DETERMINACIN DE GLICEMIA

I.

INTRODUCCIN.

Los carbohidratos o sacridos (del griego: sakcharon, azcar) son compuestos esenciales de los organismos vivos y son la clase ms abundante de molculas biolgicas. El nombre carbohidratos significa literalmente hidratos de carbono y proviene de su composicin qumica, que para muchos de ellos es (CH2O)n, donde n 3. Es decir, son compuestos en los que n tomos de carbono parecen estar hidratados con n molculas de agua. En realidad se trata de polihidroxialdehidos y polihidrohicetonas (y algunos derivados de stos), cadenas de carbono que contienen un grupo aldehdo o cetnico y varios grupos hidroxilos. Las unidades bsicas de los carbohidratos son los monosacridos, no hidrolizables en unidades ms pequeas. La glucosa es el monosacrido ms abundante; tiene 6 tomos de carbono y es el combustible principal para la mayora de los organismos. Los oligosacridos contienen de dos a diez unidades de monosacridos unidas covalentemente. Por su parte, los polisacridos estn constituidos por gran nmero de unidades de monosacridos 106 unidos dalton

covalentemente, alcanzando pesos (g/mol).

moleculares de hasta

Los polisacridos desempean dos funciones biolgicas principales:

algunos almacenan energa metablica y otros sirven de elementos estructurales a la clula. Como resultado de la hemiacetalizacin de los monosacridos aparece en su estructura el denominado carbono anomrico. Este carbono tiene caractersticas especiales que determinan entre ismeros otras cosas la aparicin de un tipo de

(los anmeros) y le confiere a estas molculas la propiedad de

polimerizarse y as constituir los oligosacridos y los polisacridos. Cuando se produce la unin de dos monosacridos a travs de un enlace

glicosdico se obtienen los denominados disacridos, de gran importancia en el

metabolismo de los glcidos y particularmente en su proceso de digestin, por lo que resulta necesario conocer a los principales representantes de este grupo de compuestos. Cuando se observa disacridos, se aprecia que al menos uno de los

carbonos anomricos ha quedado comprometido en la formacin del enlace glicosdico, en tanto que es comn que otro de estos carbonos quede libre y permita que la molcula vaya creciendo hasta alcanzar dimensiones que permitan considerarla como un polisacrido. En todo este proceso los enlaces glicosdicos que van apareciendo irn comprometiendo a los carbonos anomricos de manera que slo uno, el de uno de los extremos permanecer libre. Debido a las caractersticas reductoras que posee el carbono anomrico a ese extremo se le denominar extremo reductor, en tanto que al otro extremo de la molcula, al no presentar dicho carbono anomrico se le denomina extremo no reductor. Esta nomenclatura es de gran utilidad cuando se estudia el metabolismo de los polisacridos y en particular el del glucgeno. Por otro lado, la glucosa aparece en la sangre de los hetertrofos

directamente de la degradacin de polisacridos complejos o de su sntesis a partir de distintas fuentes por gluconeognesis y penetra en la mayor parte de las clulas a travs de un transportador especfico que la traslada hasta el citosol donde se degrada. En la prctica conoceremos la tcnica de determinacin de glucosa en el proceso metablico del organismo. La hemoglobina glucosilada (o glicosilada) es una heteroproteina de la sangre, que resulta de la unin de la hemoglobina con carbohidratos libres. Como sabemos la hemoglobina hace que los eritrocitos o glbulos rojos de la sangre sean de ese color. Un glbulo rojo vive 120 das y durante ese tiempo la glucosa que ingresa al organismo se pega a estas clulas. Cuando esto sucede se dice que han sido glucosiladas. Una vez adherida la glucosa al glbulo rojo no puede desprenderse, por ello la hemoglobina permanece glucosilada, durante todo el

periodo de vida del eritrocito. La prueba de hemoglobina glucosilada puede decirnos cuantos glbulos rojos tienen adherida glucosa, es decir cuanta hemoglobina ha sido glucosilada. Y como el eritrocito vive 120 das, esta prueba es de gran utilidad en la evaluacin del control de glicemia a largo plazo.

II. OBJETIVOS: 1. Determinar la concentracin de glucosa srica basal.

III. MATERIALES: 3.1 Materiales y equipos 3.1.1. Materiales: A. Biolgico: Sangre total Suero sanguneo

B. De vidrio: 3 Tubos de ensayo 13 x 100

C. Reactivos: Reactivo glicemia enzimtica

3.1.2. Equipos e instrumentos: 1 Bao mara 1 Espectrofotmetro 1 Centrfuga Micropipetas de 10 - 100 2 Gradillas

3.1.3. Otros: Pares de guantes descartables

1 Marcador indeleble Torundas de algodn Agujas descartables N 21 Tips de micropipetas 3 Cubetas para espectrofotmetro 1 mL 1 Ligadura Cronometro

IV. PROCEDIMIENTO:

FUNDAMENTO DEL MTODO La glucosa, presente en el suero sanguneo es oxidada por la glucosa oxidasa (GOD), a cido glucnico y agua oxigenada. El perxido de hidrgeno, en presencia de peroxidasa (POD) produce la unin oxidativa del fenol con la 4 aminofenazona, presentes en el reactivo de trabajo, dando lugar a la formacin de un cromgeno rojo- cereza con absorbancia mxima a 505 nm. La reaccin es la siguiente: GOD glucosa + O2 + H2O cido glucnico + H2O2

POD 2 H2O2 + 4-AF + fenol quinona coloreada + 4 H2O

La quinona coloreada es la 4 (p-benzoquinona-monoimino fenazona)

GLUCEMIA Obtener una muestra de sangre de la persona. Obtener suero de manera usual y realizar la prueba de determinacin de glucosa de acuerdo a lo siguiente:

Tubo

Blanco (B)

Standard (S)

Muestra (D)

Muestra (suero) (L) --Standard (L) --Reactivo de trabajo (mL) 1.0 Mezclar e incubar 10 minutos a

--10 10 --1.0 1.0 37C y leer en

espectofotgrafo 505 nm, llevando el aparato a cero con el blanco de reactivo. El color de la reaccin es Clculos: estable 30 minutos

Valores de referencia en ayunas: 70 110 mg/dL Valores de referencia en glucosa al azar: 110 126 mg/dL

V. RESULTADOS:

Datos obtenidos: Absorbancia de blanco: 0.038 Absorbancia de standard: 0.363 Absorbancia de muestra: 0.400

VI. CONCLUSIN:

Los resultados obtenidos de glucemia en el laboratorio fue 111.38 mg/dL, podemos concluir que estos valores se encuentran dentro de los rangos normales de glucosa al azar que es 110 126 mg/dL.