Grado: 4 semestre

Grupo: F

Especialidad: Laboratorio Clnico Modulo 3. Aplicar tcnicas para diagnostico bacteriolgico e inmunohematolgico. Submdulo: Procesar cultivos bacteriolgicos Facilitador: Miguel Angel Quijano Couoh Alumna: Samantha Lara Garca

Fecha: junio 2012

Introduccin
Las bacterias son a menudo malignas y es la causa de enfermedades en los humanos y en animales. Sin embargo, ciertas bacterias, producen antibiticos, otras viven simbiticamente en los intestinos de animales (inclusive en los humanos) o en otra parte de sus cuerpos, en las races de ciertas plantas, convierten el nitrgeno en una forma utilizable. Las bacterias juegan un papel fundamental en la naturaleza y en el hombre. Ellas ponen el sabor en el yogur y el gusto en el fermento del pan; ayudan en la descomposicin de la materia orgnica muerta. Las bacterias son de inmensa importancia a causa de su extrema flexibilidad, la capacidad para el crecimiento y la rpida reproduccin, los fsiles ms antiguos conocidos, de casi 3500 millones de aos, son organismos semejantes a bacterias. En este trabajo que es un conjunto de investigaciones, las cuales son resultado de una indagacin excelente de mucho tiempo dedicado, hablaremos de varios temas basados todos en las bacterias, como son las caractersticas de las bacterias, su clasificacin, los rangos taxonmicos, las condiciones necesarias del crecimiento bacteriano, la curva del crecimiento bacteriano, los medios de cultivo para las bacterias; las tinciones diferenciales y selectivas en bacteriologa (tcnica de Gram y de Ziehl-Neelsen); las clasificaciones de las especies ms importantes de los estreptococos, estafilococos, neumococos y bacilos, entre otros; Con ayuda de el facilitador Q.F.B. Miguel Angel Quijano Couoh, hemos tenido como resultado este cuadernillo en el cual explicamos todos los temas vistos en el parcial; los cuales me han ayudado mucho para poder comprender el submodulo.

Indice
Contenido Introduccin ......................................................................................2 Teoria ...................................................................................................4 Entobacterias .................................................................................4 Escherichia ...................................................................................4 Shigella ..........................................................................................6 Salmonella ....................................................................................7 Proteus ..........................................................................................9 Klebsiella .....................................................................................10 Pruebas bioqumicas utilizadas para la identificar a las Enterobacterias. ...........................................................................11 Bacterias Gram Negativas No Fermentadoras (BGNNF) .....15 Pseudomonas ............................................................................15 Acinetobacter ...........................................................................16 Flavobacterium .........................................................................17 Bordetella ...................................................................................18 Moraxella ....................................................................................20 Stenotrophomonas ...................................................................21 Alcalgenes.................................................................................22

Teoria
Entobacterias
Las entero bactericeas (Enterobacteriaceae) son una familia de bacterias Gram negativas que contiene ms de 30 gneros y ms de 100 especies que pueden tener morfologa de bacilos o cocos. Los miembros de esta familia forman parte de la microbiota del intestino (llamados coliformes) y de otros rganos del ser humano y de otras especies animales. Algunas especies pueden vivir en tierra, en plantas o en animales acuticos. Sucumben con relativa facilidad a desinfectantes comunes, incluido el cloro. Con frecuencia se encuentran especies de Enterobacteriaceae en la vio-industria: para la fermentacin de quesos y productos lcteos, alcoholes, tratamientos mdicos, produccin de toxinas en el uso de cosmticos, fabricacin de agentes antivirales de la industria farmacutica, etc. Son bacilos Gram negativos aerobios no esporulares, algunas carecen de flagelos, pueden ser mviles y no mviles, reducen los nitratos a nitritos, fermentan la glucosa formando cidos y gas, son oxidasa negativo. Clasificacin Se conocen actualmente 7 tribus de la familia Enterobacteriaceae. Tribu I: Lo forma el gnero Escherichia y Shigella. Tribu II: Lo forma el gnero Edwarciellae. Tribu III: Lo forma el gnero Salmonella. Tribu IV: Lo forma el gnero Klebsiella. Tribu V: Lo forma el gnero Proteus. Tribu VI: Lo forma el gnero Yersinae (Pasterella). Tribu VII: Lo forma el gnero Erwinae.

Escherichia
Morfologa Se trata de una enterobacteria que se encuentra generalmente en los intestinos animales, y por ende en las aguas negras, pero se lo puede encontrar en todos lados, dado que es un organismo ubicuo. Fue descrita por primera vez en 1885 por Theodore von Escherich, bacterilogo alemn, quien la denomin Bacterium coli. Posteriormente la taxonoma le adjudic el nombre de

Escherichia coli, en honor a su descubridor. Epidemiologia Estudios epidemiolgicos realizados en pases en vas de desarrollo, incluidos Latinoamrica y Mxico, han demostrado que ETEC y EPEC son dos de los principales patgenos aislados en los casos de diarrea infantil. Dentro de la vigilancia epidemiolgica que llevan a cabo las autoridades de salud en Mxico, se ha comunicado que EPEC se presenta en forma endmica hasta en 6% de la poblacin, una cifra muy parecida a la informada para pases industrializados como Alemania y Australia, en los que se ha encontrado que 5.9 y 7.6%, respectivamente, de nios sanos son portadores normales de cepas de EPEC En lo que respecta a nios con diarrea, en Mxico se ha detectado un alto porcentaje de pacientes infectados con EPEC. En un estudio que se condujo en Guadalajara, Jalisco, en 1987, se logr aislar cepas de EPEC en 17.5% de los casos de nios menores de dos aos con diarrea. En este estudio se identific EPEC con mayor frecuencia que otros patgenos tpicos, como Shigella, Giardia, Salmonella o rotavirus. Por otro lado, en 1991 Cravioto y colaboradores llevaron a cabo un estudio en nios con diarrea de una poblacin rural del estado de Morelos. Ellos aislaron cepas de EPEC en 19% de los casos de diarrea en nios de esa regin. Patogenicidad La Escherichia coli puede causar infecciones intestinales y extra intestinales generalmente graves, tales como infecciones del aparato excretor, cistitis, meningitis, peritonitis, mastitis, septicemia y neumona Gram-negativa. Tratamiento El uso de antibiticos es poco eficaz y casi no se prescribe. Para la diarrea se sugiere el consumo de abundante lquido y evitar la deshidratacin. Cuando una persona presenta diarrea no debe ir a trabajar o asistir a lugares pblicos para evitar el contagio masivo. Sin embargo en algunas patologas como la pielonefritis hay que considerar el uso de alguna cefalosporina endovenosa. Profilaxis Lavarse las manos luego de ir al bao, antes de preparar alimentos y despus de tocar algn animal. Cocinar bien las carnes. Lavar bien los vegetales y no tomar leche sin pasteurizar. No tomar agua de la playa, piscina lagos o ros. Lavar bien los utensilios de cocina.

Shigella
Morfologa La shigelosis es una colitis inflamatoria infecciosa aguda debida a uno de los microorganismos integrantes del gnero Shigella. Aunque con frecuencia se alude a esta enfermedad como disentera bacilar, muchos enfermos slo tienen una ligera diarrea acuosa y nunca presentan sntomas disentricos. Las formas menos intensas de la enfermedad predominan en los pases industrializados, mientras que la disentera ms grave y a menudo mortal afecta a enfermos de pases en vas de desarrollo. Fue descubierta hace 100 aos por un cientfico japons llamado Shiga, de quien tom su nombre. Epidemiologia La shigelosis es principalmente una enfermedad peditrica; el 70% de todas las infecciones ocurren en nios menores de 15 aos. La enfermedad endmica en los adultos es frecuente en los hombres homosexuales, y en los contactos familiares de los nios infectados. Los brotes epidmicos de la enfermedad ocurren en las guarderas, los jardines infantiles y las prisiones. La shigelosis se transmite de forma fecal oral, principalmente por las personas con las manos contaminadas, y con menor frecuencia con el agua y los alimentos. Debido a que se puede producir la enfermedad con menos de 200 bacilos, la shigelosis se extiende rpidamente en comunidades donde las condiciones sanitarias y la higiene personal son deficientes. Patogenicidad La Shigella causa la enfermedad al invadir y replicarse en las clulas que revisten el colon. Las protenas de los genes estructurales intervienen en la adherencia de los microorganismos a las clulas as como en su invasin, replicacin intracelular y extensin de una clula a otra. Estos genes se transportan en un gran plsmidios virulento, pero se regulan por genes cromosmicos. Por lo tanto, la presencia del plsmidio nos asegura la normal actividad gentica. Diagnostico de laboratorio
Muestras Heces frescas, mechones de moco y frotis rectal para cultivos. En el examen microscpico de las heces es frecuente observar gran nmero de leucocitos y eritrocitos. Si se desea demostrar el aumento en el ttulo de los anticuerpos aglutinantes deben recolectarse muestras se suero a intervalos de 10 das.

Cultivo Los materiales se siembran en estras sobre diferentes medios (por ejemplo de MacConkey o agar EMB) y sobre medios selectivos (agar entrico Hektoen o agar shigela-salmonela), los cuales suprimen otras enterobactericeas y microorganismos gram positivo. Las colonias incoloras (lactosa negativas) se inoculan en agar hierro triple azcar. Los microorganismos no productores de H2S que producen cido pero no gas en el fondo, y dan un cambio alcalino en la porcin inclinada en el medio de agar hierro triple azcar, y que carecen de motilidad, deben ser objeto de aglutinacin en un laminilla de vidrio con antisuero especfico de shigela. Serologa Con frecuencia las personas normales presentan aglutinacin contra varias especies de Shigella. Sin embargo, la determinacin seriada de los ttulos de anticuerpos a veces revela el aumento de anticuerpos especficos. Para el diagnstico de infecciones por Shigella no se emplea la serologa.

Tratamiento Para confirmar el diagnstico de Shigella, el pediatra de su hijo puede enviar una muestra de las heces del nio a un laboratorio para que analicen si contiene bacterias del tipo Shigella. Es posible que el mdico tambin solicite un anlisis de sangre y otras pruebas para descartar otras causas posibles de los sntomas, sobre todo si su hijo pierde bastante sangre por las heces. Profilaxis La mejor forma de evitar el contagio de Shigella es lavndose las manos con jabn frecuentemente y a conciencia. Esto es importante en todos los grupos de edad. A los nios se les debe recordar que se laven las manos, sobre todo despus de utilizar el vter y antes de comer. Esto es especialmente importante en los centros de preescolar.

Salmonella
Morfologa Salmonella es un gnero de bacterias que pertenece a la familia Enterobacteriaceae, formado por bacilos Gram negativos, anaerobios facultativos, con flagelos pertricos y que no desarrollan cpsula (excepto la especie S. typhi ni esporas. Son bacterias mviles que producen cido sulfhdrico (H2S). Fermentan glucosa por poseer una enzima especializada, pero no lactosa, y no producen ureasa.

Epidemiologia La Salmonella recibe su nombre por Daniel Elmer Salmon, un patlogo veterinario estadounidense, aunque fue su colega y contemporario Theobald Smith (conocido por su trabajo con anafilaxis) quien descubri la bacteria en 1885, aislndola de cerdos con clera. La salmonelosis entrica est habitualmente causada por Salmonella enterica subespecie enterica, con ms de 2.000 cepas descritas, es de importancia en pases en desarrollo, donde su incidencia est en aumento, y en algunos pases, la enfermedad es endmica. La salmonelosis es una enfermedad de transmisin alimentaria, en especial por alimentos de origen animal y pueden aparecer en brotes en escuelas, guarderas, restaurantes y residencias de ancianos. El perodo de incubacin es por lo general entre 12 a 36 horas, a veces hasta 6 y 48 horas. El tamao del inculo de Salmonella requerido para causar enfermedad sintomtica en adultos sanos no est bien establecido. En general, es necesaria una inoculacin relativamente grande, entre y organismos. En un humano voluntario, apenas 25 organismos fueron suficientes para producir la enfermedad. En otro estudio con 12 voluntarios, que ingirieron entre 17 y organismos, en ms de la mitad de los casos menos de 1000 organismos fueron suficientes. Patogenicidad Produce salmonelosis con un perodo de incubacin de entre 5 horas y 5 das, diarrea y dolor abdominal. A travs de las heces (excremento) del enfermo se elimina un gran nmero de esta bacteria y se observa fiebre entrica con un periodo de incubacin de 7 a 28 das, causante de dolor de cabeza, fiebre, dolor abdominal y diarrea, erupcin mculo-papulosa en pecho y espalda. Los enfermos presentan un perodo de convalecencia entre 1 y 8 semanas y las personas curadas eliminan Salmonella. Tambin puede ocasionar fiebres entricas o infeccin intestinal por intoxicacin con algunos alimentos. Tratamiento Puede manifestarse por fiebre prolongada o recurrente y asociarse a lesiones locales seas, articulares, pleurales, pulmonares; y con aneurismas micticos de la aorta abdominal, que es la manifestacin observada en pacientes con infeccin VIH. Se recomienda la ciprofloxacino en dosis de 750 mg dos veces al da. Aparte de estos tratamientos, el de soporte es uno de los ms recomendables, es decir, hidratarlo constantemente.

Profilaxis La prevencin de Salmonella como contaminante de alimentos involucra el asear eficazmente las superficies de contacto con los alimentos. El alcohol ha sido efectivo como agente desinfectante tpico en su contra, as como el cloro. La comida que contenga huevos crudos debe ser cocinada adecuadamente o congelada antes de consumirla. Cualquier alimento cocinado de manera imperfecta o no cocinado, especialmente en carne, aves, huevos (porque este sale por el mismo conducto de las heces y como la salmonella es una enobacteria se contamina el huevo, por eso es importante tener practicas de higiene en la manipulacin de estos) y leche, es un buen vehculo de transmisin. Su tiempo de supervivencia en alimentos a temperatura ambiente es de varios das llegando incluso a los lmites siguientes:

mantequilla: hasta 10 semanas leche: hasta 6 meses chocolate: varios meses

Proteus
Morfologa La estructura antignica est compuesta por antgeno somtico O, flagelar H y superficial K. El antgeno flagelar H contribuye a la capacidad invasora de las vas urinarias. La variante X del antgeno somtico O est presente en algunas cepas de P. mirabilis. Otros grupos antignicos definidos son el OX2, OX19 y OXK. El grupo OX19 (y a veces el grupo OX2) da reacciones cruzadas (aglutinacin) en pacientes con Rickettsia prowazekii y sa es la base de la prueba de Weil Flix. Epidemiologia Provocan infecciones nosocomiales Si la infeccin la obtuvo despus del ingreso al hospital las manifestaciones clnicas se presentan alrededor de las 48 hrs despus del ingreso.

Patogenicidad Hay tres especies que causan infecciones oportunistas en el hombre: P. vulgaris, P. mirabilis, y P. penneri. Causan infecciones urinarias (ms del 10% de complicaciones del tracto urinario incluyendo clculos y lesiones celulares del epitelio renal), enteritis (especialmente en nios), abscesos hepticos, meningitis, otitis media y neumona con o sin empiema, entre otros.4 Es un frecuente invasor secundario de quemaduras y heridas, as como infecciones nosocomiales. Todas las especies de Proteus son resistentes a la ampicilina. P. mirabilis es sensible a la penicilina. Diagnostico de laboratorio Crecen en medios corrientes y moderadamente selectivos a temperatura corporal de 37C. Crecen formando capas diseminadas por virtud de su gran motilidad. Existen variantes inmviles que forman colonias lisas.Deben refrigerarse Tratamiento P. mirabilis es generalmente susceptible a muchos antibiticos como tetraciclinas, aunque el 10%20% de las cepas de P. mirabilis son resistentes a las cefalosporinas y ampicilinas de 1 generacin.

Klebsiella
Morfologa Klebsiella es un gnero de bacterias inmviles, Gram-negativas, anaerobias facultativas y con una prominente cpsula de polisacridos. Es un frecuente patgeno humano, los organismos bacteriales del gnero Klebsiella pueden liderar un amplio rango de estados infecciosos, notablemente neumona. Epidemiologia Los microorganismos ms frecuentemente aislados de pacientes con infecciones intrahospitalarias son Staphylococcus aureus y Escherichia Coli. En Medelln, sin embargo, Klebsiella pneumoniae ha cobrado gran

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importancia en aos recientes debido a su gran incremento como agente causal de ese tipo de infecciones, lo que motiva esta revisin. Se incluyen los siguientes aspectos: microbiologa, epidemiologa, diseminacin, resistencia a los beta-lactmicos y sus mecanismos, impacto clnico e importancia del problema en la ciudad. Patogenicidad Bacilo Gram (-), capsulado bastante gruesa, es inmvil, no tiene flagelos. La especie ms importante es la K. Pneumoniae (neumona), en pacientes hospitalizados, alcohlicas, diabticos, cncer. Infecciones urinarias en pacientes cateterizados. Entre un 5 - 20 % de la pb la tiene en el aparato respiratorio (garganta). Diagnstico de laboratorio. El diagnstico comienza a partir de la clnica; en los casos de neumona, es especialmente til el estudio radiogrfico. El diagnstico definitivo lo obtenemos a partir del cultivo de muestras obtenidas de las mucosas del tracto respiratorio superior. Tratamiento. No se recomienda el uso de penicilinas, cefalosporinas (todas las generaciones), monobactames y carbapenemes independientemente de la sensibilidad in vitro. Opciones de tratamiento (requieren demostrar sensibilidad): agentes no beta-lactamicos.

Pruebas bioqumicas utilizadas para la identificar a las Enterobacterias.

La morfologa colonial y las reacciones bioqumicas de los medios de aislamiento se toman en cuenta para realizar una identificacin preliminar o sospechosa. Para la identificacin de las especies se requiere de la determinacin de las caractersticas metablicas adicionales que reflejan el cdigo gentico y la identidad nica de la bacteria en estudio. Las pruebas bioqumicas que comnmente se utilizan en el laboratorio son:

TSI: Triple azcar de hierro-. Es utilizado para determinar la asimilacin de glucosa y lactosa en condiciones anaerbicas (fermentacin) a dems permite determinar si la bacteria produce sulfuro de hidrogeno y gas. Es un

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agar inclinado que se siembra por picadura y estra, tiene como indicador de pH el rojo de fenol. Para su interpretacin se divide en pico de flauta y fondo, pudiendo dar las siguientes determinaciones de acuerdo al cambio de color de pH. Inicialmente el medio es de color naranja. LIA: Lisina alquilina-. Se utiliza comnmente para determinar si la bacteria es capaz de descarboxila en aminocidos lisina, lo cual ocurre en condiciones anaerbicas. Este medio contiene glucosa y lisina como lubricadores de pH y como indicador de pH el purpura de bromocresol, al igual que el TSI es un medio inclinado que se siembra tambin por picadura y estra. Para su lectura se divide tambin de flauta y fondo, su color inicialmente es lila. MIO: Movilidad indol ornitina-. Es un medio semislido, se siembra por picadura en el centro, sin mover el aza contiene glucosa y los aminocidos ornitina y triptfano. Este medio utiliza como indicador de pH el purpura de bromocresol. Este tubo permite determinar la movilidad, produccin de indol y la descarboxilacion de la ornitina, su color inicial es morado. Movilidad: cuando el fondo del medio se observa turbio indica que la bacteria es mvil y se reporta Movilidad positiva Mov (+) y si el fondo se observa transparente indica que la bacteria es inmvil se reporta Mov (-). Indol: para determinar esta prueba se agregan 5 gotas del reactivo de Erlich o Kovacs, en la superficie del medio. Si a los pocos segundos se forma un anillo de color rosado o rojo indica que se produjo indol y se reporta Indol (+) y si la superficie del medio forma un anillo de color amarillo indica que la bacteria no produjo indol Indol (-). Ornitina: la ornitina se lee en el fondo del tubo la aparicin de un color amarillo indica que la bacteria no descarboxilo la ornitina y cuando el fondo se observa de cualquier color diferente al amarillo (morado, grisceo, lechoso) indica que la bacteria descarboxilo la ornitina. CIT: Citrato-. Se emplea para determinar si la bacteria es capaz de utilizar el citrato como fuente de carbono, es un agar inclinado que se siembra por estria en la superficie, como indicador de p H tiene el azul de

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bromotimol, el medio inicialmente es de color verde pizarrn. La presencia de un color azul indica que la bacteria fue capaz de usar el citrato como fuente de carbono y se reporta CIT (+), la presencia del color verde del agar indica que la bacteria no fue capaz de utilizar el citrato como fuente de carbono y se reporta como CIT (-). UR: Urea-. La urea puede ser solida o liquida, en ambos medios se utiliza para determinar si la bacteria es capaz de desdoblar la urea. Se siembra por estria en la superficie cuando es solida y si es caldo solo se introduce el aza, sin agitar y como indicador de pH el rojo de fenol, inicialmente el color es de paja en el slido o rosa dbil en caldo. La aparicin de un color rosa fuerte en cualquiera de los dos tubos indica que se desdoblo la urea, y se reporta como UR(+) y si permanece del mismo color indica que no se desdoblo la urea y se reporta como UR(-). Malonato: es un medio semislido recto el indicador de pH es el azul de bromotimol, inicialmente el agar es de color verde cuando cambia de color amarillo a azul se reporta como MAL (+) y si no cambia de color indica MAL (-).

Medios de aislamiento
Tomando en cuenta la selectividad de los medios de cultivo utilizados para el aislamiento de las Enterobacterias, estos se clasifican de la siguiente manera: 1) Medios de baja selectividad o de aislamiento primario. Estos medios contienen cantidades mnimas de inhibidores, por lo que inhiben a las bacterias Gram (+) y ciertas Gram (-); pero permiten el desarrollo de las Enterobacterias, ejemplo: a) El Mc Conkey Agar, el cual es un medio selectivo diferencial donde las colonias de las bacterias fermentadoras de lactosa son de color fuerte, debido al pH del metabolismo del azcar, y las colonias lactosa negativo son incoloras o transparentes. b) EMB Agar Eosina Azul de metileno. Este es otro medio de cultivo diferencial donde las colonias lactosas positivas adquieren un color verde metlico, moradas o violetas y las no fermentadoras de lactosa son incoloras o tranparentes (-).

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2) Medios de mediana selectividad o moderadamente selectivos. Estos medios contienen inhibidores en mayor concentracin que los de aislamiento primario e inhiben ciertas Enterobacterias y permiten la recuperacin de salmonella y Shigella a partir de muestras con un escaso nmero de esas bacterias en comparacin con la concentracin masiva de otras bacterias de la flora normal, ejemplo: a) SS agar Salmonella, Shigella; donde las bacterias lactosa positiva son transparentes o incoloras (+) y las que producen H2S (acido sulfrico) presentan en el centro un punto negro, se reporta H2s (+). b) XLD agar, en este medio las bacterias lactosa positivas son de color amarillo 8+) y las lactosa negativo son incoloras o transparentes y las que producen H2S presentan el centro negro. 3) Medios de alta selectividad Estos medios contienen una mayor concentracin y nmero de inhibidores que los grupos anteriores y generalmente permiten solo el desarrollo de Salmonella y son sembrados despus de haber utilizado un caldo de enriquecimiento, ejemplo: a) VB agar. En este medio las bacterias lactosa negativas son transparentes o incoloras (-) y las lactosa positivas presentan un color amarillo verdoso, estas colonias tienen una caracterstica importante ya que desprenden un olor a tortilla quemada. b) SB agar. En este medio las bacterias lactosa positivas son inhibidoras y las lactosas negativas productoras de acido sulfridico se observan de un color verdoso con un centro negro pequeo o colonias negras con brillos metlicos.

Caldos de enriquecimiento
Estos son utilizados para facilitar el crecimiento de ciertos gneros de bacterias cuando la poblacin es escasa y para impedir el crecimiento de las bacterias de la flora normal. Estos caldos son utilizados comnmente para el aislamiento de Salmonella y entre estos medios tenemos: caldo tetrationate y caldo serenite.

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Bacterias Gram Negativas No Fermentadoras (BGNNF) Pseudomonas

Morfologa Es un gnero de bacilos rectos o ligeramente curvados, Gram negativos, oxidasa positiva, aerbicos estrictos aunque en algunos casos pueden utilizar el nitrato como aceptor de electrones. El catabolismo de los glcidos se realiza por la ruta de Etner-Doudoroff y el ciclo de los cidos tricarboxlicos. Algunos miembros del gnero son psicrfilos, mientras que otros sintetizan siderforos fluorescentes de color amarillo-verdoso con gran valor taxonmico. Es comn la presencia de plsmidos y no forman esporas. Epidemiologa Pseudomonas aeruginosa es la especie Gram negativa encontrada con mayor frecuencia. Este microorganismo sobrevive en diversos ambientes de la naturaleza y en las casas y los hospitales. Debido a la naturaleza ubicada de P. aeruginosa, su transmisin a los seres humanos pueden producirse de muchas maneras. Patogenicidad Los factores que contribuyen a su patogenicidad incluyen la produccin de exotoxina A, que causa la muerte de las clulas husped por inhibicin de la sntesis de protenas, y la produccin de enzimas y hemolisinas que destruyen clulas y tejidos. Los Pilis presentes en la superficie de la clula bacteriana facilitan su adherencia a las clulas husped. Algunas cepas producen alginato, un polmero de polisacridos que inhiben la fagocitosis y contribuyen a la infeccin probable en pacientes con fibrosis qustica. Diagnostico de laboratorio Aparte de la tincin de Gram de las muestras de los pacientes no hay procedimientos especficos para la deteccin directa de materiales clnicos. Estos microorganismos suelen aparecer como bacilos medianos y rectos en la tincin de Gram. Crecen bien en medios de cultivo simple como agar sangre de carnero al 5% y agar chocolate. Todos crecen en agar Mc Conkey. Tratamiento El tratamiento ha de ser a base de antibiticos o sulfamidas. Entre los antibiticos son recomendados la Gentamicina, la Tobramicina, la

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Amikacina y la Carbenicilina, y entre las sulfamidas la Sulfameracina y Sulfamidas Profilaxis Como estos microorganismos son ubicuos en la naturaleza y muchos se encuentran habitualmente sin que produzcan efectos deletreos en los huspedes humanos sanos, no se recomiendan vacunas ni protocolos de profilaxis. Las infecciones nosocomiales se tratan de forma ptima si se siguen las pautas de control de infecciones apropiadas y se implementan protocolos eficaces para la esterilizacin y la descontaminacin de los suministros mdicos

Acinetobacter
Morfologa Acinetobacter es un gnero de bacterias Gram-negativas que pertenece al filo Proteobacteria. Las especies de Acinetobacter son bacilos estrictamente aerobios no fermentadores, no mviles, oxidasa-negativos que se presentan en pares al microscopio. Se distribuyen ampliamente en la naturaleza, son importantes en el suelo y contribuyen a su mineralizacin. Acinetobacter es tambin una importante fuente de infeccin en los hospitales para los pacientes debilitados.1 Son capaces de sobrevivir en diversas superficies (tanto hmedas como secas) en el mbito hospitalario. Ocasionalmente son aislados de los productos alimenticios y algunas cepas son capaces de sobrevivir sobre diversos equipos mdicos e incluso sobre la piel humana sana. Epidemiologa Estos microorganismos habitan en nichos ambientes; las especies de Acinetobacter estn ampliamente distribuidas en la naturaleza y mbitos hospitalarios. Aunque ninguna de ellas es parte habitual de la flora humana, la prevalencia relativamente elevada de las especies de Acinetobacter en los hospitales, con frecuencia determina la colonizacin de la piel y la va respiratoria de los pacientes. Patogenicidad Dado que las especies de Acinetobacter son colonizadores relativamente habituales de pacientes hospitalizados, puede ser difcil establecer su importancia clnica cuando se aslan de muestras de los

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pacientes. De hecho estos microorganismos se aslan con mayor frecuencia como colonizadores que como agentes infectantes. Cuando provocan una infeccin, por lo general afecta a pacientes debilitados como los que se encuentran en unidades de quemados o de cuidados intensivos, que fueron sometidos a procedimientos mdicos invasivos o que reciben numerosos antimicrobianos. Diagnostico de laboratorio Adems de crecer en agar Mc Conkey todos los gneros crecen bien en agar sangre de carnero al 5% y en agar chocolate. Estos microorganismos suelen alcanzar un crecimiento detectable en agar de carnero al 5% y en agar chocolate incubado a 35c en atmosfera de dixido de carbono o en aerobiosis durante un mnimo de 24 hrs. Tratamiento Las especies de Acinetobacter son resistentes naturalmente a muchos tipos de antibiticos incluida la penicilina, cloranfenicol y a menudo los amino glucsidos. Se han informado de la resistencia a fluroquinolonas durante la terapia y eso tambin ha dado lugar a un aumento de resistencia a otras clases de drogas a travs del reflujo activo. Son sensibles al sulbactam. Profilaxis Dado que estos microorganismos son ubicuos en la naturaleza y por lo general no representan una amenaza para la salud humada no hay protocolos de vacunacin ni profilaxis recomendados. Las infecciones nosocomiales estriles adecuadas y las pautas para el control de infecciones y se implementan protocolos eficaces para la esterilizacin y la descontaminacin de los suministros mdicos.

Flavobacterium
Morfologa Gnero bacteriano perteneciente al grupo de las flavobacterias organotrofas. Se trata de bacilos aerobios, inmviles. Gram negativos. Tpicos de agua dulce y salada, alimentos, y plantas procesadoras. Es una especie comensal en ciertos animales acuticos. Existe asimismo alguna especie patgena oportunista de humanos y peces. Por ejemplo, Flavobacterium psychrophilum causa la enfermedad del agua fra.

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Epidemiologia Son de amplia distribucin en el medio ambiente, son de vida libre, se encuentran en el suelo, en el agua o en el material orgnico en descomposicin. Algunas cepas de estos gneros se encuentran en la flora nativa del intestino o de la vagina, pero instalados en otros tejidos producen infecciones purulentas severas. Se encuentran en el medio ambiente, de donde se adquiere el bacilo, y coloniza heridas, se instala en pacientes caterizados y pueden producir septicemias o meningitis en recin nacidos. Patogenicidad La flavobacteriosis es uno de los principales problemas patolgicos de la cra industrial de la trucha arcliris, su impacto econmico es muy importante no solo por la mortalidad que provoque sino tambin por los costos teraputicos y las alteraciones del ciclo productivo. Muchos mecanismos de patogenicidad se desconocen. Diagnostico de laboratorio Se hace por la identificacin de la cepa, por las colonias amarillas que produce en los medios de cultivo, y no crece a temperaturas mayores de 38c. La susceptibilidad a los antimicrobianos es muy diferente a los bacilos Gram negativos, debido que es resistente a los amino glucsidos y ampicilinas. Tratamiento Es susceptible a eritomicina, novobiocina, rifampicina, sulfametoxazol, trimetropim y vancomicina.Bordetella Morfologa Bordetella es el gnero de pequeas (0.2 - 0.7 m) bacterias Gram negativas del filo proteobacteria. Son organismos cocobacilos de difcil cultivo y, con la excepcin de B. petrii, son aerbicos obligados. Tres especies son patgenos humanos, B. pertussis, B. parapertussis y B. bronchiseptica; uno de los cuales (B. bronchiseptica) es tambin mvil.1 El gnero Bordetella recibe su nombre de Jules Bordet. Epidemiologia

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Es una enfermedad endmica de distribucin mundial, con brotes epidmicos cada 4 aos. Es ms frecuente en el sexo femenino y en los meses ms fros del ao. Los nios menores de 7 aos son los ms predispuestos a la enfermedad y en los menores de 2 se observa el mayor nmero de casos fatales. La enfermedad se adquiere por va respiratoria al inhalar las pequeas gotitas de secreciones respiratorias producidas en forma de aerosoles al toser el enfermo. La enfermedad es ms transmisible durante la fase catarral, pero es posible la transmisin hasta tres semanas despus del inicio de la etapa paroxstica. No existen portadores crnicos. La enfermedad se transmite a partir de los enfermos. Se consideran que los adultos con formas leves o atpicas de la enfermedad e incluso asintomtico son los principales reservorios de la misma. Patogenicidad Los bacilos penetran por las vas areas superiores y se instalan en la nasofaringe, dando lugar al cuadro catarral. Despus descienden a la trquea y los bronquios, donde colonizan la mucosa y producen necrosis de las clulas ciliadas del epitelio, lo cual explica la intensidad de la tos y, finalmente, invade los pulmones provocando una neumonitis intersticial. En algunas ocasiones las manifestaciones son moderadas o leves. Diagnostico de laboratorio Los sntomas son caractersticos. El diagnostico de laboratorio se hace obteniendo una aspiracin nasofarngea con cultivo primario en el medio de Bordet-Genou (agar-papa-glicerol-sangre). El crecimiento se inhibe con peptonas, cidos grasos insaturados, sulfuros, etc, que son componentes que se encuentran en medios ordinarios. El microorganismo crece en forma de colonia transparentes hemolticas y muy pequeas. Tratamiento El antibitico de eleccin para el tratamiento de la tos ferina es la eritromicina a dosis de 10 mg/kg cada 6 horas (mximo 2 gr.) durante 14 das. Como alternativa se puede usar clotrimoxazol. El tratamiento en nios dura 14 das para evitar las recidivas. En los adultos dura 7 das. Si se administra el antibitico durante la fase catarral de la enfermedad se consigue alterar favorablemente el curso de la enfermedad. Durante la fase paroxstica el efecto sobre el curso de la enfermedad es ms discutible, aunque siempre tiene el valor de erradicar al microorganismo impidiendo la diseminacin del mismo (el contagio). La administracin de oxigeno, sedacin y antitusivos

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ayudan en la fase paroxstica y previenen la lesin anoxica del cerebro. Profilaxis Existe profilaxis especfica con la vacuna elaborada con bacterias muertas. Se administra conjuntamente con el toxoide diftrico y el tetnico, a los 2, 4 y 6 meses, y luego refuerzos a los 18 meses y a los 5-6 aos.Tambin se puede realizar quimioprofilaxis con eritromicina durante 5 das a los contactos no inmunizados de enfermos con tos ferina.

Moraxella
Morfologa Moraxella es un gnero de bacterias Gram negativas con forma de bacilo corto, cocobacilo o, como en el caso de Moraxella catarrhalis, cocos asociados en parejas (diplococos), o incluso en pequeas cadenas. La mayora de estos microorganismos son inmviles, no esporulados, con caractersticas oxidasa-positiva y catalasa-positiva. Unos son hemolticos y algunas especies son capsuladas, aerobios aunque algunos pueden ser anaerobios facultativos y no son muy hbiles para fermentar los carbohidratos.

Epidemiologia M. catarrhalis forma parte de la flora normal de las vas respiratorias superiores de los seres humanos. Se presume que el modo de transmisin es el contacto directo con secreciones respiratorias contaminadas o propagacin por gotitas. Si bien la infeccin afecta con mxima frecuencia a los lactantes y los nios pequeos, se observa a todas las edades. No se conoce la duracin del estado de portador en los infectados y colonizados, ni el periodo de transmisibilidad. Patogenicidad Condiciones desconocidas dan lugar a la colonizacin de la nasofaringe por la bacteria que migra al odo por la trompa de Eustaquio. Las fimbrias, lipooligosacarido endotoxico y otras protenas de membrana externa contribuyen a la colonizacin e infeccin. Las

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bacterias descienden desde nasofaringe al pulmn y exacerban la produccin de tos y esputo o proliferan y provocan neumona. Diagnostico de laboratorio Es posible aislar el microorganismo en medios de cultivo agar sangre y agar chocolate despus de la incubacin en aire o con aumento de dixido de carbono. Est indicado el cultivo de aspiraciones de odo medio o senos en caso de infecciones inusitadamente grave, infecciones que no responden al tratamiento y nios inmunosuprimidos. Tratamiento Los antibiticos apropiados son amoxicilina-acido clavulanico, cefuroxima, azitromicina, trimetropim-sulfametoxazol. Si se requiere antibioticoterapia parenteral para tratar la infeccin por M. catarrhalis, los datos in vitro indican que los siguientes frmacos son eficaces: cefotaxima, ceftriaxona y ceftazidima.

Stenotrophomonas
Morfologa Son bacilos rectos y ligeramente curvos que pueden agruparse en pares u observarse como formas simples, Gram negativos, no esporulados, con una longitud de 0,5 a 1.5m mviles y aerobios obligados. Epidemiologia Puede ocasionar lesiones de piel y tejidos blandos, infecciones seas y gastrointestinales. Se ha asociado tambin a infecciones del SNC en neonatos y nios pequeos donde aparece espontneamente, mientras que en los adultos es secundaria a procederes neuroquirurgicos. Se han descrito infecciones oftalmolgicas como conjuntivitis y ulcera cornial. Patogenicidad Siendo un microorganismo de baja patogenicidad, cuyo hbitat natural es el ambiente acutico, su importancia radica en la patologa nosocomial, debido fundamentalmente a su alta resistencia a los

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antimicrobianos, lo que favorece su seleccin. Tambin puede producir en forma habitual meningitis, endocarditis, endolftamitis y un amplio rango de infecciones cutneas como celulitis y ectima gangrenoso. Diagnstico de laboratorio Crecen a 35c en aerobiosis; las colonias son lisas, destellantes, con bordes enteros, de color blanco o amarillo plido; algunas cepas pueden producir hemlisis en placas de agar sangre, crecen bien en Mc Conkey. Tratamiento Este microorganismo es resistente a un gran nmero de agentes antimicrobianos, reportndose sensibles a moxalactam, doxicilina, ciprofloxacina, colistina, polimixina B y sulfametoxazol-trimetropim. Profilaxis La terapia recomendada en SXT solo o en combinacin minociclina en infecciones severas, previo estudio in vitro, ya que se han reportado cepas resistentes a los dos primeros anti-microbianos.

Alcalgenes
Morfologa Las especies de Alcalgenes son bacilos rectos y largos. Es un gnero microbiolgico de bacterias Gram negativas aerobias. Las especies se usan para la produccin industrial de aminocidos no estndares. Epidemiologia Los hbitats de las especies de Alcalgenes son el suelo y el agua, incluidas las reas hmedas del hospital. Puede colonizar la piel en forma transitoria. El modo de transmisin es a travs de la exposicin a soluciones y dispositivos mdicos contaminados. Patogenicidad No se conocen factores de virulencia identificables. Sin embargo como las infecciones pueden implicar la exposicin de pacientes

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comprometidos a materiales contaminados, es probable que la mayor parte de estas especies sean de virulencia baja. Diagnostico de laboratorio Crecen bien en agar sangre de carnero al 5%, agar chocolate y agar Mc Conkey. La mayora de estos gneros crecen bien en caldos de los sistemas para hemocultivos as como en los caldos nutritivos comunes. Tratamiento En cuanto a los microorganismos que en ocasiones se asocian con infecciones se logra mejor si se sigue las tcnicas estriles y las pautas de control de infecciones Profilaxis Como estos microorganismos pueden encontrarse diseminados en la naturaleza para la salud humana, no hay vacunas ni protocolos de profilaxis. La prevencin de la infeccin se logra mejor si se siguen las tcnicas estriles y las pautas de control de infecciones.

Procesar coprocultivo
El coprocultivo o cultivo de heces es el mtodo utilizado usualmente para la investigacin de las bacterias productoras de diarrea aunque en realidad solamente es capaz de detectar el agente etiolgico en un 60- 80% de los procesos a vendado solamente un 20% sin identificar englobados en el trmino de sndrome diarreico inespecfico. Dentro el conjunto de la flora normal hay que buscar los microorganismos patgenos eventualmente presentes. En ciertos casos, estos patgenos son abundantes y pueden suplantar casi totalmente a la flora normal, siendo fcil su deteccin pero otras veces son pocas numerosas y su bsqueda resulta muy laboriosa, siendo indispensable utilizar tcnicas especiales de aislamiento selectivo. El coprocultivo rutinario ve en caminada fundamentalmente a la investigacin del entero patgeno ms frecuente: salmonella, shigella y campylobacter, aunque simultneamente pueden detectarse otros patgenos como yersinia, Vibrio, aerononas, y staphylococcus, y cndida Pseudomonas y otras bacterias, en los mismos medios de cultivo conviene investigar separadamente, adems, otros patgenos frecuentes por otros mtodos, un solo coprocultivo negativo no

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significa que no halla enfermedad. Se recomienda realizar cuando menos tres de estos si el cuadro clnico del paciente siguiere infeccin bacteriana, no obstante la presencia de un cultivo negativo pre someterse a la prueba los contactos personales del paciente para prevenir que la infeccin se disemine.

Procesar urocultivo
El urocultivo se utiliza para diagnosticar bacteriuria, la orina constituye un mtodo excelente para cultivar la mayor parte de microorganismos que infectan el aparato urinario. La combinacin de piuria con bacteriuria considerable sugiere la presencia de una infeccin urinaria. UTILIDAD CLINICA: 1- CUANDO LOS SINTOMAS INDICAN UNA POSIVLE INFECCION URINARIA COMO: Dolor, sensacin de calor al orinar, urgencia frecuente de orinar. 2- cuando un paciente esta canalizado por largo tiempo aunque no muestre sntoma de infeccin. 3- en mujeres embarazados para monitoreas cualquier bacteria en la orina que pueda causar algn problema al bebe. RECOLECCION DE LA MUESTRA PARA CULTIVO: La muestra ideal es la primera de la maana debido a que la cuenta bacteriana es mayor. Se requiere de 3 a 5 ml de orina reciente en un recipiente estril, tambin se puede obtener mediante una sonda uretral, supra pbica o permanencia. La muestra para urocultivo no se toman de bolsas recolectoras de orina que forman parte del sistema de drenaje atraves de una sonda. Se lleva la orina al laboratorio y se examina lo ms pronto posible de no ser as la orina se puede refrigerar hasta 2 hrs antes de sometera a cultivo. En caso que el diagnostico sea de citomegavirus, deber mantenerse a temperatura ambiental ya que la refrigeracin destruye a los virus. Para establecer bacteriuria, se toman 2 muestras sucesivas del chorro medio. Las muestras se deben de obtener antes de un tratamiento con antibiticos. El personal de salud instruye al paciente respecto de la tcnica adecuada para recolectar la muestra. La muestra de orina se cubre y el recipiente se rotula y se incluye lo siguiente informacin: Ficha de identificacin, nombre del mdico, diagnostico probable, mtodo de recoleccin, hora en que se obtuvo la muestra. Administracin de lquidos forzados.

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Procesar exudado farngeo

Un exudado farngeo es la toma de muestra que se realiza mediante el uso de un hisopo estril el cual es introducido a la boca basndonos solo en la toma de muestra ya sea en las amgdalas o en donde nosotros observemos que existe muestra para toma. El hisopo se introduce y se dan vueltas sobre la muestra a fin de que todo nuestro hisopo quede impregnado de la muestra. Se prosigue a sembrar en medio del cultivo, tomando como los ms nutritivos agar sangre y agar chocolate, se pueden usar tambin el Mc Conkey, entre otros despus se procede a incubar a 37c y observar resultados en 48 horas. La garganta puede doler al momento del examen e igual se pueden experimentar una sensacin de nauseas cuando se toca la parte posterior de la garganta con el aplicador del algodn, pero el examen solo dura unos cuantos segundos. El examen se realiza cuando se sospecha de una infeccin en la garganta, en particular una faringitis estreptoccica.

Caractersticas de exudado vaginal

El exudado vaginal es remitido al laboratorio para el diagnstico de vaginitis, una inflamacin del equilibrio de la flora vaginal sin inflamacin. La infeccin vaginal es frecuentemente la causa de molestias en la mujer adulta y los sntomas de vaginitis son los sntomas de ndole ginecolgica que con ms frecuencia ven los gineclogos y mdicos de atencin primaria. La vagina bacteriana es la causa ms frecuente de la consulta de la mujer por sntomas vaginales (40 50% ) seguida por candidiasis ( 20- 25% ) y tricomoniasis (1520%) . La causa de vaginitis/vaginosis no puede determinarse solo sobre la base de los sntomas clnicos o el examen fsico. Para realizar el diagnstico correcto se requiere la evolucin macroscpica del exudado vaginal. Los mtodos de cultivo son menos tiles para el diagnstico de algunas entidades vaginales. La evaluacin microscpica requiere evaluar tres caractersticas: I. Aspecto de las clulas epiteliales II. Aspecto del germen dominante y/o morfotipos presentes III. La presencia o ausencia de leucocitos Este exudado se puede realizar para determinar la causa de vaginitis, flujo vaginal inusual u otros signos de infeccin y para la deteccin de enfermedades de transmisin sexual.

Caractersticas de exudado uretral

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Se realiza cuando hay una secrecin de la uretra. Con este examen se pueden detectar enfermedades de trasmisin sexual, como gonorrea y clamidia. Ante un paciente con conducta sexual de riesgo, que se presenta con cuadro clnico como el analizado se impone al diagnstico de uretritis. Si se dispone los medios, siempre es recomendable la realizacin de un exudado uretral de lo contrario de igual se realiza tratamiento ya que lo fundamental es cortar la cadena epidemiolgica a travs del tratamiento precoz y adecuado, disminuyendo as el contagio y evitando las complicaciones. El exudado uretral debe obtenerse por lo menos unas 4 horas despus de la ltima miccin. Esto es en especial relevante cuando la secrecin uretral no es muy abundante ya que el efecto de lavado, de arrastre de la orina, puede impedir una toma de buena calidad.

Practicas, reportes y evidencias.

PRACTICA #1
CULTIVOS DE ENTEROBACTERIAS O/Y IDENTIFICACION (COPROCULTIVO). FUNDAMENTO DE LA PRCTICA: El coprocultivo sirve para identificar Enterobacterias e infecciones del tracto intestinal y en diferentes regiones del cuerpo. Material y equipo: Matraces Erlenmeyer de 250 ml Agua destilada Cajas de petri Probeta Balanza Hisopo Gasa Algodn Mechero de bunsen Asa bacteriolgica

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 Papel estraza Cinta testigo Autoclave Estufa bacteriolgica Medio de cultivo: Mc Conkey Agar. EM AGAR SS AGAR XLD AGAR VB AGAR PROCEDIMIENTO: 1. Primero se preparan los medios de cultivo, pesando los medios en la balanza y en pedazo de papel estraza. 2. Vaciar el agar pesado a un matraz Erlenmeyer de 250 ml el cual contiene cierta cantidad de agua destilada inmediatamente agregarle el agua restante. 3. Agitar el matraz y calentar en la flama del mechero de bunsen hasta una disolucin completa. 4. Los medios va disueltos que requieran esterilizacin se introducen en el autoclave a una presin de 15 libras que equivale a 121 C durante 15 minutos; los que no requieren esterilizacin se pasan inmediatamente a las cajas de petri. 5. Una vez preparados los medios y las cajas de petri se dejan depositadas, gelificar para su posterior uso. PROCEDIMIENTO PARA SEMBRAR LA MUESTRA: 1. Con un hisopo se toma la muestra biolgica (materia fecal) 2. Se inocula con el hisopo el medio de cultivo y posteriormente con el asa previamente flameada y enfriada se distribuye la muestra con la tcnica de la estra cruzada. 3. Repetir la misma operacin con cada medio de cultivo al final del hisopo esto se quema en la flama del mechero. Una vez sembrados los medios se llevan a la estufa bacteriolgica para incubarse durante 24 hrs. 4. Despus de las 24 hrs se observa el desarrollo de las colonias de bacterias, anotando sus observaciones. 5. Una vez observadas las caractersticas de las colonias de bacterias se procede a sembrar en los tubos de bioqumica empleando el asa bacteriolgica recta de la siguiente manera TSI: Se siembre por picadura y estra en la superficie. LIA: Se siembre por picadura y estra en la superficie. CITRATO: Se siembra por estra en la superficie. MIO: Por picadura sin mover el asa.

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UREA: Si es slido es por estra en la superficie y si es liquido por picadura sin agitar. MALONATO: Por picadura sin agitar Una vez sembrados los tubos de bioqumica se llevan a la estufa bacteriolgica e incubar de 13 a 24 hrs. Trascurriendo las 24 hrs se anotan las aportaciones de cada tubo.

REPORTE DE LA PRACTICA N 1
Comenzamos esta prctica con la preparacin de los medios de aislamiento y los tubos de bioqumica. Graduamos la balanza granataria, pesamos 6g de agar Salmonella y Shigella el cual ya habamos calculado con la regla de 3. Depositamos en el matraz la mitad de agua que utilizamos, luego agregamos los gramos de agar al matraz, vertimos el restante de agua destilada al matraz y lo agitamos para diluir. Posteriormente procedimos a preparar los tubos de bioqumica. Pesamos 1.3g de agar de hierro de Kliger (TSI), el cual ya habamos calculado con la regla de 3. Depositamos en el matraz la mitad de agua, luego agregamos los gramos de agar al matraz, vertimos el restante de agua destilada y agitamos para diluir. Calentamos el matraz con el agar de TSI, ya disuelto, en el mechero de bunsen agitamos continuamente y retirbamos para evitar su calentamiento prolongado. El maestro lleno los tubos de ensaye y los tapo con algodn. Despus llevamos a calentar el matraz con el agar Salmonella y Shigella, ya disuelto, al mechero de bunsen. Llene mi caja de petri con las medidas de esterilizacin necesarias. Deje solidificar, coloque los datos y llevamos las cajas al refrigerador. Los tubos de ensaye los llevamos al autoclave y posteriormente al refrigerador. Tomamos un poco de la muestra de copro y procedimos a inocular la muestra en nuestros medios de aislamiento. Flameamos un aza de platino, la enfriamos y sembramos nuestra muestra biolgica aplicando la tcnica de estra cruzada.

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Ya que realizamos la estra, coloque mis datos y llevamos el medio a incubar en la estufa bacteriolgica a 37 por 24hrs. Transcurridas las 24hrs retiramos los medios de aislamiento de la estufa bacteriolgica. Observamos: MCK= Lac (+) EMB= Lac (+) SS= Lac (-) XLD= Lac (+) Procedimos a sembrar en nuestros tubos de bioqumica. Llevamos los tubos a incubar a la estufa bacteriolgica a 37c por 24hrs. Transcurridas las horas observamos los resultados.

Resultados: MIO Movilidad: Mov (+) Indol: Indol (-) Ornitina: Orn (+) TSI: A/K= Acido/ Alcalino Lac (+) Gas (-) H2s (-) LIA: Lis (+) K/K CIT: Cit (+) MALONATO: Mal (+) UREA: Ur (-)

Enterobacteria:

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Aerobacter aerogenes (+)

EVIDENCIAS

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PRACTICA #2
BACTERIAS GRAM NEGATIVAS NO FERMENTADORAS (BGNNF) El termino no fermentadora se refiere a un grupo de bacterias Gram negativas que son incapaces de utilizar carbohidratos, o bien que si los utilizan los degradan pero no por la fermentacin si no por la va oxidativa. Este grupo de bacterias se encuentra integrado por varios gneros y todos tienen la capacidad de crecer en gelosa sangre, medio utilizada para los aislamientos. Las pruebas principales que se toman en cuenta por sospechar de alguno de estos gneros son las siguientes: a) Lectura del TSI -. Cuando en este tubo se observa un color rojo en el pico de flauta y un color naranja en el fondo lo cual sugiere la presencia de BGNNF. b) Reaccin de la oxidasa -. Toda bacteria que desarrolle en Gelosa sangre y que la prueba de la oxidasa sea (+), se debe sospechar de una BGNNF. No todas las bacterias de este grupo son oxidasa (+). c) Incapacidad de crecer en agar Mc Conkey -. Toda bacteria Gram negativa que desarrolle en gelosa sangre y no desarrolle en agar Mc

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Conkey debe de sospecharse de una BGNNF. Aunque existen algunas que si desarrollan. Para identificar los gneros ms comunes de este grupo se utiliza el esquema de Kin Weber y consiste en las siguientes pruebas: 1-. Se realiza un frotis y se determina si son BGN. 2-. Determinacin del metabolismo de la glucosa; para ello se utiliza el medio de Hugh-Leifson conocido como medio O-F, este medio es semislido y para la prueba se emplean 2 tubos. A uno de los tubos se le agrega aceite mineral despus de haber sido sembrado para darle las condiciones de anaerobiosis y el otro tubo sin aceite para darle las condiciones de aerobiosis. Con esos tubos se obtienen los siguientes resultados: a) Metabolismo oxidativo-. Solo cuando se produce un pH acido en el tubo sin aceite; cambiando de color el medio de verde a amarillo (la parte superior). b) Metabolismo fermentativo-. Se produce un pH acido en ambos tubos cambiando de color de verde a amarillos los 2 tubos. c) Metabolismo no sacaroltico o inerte-. No se produce pH acido y solo el tubo sin aceite presenta un cambio en la parte superior de verde a azul. 3-. Desarrollo en agar Mc Conkey-. Se debe determinar observando el desarrollo o no de la bacteria en el Agar. 4-. Produccin de la citocro-oxidasa-. Para ello se utiliza un papel filtro impregnado con un reactivo de N-N dimetilortoparadifenilendiamina, se le agrega con un aplicador de madera un inoculo del cultivo en base agar sangre. La apariencia de un color lila a morado indica que se produce la enzima y se reporta como oxidasa (+); y si no se presenta cambio alguno indica que no se produce la enzima y se reporta como oxidasa (-). 5-.Determinacion de la movilidad-. Se siembra la bacteria a identificar en el medio MIO o SIM. Si se enturbia en el fondo o crece en la superficie en forma de sombrilla la movilidad es positiva y si se observa transparente el fondo la movilidad es negativa. Los gneros de BGNNF que pueden ser identificados por esta prueba son: Pseudomonas Acinetobacter Flavobacterium Bordetella Moraxella Stenotrophomonas Alcalgenes

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REPORTE DE LA PRACTICA N 2
Comenzamos esta prctica con la preparacin de los medios de cultivo agar Mc Conkey y los tubos de bioqumica. Posteriormente procedimos a sembrar la cepa en los medios de agar Mc Conkey y los tubos de bioqumica. Por ltimo llevamos los medios a la estufa bacteriolgica para incubar por 24hrs y observamos los resultados.

Resultados: Negativo a BGNNF No era una Bacteria Gram Negativa No Fermentadora porque creci en el medio de Agar Mc Conkey.

EVIDENCIAS

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Glosario
Aminoglucosidos: Los aminoglucsidos o aminsidos son un grupo de
antibiticos bactericidas que detienen el crecimiento bacteriano actuando sobre sus ribosomas y provocando la produccin de protenas anmalas. Actan a nivel de ribosomas en la subunidad 30S bacteriana, y por ende, a nivel de sntesis de protenas, creando porosidades en la membrana externa de la pared celular bacteriana. Tienen actividad especialmente en contra de bacterias Gram negativas y aerbicas y actan sinergsticamente en contra de organismos Gram positivos.

Bacteriocinas: sustancia proteica y antignica elaborada por ciertas cepas virulentas microbianas, capaces de lisar otras cepas no virulentas de estos mismos grmenes. Clamidia: La infeccin por clamidia es una enfermedad de transmisin
sexual (ETS) frecuente, causada por la bacteria Chlamydia trachomatis, que puede afectar los rganos genitales de la mujer. Aunque generalmente la infeccin por clamidia no presenta sntomas o se manifiesta con sntomas leves, hay complicaciones graves que pueden ocurrir en forma silenciosa y causar daos irreversibles, como la infertilidad, antes de que la mujer se d cuenta del problema. Esta infeccin tambin puede causar secrecin del pene en un hombre infectado.

Endocarditis: inflamacin aguda o crnica del endocardio. Enterobacteriaceae: son una familia de bacterias Gram negativas que contienen ms de 30 gneros y ms de 100 especies que pueden tener morfologa de bacilos o cocos. Fenotpicas: lo constituyen los caracteres externos, formas que se delinean por la alimentacin, el trabajo, los accidentes y caractersticas que no dependen del cromosoma x y el y en el momento de la fecundacin. Fmites: objetos de uso personal del enfermo o portador, que pueden estar contaminados y transmitir agentes infecciosos. Gonorrea: La gonorrea es una enfermedad de transmisin sexual (ETS),
causada por una bacteria. La gonorrea puede crecer y multiplicarse fcilmente

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en reas hmedas y tibias del aparato reproductivo, incluidos el cuello uterino (la abertura de la matriz), el tero y las trompas de Falopio (tambin llamadas oviductos) en la mujer, y en la uretra (conducto urinario) en la mujer y el hombre. Esta bacteria tambin puede crecer en la boca, la garganta, los ojos y el ano.

LCR: liquido cefalorraqudeo. Lipofilicas: que tienen afinidad por las grasas y gran solubilidad en los lpidos. Organotrofas: requieren compuestos orgnicos. Osteomielitis: inflamacin simultnea del hueso y de la medula sea. Peptidoglicano: es un copolimero formado por una secuencia alternante de N-acetil-glucosamina y el acido Nacetilmuramico unidos mediante -1,4. Plasmoptisis: la clula se llena de agua y si la membrana y pared no resisten la presin osmtica la clula estalla. Pleomorfas: organismos bacterianos que varan en cuanto a forma durante su ciclo vital. Sacarolticas: capaz de hidrolizar el azcar.

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Bibliografa
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