UNIVERSIDADE FEDERAL DE MINAS GERAIS INSTITUTO DE CINCIAS BIOLGICAS DEPARTAMENTO DE MICROBIOLOGIA

Ana Lusa Paiva Amaral

MICRORGANISMOS INDICADORES DE QUALIDADE DE GUA

Belo Horizonte 2007

UNIVERSIDADE FEDERAL DE MINAS GERAIS INSTITUTO DE CINCIAS BIOLGICAS DEPARTAMENTO DE MICROBIOLOGIA

Ana Lusa Paiva Amaral

MICRORGANISMOS INDICADORES DE QUALIDADE DE GUA

Monografia apresentada ao Programa de Ps-Graduao em Microbiologia do Instituto de Cincias Biolgicas da Universidade Federal de Minas Gerais para obteno do Ttulo de Especialista.

ORIENTADOR: Prof. Dr. Carlos Augusto Rosa (Laboratrio de Ecologia e Biotecnologia de leveduras / Departamento de Microbiologia / ICB / UFMG)

Belo Horizonte 2007

Agradecimentos Agradeo a Deus por me guiar nesta jornada, possibilitando cumprir mais esta tarefa. Ao meu orientador Prof. Dr. Carlos Augusto Rosa pelo exemplo de profissional, pela pacincia, amizade e incentivo, que foram de grande importncia para a realizao deste trabalho. A Adriana Oliveira Medeiros, revisora desta monografia. Aos professores do curso de Especializao em Microbiologia. Aos colegas do curso de ps-graduao em Microbiologia pelo incentivo e convivncia agradvel. Aos meus pais pelo apoio incondicional para que este projeto se concretizasse.

1 SUMRIO

1. Resumo .................................................................................................. 2. Objetivo .................................................................................................. 3. Relevncia e Justificativa ....................................................................... 4. Microrganismos de interesse sanitrio ................................................... 4.1. Grupo Coliforme .................................................................................. 4.1.1. Escherichia coli ................................................................................. 4.2. Enterococcus spp. ............................................................................... 4.3. Pseudomonas aeruginosa ................................................................... 4.4. Staphylococcus aureus ....................................................................... 4.5. Clostridium perfringens ........................................................................ 4.6. Bactrias Heterotrficas ...................................................................... 4.7. Presena de leveduras em ambientes aquticos ................................ 5. gua para consumo ............................................................................... 5.1. guas minerais .................................................................................... 6. Contaminao microbiolgica de corpos dgua naturais e os potenciais riscos sade humana ............................................................. 7. Concluso ............................................................................................... 8. Referncias bibliogrficas ......................................................................

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2 1. RESUMO Diante de um problema crescente que vem sendo a utilizao errnea dos recursos hdricos, surge a necessidade de um estudo maior a respeito desse bem natural to necessrio a sobrevivncia do planeta. A integridade dos ecossistemas aquticos vem sofrendo os impactos causados pelas atividades humanas e suas comunidades esto sujeitas s diversas alteraes ambientais. A populao microbiana aqutica reflete as condies terrestres circundantes e as atividades ali exercidas, e os rgos administrativos utilizam essa populao, com alguns indicadores para classificar os corpos dgua. A quantificao de microrganismos de interesse sanitrio como os coliformes de grande importncia para a sade pblica, uma vez que sua presena indica contaminao por material fecal. Os microrganismos da microbiota intestinal indgena podem causar doenas e se tornar uma ameaa para o indivduo quando ocorre um eventual desequilbrio do ecossistema digestivo ou quando estes microrganismos alcanam stios estreis do corpo. Os enterococos tm sido propostos como indicadores tambm, devido alta concentrao nas fezes e alta taxa de sobrevivncia no ambiente. A Pseudomonas aeruginosa por conta de sua versatilidade, padro de potabilidade no Brasil. Estafilococos responsveis por infeces e produo de toxinas, clostridios devido resistncia aos tratamentos convencionais de gua. Bactrias heterotrficas, s representam riscos se encontradas em altas concentraes, mas sua enumerao utilizada como um parmetro complementar aos coliformes. Assim como as leveduras, que s apresentam altas taxas onde os nveis de poluio orgnica so elevados. Sendo a gua de importncia vital ao indivduo, a garantia de sua potabilidade e de suas condies higinico-sanitrias de grande importncia para toda a populao. Sob o aspecto da sade pblica, a gua potvel deve estar isenta de microrganismos do grupo coliforme, que podem ou no ser de origem fecal.

3 2. OBJETIVO _______________________________________________________________

- Atravs de reviso bibliogrfica, indicar os principais microrganismos indicadores de qualidade de gua, suas respectivas caractersticas e ocorrncia.

4 3. RELEVNCIA E JUSTIFICATIVA

Cada vez mais tem se chamado a ateno para a utilizao racional dos recursos hdricos do nosso planeta, uma vez que, se no houver um controle maior deste bem natural, a procura ser cada vez maior do que a demanda. O planeta Terra tem 75% de superfcie lquida, sendo 97% de gua salgada, 2% de geleiras, e 1% de gua doce. O Brasil tem 8% da gua doce do planeta, cerca de 112 bilhes de metros cbicos. Aproximadamente 80% das guas nacionais esto na Amaznia, onde s se encontram 5% dos brasileiros. Os outros 20% das guas nacionais tm de abastecer 95% da populao (CREA,1988). A integridade ecolgica dos ecossistemas aquticos continentais vem sofrendo com maior intensidade os impactos causados pelas atividades humanas nas ltimas dcadas e suas comunidades esto sujeitas s diversas alteraes ambientais sendo, em muitos ambientes, substancialmente

reduzidas ou mesmo eliminadas. Assim, a demanda crescente e contnua pelos recursos aquticos, causadas pelo crescimento populacional, urbanizao, industrializao e irrigao podem levar a uma rpida e contnua degradao deste ambiente (MEDEIROS, 2005). A vida aqutica inclui interaes entre os microrganismos, e entre os microrganismos e a fauna e flora constituintes do mesmo ambiente. Muitas espcies realizam alteraes bioqumicas que reciclam os elementos e nutrientes da gua, desempenhando assim um papel importante na manuteno do fluxo de nutrientes e ocupando posio-chave na cadeia alimentar do ambiente aqutico. A populao microbiana aqutica reflete as condies terrestres circundantes, mostrando os efeitos de prticas domsticas, agrcolas e industriais, conduzindo assim a uma degradao da qualidade da gua decorrente do impacto das atividades humanas. Os microrganismos

encontrados em ambiente aqutico so determinados pelas condies fsicas e qumicas que ocorrem naquele ambiente, e essas condies variam de um local para o outro e em relao a fatores como temperatura, luminosidade, pH e nutrientes. Algumas espcies microbianas so nativas em reas ecolgicas especficas, enquanto outras so transitrias, provenientes de atividades

5 humanas que geram um impacto na biodiversidade. Por exemplo, em guas que recebem esgotos domsticos com grande quantidade de nutrientes orgnicos, podem ser encontradas bactrias do grupo coliforme, como a Escherichia coli. A presena deste microrganismo na gua pode indicar risco potencial a sade, uma vez que o mesmo proveniente do intestino grosso do homem e de animais de sangue quente, indicando assim contaminao fecal, isto acontece tambm com outras bactrias como os estreptococos fecais, e tambm vrus intestinais como o causador da Hepatite A ou poliomielite (GREENBERG et al., 1992). Os rgos administrativos utilizam esses parmetros para classificar os corpos dgua quanto ao seu destino, uso e quanto a sua condio sanitria. (BRASIL, 2005). Pode-se citar tambm fatores prejudiciais ao crescimento microbiano como o lanamento de efluentes industriais em cursos dgua, com elevados nveis de metais pesados. Pesquisas que levem em considerao as interaes entre os ecossistemas aquticos e terrestres so fundamentais para a conservao dos recursos hdricos e sua diversidade biolgica (MEDEIROS, 2005). No presente trabalho sero tratados como tema as guas naturais e potveis e os diversos fatores que possam influenci-las de maneiras malficas, limitar-se- ao estudo de bactrias, fungos e leveduras. Sero levados em considerao microrganismos presentes no ambiente aqutico como contaminantes. Sero observados tambm os limites estabelecidos pelo Conselho Nacional do Meio Ambiente, Resoluo 274 (2000) e 357(2005), para lazer e recreao de contato primrio, e esclarecendo alguns critrios para considerar a potabilidade da gua de acordo com a portaria n 518 do Ministrio da Sade (2004). Sero citados ainda alguns microrganismos como Enterococcus spp., Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Clostridium perfringens, Escherichia coli, bactrias heterotrficas, fungos filamentosos e leveduras.

6 4. MICRORGANISMOS DE INTERESSE SANITRIO _______________________________________________________________

4.1. Bactrias do grupo Coliforme

A quantificao bacteriana em corpos dgua de grande interesse para sade pblica, uma vez que a deteco de altos nveis bacterianos esta freqentemente associada com elevados nveis de patgenos para humanos (USEPA, 1986). A maioria dos microrganismos patognicos, causadores de doenas transmitidas pela gua, predominantemente de origem fecal e so conhecidas como patgenos entricos. Microrganismos enteropatgenos geralmente aparecem em

concentraes muito baixas em guas ambientais quando comparada diversificada microbiota existente. Pelo fato de que os microrganismos patognicos usualmente aparecem de forma intermitente e em baixo nmero na gua, podem ser pesquisados outros grupos que esto presentes juntamente com os patognicos nas fezes. Shibata et al. (2004), afirmam que os microrganismos tipicamente utilizados como indicadores so aqueles encontrados em elevadas concentraes nas fezes humanas. Os coliformes fecais, um subgrupo dos coliformes totais representados principalmente pela espcie Escherichia coli, tm sido extensivamente utilizados no monitoramento da qualidade de guas e so considerados os mais especficos indicadores de qualidade de guas destinadas a potabilidade e balneabilidade (LPEZ-PILA & SZEWZYK, 2000; YOUN-JOO et al., 2002; ALM et al., 2003; NOGUEIRA, et al., 2003; LEBARON et al., 2005). O grupo coliforme constitudo por bactrias pertencentes aos gneros Citrobacter, Escherichia, Enterobacter e Klebsiella (NOGUEIRA et al., 2003). So bacilos aerbios ou anaerbios facultativos, Gram negativos e no formadores de esporos, oxidase-negativos, capazes de desenvolver na presena de sais biliares ou agentes tensoativos que fermentam a lactose com produo de cido, gs e aldedo a 35,0 0,5C em 24-48 horas, e que podem apresentar a enzima -galactosidase. Embora estes microrganismos estejam relacionados com contaminao fecal, podem tambm ser encontrados em outros locais, oriundos de vegetais e do solo, observado, principalmente, para os gneros

7 Citrobacter, Enterobacter e Klebsiella (GELDREICH, 1975; CABELLI, et al., 1979; 1983; HAGLER & MENDONA-HAGLER, 1988; BAUDISOV, 1997). Alm disso, alguns estudos sugerem que as altas temperaturas tropicais, a elevada radiao solar e a presena de predadores podem diminuir a sobrevivncia destes microrganismos que deixam de exercer uma funo de indicadores de presena de patgenos em tais condies (FUJIOKA et al., 1999; ROSA et al., 1990; BYAMUKAMA et al., 2000, WHITMAN et al., 2004). Diversos fatores podem interferir sobre a enumerao dos coliformes, como pH, temperatura e outros organismos presentes na gua. Pseudomonas aeruginosa conhecida por interferir sobre a contagem colimtrica e acreditase que a sntese do pigmento piocianina esteja ligada com este fenmeno (GUILHERME & SILVA, 2000). A qualidade bacteriolgica de guas recreacionais avaliada pelos mesmos indicadores recomendados para guas destinadas ao consumo humano, isto , coliformes totais e coliformes fecais (YOSHPE-PURER et al., 1987).

4.1.1. Escherichia coli

Os coliformes fecais, um subgrupo dos coliformes totais representados principalmente pela espcie Escherichia coli, esto mais especificamente relacionados com contaminao fecal oriundos de animais de sangue quente. Entretanto, sua utilizao como indicador de poluio fecal tem sido questionada, pois a metodologia usualmente empregada para detectar essas bactrias, realizada temperatura de 44,5 0,2 C como fator seletivo. Porm esta temperatura permite o isolamento de outros coliformes

termotolerantes, no necessariamente provenientes de contaminao fecal (CABELLI et al., 1979; 1983; HAGLER & MENDONA HAGLER, 1988; ELMUND et al., 1999; BYAMUKAMA et al., 2000; SCOTT et al., 2002). Pases localizados em regies de clima temperado tm utilizado, com sucesso, E. coli como indicadores de poluio fecal. Porm, a adequao de E. coli como indicadores de poluio fecal em regies tropicais e subtropicais no tem sido propriamente demonstrada (CHAO et al., 2003). Isto porque, vrios trabalhos mostram que E. coli tem sido encontrada nos solos e corpos d gua,

8 onde estudo destes ambientes tem mostrado que improvvel que a fonte destas bactrias seja contaminao fecal humana. Algumas pesquisas sugerem que estas bactrias originaram-se de outros animais que residiram na rea e que desenvolveram mecanismos para manter populaes de clulas viveis por longo perodo de tempo em condies tropicais (BYAPPANAHALLI & FUJIOKA, 1998; FUJIOKA et al., 1999; SOLO-GABRIELE et al., 2000; DESMARAIS et al., 2002; CHAO et al., 2003; WINFIEKD & GROSIMAN, 2003). Carrillo et al. (1985) e Hagler et al. (1993) isolaram E. coli de guas naturais preservadas de contaminao fecal, como as guas de bromlias e de chuvas em florestas tropicais. Embora existam ainda algumas divergncias quanto ao seu uso, as bactrias do grupo coliforme tm demonstrado eficincia no monitoramento de guas doces em relao presena de contaminao fecal. Alm disso, os rgos administrativos utilizam estes parmetros para classificar os corpos dgua quanto a seu destino, uso e quanto sua condio sanitria (BRASIL, 2005). Sabe-se que os coliformes no tm a capacidade de crescer em baixas concentraes de carbono orgnico, as altas temperaturas tropicais e a elevada radiao solar diminuem o seu potencial de sobrevivncia na gua, e assim deixam de exercer uma funo de indicadores de presena de patgenos em tais condies (HAGLER et al., 1986; ROSA, et al., 1990). Segundo KUHNERT et al. (2000), existe uma grande diversidade de linhagens de Escherichia coli comensal pertencentes a diferentes sorotipos, e que podem ser isoladas das fezes de indivduos saudveis. Estas linhagens so eliminadas maciamente no ambiente e podem contaminar os alimentos, a superfcie de corpos dgua e os sedimentos, geralmente sem causar nenhum efeito adverso a sade humana. A E. coli comensal da microbiota intestinal considerada inofensiva para o hospedeiro e um patgeno oportunista. Segundo BERG (1996), a microbiota normal associada ao trato digestivo responsvel por trs funes importantes para a sade do hospedeiro. Essas funes so as seguintes: resistncia colonizao devido inibio da multiplicao de microrganismos exgenos; imunomodulao que permite uma resposta imune mais rpida e adequada durante uma agresso infecciosa; e contribuio nutricional que fornece vitaminas, substratos energticos e reguladores na forma de cidos graxos volteis. Somente em algumas raras

9 circunstncias as linhagens de E.coli comensal podem tornar-se uma ameaa para o indivduo saudvel (KUHNERT et al., 2000). Para Santos et al. (2003), os microrganismos da microbiota intestinal indgena podem causar doena e tornar uma ameaa para o indivduo quando ocorre um eventual desequilbrio do ecossistema digestivo ou quando estes microrganismos alcanam stios estreis do corpo. Este desequilbrio pode ser devido a uma imunossupresso do indivduo ou terapias com antimicrobianos. Pacientes com sistema imune debilitado so incapazes de conter os microrganismos comensais do seu habitat natural aps o rompimento da barreira natural entre o intestino e outros stios estreis do corpo (KUHNERT et al., 2000).

4.2. Enterococcus spp.

Os enterococos so um subgrupo dos estreptococos diferenciados por sua habilidade de crescer em 6,5% de NaCl, em pH 9,6, e entre 10 a 45C (BLANCH et al., 2003). Os enterococos so bactrias encontradas no trato intestinal do homem e dos animais, e so comumente isolados de ambientes contaminados pelo material fecal humano e animal, como exemplo esgoto urbano, gua e solos que recebem fertilizantes de origem animal, alm de produtos alimentcios derivados de animais (KUHN et al., 2003). Os enterococos adquiriram recentemente particular relevncia mdica devido ao aumento de doenas, principalmente nasocomiais, causadas por eles (BLANCH et al., 2003; ANDRE et al., 2005). At o presente, esto descritas 30 espcies pertencentes ao gnero Enterococcus. E. faecalis a espcie dominante encontrada em fezes humanas, mas E. faecium, E. hirae, E. avium e E. durans tambm tem sido isoladas. Em bovinos, E. faecium a espcie predominante isolada, mas E. faecalis, E. hirae e E. casseliflavus tambm so encontradas (ANDRE et al., 2005). Devido a alta concentrao nas fezes e alta taxa de sobrevivncia no ambiente, enterococos tem sido proposto como indicador de contaminao fecal complementar aos coliformes fecais (USEPA, 2000; ANDREA et al., 2002; KHN et al., 2003; NOBLE et al., 2003). Mcfeters et al. (1974) estudaram a sobrevivncia de bactrias indicadoras e de patgenos entricos em guas de

10 poos, observando que o grupo coliforme morre mais rapidamente que o grupo enterococo, e diante disto utilizou-o como indicador para avaliao da qualidade de gua em seu trabalho.

4.3. Pseudomonas aeruginosa

O gnero Pseudomonas compreende bactrias unicelulares, Gram negativas, que so bastonetes retos ou curvos medindo 0.5 a 1.0 m X 1.5 a 4.0 m. As clulas so mveis por um ou vrios flagelos polares. No conhecida a formao de esporos neste gnero. As bactrias so catalasepositivas e aerbias estritas, exceto por algumas que so denitrificantes (GARRITY et al., 2001). Pseudomonas aeruginosa capaz de crescer e multiplicar em diversos ambientes incluindo gua, esgoto, solo, plantas e animais (KIMATA et al., 2004; PIRNAY et al., 2005). A espcie Pseudomonas aeruginosa um patgeno oportunista importante na etiologia de muitas doenas infecciosas nos humanos, e tambm est envolvido em infeces hospitalares. Numerosos casos de foliculite, dermatite, e infeces de orelha e do trato urinrio so atribudos a P. aeruginosa, adquirida por meio de recreao em guas contaminadas (ESIOBU et al., 2004). Devido a isto, vrios trabalhos que avaliam a presena desta espcie em ambientes aquticos foram realizados (PELLETT et al., 1983; KIMATA et al., 2004; ESIOBU et al., 2004; RUIZ et al., 2004; PIRNAY et al., 2005). No Brasil, a bactria padro de potabilidade em guas minerais. Por conta da sua grande versatilidade metablica, a bactria teria vantagens sobre os demais microrganismos na gua (VASCONCELOS, et al. 2006). Pseudomonas aeruginosa considerado um microrganismo metabolicamente mais verstil que os coliformes, capaz de persistir por mais tempo na gua e tende a resistir aos agentes custicos do ambiente por mecanismos ainda desconhecidos (Smith & Iglewski, 2003). A atividade antimicrobiana de Pseudomonas aeruginosa sobre os coliformes foi verificada em um estudo sobre o antagonismo entre Pseudomonas aeruginosa e bactrias indicadoras de contaminao fecal em

11 gua (VASCONCELOS, 2006). O estudo sugere tambm a importncia da investigao de fenmenos de antagonismo entre Pseudomonas aeruginosa e o grupo coliforme e consequentemente, sua implicao nas anlises colimtricas, determinando at que ponto as anlises colimtricas podem ser comprometidas.

4.4. Staphylococcus aureus

Os estafilococos so clulas esfricas gram-positivas que normalmente se dispem em cachos irregulares semelhantes a cachos de uva. Crescem rapidamente em vrios meios de cultura e mostram-se metabolicamente ativos, fermentando carboidratos e produzindo pigmentos que variam de branco a amarelo intenso. Alguns so membros da microbiota normal da pele e mucosa dos humanos; outros provocam supurao, formao de abscessos, vrias infeces piognicas e at mesmo septicemia fatal. Tradicionalmente os estafilococos so divididos em duas categorias: coagulase positivos e coagulase negativos. Essa diviso baseada na capacidade de coagular o plasma que uma propriedade considerada, h longo tempo, como importante marcador de patogenicidade (TORTORA, 2006). O S. aureus produz uma srie de enzimas que podem contribuir para a sua patogenicidade, tais como a coagulase, catalase, desoxirribonuclease (DNAse), lipase, termonuclease (TNase), bem como a toxina hemoltica, cuja produo est associada com sua virulncia. Seu alto poder de colonizar vrias partes do corpo, pode dar origem a infeces assintomticas, facilitando assim a disseminao de vrias doenas (SCHAECHTER et al., 2002). Os estafilococos desenvolvem rapidamente resistncia a numerosos agentes antimicrobianos, portanto, constituem problemas teraputicos difceis. Os estafilococos produzem catalase, o que os diferencia dos estreptococos. Os estafilococos fermentam lentamente muitos carboidratos, produzindo cido lctico, mas no gs. O tipo mais comum de intoxicao alimentar causado por uma enterotoxina estafiloccica termoestvel (TORTORA, 2006). Alguns estudos sobre o monitoramento de guas recreacionais sugerem alm da contagem de coliformes, uma abordagem sobre alguns

12 microrganismos indicadores de origem no-fecal, como contagem de bactrias heterotrficas, leveduras e Staphylococcus aureus (HAGLER, 1986).

Staphylococcus aureus um importante patgeno de enfermidades que resultam em infeces ou em produo de toxinas. o principal agente etiolgico de doenas transmitidas por gua contaminada por animais, pessoas doentes, e portadores assintomticos (TOOD, 1977; VERHOEF, 1981). Algumas espcies de estafilococos coagulase negativo, normal da microbiota humana, tem sido isolados de amostras clnicas originrias de vrios tipos de infeces. Este patgeno oportunista tem sido frequentemente encontrado em guas de piscinas cloradas e guas de praias inclusive nos locais onde o ndice de coliformes satisfaz o padro de balneabilidade (HAGLER, 1990). A contagem de S. aureus pode ser um bom monitoramento para evitar infeces de pele e de olhos, uma vez que esse microrganismo se mostra resistente em guas cloradas e salinas (HAGLER, 1990).

4.5. Clostridium perfringens

Clostridium perfringens uma bactria anaerbia, em forma de bastonete, Gram positiva, esporognica, sulfito redutora, amplamente

distribuda na natureza e considerada como parte da microbiota intestinal normal do homem e de animais (HATHEWAY et al. 1980). As clulas vegetativas de C. perfringens encontram no intestino condies adequadas para sua esporulao, o que no ocorre facilmente em meios de cultura, utilizados para crescimento in vitro (LABBE, 1980). Os esporos so eliminados nas fezes e, dessa forma, chegam ao meio aqutico onde apresentam excepcional longevidade, em funo da grande resistncia a condies ambientais desfavorveis. Por esse motivo, so teis na deteco de contaminao fecal remota, em situaes nas quais outros indicadores, como Escherichia coli e estreptococos fecais, j no se encontrariam presentes. O uso de C. perfringens como um indicador de qualidade de gua tem sido objeto de vrios estudos. De acordo com Medema et al. (1997), os esporos de C. perfringens sobrevivem mais tempo nas guas fluviais que os oocistos do protozorio

13 Cryptosporidium parvum, podendo, desta forma, ser considerado um indicador til da presena deste parasita, responsvel por inmeros surtos de doenas intestinais de origem hdrica e resistente ao tratamento convencional da gua. O monitoramento de C. perfringens em gua tratada pode fornecer subsdios para se avaliar a eficincia na remoo de organismos patognicos resistentes, tais como oocistos de Cryptosporidium ou cistos de Giardia, em sistemas de tratamento de gua.

4.6. Bactrias Heterotrficas

O termo bactrias heterotrficas inclui todas as bactrias que usam nutrientes orgnicos para o seu crescimento. Estas bactrias so

universalmente presentes em todos os tipos de gua, alimento, solo, vegetao e ar. A contagem de bactrias heterotrficas representa diversos

microrganismos isolados a partir de um mtodo particular, que incluem algumas variveis como meio de cultura, tempo e temperatura de incubao, e a forma de inoculao no meio (ALLEN, 2004). A enumerao de alguns gneros de microrganismos pelo mtodo de contagem de bactrias heterotrficas pode variar muito de acordo com o meio de cultura escolhido, temperatura de incubao, tempo de incubao, origem da gua (rios, reservatrios de guas superficiais, gua tratada), e estao do ano. Todos os gneros de bactrias heterotrficas encontrados em guas so comuns tambm em alimentos, e so ingeridos pelo homem diariamente. Altas concentraes de carboidratos e protenas ajudam a multiplicao desses microrganismos nos alimentos, mas no em gua, onde sua concentrao significativamente menor, caracterizando assim os alimentos como um risco maior sade do que a ingesto de gua (ALLEN, 2004). Para considerarmos as bactrias heterotrficas como um risco sade, elas devem estar em altas concentraes para serem capazes de infectar uma pessoa idosa. A capacidade de um microrganismo de causar uma enfermidade frequentemente est associada ao seu fator de virulncia. Alguns estudos afirmam que contagens de bactrias heterotrficas entre 500-1000 UFC/mL em guas potveis pode interferir nas anlises de

14 coliformes, a portaria n 518 do Ministrio da Sade estabelece que em 20% das amostras mensais para anlise de coliformes totais nos sistemas de distribuio, deve ser efetuada a contagem de bactrias heterotrficas e, uma vez excedidas 500 unidades formadoras de colnia (UFC) por mL, devem ser providenciadas imediata recoleta, inspeo local e, se constatada

irregularidade, outras providncias cabveis. A determinao da contagem de bactrias heterotrficas pode ser usada para monitorar a eficcia dos processos de tratamento de gua potvel e verificar mudanas indesejveis na qualidade durante a sua distribuio e estoque, mas no por razes de risco para a sade.

4.7. Presena de leveduras em ambientes aquticos

As leveduras so microrganismos predominantemente unicelulares, imveis e englobam um grupo funcional de organismos heterotrficos que colonizam substratos contendo fontes de carbono. Com relao faixa de temperatura so classificadas como mesfilas crescendo preferencialmente entre 18 e 45C. Taxonomicamente pertencem a 100 gneros entre as classes Ascomicetos e Basidiomicetos (KURTZMAN & FELL, 1998). Estudos sobre a diversidade e distribuio de leveduras em ambientes aquticos e terrestres, animais e frutos no Brasil, tm mostrado que diferentes habitas possuem comunidades distintas de leveduras sendo encontrados diversos bitipos ainda no descritos, e possivelmente espcies novas. Pesquisas envolvendo leveduras de ambientes tropicais vm sendo conduzidas com uma freqncia ainda inferior a desejvel, pois muitos ambientes so devastados antes mesmo de se conhecer a microbiota (HAGLER et al., 1995). Apesar de inmeros trabalhos feitos com objetivo de caracterizar as leveduras presentes em ambientes aquticos, existem poucos dados referentes a sua ocorrncia em lagos e rios em regies tropicais, sendo a maioria dos trabalhos desenvolvidos em regies temperadas. Segundo Hagler & Ahearn (1987) em lagos no poludos so encontradas contagens geralmente abaixo de 10 unidades formadoras de colnia (UFC) de leveduras por 100 mL. Lagos mesotrficos possuem

15 contagens entre 10 e 50 UFC/100 mL. guas que esto recebendo descargas de poluentes, mas que ainda so seguras para uso recreacional, possuem contagens entre 50 e 100 UFC por 100 mL. E, finalmente, guas eutrofizadas apresentam contagens acima de 100 UFC/100 mL. Tem sido observada uma correlao entre os nveis de poluio orgnica e as populaes de leveduras. Cooke (1963, 1965) observou a existncia de uma grande diversidade de leveduras em todos os estgios de tratamento de esgoto e que estas ocorriam em altas densidades em guas naturais que recebiam efluentes de esgotos domsticos. Quinn (1984) sugere que a presena de elevado nmero de leveduras poderia ser utilizada como um bom indicador de enriquecimento orgnico peridico ou localizado em ambientes aquticos. A composio da microbiota fngica em um corpo dgua pode ser influenciada por vrios parmetros fsicos e qumicos, como por exemplo, temperatura, pH, oxignio dissolvido e fosfatos totais dissolvidos (WOOLLETT et al., 1970; SIMARD & BLACKWOOD, 1971 a, b; QUINN, 1984; HAGLER et al., 1986; FUJITA et al., 1987; ROSA et al., 1990, 1995; MORAIS et al., 1996). Segundo Brlocher (1982) ecossistemas aquticos com dados fsicos e qumicos semelhantes apresentam elevado grau de similaridade quanto diversidade de espcies de fungos. Rosa et al. (1995) e Morais et al. (1996) no encontraram correlao significativa entre a freqncia de espcies de leveduras e as variveis fsico-qumicas para os lagos da regio de Lagoa Santa, Minas Gerais. Medeiros (2002) em estudo realizado em lagos e rios da Bacia do rio Doce encontrou correlao significativa entre as contagens de leveduras e as concentraes de fsforo solvel reativo e nitrato no lago Dom Helvcio. Na lagoa Carioca as contagens de leveduras apresentaram correlao com temperatura, pH, amnia e luz. Um elevado nmero de espcies de leveduras tem sido freqentemente isolado em ambientes aquticos, observando-se o predomnio dos gneros Aureobasidium, Candida, Cryptococcus, Rhodotorula, Saccharomyces e Trichosporon, sendo que a maioria das espcies destes gneros est associada a plantas, solos ou fontes de poluio orgnica (MEDEIROS, 2005). As leveduras pertencentes ao gnero Cryptococcus e as leveduras negras principalmente a espcie Aureobasidium pullulans so conhecidas por serem

16 os tipos predominantes em ambientes aquticos com pouca ou nenhuma poluio, j os gneros Candida e Rhodotorula so predominantes em guas contendo esgotos domsticos. Odds (1988) relata como isoladas do trato gastrointestinal humano, as espcies Candida albicans, C. glabrata, C. guilliermondii, C. parapsilosis e C. tropicalis. A espcie C. albicans a levedura oportunista, associada ao homem, mais amplamente estudada. Alguns relatos demonstram ainda o isolamento dessa espcie em anfbios (ODDS, 1988) e, de acordo com a literatura revista por esse autor, C. albicans comprovadamente encontrada em 58 espcies animais incluindo primatas, mamferos selvagens e domesticados, alm de pssaros. Algumas pesquisas mostraram que densidades altas de C. albicans estavam associadas com contaminao fecal humana recente em guas doces de regies temperadas, mas baixas taxas de isolamento ou at sua ausncia tem sido observada em locais poludos, sendo encontrada em guas tropicais, mesmo na ausncia de contaminao fecal (VALDEZ-COLAZO et al., 1987). guas poludas por efluentes industriais apresentam microbiota fngica caracterstica, relacionada com a fonte poluidora. O gnero Saccharomyces constitui um exemplo tpico, sendo freqentemente isolado de locais prximos indstria de vinho, cerveja e po (AHEARN et al., 1968). Ambientes aquticos que recebem efluentes industriais podem ser habitados por microrganismos, com a habilidade de degradar dejetos txicos e sobreviver em ambientes hostis, fazendo deles grandes candidatos para serem utilizados em processos de biorremediao (SLVIKOV & VADKERTIOV, 1997 a, b). Segundo Hagler et al. (1995) o estudo de diversidade e distribuio de leveduras em ambientes aquticos indicam que habitas diferentes possuem comunidades de leveduras caractersticas, revelando muitos bitipos diferentes que provavelmente representam novas espcies. Uma grande diversidade de populaes de leveduras tem sido encontrada em ambientes aquticos porem, estas parecem originar de ambientes terrestres incluindo esgotos (HAGLER et al., 1995). Medeiros (2002) em trabalho realizado na bacia do rio Doce encontrou a maior diversidade de espcies de leveduras nos ambientes aquticos que recebiam maior carga de material alctone. Candida krusei, C. parapsilosis e C. guilliermondii foram predominantes nos ambientes onde foi observada a maior diversidade de espcies de leveduras e que recebiam

17 grande quantidade de esgoto domstico. Estes microrganismos provavelmente entraram nos corpos d gua carreados pelas chuvas encontrando ambientes favorveis para sua sobrevivncia. Segundo Hagler & Ahearn (1987), poucas espcies de leveduras so especficas de habitas aquticos sendo que diferentes populaes destes microrganismos podem ser encontradas em gua doce originadas de ambientes terrestres e esgotos.

18 5. GUA PARA CONSUMO _______________________________________________________________

A gua um recurso natural imprescindvel s diversas atividades do homem e indispensvel para sua prpria sobrevivncia. A gua necessria para suprir todas as exigncias do mundo moderno provm de mananciais de superfcie ou subterrneos (SILVA & SALGUEIRO, 2001). No entanto, a qualidade da gua dos nossos rios, lagoas e outros reservatrios est comprometida pelos poluentes que nela so lanados, provenientes de esgotos domsticos ou efluentes industriais, ou de outras fontes decorrentes do carreamento de contaminantes pela gua de chuva que escoa pela superfcie do solo ou pavimentao (SOARES & MAIA, 1999). Assim, a contaminao das guas de abastecimento contribui para o aumento das doenas transmitidas ao homem. Sendo a gua de importncia vital ao indivduo, a garantia de sua potabilidade e de suas condies higinico-sanitrias de grande importncia para toda a populao (SIQUEIRA, 2005). Somente 30% da populao mundial tem garantia de gua tratada, sendo que os 70% restantes dependem de poos e outras fontes de abastecimento passveis de contaminao (MACEDO, 2001). O uso de gua subterrnea contaminada, no tratada ou desinfetada foi responsvel por 44% dos surtos de doenas de veiculao hdrica nos Estados Unidos, entre 1981 e 1988 (CRAUN, 1991). Cerca de 34.000 pessoas morrem no mundo diariamente de doenas relacionadas com a gua, tais como diarria. No Brasil, 65% das internaes hospitalares so devidas a doenas veiculadas pela gua (MCT, 2001). O Ministrio da Sade do Brasil, atravs da Portaria n 518 de 25/03/04, regulamenta as normas de potabilidade de guas para consumo humano: os nveis de qualidade probem a presena de Escherichia coli ou coliformes termotolerantes em amostras de 100 mL de gua para consumo humano e, para gua tratada no sistema de distribuio ausncia em 100 mL para Escherichia coli ou coliformes termotolerantes e inclusive para coliformes totais (BRASIL, 2004). Portanto, sob o aspecto de Sade Pblica, a gua potvel deve estar isenta de microrganismos do grupo coliforme, que na realidade um

19 grupo heterogneo de bactrias, que podem ou no ser de origem fecal (CARDOSO, 2003). Na impossibilidade na gua, de se controlar a a presena e de todos os de

microrganismos

utiliza-se

deteco

enumerao

microrganismos chamados indicadores (VARNERLI, 2002). importante notar que a qualidade microbiolgica da gua no definida somente pela qualidade de organismos presentes, mas pelas diferentes espcies de organismos presentes (VIEIRA, 2000). Geralmente so utilizados como indicadores de deficincia de saneamento as bactrias do grupo coliforme, sendo a Escherichia coli o mais importante indicador na contagem desses

microrganismos, e estes microrganismos normalmente esto associados a microrganismos de origem intestinal. Conforme Franco & Landgraf (1996) microrganismos indicadores vm sendo utilizados na avaliao da qualidade microbiolgica da gua h longo tempo. Microrganismos indicadores so grupos ou espcies de microrganismos que, quando presentes em um alimento ou gua pode fornecer informaes sobre a ocorrncia de contaminao de origem fecal, sobre a provvel presena de patgenos ou sobre a deteriorao potencial do alimento (FRANCO & LANDGRAF, 1996). A gua domiciliar destinada ao consumo humano, deve ser potvel e para isso dever atender aos padres de qualidade das guas destinadas ao abastecimento, que so estabelecidas pela portaria vigente (MACDO, 2001). Mas a sua contaminao pode ocorrer na fonte, durante a distribuio ou nos reservatrios das cidades analisadas. As causas mais freqentes de contaminao muitas vezes vm das caixas dgua abertas ou mal fechadas e sobretudo, carncia de hbitos de higiene pessoal e ambiental. Alm disso, a gua pode ser contaminada devido ao fenmeno da aderncia de bactrias s superfcies (canos, torneiras) que causam a formao de um biofilme, a partir do qual estas mesmas bactrias podem regularmente ser liberadas nesta gua (SIQUEIRA & OKURA, 2005). Sendo assim, imprescindvel a constante limpeza das redes internas de abastecimento, como cisternas, caixas dgua, torneiras e bebedouros, para garantir que a qualidade das guas vai ser mantida at o seu consumo.

20 5.1. guas minerais

Atribui-se ao sabor e odores causados pela adio de flor e cloro nas guas de abastecimento pblico, o aumento do consumo de guas engarrafadas. Tal aumento de procura por fontes alternativas de gua para consumo primrio tem despertado interesse acerca da qualidade destas (AMARAL, 2005). A gua um importante veculo de transmisso de doenas e entre os relatos a este respeito encontra-se na literatura o surto de clera ocorrido no ano de 1974 em Portugal, que levou a 2.467 internaes e 48 mortes (BLAKE et al., 1977a). Destes, 82 pacientes ingeriram gua mineral engarrafada e 36 casos tinham visitado uma clnica abastecida pela mesma forma utilizada para o engarrafamento, cujo lenol fretico estava contaminado com Vibrio cholera (BLAKE et al., 1977b). O monitoramento de patgenos especficos impraticvel e, por este motivo, supe-se que indicadores podem estar presentes em maior nmero e sobreviver tanto quanto microrganismos patognicos (BURGE & HUNTER, 1990). McFeters et al. (1974) estudaram a sobrevivncia de bactrias indicadoras e de patgenos entricos em guas de poos, observando que, o grupo coliforme, morre mais rapidamente que o grupo enterococo. Payment e Franco (1993) estudaram a correlao entre cistos de Giardia lamblia, oocistos de Criptosporidium, vrus entricos humanos e potenciais indicadores como colifagos e Clostridium perfringens em amostras de vrias etapas de tratamento de gua; C. perfringens apresentou-se como o melhor indicador da eficincia do tratamento para remoo e inativao desses patgenos. Em um estudo feito na cidade de Jaboticabal/SP, encontram-se enterococos em 40 amostras analisadas, e clostridios sulfito-redutores em 7 das 225 amostras analisadas, totalizado 18% e 3% respectivamente, fora do padro de potabilidade estabelecido na Resoluo RDC-54/00 (BRASIL, 2000), que consiste na ausncia em 100 mL. Confirmou-se tambm que as embalagens de 20L continham mais enterococos do que as embalagens de 0,2L e 1,5L, da mesma marca e tambm mais do que os gales das outras marcas (AMARAL, 2005). De acordo com Bischofberger et al. (1990), as embalagens plsticas facilitam a aderncia e a colonizao, devido rugosidade das paredes e

21 embalagens retornveis podem manter resduos de detergente que,

dependendo de sua natureza, servem como fonte de nutrientes para as bactrias; tal fato pode explicar a qualidade microbiolgica de guas minerais acondicionadas em gales de 20L. Deve-se conduzir a captao, o processamento, embalagem e estocagem da gua mineral sob rigorosas prticas higinicas, de forma a prevenir ou minimizar quaisquer fontes potenciais de contaminao.

22 6. CONTAMINAO MICROBIOLGICA DE CORPOS DGUA NATURAIS E OS POTENCIAIS RISCOS SADE HUMANA _______________________________________________________________

As guas naturais possuem um valor inestimvel para indicar as condies ambientais de um determinado ecossistema. A avaliao dos recursos hdricos, bem como o gerenciamento e planejamento ambiental, no pode ser realizada sem este tipo de estudo (PIMENTEL, 2001). Os ambientes aquticos so utilizados em todo o mundo com distintas finalidades, entre as quais se destacam o abastecimento de gua, a gerao de energia, a irrigao, a navegao, a aqicultura, recreao e a harmonia paisagstica (LOPEZ-PILA et al., 2000; MORAES & JORDO, 2002; LEBARON et al., 2005). O grande interesse na qualidade da gua a ser usada pela populao est na associao entre a gua contaminada e a transmisso de doenas infecciosas. As guas so classificadas de acordo com suas caractersticas qualitativas para determinado uso que ser feito das mesmas, isto , as exigncias quanto ao grau de pureza variam de acordo com o fim a que se destinar. Os padres bacteriolgicos de qualidade da gua so baseados especificamente na proteo do consumidor, evitando ento as doenas de veiculao hdrica (NOGUEIRA et al., 2003). Os agentes patognicos podem entrar em corpos dgua utilizados para recreao atravs de descargas de esgoto in natura ou inadequadamente tratados, guas de arraste das chuvas em regies urbanas ou rurais, dejetos de animais domsticos ou silvestres e, possivelmente, por meio dos prprios indivduos que utilizam estas guas para recreao, aumentando o risco de transmisso de doenas para os banhistas (PAUL et al., 1995; WIGGINS, 1996; DOMBECK et al., 2000). Segundo ALM et al. (2003), a contaminao fecal em guas destinadas ao banho pode ser arriscada para os usurios, pois as fezes podem conter bactrias, vrus e protozorios que podem ser ingeridos e causar doena intestinal. Alm disso, estes autores relatam que a agitao da gua em conseqncia das atividades recreacionais tambm pode ressuspender bactrias do sedimento, apresentando um risco para as pessoas que se divertem no local de banho. Assim, quanto maior a contaminao, maior

23 a probabilidade da gua conter microrganismos patognicos de origem entrica, tais como Salmonella spp., Shigella spp., vrus da hepatite A, vrus Norwalk causadores de doenas como gastroenterites, hepatite A, poliomielite, dentre outras (GREENBERG, et al.,1992; DOMBECK et al., 2000). A utilizao de reservas ecolgicas para fins recreacionais pode muitas vezes ser feita de maneira inadequada, comprometendo a qualidade da gua a ser utilizada pelos turistas, a identificao dos tipos patognicos de E. coli pode possibilitar uma avaliao da diversidade ecolgica e o grau de virulncia desses microrganismos que circulam em lagoas. importante ressaltar que uma srie de doenas pode ser veiculada pela gua, tais como: gastroenterites, hepatites, poliomielites, doenas parasitrias e fngicas (MELO, 2006). Escherichia coli diarreognica o grupo de bactrias mais comumente detectado nos estudos em pases em desenvolvimento, causando cerca de 30 a 40% de episdios de diarria aguda em crianas (ORYAN et al., 2005). De 1999 a 2000, 59 surtos de doenas nos Estados Unidos foram atribudos a exposio das pessoas em guas recreacionais, e 61% desses surtos foram de gastroenterites (ALM et al., 2003). Pode-se concluir que a recreao de contato primrio ou secundrio em locais inadequados pode atrair vrios riscos de contrair doenas para os banhistas.

24 7. CONCLUSES

Sabendo que o planeta possui apenas 1% de gua doce, que a contaminao de corpos dgua naturais por lanamento de efluentes constante, e que apenas 30% da populao mundial tem garantia de gua tratada, sendo que os 70% restantes dependem de poos e outras fontes passveis de contaminao. E que o uso de gua contaminada responsvel por milhares de surtos de doenas e at a morte, surge um pensamento de que preciso uma mudana e que esta precisa ser feita o mais rpido possvel. Mas pouco se tem feito para se estabelecer polticas que equacionem os problemas advindos da utilizao inadequada dos recursos hdricos. necessrio perceber a necessidade da utilizao racional dos recursos hdricos, essa percepo deve ser feita por governantes, estabelecendo leis que tornem o tratamento de efluentes domsticos e industriais obrigatrios, antes que estes atinjam nossos mananciais, criando programas de

conscientizao da populao, que assim ser orientada a proteo de um bem to necessrio a todos.

25 8. REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS

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