evidencia sugestiva, datos recientes han cuestionado tal modalidad predominantemente directa de la accin de la leptina en Kiss1 neuronas. En primer lugar, la eliminacin selectiva de LEPR en clulas Kiss1 parece ser compatible con groseramente conservado inicio la pubertad y la fertilidad (63). Se observa, sin embargo, que la selectividad de la ablacin LEPR en postnatales Kiss1 neuronas en el hipotlamo puede verse comprometida por el hecho de que el gen Kiss1 se expresa ampliamente en otro cerebro y otros tejidos perifricos en las primeras etapas de desarrollo. Por otra parte, la eliminacin congnita de LEPR en clulas Kiss1 podra haber causado cambios compensatorios que puedan obstruir el impacto de la sealizacin de la leptina en esta poblacin neuronal. No obstante, un estudio independiente mapeo de la distribucin de la LepRb funcional en diversas reas hipotalmicas No se encontr evidencia de su expresin en las neuronas de GnRH o Kiss1, a excepcin de una pequea poblacin de clulas Kiss1 en el arco (64). Es interesante sealar que la poblacin no caracterizado de LepRb que expresan las neuronas ha sido identificado en la ARC y RP3V, en las cercanas de Kiss1 neuronas (64). Por lo tanto, es posible que una parte sustancial de los efectos positivos de la leptina sobre la expresin hipotalmica de Kiss1/kisspeptin se lleva a cabo indirectamente, y se transmite a travs de circuitos intermedios, como todava desconocidos (64).

En el mismo sentido, la evidencia slida ha demostrado que los efectos sobre la reproduccin de la leptina son, al menos en parte, lleva a cabo a travs de acciones primarias fuera de las grandes ncleos Kiss1 que expresa en el hipotlamo. Un ejemplo claro es el premamilar ncleo ventral (PMV), que ha surgido recientemente como un objetivo primordial importancia y la transmisin de nodo para los efectos permisivos de la leptina en las neuronas GnRH (63, 65). Las neuronas en el PMV express LepRb y responden a la estimulacin leptina, mientras que la ablacin de este ncleo derog efectos de leptina en el eje reproductivo. Estas observaciones sugieren la existencia de vas Kiss1-independientes para la transmisin de los efectos de la leptina en las neuronas de GnRH. A pesar de esto, en la cara de los datos slidos que sugieren la regulacin de la expresin Kiss1 por seales metablicas en general y la leptina, en particular, sigue siendo posible que los circuitos PMV y kisspectina pueden interaccin o convergir en algn punto para la transmisin de informacin metablica en el sistema de la GnRH. Una presentacin esquemtica de las vas de transmisin posibles efectos de leptina en las neuronas de GnRH se muestra en la figura. 1.

Ver una versin ms grande: En esta pgina en una nueva ventana Descargar como diapositivas de PowerPoint Figura 1 Representacin esquemtica de los mecanismos potenciales para la transmisin de las acciones de la leptina, producidas por el tejido adiposo blanco (WAT) en proporcin a las reservas de energa del cuerpo, a las neuronas de GnRH en el cerebro anterior basal, como una va de salida importante para el control de aguas abajo del eje gonadotrpica y por lo tanto la aparicin pubertad. Los modos putativo de accin pueden incluir: (1) Las acciones directas de la leptina sobre la Kiss1 neuronas, que a su vez puede proyectar a las neuronas GnRH, (2) las acciones indirectas de la leptina sobre neuronales aferentes proyectan en Kiss1 neuronas, y / o (3) la leptina acciones en hipotlamo (o extra-hipotalmico) ncleos carentes de Kiss1 neuronas. En este ltimo caso, se pone de relieve el caso del ncleo premamilar ventral (PMV). Para la opcin 3, la interaccin con Kiss1 circuitos no se puede descartar y se representa como proyeccin de la lnea de puntos. Para ms detalles, consulte la seccin "Control metablico de la pubertad: la leptina, kisspeptins, y ms all". Acreditacin, barrera sangre-cerebro.

Otros aspectos del control metablico de la pubertad, y los mecanismos y los neurotransmisores implicados, tambin han atrado el inters y la atencin en los ltimos aos. Por ejemplo, los mediadores moleculares centrales para este fenmeno permanecen escasamente caracterizados. Los esfuerzos en este frente han incluido la identificacin de las funciones del sensor de energa

celular, mamferos objetivo de rapamicina (mTOR), en la mediacin de los efectos de la leptina en la regulacin del metabolismo de la pubertad. Las funciones fisiolgicas de la mTOR en el control de la homeostasis de la energa celular y la ingesta de alimentos han sido ampliamente revisados en otro lugar (20). Los estudios experimentales en ratas hembras pberes han sugerido que, adems, el centro de la sealizacin de mTOR puede jugar un papel relevante en el control de la pubertad, como se demuestra por el hecho de que el bloqueo crnico de mTOR por inyeccin central de la rapamicina marcadamente alterado el inicio de la pubertad, documentado por la abertura vaginal retardada, la reduccin de tero y de ovario pesos, y perturbado la maduracin folicular y anovulacin (66). En buen acuerdo, la inactivacin central de mTOR tambin contrarrest el efecto permisiva / estimulador de la leptina sobre la progresin de la pubertad, por lo que el rescate de inicio de la pubertad inducida por la inyeccin de leptina a ratas hembras pberes sometidos a la desnutricin fue bloqueada por la coadministracin central del inhibidor de mTOR , rapamicina (66). Desde un punto de vista mecanstico, el impacto del bloqueo de mTOR en inicio de la pubertad y la funcin reproductiva est mediada, al menos en parte, por la inhibicin de circuitos kisspectina centrales, como la rapamicina era capaz de suprimir Kiss1 niveles de mRNA en ncleos hipotalmicos clave, tales como el ARC ( 66). En conjunto, estas observaciones sugieren la existencia de una va de la leptina-mTOR-kisspectina que participar en la regulacin del metabolismo de la pubertad (20). Es de destacar que la neuroanatoma de una va como an no se ha dilucidado. De hecho, estudios recientes revelaron que el blanco aguas abajo de la mTOR, PS6, al parecer, no se expresa en neuronas Kiss1 (67), por lo tanto, reforzando la vista de un modo indirecto de accin predominante de las seales de leptina / mTOR en vas kisspectina.

Otras reas de inters en el control metablico de la pubertad son la identificacin de las influencias tempranas y transmisores adicionales que ello suponga. En el primer caso, la posibilidad de que las primeras formas de estrs metablico pueden tener una influencia duradera en el momento de la pubertad es atractiva luz de la creciente incidencia de la obesidad infantil y las tendencias para el avance de la edad de la pubertad en los seres humanos, un fenmeno que probablemente perjudicial para la despus la salud y la vida (metablica y cardiovascular) Esperanza (68). En este contexto, nuestros estudios en modelos de posnatal bajo-y el exceso de nutricin en ratas hembra han documentado que las ratas con alimentacin restringida durante la lactancia son ms delgados durante la transicin puberal y se muestra retrasado abertura de la vagina en el momento de la pubertad, a pesar de que se les permiti comer ad libitum desde el destete en adelante. En contraste, sobrealimentado ratas hembra durante la lactancia debido a la cra en camadas pequeas mostraron la entrada anterior a la pubertad (69). En ambos extremos, haba una estrecha correlacin entre el peso corporal, los niveles circulantes de leptina Kiss1/kisspeptin, e hipotalmica, por lo que los animales ms magros tenan bajos niveles sricos de leptina y la reduccin de la expresin Kiss1 y nmeros de neuronas kisspectina-positivos en el hipotlamo, mientras ms pesado ratas tenan las concentraciones de leptina ms altos y el aumento de los niveles de mRNA Kiss1 y fibras kisspectina-positivas en el RP3V inmediatamente

antes de la pubertad (69). Los datos recientes han confirmado nuestras observaciones anteriores (rata) en ratones hembras sometidas a la desnutricin postnatal (70). Por otra parte, los estudios en modelos de estrs metablico en animales pberes han revelado recientemente que el sistema de NKB hipotlamo tambin es sensible a las condiciones de equilibrio energtico negativo, de modo que el ayuno aguda no slo suprimi Kiss1 la expresin del ARNm en el ARC y RP3V sino tambin inhibido expresin hipotalmica de los genes que codifican NKB y NK3R en ratas hembras pberes (41). Es importante destacar que, el retraso de la pubertad causada por la desnutricin fue parcialmente impedido por la administracin de un agonista de NKB, apoyando as que la sealizacin de NKB pueden cooperar con kisspeptins en el control metablico de la pubertad (41). Como apoyo adicional para la sensibilidad de las vas de NKB a la regulacin metablica durante la pubertad, se ha demostrado recientemente que la alimentacin en una dieta alta en grasas a ratas hembra desde el destete precoz causada inicio la pubertad y el aumento de la expresin del gen que codifica la NKB, as como Kiss1 , en el arco (71).

Seccin Seccin anterior Nesfatin-1: jugador novel en el control metablico de la pubertad

Como se ha revisado en las secciones anteriores, diferentes estudios han permitido la identificacin de leptina, kisspeptins, y NKB como reguladores esenciales de la pubertad. Sin embargo, como se destaca en esta revisin en otra parte, el trabajo experimental en diferentes especies ha definido tambin la importante contribucin de otros transmisores y hormonas perifricas centrales, tales como el glutamato, GABA, y la grelina (slo para nombrar slo unos pocos ejemplos) en el control fisiolgico de inicio de la pubertad (72, 73). Una reciente adicin a la creciente lista de moduladores pubertad es nesfatin-1, segn lo revelado por los datos recientes sobre las ratas hembras pberes (74, 75). Las principales caractersticas de este neuropptido como un regulador putativo del momento de la pubertad en la hembra se resumen a continuacin y sinpticamente presentan en la Tabla 3.

Ver esta tabla: En esta ventana En una nueva ventana Tabla 3 Compilacin sinptica de los datos experimentales que apoyan un papel de nesfatin-1 en el control central de la pubertad. Tenga en cuenta que la evidencia experimental se resumen a continuacin se ha obtenido en ratas. Para ms detalles, consulte la seccin "nesfatin-1: novela jugador en el control metablico de la pubertad y de referencias (74, 75).

Nesfatin-1 es uno de los productos peptdicos de la NUCB2 gen, con la capacidad para llevar a cabo efectos anorexgenos que actan a nivel central (hipotlamo) (75). El inters en las acciones metablicas de esta molcula se ve reforzada por la demostracin de su expresin en reas hipotalmicas con papeles clave en el control de la ingesta de alimentos, tales como el ARC, el ncleo paraventricular (PVN), y el hipotlamo lateral (LHA), y el hecho de que los efectos anorexgenos de nesfatin-1 parecen ser independientes de la sealizacin de la leptina (75). Teniendo en cuenta que la obesidad est ligada con frecuencia a la resistencia a la leptina, la identificacin de seales con capacidad de conservado para suprimir la alimentacin a pesar de desensibilizacin a los efectos de saciedad de la leptina ejerce un inters considerable no slo a partir de una fisiolgica, sino tambin desde un punto de vista farmacolgico. Teniendo en cuenta la estrecha asociacin entre los mecanismos reguladores centrales de equilibrio y la energa de la pubertad, y la posibilidad de las vas de leptina independientes de modulacin de inicio la pubertad, exploramos la posibilidad de que nesfatin-1 podra desempear un papel en el control central de la pubertad.

Los estudios preclnicos llevados a cabo por nuestro grupo han apoyado esta hiptesis. NUCB2/nesfatin-1 expresin hipotalmica aument durante la transicin puberal, con un aumento significativo de sus niveles de mRNA en el LHA, PVN, y el ncleo supraptico, y un aumento del triple de su contenido total de protenas (74). Adems, las condiciones de balance energtico negativo sabe que perturban la pubertad, como la sub-nutricin crnica o aguda ayuno, disminucin hipotlamo NUCB2 mRNA y los niveles de protena en las hembras pberes (74). En conjunto, estos datos sugieren que durante la pubertad, la expresin hipotalmica de NUCB2/nesfatin-1 se somete a la regulacin del desarrollo y metablicos precisa.

La relevancia de nesfatin-1 de sealizacin en el inicio de la pubertad se ve apoyada por los anlisis funcionales de los efectos de su activacin o inactivacin. En este sentido, el centro de la inyeccin de dosis bajas de nesfatin-1 evoc un aumento moderado pero significativo en los niveles sricos de LH en peripuberal hembra ratas alimentadas ad libitum. Curiosamente, gonadotropina respuestas a nesfatin-1 se increment sustancialmente en condiciones de ayuno a corto plazo, a pesar de la disminucin significativa en los niveles de gonadotropina predominantes y de la expresin hipotalmica de NUCB2/nesfatin-1 (74). Por otra parte, se han detectado mayores respuestas de LH en ratas machos y hembras pberes despus de la infusin de dosis ms altas nesfatin-1 (Navarro, Ruiz-Pino y Tena-Sempere, observaciones no publicadas). En buen acuerdo, la supresin del tono endgeno de nesfatin-1 en el hipotlamo durante la transicin puberal, utilizando un oligonucletido antisentido morfolino (como-lun) contra NUCB2, deteriora la sincronizacin normal de la pubertad, como se evidencia por un retraso en la abertura de la vagina y la reduccin de los niveles de LH y pesos ovricos. La posibilidad de que tales cambios reproductivos podran ser debido a un impacto metablica primaria del tratamiento como-lun se

puede descartar como, a pesar de la sustancial disminucin en el contenido de protena NUCB2 en el hipotlamo, este tratamiento no modific el aumento de peso corporal o diaria la ingesta de alimentos durante la pubertad (74).

Si, adems de su papel puberal, nesfatin-1 de sealizacin est implicada en el control del eje gonadotrpica en la edad adulta an no se ha definido. Los anlisis iniciales no encontraron respuestas a la inyeccin de gonadotropina central de dosis bajas de nesfatin-1 en ratas hembras adultas. En el mismo sentido, i.c.v. infusin de como-lun contra NUCB2 no afect a la oleadas de LH y FSH en ratas hembra adultas, cclicos (74) preovulatorio. Estas observaciones apuntan a cabo una accin preferencial de nesfatin-1 en el control del eje gonadotrpica en la pubertad. Sin embargo, los datos preliminares recientes indican que, a dosis ms altas, nesfatin-1 puede estimular la secrecin de LH en ratas macho adultas (76) y ratones (Navarro, Ruiz-Pino y TenaSempere, observaciones no publicadas). Esto sugerira que el eje gonadotropic adulto tambin puede responder a los efectos estimulantes de nesfatin-1, aunque la sensibilidad es probablemente menor en la edad adulta. En cualquier caso, las caractersticas de nesfatin-1 resumidos califican a principios de este factor de novela como un putativo regulador metablico de la pubertad y la funcin gonadotrpica (75). De acuerdo con este punto de vista, nuestros datos preliminares sugieren que el bloqueo de endgeno nesfatin-1 tono, por el uso de como-lun contra NUCB2, induce una disminucin modesta, pero significativa en Kiss1 la expresin gnica en el arco, mientras que la ausencia de GPR54 sealizacin abroga LH respuestas a nesfatin-1 (Navarro, RuizPino y Tena-Sempere, observaciones no publicadas). Mientras que la neuroanatoma para un putativo va de tales nesfatin-Kiss1 an no se ha desenredado, estos datos iniciales sugieren la convergencia de nesfatin-1 y la sealizacin kisspectina en la central de control de la pubertad y el eje gonadotrpica.

Seccin Seccin anterior Nuevos mecanismos en el control de la pubertad: funciones de la epigentica y microRNAs

La naturaleza compleja de la pubertad, como un evento complejo del desarrollo sensibles a numerosas seales reguladoras, hace defendible que su tiempo no se basa nicamente en el control de la transcripcin de mltiples vas (como los que se resumen en las secciones anteriores), pero tambin puede depender de elementos reguladores adicionales, tales como la epigentica y microRNAs (miRNAs). Mientras que la caracterizacin de las funciones fisiolgicas de estos mecanismos alternativos / complementarios se encuentra todava en su infancia, su potencial implicacin en la pubertad mamferos es atractiva, tal como se define sobre la base de los datos preliminares (vase ms adelante) y conceptualmente desafiantes, ya que estos

mecanismos, que no tenan ha relacionado con la pubertad hasta hace poco, podra haber escapado de la endocrina convencional / anlisis moleculares.

Partiendo de la hiptesis de que el momento de la pubertad en la poblacin general es la consecuencia de la interaccin concertada de los conjuntos de genes, se han dedicado esfuerzos recientemente para identificar nuevos genes / caminos candidatos en el control del inicio de la pubertad a travs de todo el genoma de asociacin estudios (GWAS) (4). Aunque un estudio inicial report una asociacin con el locus SPOCK que no se ha replicado (77), cuatro artculos independientes publicados mayo 2009 identificaron una asociacin de la edad de la menarquia (AAM) a la variabilidad en 6q21, en o cerca del gen Lin28B ( 78, 79, 80, 81). La robustez de esta conclusin se ve reforzada por su reciente confirmacin en un metanlisis extensa (82), y el hecho de que Lin28B tambin haba sido relacionada con el desarrollo del pecho y la altura adulta. Lin28B, y la Lin28A relacionados, son protenas de unin a ARN cuya funcin conocida es importante para bloquear el procesamiento de miRNAs de la familia let7, a travs de la inhibicin de la maduracin de precursores let7 (83, 84). Mientras que algunos de los GWAS anteriores detectaron otras asociaciones potenciales, el anlisis de los roles de la pubertad de los factores Lin28B y afines es especialmente atractivo dadas las caractersticas funcionales de Lin28B (potenciales relacin con AAM, el desarrollo del pecho y la altura) y su implicacin en la supuesta regulacin de miRNAs. En buen acuerdo, la sobre expresin de la Lin28A relacionada Recientemente se ha demostrado para retrasar la pubertad en ratones (85), entre otras caractersticas fenotpicas.

Las observaciones anteriores fueron los primeros en sealar la posibilidad de que los miRNAs de la familia let7 (o eventualmente otros miRNAs) pueden contribuir al control de la pubertad en los seres humanos y otras especies de mamferos. La familia de let7 abarca un grupo de miRNAs estrechamente relacionados, codificada por diferentes grupos (cuatro en los seres humanos), cuya maduracin se encuentra bajo el control de los factores relacionados con Lin28B y otros, tales como myc (83, 84, 86, 87). A su vez, let7 miRNAs participan en la regulacin de la expresin Lin28B, que tambin est supuestamente controlado por otros miRNAs, como miR-132 y miR-145 (como se predijo por los algoritmos bioinformticas), y myc en s. Antes de que los GWAS indicado anteriormente (78, 79, 80, 81), no se haban sospechado los roles potenciales de let7 miRNAs y factores relacionados en el control de la pubertad y otras funciones neuroendocrinas. Por el contrario, let7 miRNAs fueron inicialmente catalogados como putativos supresores de tumores (88). Curiosamente, los genes supresores de tumores han sido implicados en el control transcripcional de la pubertad, con un aumento detectable en su expresin en el momento de la pubertad (89). Si let7 miRNAs encajan en esta categora queda por esclarecer.

Aunque el papel potencial de la Lin28B/let7 tndem en la central de control de inicio de la pubertad an no se ha definido, los datos preliminares de los anlisis de expresin sugieren fuertemente que esta es una posibilidad defendible. Por lo tanto, hemos detectado expresin robusta de Lin28B, as como de la Lin28A relacionada, mRNA en el hipotlamo de roedores, donde sus niveles relativos muestran una marcada disminucin de la neonatal para el perodo puberal (SANGIAO-Alvarello, Manfedi-Lozano y Tena-Sempere , presentado); esta tendencia parece ser especfica para el hipotlamo, ya que no se detect en la corteza cerebral. Adems, hemos encontrado expresin de let7a y let7b en hipotlamo de rata, con una relacin inversa con los niveles de mRNA Lin28B, por lo que se detecta un aumento significativo en los niveles relativos de let7 miRNAs en el hipotlamo de ratas macho y hembra a lo largo de la maduracin postnatal / puberal . Aunque estas observaciones deben ampliarse, hacen hincapi en el inters de la expresin especfica y los anlisis funcionales de hipotalmicas let7 miRNAs y sus protenas de unin, Lin28A y Lin28B, como reguladores putativos de la pubertad.

Adems de miRNAs, la evidencia preliminar es el montaje que la regulacin de los componentes clave de las vas centrales que rigen inicio de la pubertad tambin puede involucrar mecanismos epigenticos. Conceptualmente, la epigentica, que se define como la informacin heredable que no est codificada por la mera secuencia de nucletidos de un gen dado (90), est muy bien adecuado para una funcin biolgica tan complejo, ya que los cambios epigenticos pueden participar en ambas modificaciones de desarrollo a largo plazo inducidos por interacciones entre genes y medio ambiente, as como en los rpidos cambios de vas especficas, como las que se ven en el momento de la pubertad (3). En efecto, la epigentica se ha demostrado para participar en el control de varias funciones neurobiolgicos (3) y, sin embargo, poca atencin se ha prestado hasta la fecha para sus posibles funciones en la pubertad de mamfero.

Entre los diferentes mecanismos de control epigentico de la expresin gnica, la metilacin del ADN y las modificaciones de las histonas se encuentran entre los mejor caracterizados y los ms relevantes (90, 91, 92). La incorporacin de grupos metilo a las islas CpG es la nica forma de modificacin epigentica del ADN, que es catalizada por una familia de metiltransferasas de ADN (DNMT). Mientras DNMT1 es responsable de la metilacin basal, la metilacin de novo depende principalmente DNMT3A y DNMT3B. Metilacin del ADN es una marca general de la represin de genes; los efectores de tal efecto inhibidor en la transcripcin son una familia de protenas de unin a metil-CpG (90, 91). En contraste, se ha demostrado que los cambios epigenticos en las histonas para involucrar a una diversidad de posibles modificaciones post-traduccionales, incluyendo acetilacin, metilacin, fosforilacin y (92). El estado de acetilacin de las histonas est controlada por la accin concertada de transferasas y desacetilasas (HDAC), acetilacin de la histona acetil siendo generalmente una seal de activacin de la transcripcin (92). Metilacin de histona es provocada por diferentes metiltransferasas (HMT), la consecuencia biolgica siendo la represin o la activacin en funcin de la histona y el residuo se someti a metilacin (92). Por

otra parte, el resultado final en la regulacin transcripcional depende de la combinacin de los cambios epigenticos (por ejemplo, la metilacin de ADN ms acetilacin de histonas y la metilacin), proporcionando as un mayor grado de complejidad de este sistema de regulacin.

Como se ha indicado en las secciones anteriores, la pubertad es el punto final de un proceso continuo de maduracin que comienza durante la diferenciacin sexual del cerebro, que es accionado por los esteroides sexuales que actan durante ventanas crticas de desarrollo (93). La evidencia de un papel de la epigentica en el control de la diferenciacin sexual de los ncleos especficos ha sido presentado recientemente. Por lo tanto, el tratamiento neonatal con inhibidores de HDAC era capaz de evitar la masculinizacin de la cama ncleo de la estra terminal (94). La posibilidad de control epigentico de la diferenciacin sexual del cerebro es tremendamente atractivo, como los cambios en el epigenoma de las poblaciones neuronales especficas pueden contribuir a los efectos a largo plazo, la organizacin que participan en este fenmeno. Sin embargo, sus consecuencias funcionales para la posterior momento de la pubertad siguen siendo desconocidos. Sin embargo, nuestros estudios preliminares relacionados con la administracin de inhibidores de cualquiera de desacetilacin de histonas y la metilacin del ADN durante el perodo crtico de diferenciacin sexual del cerebro han revelado un impacto discernible de estas alteraciones epigenticas en el momento de la pubertad (Len, Castellano y Tena-Sempere, sin publicar). Sin embargo, la magnitud y los ltimos mecanismos para tales alteraciones, as como los posibles efectos sobre otros sistemas (por ejemplo, relacionados con el crecimiento y la homeostasis de la energa), esperan una caracterizacin adicional.

Adems de los cambios de desarrollo tempranos, modificaciones epigenticas tambin pueden contribuir al control de transitorios, los cambios dinmicos en las vas que regulan neuroendocrinos inicio de la pubertad. Esta posibilidad ha comenzado a ser probado recientemente. Por lo tanto, los estudios pioneros por Ojeda et al. (3), han puesto de manifiesto que los cambios profundos en los patrones de metilacin del ADN se realizan en el hipotlamo durante la pubertad. Por otra parte, el bloqueo farmacolgico de la metilacin del ADN o la desacetilacin de histonas en las ratas hembra jvenes se ha demostrado retrasar el momento de la pubertad (3). Aproximadamente resultados similares han sido obtenidos por nuestro grupo en los anlisis fenotpicos y hormonales iniciales de los modelos de rata de la manipulacin farmacolgica central de la metilacin (por ejemplo, tratamiento con 5'-AZA; inhibidor de DNMT) o desacetilacin (por ejemplo, tratamiento con cido valproico; bloqueador de HDAC) durante la transicin puberal; sin embargo, la magnitud de algunos de los efectos fue modesto (Len, Castellano y Tena-Sempere, no publicado). En conjunto, estos estudios sugieren fuertemente que la perturbacin de las modificaciones epigenticas del ADN / histonas tiene un impacto grave en el momento de la pubertad. Curiosamente, a pesar de las manipulaciones anteriores (inhibicin de la metilacin del ADN o el bloqueo de desacetilacin) preferentemente deben resultar en la activacin de genes, debido a la eliminacin de las marcas epigenticos asociados con el

silenciamiento, el resultado final observado en estos experimentos era un retraso en el inicio de la pubertad. Por lo tanto, se ha planteado la hiptesis de que, en condiciones fisiolgicas, los cambios epigenticos podran operar para inhibir la expresin de los genes de la pubertadrepresor en el hipotlamo (3), cuya identidad y objetivos finales an no se han aclarado completamente. En este contexto, y teniendo en cuenta su perfil biolgico, una tentadora posibilidad es que el gen Kiss1 est bajo la regulacin epigentica. Mientras que la evidencia de este fenmeno no se ha publicado hasta ahora en relacin con la pubertad, las observaciones recientes sugieren que la metilacin diferencial del gen Kiss1 podra contribuir al dimorfismo sexual en los niveles de expresin de Kiss1 del RP3V (95), mientras que los estrgenos los cambios inducidos en la acetilacin de histonas en el promotor Kiss1 en este ncleo pueden desempear un papel en la respuesta positiva responsable de la generacin del pico preovulatorio (96). Estos resultados abren el camino para los anlisis especficos sobre los cambios de las marcas epigenticas en el gen Kiss1 en la ARC y RP3V durante la transicin de la pubertad y para la evaluacin de las consecuencias funcionales de las diversas manipulaciones epigenticos en la expresin de la pubertad Kiss1.

Seccin Seccin anterior Medicina traslacional y el control de la pubertad: modelos preclnicos y diferencias de especies

Como se describe en los apartados anteriores, los mecanismos que rigen la pubertad aparicin han sido objeto de investigacin activa en los ltimos aos. Por razones ticas obvias y experimentales, estos anlisis se han llevado a cabo principalmente en modelos preclnicos adecuados, roedores, principalmente de tipo salvaje y modificados genticamente. Esto plantea la cuestin de la pertinencia de traslacin de algunos de los hallazgos realizados en dichas especies, especialmente en lo que se refiere a la pubertad, por lo que, a pesar de similitudes importantes, tambin se han identificado diferencias en trminos de los perfiles hormonales y mecanismos neuroendocrinos entre los primates y no primates especies (1, 97, 98). Por ejemplo, los perfiles de secrecin de gonadotropinas durante los periodos infantil y juvenil de la maduracin postnatal difieren entre las especies, y slo los primates muestran un perodo de reposo prolongado en la infancia, cuando los niveles de gonadotropina permanecen persistentemente baja (99). Sin embargo, a pesar de estas particularidades, tambin hay una fuerte evidencia de la existencia de mecanismos neuroendocrinos comunes para el control de la pubertad tanto en primates y roedores, lo que justifica el uso de modelos preclnicos de los estudios experimentales sobre la pubertad. Un ejemplo ilustrativo en este frente es el sistema Kiss1, cuyo papel en el inicio de la pubertad se ha documentado su mayor parte por los estudios preclnicos (principalmente roedores) modelos, pero que, sin embargo, parece desempear tambin un papel importante en el control de los primates (y humanos) la pubertad. Una breve resea de los aspectos comunes y las especificidades de Kiss1 papel en el control de primate pubertad se presenta a continuacin, como

un medio para ilustrar las ventajas y limitaciones potenciales de los estudios preclnicos publicados en esta rea.

Como se ha indicado anteriormente en esta revisin, los datos genticos sugieren que la sealizacin kisspectina es indispensable para lograr la maduracin puberal completo en los seres humanos. Este papel ha sido justificada por la expresin convincente y datos funcionales obtenidos en primates que apoyan la importante contribucin de Kiss1 vas en la pubertad. Por lo tanto, hipotalmico Kiss1 la expresin de ARNm se ha demostrado que aumenta durante la maduracin puberal en monos (100), un perodo en el que hay un aumento en la liberacin pulstil de kisspectina-54 en la eminencia media de esta especie, que se correlaciona estrechamente con la mejora de la frecuencia de pulsos de la GnRH durante esta edad (101). Por otra parte, las inyecciones repetidas de kisspectina-10 a los monos al final de la fase juvenil evoc un patrn de las descargas de GnRH similar a la observada en la pubertad (102), mientras que el antagonismo kisspectina suprime la secrecin de GnRH en monos prepberes y puberal (103). En conjunto, estos datos estn en buen acuerdo con observaciones similares en las especies no primates, principalmente roedores y ovejas, y son compatibles con un importante papel activacional de kisspectina sealizacin en el control de la pubertad primate. De nota, anlisis recientes han iniciado el estudio de las bases moleculares de la activacin kisspectina en la pubertad en seres humanos, y un nmero de factores de transcripcin con papeles probados en la pubertad de mamfero (como se evidencia por una combinacin de roedor anterior y los estudios de primates), tales como TTF1 , CUX1, YY1, y EAP1, han demostrado que se unen a la KISS1 promotor humano y para regular la actividad transcripcional KISS1 (104).

A pesar de las similitudes ms arriba, los datos de estudios de primates tambin han puesto de relieve las divergencias potenciales con los roedores y otras especies preclnicos. Por ejemplo, mientras que la mayora de los estudios con roedores en los cambios de Kiss1 neuronas durante la maduracin puberal se han centrado en el papel de la poblacin RP3V, aumentos constantes en el Kiss1 la expresin de genes se han documentado en el hipotlamo medio-basal de monos durante la pubertad, lo que sugiere por lo tanto una llave papel de la ARC Kiss1 neuronas en primates pubertad (100). Del mismo modo, los mecanismos que regulan la activacin puberal de Kiss1 neuronas pueden diferir parcialmente entre los primates y los roedores. Por ejemplo, un estudio reciente en monos sugiere que Kiss1 neuronas estn bajo el control inhibidor de las vas de GABA antes de la pubertad y que es causado su activacin puberal, al menos parcialmente, por una disminucin en el tono GABArgico (105). Sin embargo, no hay evidencia hasta ahora publicado, lo que sugiere una accin inhibidora de GABA en las neuronas Kiss1 en roedores. En el mismo sentido, estudios con ratones han sugerido que la ampliacin puberal de Kiss1 poblacin de neuronas en el RP3V requiere la unidad de algn grado de entrada estrognica (106, 107), sin embargo, es posible que un fenmeno similar no es fisiolgicamente relevante en primates , donde la activacin del eje gonadotrpica durante la pubertad puede ocurrir en gran medida de

una manera independiente-gonadal (99, 108). En cualquier caso, mientras que el estrs de estos datos la necesidad de actuar con cautela al extrapolar directamente los resultados de una especie a otra, los estudios sobre el papel de la pubertad kisspeptins resumen a continuacin ilustran claramente la validez y el poder de los anlisis mecnicos en modelos preclnicos, como medio para dar a conocer las bases de los fenmenos neuroendocrinos complejos, como la pubertad.

Seccin Seccin anterior Observaciones finales

En un perodo de maduracin fascinante de la vida, el estudio de la pubertad ha atrado la atencin de los cientficos durante siglos. Tenemos que reconocer humildemente que nuestro conocimiento de las seales y los mecanismos neurohormonales responsables del control de la pubertad, en general, y por su modulacin por seales metablicas, en particular, sigue siendo muy incompleta. Hay que reconocer, sin embargo, que los acontecimientos importantes han tenido lugar en este frente durante los ltimos aos. La presente revisin no pretende dar una visin general de todos los grandes descubrimientos, cuya cobertura en profundidad excede claramente los lmites y el alcance de este trabajo, sino ms bien ofrecer una idea de la evolucin de la materia, mediante la presentacin de algunos paradigmtica ejemplos de seales novedosos y los mecanismos que han sido reconocidos en los ltimos aos como reguladores putativos de la pubertad. Se espera que los nuevos anlisis de estos y otros caminos para arrojar ms luz en las intimidades de uno de los fenmenos, de desarrollo ms complejos, e intrigante, cuyas alteraciones en los seres humanos estn aumentando las preocupaciones de la comunidad cientfica y laicos en el mundo pblico.