SOCIEDAD DE MICROBIOLOGA CLNICA DE CASTILLA LA MANCHA (SOMICCAM)

MANUAL DE RECOGIDA DE MUESTRAS EN ATENCIN PRIMARIA PARA DIAGNSTICO MICROBIOLGICO

Coordinador: Daniel Tena Gmez

Autores

Seccin de Microbiologa. Hospital Universitario de Guadalajara. C/. Donante de sangre s/n. 19002 Guadalajara. Mara Elena Rodrguez Zurita

Daniel Tena Gmez

Seccin de Microbiologa. Hospital Universitario de Guadalajara. C/. Donante de sangre s/n. 19002 Guadalajara. Eva Heredero Glvez

Servicio de Microbiologa. Hospital Virgen de la Salud de Toledo. Avda. Barber s/n. 45004 Toledo. Esther Manrique Gonzlez

Laboratorio de Microbiologa. Hospital General de Tomelloso. Vereda de Socullamos s/n. 13700 Tomelloso (Ciudad Real). Soledad Illescas Fernndez-Bermejo Laboratorio de Microbiologa. Hospital Virgen de Altagracia. Avda. Emiliano Garca Roldn n 2. 13200 Manzanares (Ciudad Real).

NDICE INTRODUCCIN .......................................................................................... 5 NORMAS BSICAS GENERALES .............................................................. 6 1. MUESTRAS DEL TRACTO URINARIO 1.1. Orina (miccin media) ................................................................. 8 1.2. Orina en pacientes con sonda permanente .............................. 11 2. MUESTRAS DEL TRACTO RESPIRATORIO SUPERIOR 2.1. Exudado oral ............................................................................. 13 2.2. Exudado faringo-amigdalar ....................................................... 14 2.3. Aspirado y exudado nasofarngeo ............................................. 16 3. MUESTRAS DEL TRACTO RESPIRATORIO INFERIOR 3.1. Esputo ....................................................................................... 18 4. MUESTRAS DE OIDO 4.1. Exudado de odo externo .......................................................... 20 5. MUESTRAS OCULARES 5.1. Exudado conjuntival .................................................................. 22 6. MUESTRAS DE PIEL Y TEJIDOS BLANDOS 6.1. Exantema .................................................................................. 6.2. Escara ....................................................................................... 6.3. Exudado de absceso cerrado ..................................................... 6.4. Exudado de fstula ..................................................................... 24 27 29 32

6.5. Exudado de herida ................................................................... 34 6.6. Exudado de lcera vascular ................................................... 36 7. MUESTRAS DE PIEL Y FANERAS 7.1. Pelo ......................................................................................... 39 7.2. Raspado cutneo .................................................................... 41 7.3. Ua .......................................................................................... 43 8. MUESTRAS DEL TRACTO INTESTINAL 8.1. Heces ...................................................................................... 46 8.2. Test de Graham ........................................................................ 48 9. MUESTRAS DEL TRACTO GENITAL FEMENINO 9.1. Exudado endocervical .............................................................. 9.2. Exudado rectal/anal .................................................................. 9.3. Exudado uretral femenino ........................................................ 9.4. Exudado vaginal ....................................................................... 9.5. Exudado vulvar ......................................................................... 9.6. lcera genital ........................................................................... 10. MUESTRAS DEL TRACTO GENITAL MASCULINO 10.1. Exudado rectal/anal ................................................................ 10.2. Exudado uretral masculino ..................................................... 10.3. lcera genital ......................................................................... 10.4. Semen .................................................................................... 50 52 54 57 59 61 64 66 68 71

11. LQUIDOS ORGNICOS NORMALMENTE ESTRILES 11.1. Lquido sinovial ....................................................................... 73

12. MUESTRAS PARA ESTUDIO SEROLGICO 12.1. Plasma .................................................................................. 76 12.2. Suero ...................................................................................... 76 13. OTRAS MUESTRAS 13.1. Vesculas ................................................................................ 81 13.2. Pestaas ................................................................................ 82

INTRODUCCIN El diagnstico de las enfermedades infecciosas se basa en el estudio de los signos y sntomas clnicos, as como en la identificacin de los microorganismos causales. El diagnstico clnico es presuntivo en muchas ocasiones y requiere del laboratorio de microbiologa para conocer la causa de la infeccin.

La elaboracin del manual se ha realizado con un objetivo eminentemente prctico. Su edicin puede mejorar los resultados de nuestro trabajo y puede establecer un nexo de unin y colaboracin entre los laboratorios de microbiologa clnica de nuestra comunidad autnoma y los distintos centros de Atencin Primaria.

El objetivo del manual es realizar una puesta al da en la recogida, transporte y conservacin de las muestras microbiolgicas, sealando el material necesario, el procedimiento para obtenerlas, el volumen y nmero necesarios, las condiciones de transporte, y las caractersticas especiales que presentan algunas de ellas. En cada tipo de muestra se han incluido los procedimientos microbiolgicos ms habituales y una tabla en la que se detallan los microorganismos con significado clnico que pueden aislarse. Debe tenerse en cuenta que algunos microorganismos no se estudian de forma rutinaria y requieren tcnicas microbiolgicas especiales. En este sentido, la comunicacin entre el clnico y el laboratorio de microbiologa resulta esencial para el correcto procesamiento de las muestras.

La informacin diagnstica que proporciona el laboratorio de microbiologa depende de la calidad de la muestra recibida. Una muestra mal recogida, insuficiente o mal transportada puede imposibilitar la identificacin de los microorganismos causales, induciendo a errores diagnsticos e incluso a tratamientos antibiticos inadecuados. Este hecho es bien conocido por los microbilogos pero no por otros profesionales sanitarios. Por este motivo es necesaria la preparacin continuada del personal sanitario, al que hay que concienciar de la falsedad de los resultados obtenidos a partir del procesamiento de muestras recogidas o conservadas de forma inadecuada.

NORMAS BSICAS GENERALES

Cada muestra deber ir acompaada de un volante de peticin, principal mecanismo de comunicacin entre el mdico solicitante y el laboratorio, por lo que deber cumplimentarse de forma legible aportando los siguientes datos: 2. Datos del paciente: - Nombre y apellidos completos, fecha de nacimiento o edad y CIP. - Diagnstico o sospecha diagnstica, tiempo de evolucin, fase aguda o convalecencia. - Caractersticas especiales del paciente: diabetes, embarazo, inmunodepresin, alergia a antibiticos, etc. - Tratamiento antibitico previo. 1. Centro de Salud y mdico solicitante.

3. Tipo de muestra a estudiar. - En escaras, abscesos, fstulas, heridas, exudados o raspados de piel se indicar la localizacin anatmica de la muestra.

6. Cuando exista la sospecha de infecciones por microorganismos no habituales se recomienda contactar con el laboratorio de microbiologa. Las muestras deben ser representativas del proceso infeccioso a estudiar y recogerse en condiciones de mxima asepsia utilizando dispositivos estriles. Siempre que sea posible, la recogida de las muestras debe realizarse antes de iniciar el tratamiento antibitico. Si esto no fuera posible se har constar el antibitico administrado, dosis y duracin del tratamiento. El volumen de muestra necesario y aconsejable vara dependiendo del tipo de muestra y de las determinaciones solicitadas. Las muestras se remitirn al laboratorio lo antes posible, utilizando dispositivos estriles de cierre hermtico adecuadamente identificados (nmero de peticin y/o nombre del paciente). La ausencia de identificacin de las muestras impide su procesamiento.

5. Fecha de la toma de muestra.

4. Determinaciones solicitadas (cultivo bacteriano, cultivo de hongos, examen en fresco, estudio de parsitos, cultivo de micobacterias, etc). Si se solicita serologa se debe especificar el tipo de anticuerpos a estudiar (IgG, IgM, anti HBs, etc).

La demora en el transporte de las muestras puede producir que determinados microorganismos no sobrevivan o queden encubiertos por otros que crecen con mayor rapidez. Por ejemplo, un nmero insignificante de bacilos gramnegativos puede proliferar en la orina y alcanzar los niveles de una bacteriuria significativa, si la muestra se almacena durante ms de 2 horas a temperatura ambiente. Si no es posible enviar la muestra se recomienda consultar en el manual las condiciones de conservacin para cada caso concreto. Ante cualquier duda es recomendable contactar con el laboratorio de microbiologa.

1. MUESTRAS DEL TRACTO URINARIO 1.1. Orina (miccin media)

Procedimientos microbiolgicos ms habituales - Cultivo bacteriano aerobio. - Cultivo de hongos. - Cultivo de micobacterias. Microorganismos con significado clnico que pueden aislarse en una orina Microorganismos Frecuentes Menos frecuentes Bacterias1 Escherichia coli Klebsiella pneumoniae Proteus mirabilis Enterococcus spp.

Otras enterobacterias (Morganella spp., Enterobacter spp., Serratia spp., etc) Pseudomonas aeruginosa Staphylococcus aureus Staphylococcus saprophyticus Corynebacterium urealyticum2

Hongos1

Micobacterias3
1 2

Candida spp.2

Se investigan de forma rutinaria. Microorganismo de crecimiento lento. Crece en el cultivo bacteriano de rutina pero pueden requerir incubacin prolongada. En enfermos con piuria y cultivo de orina estril se recomienda ponerse en contacto con el laboratorio de microbiologa. 3 Si existe sospecha de infeccin gnito-urinaria por micobacterias se deber solicitar cultivo especfico de micobacterias.

Mycobacterium tuberculosis Micobacterias atpicas

Material necesario para realizar la toma de la muestra - Gasas estriles. - Jabn neutro. - Recipiente estril de boca ancha y cierre hermtico. - Bolsa de plstico o colectores estriles para nios.

Tcnica para obtener la muestra - La muestra idnea es la primera miccin de la maana debido a la multiplicacin de las bacterias durante la noche. Tcnica para mujeres - La paciente debe quitarse la ropa interior. - Se lavar las manos cuidadosamente con agua y jabn, las enjuagar con agua y las secar con una toalla limpia. - Se separarn los labios mayores y menores, y los mantendr separados en todo momento hasta que se haya recogido la orina. - Con una gasa enjabonada se lavar bien la vulva pasndola de delante hacia atrs y se repetir el proceso un total de 4 veces. - Enjuagar cuidadosamente con agua para eliminar los restos de jabn. - Se solicitar a la paciente que orine desechando los primeros 20-25 ml., tras lo cual y sin interrumpir la miccin, se recoger el resto de la orina en el recipiente. - El frasco debe sujetarse para que no tome contacto con pierna, vulva o ropa del paciente. Los dedos no deben tocar el borde del frasco o la superficie interior.

Tcnica para hombres - Se lavar las manos con agua y jabn. - Retraer completamente el prepucio, que se mantendr as en todo momento, hasta que se haya recogido la orina. - Limpiar el glande con jabn neutro. - Eliminar los restos de jabn enjuagndolo con agua. - Se pedir al paciente que orine desechando los primeros 20-25 ml. - Recoger el resto de la orina en el recipiente estril.

Tcnica para nios (bolsa colectora) - En nios y nias mayores la orina se recoge de forma similar a los adultos. - En nios y nias ms pequeos, la orina se recoger en colectores o bolsas estriles de la siguiente forma: - Lavar los genitales y el rea perianal de forma similar a la descrita en adultos. - Colocar la bolsa de plstico o el colector. - Vigilar la bolsa cada 30 minutos y tan pronto como el nio haya orinado, debe retirarse y enviarse al laboratorio para su procesamiento. Para su transporte la bolsita puede introducirse cuidadosamente en un recipiente de boca ancha, evitando que la orina entre en contacto con la zona que ha estado adherida a la piel. No vaciar la bolsita en el frasco. - Si la miccin no se ha realizado en una hora, se repetir la operacin colocando una nueva bolsa. Volumen necesario, nmero de muestras y momento de la extraccin Cultivo Bacterias Hongos Micobacterias Volumen 0,5 - 1 ml. > 20 ml. Mnimo 40 ml. Comentarios Una muestra es suficiente. Recoger primera orina de la maana. Una muestra es suficiente. Recoger primera orina de la maana. Se deben recoger 3 muestras de 3 das consecutivos. No mezclar las muestras. Recoger primera orina de la maana.

Transporte y conservacin de las muestras - La muestra debe enviarse al laboratorio lo antes posible o conservarse refrigerada a 4C durante un tiempo mximo de 24 horas. - Para estudio de micobacterias las muestras pueden conservarse a 4C durante un mximo de 72 horas. Pueden enviarse las 3 muestras el mismo da. Muestras inadecuadas - Muestras que no cumplen las condiciones descritas anteriormente. - No deben enviarse muestras recogidas mediante torunda.

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Observaciones - Si el enfermo ha recibido tratamiento previo, se indicar en la peticin junto a la duracin del mismo. - En el caso de no ser orina de miccin media es muy importante especificar en el volante el origen de la muestra para que pueda ser procesada correctamente.

1.2. Orina en pacientes con sonda permanente

Procedimientos microbiolgicos ms habituales - Cultivo bacteriano aerobio. - Cultivo de hongos. - Cultivo de micobacterias. Microorganismos con significado clnico que pueden aislarse en una orina de sondaje - Consultar los microorganismos descritos para la orina de miccin media. Material necesario para realizar la toma de la muestra - Batea. - Agua templada. - Esponja con gel dermoprotector. - Gasas estriles y no estriles. - Solucin acuosa con clorhexidina al 0.05%. - Pinzas para clampar. - Jeringa de 10 20 ml. - Aguja de pequeo calibre. - Recipiente estril de boca ancha y cierre hermtico. Tcnica para obtener la muestra A. Sistemas colectores cerrados - Pinzar el circuito de drenaje por debajo de la zona destinada a la extraccin o zona de conexin sonda/bolsa durante 2 horas.

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- Lavar con esponja, enjuagar y secar con gasas estriles la zona del sistema destinado a la puncin. Desinfectar con povidona yodada y dejar secar. - Abrir el circuito de drenaje, dejando fluir una cantidad suficiente de orina que renueve la acumulada en el circuito durante el clampado. - Volver a cerrar el circuito. - Puncionar en la zona destinada para ello o seleccionar una zona que no atraviese la va del globo. - Extraer entre 10 y 20 ml. de orina. - Retirar la aguja, verter la orina en el frasco sin tocar los bordes y cerrarlo bien. - Desinfectar nuevamente la zona de puncin y despinzar el circuito. B. Sistemas colectores abiertos - Los sistemas de sondaje abiertos no permiten la recogida de muestras vlidas para estudios microbiolgicos. - No son aceptables muestras recogidas de las bolsas colectoras. Volumen o cantidad necesaria - Extraer entre 10 y 20 ml. de orina. Nmero de muestras y momento de la extraccin - Una muestra es suficiente. - Recoger la orina de primera hora de la maana. - La muestra se obtendr antes de iniciar el tratamiento. Transporte y conservacin de las muestras - La muestra debe enviarse al laboratorio de microbiologa lo antes posible, o conservarse refrigerada a 4C durante un mximo de 24 horas. Muestras inadecuadas - Muestras que no cumplan las condiciones descritas anteriormente. Observaciones - Si el enfermo ha recibido tratamiento antibitico previo, se indicar en la peticin junto a la duracin del mismo. - Debe especificarse en la peticin que se trata de una orina de sondaje, debido a que la valoracin microbiolgica es diferente respecto a una orina normal.

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2. MUESTRAS DEL TRACTO RESPIRATORIO SUPERIOR 2.1. Exudado oral

Procedimientos microbiolgicos ms habituales - Examen en fresco. - Tincin de Gram (angina de Vincent). - Cultivo de hongos. Microorganismos con significado clnico que pueden aislarse en un exudado oral Microorganismos Frecuentes Menos frecuentes Bacterias Hongos Virus Treponema pallidum1 Borrelia spp./Fusobacterium spp.2

Candida spp.3

Si se sospecha infeccin por Treponema pallidum es imprescindible obtener muestra de suero para realizar estudio serolgico. La visin en campo oscuro slo resulta til si se realiza inmediatamente despus de recoger la muestra. 2 Muy infrecuente. Solicitar tincin de Gram si existe sospecha de angina de Vincent. 3 Se investiga de forma rutinaria mediante examen en fresco y/o cultivo. 4 La deteccin de virus no se realiza de forma rutinaria. Si existe sospecha de infeccin por virus herpes simple se debe solicitar al laboratorio de microbiologa medio especial de trasporte para virus. Su deteccin requiere tcnicas de cultivo celular, Shell-vial o PCR.
1

Virus herpes simple4

Material necesario para realizar la toma de la muestra - Depresor lingual. - Torundas de algodn con medio de transporte de Stuart-Amies. - Torunda con medio de transporte para virus. Tcnica para obtener la muestra - Frotar con la torunda las zonas purulentas o las lesiones de la mucosa oral, lengua u orofaringe. - Utilizar el depresor para evitar contaminaciones con otras zonas de la boca. Volumen o cantidad necesaria de muestra - Recoger la mayor cantidad posible de exudado.

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Nmero de muestras y momento de la extraccin - Para estudio de hongos es suficiente con una torunda. - Para estudio adicional de virus se enviar otra torunda independiente. - La muestra se obtendr antes de iniciar el tratamiento. Transporte y conservacin de las muestras - Las torundas para estudio de hongos se conservarn refrigeradas a 4C (mximo 48 horas). - Las torundas con medio de transporte para virus se conservarn refrigeradas a 4C durante un mximo de 72 horas. Observaciones - Si el enfermo ha recibido tratamiento previo, se indicar junto a la duracin del mismo.

2.2. Exudado faringo-amigdalar

Procedimientos microbiolgicos ms habituales A. Faringitis - Cultivo bacteriano aerobio. - Deteccin de antgeno de Streptococcus pyogenes. Microorganismos con significado clnico que pueden aislarse en un exudado farngeo Microorganismos Bacterias Frecuentes Streptococcus pyogenes1 Estreptococos betahemolticos (grupos C y G)1 Neisseria meningitidis2 Neisseria gonorrhoeae3 Arcanobacterium haemolyticum4 Treponema pallidum5 Francisella tularensis6 Yersinia enterocolitica7 Fusobacterium necrophorum8 Corynebacterium diphtheriae9 Menos frecuentes

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Se investiga de forma rutinaria. Deteccin de portadores. 3 Si existe sospecha (pareja sexual con uretritis gonoccica) es recomendable contactar con el laboratorio de microbiologa. El cultivo debe realizarse de forma inmediata. 4 Crece en los medios habituales de cultivo pero puede requerir incubacin prolongada. Si existe sospecha (asociacin a exantema mculo-papular) se recomienda contactar con el laboratorio de microbiologa. 5 Si existe sospecha (pareja sexual con sfilis), se solicitar serologa. 6 Si existe sospecha (contacto con roedores, artrpodos, etc) es recomendable contactar con el laboratorio de microbiologa. Francisella tularensis requiere cultivo prolongado en medios especiales. Solicitar serologa. 7 Muy infrecuente. Asociacin a brotes. 8 Muy infrecuente. 9 Excepcional en nuestro medio. Produce faringitis membranosa.
1 2

B. Epiglotitis - No se recomienda recoger exudado farngeo para cultivo, ya que el valor diagnstico es escaso y puede producirse una reaccin inflamatoria muy importante que puede requerir la intubacin del paciente. Microorganismos causantes de epiglotitis Microorganismos Frecuentes Bacterias Haemophilus influenzae Menos frecuentes

Haemophilus parainfluenzae Streptococcus pneumoniae Streptococcus pyogenes Staphylococcus aureus

Material necesario para realizar la toma de la muestra - Depresor lingual. - Torunda de dacron con medio de transporte de Stuart-Amies (cultivo). - Torunda de dacron sin medio de transporte (deteccin de antgeno de Streptococcus pyogenes). Tcnica para obtener la muestra - Bajo visin directa y con la ayuda de un depresor lingual, se tocar con una torunda en todas las zonas con exudado, membranas o inflamacin. Se deben frotar las criptas tonsilares y la faringe posterior.

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- No tocar nunca la mucosa oral, lengua o vula. Numero de muestras y momento de la extraccin - Para cultivo bacteriano es suficiente una muestra. - Para la deteccin de antgeno de Streptococcus pyogenes es suficiente una muestra. - La muestra se obtendr antes de iniciar el tratamiento. Transporte y conservacin de las muestras - Las torundas pueden conservarse a temperatura ambiente (mximo 2 horas). - Mantener las torundas refrigeradas a 4 C si el envo se va a retrasar ms de 24 horas. - Retrasos superiores a 48 horas no son deseables. Observaciones - Si el enfermo ha recibido tratamiento previo, se indicar en la peticin junto a la duracin del mismo. - En pacientes con sospecha de faringitis estreptoccica y deteccin de antgeno de Streptococcus pyogenes negativa se recomienda tomar muestra para cultivo. - La difteria es una enfermedad excepcional en nuestro medio. Si existe sospecha (antecedente de viajes, consumo de leche no pasteurizada, etc) es recomendable contactar con el laboratorio de microbiologa de forma inmediata. Se recomienda enviar porciones de membrana recogidas en un contenedor estril, una torunda de exudado farngeo y una torunda de exudado nasofarngeo recogido por va pernasal. - El diagnstico microbiolgico de las epiglotitis se realiza mediante hemocultivo, siendo positivo en el 50% de los casos.

2.3. Aspirado y exudado nasofarngeo

Procedimientos microbiolgicos ms habituales - Cultivo bacteriano aerobio. Microorganismos con significado clnico que pueden aislarse en un exudado nasofarngeo - Bordetella pertussis y Bordetella parapertussis (agentes causales de tos ferina).

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Material necesario para realizar la toma de la muestra - Para frotis: torundas flexibles de dacron (alginato clcico). - Para aspirados: tubo aspirador de tefln o jeringa y catter. Tcnica para obtener la muestra - Frotis: pasar la torunda suavemente a travs de las fosas nasales hasta llegar a la nasofaringe. Hay que mantener la torunda cerca del septum y suelo de la fosa. Rotar la torunda y extraerla. - Aspirado: aspirar el moco, pasando por va pernasal un tubo de tefln o un catter conectado a una jeringa, de igual forma que la torunda. Volumen o cantidad necesaria de muestra - Aspirado: se recomienda un volumen mayor de 1 ml. Nmero de muestras y momento de la extraccin - Una torunda es suficiente. - La extraccin debe hacerse en el momento inmediatamente anterior a la siembra de la muestra. - La muestra se obtendr antes de iniciar el tratamiento. Transporte y conservacin de las muestras - El transporte al laboratorio debe ser inmediato. Observaciones - En todos los casos en los que exista sospecha de tos ferina se recomienda ponerse en contacto con el laboratorio de microbiologa. - La siembra de la muestra debe realizarse de forma inmediata en medios de cultivo especiales (agar de Bordet Gengou). - La sensibilidad del cultivo es del 50% y tiene mayor rendimiento en la fase exudativa de la enfermedad. - Si el enfermo ha recibido tratamiento antibitico previo, se indicar en la peticin junto a la duracin del mismo.

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3. MUESTRAS DEL TRACTO RESPIRATORIO INFERIOR 3.1. Esputo

Procedimientos microbiolgicos ms habituales - Tincin de Gram. - Cultivo bacteriano aerobio. - Cultivo de hongos. - Cultivo de micobacterias. Microorganismos con significado clnico que pueden aislarse en un esputo Microorganismo Frecuentes Menos frecuentes Bacterias Streptococcus pneumoniae Haemophilus influenzae Moraxella catarrhalis Staphylococcus aureus Pseudomonas aeruginosa Legionella pneumophila1 Nocardia asteroides1

Hongos2 Micobacterias4
1

Aspergillus spp.1 Histoplasma capsulatum1,3

Si existe sospecha de infeccin se recomienda contactar con el laboratorio de microbiologa. Requiere medios y/o condiciones de cultivo especiales. 2 Si existe sospecha de infeccin pulmonar fngica se solicitar cultivo especfico de hongos. 3 Excepcional en nuestro medio. 4 Si existe sospecha de infeccin pulmonar por micobacterias se solicitar cultivo especfico de micobacterias. 5 Las micobacterias atpicas pueden ser saprofitas y slo tienen valor clnico en algunos casos.

Mycobacterium tuberculosis Micobacterias atpicas5

Material necesario para realizar la toma de la muestra - Frasco estril de boca ancha y cierre hermtico. - Suero fisiolgico estril al 3-10 % y nebulizador.

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Tcnica para obtener la muestra - El paciente se enjuagar la boca o har grgaras con agua. - Obtener el esputo tras una expectoracin profunda, preferentemente matinal. - Si no se consigue expectoracin espontnea, puede inducirse la misma con nebulizaciones de suero fisiolgico estril (25 ml. de solucin salina estril al 3-10%), siendo til realizar un drenaje postural o fisioterapia respiratoria. Volumen o cantidad necesaria - El volumen mnimo para cultivo bacteriano y de hongos es 1 ml. - El volumen mnimo para cultivo de micobacterias es 5-10 ml. Nmero de muestras y momento de la extraccin - Cultivo bacteriano: es suficiente una muestra. - Cultivo de micobacterias: 3 muestras obtenidas en 3 das consecutivos. - La muestra se obtendr antes de iniciar el tratamiento. Transporte y conservacin de las muestras - Las muestras deben enviarse al laboratorio de microbiologa lo antes posible. - Para estudio de bacterias y hongos la muestra se conservar a temperatura ambiente (mximo 2 horas). Si se prolonga ms de 2 horas se conservar refrigerada a 4C (mximo 24 horas). - Para estudio de micobacterias la muestra se puede conservar refrigerada a 4C durante un mximo de 72 horas. Observaciones - Si el enfermo ha recibido tratamiento previo, se indicar en la peticin junto a la duracin del mismo. - Los esputos para cultivo de bacterias sern rechazados si no alcanzan la calidad suficiente. - No se aadir a la muestra ninguna sustancia conservadora ni antisptica. - El esputo no sirve para cultivo de bacterias anaerobias. - La deteccin de antgeno de Legionella pneumophila en orina permite el diagnstico rpido de las neumonas producidas por este microorganismo. - Para estudio de otros microorganismos causantes de neumona como Mycoplasma pneumoniae, Chlamydophila pneumoniae, Chlamydophila psittaci y Coxiella burnetii se precisa una muestra de suero en fase aguda y otra en fase de convalecencia para demostrar seroconversin.

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4. MUESTRAS DE OIDO

4.1. Exudado de odo externo

Procedimientos microbiolgicos ms habituales - Tincin de Gram. - Cultivo bacteriano aerobio. - Cultivo de hongos. Microorganismos con significado clnico que pueden aislarse en un exudado tico Patologa Otitis externa Bacterias1 Microorganismos Staphylococcus aureus Enterobacterias Streptococcus pyogenes (Escherichia coli, Proteus Pseudomonas aeruginosa spp., Klebsiella spp., etc) Aspergillus spp. Candida spp. Streptococcus pneumoniae Haemophilus influenzae Moraxella catarrhalis Streptococcus pyogenes Staphylococcus aureus Alloiococcus otitidis Enterobacterias Turicella otitidis2 Frecuentes Menos frecuentes

Hongos1 Otitis media Bacterias1

1 2

Se investigan de forma rutinaria. Muy infrecuente.

Material necesario para realizar la toma de la muestra - Torundas de algodn con medio de transporte de Stuart-Amies. - Un antisptico suave (ej. cloruro de benzalconio al 1/100). - Jeringa con aguja estril (abscesos). - Contenedor estril de boca ancha y cierre hermtico (abscesos). Tcnica para obtener la muestra - Limpiar el odo externo con un antisptico suave utilizando una torunda para eliminar cualquier detritus existente en el canal del odo.

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- La toma se realizar mediante frotis con otra torunda estril, o bien mediante aspiracin del fluido si existe un absceso, utilizando una jeringa con aguja estril. En este caso, el contenido debe transferirse a un contenedor estril y en ningn caso debe enviarse la jeringa con la aguja por el riesgo de pinchazos. - La muestra se obtendr del borde activo y del exudado de las zonas profundas. - Especificar en la torunda la localizacin de la muestra (odo derecho o izquierdo). Volumen o cantidad necesaria de muestra - Se recomienda obtener la mayor cantidad posible de exudado. Nmero de muestras y momento de la extraccin - Una torunda para cada odo. - La muestra se obtendr antes de iniciar el tratamiento. Transporte y conservacin de las muestras - Las torundas con medio de transporte para cultivo bacteriano y de hongos pueden conservarse a temperatura ambiente (mximo 24 horas). - Mantener las torundas refrigeradas a 4C si el envo se va a retrasar ms de 24 horas. - Retrasos superiores a 48 horas no son deseables. Observaciones - Si el enfermo ha recibido tratamiento previo, se indicar en la peticin junto a la duracin del mismo. - La muestra ms representativa para realizar el diagnstico etiolgico de la otitis media es la obtenida mediante timpanocentesis. El contenido del odo medio se debe extraer por aspiracin, evitando la contaminacin con la flora bacteriana habitual del conducto auditivo externo. - Si existe perforacin del tmpano pueden recuperarse los agentes causantes de otitis media en el exudado de odo externo. Esta muestra se tomar mediante torunda.

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5. MUESTRAS OCULARES 5.1. Exudado conjuntival

Procedimientos microbiolgicos ms habituales - Tincin de Gram. - Cultivo bacteriano aerobio. Microorganismos con significado clnico que pueden aislarse en un exudado conjuntival Microorganismos Bacterias Frecuentes Staphylococcus aureus Streptococcus pneumoniae Streptococcus pyogenes Haemophilus influenzae Menos frecuentes Moraxella catarrhalis Neisseria spp. Propionibacterium acnes Enterobacterias (Escherichia coli, Proteus spp., Klebsiella spp., etc) Pseudomonas aeruginosa Haemophilus parainfluenzae Chlamydia trachomatis1 Adenovirus Virus herpes simple

Virus2
1

Muy infrecuente. No se investiga de forma rutinaria. Se recomienda contactar con el laboratorio de microbiologa. La deteccin de Chlamydia trachomatis requiere tcnicas de inmunofluorescencia, PCR o deteccin antignica. 2 La deteccin de virus no se realiza de forma rutinaria y requiere tcnicas de PCR, cultivo celular o cultivo rpido (Shell-vial). Se recomienda contactar con el laboratorio de microbiologa y solicitar medio de transporte para virus.

Material necesario para realizar la toma de la muestra - Torundas de alginato clcico o dacron con medio de transporte de Stuart-Amies. - Suero salino estril. - Torunda con medio de transporte para virus. Tcnica para obtener la muestra - Con una torunda mojada en suero fisiolgico frotar sobre la conjuntiva tarsal inferior y el frnix. - Especificar en al torunda la localizacin de la muestra (ojo izquierdo o derecho).

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- Para la investigacin de Chlamydia trachomatis de debe obtener otra muestra independiente. Everter el prpado y frotar con una torunda la superficie conjuntival. Volumen o cantidad necesaria de muestra - Obtener la mayor cantidad posible de exudado. Nmero de muestras y momento de la extraccin - Una torunda para cada ojo. - La muestra debe obtenerse preferiblemente antes de la instilacin de analgsicos locales, colirios o antibiticos. Transporte y conservacin de las muestras - Las torundas para cultivo bacteriano se deben enviar en menos de 2 horas a temperatura ambiente. Si se va a retrasar el envo ms de 24 horas, mantener las torundas refrigeradas a 4C. Retrasos superiores a las 48 horas no son deseables. - Para la deteccin de Chlamydia trachomatis las muestras deben mantenerse refrigeradas a 4C durante un mximo de 24-48 horas. - Las torundas con medio de transporte para virus se mantendrn refrigeradas a 4C durante un mximo de 72 horas. Observaciones - Si el enfermo ha recibido tratamiento previo, se indicar en la peticin junto a la duracin del mismo. - Los cultivos preoperatorios de conjuntiva no son tiles. El nmero y tipo de microorganismos de la conjuntiva normal vara diariamente, por lo que estas muestras no son vlidas, excepto en el caso de que existan signos inflamatorios a nivel ocular.

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6.1. Exantema

6. MUESTRAS DE PIEL Y TEJIDOS BLANDOS

Procedimientos microbiolgicos ms habituales - Tincin de Gram. - Cultivo bacteriano aerobio. - Cultivo de hongos. - Cultivo de micobacterias. Microorganismos con significado clnico que pueden aislarse en un exantema Exantema Vesicularampolloso Microorganismos Frecuentes Bacterias Virus1 Nodular o papular Bacterias Hongos4 Micobacterias6 Virus1 Purprico Bacterias Virus herpes simple Virus varicela zoster Staphylococcus aureus Streptococcus pyogenes2 Pseudomonas aeruginosa Virus herpes simple Virus varicela zoster Menos frecuentes Aeromonas hydrophila Stenotrophomonas maltophilia Capnocytophaga canimorsus

Streptococcus pyogenes2

Arcanobacterium haemolyticum2 Bartonella spp.3

Cryptococcus neoformans5 Histoplasma capsulatum5 Aspergillus spp.5

Mycobacterium tuberculosis5 Mycobacterium marinum5

La deteccin de virus no se realiza de forma rutinaria y requiere tcnicas de PCR, cultivo celular o cultivo rpido (Shell-vial). La muestra puede obtenerse a partir del aspirado y del escarificado de la base de la vescula. Se recomienda contactar con el laboratorio de microbiologa y solicitar medio de transporte para virus. 2 Asociacin a faringitis.
1

Eritematoso Bacterias

Neisseria meningitidis Neisseria gonorrhoeae Staphylococcus aureus Streptococcus pneumoniae Borrelia burgdorferi7

Capnocytophaga canimorsus

Ehrlichia chaffeensis8

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Produce enfermedad por araazo de gato. Si existe sospecha solicitar cultivo con incubacin prolongada, serologa o PCR de la lesin cutnea (biopsia). 4 Si existe sospecha de infeccin fngica se solicitar cultivo especfico de hongos. 5 Muy infrecuente. Cuando exista sospecha de infecciones por microorganismos inhabituales se recomienda ponerse en contacto con el laboratorio de microbiologa. Requieren medios y/o condiciones de cultivo especiales. 6 Si existe sospecha de infeccin por micobacterias se solicitar cultivo especfico de micobacterias. 7 Produce enfermedad de Lyme. Cursa con eritema anular migratorio. Si existe sospecha (picadura por garrapatas) solicitar serologa o PCR de la lesin cutnea (biopsia). Borrelia burgdorferi no crece en los medios de cultivo habituales. 8 Si existe sospecha (picadura por garrapatas) solicitar serologa o PCR de la lesin cutnea (biopsia). Ehrlichia chaffeensis no crece en los medios de cultivo habituales.
3

Material necesario para la toma de la muestra. - Suero fisiolgico estril o solucin de Ringer lactato estril. - Jeringa y aguja estril. - Torunda con medio de transporte de Stuart-Amies. - Tubo o contenedor estril con tapn de rosca. - Torunda de dacron con medio de transporte para virus. Tcnica para obtener la muestra A. Con aguja - Es el procedimiento con mayor rendimiento y menor probabilidad de contaminacin, sobre todo si existen vesculas. - Lavar la superficie de la lesin con una gasa humedecida en suero salino y desinfectar con alcohol o povidona iodada. - Aspirar el contenido del exantema con aguja y jeringa de las zonas profundas o de los bordes. - Si el contenido es mnimo se puede instilar suero fisiolgico estril o solucin de Ringer lactato estril y volver a aspirarlo. - Transferir el contenido a un contenedor estril. - No se recomienda enviar la jeringa con aguja por el riesgo de pinchazos. B. Con torunda - Las muestras recogidas con torunda no son recomendables por tener menor cantidad de muestra y presentar mayor riesgo de contaminacin con flora saprofita de la piel.

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- Debern usarse torundas con medio de transporte. - Limpiar la superficie de la lesin con una gasa humedecida en suero salino. - Si la lesin es costrosa se debe retirar la costra con la ayuda de la punta de un escalpelo o aguja estril. - Rotar la torunda sobre la base de la lesin evitando contaminacin con las zonas adyacentes. Volumen o cantidad necesaria de la muestra. - Aspirar la mayor cantidad posible de muestra. Nmero de muestras y momento de la extraccin. - Para estudio de bacterias y hongos es suficiente una muestra. - Para estudio adicional de virus o micobacterias se enviar una muestra independiente. - La muestra se obtendr antes de iniciar el tratamiento. Transporte y conservacin de las muestras A. Aspirados en jeringas - Las muestras obtenidas mediante jeringa deben enviarse al laboratorio de microbiologa lo antes posible. - Las muestras para estudio de bacterias y hongos se pueden conservar a temperatura ambiente (mximo 24 horas). - Las muestras para estudio de virus y micobacterias se deben conservar refrigeradas a 4C (mximo 72 horas). B. Torundas - Las torundas con medio de transporte se enviarn al laboratorio de microbiologa antes de 2 horas. Si no es posible, se mantendrn a temperatura ambiente (mximo 24 horas). - Las torundas con medio de transporte para virus se conservarn refrigeradas a 4C durante un mximo de 72 horas. Muestras inadecuadas. - Muestras mal identificadas. - Muestras recibidas en torundas sin medio de transporte. - Las torundas no son vlidas para cultivo de micobacterias.

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Observaciones - Si el enfermo ha recibido tratamiento previo, se indicar en la peticin junto a la duracin del mismo. - Se debe especificar la localizacin anatmica de la muestra. - Si existe sospecha de infeccin por micobacterias la muestra deber recogerse mediante puncin o biopsia. Las biopsias deben enviarse en un contenedor estril con suero fisiolgico estril. Pueden conservarse refrigeradas a 4C durante un mximo de 72 horas. - Las biopsias cutneas para PCR de Borrelia burgdorferi o Ehrlichia chaffeensis deben recogerse en un contenedor estril con suero fisiolgico estril y mantenerse refrigeradas a 4C.

6.2. Escara
Procedimientos microbiolgicos ms habituales - Tincin de Gram. - Cultivo bacteriano aerobio y anaerobio. - Cultivo de hongos. Microorganismos con significado clnico que pueden aislarse en una escara Microorganismos Bacterias aerobias Enterobacterias (Escherichia coli, Proteus spp., Klebsiella spp, etc) Pseudomonas aeruginosa Staphylococcus aureus Enterococus spp. Frecuentes Menos frecuentes Aeromonas spp. Achromobacter spp. Streptococcus agalactiae Streptococcus pyogenes Bacillus anthracis1 Nocardia spp.1 Rickettsia conorii2 Clostridium perfringens Aspergillus spp.1 Mucor spp.1

Bacterias anaerobias Peptostreptococcus spp. Hongos3

1

Candida spp.

Muy infrecuente. Cuando exista sospecha se recomienda ponerse en contacto con el laboratorio de microbiologa. Requiere medios y/o condiciones de cultivo especiales. 2 Produce la fiebre botonosa (mancha negra). Si existe sospecha (picadura por garrapatas) se debe solicitar serologa o PCR de la lesin cutnea (biopsia). Rickettsia conorii no crece en los medios de cultivo habituales. 3 Si existe sospecha de infeccin fngica se deber solicitar cultivo especfico de hongos.

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Material necesario para realizar la toma de la muestra - Suero fisiolgico estril o solucin de Ringer lactato estril. - Jeringa y aguja estril. - Tubo o contenedor estril con tapn de rosca. - Torunda con medio de transporte de Stuart-Amies. Tcnica para obtener la muestra A. Con aguja - Es el procedimiento de mayor rendimiento diagnstico y por lo tanto debe realizarse siempre que sea posible. - Lavar la superficie de la herida con suero fisiolgico estril. - Recoger el pus con jeringa y aguja aspirando preferentemente de zonas profundas o de los bordes. - Si la muestra es insuficiente, inyectar suero fisiolgico estril o solucin de Ringer lactato estril y aspirarlo nuevamente con la aguja. - Transferir el contenido a un contenedor estril. - No se recomienda enviar la jeringa con aguja por el riesgo de pinchazos. B. Con torunda - La toma de muestra con torunda no es recomendable. Los microorganismos que se aslan no siempre son los agentes causales de la infeccin debido al riesgo de contaminacin con flora saprofita de la piel. - Debern utilizarse torundas con medio de transporte. - Si fuera preciso, realizar desbridamiento quirrgico de la lesin. - Lavar la superficie de la escara con suero fisiolgico estril. - Rotar la torunda sobre la superficie de la herida evitando el contacto con las zonas de piel adyacente. - No frotar la lcera con fuerza. - Recorrer con el hisopo los extremos de la herida, abarcando diez puntos distintos. Volumen o cantidad necesaria de muestra - Se recomienda la mayor cantidad posible en caso de obtenerse mediante puncin.

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Nmero de muestras y momento de la extraccin - Es suficiente una muestra por escara. - La muestra se obtendr antes de iniciar el tratamiento. Transporte y conservacin de las muestras - Las muestras deben enviarse al laboratorio de microbiologa lo antes posible. - Si no es posible enviar la muestra se mantendr a temperatura ambiente (mximo 24 horas). Muestras inadecuadas - No se aceptarn para cultivo aquellas muestras que se obtengan mediante torundas sin medio de transporte y aquellas que se obtengan en condiciones no estriles. Observaciones - Si el enfermo ha recibido tratamiento previo, se indicar en la peticin junto a la duracin. - Todas las lceras cutneas estn colonizadas por bacterias. El aislamiento de bacterias no indica necesariamente que la escara est infectada. - La visualizacin de leucocitos en la tincin de Gram puede orientar sobre el valor clnico de los microorganismos aislados, especialmente si la muestra se obtiene mediante torunda. - Especificar la localizacin anatmica de la muestra y las caractersticas que presenta. - Si existe sospecha de infeccin por microorganismos altamente patgenos (e.j. Bacillus anthracis) deber comunicarse al laboratorio de forma inmediata. - Si la escara se asocia a celulitis, la obtencin de la muestra se realizar obligatoriamente mediante puncin con aguja del borde eritematoso de la lesin - Las biopsias cutneas para PCR de Rickettsia conorii deben recogerse en un contenedor estril con suero fisiolgico estril y mantenerse refrigeradas a 4C.

6.3. Exudado de absceso cerrado

Procedimientos microbiolgicos ms habituales - Tincin de Gram. - Cultivo bacteriano aerobio y anaerobio. - Cultivo de hongos. - Cultivo de micobacterias.

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Microorganismos con significado clnico que pueden aislarse en un absceso Microorganismos Bacterias aerobias Frecuentes Enterobacterias (Escherichia coli, Proteus spp., Klebsiella spp., etc) Pseudomonas aeruginosa Staphylococcus aureus Streptococcus viridans Streptococcus agalactiae Streptococcus pyogenes Enterococcus spp. Menos frecuentes Aeromonas spp. Haemophilus spp. Streptococcus pneumoniae Brucella spp.1 Nocardia spp.1

Bacterias anaerobias Bacteroides spp. Clostridium spp. Prevotella spp. Peptostreptococcus spp. Hongos2 Candida spp.

Fusobacterium spp. Actinomyces spp.1 Aspergillus spp.1 Crytococcus neoformans1

Micobacterias3
1 2

microbiologa. Requiere medios y/o condiciones de cultivo especiales. Si existe sospecha de infeccin fngica se solicitar cultivo especfico de hongos. 3 Si existe sospecha de infeccin por micobacterias se solicitar cultivo especfico de micobacterias.

Muy infrecuente. Cuando exista sospecha se recomienda ponerse en contacto con el laboratorio de

Mycobacterium tuberculosis1 Micobacterias atpicas1

Material necesario para realizar la toma de la muestra - Gasas estriles. - Alcohol etlico al 70%. - Povidona iodada al 10%. - Jeringa y aguja estril. - Tubo o contenedor estril con tapn de rosca. Tcnica para obtener la muestra - Desinfectar la superficie cutnea con una gasa estril impregnada en alcohol, limpiando la lesin de forma concntrica comenzando por el centro y abarcando una zona de unos 10 cm.

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- Repetir la operacin con Povidona. En pacientes con hipersensibilidad al yodo se utilizar alcohol 2 veces consecutivas. - Dejar secar al menos 1 minuto para que la Povidona ejerza su accin antisptica. - Realizar una puncin aspiracin del absceso con jeringa y aguja. - Transferir el contenido a un contenedor estril. - No se recomienda el envo de jeringas con agujas por el riesgo de pinchazos. Volumen o cantidad necesaria de muestra - Se recomienda recoger un volumen de 1-5 ml. Nmero de muestras y momento de la extraccin - Para cultivo de bacterias y hongos es suficiente una muestra. - Para cultivo adicional de micobacterias se enviar una muestra independiente. - La muestra se obtendr antes de iniciar el tratamiento. Transporte y conservacin de las muestras - La muestra debe enviarse al laboratorio de microbiologa lo antes posible. - Para cultivo de bacterias y hongos la muestra se conservar a temperatura ambiente (mximo 24 horas). - Para estudio de micobacterias la muestra se conservar refrigerada a 4C (mximo 72 horas). Muestras inadecuadas - No se aceptarn para cultivo aquellas muestras que se obtengan mediante torundas y aquellas que se obtengan en condiciones no estriles. Observaciones - Si el enfermo ha recibido tratamiento previo, se indicar en la peticin junto a la duracin - Especificar en el volante la localizacin anatmica de la muestra. - Cuando exista sospecha de infeccin por microorganismos altamente patgenos (e.j. Brucella spp.), se recomienda ponerse en contacto con el laboratorio de forma inmediata. - Si existe sospecha de infeccin por micobacterias la muestra deber recogerse mediante puncin o biopsia. Las biopsias deben enviarse en un contenedor estril con suero fisiolgico estril. Pueden conservarse refrigeradas a 4C durante un mximo de 72 horas.

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6.4. Exudado de fstula

Procedimientos microbiolgicos ms habituales - Tincin de Gram. - Cultivo bacteriano aerobio y anaerobio. - Cultivo de hongos. Microorganismos con significado clnico que pueden aislarse en una fstula Microorganismos Bacterias aerobias Enterobacterias (Escherichia coli, Streptococcus pneumoniae Proteus spp., Klebsiella spp., etc) Streptomyces spp.1 Pseudomonas aeruginosa Nocardia spp.1 Staphylococcus aureus Streptococcus agalactiae Streptococcus pyogenes Enterococcus spp. Bacteroides spp. Clostridium spp. Prevotella spp. Candida spp. Fusobacterium spp. Actinomyces spp.1 Aspergillus spp.1 Frecuentes Menos frecuentes

Bacterias anaerobias Hongos2

Muy infrecuente. Cuando exista sospecha se recomienda ponerse en contacto con el laboratorio de microbiologa. Requiere medios y/o condiciones de cultivo especiales. 2 Si existe sospecha de infeccin fngica se deber solicitar cultivo especfico de hongos.
1

Material necesario para realizar la toma de la muestra - Gasas estriles. - Alcohol etlico al 70%. - Povidona iodada al 10%. - Jeringa y aguja estril. - Tubo o contenedor estril con tapn de rosca.

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Tcnica para obtener la muestra - Desinfectar la superficie cutnea con una gasa estril impregnada en alcohol. - Repetir la operacin con Povidona y dejar secar. En pacientes con hipersensibilidad al yodo se utilizar alcohol 2 veces consecutivas. - Dejar secar al menos 1 minuto para que la Povidona ejerza su accin antisptica. - Aspirar el exudado de la parte profunda de la fstula con jeringa y aguja. - Si la muestra es insuficiente se podr instilar suero fisiolgico estril y posteriormente se aspirar con la jeringa. Si no es posible, con una torunda se realizar un frotis de la parte profunda. - Transferir el contenido a un contenedor estril. - No se recomienda el envo de jeringas con agujas por el riesgo de pinchazos. Volumen o cantidad necesaria de muestra - Se recomienda recoger un volumen de 1-5 ml. Nmero de muestras y momento de la extraccin - Es suficiente con una muestra. - La muestra se obtendr antes de iniciar el tratamiento. Transporte y conservacin de las muestras - Enviar la muestra al laboratorio de microbiologa lo antes posible. - Las muestras se pueden conservar a temperatura ambiente un mximo de 24 horas. Muestras inadecuadas - No se aceptarn para cultivo aquellas muestras que se obtengan mediante torundas sin medio de transporte y aquellas que se obtengan en condiciones no estriles. Observaciones - Si el enfermo ha recibido tratamiento previo, se indicar en la peticin junto a la duracin del mismo. - Las muestras obtenidas mediante torunda son inadecuadas para cultivo microbiolgico. Los trayectos fistulosos suelen estar colonizados por microorganismos que no estn implicados en la patogenia del proceso. Por ello, la rentabilidad del cultivo mediante torunda es baja y los resultados se deben evaluar con precaucin. - Especificar la localizacin anatmica de la muestra.

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6.5. Exudado de herida

Procedimientos microbiolgicos ms habituales - Tincin de Gram. - Cultivo bacteriano aerobio y anaerobio. - Cultivo de hongos. - Cultivo de micobacterias. Microorganismos con significado clnico que pueden aislarse en una herida Microorganismos Bacterias aerobias Frecuentes Enterobacterias (Escherichia coli, Proteus spp., Klebsiella spp., etc) Pseudomonas aeruginosa Staphylococcus aureus Streptococcus agalactiae Streptococcus pyogenes Enterococcus spp. Bacteroides spp. Clostridium spp. Prevotella spp. Candida spp. Menos frecuentes Haemophilus influenzae Eikenella corrodens Aeromonas spp. Achromobacter spp. Pasteurella multocida. Capnocytophaga spp. Bacillus anthracis1 Nocardia spp.1 Erysipelothrix rhusiopathiae1 Fusobacterium spp. Peptostreptococcus spp. Aspergillus spp.1 Mucor spp.1

Bacterias anaerobias Hongos2 Micobacterias3

1

Muy infrecuente. Cuando exista sospecha se recomienda ponerse en contacto con el laboratorio de microbiologa. Requiere medios y/o condiciones de cultivo especiales. 2 Si existe sospecha de infeccin fngica se solicitar cultivo especfico de hongos. 3 Si existe sospecha de infeccin por micobacterias se solicitar cultivo especfico de micobacterias.

Mycobacterium tuberculosis1 Micobacterias atpicas1

Material necesario para realizar la toma de la muestra - Suero fisiolgico estril o solucin de Ringer lactato estril. - Jeringa y aguja estril.

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- Tubo o contenedor estril con tapn de rosca. - Torunda con medio de transporte de Stuart-Amies. Tcnica para obtener la muestra A. Con aguja - Es el procedimiento de mayor rendimiento diagnstico y por lo tanto debe realizarse siempre que sea posible. - Lavar la superficie de la herida. - Recoger el pus con jeringa y aguja aspirando preferentemente de zonas profundas o de los bordes. - Si la muestra es insuficiente, inyectar suero fisiolgico estril o solucin de Ringer lactato estril y aspirarlo nuevamente con la aguja. - Transferir el contenido a un contenedor estril. - No se recomienda el envo de jeringas con agujas por el riesgo de pinchazos. B. Con torunda - La toma de muestra con torunda es menos recomendable. Los microorganismos que se aslan no siempre son los agentes causales de la infeccin debido al riesgo de contaminacin con flora saprofita de la piel. - Debern usarse torundas con medio de transporte. - Lavar la superficie de la herida. - Rotar la torunda sobre la superficie de la herida evitando el contacto con las zonas de piel adyacente. - No frotar la herida con fuerza. Volumen o cantidad necesaria de muestra - En caso de obtenerse mediante puncin se recomienda la mayor cantidad posible. Nmero de muestras y momento de la extraccin - Para cultivo de bacterias y hongos es suficiente una muestra por herida. - Para estudio adicional de micobacterias se enviar una muestra independiente. - La muestra se obtendr antes de iniciar el tratamiento.

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Transporte y conservacin de las muestras - Las muestras deben enviarse al laboratorio de microbiologa lo antes posible. - Las muestras para cultivo de bacterias y hongos se mantendrn a temperatura ambiente (mximo 24 horas). - Las muestras para cultivo de micobacterias deben mantenerse refrigeradas a 4C (mximo 72 horas). Muestras inadecuadas - No se aceptarn para cultivo aquellas muestras que se obtengan mediante torundas sin medio de transporte y aquellas que se obtengan en condiciones no estriles. - Las torundas no son vlidas para cultivo de micobacterias. Observaciones - Si el enfermo ha recibido tratamiento, se indicar en la peticin junto a la duracin del mismo. - Para la correcta interpretacin del cultivo bacteriano, se recomienda especificar en el volante la localizacin anatmica de la muestra y las caractersticas que presenta. - Es recomendable indicar en el volante de peticin los antecedentes relacionados con la herida: traumatismos, mordeduras (humanas o por animales), quemaduras, contacto con agua o carne, diabetes, etc. - Si existe sospecha de infeccin por microorganismos altamente patgenos (e.j. Bacillus anthracis), se recomienda contactar con el laboratorio de microbiologa de forma inmediata. - Cuando exista sospecha de infeccin por micobacterias la muestra se recoger mediante puncin o biopsia. Las biopsias deben enviarse en un contenedor estril con suero fisiolgico estril. Pueden conservarse refrigeradas a 4C durante un mximo de 72 horas.

6.6. Exudado de lcera vascular

Procedimientos microbiolgicos ms habituales - Tincin de Gram. - Cultivo bacteriano aerobio y anaerobio. - Cultivo de hongos.

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Microorganismos con significado clnico que pueden aislarse en una lcera vascular Microorganismos Bacterias aerobias Frecuentes Menos frecuentes Aeromonas spp. Bacillus anthracis1 Nocardia spp.1 Enterobacterias (Escherichia coli, Proteus spp., Klebsiella spp., etc) Pseudomonas aeruginosa Staphylococcus aureus Streptococcus viridans Streptococcus agalactiae Streptococcus pyogenes Enterococcus spp.

Bacterias anaerobias

Hongos2
1

Bacteroides spp. Clostridium spp. Prevotella spp. Peptostreptococcus spp. Candida spp.

Fusobacterium spp.

Muy infrecuente. Cuando exista sospecha se recomienda ponerse en contacto con el laboratorio de microbiologa. Requiere medios y/o condiciones de cultivo especiales. 2 Si existe sospecha de infeccin fngica se solicitar cultivo especfico de hongos.

Aspergillus spp.1 Mucor spp.1

Material necesario para realizar la toma de la muestra - Suero fisiolgico estril o solucin de Ringer lactato estril. - Jeringa y aguja estril. - Tubo o contenedor estril con tapn de rosca. - Torunda con medio de transporte de Stuart-Amies. Tcnica para obtener la muestra A. Con aguja - Es el procedimiento de mayor rendimiento diagnstico y por lo tanto debe realizarse siempre que sea posible. - Lavar la superficie de la herida. - Recoger el pus con jeringa y aguja aspirando de zonas profundas o de los bordes.

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- Si la muestra es insuficiente, inyectar suero fisiolgico estril o solucin de Ringer lactato estril y aspirarlo nuevamente con la aguja. - Transferir el contenido a un contenedor estril. - No se recomienda el envo de jeringas con agujas por el riesgo de pinchazos. B. Con torunda - La toma de muestra con torunda es menos recomendable. Existe mayor riesgo de contaminacin con flora saprofita de la piel. - Debern utilizarse torundas con medio de transporte. - Lavar la superficie de la herida. - Rotar la torunda sobre la superficie de la herida evitando el contacto con la piel adyacente. Volumen o cantidad necesaria de muestra - En caso de obtenerse mediante puncin, se recomienda la mayor cantidad posible. Nmero de muestras y momento de la extraccin - Es suficiente una muestra. - La muestra se obtendr antes de iniciar el tratamiento. Transporte y conservacin de las muestras - Las muestras deben enviarse lo antes posible al laboratorio de microbiologa. - Si no es posible enviar la muestra, se mantendr a temperatura ambiente (mximo 24 horas). Muestras inadecuadas - No se aceptarn para cultivo aquellas muestras que se obtengan mediante torundas sin medio de transporte y aquellas que se obtengan en condiciones no estriles. Observaciones - Si el enfermo ha recibido tratamiento previo, se indicar en la peticin junto a la duracin del mismo. - Para la correcta interpretacin del cultivo bacteriano, se recomienda especificar en el volante la localizacin anatmica de la muestra y las caractersticas que presenta. - Si existe sospecha de infeccin por microorganismos altamente patgenos (e.j. Bacillus anthracis), se recomienda contactar con el laboratorio de microbiologa de forma inmediata.

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7. MUESTRAS DE PIEL Y FANERAS 7.1. Pelo

Procedimientos microbiolgicos ms habituales - Examen en fresco. - Cultivo de hongos dermatofitos. Microorganismos con significado clnico que pueden aislarse en un pelo Microorganismos Hongos dermatofitos1 Microsporum canis Trichophyton tonsurans Trichophyton mentagrophytes Trichophyton rubrum Frecuentes Menos frecuentes Trichophyton violaceum Microsporum audouinii Trichophyton verrucosum Trichophyton schoenleinii Trichophyton terrestre Epidermophyton floccosum

Se investigan de forma rutinaria.

Material necesario para realizar la toma de la muestra - Alcohol etlico al 70%. - Placa de Petri estril o contenedor estril de boca ancha y cierre hermtico. - Bistur, cortauas, tijeras o pinzas. - Torunda con medio de transporte de Stuart-Amies (lesiones exudativas). Tcnica para obtener la muestra - Antes de realizar la recogida de la muestra, los pelos afectados deben limpiarse con alcohol para eliminar la flora bacteriana, exudacin o restos de excipientes de tratamientos previos que dificultan el examen directo y el cultivo. - En las tias del cuero cabelludo o de la barba es importante recoger los pelos parasitados, arrancndolos con la raz intacta. Cortar los pelos es menos eficaz. En muchas ocasiones, los pelos parasitados se reconocen porque tienen una fluorescencia positiva con luz de Wood, estn deslustrados, rotos, friables o se desprenden fcilmente con el raspado.

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- Dependiendo del tipo de lesin observada, los pelos pueden recogerse mediante diferentes tcnicas: A. Tias microspricas (Microsporum canis) - Se reconocen por presentar una placa escamosa blanquecina con escasa o nula inflamacin, que puede alcanzar varios centmetros de dimetro, y en la cual se observan pelos rotos a 510 mm de la superficie cutnea. Estos pelos parasitados son friables y se arrancan con facilidad al raspar con el bistur. B. Tias tricofticas antropoflicas (Trichophyton tonsurans) - Forman pequeas placas escamosas con pelos de poca longitud, en forma de W o Z, situados en el espesor de la escama o bien rotos al nivel de la superficie dando un aspecto de puntos negros, casi siempre en ausencia de inflamacin. Estos puntos negros son los que deben extraerse con la punta del bistur o con pinzas. C. Tias tricofticas zooflicas (Trichophyton mentagrophytes) - Se observan placas escamosas de tamao variable, que se inflaman y se elevan sobre la superficie cutnea, apareciendo numerosas pstulas foliculares que originan un Kerion. Los pelos situados en la placa tienen una longitud variable pudindose extraer con facilidad sin causar dolor al paciente. D. Tia favosa (Trichophyton schoenleinii) - Presenta costras amarillentas, cncavas y centradas por un pelo, denominadas esctulas o cazoletas fvicas. Estn formadas por un conglomerado de hifas que originan una foliculitis y con el tiempo alopecia cicatricial por destruccin de la matriz. La muestra de estas lesiones debe ser tomada con asa (el pus folicular) y cucharilla (las cazoletas). - Algunos autores recomiendan que en las lesiones de tia tricoftica, en las cuales se encuentran mezclados pelos sanos y enfermos, es til cortar 20 a 30 pelos a una altura de 1 cm y posteriormente depositarlos en una placa de Petri. - Las lesiones inflamatorias con exudacin se frotarn con una torunda con medio de transporte. Volumen o cantidad necesaria - Es suficiente una mnima cantidad de pelos afectados.

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Nmero de muestras y momento de la extraccin - Es suficiente una muestra. - Antes de realizar la toma de la muestra es necesario asegurarse de que no se haya administrado ningn frmaco antifngico tpico o sistmico, al menos en los 4 das precedentes. Transporte y conservacin de las muestras - Las muestras no precisan medidas especiales de conservacin hasta su procesamiento. - Las muestras se enviarn en una placa de Petri precintada con papel celofn o en un contenedor estril de boca ancha hermticamente cerrado. - Las torundas se enviarn al laboratorio de microbiologa lo antes posible y a temperatura ambiente. Muestras inadecuadas - Se deben evitar los hisopos, siempre que el tipo de lesin lo permita. - No es recomendable refrigerar las muestras. El fro inhibe el crecimiento de los hongos dermatofitos. Observaciones - Se recomienda especificar en el volante de peticin la localizacin de la lesin, las caractersticas de la misma, datos epidemiolgicos de inters y el diagnstico clnico presuntivo. - Si el enfermo ha recibido tratamiento antifngico previo, se indicar en la peticin junto a la duracin del mismo. - El examen en fresco permite el diagnstico rpido, pero un resultado negativo no descarta la infeccin. - El crecimiento en cultivo de los hongos dermatofitos es tardo (5-21 das).

7.2. Raspado cutneo

Procedimientos microbiolgicos ms habituales - Examen en fresco. - Cultivo de hongos.

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Microorganismos con significado clnico que pueden aislarse en un raspado cutneo Microorganismos Hongos no dermatofitos1 Frecuentes Candida albicans Candida krusei Candida glabrata Candida tropicalis Menos frecuentes Candida krusei Candida tropicalis

Hongos dermatofitos1
1

Se investigan de forma rutinaria.

Trichophyton mentagrophytes Trichophyton terrestre Microsporum canis Trichophyton rubrum Trichophyton tonsurans Epidermophyton floccosum

Material necesario para realizar la toma de la muestra - Alcohol etlico al 70%. - Placa de Petri estril o contenedor estril de boca ancha y cierre hermtico. - Bistur. - Torunda con medio de transporte de Stuart-Amies (lesiones exudativas). Tcnica para obtener la muestra - Limpiar la lesin con alcohol. - En las muestras de piel se recomienda raspar el borde de la lesin con un bistur, recogiendo las escamas en una placa de Petri o en un contenedor estril. - En las lesiones intertriginosas (axilas, pliegues inguinales, etc) pueden obtenerse escamas raspando con un bistur. - Si la lesin es exudativa se puede frotar con una torunda con medio de transporte. Volumen o cantidad necesaria - No es necesario gran cantidad de muestra para el procesamiento. Nmero de muestras y momento de la extraccin - Es suficiente el envo de una muestra al laboratorio. - Antes de realizar la toma de la muestra es necesario asegurarse de que no se haya administrado ningn frmaco antifngico tpico o sistmico, al menos en los 4 das precedentes.

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Transporte y conservacin de las muestras - Las escamas se enviarn sin carcter de urgencia, no siendo necesarias medidas especiales de conservacin hasta su procesamiento. - Las torundas se deben enviar al laboratorio de microbiologa lo antes posible y a temperatura ambiente. Muestras inadecuadas - Se deben evitar los hisopos, siempre que el tipo de lesin lo permita. - No es recomendable refrigerar las muestras. El fro inhibe el crecimiento de los hongos dermatofitos. Observaciones - Se recomienda especificar en el volante de peticin la localizacin de la lesin, las caractersticas de la misma, datos epidemiolgicos de inters y el diagnstico clnico presuntivo. - Si el enfermo ha recibido tratamiento antifngico previo, se indicar en la peticin junto a la duracin del mismo. - El examen en fresco permite el diagnstico rpido, pero un resultado negativo no descarta la infeccin. - El crecimiento en cultivo de los hongos dermatofitos es tardo (5-21 das).

7.3. Ua
Procedimientos microbiolgicos ms habituales - Examen en fresco. - Cultivo de hongos.

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Microorganismos con significado clnico que pueden aislarse en una ua Onicomicosis Distal y lateral subungueal Microorganismos Hongos1 Frecuentes Trichophyton mentagrophytes Trichophyton rubrum Scopulariopsis spp. Candida spp. Trichophyton rubrum Trichophyton mentagrophytes Trichophyton rubrum Candida spp. Candida spp. Trichophyton mentagrophytes Trichophyton rubrum

Menos frecuentes Scytalidium dimidiatum

Proximal subungueal Blanca superficial Distal y lateral con paroniquia crnica Distrfica total
1

Hongos1 Hongos1 Hongos1 Hongos1

Acremonium spp. Fusarium spp. Aspergillus spp.

Se investigan de forma rutinaria.

Material necesario para realizar la toma de la muestra - Alcohol etlico al 70%. - Placa de Petri estril o contenedor estril de boca ancha con cierre hermtico. - Bistur, cortaas o tijeras. - Alicates (uas hiperqueratsicas). - Torunda con medio de transporte de Stuart-Amies (perionixis, onicolisis). Tcnica para obtener la muestra - Limpiar la ua con alcohol. - En las micosis ungueales, cuando la superficie externa de la ua est intacta, la muestra se obtiene raspando con el bistur por debajo del borde ungueal, recogiendo el material en una placa de Petri o en un contenedor estril. Si es posible se cortarn fragmentos finos de la ua afectada. - En la perionixis se recoger el exudado con una torunda y se obtendrn escamas raspando la superficie ungueal y la piel periungueal.

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- En la onicomicosis distal y lateral subungueal aparecen una uas hiperqueratsicas por lo que los alicates son esenciales para recoger el material subungueal. Se deben cortar fragmentos de la parte ms proximal de la ua. Es la parte menos accesible pero la que presenta los elementos fngicos ms jvenes y viables. - En la onicomicosis proximal subungueal se debe recoger el material blanquecino de la porcin ms profunda de la tabla ungueal. - En la onicomicosis blanca superficial se raspar con un bistur la superficie afectada. - En la onicolisis distal y lateral con paroniquia crnica se recoger el material ungueal ms cercano a la cutcula, raspando con el bistur en la profundidad del surco periungueal. Con torunda o asa estril se recoger el pus de la paroniquia acompaante tras incisin con bistur. - En la onicomicosis distrfica total se debe raspar preferentemente el material subungueal. Volumen o cantidad necesaria - Es variable dependiendo del lugar afectado. Nmero de muestras y momento de la extraccin - Es suficiente el envo de una muestra. - Antes de realizar la toma de la muestra es necesario asegurarse de que no se haya administrado ningn frmaco antifngico tpico o sistmico, al menos en los 4 das precedentes. Transporte y conservacin de las muestras - Enviar la muestra al laboratorio de microbiologa lo antes posible. - Conservar la muestra a temperatura ambiente. Muestras inadecuadas - Se deben evitar los hisopos, siempre que el tipo de lesin lo permita. - No es recomendable refrigerar las muestras. El fro puede inhibir el crecimiento de los hongos dermatofitos. Observaciones - Se recomienda especificar en el volante de peticin la localizacin de la lesin, las caractersticas de la misma, datos epidemiolgicos de inters y el diagnstico clnico presuntivo. - Si el enfermo ha recibido tratamiento antifngico previo, se indicar en la peticin junto a la duracin del mismo. - El examen en fresco permite el diagnstico rpido, pero un resultado negativo no descarta la infeccin. - El crecimiento de los hongos dermatofitos en cultivo es tardo (5-21 das).

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8. MUESTRAS DEL TRACTO INTESTINAL

Procedimientos microbiolgicos ms habituales - Cultivo bacteriano aerobio. - Deteccin directa de antgenos virales (Rotavirus, Adenovirus). - Examen en fresco (estudio de parsitos). - Tincin para estudio de Cryptosporidium parvum. Microorganismos Bacterias Frecuentes

8.1. Heces

Microorganismos con significado clnico que pueden aislarse en las heces Salmonella spp. Campylobacter spp. Aeromonas spp. Menos frecuentes Yersinia enterocolitica Shigella spp. Plesiomonas shigelloides Vibrio spp.1 Escherichia coli enteropatgeno1 Escherichia coli enterohemorrgico1 Adenovirus2 Astrovirus3

Virus Parsitos

Rotavirus2 Giardia lamblia

No se investiga de forma rutinaria. Si existe sospecha (consumo previo de pescado (Vibrio spp.), viajes, etc) se recomienda contactar con el laboratorio de microbiologa. Requiere medios y/o condiciones de cultivo especiales. 2 Se investiga en nios menores de 4-5 aos. Requiere tcnicas de deteccin antignica 3 No se investiga de forma rutinaria. Si existe sospecha (gastroenteritis en nios, ancianos, sida), contactar con el laboratorio de microbiologa. Su deteccin requiere tcnicas de PCR o deteccin antignica. 4 No se investiga de forma rutinaria. Si existe sospecha (diarrea en nios, inmunodeprimidos (sida) es recomendable contactar con el laboratorio de microbiologa. Se diagnostica mediante tincin de Kinyoun o auramina, o deteccin antignica. 5 Slo tiene significado clnico en casos de infestacin masiva y sintomatologa compatible.
1

Cryptosporidium parvum4 Entamoeba histolytica Blastocystis hominis5 Taenia spp. Trichuris trichiura Ascaris lumbricoides Hymenolepis nana

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Material necesario para realizar la toma de la muestra - Recipiente (orinal, cua o similar) lo ms limpio posible. - Contenedor estril de boca ancha y cierre hermtico. - Contenedor con medio de transporte para estudio de parsitos. Tcnica para obtener la muestra - Heces formadas o pastosas: con una cucharilla se recogern al menos 2 gramos de heces recin emitidas en un contenedor estril con cierre hermtico. Se elegirn aquellas porciones que contengan sangre, moco o pus. - Heces lquidas: se inocularn en un contenedor estril con cierre hermtico. Volumen o cantidad necesaria - Heces formadas o pastosas: muestras del tamao de una nuez son muy adecuadas. - Heces lquidas: entre 5 y 10 ml. - Si se utilizan contenedores con medio de transporte para estudio de parsitos se deben seguir las instrucciones facilitadas por el fabricante. Nmero de muestras y momento de la extraccin - Para el cultivo de heces y deteccin de antgenos virales es suficiente una muestra. - Para el estudio de parsitos se recoger la primera muestra de heces emitida en el da. Se enviarn 3 muestras recogidas en 3 das consecutivos. - La muestra se recoger antes de iniciar el tratamiento. Transporte y conservacin de las muestras - Las muestras deben enviarse al laboratorio lo antes posible. - Para estudio de bacterias y virus las muestras deben mantenerse refrigeradas hasta su llegada al laboratorio. - Para estudio de parsitos las muestras deben conservarse a temperatura ambiente. Muestras inadecuadas - Muestras contaminadas con orina. - Se evitar cualquier resto de jabn, detergente o desinfectante en el recipiente. - Heces que no hayan sido refrigeradas (excepto para estudio de parsitos). - Muestras envueltas en papel de aluminio.

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- Para estudio de parsitos no son vlidas las 3 muestras recogidas el mismo da. - Las muestras remitidas en medio de transporte para estudio de parsitos no son tiles para cultivo bacteriano ni para deteccin de antgenos virales. Observaciones - Si el enfermo ha recibido tratamiento antibitico previo, se indicar en la peticin junto a la duracin del mismo. - Si existe antecedente de viaje, es recomendable indicar el destino del mismo. - Si el enfermo es inmigrante es aconsejable especificar el pas de origen. - Indicar siempre el diagnstico de presuncin y la edad del enfermo. - Para estudio de virus (deteccin de antgenos) las heces deben ser lquidas. - Es conveniente evitar, especialmente para estudios parasitolgicos, la utilizacin previa de anticidos, laxantes oleosos y compuestos utilizados para estudios radiolgicos digestivos. - Para la investigacin de parsitos se recomienda que el paciente no ingiera en los 3 das previos al estudio verduras, frutas, legumbres, patatas, arroz, huevos, pastas, hgado y sesos. - Cuando se observen formas compatibles con parsitos en la zona anal o en las heces, se recogern en recipiente estril y se aadir una pequea cantidad de suero fisiolgico estril. - La presencia en heces de Candida spp., Entamoeba coli y Endolimax nana no tiene significado clnico. - En caso de brotes, es recomendable contactar con el laboratorio de microbiologa de forma inmediata. - La serologa tiene escasa utilidad para el diagnstico de infecciones gastrointestinales. - Se debe evitar el uso de torundas.

8.2. Test de Graham

Procedimiento microbiolgico ms habitual - Examen en fresco (investigacin de oxiuros). Microorganismos que pueden observarse - Enterobius vermicularis (oxiuros).

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Material necesario para realizar la toma de la muestra - Papel celo transparente. - Portaobjetos de vidrio. Tcnica para obtener la muestra - La obtencin de las muestras se realizar durante 3 das. - Lavar el ano por la noche. - A la maana siguiente (sin lavarse), aplicar papel celo varias veces sobre el ano. - Adherir el celo sobre una de las caras del portaobjetos. Volumen o cantidad necesaria - Tres portaobjetos de cristal tomados en 3 das consecutivos. Nmero de muestras y momento de la extraccin - Se recogern 3 muestras de 3 das consecutivos. - Por la noche la hembra del parsito deposita los huevos en los mrgenes del ano, por lo que la toma se realizar a primera hora de la maana. - Las muestras se obtendrn antes de iniciar el tratamiento antiparasitario. Transporte y conservacin de las muestras - Se enviarn los portaobjetos en el interior de un sobre al laboratorio de microbiologa. Muestras inadecuadas - El papel celofn debe ser transparente y adherirse a una nica cara del portaobjeto. - No depositar heces sobre el papel celofn. Observaciones - Si el enfermo ha recibido tratamiento antiparasitario previo, se indicar en la peticin junto a la duracin del mismo.

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9.1. Exudado endocervical

9. MUESTRAS DEL TRACTO GENITAL FEMENINO

Procedimientos microbiolgicos ms habituales - Tincin de Gram. - Cultivo bacteriano aerobio. Microorganismos con significado clnico que pueden aislarse en un exudado endocervical Microorganismos Bacterias Virus3 Frecuentes Neisseria gonorrhoeae1 Virus del papiloma humano de alto riesgo oncognico (VPH 16, 18)4 Virus herpes simple5 Menos frecuentes Chlamydia trachomatis2 Ureaplasma urealyticum2 Mycoplasma hominis2

Virus del papiloma humano de bajo riesgo oncognico (VPH 6, 11)4

Se investiga de forma rutinaria. No se investiga de forma rutinaria. La identificacin requiere tcnicas de PCR, inmunofluorescencia o deteccin antignica. Se recomienda ponerse en contacto con el laboratorio de microbiologa. 3 La deteccin de virus no se realiza de forma rutinaria. Se recomienda contactar con el laboratorio de microbiologa y solicitar medio especial de trasporte para virus. 4 Su deteccin requiere tcnicas de PCR o hibridacin de captura. 5 Su deteccin requiere tcnicas de cultivo celular, Shell-vial o PCR.
1 2

Material necesario para realizar la toma de la muestra - Camilla ginecolgica. - Espculo estril. - Torunda de algodn seca. - Torunda de dacron con medio de transporte de Stuart-Amies. - Medio de transporte para virus.

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Tcnica para obtener la muestra - Introducir un espculo sin lubricante con la paciente en posicin ginecolgica. - Limpiar las secreciones vaginales del exocrvix con una torunda seca de algodn. - Bajo visin directa se comprimir cuidadosamente el crvix con las palas del espculo y se introducir la torunda de dacron en el canal endocervical, rotndola en su interior. - Extraer la torunda sin tocar los bordes e introducirla en el tubo con medio de transporte. - Para la deteccin de virus, la torunda se introducir en el medio de transporte especfico para virus. En caso de no disponer, se deber enviar la torunda al laboratorio de microbiologa con la mayor rapidez posible. Nmero de muestras y momento de la extraccin - Se recomienda una torunda para cultivo bacteriano. - Si existe sospecha de infeccin por Chlamydia trachomatis se enviar otra torunda diferente. - Si existe sospecha de infeccin por virus se enviar otra torunda diferente. - La muestra debe obtenerse antes de iniciar el tratamiento. Transporte y conservacin de las muestras - Todas las muestras se deben enviar al laboratorio lo antes posible, especialmente si existe sospecha de infeccin por Neisseria gonorrhoeae. - Las muestras para cultivo bacteriano se mantendrn a 37C y si no es posible, a temperatura ambiente (mximo 24 horas). - Las muestras para deteccin de Chlamydia trachomatis o virus se conservarn refrigeradas a 4C (mximo 48-72 horas). - Si existe sospecha de infeccin por Mycoplasma hominis o Ureaplasma urealyticum se recomienda utilizar medio de transporte especfico (urea-arginina), y mantener la muestra refrigerada a 4C. Si no se dispone del medio es aconsejable enviar la muestra al laboratorio lo antes posible. Muestras inadecuadas - No se aceptarn para cultivo aquellas muestras que se obtengan mediante torundas sin medio de transporte y aquellas que se obtengan en condiciones no estriles. Observaciones - Si el enfermo ha recibido tratamiento previo, se indicar en la peticin junto a la duracin.

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- La viabilidad de Neisseria gonorrhoeae es muy limitada y no puede garantizarse transcurridas 6-8 horas. La muestra debe enviarse al laboratorio rpidamente y sembrarse de forma muy urgente. Debe evitarse el uso de torundas de algodn ya que contienen cidos grasos insaturados que pueden inhibir el crecimiento de Neisseria gonorrhoeae. - El virus del papiloma humano de alto riesgo oncognico es la causa del cncer de cuello de tero. - El virus del papiloma humano de bajo riesgo oncognico produce verrugas genitales (condiloma acuminado). Su presencia en endocervix es infrecuente y de difcil diagnstico. - Chlamydia trachomatis es un cofactor oncognico del cncer de cuello uterino y con frecuencia se asocia a infeccin por el virus del papiloma humano.

9.2. Exudado rectal/anal

Procedimientos microbiolgicos ms habituales - Tincin de Gram. - Cultivo bacteriano aerobio. - Cultivo de hongos. Microorganismos con significado clnico que pueden aislarse en un exudado rectal/anal Microorganismos Bacterias Hongos Virus4 Frecuentes Streptococcus agalactiae1 Candida spp.3 Menos frecuentes Neisseria gonorrhoeae2 Treponema pallidum2 Virus del papiloma humano de bajo riesgo oncognico6

Virus herpes simple5 Virus del papiloma humano de alto riesgo oncognico6

1 En mujeres embarazadas se investiga de forma rutinaria en el tercer trimestre de gestacin (estudio de portadoras). 2 No se investiga de forma rutinaria. Si existe sospecha es recomendable ponerse en contacto con el laboratorio de microbiologa. 3 Se asocia a candidiasis anal. Si existe sospecha solicitar cultivo especfico de hongos. 4 La deteccin de virus no se realiza de forma rutinaria. Si existe sospecha de infeccin viral se debe contactar con el laboratorio de microbiologa y solicitar medio especial de trasporte para virus. 5 Su deteccin requiere tcnicas de cultivo celular, Shell-vial o PCR. 6 Su deteccin requiere tcnicas de PCR o hibridacin de captura.

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Material necesario para realizar la toma de la muestra - Torunda con medio de transporte de Stuart-Amies. - Medio de transporte para virus. Tcnica para obtener la muestra - Exudados rectales: introducir la torunda suavemente a travs del esfnter anal y rotar contra las criptas rectales. - Exudados anales: rotar la torunda sobre los mrgenes del ano sin introducirla en el recto. Nmero de muestras y momento de la extraccin - Se recomienda una muestra para cultivo bacteriano y de hongos. - Si existe sospecha de infeccin por virus se enviar otra torunda diferente. - La muestra se obtendr antes de iniciar el tratamiento. Transporte y conservacin de las muestras - Las muestras para cultivo bacteriano y de hongos se mantendrn a 37C y si no es posible a temperatura ambiente (mximo 24 horas). - Las muestras para deteccin de virus se conservarn refrigeradas a 4C (mximo 72 horas). - Todas las muestras se deben enviar al laboratorio lo antes posible. Muestras inadecuadas - No se aceptarn para cultivo aquellas muestras que se obtengan mediante torundas sin medio de transporte y aquellas que se obtengan en condiciones no estriles. Observaciones - Si el enfermo ha recibido tratamiento previo, se indicar en la peticin junto a la duracin del mismo. - Si existe sospecha de infeccin por Neisseria gonorrhoeae la muestra debe enviarse rpidamente y sembrarse de forma muy urgente. La viabilidad de Neisseria gonorrhoeae es muy limitada y no puede garantizarse transcurridas 6-8 horas. Deben evitarse torundas de algodn ya que contienen cidos grasos insaturados que pueden inhibir el crecimiento de Neisseria gonorrhoeae. - Si se sospecha infeccin por Treponema pallidum se recomienda realizar impronta del chancro y enviarla rpidamente para visin del fresco en campo oscuro. Es imprescindible obtener muestra

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de suero para estudio serolgico. La localizacin anal del chancro sifiltico es infrecuente. Para ms detalles sobre la recogida de la muestra, consultar el apartado lcera genital. - El virus del papiloma humano de alto riesgo oncognico se asocia a cncer anal. - El virus del papiloma humano de bajo riesgo oncognico produce verrugas genitales (condiloma acuminado). La localizacin anal es infrecuente.

9.3. Exudado uretral femenino

Procedimientos microbiolgicos ms habituales - Examen en fresco (Trichomonas vaginalis). - Tincin de Gram. - Cultivo bacteriano aerobio. - Cultivo de hongos. Microorganismos con significado clnico que pueden aislarse en un exudado uretral Microorganismos Bacterias Frecuentes Neisseria gonorrhoeae Chlamydia trachomatis1 Menos frecuentes Neisseria meningitidis Enterobacterias(Escherichia coli, Proteus spp., Klebsiella spp., etc)2 Pseudomonas aeruginosa2 Haemophilus influenzae Moraxella catarrhalis Gardnerella vaginalis Ureaplasma urealyticum1 Treponema pallidum3 Candida spp.2 Trichomonas vaginalis4

Hongos Virus5

Parsitos

1 No se investiga de forma rutinaria. La identificacin requiere tcnicas de PCR, inmunofluorescencia o deteccin antignica. Se recomienda ponerse en contacto con el laboratorio de microbiologa. 2 Su aislamiento no indica necesariamente la existencia de uretritis.

Virus del papiloma humano de alto y bajo riesgo oncognico6 Virus herpes simple7

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No se investiga de forma rutinaria. Si existe sospecha es recomendable contactar con el laboratorio de microbiologa. Solicitar serologa. 4 Infrecuente. Se asocia con mayor frecuencia a vaginitis. 5 La deteccin de virus no se realiza de forma rutinaria. Si existe sospecha de infeccin viral se recomienda contactar con el laboratorio de microbiologa y solicitar medio especial de trasporte para virus. 6 Su deteccin requiere tcnicas de PCR o hibridacin de captura. 7 Su deteccin requiere tcnicas de cultivo celular, Shell-vial o PCR.
3

Material necesario para realizar la toma de la muestra - Torunda fina con varilla de alambre no excesivamente flexible, de alginato clcico o dacron con medio de transporte de Stuart-Amies. - Gasas estriles. - Medio de transporte para virus. Tcnica para obtener la muestra - Limpiar la zona periuretral con una gasa estril. - Introducir la torunda unos 2 cm en la uretra. - Girar la torunda en sentido antihorario 2-3 veces. Nmero de muestras y momento de la extraccin - Se recomienda una torunda para cultivo bacteriano y de hongos. - Si existe sospecha de uretritis por Trichomonas vaginalis se enviar una torunda adicional con medio de transporte para realizar examen en fresco. Puede ser de utilidad recoger una muestra de exudado vaginal para realizar examen en fresco. - Si existe sospecha de infeccin por Chlamydia trachomatis se enviar otra torunda diferente. - Si existe sospecha de infeccin por virus se enviar otra torunda diferente. - Las muestras se obtendrn antes de iniciar el tratamiento. Transporte y conservacin de las muestras - Las muestras para cultivo bacteriano y de hongos se mantendrn a 37C y si no es posible, a temperatura ambiente (mximo 24 horas). - Las muestras para deteccin de Chlamydia trachomatis o virus se conservarn refrigeradas a 4C (mximo 48-72 horas). - Todas las muestras se deben enviar al laboratorio lo antes posible, especialmente si existe sospecha de infeccin por Neisseria gonorrhoeae.

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- Si existe sospecha de infeccin por Ureaplasma urealyticum se recomienda utilizar medio de transporte especfico (urea-arginina) y mantener la muestra refrigerada a 4C. Si el medio no est disponible se aconseja enviar la muestra al laboratorio lo antes posible. Muestras inadecuadas - No se aceptarn para cultivo aquellas muestras que se obtengan mediante torundas sin medio de transporte y aquellas que se obtengan en condiciones no estriles. Observaciones - Si el enfermo ha recibido tratamiento previo, se indicar en la peticin junto a la duracin del mismo. - La muestra debe recogerse antes de la primera miccin de la maana. Si no es posible, se deber esperar al menos una hora tras la ltima miccin para recogerla. - La viabilidad de Neisseria gonorrhoeae es limitada y no puede garantizarse transcurridas 6-8 horas. La muestra debe enviarse al laboratorio rpidamente y sembrarse de forma urgente. Debe evitarse el uso de torundas de algodn ya que contienen cidos grasos insaturados que pueden inhibir el crecimiento de Neisseria gonorrhoeae. - Los bacilos gramnegativos (enterobacterias, Pseudomonas aeruginosa) producen uretritis en enfermos sondados, immunodeprimidos, diabticos, homosexuales y enfermos con patologas urolgicas (estenosis). - El diagnstico de la uretritis candidisica es difcil de realizar porque Candida spp. puede aislarse en la uretra de mujeres sanas. La observacin de pseudomicelios en la tincin de Gram es un criterio de patogenicidad. - Un chancro lutico en la uretra puede simular una uretritis. Para ms detalles sobre la recogida de la muestra para realizar examen en campo oscuro, consultar el apartado lcera genital. Es imprescindible solicitar serologa de sfilis. - La infeccin uretral por el virus del papiloma humano de bajo riesgo oncognico se asocia a verrugas en la uretra distal (condiloma acuminado). - La infeccin uretral por el virus del papiloma humano de alto riesgo oncognico es muy infrecuente en mujeres.

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9.4. Exudado vaginal

Procedimientos microbiolgicos ms habituales - Examen en fresco (Trichomonas vaginalis). - Tincin de Gram (vaginosis bacteriana). - Cultivo bacteriano aerobio. - Cultivo de hongos. Microorganismos con significado clnico que pueden aislarse en un exudado vaginal Microorganismos Bacterias Frecuentes Streptococcus pyogenes1 Listeria monoytogenes2 1 Haemophilus influenzae Staphylococcus aureus Streptococcus pneumoniae1 Neisseria gonorrhoeae Streptococcus agalactiae3 Gardnerella vaginalis Mycoplasma hominis Prevotella spp. Mobiluncus spp. Bacteroides spp. Fusobacterium spp. Candida spp.4 Menos frecuentes

Flora bacteriana polimicrobiana aerobia y anaerobia (vaginosis bacteriana)4 Hongos Virus5

1 2

Parsitos

Trichomonas vaginalis4

Produce vaginitis en nias. La incidencia en mujeres adultas es menor. Si existe sospecha se debe contactar con el laboratorio de microbiologa 3 Se investiga de forma rutinaria en mujeres embarazadas durante el tercer trimestre (estudio de portadoras). 4 Se investiga de rutina. 5 La deteccin de virus no se realiza de forma rutinaria. Si existe sospecha de infeccin viral se debe contactar con el laboratorio de microbiologa y solicitar medio especial de trasporte para virus. 6 Su deteccin requiere tcnicas de PCR o hibridacin de captura. 7 Su deteccin requiere tcnicas de cultivo celular, Shell-vial o PCR.

Virus del papiloma humano de alto y bajo riesgo oncognico6 Virus herpes simple7

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Material necesario para realizar la toma de la muestra - Camilla ginecolgica. - Espculo estril. - Torunda de alginato clcico o dacron con medio de transporte de Stuart-Amies. - Medio de transporte para virus. Tcnica para obtener la muestra - Introducir el espculo sin lubricante con la paciente en posicin ginecolgica. - Con la torunda realizar un frotis de la zona de mayor exudado o en su defecto del fondo de saco vaginal posterior. - Si la toma se realiza para estudio de portadora de Streptococcus agalactiae, la muestra se recoger sin espculo y antes de cualquier manipulacin ginecolgica. Nmero de muestras y momento de la extraccin - Se recomienda una torunda para realizar tincin de Gram, cultivo bacteriano (en nias) y de hongos. - Si existe sospecha de infeccin por virus se enviar otra torunda diferente. - Si existe sospecha de infeccin por Trichomonas vaginalis se enviar otra torunda diferente. - Las muestras se obtendrn antes de iniciar el tratamiento. Transporte y conservacin de las muestras - Para tincin de Gram y cultivo bacteriano y de hongos, las muestras se mantendrn a 37C y si no es posible se conservarn a temperatura ambiente (mximo 24 horas). - Las muestras para deteccin de virus se conservarn refrigeradas a 4C (mximo 72 horas). - Todas las muestras se deben enviar al laboratorio lo antes posible. Muestras inadecuadas - No se aceptarn para cultivo aquellas muestras que se obtengan mediante torundas sin medio de trasporte y aquellas que se obtengan en condiciones no estriles. Observaciones - En los das previos a la obtencin de la muestra no deben utilizarse soluciones antispticas, vulos o pomadas. Si se han utilizado, se har constar en la peticin.

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- El diagnstico microbiolgico de vaginosis bacteriana se realiza mediante tincin de Gram. Para completar el diagnstico es de utilidad la deteccin del pH vaginal y la produccin de aminas voltiles por adiccin de KOH al 10%. El flujo vaginal es caracterstico: grisceo, adherido a la pared vaginal y maloliente (olor a pescado). Es imprescindible indicar la edad para la correcta interpretacin de la tincin de Gram. - Es importante indicar en la peticin si se trata de una nia, mujer gestante o purpera, para el estudio de patgenos especficos. - Si existe sospecha de vaginitis por Trichomonas vaginalis es recomendable comunicarlo al laboratorio de microbiologa. Su deteccin puede realizarse rpidamente mediante examen en fresco. Existe la posibilidad de realizar cultivo pero resulta ms tardo. - El principal reservorio de Neisseria gonorrhoeae, Chlamydia trachomatis, virus herpes y virus del papiloma humano en el tracto genital femenino es el endocrvix y no la vagina. El exudado vaginal no es la muestra ms adecuada para el estudio de estos microorganismos. - La presencia de Candida spp. no indica necesariamente la existencia de vaginitis. El 25% de las mujeres sanas son portadoras asintomticas de Candida spp. La presencia de levaduras con pseudomicelio en la tincin de Gram se considera un criterio de patogenicidad.

9.5. Exudado vulvar

Procedimientos microbiolgicos ms habituales - Tincin de Gram (Haemophilus ducreyi). - Cultivo bacteriano aerobio. - Cultivo de hongos. Microorganismos con significado clnico que pueden aislarse en un exudado vulvar Microorganismos Bacterias Hongos Virus3 Frecuentes Streptococcus agalactiae Streptococcus pyogenes Staphylococcus aureus Candida spp. Virus del papiloma humano de bajo riesgo oncognico4 Virus herpes simple5 Menos frecuentes Treponema pallidum1 Haemophilus ducreyi2

Virus del papiloma humano de alto riesgo oncognico4

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No se investiga de forma rutinaria. Si existe sospecha es recomendable contactar con el laboratorio de microbiologa. 2 Muy infrecuente. Se recomienda contactar con el laboratorio de microbiologa. 3 La deteccin de virus no se realiza de forma rutinaria. Si existe sospecha de infeccin viral se debe contactar con el laboratorio de microbiologa y solicitar medio especial de trasporte para virus. 4 Su deteccin requiere tcnicas de PCR o hibridacin de captura. 5 Su deteccin requiere tcnicas de cultivo celular, Shell-vial o PCR.
1

Material necesario para realizar la toma de la muestra - Camilla ginecolgica. - Alcohol etlico o isoproplico al 70%. - Agua estril. - Jeringa y aguja estril. - Torunda con medio de transporte de Stuart-Amies. - Medio de transporte para virus. Tcnica para obtener la muestra - Utilizar alcohol para desinfectar la piel y agua estril para las mucosas. - Realizar frotis de las lesiones. - Si hay abscesos, aspirar con una jeringa e inocular el contenido en un contenedor estril. Se debe evitar mandar jeringas con agujas por el riesgo de pinchazos. Nmero de muestras y momento de la extraccin - Se recomienda una muestra para cultivo bacteriano y de hongos. - Si existe sospecha de infeccin por virus se enviar otra torunda diferente. - Las muestras se obtendrn antes de iniciar el tratamiento. Transporte y conservacin de las muestras - Las muestras para cultivo bacteriano y de hongos se mantendrn a 37C y si no es posible, a temperatura ambiente (mximo 24 horas). - Las muestras para deteccin de virus se conservarn refrigeradas a 4C (mximo 72 horas). - Todas las muestras se deben enviar al laboratorio lo antes posible.

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Muestras inadecuadas - No se aceptarn para cultivo aquellas muestras que se obtengan mediante torundas sin medio de transporte y aquellas que se obtengan en condiciones no estriles. Observaciones - En los das previos a la obtencin de la muestra no deben utilizarse soluciones antispticas o pomadas. Si se han utilizado, se har constar en la peticin. - Si se sospecha infeccin por Treponema pallidum, se recomienda realizar impronta del chancro y enviarla rpidamente al laboratorio de microbiologa para visin del fresco en campo oscuro. Es imprescindible obtener una muestra de suero para estudio serolgico. Para ms detalles sobre la recogida de la muestra, consultar el apartado lcera genital. - Si se sospecha infeccin por Haemophilus ducreyi (chancro blando) se recomienda contactar con el laboratorio de microbiologa. El cultivo requiere medios especiales e incubacin prolongada (7-10 das). La tincin de Gram del exudado puede tener utilidad (sensibilidad del 50%). - La infeccin vulvar por el virus del papiloma humano de bajo riesgo oncognico produce verrugas genitales (condiloma acuminado). - La infeccin vulvar por el el virus del papiloma humano de alto riesgo oncognico se asocia a cncer vulvar (muy infrecuente).

9.6. lcera genital

Procedimientos microbiolgicos ms habituales - Tincin de Gram. (Haemophilus ducreyi) - Visin microscpica en campo oscuro (Treponema pallidum). - Cultivo bacteriano (Haemophilus ducreyi). Microorganismos con significado clnico que pueden aislarse en una lcera genital Microorganismos Bacterias Virus2
1 2

Frecuentes

Treponema pallidum

Menos frecuentes

Muy infrecuente. Se recomienda contactar con el laboratorio de microbiologa. La deteccin de virus no se realiza de forma rutinaria. Si existe sospecha de infeccin viral se debe contactar con el laboratorio de microbiologa y solicitar medio especial de trasporte para virus. 3 Su deteccin requiere tcnicas de cultivo celular, Shell- vial o PCR.

Virus herpes simple3

Haemophilus ducreyi1

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Material necesario para realizar la toma de la muestra - Guantes y gasas estriles. - Suero salino estril. - Pipeta Pasteur. - Portaobjetos y cubreobjetos. - Jeringa con aguja estril. - Torunda con medio de transporte de Stuart-Aimes. Tcnica para obtener la muestra para visin en campo oscuro. - La visin en campo oscuro sirve para ver formas mviles de Treponema pallidum. - Se limpiar la superficie de la lesin con gasas humedecidas con suero salino. Se evitarn jabones u otras sustancias que puedan tener actividad antitreponmica. - Con una gasa seca se frotar suavemente la lesin hasta que se obtenga el fluido, intentando no producir demasiado sangrado ya que pueden interferir en el examen microscpico. - Limpiar las primeras gotas de exudado que se obtengan y dejar salir el fluido profundo a la superficie. Recoger el fluido por capilaridad con una pipeta Pasteur. - Colocar una gota de fluido en un portaobjetos limpio y examinar inmediatamente en microscopio de campo oscuro. - Si es necesario se puede aadir una gota de suero salino. Tambin puede aplicarse el portaobjetos directamente sobre el fluido para recogerlo. Tcnica para obtener la muestra para cultivo bacteriano - El cultivo bacteriano est indicado si existe sospecha de infeccin por Haemophilus ducreyi o sobreinfeccin bacteriana. - Se limpiar la superficie de la lesin con gasas humedecidas con suero salino. Se evitarn jabones. - Con una gasa seca se frotar suavemente la lesin hasta que se obtenga el fluido. - Aspirar el fluido con una jeringa y aguja estril. Si no es posible, se utilizar una torunda con medio de transporte. El rendimiento de las muestras recogidas con torunda es menor. Nmero de muestras y momento de la extraccin - Para visin en campo oscuro se recomiendan 3 muestras obtenidas en 3 das consecutivos. - Para cultivo bacteriano es suficiente una muestra. - Para estudio de virus se enviar otra muestra diferente. - Las muestras se obtendrn antes de iniciar el tratamiento.

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Transporte y conservacin de las muestras - Las muestras se deben enviar al laboratorio de microbiologa de forma urgente, especialmente las improntas para visin en campo oscuro. - Las muestras para cultivo bacteriano se mantendrn a 37C y si no es posible, a temperatura ambiente (mximo 24 horas). - Las muestras para estudio de virus se mantendrn refrigeradas a 4C (mximo 72 horas). Muestras inadecuadas - No se aceptarn para cultivo aquellas muestras que se obtengan mediante torundas sin medio de transporte y aquellas que se obtengan en condiciones no estriles. Observaciones - Si el enfermo ha recibido tratamiento previo, se indicar en la peticin junto a la duracin del mismo. - Si existe sospecha de infeccin por Treponema pallidum es imprescindible obtener una muestra de suero para realizar estudio serolgico. La visin en campo oscuro slo resulta til si se realiza inmediatamente despus de recoger la muestra. El retraso en su visualizacin puede dar lugar a falsos negativos. - Si existe sospecha de infeccin por Haemophilus ducreyi (chancro blando) se recomienda contactar con el laboratorio de microbiologa, puesto que el cultivo requiere medios especiales e incubacin prolongada (7-10 das). La tincin de Gram del exudado puede tener utilidad (sensibilidad del 50%). - Las lceras genitales pueden sobreinfectarse por bacterias (Staphylococcus aureus, Streptococcus agalactiae, etc) u hongos (Candida spp.). Si existe sospecha de sobreinfeccin se solicitar cultivo en medios habituales.

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10. MUESTRAS DEL TACTO GENITAL MASCULINO 10.1. Exudado rectal/anal

Procedimientos microbiolgicos ms habituales - Tincin de Gram. - Cultivo bacteriano aerobio. - Cultivo de hongos. Microorganismos con significado clnico que pueden aislarse en un exudado rectal/anal Microorganismos Frecuentes Menos frecuentes Bacterias Hongos Virus3 Neisseria gonorrhoeae1 Treponema pallidum1

Candida spp.2

Virus herpes simple4 Virus del papiloma humano de alto riesgo oncognico5

Virus del papiloma humano de bajo riesgo oncognico5

No se investiga de forma rutinaria. Si existe sospecha es recomendable contactar con el laboratorio de microbiologa. 2 Se asocia a candidiasis anal. Si existe sospecha solicitar cultivo especfico de hongos. 3 La deteccin de virus no se realiza de forma rutinaria. Si existe sospecha de infeccin viral se debe contactar con el laboratorio de microbiologa y solicitar medio especial de trasporte para virus. 4 Su deteccin requiere tcnicas de cultivo celular, Shell-vial o PCR. 5 Su deteccin requiere tcnicas de PCR o hibridacin de captura.
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Material necesario para realizar la toma de la muestra - Torunda con medio de transporte de Stuart-Amies. - Medio de transporte para virus. Tcnica para obtener la muestra - Exudados rectales: introducir la torunda suavemente a travs del esfnter anal y rotar contra las criptas rectales. - Exudados anales: rotar la torunda sobre los mrgenes del ano sin introducirla en el recto.

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Nmero de muestras y momento de la extraccin - Se recomienda una muestra para cultivo bacteriano y de hongos. - Si existe sospecha de infeccin por virus se enviar otra torunda diferente. - Las muestras se obtendrn antes de iniciar el tratamiento. Transporte y conservacin de las muestras - Las muestras para cultivo bacteriano y de hongos se mantendrn a 37C y si no es posible a temperatura ambiente (mximo 24 horas). - Las muestras para deteccin de virus se conservarn refrigeradas a 4C (mximo 72 horas). - Todas las muestras se deben enviar al laboratorio lo antes posible. Muestras inadecuadas - No se aceptarn para cultivo aquellas muestras que se obtengan mediante torundas sin medio de transporte y aquellas que se obtengan en condiciones no estriles. Observaciones - Si el enfermo ha recibido tratamiento previo, se indicar en la peticin junto a la duracin del mismo. - Si existe sospecha de infeccin por Neisseria gonorrhoeae la muestra debe enviarse rpidamente y sembrarse de forma muy urgente. La viabilidad de Neisseria gonorrhoeae es muy limitada y no puede garantizarse transcurridas 6-8 horas. Debe evitarse torundas de algodn ya que contienen cidos grasos insaturados que pueden inhibir el crecimiento de Neisseria gonorrhoeae. - Si se sospecha infeccin por Treponema pallidum, se recomienda realizar impronta del chancro y enviarla rpidamente para visin del fresco en campo oscuro. Es imprescindible obtener una muestra de suero para estudio serolgico. La localizacin anal del chancro sifiltico es infrecuente. Para ms detalles sobre la recogida de la muestra, consultar el apartado lcera genital. - El virus del papiloma humano de alto riesgo oncognico se asocia a cncer anal. - El virus del papiloma humano de bajo riesgo oncognico produce verrugas genitales (condiloma acuminado). La localizacin anal es infrecuente.

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10.2. Exudado uretral masculino

Procedimientos microbiolgicos ms habituales - Examen en fresco (Trichomonas vaginalis). - Tincin de Gram. - Cultivo bacteriano aerobio. - Cultivo de hongos. Microorganismos con significado clnico que pueden aislarse en un exudado uretral Microorganismos Bacterias Frecuentes Neisseria gonorrhoeae Chlamydia trachomatis1 Menos frecuentes Neisseria meningitidis Enterobacterias (Escherichia coli, Proteus spp., Klebsiella spp., etc)2 Pseudomonas aeruginosa2 Haemophilus influenzae Moraxella catarrhalis Gardnerella vaginalis Ureaplasma urealyticum1 Treponema pallidum3 Candida spp.2 Trichomonas vaginalis4

Hongos Virus5
1

Parsitos

No se investiga de forma rutinaria. La identificacin puede realizarse por PCR, inmunofluorescencia o deteccin antignica. Si existe sospecha de infeccin se recomienda contactar con el laboratorio de microbiologa. 2 Su aislamiento no indica necesariamente la existencia de uretritis. 3 No se investiga de forma rutinaria. Si existe sospecha se recomienda contactar con el laboratorio de microbiologa. Solicitar serologa. 4 Tambin puede detectarse en el examen en fresco de orina. 5 La deteccin de virus no se realiza de forma rutinaria. Si existe sospecha de infeccin viral se debe contactar con el laboratorio de microbiologa y solicitar medio especial de trasporte para virus. 6 Su deteccin requiere tcnicas de PCR o hibridacin de captura. 7 Su deteccin requiere tcnicas de cultivo celular, Shell-vial o PCR.

Virus del papiloma humano de alto y bajo riesgo oncognico6 Virus herpes simple7

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Material necesario para realizar la toma de la muestra - Torunda fina con varilla de alambre no excesivamente flexible, de alginato clcico o dacron con medio de transporte de Stuart-Amies. - Gasas estriles. - Medio de transporte para virus. Tcnica para obtener la muestra - Limpiar la zona periuretral con una gasa estril. - Introducir la torunda unos 2 cm en la uretra. - Girar la torunda en sentido antihorario. Nmero de muestras y momento de la extraccin - Se recomienda una torunda para cultivo bacteriano y de hongos. - Si existe sospecha de infeccin por Trichomonas vaginalis se enviar una torunda adicional con medio de transporte para realizar examen en fresco. Puede ser de utilidad recoger una muestra de orina para realizar examen en fresco. - Si existe sospecha de infeccin por Chlamydia trachomatis se enviar otra torunda diferente. - Si existe sospecha de infeccin por virus se enviar otra torunda diferente con medio de transporte especfico. - Las muestras se obtendrn antes de iniciar el tratamiento. Transporte y conservacin de las muestras - Las muestras para cultivo bacteriano y de hongos se mantendrn a 37C y si no es posible, a temperatura ambiente (mximo 24 horas). - Las muestras para deteccin de Chlamydia trachomatis o virus se conservarn refrigeradas a 4C (mximo 48-72 horas). - Todas las muestras se deben enviar al laboratorio lo antes posible, especialmente si existe sospecha de infeccin por Neisseria gonorrhoeae. - Si existe sospecha de infeccin por Ureaplasma urealyticum se recomienda utilizar medio de transporte especfico (urea-arginina) y mantener la muestra refrigerada a 4C. Si no se dispone del medio es aconsejable enviar la muestra al laboratorio lo antes posible.

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Muestras inadecuadas - No se aceptarn para cultivo aquellas muestras que se obtengan mediante torundas sin medio de transporte y aquellas que se obtengan en condiciones no estriles. Observaciones - Si el enfermo ha recibido tratamiento previo, se indicar en la peticin junto a la duracin del mismo. - La muestra debe recogerse antes de la primera miccin de la maana. Si no es posible, se deber esperar al menos una hora tras la ltima miccin para recogerla. - La viabilidad de Neisseria gonorrhoeae es limitada y no puede garantizarse transcurridas 6-8 horas. La muestra debe enviarse al laboratorio rpidamente y sembrarse de forma urgente. Debe evitarse el uso de torundas de algodn ya que contienen cidos grasos insaturados que pueden inhibir el crecimiento de Neisseria gonorrhoeae. - Los bacilos gramnegativos (enterobacterias, Pseudomonas aeruginosa) producen uretritis en sondados, immunodeprimidos, diabticos, homosexuales y enfermos con patologas urolgicas (estenosis). - El diagnstico de las uretritis candidisicas es difcil de realizar porque Candida spp. puede aislarse en la uretra de personas sanas. - Un chancro lutico en la uretra puede simular una uretritis. Para ms detalles sobre la recogida de la muestra para realizar examen en campo oscuro, consultar el apartado lcera genital. Es imprescindible solicitar serologa de sfilis. - La infeccin uretral por el virus del papiloma humano de bajo riesgo oncognico se asocia a verrugas en la uretra distal (condiloma acuminado). - La uretra es el principal reservorio del virus del papiloma humano de alto riesgo oncognico en el varn. La infeccin es asintomtica y con frecuencia desaparece espontneamente.

10.3. lcera genital

Procedimientos microbiolgicos ms habituales - Tincin de Gram (Haemophilus ducreyi). - Visin microscpica en campo oscuro (Treponema pallidum). - Cultivo bacteriano (Haemophilus ducreyi).

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Microorganismos con significado clnico que pueden aislarse en una lcera genital Microorganismos Bacterias Virus2
1 2

Frecuentes

Treponema pallidum

Menos frecuentes

Muy infrecuente. Se recomienda contactar con el laboratorio de microbiologa. La deteccin de virus no se realiza de forma rutinaria. Si existe sospecha de infeccin viral se debe contactar con el laboratorio de microbiologa y solicitar medio especial de trasporte para virus. 3 Su deteccin requiere tcnicas de cultivo celular, Shell-vial o PCR.

Virus herpes simple3

Haemophilus ducreyi1

Material necesario para realizar la toma de la muestra - Guantes estriles y gasas estriles. - Suero salino estril. - Pipeta Pasteur. - Portaobjetos y cubreobjetos. - Jeringa con aguja estril. - Torunda con medio de transporte de Stuart-Aimes. Tcnica para obtener la muestra para visin en campo oscuro. - La visin en campo oscuro sirve para ver formas mviles de Treponema pallidum. - Se limpiar la superficie de la lesin con gasas humedecidas con suero salino. Se evitarn jabones u otras sustancias que puedan tener actividad antitreponmica. - Con una gasa seca se frotar suavemente la lesin hasta que se obtenga el fluido, intentando no producir demasiado sangrado ya que pueden interferir en el examen microscpico. - Limpiar las primeras gotas de exudado que se obtienen y dejar salir el fluido profundo a la superficie. Recoger el fluido por capilaridad con una pipeta Pasteur. - Colocar una gota de fluido en un portaobjetos limpio y examinar inmediatamente en microscopio de campo oscuro. - Si es necesario se puede aadir una gota de suero salino. Tambin puede aplicarse el portaobjetos directamente sobre el fluido para recogerlo. Tcnica para obtener la muestra para cultivo bacteriano - El cultivo bacteriano est indicado si existe sospecha de infeccin por Haemophilus ducreyi o sobreinfeccin bacteriana. - Se limpiar la superficie de la lesin con gasas humedecidas con suero salino. Se evitarn jabones.

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- Con una gasa seca se frotar suavemente la lesin hasta que se obtenga el fluido. - Aspirar el fluido con una jeringa y aguja estril. Si no es posible, se utilizar una torunda con medio de transporte. El rendimiento de las muestras recogidas con torunda es menor. Nmero de muestras y momento de la extraccin - Para realizar visin microscpica en campo oscuro se recomiendan 3 muestras obtenidas en 3 das consecutivos. - Para cultivo bacteriano es suficiente una muestra. - Para estudio de virus se enviar otra muestra diferente. - Las muestras se obtendrn antes de iniciar el tratamiento. Transporte y conservacin de las muestras - Las muestras se deben enviar al laboratorio de microbiologa de forma urgente, especialmente las improntas para visin en campo oscuro. - Las muestras para cultivo bacteriano se mantendrn a 37C y si no es posible, a temperatura ambiente (mximo 24 horas). - Las muestras para estudio de virus se conservarn refrigeradas a 4C (mximo 72 horas). Muestras inadecuadas - No se aceptarn para cultivo aquellas muestras que se obtengan mediante torundas sin medio de transporte y aquellas que se obtengan en condiciones no estriles. Observaciones - Si el enfermo ha recibido tratamiento previo, se indicar en la peticin junto a la duracin del mismo. - Si existe sospecha de infeccin por Treponema pallidum es imprescindible obtener muestra de suero para realizar estudio serolgico. La visin en campo oscuro slo resulta til si se realiza inmediatamente despus de recoger la muestra. El retraso en su visualizacin puede dar lugar a falsos negativos. - Si existe sospecha de infeccin por Haemophilus ducreyi (chancro blando) se recomienda contactar con el laboratorio de microbiologa puesto que el cultivo requiere medios especiales e incubacin prolongada (7-10 das). La tincin de Gram del exudado puede tener utilidad (sensibilidad del 50%). - Si existe sospecha de sobreinfeccin bacteriana o por Candida spp. se recomienda solicitar cultivo en medios habituales.

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10.4. Semen
Procedimientos microbiolgicos ms habituales - Examen en fresco (Trichomonas vaginalis). - Tincin de Gram. - Cultivo bacteriano aerobio. - Cultivo de hongos. Microorganismos con significado clnico que pueden aislarse en una muestra de semen Microorganismos Bacterias Frecuentes Menos frecuentes Enterobacterias (Escherichia coli1, Proteus spp., Klebsiella spp., etc) Pseudomonas aeruginosa2 Staphylococcus aureus2 Enterococcus spp. Haemophilus influenzae Neisseria gonorrhoeae Chlamydia trachomatis3 Ureaplasma urealyticum3,4 Candida spp.5 Trichomonas vaginalis

Hongos

Parsitos
1 2

Constituye la causa ms frecuente de prostatitis. Con mayor frecuencia produce prostatitis en enfermos sondados. 3 No se investiga de forma rutinaria. Su deteccin requiere tcnicas de PCR (en semen u orina) o deteccin antignica (en orina). Si existe sospecha es recomendable contactar con el laboratorio de microbiologa. 4 Su implicacin en la prostatitis es dudosa. 5 Con mayor frecuencia produce prostatitis en diabticos, especialmente tras instrumentacin de la va urinaria.

Material necesario para realizar la toma de la muestra - Gasas estriles. - Contenedor estril de boca ancha y cierre hermtico. Tcnica para obtener la muestra - Limpiar la zona periuretral con una gasa estril. - Recoger la muestra en un contenedor estril.

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Nmero de muestras y momento de la extraccin - Es suficiente una muestra. - La muestra se obtendrn antes de iniciar el tratamiento. Transporte y conservacin de las muestras - Las muestras se deben enviar al laboratorio de microbiologa de forma urgente, especialmente si se solicita cultivo de Neisseria gonorrhoeae. - Las muestras para examen en fresco, cultivo bacteriano y de hongos se mantendrn a 37C y si no es posible, a temperatura ambiente (mximo 24 horas). Muestras inadecuadas - No se aceptarn para cultivo aquellas muestras que se obtengan mediante torunda o en condiciones no estriles. Observaciones - Las muestras de semen son muy poco recomendables para el diagnstico de prostatitis debido a que con frecuencia estn contaminadas con flora uretral. El aislamiento de un microorganismo no significa necesariamente que sea la causa de la prostatitis. - Las muestras de semen deben acompaarse siempre de una muestra de orina representativa de la uretra (primera orina de la miccin), y de la vejiga (orina de la miccin media). Slo es valorable el hallazgo de grmenes uropatgenos en el cultivo de semen que no se aslen en la orina uretral y vesical. - Las prostatitis crnicas pueden diagnosticarse mediante la tcnica simplificada de Nkel. Se basa en el cultivo cuantitativo de orina pre y postmasaje prosttico. La presencia de un microorganismo con un recuento de UFC/ml. < 10 veces en la muestra postmasaje respecto a la muestra premasaje tiene una sensibilidad y especificidad de prostatitis crnica del 90%. - Si existe sospecha de infeccin por Neisseria gonorrhoeae la muestra de mayor rendimiento es el exudado uretral. El rendimiento del cultivo de semen es muy bajo. La muestra debe enviarse rpidamente y sembrarse de forma muy urgente. La viabilidad de Neisseria gonorrhoeae es muy limitada y no puede garantizarse transcurridas 6-8 horas. - La muestra de mayor rendimiento para la deteccin de Chlamydia trachomatis es la orina y no el semen. La deteccin en semen requiere tcnicas de PCR y slo se realiza de forma excepcional. La muestra se conservar refrigerada a 4C (mximo 48-72 horas).

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11.1. Lquido sinovial

11. LQUIDOS ORGNICOS NORMALMENTE ESTRILES

Procedimientos microbiolgicos ms habituales - Tincin de Gram. - Cultivo bacteriano aerobio y anaerobio. - Cultivo de hongos. - Cultivo de micobacterias. Microorganismos con significado clnico que pueden aislarse en un lquido sinovial Artritis Microorganismos Frecuentes Bacterias Menos frecuentes Menor de 5 aos Staphylococcus aureus Neisseria meningitidis Streptococcus spp. Bacilos gramnegativos (EsHaemophilus influenzae cherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa, Salmonella spp., etc) Staphylococcus aureus Streptococcus spp. Bacilos gramnegativos Brucella spp.1 Neisseria gonorrhoeae1 Mycobacterium tuberculosis1

5 - 60 aos

Bacterias

Micobacterias2 Mayor de 60 aos, Bacterias con prtesis, herida penetrante o inmunodepresin Hongos3 Micobacterias2
1

Staphylococcus aureus Bacilos gramnegativos

Nocardia spp.1 Anaerobios (Clostridium spp., Bacteroides spp., etc) Candida spp. Mycobacterium tuberculosis1

Muy infrecuente. Si existe sospecha se recomienda ponerse en contacto con el laboratorio de microbiologa. Requiere medios y/o condiciones de cultivo especiales. 2 Si existe sospecha de infeccin por micobacterias se solicitar cultivo especfico de micobacterias. 3 Cuando exista sospecha de infeccin fngica se solicitar cultivo especfico de hongos.

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Material necesario para realizar la toma de la muestra - Gasas estriles. - Alcohol etlico al 70%. - Povidona yodada al 10%. - Jeringa y aguja estril. - Recipiente estril de boca ancha y cierre hermtico. Tcnica para obtener la muestra - Desinfectar la superficie cutnea con una gasa estril impreganada en alcohol, limpiando la zona de forma concntrica comenzando por el centro y abarcando una zona de unos 10 cm. - Repetir la operacin con povidona yodada. En pacientes con hipersensibilidad al yodo se utilizar alcohol 2 veces consecutivas. - Dejar secar al menos 1 minuto. - Realizar una puncin aspiracin del lquido sinovial con la jeringa y aguja. - Inocular el contenido en un contenedor estril. No se recomienda el envo de jeringas con agujas por el riesgo de pinchazos. Volumen o cantidad necesaria de muestra - Se recomienda recoger un volumen de 15 ml. Nmero de muestras y momento de la extraccin - Para cultivo bacteriano y de hongos es suficiente una muestra. - Para estudio adicional de micobacterias se obtendr otra muestra independiente. - La muestra se obtendr antes de iniciar el tratamiento. Transporte y conservacin de las muestras - La muestra se enviar al laboratorio de microbiologa lo antes posible. - Las muestras para cultivo bacteriano y de hongos se conservarn a temperatura ambiente (mximo 24 horas). - Las muestras para cultivo de micobacterias se conservarn refrigeradas a 4C (mximo 72 horas). Muestras inadecuadas - Muestras mal identificadas. - Muestras no recogidas en contenedores estriles.

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- Muestras no recogidas de manera asptica. Observaciones - Si el enfermo ha recibido tratamiento previo, se indicar en la peticin junto a la duracin del mismo. - Indicar la localizacin anatmica de la muestra. - Si existe sospecha de infeccin por micoorganismos altamente patgenos (e.j., Neisseria gonorrhoeae o Brucella spp.), debe comunicarse al laboratorio de microbiologa de forma inmediata. - Los hemocultivos son positivos en ms del 50% de artritis spticas no gonoccicas. - El rendimiento del lquido sinovial para cultivo de micobacterias es bajo. El rendimiento es mayor si se cultiva la membrana sinovial (biopsia). Debe enviarse en un contenedor estril con suero fisiolgico estril. Puede conservarse refrigerada a 4C durante un mximo de 72 horas.

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12. MUESTRA PARA ESTUDIO SEROLGICO 12.1. Plasma

Muestra - El plasma se obtiene recogiendo sangre venosa en un tubo con anticoagulante. Se debe mezclar inmediatamente y posteriormente se centrfuga a una velocidad y tiempo definidos. Procedimientos microbiolgicos ms habituales - Deteccin de anticuerpos. - Deteccin de antgenos: generalmente son pruebas no incluidas en el catalogo de Atencin Primaria (excepto la deteccin de HBsAg). Para casos concretos es recomendable contactar con el laboratorio de microbiologa. Deteccin de anticuerpos - La mayora de las tcnicas utilizadas permiten la deteccin de anticuerpos en suero o plasma indistintamente, utilizando EDTA como anticoagulante, pero en general se suele realizar en suero. - Cada laboratorio tiene establecido el tipo, color y tamao de los tubos que deben remitirse para las distintas determinaciones solicitadas. Estas normas deben seguirse para facilitar la rpida distribucin de las muestras en las diferentes Unidades Diagnsticas.

12.2. Suero
Muestra - El suero se obtiene recogiendo sangre venosa en un tubo sin anticoagulante dejndola reposar para que se forme el cogulo. Posteriormente se centrifuga a una velocidad y tiempo definidos. Procedimientos microbiolgicos ms habituales - Deteccin de anticuerpos. - Deteccin de antgenos: generalmente son pruebas no incluidas en el catalogo de Atencin Primaria (excepto la deteccin de HBsAg). Para casos concretos es recomendable contactar con el laboratorio de microbiologa.

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Aplicaciones de la determinacin de anticuerpos Diagnstico de infeccin Estudio del estado inmunitario

Comentarios

Ejemplos: control de embarazo, control posvacunacin hepatitis B, estudios epidemiolgicos, etc.

Tipos de anticuerpos estudiados habitualmente Anticuerpos IgM Comentarios

- Se relaciona habitualmente con infeccin aguda, pero en algunas infecciones se correlaciona no slo con la fase temprana de la enfermedad sino tambin con la actividad de la misma en estadios crnicos.

- En determinadas infecciones persisten detectables durante periodos prolongados por lo que su utilidad debe ser evaluada para cada agente infeccioso y en el contexto de las manifestaciones clnicas. IgG

- Se precisa como mnimo de 7 a 10 das desde la exposicin para poder tener una concentracin mnima detectable.

Anticuerpos totales

- En ocasiones se requiere el procesamiento de dos sueros en paralelo, uno tomado en la fase aguda de la enfermedad y otro 3-4 semanas ms tarde, durante la convalecencia. Un aumento de 4 veces en el ttulo se considera evidencia de infeccin reciente. IgM + IgG

- En general, alcanzan niveles mximos a las 4-6 semanas despus de la exposicin, persistiendo de por vida.

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Infecciones diagnosticadas habitualmente mediante serologa. Hepatitis A Infeccin IgM VHA

Procedimientos serolgicos disponibles

Hepatitis B Brucelosis

Hepatitis C Citomegalovirus (CMV) VIH

HBsAg y anti-HBc anti-VHC Rosa de Bengala, aglutinaciones, Coombs de Brucella, deteccin de anticuerpos por ELISA Citomegalovirus IgM Anti-VIH Paul-Bunnell, IgM anti-VCA, IgG anti-VCA, IgG anti-EBNA Pruebas no trepnemicas: RPR Pruebas trepnemicas: TPHA, EIA, FTA-Abs Hemaglutinacin IgM (programa de erradicacin de sarampin)

Virus de Epstein-Barr (VEB) Sfilis (Treponema pallidum) Hidatidosis Sarampin

Perfiles serolgicos ms habituales Hepatitis aguda Infeccin

Hepatitis crnica

IgM anti-VHA HBsAg y anti-HBc IgM anti-VHC anti-VHD IgM (en pacientes UDP positivos para HBsAg)

Perfil serolgico

Control postvacunacin de VHB Sndrome mononuclesico

HBsAg y anti-HBc total Anti-VHD total (en pacientes UDP positivos para HBsAg) anti-VHC Anti-HBs Paul-Bunnell, serologa VEB, Citomegalovirus IgM, Toxoplasmosis IgM, Toxoplasma IgG, Rubeola IgG, RPR, HBsAg, Anticuerpos VIH-1-2

Control previo al embarazo Control primer trimestre de embarazo

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Material necesario para realizar la toma de la muestra - Guantes. - Compresor. - Algodn o gasas estriles. - Alcohol etlico o isoproplico al 70%. - Sistema de toma de sangre para tubos de presin negativa (aguja palomilla y adaptador o cono); en su defecto se recomienda jeringa y aguja estril de puncin intravenosa. - Tubo sin anticoagulante con gel separador con cierre hermtico de presin negativa. - Existen comercializados tubos con tapones de distintos colores. Se deben utilizar los cdigos de colores y los volmenes especficos indicados en cada laboratorio de referencia. - Etiquetas identificativas. Tcnica para obtener la muestra - Utilizar guantes. - Corroborar la identidad del paciente antes de la extraccin. - Identificar los tubos con la misma numeracin que el volante de peticin utilizando etiquetas con cdigos de barras. Las etiquetas sobrantes se remitirn al laboratorio junto con los volantes y los tubos extrados. - Colocar el compresor 4 cm. por encima de la zona elegida para la puncin. - Localizar la vena. - Desinfectar la piel con alcohol. - Dejar secar la piel para evitar la produccin de hemlisis en la muestra de sangre. - Colocar la aguja al portatubos. - Puncionar la vena colocando el bisel hacia arriba. - Conectar el tubo o tubos de vaco a la aguja. Los tubos se llenan hasta que se agote el vaco del que disponen. - Si se van a extraer distintos tubos a un mismo paciente el orden de extraccin deber ser: 1. Tubo sin aditivos. 2. Tubo con gel separador. 3. Tubo con citrato. 4. Tubo con heparina. 5. Tubo con EDTA. 6. Tubo con oxalato-fluor.

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- Nunca se pasar sangre de un tubo a otro. - Una vez realizada la extraccin retirar el compresor y la aguja y realizar la hemostasia con algodn seco. - Desechar el material utilizado. Volumen o cantidad necesaria de muestra - Se deben seguir las indicaciones especficas de cada laboratorio de referencia. Nmero de muestras y momento de la extraccin - Preferiblemente en ayunas para evitar lipemia. - Dependiendo de la etiologa a diagnosticar y del tiempo de evolucin, ser suficiente una nica muestra o deber remitirse una segunda muestra 2-4 semanas despus. - Un nico suero de la fase aguda para estudio de IgM especifica puede ser til en el diagnstico de algunos casos (IgM hepatitis A). - Un nico suero de la fase de convaleciente puede utilizarse ocasionalmente para diagnosticar una infeccin reciente. Transporte y conservacin de las muestras - Dejar los tubos extrados a temperatura ambiente para favorecer la coagulacin hasta su transporte. - Transportar las muestras refrigeradas el mismo da de la extraccin. En caso de demora en el envo, puede mantenerse refrigerada durante 2-3 das. Si se va a tardar ms tiempo la sangre debe centrifugarse y congelarse a 20C. Muestras inadecuadas - Las muestras sin identificar o de forma que pueda llevar a confusin. - En algunos casos la lipemia y/o la hemlisis interfiere en los resultados por lo que se solicitar nueva muestra. Observaciones - Si existe sospecha de infecciones infrecuentes se recomienda ponerse en contacto con el laboratorio de microbiologa.

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13.1. Vesculas

13. OTRAS MUESTRAS

Procedimientos microbiolgicos ms habituales - Tincin de Gram. - Cultivo bacteriano aerobio. Microorganismos que pueden aislarse en una vescula Microorganismos Frecuentes Bacterias Streptococcus pyogenes Staphylococcus aureus Virus varicela zoster2 Virus herpes simple2 Menos frecuentes

Virus1
1

Enterobacterias (Escherichia coli, Proteus mirabilis, Klebsiella pneumoniae, etc) Pseudomonas aeruginosa

La deteccin de virus no se realiza de forma rutinaria. Si existe sospecha de infeccin viral se debe contactar con el laboratorio de microbiologa y solicitar medio especial de trasporte para virus. 2 Su deteccin requiere tcnicas de cultivo celular, Shell-vial o PCR.

Material necesario para realizar la toma de muestra - Jeringa y aguja estril. - Alcohol de 70C. - Povidona iodada. - Contenedor estril con cierre hermtico. - Medio de transporte de virus. - Portaobjetos. Tcnica para obtener la muestra - Limpiar la piel con alcohol 70C y desinfectar con povidona iodada dejando secar 60 segundos. - Punzar el sitio elegido e inocular la muestra en un contenedor estril con tapa de rosca. Se debe evitar el envo de jeringas con agujas por el riesgo de pinchazos. - Si no se obtiene material por este procedimiento, inyectar 0.5-1ml. de solucin fisiolgica estril y aspirar nuevamente.

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- Para estudio de virus debe realizarse la toma de la lesin de la misma manera, transfiriendo la muestra en el medio de transporte de virus. - Para el diagnstico directo realizar una impronta tomada directamente de la lesin con un porta objetos. Volumen o cantidad necesaria de muestra - Se recomienda obtener la mayor cantidad posible. Nmero de muestras y momento de la extraccin - Para cultivo bacteriano es suficiente una muestra. - Para estudio de virus debe enviarse otra muestra diferente. - La muestra se debe obtener antes de iniciar el tratamiento. Transporte y conservacin de las muestras - Las muestras para cultivo bacteriano se conservarn a temperatura ambiente durante un, mximo de 24 horas. - Las muestras para estudio de virus se conservarn refrigeradas a 4C durante un mximo de 72 horas. Muestras inadecuadas - Las muestras que no cumplan las condiciones descritas anteriormente. Observaciones - Si el enfermo ha recibido tratamiento previo, se indicar en la peticin junto a la duracin del mismo. - Indicar la localizacin anatmica de la muestra.

13.2. Pestaas
Procedimiento microbiolgico ms habitual - Examen en fresco (observacin del microorganismo en el folculo).

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Microorganismos con significado clinico que pueden observarse - Demodex folliculorum o Phtirus spp. Material necesario para realizar la toma de la muestra - Contenedor estril con cierre hermtico. - Pinzas estriles Tcnica para obtener la muestra - Recoger las pestaas mediante una pinza estril, arrancndolas desde la raz. - Depositarlas en el contenedor estril. Volumen o cantidad necesaria - Es suficiente una mnima cantidad. Nmero de muestras y momento de la extraccin - Es suficiente el envo de una muestra. Transporte y conservacin de las muestras - La muestra se depositar en un contenedor estril y se enviar lo antes posible al laboratorio. Muestras inadecuadas - Las muestras que no cumplen las condiciones descritas anteriormente. Observaciones - Demodex folliculorum es un caro que vive en los folculos pilosos y glndulas sebceas del rea ceflica.

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