DA VIDA

OS SERES VIVOS DIVERSIFICAM OS PROCESSOS VITAIS

EXPERIMENTO

DIVERSIDADE

Anlise do crescimento de leveduras - Aula 2

Verso: agosto 18, 2011 4:30 PM

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1. Resumo
Neste experimento, sero observados ao microscpio os cultivos feitos na aula anterior para verificar a influncia da disponibilidade de nutrientes e da variao da temperatura no desenvolvimento de leveduras. Sero preparados tambm outros cultivos para avaliar a influncia da variao de pH.

2. O experimento 2.1 Materiais

Alquotas das seis solues de leveduras preparadas na aula anterior, submetidas a diferentes tratamentos; 9 lminas; 9 Lamnulas; Bqueres; 3 frascos de 50 mL; Liquidificador; Microscpio; Mquina fotogrfica digital; Fotos tiradas na aula anterior; Pipetas Pasteur; Colheres de ch; Termmetro; cido actico (vinagre); Bicarbonato de sdio; Acar; tablete de fermento fresco; gua destilada.

Figura 1: Materiais necessrios.

2.2 Procedimento
Professor, pea para que cada grupo de alunos se divida em dois subgrupos. Uma parte dos alunos dever preparar novas lminas a partir das solues A a F, preparadas na aula anterior e deixadas em diferentes temperaturas. Os demais alunos ficaro encarregados de preparar novas solues (G, H e I) e novas lminas para a realizao de um outro experimento, que avaliar a influncia do pH sobre o crescimento das leveduras. Por fim, todos os membros do
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grupo devero observar todas as lminas que foram preparadas pelos dois subgrupos. Recomendamos tambm que respondam s questes propostas.

2.2.1 Protocolo experimental

Comparao do crescimento de leveduras em diferentes meios submetidos a diferentes temperaturas Preparo das lminas 1) Aps 24 horas de incubao em temperaturas diferentes, montar lminas com as amostras preparadas na aula anterior para serem observadas ao microscpio; 2) Medir e registrar a temperatura da geladeira e a temperatura ambiente (mdia do dia); 3) Observar ao microscpio e fotografar cada amostra;

Figura 2: Frasco A contendo somente soluo de leveduras. (A) 0h de cultivo e (B) 24h de cultivo na geladeira. Aumento de 500x.

A B Figura 3: Frasco B contendo somente soluo de leveduras. (A) 0h de cultivo; e (B) 24h de cultivo temperatura ambiente. Aumento de 500x.

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Nos frascos A e B, que contm somente leveduras (Figuras 2 e 3), espera-se que as clulas tenham se reproduzido mais e estejam mais numerosas, em comparao ao cultivo mantido na geladeira (Figura 2B).

Figura 4: Frasco C contendo soluo de leveduras e acar (A) 0h de cultivo, e (B) 24h de cultivo na geladeira. Aumento DE 500x.

Figura 5: Frasco D contendo soluo de leveduras e acar (A) 0h de cultivo, e (B) 24 h de cultivo temperatura ambiente. Aumento de 500x.

Nos frascos C e D, que contm acar e leveduras, espera-se um aumento do nmero de clulas, ou seja, da reproduo das leveduras, tanto no cultivo que ficou na geladeira (Figura 4B), quanto no que ficou em temperatura ambiente. Entretanto, o processo mais intenso temperatura ambiente (Figura 5B).

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B A Figura 6: Frasco E contendo acar e gua (A) 0h de cultivo e (B) 24h de cultivo na geladeira. Aumento de 1000x.

B A Figura 7: Frasco F contendo acar e gua (A) 0h de cultivo e (B) 24h de cultivo temperatura ambiente. Aumento de 1000x. Os frascos E e F, sem leveduras, no devero apresentar alteraes. Eventualmente, sero observados pequenos pontinhos mveis, tratando-se de contaminao por bactrias, o que tambm costuma ocorrer nos frascos com leveduras. Prepao do material para verificar a influncia do pH no crescimento das leveduras Preparo dos frascos G, H e I: 1) Preparar uma soluo saturada de bicarbonato de sdio, contendo 100 mL de gua destilada (aproximadamente copo americano) e duas colheres de ch de bicarbonato de sdio em p; 2) Preparar uma soluo de acar (uma colher de ch de acar em 50 mL de gua); 3) Preparar a soluo de levedura no liquidificador com meio tablete de fermento fresco e 500 mL de gua fria; 4) Preparar trs frascos de cultura conforme a tabela abaixo: Frasco G H I Soluo de leveduras 15 mL 15 mL 15 mL Acar 1 colher de ch 1 colher de ch 1 colher de ch gua 10 mL - - Bicarbonato de sdio - 10 mL Vinagre 10 mL

OBS.:Usar um copo-medida (V.O.) de medicamentos lquidos. Verso: agosto 18, 2011 4:30 PM

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5) Colocar uma gota de cada soluo na respectiva lmina, j devidamente identificada. Observar ao microscpio e registrar atravs de fotografia;

Figura 8: Frasco G contendo soluo de leveduras, acar e gua. Aumento de 500x.

Figura 9: Frasco H contendo soluo Figura 10: Frasco I contendo soluo de leveduras, acar e bicarbonato de de leveduras, acar e vinagre. Aumento de 500x. sdio. Aumento de 500x.

6) Cultivar por dois dias em temperatura ambiente. Os resultados da influncia do pH do meio no crescimento de leveduras sero observados na prxima aula.

3. Sugesto de roteiro de trabalho

A seguir, sugerimos um roteiro de trabalho para ser utilizado na ntegra ou adaptado que poder ser entregue aos alunos. Ele contm todas as orientaes necessrias para o desenvolvimento da aula prtica e tambm algumas questes que auxiliaro no encerramento da atividade.

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PRTICA LABORATORIAL DE BIOLOGIA Anlise do crescimento de leveduras Aula 2 Nome: __________________________ N_____ Srie: _____ Data: ________ Objetivo da aula prtica
Neste experimento, ser verificada a influncia da disponibilidade de nutrientes, da variao da temperatura e da variao do pH no desenvolvimento de leveduras.

Protocolo Experimental Materiais

Alquotas das seis solues de leveduras preparadas na aula anterior, submetidas a diferentes tratamentos; 9 lminas; 9 Lamnulas; Bqueres; 3 frascos de 50 mL; Liquidificador; Microscpio; Mquina fotogrfica digital; Fotos tiradas na aula anterior; Pipetas Pasteur; Colheres de ch; Termmetro; cido actico (vinagre); Bicarbonato de sdio; Acar; tablete de fermento fresco; gua destilada.

Procedimento
Cada grupo dever se dividir em duas turmas e cada uma dever realizar o procedimento 1 ou o 2, abaixo. Preparo das lminas Comparao do crescimento de leveduras em diferentes meios submetidos a diferentes temperaturas 1) Aps 24 horas de incubao em temperaturas diferentes, montar lminas com as seis amostras preparadas na aula anterior para serem observadas ao microscpio; 2) Medir e registrar a temperatura da geladeira e a temperatura ambiente (mdia do dia); 3) Observar ao microscpio e fotografar cada amostra;

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Preparo dos frascos G, H e I Preparao do material para verificar a influncia do pH no crescimento das leveduras: 1 .Preparar uma soluo saturada de Bicarbonato de Sdio (100 mL de gua destilada e duas colheres de ch de bicarbonato de sdio em p); 2 .Preparar uma soluo de acar (uma colher de ch de acar em 50 mL de gua); 3 .Preparar a soluo de levedura no liquidificador com meio tablete de fermento fresco e 500 mL de gua fria; 4 .Preparar trs frascos conforme a tabela abaixo

Frasco G H I

Soluo de leveduras 15 mL 15 mL 15 mL

Acar 1 colher de ch 1 colher de ch 1 colher de ch

gua 10 mL - -

Bicarbonato de sdio - 10 mL -

Vinagre 10 mL

5.Colocar uma gota de cada soluo na respectiva lmina devidamente identificada, conforme feito na aula anterior, observar ao microscpio e registrar atravs de fotografia; 6.Incubar por 24 horas em temperatura ambiente. 7.Para a prxima aula, trazer as fotos das lminas G, H e I impressas. Os resultados da influncia do pH do meio no crescimento de leveduras sero observados na prxima aula.

Questo
Compare as fotografias das lminas dos frascos A a F feitas na aula anterior com as lminas observadas nessa aula, quanto presena ou ausncia de leveduras; presena ou ausncia de muitas clulas em processo de brotamento e quantidade de clulas. Frasco A Lmina em 0h de cultivo:

Lmina em 24h de cultivo:

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Frasco B Lmina em 0h de cultivo

Lmina em 24h de cultivo

Frasco C Lmina em 0h de cultivo

Lmina em 24h de cultivo

Frasco D Lmina em 0h de cultivo

Lmina em 24h de cultivo

Frasco E Lmina em 0h de cultivo

Lmina em 24h de cultivo

Frasco F Lmina em 0h de cultivo

Lmina em 24h de cultivo

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4. Referncias complementares
1. Cultivo e Crescimento de micro-organismos. Condies fsicas para o cultivo de microorganismos. In: Curso de Microbiologia Bsica. Disponvel em: http://www.livronline.com/servicos/gratuitos/mb1504/indice.html Acesso em: 17/12/2009

2. Espionando: No mundo dos fungos. Artigo do site do Ministrio da Sade e Fiocruz sobre fungos. Gatti, M. Disponvel em: http://www.invivo.fiocruz.br/cgi/cgilua.exe/sys/start.htm?infoid=104&sid=2 Acesso em: 17/12/2009

3. Eca! O fermento um fungo. Artigo do site do Ministrio da Sade e Fiocruz sobre fermento e a produo de po. Disponvel em: http://www.invivo.fiocruz.br/cgi/cgilua.exe/sys/start.htm?infoid=819&sid=2

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FICHA TCNICA
Universidade Estadual de Campinas Reitor: Fernando Ferreira Costa. Vice-reitor: Edgar Salvadori de Decca. Pr-reitor de ps-graduao: Euclides de Mesquita Neto. Instituto de Biologia Diretora: Shirlei Maria Recco Pimentel. Diretor Associado: Flavio Antonio Mas dos Santos.

EXECUO

Projeto EMBRIAO Coordenao geral: Eduardo Galembeck. Coordenao de Mdia - Audiovisuais: Eduardo Paiva. Coordenao de Mdia - Software: Eduardo Galembeck. Coordenao de Mdia - Experimentos: Helika A. Chikuchi, Marcelo J. de Moraes e Bayardo B. Torres. Apoio Logstico/Administrativo: Eduardo K. Kimura, Gabriel G. Hornink, Juliana M. G. Geraldi.

OBJETO DE APRENDIZAGEM

Anlise do crescimento de leveduras - Aula 2 Coordenao do experimento: Bianca Caroline Rossi Rodrigues. Redao: Bianca Caroline Rossi Rodrigues, Maurcio Aurlio Gomes Heleno, Helika A. Chikuchi e Eduardo Galembeck. Pesquisa: Bianca Caroline Rossi Rodrigues, Maurcio Aurlio Gomes Heleno, Gislaine Lima Marchini e Roney Vander dos Santos. Reviso de Contedo: Daniela Kiyoko Yokaichiya, Helika A. Chikuchi e Cristiane Zaniratto. Testes de Bancada e Captura de Imagens: Gislaine Lima Marchini e Roney Vander dos Santos. Edio de Imagem: Florencia Mara Pin Pereira Dias. Adequao Lingustica: Lgia Francisco Arantes de Souza e Raquel Faustino. Diagramao: Henrique Oliveira e Thais Goes.

A Universidade Estadual de Campinas autoriza, sob licena Creative Commons Atribuio 2.5 Brasil - cpia, distribuio, exibio e execuo do material desenvolvido de sua titularidade, sem fins comerciais, assim como a criao de obras derivadas, desde que se atribua o crdito ao autor original da forma especificada por ele ou pelo licenciante. Toda obra derivada dever ter uma Licena idntica a esta. Estas condies podem ser renunciadas, desde que se obtenha permisso do autor. O no cumprimento desta licena acarretar nas penas previstas pela Lei n 9.610/98.

Laboratrio de Tecnologia Educacional Departamento de Bioqumica Instituto de Biologia - Universidade Estadual de Campinas UNICAMP Rua Monteiro Lobato, 255 CEP 13083-862, Campinas, SP, Brasil

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