EFECTO TXICO DE MACROQUISTES DE Sarcocystis aucheniae H. EN RATONES SILVESTRES Carhuapoma, V. 1*, Castillo, R. 1 Snchez, V. 2 Medina, D.

3 RESUMEN La investigacin fue realizado en el Laboratorio Central de la Universidad Nacional de Huancavelica.Se inocularon Lisado de Macroquistes de Sarcocystis aucheniae (LMSA) en ratones silvestres (36) con la finalidad de evaluar su actividad biolgica. El objetivo fue probar la efectividad de letalidad y toxicidad del inoculo a concentraciones de 5, 10 % y a dosis de 0.5, 1 ml. Las manifestaciones clnicas y la accin letal del LMSA en ratones fue dependiente de las dosis y concentraciones administradas de 50, 100 g de protena por g de P.V. Los parmetros evaluados fueron signos clnicos que consistieron en temperatura, frecuencia cardiaca, diarrea y supervivencia. En el examen histopatolgico se observaron las alteraciones en diferentes rganos, siendo el pulmn y el rin los ms afectados, mostrando severa hiperemia, neumonitis y degeneracin e hiperplasia de los rganos. Todos los ratones tratados murieron entre las 4 a 72 horas de pos inoculacin. Los ratones no inoculados con suero fisiolgicos (Testigo), no mostraron alteraciones histopatolgicas en los diferentes rganos, ni cambios de signos clnicos entre las 4 y 72 horas de pos-inoculacin. En conclusin, los resultados evidencian la presencia de toxicidad y letalidad con mayor efectividad a concentraciones de 5 % y a dosis de 1ml. de LMSA.

Palabras clave: Inculo, letalidad, Macroquistes, ratn, Sarcocystis,

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Estudiantes de pregrado de La Universidad Nacional de Huancavelica. Docentes de la Universidad Nacional de Huancavelica de EAP. Zootecnia. Docente Principal de la Facultad de Ciencias Biolgicas de la Universidad De

3.

Trujillo. Autor para correspondencia:carhuapoma 22@hotmail.com

ABSTRACT The investigation was conducted at the Central Laboratory of the Universidad Nacional de Huancavelica. Macrocystic lysate of Sarcocystisaucheniae (LMSA) was inoculated into wild mice (36) in order to evaluate their biological activity. The aim was to test the effectiveness of lethality and toxicity of the inoculum at concentrations of 5, 10 and at doses of 0.5 ml. The clinical and LMSA lethal action in mice was dependent on the doses and concentrations administered 50, 100 g of protein per g of P.V. Clinical signs consisted of temperature, heart rate, diarrhea and survival. At pathological examination abnormalities were observed in various organs, being lung and kidney the most affected, showing severe congestion, pneumonitis, arterial spasm, arteriolar and degeneration and hyperplasia of the organs. All treated mice died between 4 to 72 hours post-infection. Non-inoculated mice showed no clinical signs or alterations in pathological examination between 4 and 72 hours post-infection.In conclusion, the results show the presence of toxicity and lethality most effectively at concentrations of 5% doses of 1ml of LMSA Keywords: inoculum, letalidad, Macrocystis, mouse, Sarcocystis, INTRODUCCIN La crianza de los camlidos domsticos, alpacas y llamas, es una de las actividades de mayor importancia e impacto en el desarrollo socio econmico de la poblacin alto andina de nuestro pas .El 74% de la poblacin huancavelicana vive en la zona rural alto andina, de los cuales el 85% se dedica a esta actividad y el Sarcocystisaucheniae (SA) causa infecciones importantes en alpacas y llamas (Mamani et al., 2004).La carne de camlidos es rica en protenas, conteniendo 21.274 % la alpaca y 24.821% la llama; siendo adems una carne que tiene poca grasa y poco contenido de colesterol. Asimismo, el alimento principal en el antiguo Per fue la carne de camlidos domsticos (alpacas y llamas), siendo una de los principales fuentes proteicas abundantes como resultado de una seleccin correspondiente a un sabio manejo (Franklin et al.,2003).El gnero Sarcocystis incluye especies altamente patgenas para bovinos (Uggla, 1990), cerdos (Perovic, 1991; Freyre et al., 1992), ovinos, camellos (Hilali y Nassar, 1992; Svobodoka, 1991), caballos (Gunn y Frher, 1992), cabras (Kudi

y Aganga, 1991), incluyendo animales silvestres como tejones, ratas, bfalos y monos, entre otros(Sam y Mansilla, 1998). En el Per el Sarcocystisaucheniae (SA) causa infecciones importantes en alpacas y llamas (Guerrero et al., 1967). La infeccin por S. aucheniae o sarcocistiosis, se traduce en importantes prdidas econmicas de la produccin alpaquera derivada no slo de la disminucin de la produccin y la productividad animal, sino por la prdida de su valor comercial y/o el decomiso de la carcasa. Esta enfermedad es reconocida como una zoonosis parasitaria (Legua, 1988).Se reconoce que, los Sarcoquistes se encuentran adaptados en msculo y sistema nervioso central, sin aparente reaccin del animal infectado. Se presume la ruptura de algunos Sarcoquistes en algn momento de la infeccin con probable liberacin de productos txicos, no existiendo claridad sobre el rol que juega en los procesos de Sarcocistiosis crnica (Tadros y Laarman, 1982). La actividad neurotxica fue demostrada por Hiepe et al. (1981) denominando al producto como Sarcocistina. Este producto ha sido considerado como una endotoxina de accin en msculo cardaco y tejido nervioso gastrointestinal (Briggs y Foreyt, 1985). Estudios preliminares utilizando protena de bradizoitos de Macroquistessonicados (5 mg/lml) de S. aucheniae, demostr su accin letal en conejos (Sam, 1988). As Mismo, existen evidencias de trastornos gastroentricos en personas que consumieron carne cruda infectada con SA (Legua, 1989), y con S. hominis(Lesk, A. 2000). Los antecedentes anteriormente mencionados no reportan sobre el efecto letal de

diferentes extractos de Sarcocystis en animales silvestres y la falta de informacin sobre el efecto biolgico de Sarcocystisaucheniae en ratones silvestres motiv el presente estudio, con el objetivo de determinar el efecto toxico de Sarcocystisaucheniae en ratones silvestres machos. MATERIALES Y MTODOS El presente estudio se realiz por un periodo de 3 meses, en el Laboratorio Central de Investigacin, rea de Sanidad Animal de la Universidad Nacional de Huancavelica, ubicado a 2 km. De la ciudad de Huancavelica y a 3780 m.s.n.m. con temperaturas que tienen una variacin entre 15-18C y de 8-5C. El objetivo de la presente

Investigacin fue probar la letalidad del inculo de lisado de Macrosquistis a concentraciones de 5, 10 % a dosis de 0.5 y1 ml.

Para el estudio se utilizaron 36 ratones silvestres machos con un peso promedio de 150g aproximadamente provenientes de las zonas alto andinas de la Comunidad de Santa Brbara - Huancavelica. Estos animales fueron instalados en jaula modelo para su estudio , inoculados a concentraciones de 10% 5% y suministrados a dosis de 0.5 y 1ml de inculo de lisado de Magroquistis de sarcocistiosisauchiniae para el tratamiento 1 , para el tratamiento 2 concentraciones de 10% 5% y suministrados a dosis de 0.5,1ml de lisado de Magroquistis de sarcocistiosisauchiniae con concentraciones de 50, 100 g de protena por g de P.V y en el tratamiento 3 se suministr dosis de 0.5,1ml de suero fisiolgico, con la finalidad de encontrar la letalidad del inoculo. El estudio se evalu por un tiempo de 30 das y las evaluaciones se realizaron a los 4, 8, 10,12 y 72 horas pos-inoculados. Las evaluaciones consistieron en la medicin de la temperatura, frecuencia cardiaca, presencia de diarrea y supervivencia. De igual forma se realiz el examen histopatolgico de los rganos (pulmn, hgado, rin, corazn e intestinos). Se utiliz el diseo completamente al azar con arreglo factorial de 3*2 y la prueba de Tukey (P< 0.05) para comparacin de medias, y los clculos se realizaron en el programa de SAS versin 7. RESULTADOS Y DISCUSIN Los ratones sometidos al tratamiento T1(Inoculo10%- dosis 1ml.), demostr mayor letalidad y toxicidad de lisado del inculo de Macroquistis presentando diarrea, altas temperaturas, alteracin de frecuencia respiratoria, inestabilidad, anorexia, postracin y muerte de ratonesa 4 horas pos-inoculacin, mientras que a dosis de 0.5ml estas alteracin presento a 6 horas pos-inoculacin y no llegando a sobrevivir a los 17 horas de evaluacin, y los ratones sometidos al tratamiento T2 (inoculo 5%) demostr la efectividad de letalidad y toxicidad de lisado del inoculo de Macroquistis a los 8 horas pos-inoculacin y con dosis de 0.5ml el efecto dio a los 10 horas al final de la evaluacin todos los ratones no sobrevivieron a ms de 17 horas con ambas dosis. Los ratones del tratamiento T3 (testigo) no presentaron la toxicidad de signos clnicos del suero fisiolgico a dosis de l ml ni con dosis de 0.5ml. Nuestro resultado se asemeja con los trabajos de Duran (2004), donde indica que la letalidad de sustancia de los Macroquistes ocurre entre las 12 y 72 horas pos inoculacin en conejos, y de acuerdo con los reportes de Legua et al., (1988); Mansilla, (1993); Sam et al., (1998); Durn, (2004); Cspedes, (2005), quienes evaluaron en conejos y cobayos encontrando la

letalidad de lisado de Macroquistis a los 4 12 horas pos-inoculacin, los resultados coinciden con el estudio realizado.
Tabla N 01. Comparacin de media y desviacin estndar de la toxicidad del

Macroquistes de Sarcocystis aucheniae en ratones segn las variables de estudio (temperatura rectal, frecuencia respiratoria y sobrevivencia) U.N.H. Per (2010) TRATAMIENTOS Frecuencia Respiratorio Presenci a de Diarrea Temperatur a Rectal Frecuenci a de Sobrevive ncia(4- 17 horas) T1 Inculo10% T2 inculo 5% T3 suero fisiolgico
0.5ml 1ml. 0.5ml. 1ml. 0.5ml. 1ml. 64,17 2,01b 31,33 3,50
a c

10% 8% 18% 22% 22% 22%

19,46 2,34b 10,08 1,26 32,75 3,33

a c c

40% 0,0% 75% 25% 100% 100%

116,25 2,45 142,25 1,15 156,42 1,82

39,21 0,81 38,11 0,77

c c

c c

155,33 2,63

38,04 0,14

a b, b c a la prueba de Tukey (p<0,05)

Por otro lado se evaluaron alteraciones morfolgicas e histopatolgicas de los diferentes rganos, donde los tratamientos 1 y 2 demostraron la presencia de alteraciones morfolgicase histopatolgicas en rganos internos (hgado, rin, corazn, pulmn), mientras que el tratamiento T3 (suero fisiolgico), no presento alteraciones morfolgicas ni histopatolgicas en rganos internos de los ratones silvestres como se muestra en la tabla N 2. Estos resultados Coinciden con resultados con los reportes de Tadros y Laarman, (1982); Hiepe et al., (1981), que la actividad biolgica txica de extractos de S. auchiniae en conejos a dosis altas de 5 mg/ml. altera morfolgicamente y histopatologicamente los diferentes rganos, de igual los resultados coinciden con los reportes de Mansilla, (1993); Sam et al., (1998); Durn, (2004); Cspedes, (2005). Tabla: N2. Comparacin de promedios de alteraciones morfolgicas de los diferentes rganos internos de los ratones sometidos a diferentes tratamientos del inculo de lisado de Macroquistis (%).

TRATAMIENTOS

Hgado (%)

Rin (%)

Corazn (%)

Pulmn (%)

Intestinos (%)

T1 Inoculo10% T2 inoculo 5% T3 suero

0.5ml 1ml. 0.5ml. 1ml. 0.5ml. 1ml.

24.3 22.4 14.5 16.8 0.0 0.0 0.0 0.0

42.0 41.5 34.6 36.2

14.0 10.2 8,9 10.8 0.0 0.0

12.5 16.4 12.3 14.4 0.0 0.0

7.2 9.5 29.7 21.8 27.4 26.7

fisiolgico

CONCLUSIONES El inoculo de lisado de Macroquistes de Sarcocystis aucheniae a la concentracin de 10% y a dosis de 1ml fue letal para los ratones y no sobrevivieron a ms de 4 horas pos inoculacin, adems presentaron alteraciones morfolgicas como reduccin e incremento de tamao de los diferentes rganos (pulmn, hgado, riones, corazn) y alteraciones histopatolgicas.

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