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Escola Politcnica da Universidade de So Paulo

Projeto de Formatura Engenharia Ambiental

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Desenvolvimento de um sistema de pr-tratamento para osmose reversa

Orientador: Prof. Dr. Ren Peter Schneider Graduao em Engenharia Ambiental: Bruna de Sandre Oristanio Daniel Brooke Peig Marcelo Augusto Sartori Lopes (oristaniobruna@yahoo.com) (daniel@brookepeig.com) (maslusp@gmail.com) (schneide@icb.usp.br)

Dezembro de 2006

NDICE RESUMO/ ABSTRACT........................................................................................ 4 1. INTRODUO................................................................................................. 2 2. OBJETIVOS.......................................................................................................9 3. REVISO BIBLIOGRFICA........................................................................ 3 3.1. Sistemas de separao por membrana.............................................. 3 3.2. Sistema de osmose reversa................................................................. 3 3.2.1. Princpio de funcionamento da osmose reversa................ 3 3.2.2. Depsito em membranas...................................................... 4 3.2.3. Depsito Biolgico............................................................... 4 3.2.4. Polarizao............................................................................ 6 3.2.4. Controle de depsitos em membranas................................6 3.3. Mtodos de pr-tratamento mais utilizados..................................... 7 3.3.1. Convencional........................................................................ 7 3.3.2. Microfiltrao e ultrafiltrao............................................ 7 3.3.3. Tratamento biolgico.......................................................... 7 3.3.4. Condicionamento qumico.................................................. 8 4. JUSTIFICATIVA.............................................................................................. 10 4.1. Filtro em espiral.................................................................................. 10 4.2. Biorreator de filme fixo...................................................................... 10 4.3. Ultrafiltrao por suco em membranas submersas..................... 10 5. PLANO DE TRABALHO................................................................................. 11 5.1. Desenvolvimento dos prottipos........................................................ 11 5.2. Determinao de parmetros e mtodos de quantificao.............. 11 5.3. Operao e coleta de dados................................................................ 11 5.4. Anlise dos resultados........................................................................ 11 6. DESENVOLVIMENTO DO PLANO DE TRABALHO............................... 11 6.1. Estratgia de desenvolvimento dos sistemas de pr-tratamento.... 22 6.2. Cronograma do desenvolvimento do projeto................................... 31 6.3. Desenvolvimento dos prottipos........................................................ 32 6.3.1. Prottipo: Filtro em Espiral................................................ 32 6.3.1.1. Configurao do sistema....................................... 34 6.3.1.2. Dosagem de qumicos............................................ 34 6.3.1.3. Sistema de Retrolavagem...................................... 35 6.3.1.4. Dimensionamento do filtro................................... 35 6.3.2. Prottipo: Biorreator de filme fixo..................................... 37 6.3.2.1. Pacotes de enchimentos......................................... 38 6.3.2.2. Sistema de aerao................................................ 38 6.3.2.3. Dimensionamento do biorreator.......................... 39 6.3.3. Prottipo: Ultrafiltrao por suco em membranas....... 41 6.3.3.1.O elemento e os mdulos de membranas..............42 6.3.3.2.Sistema de aerao................................................ 43 6.3.3.3. Sistema de retrolavagem....................................... 43

6.3.3.4. Fluxo Crtico.......................................................... 44 6.3.3.5. Dimensionamento da ultrafiltrao.................... 44 6.4. Determinao dos parmetros e mtodos de quantificao........... 45 6.5. Operao e Coleta de dados............................................................... 47 6.6. Anlise dos resultados....................................................................... 47 7. DISCUSSO DE RESULTADOS.................................................................... 48 8. CONCLUSO ................................................................................................... 50 9. REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS............................................................ 51 10. ANEXOS .......................................................................................................... 54

NDICE DE FIGURAS Figura 01 - Remoo de partculas...................................................................... 08 Figura 02 - Fenmeno da Osmose........................................................................ 10 Figura 03 - Processo de osmose reversa.............................................................. 10 Figura 04 - Elemento de membrana.................................................................... 11 Figura 05 - Instalao dos elementos membranas............................................. 11 Figura 06 - Fluxograma de uma mquina de osmose reversa.......................... 11 Figura 07 - Montagem de uma membrana de Osmose Reversa ...................... 12 Figura 08 - Filtrao tangencial........................................................................... 12 Figura 09 - Etapas de desenvolvimento do biofilme........................................... 13 Figura 10 - Queda de produtividade na osmose reversa da Petrobrs ........... 18 Figura 11 - Aumento das presses de alimentao em funo do fouling........ 19 Figura 12 - Desenho esquemtico do filtro em espiral....................................... 33 Figura 13 - Descrio da passagem das partculas ao longo do filtro............... 33 Figura 14 - Fluxograma de operao do Filtro em Espiral.............................. 34 Figura 15 - Perfil isomtrico do sistema do biorreator de filme fixo................ 37 Figura 16 - Esquema de funcionamento do pacote de enchimentos................. 37 Figura 17 - Esquema de funcionamento da seqncia de enchimentos............ 38 Figura 18 - Fluxograma de operao do Biorreator.......................................... 39 Figura 19 - Organizao dos mdulos de membrana no tanque....................... 41 Figura 20 - Fluxograma do sistema de ultrafiltrao......................................... 42 Figura 21 - Elemento de membrana e sua composio...................................... 42 Figura 22 - Fotografias da construo das mquinas na fbrica...................... 49

NDICE DE TABELAS Tabela 1 Cronograma do projeto...................................................................... 31 Tabela 2 Dados do clculo do dimensionamento do filtro.............................. 36 Tabela 3 Parmetros analisados e seus pontos de coleta................................ 46

NDICE DE ANEXOS Anexo 1 - Protocolo para a determinao de Carboidratos............................... 55 Anexo 2 - Proposta de ensaios validao do protocolo de Carboidratos....... 57 Anexo 3 - Protocolo para a determinao de Protenas..................................... 59 Anexo 4 - Propostas de ensaios validao do ensaio de Protenas.................. 61 Anexo 5 - Protocolo para a determinao da Srie de Slidos.......................... 66 Anexo 6 - Propostas de ensaios validao do ensaio da Srie de Slidos....... 70 Anexo 7 - Mtodos padronizados para a determinao da DBO...................... 75 Anexo 8 - Verificao de acurcia e preciso do respirmetro Oxitop............. 81 Anexo 9 - Protocolo de uso do respirmetro Oxitop........................................... 87 Anexo 10 - Manual de uso do Oxitop................................................................... 90 Anexo 11 - Determinao da acurcia e preciso de equipamentos..................96

ABSTRACT / RESUMO Neste trabalho foram desenvolvidos os projetos para um conjunto de prottipos cujo objetivo aprimorar a qualidade de pr-tratamento de gua de alimentao para sistemas de osmose reversa. Os objetivos deste pr-tratamento so: a remoo de slidos em suspenso da gua bruta, reduo dos compostos causadores de depsito biolgico para o aumento da vida til das membranas de osmose reversa e a reduo dos custos operacionais. Os prottipos serviro para gerar os dados bsicos de desempenho operacional para permitir o dimensionamento de plantas-piloto dos sistemas. Neste projeto foram desenvolvidos os planos para a construo de trs mquinas: um biorreator de filme fixo para remoo de carbono orgnico, um filtro em espiral para a remoo de slidos com dimetro maior que 15 m e um sistema de ultrafiltrao para remoo de slidos coloidais em suspenso e bactrias. Para cada mquina desenvolvida, foram determinados os parmetros a serem controlados para analisar a eficincia do processo de pr-tratamento, alm das metodologias de anlise mais adequadas para avaliao de cada um destes. O projeto resultado de uma parceria entre a Universidade de So Paulo e a Perenne, uma empresa de tratamento de gua. Trata-se de um projeto multidisciplinar, com a participao de bilogos, engenheiros e projetistas.

1. INTRODUO O sistema convencional de tratamento de gua, usado em larga escala no ltimo sculo, no capaz de assegurar a remoo eficiente de substncias indesejveis, principalmente quando a fonte de gua bruta poluda, salobra ou j foi previamente utilizada (reso) [16]. A busca por sistemas mais eficientes levou aos tratamentos por membranas e de osmose reversa em particular, tecnologias que tm apresentado excelentes resultados em diferentes aplicaes. A osmose reversa um sistema de tratamento de gua atravs de separao por membranas capaz de remover substncias dissolvidas na gua at o tamanho de ons. Esta tecnologia tem sido utilizada para a desmineralizao de gua, ou seja, para remover todos os compostos dissolvidos na gua. A gua desmineralizada tem aplicaes na agricultura, abastecimento pblico, em processos industriais e na rea mdica. Infelizmente, a tecnologia de osmose reversa est sujeita a uma srie de problemas, um dos maiores deles a reduo acelerada da vida til das membranas em virtude do entupimento das membranas. Isso leva ao aumento dos custos e de sua complexidade operacional. As causas deste problema esto relacionadas com a qualidade da gua que alimenta o sistema. Este trabalho enfoca a soluo do problema do entupimento de membranas atravs do pr-tratamento da gua que alimenta os sistemas de osmose reversa, ou seja, uma remoo prvia de slidos, matria orgnica e outros compostos para evitar que prejudiquem a osmose reversa em si. Neste projeto, sero concebidas, desenvolvidas e dimensionadas mquinas para o prtratamento de gua, mais eficientes e economicamente viveis do que outras opes atualmente utilizadas. A iniciativa parte de um convnio entre a empresa Perenne Equipamentos e Sistemas de gua Ltda. e a Universidade de So Paulo. Os autores deste relatrio integraram uma equipe multidisciplinar constituda por bilogos, engenheiros e projetistas. Durante 10 meses os equipamentos foram concebidos e construdos. Paralelamente foram realizadas atividades para determinar o modo de operao e definir estratgias para avaliar a eficincia dos sistemas concebidos.

2. OBJETIVOS O objetivo deste trabalho o desenvolvimento do projeto, incluindo a concepo, clculos preliminares de dimensionamento de um sistema de pr-tratamento de gua para plantas de osmose reversa composto de:

Um biorreator de filme fixo; Um sistema de ultrafiltrao por suco em membranas submersas; Um filtro em espiral.

Os equipamentos sero projetados, construdos, operados e otimizados, tanto individualmente quanto de forma integrada, para garantir: A mxima remoo dos compostos formadores de depsitos (fouling) em membranas: principal responsvel pela degradao e reduo de produtividade dos sistemas de osmose reversa; Minimizao de interferncias nos processos: propiciando maior continuidade na forma de operao dos sistemas de osmose reversa, minimizando o nmero de paradas para manuteno; Minimizao dos custos de operao: reduzindo gastos energticos, de produtos qumicos ou de pessoal para manuteno; Minimizao do uso de produtos qumicos (anti- incrustantes e outros).

3. REVISO BIBLIOGRFICA 3.1. Sistemas de separao por membrana O processo de membranas uma tcnica que permite concentrar e separar compostos de uma soluo sem o uso de calor [24]. As partculas so separadas de acordo com o seu tamanho molecular e formato atravs da aplicao de presses e o uso de membranas especiais semipermeveis. O emprego da tecnologia de membranas no tratamento de gua relativamente recente. As primeiras unidades comerciais de osmose reversa foram construdas no incio da dcada de 60 do sculo passado, enquanto que os primeiros sistemas de ultra e microfiltrao entraram em operao no final da dcada de 80 e os primeiros reatores de membrana para tratamento de guas residurias em meados da dcada de 90. Na filtrao convencional, a gua com slidos forada a atravessar, perpendicularmente, um meio filtrante. Toda a soluo atravessa por esse meio criando apenas uma corrente de sada conhecida como filtrado. Os slidos ficam retidos no interior do filtro. Este o tipo de filtrao utilizado em filtros de cartucho e filtros de areia. A tecnologia de filtrao convencional limitada a partculas em suspenso, com dimetros superiores a 20 micrmetros. Para a remoo de partculas menores que 0,2 m utiliza-se vrios tipos de tecnologias de membrana. A microfiltrao (MF) remove partculas de dimetro da ordem de 0.1 a 1 micrmetro. utilizada para remover colides e bactrias. Slidos em suspenso e dissolvidos no so removidos de forma eficiente por este processo. Existem diversas configuraes de sistemas de microfiltrao, cada uma com uma diferente aplicao. A Ultrafiltrao (UF) tem a capacidade de separar macro molculas, de dimetros de at 0,01 micrmetros. Embora apresente uma remoo completa de slidos em suspenso e colides, permite a passagem de sais dissolvidos e molculas menores. As configuraes de sistemas de ultrafiltrao so semelhantes s de processos de microfiltrao. A ultrafiltrao tem tido um grande desenvolvimento no campo de tratamento de gua para o abastecimento pblico. Nanofiltrao (NF): A nanofiltrao um processo especial de membranas que remove partculas de dimetros at a ordem de 1 nanmetro (10 ngstroms). A nanofiltrao um processo situando entre a osmose reversa e a ultrafiltrao. Matria orgnica e sais com nions divalentes so eficientemente removidos. A Nanofiltrao utilizada, principalmente para a remoo de cor, carbono orgnico total e slidos dissolvidos em guas residurias. Por se tratar de uma tecnologia relativamente nova, seu uso ainda pouco difundido. Osmose Reversa (OR): A osmose reversa o mais seletivo processo de filtrao disponvel. A membrana de osmose reversa atua como uma barreira seletiva a todos os sais dissolvidos, molculas orgnicas e inorgnicas. A rejeio tpica de sais no processo de OR vai de 95% a 99% [24]. Este trabalho ser focado no processo de Osmose Reversa, a ser detalhado mais adiante.

Figura 01 Tamanho de partculas removidas em diferentes sistemas de filtrao (Fonte: ECC USA 2004)

3.2. Sistema de osmose reversa O sistema de osmose reversa um processo que tem a capacidade de remover slidos dissolvidos na gua com eficincia altssima. possvel obter de forma simples e contnua, gua purssima com salinidade prxima a gua destilada. Os usos da osmose reversa no tratamento de gua so diversos (referncias): o Dessalinizao de gua do mar: Tanto para consumo humano quanto para outros processos, a membrana de Osmose Reversa pode reduzir a concentrao de cloreto de sdio de 35.000mg/L para 350mg/L. o Irrigao: Um dos problemas da agricultura a acumulao de sais no solo em funo da irrigao com gua de rios ou poos. A partir de certo patamar os sais tornam-se nocivos s plantaes. A Osmose Reversa capaz de remover este excesso de sais de forma economicamente vivel. o Alimentao de caldeiras: Caldeiras exigem gua purssima, pois a evaporao da gua causa a incrustrao da superfcie dos tubos pelos slidos presentes na mesma, reduzindo a transferncia de calor, aumentando o consumo de combustvel e o risco de exploses. A osmose reversa, assim como a troca inica, tm sido o tratamento mais utilizado nestes casos. o Produo de produtos qumicos: Hospitais, conglomerados farmacuticos e laboratrios utilizam o processo de Osmose Reversa para garantira mxima pureza em seus produtos. Processos de hemodilise so alimentados com gua desmineralizada ou destilada. Comparada ao processo de troca inica, muito utilizado para o abrandamento (remoo de dureza) de guas industriais, a osmose reversa tem a vantagem de dispensar a etapa de regenerao, um processo que interrompe a produo e ao mesmo tempo consome uma grande quantidade de solues qumicas (cidos e bases fortes). Como desvantagem existe a gerao de um fluxo de rejeito, soluo com elevadas concentraes de sais em volumes de at 50% da alimentao total. Completar informao.

3.2.1. Princpio de funcionamento da osmose reversa O princpio de funcionamento dos sistemas de osmose reversa baseia-se na inverso do fenmeno do equilbrio osmtico (Figura 02), que consiste na gerao de um gradiente de presso para levar um solvente da fase mais concentrada para a menos concentrada atravs de uma membrana semipermevel (Figura 03).

Figura 02 Fenmeno da osmose

Figura 03 Processo de osmose reversa As membranas semipermeveis de osmose-reversa so compostas de trs camadas. A primeira um suporte de polister, que garante a resistncia mecnica do conjunto. A segunda uma camada de polisulfona com caracterstica de membrana de ultrafiltrao, cujo objetivo funcionar como suporte para a fixao da terceira camada, que a membrana de osmose, uma pelcula ultrafina de poliamida, que estabelece a barreira de rejeio dos sais. Todo este conjunto possui cerca de 1/10 de milmetro e consistncia e aparncia de uma folha de papel. Na prtica, um sistema de osmose reversa composto de elementos de membranas (Figura 04), vasos de presso e uma bomba de alimentao (Figura 05). Os vasos de presso asseguram o suporte e a proteo mecnica dos elementos de membrana. A bomba de alta presso injeta continuamente gua nas membranas com energia suficiente para superar a presso osmtica. A soluo que alimenta o sistema divide-se em dois fluxos, um de permeado (gua dessalinizada) e outro de concentrado. Esta relao de fluxos controlada atravs de uma vlvula na tubulao de concentrado (Figura 06). Normalmente a produo de concentrado varia de 40 a 80% do fluxo de alimentao do sistema. 10

Figura 04 Elemento de membrana (Fonte: TMA Amrica, 2006)

Alimentao

Permeado Rejeito

Figura 05 Instalao dos elementos membranas, em srie, e um vaso de presso. As setas indicam o fluxo da gua.

Figura 06: Fluxograma de uma mquina de osmose reversa [24].

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Em sistemas comerciais, as membranas de osmose reversa so dispostas na conformao em espiral (elementos). O arranjo em espiral oferece a vantagem e permitir agregar uma grande rea de membranas em um pequeno volume e simplicidade de construo e instalao. No arranjo em espiral, duas folhas de membranas so unidas com uma tela em seu interior e suas laterais coladas. A partir da so enroladas ao redor de um tubo e separadas externamente por mais uma tela (Figura 07). Uma das telas forma o canal de coleta de permeado, a outra, o canal de alimentao.

Figura 07 Montagem de uma membrana de Osmose Reversa (Fonte: ECC USA 2004) O arranjo em espiral torna o sistema mais compacto e facilita a operao a altas presses em virtude do formato cilndrico dos mdulos. Ao mesmo tempo, esta configurao deixa espaos muito pequenos para a circulao de gua, da ordem de dcimos de milmetro, cria um ambiente propcio para o acmulo de material e a proliferao de microrganismos [1]. Estas membranas so geralmente operadas atravs de fluxo tangencial (Figura 08). Nesta modalidade, a soluo circula paralelamente membrana. Parte da gua permeada (atravessa as membranas) e o restante, incluindo os slidos remanescentes so arrastados e levados para fora dos filtros criando uma segunda sada conhecida como concentrado ou rejeito.

Figura 08 Filtrao tangencial (Fonte: ECC USA 2004)

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Existem diferentes tecnologias que utilizam a filtrao tangencial, cada uma aplicvel a um tamanho distinto de partcula que se deseja remover (Figura 01). As quatro principais so listadas abaixo. Fluxo tangencial em elementos espirais: vazo mxima de alimentao, vazo mnima de concentrado para garantir a remoo do material retido pelo arraste hidrulico. 3.2.2. Depsito em membranas O fenmeno de depsito em membranas, conhecido em ingls como fouling, pode ser entendido como um acmulo de material na superfcie de membranas e nos espaadores [16], muitas vezes pode ser irreversvel. Este acmulo leva deteriorao fsica e qumica das membranas pela abraso e oxidao das camadas polimricas e o aumento das presses em virtude da maior resistncia da gua em atravessar a membrana. Tambm comum o aumento da passagem de sais uma vez que a concentrao no interior dos mdulos passa a ser maior. O depsito em membranas depende da qualidade da gua de alimentao no sistema sendo, na grande maioria das vezes, ocasionado por sais insolveis (fenmeno conhecido como scaling), substncias coloidais e matria orgnica. interessante ressaltar que a formao destes depsitos facilitada pela geometria dos elementos de membranas, onde a gua de alimentao deve passar por estreitos canais formados pelos espaadores de alimentao que agem como uma espcie de filtro.

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3.2.3. Depsito Biolgico O depsito biolgico (conhecido como biofouling, em ingls) o tipo de depsito mais preocupante na operao de sistemas de osmose reversa alimentados com guas de superfcie e de reso [3]. A gua bruta contm diversos tipos de microrganismos, como bactrias, algas, fungos e vrus. A principal diferena entre os microrganismos e partculas no vivas, a habilidade dos microrganismos de se reproduzir, e formar um biofilme na superfcie da membrana. Ao entrar em um sistema de osmose reversa, os microrganismos encontram uma grande superfcie de membrana onde o efeito da concentrao-polarizao (item 3.3.3. deste relatrio) proporciona uma maior concentrao de nutrientes dissolvidos, formando um ambiente adequado para a formao do biofilme. O depsito biolgico em membranas reduz drasticamente o desempenho das membranas de osmose, causando o aumento da presso diferencial no canal de alimentao (diferena de presso no canal de alimentao entre a entrada e a sada do elemento de membrana). Em casos extremos, o entupimento do canal de alimentao por biofilmes microbianos pode causar o colapso telescpico e danos mecnicos nos elementos de membrana, alm da reduo do fluxo nas membranas. Este tipo de depsito pode ocorrer tambm do lado do permeado da membrana, contaminando a gua tratada. A formao do biofilme ocorre em trs etapas: adeso, crescimento e desprendimento (Figura 09).

Figura 09 Etapas de desenvolvimento do biofilme (Fonte: Trends in Microbiology)

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A formao de biofilme microbiano se inicia com a adeso de microrganismos colonizadores, que se fixam por meio de estruturas adesivas (fimbria, flagelos), aps um tempo mnimo de contato (segundos) na superfcie da membrana condicionada pela adsoro de componentes orgnicos e inorgnicos da gua de alimentao Aps esta adeso primria, os microrganismos fixados, capazes de metabolizar carbono orgnico do meio lquido, iniciam a biossntese de biomassa, o que inclui a formao de polmeros extracelulares (EPS). O crescimento do biofilme o resultado do metabolismo dos compostos orgnicos presentes na gua de alimentao pelas clulas do biofilme, que os transformam em biomassa celular e em energia metablica. A estrutura de um biofilme geralmente permeada por canais de passagem de lquido. Clulas presentes na gua de alimentao tambm podem se aderir ao biofilme prformado, contribuindo assim para o aumento da biodiversidade de organismos na estrutura. O fluxo tangencial no canal de alimentao pode causar o desprendimento de pedaos do biofilme por meio da ao hidrodinmica do fluido.

Os polmeros extracelulares da matriz do biofilme formam uma camada gelatinosa que envolve os organismos do biofilme e garante a estabilidade e coeso mecnica desta estrutura biolgica. Esta matriz tambm protege os microrganismos em seu interior, servindo de barreira a ataques qumicos e biolgicos. O crescimento do biofilme causa o aumento da espessura da matriz de EPS sobre a membrana, aumentando portanto a resistncia de filtrao. Os nutrientes e demais compostos da gua de alimentao, ao passarem pelo biofilme, podem sofrer: Aderncia: partculas em suspenso e clulas podem ser fisicamente retidas no biofilme por meio de aderncia ao EPS, devido a foras de atrao (cargas eletrostticas do EPS e das partculas). Transformao: o biofilme tambm pode se utilizar dos nutrientes presentes na gua de alimentao para seu crescimento, gerando energia e gases (ex: CO2), ou ento transformando os componentes da gua em partculas menores (ex: degradao de protenas em aminocidos) ou maiores atravs da biossntese. Nenhuma transformao: os componentes da gua podem entrar em contato com o biofilme e no sofrer nenhum tipo de aderncia ou degradao (por se tratar de um material recalcitrante ou de difcil biodegradao) ou, devido hidrodinmica do fluido nos poros entre os substratos que sustenta o biofilme, pode ocorrer a passagem direta dos componentes da gua, sem tempo suficiente de contato com o biofilme, de forma a impedir que alguma reao possa ocorrer. A dificuldade de remoo do biofilme se deve aos exopolmeros (EPS) produzidos pelas bactrias, que tem a funo justamente de prover maior fixao e proteo dos microrganismos contra a ao hidrodinmica e o ataque de biocidas. Assim, o prtratamento torna-se indispensvel na preveno do depsito biolgico, focando principalmente na remoo nos nutrientes, visando limitar o crescimento do biofilme.

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3.2.4. Concentrao-Polarizao A concentrao-polarizao o fenmeno do aumento da concentrao de sais na superfcie da membrana durante o processo de filtrao. Os sais rejeitados pela membrana, concentram-se temporariamente na superfcie da membrana formando uma fina camada onde a concentrao de componentes superior da gua de alimentao. Essa concentrao no se trata de um problema relevante para a operao de membranas de osmose reversa, porm proporciona concentrao de cargas eltricas e aumento de nutrientes dissolvidos, propiciando um ambiente favorvel para o depsito de sais, de microrganismos e o crescimento de biofilmes, estimulando a precipitao de sais e o acmulo de depsitos de matria orgnica e inorgnica [23]. 3.2.5. Controle de depsitos em membranas Depsitos formados na superfcie de membranas durante a operao so removidos periodicamente atravs da execuo de rotinas de limpeza qumica, processo em que uma soluo qumica (cida, bsica ou composta de detergentes) circula pelos vasos eliminando parte da incrustao. Uma das deficincias da limpeza qumica que este processo tambm degrada a superfcie das membranas, reduzindo a sua vida til. Muitas vezes, quando a camada de depsito sobre as membranas muito espessa ou de composio muito complexa, os procedimentos de limpeza qumica no permitem a remoo da totalidade de componentes dos depsitos. Eventualmente a membrana ficar colmatada de forma irreversvel, exigindo a sua reposio. O depsito irreversvel (aquele que no pode ser eliminado nas limpezas qumicas) pode ser evitado atravs da eliminao prvia de seus agentes causadores. Este processo conhecido como pr-tratamento.

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3.3. Mtodos de pr-tratamento mais utilizados 3.3.1. Convencional O mtodo convencional consiste na adio de um coagulante na gua a ser tratada, seguido da floculao, sedimentao das partculas maiores e, finalmente, da passagem por filtros de areia, antracito ou granada, para remover partculas menores. Este sistema mais antigo amplamente difundido em diversos campos do tratamento de gua e dominado por projetistas de sistemas de tratamento de gua . O mtodo convencional eficiente na remoo de matria coloidal, e demonstra-se pouco eficiente na remoo de bactrias e compostos orgnicos ou inorgnicos dissolvidos. As principais desvantagens do mtodo convencional podem ser apontadas como a necessidade de reas de instalao superiores de sistemas ais modernos, altos custos de operao e a baixa eficincia na remoo de partculas dissolvidas, microrganismos e carbono orgnico, mesmo quando bem operados [4]. A utilizao de coagulantes como sulfato de alumnio ou cloreto frrico gera lodo, um passivo ambiental que deve ser tratado e disposto adequadamente. Em um de seus estudos, realizado em 2004, a American Water Works Association [6] considera insuficiente o uso exclusivo de prtratamento, pelo mtodo convencional, em sistemas de osmose reversa. 3.3.2. Microfiltrao e ultrafiltrao Sistemas de microfiltrao e ultrafiltrao tm se demonstrado as opes mais modernas no pr-tratamento para sistemas de osmose reversa. Possuem uma alta eficincia na remoo de slidos em suspenso e colides [5] alm de ocuparem pouco espao e permitirem a operao automatizada. Os sistemas de micro e ultrafiltrao tambm so baseados em membranas, assim como a Osmose Reversa, apresentam diversas opes de configuraes, desde o formato de placas com operao por suco at o uso de fibras ocas em vasos pressurizados. Todavia, nem a micro nem a ultrafiltrao so capazes de separar ons. As desvantagens nos sistemas de micro e ultrafiltrao ficam por conta de seus elevados custos de implantao e operao, alm da remoo insuficiente dos causadores de depsito biolgico nas membranas. Neste tipo de pr-tratamento, h tambm a gerao de rejeito, que requer descarte adequado. 3.3.3. Tratamento Biolgico O tratamento convencional ou por membranas de micro ou ultrafiltrao no tm a capacidade de remover o material biodisponvel presente na gua de alimentao, principal responsvel pela ocorrncia do depsito biolgico na superfcie das membranas de osmose reversa [9]. Este o principal diferencial do tratamento biolgico, que atua justamente na remoo dos constituintes orgnicos da gua de alimentao, mesmo na presena de baixssimas taxas de carbono orgnico total (TOC). Os sistemas biolgicos mais utilizados no pr-tratamento de sistemas de osmose reversa so os biorreatores de membrana (MBR) principalmente em sistemas alimentados com gua de reso.

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Estes sistemas apresentam altas taxas de remoo de: TOC, demanda bioqumica de oxignio (DBO) e demanda qumica de oxignio (DQO), alm da degradao biolgica de compostos farmacuticos [11]. A principal desvantagem destes sistemas a ineficcia na remoo de material particulado, de sais inorgnicos e de compostos dissolvidos no biodegradveis, alm da alta sensibilidade dos reatores s variaes de pH, oxignio dissolvido (OD), temperatura e fontes de carbono, que influenciam no crescimento e manuteno dos microrganismos responsveis pela degradao biolgica.

3.3.4. Condicionamento qumico O condicionamento qumico, geralmente utilizado em combinao ou como parte dos sistemas de pr-tratamento citados anteriormente, uma prtica comum no controle dos agentes causadores de depsitos em membranas. Dentre os compostos qumicos mais utilizados esto os anti-incrustantes, cujo objetivo reduzir a colmatao por deposio de sulfatos e carbonatos. Os anti-incrustantes so substncias qumicas, do grupo dos fosfonatos, dosadas na alimentao da osmose reversa em concentraes muito pequenas (da ordem de 3ppm). Apresentam como caracterstica negativa o potencial incremento do depsito biolgico por possurem em sua composio, nutrientes para o crescimento bacteriano [7]. Outros compostos amplamente utilizados so oxidantes base de cloro e outros agentes como os perxidos. Estes produtos permitem a remoo de diversos componentes da gua de alimentao, como a matria orgnica, metais oxidveis e a desinfeco para controle do fouling biolgico porm, ao mesmo tempo, so prejudiciais aos sistemas de osmose reversa pois agridem a camada polimrica das membranas, devendo ser removidos antes que cheguem osmose reversa [8]. O condicionamento qumico um processo caro. Alm de exigir cuidados com o controle contnuo da dosagem, uma vez que as caractersticas da gua no so constantes ao longo do tempo, so necessrios servios laboratoriais e, principalmente, cuidados com a segurana dos trabalhadores, armazenamento e transporte. Agentes oxidantes como o cloro e perxidos so considerados substncias perigosas, oferecem tanto riscos ocupacionais quanto riscos ambientais.

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4. JUSTIFICATIVA O fouling das membranas tem atualmente sido um dos fatores que mais encarecem o tratamento de gua por Osmose Reversa. Um elemento de membrana de com 8 polegadas de dimetro (mais utilizado atualmente) custa cerca de R$ 2.000 e tem uma vida til estimada de 3 anos. Plantas de porte tipicamente operadas em unidades industriais brasileiras chegam a ter 400 elementos instalados, o que representa um investimento de R$ 800.000,00 apenas em membranas. Em uma das maiores plantas de osmose do Brasil, pertencente Petrobrs (400m/h de produo), a vida til estimada das membranas tem sido de 6 meses. Isso representa um gasto de R$ 4,8 milhes em trs anos com reposio de membranas, seis vezes mais do que o ideal. O equipamento da Petrobrs citado anteriormente, possui um dos pr-tratamentos mais modernos e caros disponveis no mercado: um sistema de clarificao convencional seguido de ultrafiltrao automatizada, dosagem de biocidas online e anlise fsicoqumica diria de praticamente todos os parmetros de qualidade. Mesmo assim, o fouling biolgico ocorre de forma to intensa que a produtividade cai cerca de 30% na primeira quinzena de operao (Figura 10). Limpezas qumicas so realizadas mais que uma vez ao ms, com as condies mais agressivas e mesmo assim no surtem os resultados desejados.

Vazo* de permeado normalizada

100,00 90,00 80,00 70,00

Vazo (m/h)

60,00 50,00 40,00 30,00 20,00 10,00 0,00

1 estgio Limpeza 2 estgio

Figura 10 Queda de produtividade em sistema de osmose reversa da Petrobrs (Perenne 2006)

30 e -s t

10 ut -o

20 ut -o

30 ut -o

no 9v

19 ov -n

29 ov -n

de 9z

Data
Limpeza 1 estgio Tendncia 1 estgio 2 estgio Tendncia 2 estgio

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Em outra anlise, podemos considerar o consumo energtico. Tomando como base as equaes fornecidas pela CAT Pumps (fabricante de bombas) em seu catlogo [27], possvel constatar que um aumento de 15% nas presses de alimentao leva a um aumento de aproximadamente 15% no consumo energtico. Em plantas com problemas de fouling, a ordem de grandeza deste aumento de presses pode chegar facilmente a 30% (Figura 11).

Presso de alimentao
20,00 18,00 16,00 14,00

Presso (bar)

12,00 10,00 8,00 6,00 4,00 2,00 0,00

1 estgio

Figura 11 Aumento das presses de alimentao da Osmose Reversa da Petrobrs em funo do fouling das membranas (Perenne 2006). Um sistema que produz 400m/h tem um consumo de energia da ordem de 244kW. Baseando-nos nas tarifas da Eletropaulo (2006), os custos anuais para esta produo so superiores a R$420.000,00. 30% deste valor so R$ 126.800,00 por ano (apenas em gastos energticos decorrentes do Fouling). Estudos realizados pelo ICB-USP e outros institutos de pesquisa ao redor do mundo (ver reviso bibliogrfica) tm provado que o problema de centenas de plantas com a que existe na Petrobrs est na ineficincia do pr-tratamento, por mais moderno que seja. Embora sistemas como a ultrafiltrao e tratamento convencional consigam remover compostos em suspenso a nveis aceitveis para alimentao de osmose, no controlam com eficcia parmetros como o carbono orgnico dissolvido que tem influencia direta no fouling biolgico das membranas. Os sistemas de pr-tratamento projetados neste trabalho tem justamente o objetivo de sanar as deficincias dos pr-tratamentos convencionais levando reduo dos custos globais de operao de sistemas de osmose e ao aumento da produtividade destas instalaes, com melhoria considervel da confiabilidade operacional. Cada dispositivo ser apresentado mais detalhadamente nos itens a seguir.

30 e -s t

10 ut -o

2 estgio

20 ut -o

30 ut -o

no 9v
Tendncia 1 estgio

19 ov -n

29 ov -n

de 9z

Data
Tendncia 2 estgio

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4.1. Filtro em Espiral Uma operao de filtrao consiste essencialmente em fazer passar gua por um dispositivo formado por uma ou mais camadas de materiais diversos, conhecidos conjuntamente como meio filtrante. Essa operao visa obter como produto, um fluido de maior qualidade, ou seja, livre de eventuais agentes poluentes, como materiais em suspenso, substncias coloidais e at bactrias. A principal finalidade deste filtro retirar da gua afluente partculas coloidais e material em suspenso. Sua construo mais simples e barata em comparao aos filtros cartucho, tradicionalmente utilizados em sistemas de osmose reversa. O filtro em espiral tem como vantagem a capacidade de retrolavagem, operao que aumenta a vida til do elemento filtrante e reduz a quantidade de filtros descartados. 4.2. Biorreator de filme fixo Trata-se de um equipamento que remove biologicamente a carga orgnica da gua de alimentao. Neste equipamento, a gua bruta passa por diversos cestos preenchidos com material de suporte para o crescimento microbiano, onde os microrganismos aderidos degradam os compostos orgnicos e nutrientes, transformando-os em formas mais facilmente removveis por outros processos. O principal diferencial deste tratamento sua capacidade de remoo de compostos causadores de biofouling no removidos por outros sistemas. Por no utilizar produtos qumicos para desinfeco, tambm previne problemas futuros nas membranas de osmose. O equipamento demanda um baixo consumo energtico, pois opera por gravidade, caracterstica que lhe garante tambm uma manuteno simples. 4.3. Ultrafiltrao por suco em membranas submersas Trata-se de um sistema em que as membranas so dispostas em placas paralelas, no interior de um tanque aerado. A filtrao realizada atravs de suco a vcuo. A principal finalidade deste sistema, como pr-tratamento para osmose reversa, a remoo de slidos em suspenso e microrganismos. A ultrafiltrao em membranas submersas, por operar com suco a baixas presses, permite uma reduo nos gastos de manuteno e de energia, se comparada ultrafiltrao pressurizada com mdulos em espiral. Alm disso, simplifica o processo de substituio das membranas e sua limpeza, uma vez que a superfcie da membrana no permanece confinada em um invlucro de difcil acesso e cada mdulo de membranas pode ser removido sem a interrupo da filtrao nos demais.

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5. PLANO DE TRABALHO Descrevemos a seguir todo o planejamento das atividades realizadas, bem como suas justificativas e resultados esperados. Os resultados obtidos em cada uma destas atividades sero abordados no item 6. Desenvolvimento do plano de trabalho. 5.1. Desenvolvimento dos prottipos Com o intuito de coletar dados e permitir pesquisas com o sistema de pr-tratamento para osmose reversa proposto, sero construdos trs equipamentos de acordo com os objetivos deste projeto: um biorreator de filme fixo, um sistema de filtros espiral e um sistema de ultrafiltrao por suco em placas submersas. O desenvolvimento destes prottipos ser realizado em conjunto com os projetistas e engenheiros da Perenne e a equipe de pesquisadores do laboratrio de Microbiologia Ambiental do Instituto de Cincias Biomdicas da USP. Nosso papel, neste grupo, ser o de descrever, pesquisar e elaborar especificaes para o dimensionamento, instrumentao e demais caractersticas dos trs equipamentos. Uma vez que os prottipos estejam construdos, sua instalao ser realizada na Raia Olmpica da USP, permitindo a operao com gua bruta e a coleta e a anlise dos dados nos prprios laboratrios da universidade. 5.2. Determinao dos parmetros e mtodos de quantificao A determinao de parmetros e variveis a serem controladas permitir realizar a medio da eficincia do sistema e modelar o seu funcionamento. Alguns destes parmetros requerem a instalao de instrumentos de medio nos sistemas. Para isso, parte deste processo ser realizada em conjunto com o desenvolvimento do prottipo. Baseando-se em dados da literatura e experincias no laboratrio, sero definidos: Os parmetros de projeto necessrios para o dimensionamento inicial dos prottipos, a operao e otimizao do sistema; Ponto de amostragem adequado para cada parmetro em cada um dos sistemas; A metodologia e protocolo de anlise desses parmetros. 5.3. Operao e Coleta de dados Com as duas etapas anteriores concludas, ser dado incio ao processo de coleta de dados. O objetivo desta etapa operar os trs sistemas individualmente e de forma integrada, buscando uma operao estvel com o menor nmero de interferncias. 5.4. Anlise dos resultados A anlise dos resultados tem como objetivo otimizar o funcionamento de cada um dos sistemas e sua integrao, fornecendo parmetros para a operao e alteraes no projeto para a construo de plantas piloto. Atravs das anlises ser possvel determinar a capacidade dos sistemas (e as condies de contorno para seu dimensionamento), o arranjo ideal para a montagem, a dosagem de produtos qumicos, rotinas de operao e manuteno e, principalmente, a eficincia de cada sistema na remoo dos causadores do fouling em membranas de Osmose Reversa. 22

6. DESENVOLVIMENTO DO PLANO DE TRABALHO A seguir, apresentamos os resultados de cada uma das etapas de desenvolvimento de nosso projeto. 6.1. Estratgia de desenvolvimento dos sistemas de pr-tratamento O desenvolvimento das trs mquinas (ultrafiltrao, biorreator e filtro) iniciou-se no segundo semestre de 2005. Um grupo de pesquisadores do laboratrio de Microbiologia Ambiental do Instituto de Cincias Biomdicas da USP construiu modelos de bancada que serviram de base para a concepo dos sistemas de pr-tratamento para Osmose Reversa. Os resultados desta pesquisa so anteriores ao incio dos trabalhos do grupo de autores deste relatrio. Modelo da Ultrafiltrao O modelo de bancada de ultrafiltrao consistia de duas membranas coladas nas laterais, separadas por uma tela e conectadas a um tubo de silicone (tubo de coleta de permeado). Este dispositivo operava atravs de sifo com uma suco de 2 metros de coluna de gua. Os experimentos realizados com esta configurao muito rstica de elemento de filtrao permitiram obter uma estimativa inicial do fluxo com alimentao de gua bruta proveniente da Raia Olmpica da USP e uma escolha preliminar das opes de membrana disponveis no mercado. Os resultados serviram como base para o dimensionamento e definio da configurao dos elementos de membrana no prottipo de ultrafiltrao. A operao deste pequeno modelo comprovou a viabilidade e eficincia do sistema de ultrafiltrao por placas de membranas submersas em pequena escala. Modelo do Biorreator O biorreator montado em escala de bancada consistia de um tanque contendo 5 cestos preenchidos com um material de suporte para o crescimento microbiano. Este modelo permitiu, atravs de ensaios realizados com gua da Raia Olmpica da USP, a comparao da qualidade entre a gua bruta e a gua tratada por esta mquina, validando a real aplicabilidade deste mtodo como pr-tratamento. Os ensaios tambm permitiram a escolha do material para o enchimento dos cestos, a estimativa do fluxo esperado nesta mquina, bem como a confirmao da necessidade de aerao das cmaras do biorreator para aumento da eficincia na remoo da DBO. Modelo do Filtro em Espiral Os ensaios realizados em laboratrio permitiram a modelagem da forma de enrolamento do material filtrante e a anlise do fluxo para diferentes valores de presso. Os ensaios foram realizados em prottipos de laboratrio montando-se o enchimento do filtro no interior de uma seringa, e a determinao dos fluxos e qualidade da gua filtrada permitiram a escolha do tecido filtrante a ser testado preliminarmente no prottipo [22]. Aps os testes de bancada, o grupo de autores deste relatrio integrou a equipe do ICBUSP para o projeto dos prottipos propriamente ditos. Todas as prximas etapas foram realizadas pelos autores deste relatrio.

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A primeira fase com o novo grupo, foi a pesquisa em referncias internacionais e projetos na rea. Foram levantadas cerca de 100 publicaes relativas aos seguintes tpicos: Osmose Reversa Descrio e detalhes sobre problemas de Biofouling Eficincia de pr-tratamentos existentes na remoo de biofouling Alternativas para o controle do fouling biolgico Novos sistemas de pr-tratamento Ultrafiltrao Ultrafiltrao como pr-tratamento para osmose reversa Sistemas de ultrafiltrao por membranas submersas Biorreatores de membranas Aerao Fluxo crtico Biorreator Biorreatores de filme fixo Influncia da aerao no processo de biodegradao em biorreatores Materiais de suporte em biorreatores de filme fixo Modelagem matemtica para dimensionamento e aumento de escala de biorreatores Taxas de remoo orgnica em processos aerbios de biorreatores Interferncias da hidrodinmica no desempenho do biofilme Filtros Especificaes de materiais para o filtro Aplicao da teoria de filtrao no desenvolvimento de plantas piloto Diretrizes de otimizao para filtrao Estratgias para melhorar a remoo de partculas na retrolavagem Filtrao em profundidade

Aps o levantamento de informaes da literatura, iniciou-se a etapa de desenvolvimento do modelo conceitual dos equipamentos. O modelo conceitual trata da forma com que cada mquina deve funcionar e que caractersticas so necessrias para atingir estes objetivos. Com essas informaes, foi possvel iniciar o projeto de cada um dos trs prottipos, focando na operao final de cada mquina.

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Ultrafiltrao No caso da ultrafiltrao, pensou-se em um arranjo semelhante ao utilizado em reatores de membrana comerciais. A montagem das folhas de membranas em placas retangulares permite a otimizao do espao e facilita a construo dos tanques e suportes. O uso de uma tela como espaador entre duas folhas de membranas evita o bloqueio do canal de permeado durante a suco. Um tanque com alimentao de gua por gravidade permite o controle da vazo atravs de uma chave bia. J nesta fase surgiram alguns desafios em relao ao equipamento. O primeiro deles foi a construo dos suportes das membranas de forma que conferissem resistncia e, ao mesmo tempo, ocupassem um espao mnimo, uma vez que era desejada a maximizao de rea de membrana por volume de tanque. A soluo proposta, com as molduras de ao parafusadas, foi proposta pela engenharia da Perenne e foi aceita para o equipamento. Um segundo desafio que surgiu foi a definio da configurao do sistema de coleta de amostras de permeado. Por se tratar de um sistema de suco, uma vlvula convencional aliviaria as presses internas dos tubos inviabilizando o recolhimento da gua. Um ponto de coleta localizado aps a bomba de suco permitiria a anlise de uma mistura de permeado proveniente de todos os elementos filtrantes em operao e inviabilizaria a anlise do produto de cada elemento individual, como desejado. A soluo apresentada pelo grupo foi o emprego de um recipiente acoplado ao tubo de permeado. Um conjunto de duas vlvulas garantiria o redirecionamento dos fluxos sem o alivio das presses nos tubos. Para avaliar a viabilidade desta soluo foi realizado um experimento no laboratrio, com uma bomba de vcuo e frascos de vidro adaptados. Alem de comprovar a eficcia da soluo, foi possvel determinar o volume ideal do recipiente em funo da vazo e da quantidade de gua necessria para amostragem. O terceiro desafio, ainda nesta etapa do modelo conceitual de funcionamento do equipamento foi a forma com que seria realizada a retrolavagem. A proposta inicial da equipe de engenharia da Perenne era utilizar duas bombas centrfugas, uma de suco e a outra de limpeza. Periodicamente, uma das bombas deveria ser desligada e a outra acionada. O grupo, em conversas com o Dr. Mierzwa, decidiu mudar esta configurao para apenas uma bomba. A inverso do fluxo seria feita atravs de vlvulas solenide, controladas eletronicamente por um painel. O tipo de bomba selecionada para a instalao foi a peristltica por ter a capacidade de bombear tanto ar quanto gua (uma bomba centrifuga no pode trabalhar a seco) e tambm, pela capacidade de controle continuo de vazo, caracterstica interessante em um prottipo.

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Biorreator Para o biorreator, a configurao estabelecida visa a alimentao da mquina por gravidade (devido ao baixo custo), e a necessidade de se realizar um teste em uma configurao diferente dos biorreatores convencionais, que normalmente tem disposio do fluxo na vertical. A alimentao do fluxo na horizontal permitir a comparao com a eficincia dos equipamentos j existentes, alm de permitir o estudo da degradao dos compostos orgnicos ao longo do comprimento do biorreator, por isso a diviso do enchimento em cinco compartimentos. Cada uma das cmaras contar tambm com um ponto de coleta de amostras. Para manter a vazo constante, foram includos e dimensionados dois extravasores no tanque do biorreator, um na entrada e outro na sada, eliminando a necessidade de ajustes de vazo com vlvulas. Para a medio da perda de carga entre cada um dos compartimentos do biorreator, a soluo encontrada pelo grupo foi a adoo de uma escala graduada, em nvel, no interior de cada um dos compartimentos, permitindo a leitura individual nas cmaras. A aerao, neste equipamento, tem a finalidade de manter homognea a gua no interior da cmara. Em modelos de maior escala, ter tambm a finalidade de manter um valor mnimo de Oxignio Dissolvido (OD), pois o processo de degradao de matria orgnica aerbio. Como neste modelo piloto no h altura suficiente para absoro de oxignio na pequena coluna de gua, no h a necessidade da produo de bolhas finas para absoro do ar na gua. Dessa forma, a soluo do grupo para a aerao com finalidade de mistura da gua foi a utilizao de tubos perfurados, instalados no fundo de cada uma das cmaras. Trata-se de uma alternativa de baixo custo e que atende os propsitos desejados. Para a definio da vazo de ar necessria para a mistura, adotouse uma vlvula de controle para cada uma das tubulaes de ar, permitindo ensaios comparativos com diferentes valores de vazo. Os cestos que contm o material de suporte tambm deram origem a um projeto especfico. A necessidade de um valor fixo e conhecido para o volume interno do cesto, alm da necessidade de remoo do enchimento para estudo microbiolgico e dimensional, gerou o projeto de um cesto metlico, com uma tampa na parte superior, que permite seu fcil preenchimento ou retirada do material de enchimento. Alm disso, os cestos foram desenhados para possibilitar sua remoo e intercmbio de posies, ou seja, o tanque do biorreator permite qualquer tipo de posicionamento e a variao do nmeros de cesto em operao, at o valor mximo de dez cestos seqenciais.

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Filtro em espiral Nos filtros em espiral, onde j se encontravam disponveis diretrizes bsicas geradas nos trabalhos conduzidos no Laboratrio de Microbiologia Ambiental do Instituto de Cincias Biomdicas da Universidade de So Paulo, procurou-se utilizar um material filtrante de baixo custo e que possibilite a retrolavagem, aumentando com isso a vida til dos filtros em espiral. Foram testados diferentes tipos de material para o enchimento, sendo identificado um produto que permitiu a manuteno de um fluxo elevado com boa eficincia de filtrao. Ainda, de acordo com testes feitos em laboratrio, foi observada a importncia da utilizao de uma tela como espaador entre o enchimento do material filtrante. O sentido do fluxo ascendente foi escolhido por possibilitar a maior contribuio das foras da gravidade para a filtrao, contribuindo para o desempenho do sistema de filtrao. Durante a etapa de desenvolvimento, notou-se a necessidade da utilizao de um limitador nas extremidades internas do filtro a fim de evitar que o material filtrante se desloque fisicamente por efeito telescpico, quando o filtro colmatar. Os principais parmetros a serem medidos sero a vazo, atravs de um rotmetro, e a perda de carga por manmetros localizados na entrada e na sada do filtro em espiral. A anlise da perda de carga, atravs dos medidores de presso, permitir determinar o momento da retrolavagem. A anlise da turbidez permitir quantificar o desempenho do sistema e avaliar a necessidade de melhoramentos.

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A segunda etapa do desenvolvimento do projeto foi a elaborao dos fluxogramas do processo. Nesta etapa, os projetistas da Perenne cuidaram da elaborao das plantas e desenhos. Coube ao grupo deste trabalho conceber os fluxogramas e determinar todos os tipos de equipamentos nas linhas de operao. O desenvolvimento dos fluxogramas foi iniciado atravs da definio das linhas de circulao da gua. Em todos os equipamentos, foi decidida a instalao de tanques tanto na entrada como na sada dos sistemas. A configurao dos tanques facilita a posterior integrao das mquinas, uma vez que dispensa o uso de bombas entre cada etapa do processo e permite regularizar produtividades diferenciadas. Os filtros podem fornecer ate 200 litros por hora, mas o biorreator trata apenas 50 litros por hora. Foram instaladas bombas apenas nos locais em que eram estritamente necessrias, sempre que possvel o grupo optou por alimentao por gravidade. Dentre as dificuldades encontradas na elaborao dos fluxogramas estava o posicionamento dos instrumentos para a leitura de presses e vazes. O grupo procurou posicionar rotmetros apenas na sada de gua tratada para evitar a formao de algas em seu interior. A posio dos medidores de presso foi definida em cada caso para garantir a leitura da presso real no sistema. A determinao do fundo de escala foi fundamental, para isso, utilizou-se os valores de pr-dimensionamento de cada um dos dispositivos. Cada tipo de vlvula foi especificado pelo grupo nesta etapa da elaborao do fluxograma. Foram adotadas vlvulas do tipo agulha para todos os canais que exigissem ajuste fino das vazes. Vlvulas do tipo esfera foram includas em drenos e locais aonde no era necessrio um controle preciso de vazo. Finalizados os fluxogramas, a Perenne encarregou-se de elaborar das plantas construtivas. O grupo deste trabalho cuidou da reviso de cada uma das verses destes desenhos de modo a garantir que todos os instrumentos previstos fossem instalados corretamente. Foram feitas cerca de 7 revises at a verso final dos desenhos. Este processo tomou 20 semanas, correspondendo a 48% do tempo no cronograma geral do projeto para 2006.

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Paralelamente, iniciou-se a etapa de definio dos parmetros de qualidade e performance que deveriam ser controlados em cada uma das mquinas. Os autores deste relatrio, em conjunto com os pesquisadores do ICB levantaram uma lista de todos os parmetros que deveriam ser controlados para:

Avaliar a remoo dos compostos causadores do fouling em cada um dos sistemas. Avaliar parmetros de desempenho e produtividade dos equipamentos. Identificar a composio e os causadores do fouling nas membranas de osmose reversa. Permitir a comparao dos novos sistemas com outros convencionalmente utilizados. Permitir o dimensionamento das plantas piloto.

Aps a definio e aprovao em reunies do grupo de todos os parmetros, iniciou-se uma etapa de levantamento dos procedimentos padronizados existentes para cada uma das medidas. Normas nacionais e internacionais foram consultadas. Parmetros sem normas especficas para avaliao tiveram procedimentos de estudo levantados e definidos com base na literatura cientfica internacional. Levantados os procedimentos iniciou-se a verificao da adequao de cada anlise s condies de operao e realidade de nossos sistemas. Diversos ensaios laboratoriais foram realizados, comparando-se a gua bruta e a tratada por cada um dos modelos fsicos anteriormente desenvolvidos. Este processo durou 11 semanas, pois para alguns ensaios, foi necessria a aquisio de reagentes e equipamentos incomuns ao laboratrio. Em outros ensaios, houve a necessidade de diversas etapas de ensaios, modelagens e testes, at a obteno de concluses consistentes. Os ensaios realizados pelos autores deste trabalho foram: Determinao quantitativa de protenas em biofilme. Determinao quantitativa de polissacardeos em biofilme. Extrao do EPS de uma soluo de biofilme a partir de resinas de troca inica. Determinao da demanda de oxignio atravs de mtodos respiromtricos. Determinao das fraes de slidos na gua atravs de mtodos gravimtricos. Determinao da acurcia e preciso de pHmetros na avaliao da eficincia dos pr-tratamentos. Determinao da acurcia e preciso de condutivmetro na avaliao da eficincia dos pr-tratamentos. Determinao da acurcia e preciso de colormetro na avaliao da eficincia dos pr-tratamentos. Determinao da acurcia e preciso de turbidmentros na avaliao da eficincia dos pr-tratamentos. Determinao da acurcia e preciso do respirmetro do laboratrio na avaliao da DBO das amostras. Determinao do protocolo de uso para o respirmetro do laboratrio (Oxitop).

Os resultados de cada um destes ensaios realizados pelos membros deste grupo encontram-se em anexo.

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Concludos os fluxogramas do processo, o grupo de projetistas da Perenne integrou-se novamente com a equipe da USP para definir os prximos passos. Dentre eles estavam a definio dos equipamentos que seriam utilizados e a montagem do laboratrio experimental em um container (a ser localizado na Raia Olmpica da USP). A escolha dos equipamentos envolveu desde a reviso minuciosa do dimetro e caracterstica de cada uma das centenas de vlvulas previstas para as mquinas at a escolha dos aeradores, tipo de tubulao e especificao dos instrumentos de medio (baseados nos parmetros a serem controlados). Enquanto o grupo de autores deste relatrio trabalhou nas especificaes de dimenses de cada um dos dispositivos, a Perenne em seu escritrio buscou fornecedores que atendessem a cada um dos requisitos fixados. J a montagem do laboratrio experimental no container, tratou inicialmente de um problema de organizao de espao. Os equipamentos deveriam ser posicionados de tal forma que os pesquisadores pudessem movimentar-se no interior do recinto e, ao mesmo tempo, ocupar um nico container. A soluo contemplou o posicionamento das caixas de gua bruta na parte externa do container bem como todo o sistema de bombeamento e alimentao do laboratrio com gua bruta. A Perenne elaborou os desenhos com a planta final de acordo com as decises tomadas nas reunies. A instalao do container que abrigar o laboratrio experimental na Raia Olmpica da USP ficou cargo dos autores deste relatrio. A definio do modelo e fabricante do container a ser instalado foi realizada nos escritrios da Perenne. A partir da, todas as tarefas foram realizadas pelos autores deste relatrio. Inicialmente, o grupo calculou o peso total a ser suportado pelo container, e projetou uma fundao de concreto, dimensionando vigas apoiadas em sapatas de 1,5m de profundidade, de forma a suportar o futuro laboratrio s margens da Raia Olmpica da USP. Em paralelo, foi realizado o contato formal coma universidade, de forma a obter as autorizaes necessrias para a instalao do laboratrio e das obras na Raia Olmpica. Depois de obtidas as devidas autorizaes, o grupo contratou a mo de obra (4 operrios), realizou a quantificao e compra do material de construo, projetou e coordenou toda a obra civil das fundaes do container. Com as fundaes j finalizadas, foi realizado o acompanhamento at a instalao final do container que abrigar as mquinas projetadas, passando ento a operar como um laboratrio. No mesmo perodo em que se iniciaram as obras na Raia Olmpica, foi iniciada tambm a construo das mquinas na fbrica da Perenne, em Feira de Santana, na Bahia. Todo o projeto executivo para cada uma das mquinas foi desenhado pela Perenne, baseado nas definies de equipamentos e no fluxograma de operao definidos previamente, ao longo do projeto, pelos autores deste relatrio. Nesta fase, algumas alteraes tiveram que ser realizadas no projeto, devido dificuldades tcnicas de execuo, na fbrica, de algumas das especificaes exigidas para as mquinas. Isto se deve ao fato de as mquinas no fazerem parte do padro produtivo atual da linha de montagem da fbrica, por se tratarem de uma tecnologia totalmente nova, nunca antes construda. Alm disso, o fato de se tratar de uma unidade prottipo, com vazes muito menores aos equipamentos usualmente produzidos pela fbrica, tambm gerou mudanas.

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fbrica, tambm gerou mudanas. Cada dificuldade ou impossibilidade tcnica de execuo do projeto executivo, na forma como havia sido enviado fbrica, era comunicado matriz em So Paulo, que informava ao grupo as necessidades de alterao. Baseado nas informaes recebidas da fbrica, o grupo realizou modificaes no projeto, possibilitando assim a fabricao das mquinas. As mudanas no projeto executivo resultaram em: alteraes de medidas em partes de equipamentos; compra de nova maquinaria ou produtos qumicos especficos para utilizao na fbrica; rearranjo no desenho interno do laboratrio experimental instalado no container; utilizao de novas matrias-primas no usuais na fbrica; criao de processos produtivos (como no caso do enrolamento do enchimento filtro), entre outros. Graas ao profundo conhecimento do equipamento, uma vez que havia sido concebido e projetado pelos autores deste relatrio, foi possvel realizar as alteraes necessrias no projeto executivo, permitindo que as mquinas passassem efetivamente para a fabricao. Por se tratarem de equipamentos novos, o conhecimento da finalidade e relevncia de cada uma das especificaes do projeto, permitiu autorizar as mudanas, sem que estas comprometessem a qualidade final do produto de cada uma das mquinas, ou as anlises laboratoriais que seriam feitas a posteriori, na operao destes equipamentos. O processo de fabricao das mquinas iniciou-se efetivamente em Novembro de 2006, e tem previso de concluso para Janeiro de 2007, quando devem ser instaladas as primeiras mquinas-prottipo no laboratrio experimental no container localizado na Raia Olmpica da USP.

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6.2. Cronograma do desenvolvimento do projeto

PRINCIPAIS ATIVIDADES DESENVOLVIDAS NO PERODO Levantamento de literatura e reviso bibliogrfica Definio de plantas de cada sistema Definio de fluxograma de operao de cada sistema Definio de parmetros de operao Validao de protocolos de medio de parmetros Alteraes no projeto devido a incompatibilidades de fabricao Instalao do container para os prottipo Construo dos prottipos Fevereiro Maro Abril Maio Junho Julho Agosto Setembro Outubro Novembro Dezembro

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6.3. Desenvolvimento dos prottipos Esta seo contempla a descrio de cada um dos sistemas projetados, bem como os princpios de operao e o dimensionamento inicial dos prottipos, resultado dos trabalhos previamente descritos. Como nenhum dos equipamentos desenvolvidos existe, o grupo de trabalho buscou na literatura solues semelhantes e tentou aproximar suas caractersticas aos sistemas que seriam desenvolvidos. O resultado foi um pr-dimensionamento, suficiente para o desenvolvimento de prottipos que, por sua vez, fornecero todas as informaes e caractersticas importantes para o dimensionamento de plantas piloto. Alguns dos resultados dos testes de bancada foram aplicados para refinar estes clculos iniciais e confirmar as ordens de grandeza que foram adotadas.

6.3.1. Prottipo: Filtro em Espiral O filtro em espiral formado por um basto circular onde enrolado o material filtrante, tendo suas diversas camadas separadas por um material suporte (Figura 12). O material suporte possui orifcios que no obstruem significativamente o fluxo ao longo do enchimento. Nas extremidades do basto, existe um limitador que evita a movimentao do elemento filtrante no interior do filtro, ou seja, a formao do efeito telescpico no enchimento. O sistema de filtrao contm um rotmetro para controle de vazo, vlvulas que possibilitam o ajuste da vazo para suas operaes de filtrao e de retrolavagem, uma bomba de alimentao, bombas de dosagem qumica e medidores de presso. No sistema existem quatro filtros, sendo trs deles do tipo espiral e o outro do tipo cartucho. O objetivo do filtro cartucho a de ter uma referncia dos resultados que sero obtidos com os filtros em espiral. A gua introduzida no cilindro, sob presso, com fluxo ascendente e coletada na parte superior. A retrolavagem feita alterando-se o sentido do fluxo.

Figura 12- Desenho esquemtico do filtro em espiral. 33

O princpio de funcionamento do filtro em espiral a filtrao em profundidade (Figura 13). O que ocorre, a reteno das partculas ao longo dos interstcios do elemento filtrante. A reteno de impurezas na filtrao considerada o resultado de dois mecanismos: transporte e aderncia. As partculas devem se aproximar da superfcie do meio filtrante, e permanecerem aderidas de modo a resistirem s foras de cisalhamento resultantes das caractersticas hidrodinmicas do escoamento ao longo do meio filtrante. A taxa de acmulo de partculas no interior do enchimento do filtro poder ser acompanhado e quantificado pela variao da perda de carga, que ser registrada nos manmetros, alm da reduo da vazo observada nos rotmetros. Junto a isso, a turbidez ser monitorada para assegurar a eficincia do filtro em espiral, comparado ao filtro cartucho.

Figura 13- Descrio da passagem das partculas ao longo do filtro.

Figura 14- Fluxograma de operao do Filtro em Espiral 34

6.3.1.1. Configurao do sistema A gua captada e armazenada em um reservatrio de gua bruta, havendo uma bomba para todo o sistema de filtrao com vazo ajustvel atravs de vlvulas para se obter 200 l/h. Na alimentao do sistema existem trs pontos de dosagem de produtos qumicos. A partir da, a gua direcionada para a entrada dos filtros, onde monitorada por rotmetros individuais e sua vlvula agulha ajustada para o controle da vazo a fim de se obter 50 l/h. Passando pelo filtro, existe uma vlvula em cada filtro para a coleta de amostra, e posteriormente ela segue para o reservatrio de gua tratada dos filtros. Foram testados no laboratrio de Microbiologia Ambiental do Instituto de Cincias Biomdicas da Universidade de So Paulo alguns tipos de materiais para a construo do elemento filtrante bem como diferentes configuraes de disposio do enchimento, onde se constatou que o tecido Nylon Coreano 120 fios separado com material suporte apresentou melhor desempenho [22]. A estrutura do projeto piloto com trs filtros em paralelo possibilita o estudo comparativo de outros materiais para o enchimento simultaneamente, que podero ser testados posteriormente. 6.3.1.2. Dosagem de qumicos Existe um conjunto com trs bombas dosadoras, com vazo de 1,0 L/h, antes da entrada dos filtros. O objetivo da dosagem de produtos qumicos fornecer coagulante e ajustar o pH para se obter uma melhor reteno de partculas no sistema de filtrao. As trs solues sero preparadas e armazenadas em tanques individuais, com volume de 10 litros cada. Inicialmente, as solues tero as seguintes caractersticas e concentraes: Sulfato de alumnio (2%) Carbonato de sdio (2%) Hipoclorito de sdio (5%)

6.3.1.3. Sistema de Retrolavagem A retrolavagem prolonga a vida til, reduzindo custos operacionais, em comparao aos filtros cartucho convencionalmente utilizados no processo de pr-tratamento de gua para o sistema de osmose reversa. O sistema de retrolavagem opera com fluxo descendente, sentido contrrio ao de filtrao e tem o objetivo de extrair as partculas que ficaram retidas no meio filtrante. Sua operao iniciada observando os manmetros instalados na entrada e sada do filtro. Havendo o aumento da perda de carga, estabelecida nas operaes iniciais com a planta piloto, inicia-se o processo de retrolavagem pelo tempo pr-determinado. Utiliza-se neste processo, a gua armazenada no reservatrio de gua tratada do sistema de filtrao. As vazes da operao de retrolavagem sero reguladas manualmente por 35

vlvulas agulha individuais nos filtros, observando seus respectivos rotmetros. A contra lavagem pode ser feita individualmente ou em grupo, sendo possvel, portanto, a operao de filtrao junto com a retrolavagem. A vazo pr-determinada para a contra lavagem de 60 L/h para cada filtro, com previso de 10 minutos de durao, podendo-se alterar esta configurao de acordo com a performance observada.

6.3.1.4. Dimensionamento do filtro O sistema de filtrao foi dimensionado para uma vazo de 50 L/h. Analisando os dados obtidos em laboratrio [22], foi possvel calcular as dimenses do prottipo, descritas a seguir. conhecido o dimetro, a altura e a espessura do basto no filtro em espiral de escala de laboratrio. Portanto, possvel calcular a rea til de filtragem que a rea do filtro menos a rea do basto. Posteriormente, atravs de ensaios no filtro em espiral de escala de laboratrio, obtivemos a vazo de 9,8 L/h, e foi possvel calcular o fluxo por rea, valor este que deve ser semelhante ao do prottipo. Com os valores do fluxo por rea e de vazo estabelecidos, pode-se calcular a rea til do filtro em espiral do prottipo. Nesta parte, foi adotado como espessura do basto no prottipo o valor de 1,27 cm (0,5 polegada) por razes comerciais. Com o valor da rea til, possvel calcular o dimetro necessrio e ainda garantir uma margem de segurana para o equipamento. A altura no filtro em espiral do prottipo foi considerada de dimenses proporcionais ao seu dimetro, em comparao com as dimenses dos testes de laboratrio. A seguir (Tabela 1) h a descrio dos resultados obtidos, calculados pela teoria da semelhana hidrulica entre a escala de laboratrio e o prottipo em dimensionamento. Escala de laboratrio 28,14 98,14 3,00 4,96 Prottipo 69,00 240,64 12,70 25,33

Dimetro (mm) Altura (mm) Basto (mm) rea til (mm2) Fluxo por rea 19742,66 19742,66 (l/m2.h) 9,80 50,00 Vazo (L/h) Tabela 1 Dados do clculo do dimensionamento do filtro.

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6.3.2. Prottipo: Biorreator de filme fixo O biorreator constitudo por trs principais componentes: o sistema de enchimentos seqenciais; o cesto (ou pacote) de enchimentos, que contm o material de suporte para o biofilme e o prprio biofilme, responsvel pela biodegradao da matria orgnica.

Figura 15 - Perfil isomtrico do sistema do biorreator de filme fixo O biofilme cresce aderido superfcie de um substrato formado por pequenas placas polimricas, contidas no interior de um cesto de malha de ao carbono, chamado aqui de cesto de enchimentos. A gua entra por um dos lados do cesto, atravessa toda sua espessura (Figura 16), mantendo um determinado tempo de contato com o biofilme, onde os microrganismos aderidos ao material suporte degradam os compostos orgnicos e nutrientes, transformando-os em gases, biomassa, metablitos e partculas desprendidas de biomassa (bem maiores do que organismos individuais), formas mais facilmente removveis por outros processos.

Figura 16 - Esquema de funcionamento do pacote de enchimentos

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O sistema do biorreator composto por cestos de enchimento seqenciais (Figura 17), funcionando em alimentao contnua de gua. A disposio seqencial dos cestos proporciona uma degradao especializada dos componentes da gua de alimentao. Os compostos de degradao mais difcil so transformados apenas nos ltimos cestos, pois os facilmente degradveis foram removidos nos cestos anteriores.

Figura 17 Esquema de funcionamento da seqncia de enchimentos

6.3.2.1. Pacotes de enchimentos Os pacotes de enchimento so cestos metlicos, com uma tampa na parte superior que permite o preenchimento de todo o volume do cesto com o material de suporte. Em nossos enchimentos, utilizaremos raspas de polietileno como substrato para o crescimento do biofilme. A densidade do polmero utilizado e a espessura das raspas, permitem o clculo da rea disponvel para aderncia de biofilme, possibilitando a estimativa da biomassa presente em cada cesto. 6.3.2.2. Sistema de aerao O biorreator de filme fixo ir operar aerobicamente, por se tratar do tipo de degradao mais eficiente para os compostos orgnicos que se deseja remover. O sistema de aerao tem a finalidade de garantir a saturao de oxignio ao longo de toda a coluna de gua, e promover mistura para manter homognea a gua no interior de cada uma das cmaras. Trata-se de um sistema de bolhas finas, geradas por um tubo perfurado. A vazo de ar controlada por vlvulas. Seu valor dever ser o mnimo necessrio para garantir a saturao de oxignio e a mistura completa [13] no interior de cada uma das cmaras.

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Figura 18 Fluxograma de operao do Biorreator 6.3.2.3. Dimensionamento do biorreator A seguir so explicados cada um dos parmetros utilizados, seus respectivos valores e frmulas utilizadas para este dimensionamento. Os clculos consideram apenas a velocidade (taxa) de remoo de carga orgnica versus a velocidade de aporte de carga orgnica para determinar as dimenses do equipamento. Os valores de referncia utilizados baseiam-se na literatura de sistemas para tratamento de esgoto. Vazo (Q = 50 l/h = 1,2 m/dia) Definida como o valor mnimo de gua bruta a ser tratada no biorreator. Taxa de Aplicao superficial hidrulica (Ta = 30 m/m.dia) Trata-se da velocidade da gua no interior do biorreator, calculada como a vazo dividida pela rea do biorreator. Adotou-se o valor mdio de 30 m/m.dia baseado nos valores encontrados na literatura [19] [20] [21] que variam de 10 a 75 m/m.dia. Taxa de Aplicao orgnica volumtrica (To = 0,5 kg.DBO/m.dia) Trata-se da taxa de remoo diria de DBO, ou seja, a concentrao de DBO (em kg/m de gua bruta) que o sistema remove ao longo de um dia. Adotamos 0,5 kg DBO/m.dia, com base nos valores de literatura [19] [20] [21], que variam de 0,5 a 3,0 kg DBO/m.dia. Carga orgnica aplicada volumtrica (C = 0,01 kg.DBO/m.dia) a quantidade de carga orgnica, em quilos de DBO, que se espera encontrar na gua bruta. Adotou-se aqui a carga orgnica de um rio classe 3. 39

Nmero de cestos (Nc = 5 cestos) Para permitir a avaliao das diferentes fases da degradao biolgica ao longo do comprimento do biorreator e as diferenas de composio do biofilme ao longo desta extenso, definiu-se que o volume total do enchimento do biorreator seria dividido em cinco partes (cestos), proporcionando a diviso interna do biorreator em cmaras. Carga orgnica diria (Cd) a quantidade de carga orgnica, em quilos de DBO, que se deseja tratar ao longo de um dia. Calculada como a vazo total a ser tratada por dia, multiplicada pela carga orgnica de cada metro cbico de gua bruta. Cd = Q.C = (1,2 m/dia) . (0,01 kg.DBO/m.dia) rea total do biorreator (At) Com a taxa de aplicao, pode-se ento calcular qual a rea necessria para tratar a vazo desejada. Determinada pelo tempo de contato necessrio entre a gua bruta e o enchimento, dada sua velocidade de deslocamento pela rea (vazo). At = Q/ Ta = (1,2 m/dia) (30 m/m.dia) = 0,04 m Volume total de enchimento (Vt) calculado a partir da carga diria a ser tratada dividido pela taxa de degradao. Vt = Cd/To = (0,012 kg.DBO/dia) (0,5 kg.DBO/m.dia)= 0,024 m Comprimento total do enchimento (Lt) Com o volume e rea do enchimento j determinados, calcula-se seu comprimento total. Lt = Vt/At = (0,024 m) (0,04 m ) = 60cm Comprimento de cada cesto (Lunit) Para fins do estudo da degradao ao longo do comprimento do biorreator, dividiu-se o comprimento total de enchimento em cinco cestos. Lunit = Lt/Nunid = 60cm 5 = 12 cm

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6.3.3. Prottipo: Ultrafiltrao por suco em membranas submersas O equipamento consiste basicamente de um tanque onde a gua bruta entra por gravidade e permanece armazenada. No interior do tanque, 16 placas de membranas divididas em quatro mdulos so completamente submersas na gua bruta (Figura 19). Destas placas saem tubos, que so conectados a uma bomba de suco, responsvel por fornecer energia para o processo de filtrao. Paralelamente, existe um sistema complementar de aerao que, atravs da asperso de bolhas finas, mantm a superfcie das membranas limpa. Um outro sistema, de retrolavagem com permeado, permite inverter o fluxo da filtrao removendo os materiais acumulados na superfcie das mesmas. O fluxograma do sistema indicado na Figura 19. Nos pargrafos a seguir, ser feita uma descrio detalhada do equipamento de ultrafiltrao por suco em mdulos submersos. Esta descrio ser dividida em cada componente que compe o equipamento. importante ressaltar que o objetivo deste sistema a remoo de slidos em suspenso. Eventualmente o equipamento tambm poder funcionar como um reator de membranas, neste caso, adquire a capacidade de remover o carbono orgnico e nutrientes da gua.

Figura 19 Organizao dos mdulos de membrana no tanque

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Figura 20 Fluxograma do sistema de ultrafiltrao 6.3.3.1. O elemento e os mdulos de membrana submersos O sistema de ultrafiltrao baseia-se no princpio da reteno de partculas na superfcie de uma membrana permevel. O elementos de membranas so montados como placas, cada placa constituda de duas folhas de membranas coladas nas bordas e separadas por um espaador tipo tela (Figura 21). A funo do espaador evitar que as duas folhas bloqueiem a passagem de permeado quando sujeitas suco.

Figura 21 Elemento de membrana e sua composio.

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Assim que se inicia a suco (no canal de permeado dos mdulos), partculas se depositam na superfcie da membrana dificultando a passagem de outras partculas menores, formando a torta de filtro. Obstrudos, os poros (originalmente com dimetro nominal de 0,2 m) operam como se fossem de dimetro menor e apresentam melhora na qualidade da gua permeada, porm o fluxo torna-se decrescente. O fluxo de permeado depende da fora (neste caso a suco), concentrao de alimentao e caractersticas da membrana. A energia de suco fornecida por uma bomba peristltica, escolhida por permitir um controle da velocidade, do sentido do fluxo e por operar normalmente mesmo no caso de entrada de ar na tubulao. Um mdulo de membranas um conjunto de 4 elementos instalados em paralelo. Cada mdulo pode ser operado em regimes diferentes de limpeza, vazo, presso e aerao. A utilizao de 4 mdulos permite avaliar simultaneamente a performance de diferentes tipos de membranas. Esta caracterstica ser muito til no incio da operao da planta, para permitir a escolha do melhor material filtrante. 6.3.3.2.Sistema de aerao O sistema de aerao tem como principal objetivo aumentar o tempo de operao do sistema de filtrao, reduzindo o nmero de interrupes no processo para retrolavagens, limpezas qumicas ou substituio dos mdulos de membranas. A influncia das bolhas de ar na operao da ultrafiltrao se d predominantemente atravs de dois mecanismos. O primeiro deles criao de turbulncia na interface da membrana com a gua de alimentao. Esta turbulncia desestabiliza a formao do acmulo de slidos na superfcie atravs do fluxo laminar de gua. O segundo mecanismo ocorre atravs ascenso da bolha aderida superfcie da membrana. Este fenmeno gera tenses na interface ar/gua/membrana arrancando o material aderido da superfcie. O equipamento utilizado para a aerao composto de um compressor de ar, um conjunto de vlvulas, um rotmetro para o controle da vazo de ar e, finalmente, por dispersores de ar (aeradores). Os aeradores so dispositivos em formato circular (padro comercial), revestidos por uma membrana perfurada. Sua principal funo formar e dispersar micro bolhas de ar. O sistema de aerao o responsvel pela maior parcela do consumo energtico da ultra filtrao. 6.3.3.3. Sistema de retrolavagem O prottipo da mquina de ultrafiltrao por membranas submersas conta com um sistema que permite a retrolavagem programada dos mdulos de membranas. A retrolavagem realizada atravs da circulao do permeado em sentido inverso filtrao. O objetivo deste sistema testar formas de limpar as membranas sem o uso de produtos qumicos ou interrupes longas no sistema (comuns quando so realizadas limpezas qumicas). Membranas limpas de forma eficiente tm a sua vida til aumentada.

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Uma das preocupaes quanto ao sistema de retrolavagem, que ser avaliada durante a operao de nosso prottipo, o risco das membranas descolarem ou de rasgarem em funo da inverso do fluxo. 6.3.3.4. Fluxo Crtico O objetivo da operao do sistema de ultrafiltrao atingir o fluxo crtico. Desta forma as interferncias no sistema como a execuo da retrolavagem ou limpeza qumica das membranas so minimizadas. Entende-se por fluxo crtico como sendo um fluxo limite, dependente do tipo de sistema utilizado e da gua de alimentao, em que, abaixo dele, o fouling das membranas de microfiltrao no observado. Em membranas de 0,2m de placas submersas, a literatura apresenta fluxos crticos da ordem de 13 l/h.m [17] para gua de superfcie. O fluxo crtico sempre inferior ao fluxo de operao usual das membranas de ultrafiltrao. Se por um lado possvel reduzir o nmero de intervenes, pelo outro existe o aumento das dimenses do sistema tendo em vista que a produtividade reduzida. 6.3.3.5. Dimensionamento da ultrafiltrao Para o dimensionamento do sistema de ultrafiltrao, partimos de uma vazo objetivo de 50 l/h. Como desejamos operar o sistema em fluxo crtico e sabemos que este fluxo baixo o suficiente para no sub-dimensionar o sistema, fixamos o valor em 13 l/m.h, baseando-nos em valores obtidos na literatura [17] [18] para sistemas semelhantes. Em experimentos no laboratrio chegamos a obter fluxos de at 22 l/m.h. Para atingir o fluxo crtico de 13L/m para uma vazo de 50l/h, o sistema deve possuir uma rea de membranas mnima de 3,8m. Estabelecendo o arranjo de 16 elementos de membranas, com a dimenso til das membranas em cada elemento de 28 cm por 48 cm, chegamos a uma rea total de 4,3m, suficiente para garantir a vazo desejada. O tanque foi dimensionado para garantir que os 16 mdulos de membrana estivessem devidamente submersos e houvesse espao suficiente para a instalao dos aeradores. O sistema de aerao foi escolhido com base nas dimenses do tanque. Os dispersores de ar, de dimenses comerciais, com 9 polegadas de dimetro so capazes de fornecer at 10 m/h de ar. Os dados da literatura apontam para vazes de ar entre 4 e 10 l/min [17] [18]. O sistema de retrolavagem foi projetado para utilizar a mesma bomba de suco de permeado atravs de uma inverso do sentido do fluxo. Como no existem referncias na literatura de sistemas parecidos, parte da experincia de operao ser determinar a vazo ideal de retrolavagem e a presso mxima que pode ser alcanada sem o rompimento das membranas.

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6.4. Determinao dos parmetros e mtodos de quantificao Durante a operao de cada um dos sistemas alguns parmetros sero controlados com o objetivo de mensurar a eficincia e performance de cada equipamento. Um equipamento de osmose reversa instalado posteriormente ao pr-tratamento desenvolvido vai permitir correlacionar a influncia dos parmetros medidos com a performance da Osmose Reversa. Cada um dos parmetros controlados, hidrulicos ou de qualidade da gua, so listados a seguir, juntamente com uma breve descrio e explicao da instrumentao necessria para sua medio. A Tabela 2 ilustra os pontos dos sistemas aonde sero coletadas amostras de gua ou onde sero instalados medidores para estes parmetros. Turbidez A turbidez tem como objetivo indicar a eficincia na remoo de slidos em suspenso. A unidade padro para a medio da turbidez o NTU (Unidades Nefelomtricas de Turbidez) e o equipamento utilizado conhecido como turbidmetro. Carbono orgnico dissolvido um indicador da quantidade matria orgnica presente na gua, disponvel para o consumo microbiano. Existem equipamentos especficos para sua determinao, que se utilizam de raios ultravioleta (UV), e neste este ser utilizado o equipamento de TOC. A avaliao do carbono orgnico dissolvido permitir medir a eficincia do biorreator na remoo de compostos causadores do depsito biolgico. Temperatura A temperatura, alm de influenciar no metabolismo dos microrganismos causadores do fouling biolgico, altera as caractersticas fsicas da gua, dentre elas a densidade, a viscosidade e a solubilidade de gases. A temperatura utilizada em modelos de normalizao, para neutralizar os efeitos de alteraes de propriedades fsicas da gua no clculo do desempenho de sistemas e permitir uma comparao direta dos dados operacionais (vazo, fluxo e presses). Cor Verdadeira A cor de uma amostra de gua est associada ao grau de reduo de intensidade que a luz sofre ao atravess-la (e esta reduo d-se por absoro de parte da radiao eletromagntica), devido presena de slidos dissolvidos. Seu uso permite estimar a eficincia do biorreator. Presso de vcuo A presso de vcuo a energia aplicada s membranas para executar o processo de filtrao. Seu valor diretamente relacionado com a vazo de permeado e um parmetro importante na quantificao do fouling nos mdulos de ultrafiltrao. A presso de vcuo medida atravs de um vacumetro instalado no canal de permeado. Vazo de permeado/ Vazo de entrada As vazes de permeado e de entrada so medidas diretas da produtividade do sistema de ultrafiltrao e do biorreator. utilizada na determinao do fluxo de filtrao e na velocidade de escoamento do fluido. Com o auxlio de um rotmetro, este valor pode ser medido em tempo real.

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Perda de carga A anlise da perda de carga permite verificar a performance do sistema de filtrao. Ela medida atravs de medidores de presso individuais instalados na entrada e na sada do filtro. pH O pH um parmetro que influencia diversas caractersticas da gua de alimentao. Dentre elas a solubilidade de sais e a formao de colides. O pH tem influncia na eficincia do coagulante dosado nos filtros em espiral. Condutividade A condutividade uma medida indireta da concentrao de sais dissolvidos no sistema, quanto maior a condutividade, mais sais esto dissolvidos na gua. Este parmetro muito utilizado no acompanhamento operacional de sistemas de osmose reversa. Embora o objetivo do pr-tratamento no seja a remoo dos sais dissolvidos, interessante monitorar sua evoluo ao longo do pr-tratamento. O condutivmetro o equipamento utilizado, e apresenta os resultados em Micro Siemens por centmetro. Vazo de ar A vazo de ar utilizada para otimizar os sistemas de aerao, reduzindo o consumo de energia, maximizando a limpeza das membranas de ultrafiltrao e garantindo a mistura completa e a saturao de oxignio no biorreator. Oxignio dissolvido A quantidade de oxignio dissolvido na gua ir permitir garantir a presena de microrganismos realizadores de degradao aerbia, e ir determinar a necessidade ou no da adio de oxignio na gua. Sua medida ser feita atravs de um medidor de oxignio dissolvido. Parmetros biolgicos Ensaios de laboratrio permitiro caracterizar o tipo de biofilme, sua espessura no material suporte do biorreator, alm de caracterizar o tipo de degradao e a necessidade de nutrientes na gua, de forma a favorecer a degradao aerbia (medidas de fsforo, nitrognio).
Ultrafiltrao
gua de alimentao Sada do Permeado Canal do permeado Canal de aerao

Biorreator
Canal de aerao X X

Filtro

Entrada/Sada

Parmetro Turbidez Carbono (TOC/DOC/AOC) Temperatura pH Condutividade Vazo do permeado Vazo de ar Presso de vcuo Vazo de entrada

X X X

X X

X X X X X X X

X X X X X

X X

Tabela 2 Parmetros analisados e seus pontos de coleta

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Entrada/Sada

Cmara

Tanque

6.5. Operao e Coleta de dados Por se tratar de uma tecnologia nova e complexa, o processo de aquisio de peas e desenvolvimento dos mtodos construtivos tomou mais tempo do que o planejado. Em decorrncia disso, os prottipos ainda no haviam sido instalados na Raia Olmpica da USP at a data da elaborao deste relatrio. Portanto, no temos disponveis dados de operao.

6.6. Anlise dos resultados Pelos motivos acima (6.3), no houve anlise de resultados dos dados de operao de cada um dos prottipos projetados pelos autores deste relatrio.

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7. DISCUSSO DE RESULTADOS Todo o processo anteriormente explicado e detalhado resultou na definio dos projetos de trs equipamentos inovadores de pr-tratamento de gua de alimentao de sistemas de osmose reversa no perodo de apenas um ano. Embora o cronograma proposto inicialmente tenha previsto o incio da operao dos sistemas em perodo de seis meses aps o incio do projeto, alguns fatores imprevistos causaram atrasos cumulativos que impossibilitaram a operao dos prottipos pelo grupo. Os principais fatores que contriburam para este atraso incluem o carter inovador do projeto, as dificuldades advindas da relao universidade-empresa e as exigncias inovadoras do projeto. O atraso do projeto em funo da relao entre a universidade e a empresa ocorreu principalmente em funo de problemas de comunicao. Por estarem em localidades diferentes, as duas equipes no podiam desenvolver os trabalhos conjuntamente. Quando uma parte encerrava suas tarefas ou necessitava do parecer da outra para a continuidade dos trabalhos, tornava-se necessrio agendar uma reunio, em uma data compatvel para os dois grupos, o que podia levar semanas. As exigncias inovadoras do projeto tambm dificultaram a aquisio de materiais e equipamentos. A prpria estrutura da Perenne no estava preparada para lidar com novos fornecedores, produtos diferentes daqueles usualmente utilizados e novas especificaes. Isto gerou insegurana e causou uma demora no programada nos processos de tomada de preos e aquisio de componentes e insumos para a construo dos prottipos. Apesar de este relatrio ainda no poder contemplar os resultados operacionais das mquinas projetadas, diversas realizaes de sucesso foram atingidas ao longo deste projeto. Em primeiro lugar, deve-se destacar a concepo, elaborao, dimensionamento e projeto executivo de trs prottipos inovadores de mquinas com a finalidade de prtratar gua para Osmose Reversa, um problema ainda sem soluo definitiva no mercado de tratamento de gua. Deve-se ressaltar que todo o projeto, da idia ao envio produo dos prottipos, levou um ano, e abordou a pesquisa das tecnologias mais recentes, comercializadas no mercado internacional. Todo o trabalho de engenharia, focado na pesquisa de tecnologias, dimensionamento e a definio de instrumentaes de cada uma das trs mquinas prottipo foi realizado exclusivamente pelos trs alunos autores deste relatrio. Em segundo lugar, deve-se destacar a inovadora parceria entre a empresa Perenne e a Universidade. O laboratrio de Microbiologia Ambiental do ICB da USP recebeu o fomento s pesquisas relacionadas este projeto atravs dos investimentos da Perenne que, em contrapartida, teve a possibilidade de inovar, iniciando uma nova fase de desenvolvimentos tecnolgicos na empresa, graas pesquisa e os bons resultados alcanados por este projeto. Finalmente, os alunos autores deste relatrio adquiriram conhecimentos no relacionamento empresarial e na criao de uma nova tecnologia, englobando a negociao de instrumentao utilizada e alteraes de equipamentos, estudos de custobenefcio de tecnologias, soluo das dificuldades operacionais de fabricao, trabalho em uma equipe multidisciplinar, tcnicas laboratoriais, estudos de bancada, entre outros.

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A seguir, algumas fotos ilustram o andamento da construo das mquinas. As fotos foram tiradas na fbrica da Perenne, em Feira de Santana, na Bahia, em Novembro de 2006.

Figura 22 - Fotografias da construo das mquinas na fbrica 49

8. CONCLUSO Todos os objetivos relacionados ao desenvolvimento de cada uma das trs mquinas e o projeto dos sistemas foram atingidos. Por motivos de sigilo industrial, os desenhos tcnicos, materiais utilizados e dimenses detalhadas dos equipamentos no puderam ser apresentados neste documento. De qualquer forma, os princpios que nortearam a escolha dos dispositivos e o seu funcionamento puderam ser abordados. As mquinas projetadas j esto em processo de fabricao e sero entregues no incio de Janeiro, aps o prazo de concluso deste trabalho. O fato de a produo estar em fase final, indica que a configurao escolhida pode ser aplicada industrialmente. A concepo dos prottipos, englobando a pesquisa das tecnologias a serem utilizadas, o dimensionamento dos prottipos e a definio da instrumentao a ser utilizada em cada uma das mquinas, bem como seu fluxograma de operao de cada equipamento foram concludos com sucesso. Todos os resultados apresentados ao longo deste projeto resumem o trabalho realizado ao longo do ano de 2006 pelos autores deste relatrio, culminando na fabricao de uma tecnologia inovadora. Esta nova tecnologia servir como base para o estudo e desenvolvimento de plantas piloto para pr-tratamento de gua para Osmose Reversa, que assimilam um conjunto de tecnologias at o momento inexistente mundialmente. Este trabalho deve servir como histrico das atividades realizadas pelos autores deste projeto no decorrer de 2006, e tambm como introduo para aqueles que desejam aprofundar-se no tema e dar continuidade a estes estudos.

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9. REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS 1) DUDLEY, L. Y.; CHRISTOPHER, N. S. J.; PermaCare. Practical Experiences of Biofouling in Reverse Osmosis Systems. 2002. 2) FILMTEC Membranes. Understanding Reverse Osmosis. 1997. 3) AL-AHMAD, M.; ABDUL ALEEM, F.A.; MUTIRI, A.;UBAISY, A. Biofouling in RO membrane systems Part 1" Fundamentals and control. 2000. 4) REDONDO, J. Brackish - Sea and wastewater desalination. 2001. 5) BREHANTA, A.; BONNELYEB, V.; PEREZA, M. Comparison of MF/UF pretreatment with conventional filtration prior to RO membranes for surface seawater desalination. 2002. 6) CHRISTOPHER, J.; GABELIC; FREDRICK, W.; GERRINGER; FRANKLIN, J. C.; GAO, Junbo; COHEN, Yoram;. Reverse Osmosis pretreatment: Challenges with conventional treatment. 2004. 7) VROUWENVELDER, J.S.; MANOLARAKIS, S.A.; VEENENDAAL, H.R.; VAN DER KOOIJ, D. Biofouling potential of chemicals used for scale control in RO and NF membranes. 2000. 8) GLATER, Julius; HONG, Seung-kwan; ELIMELECH, Menachem. The search for a chlorine-resistant reverse osmosis membrane. 1994. 9) WEND, Christopher F.; STEWARTB, Philip S.; JONESB, Warren; CAMPER, Anne K. Pretreatment for membrane water treatment systems: a laboratory study. 2003. 10) ZWIENER, C.; FRIMMEL, F. H. Short-term tests with a pilot sewage plant and biofilm reactors the biological degradation of the pharmaceutical compounds clofibric acid, ibuprofen, and diclofenac. 2003. 11) WATER SCIENCE AND TECHNOLOGY. Membrane bioreactor (MBR) and reverse osmosis (RO) system for thin-film transistor liquid crystal display TFT-LCD, industrial wastewater recycling. 2004. 12) ONG, S. L.; LIU, Y.; LEE, L. Y.; HU, J. Y.; NG, W. J. A novel high capacity biofilm reactor system for treatment of domestic sewage. 2004. 13) DEL POZO, R.; DIEZ, V. Organic matter removal in combined anaerobicaerobic fixed-film bioreactors. 2003. 14) HSIEH, Yuan-Lynn; TSENG, Szu-Kung; CHANG, Yu-Jie. Nitrogen removal from wastewater using a double-biofilmreactor with a continuous-flow method. 2003. 15) ADHAM, Samer; MERLO, Rion P.; GAGLIARDO, Paul. Membrane bioreactors for water reclamation - Phase II Final Technical report. 2000.

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16) SCHNEIDER, R. P.; TSUTIYA, M. T. Membranas filtrantes para o tratamento de gua, esgoto e gua de reuso. 2001. 17) LE CLECH, P.; JEFFERSON, B.; CHANG, I. S.; JUDD, S. J. Critical flux determination by the flux-step method in a submerged membrane bioreactor. 2003. 18) NUENGJAMNONG, C.; KWEON, J. H.; CHO, J.; POLPRASERT, C.; AHN, K. H. Membrane fouling caused by extracellular polymeric substances during microfiltration process. 2005. 19) JORDO, E. P ; PESSOA, C. A. Tratamento de esgotos domsticos. ABES. 1995. 20) SANTOS, A.S.P. Avaliao de desempenho de um filtro biolgico percolador em diferentes meios de suporte plsticos. UFRJ. 2005. 21) AISSE, M.M.; JRGENSEN, D.; ALM SOBRINHO, P. Avaliao do sistema reator UASB e filtro biolgico para o tratamento de esgoto sanitrio. PUCPR. 2001. 22) ANEXO 11. FILHO, M. M.; Desenvolvimento de sistema de pr-tratamento de osmose reversa, primeiro relatrio. ICB USP. 2006. 23) Membrane Process 24) DOW CHEMICAL; Filmtec Reverse Osmosis Technical Manual. 2005. 25) CHETTIYAPPAN VISVANATHANA, NATAPOL BOONTHANONA, ARUMUGAM SATHASIVANA, VEERIAH JEGATHEESANB; Pretreatment of seawater for biodegradable organic content removal using membrane bioreactor (2004). 26) CHEN, S.; ZHU, SONGMING.; Effects of Air Diffusion Turbulent Flow on Nitrification Rate in Fixed-Film Biofilters: A Comparison Study. Washington State University, Pullman. 2003. 27) CAT PUMPS Model 6020 specifications (www.catpumps.com), 2006 28) MCADAM E., JUDD S.J., GILDEMEISTER R., DREWS A., KRAUME M.; Critical analysis of submerged membrane sequencing batch reactor operating conditions (2005) Water Research, 39 16, Pginas 4011-4019. 29) SOFIA A., NG W.J., ONG S.L.; Engineering design approaches for minimum fouling in submerged MBR. Desalination, 160 1, Pginas 67-74. 2004. 30) HOWELL J.A., CHUA H.C., ARNOT T.C. ;In situ manipulation of critical flux in a submerged membrane bioreactor using variable aeration rates, and effects of membrane history. Journal of Membrane Science, 242 1-2, Pginas 13-19. 2004. 31) NOSENZO G., GUALDI A., MIGNANI M., BELLINI G.; Industrial removal of micropollutants from water of varying quality by FLAMEC flat sheet polymeric membranes cassettes. Desalination, 185 1-3, Pginas 167-183. 2005.

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32) TATSUKI UEDA M. and KENJI HATA; Domestic Wastewater treatmet by a submerged membrane bioreactor with gravitational. 1999. 33) FANE A.G., YEO A., LAW A., PARAMESHWARAN K., WICAKSANA F., CHEN V.; Low pressure membrane processes - Doing more with less energy (2005) Desalination, 185 1-3, Pginas 159-165. 34) CHU H.P., LI X.-Y.; Membrane fouling in a membrane bioreactor (MBR): Sludge cake formation and fouling characteristics (2005) Biotechnology and Bioengineering, 90 3, Pginas 323-331. 35) HOWELL J.A.; Sub-critical flux operation of microfiltration. Journal of Membrane Science, 107 1-2, Pginas 165-171. 1995. 36) CUI Z.F., CHANG S., FANE A.G.; The use of gas bubbling to enhance membrane processes (2003) Journal of Membrane Science, 221 1-2, Pginas 1-35. 37) MATIS K.A., PELEKA E.N., ZAMBOULIS D., ERWE T., MAVROV V. Air sparging during the solid/liquid separation by microfiltration: Application of flotation (2004) Separation and Purification Technology, 40 1, Pginas 1-7. 38) CHANG I.-S., JUDD S.J.; Air sparging of a submerged MBR for municipal wastewater treatment. Process Biochemistry, 37 8, Pginas 915-920. 2002. 39) FIELD R.W., WU D., HOWELL J.A., GUPTA B.B.; Critical flux concept for microfiltration fouling. Journal of Membrane Science, 100 3, Pginas 259-272. 1995. 40) CHURCHOUSE S.; Membrane bioreactors for wastewater treatment - Operating experiences with the Kubota submerged membrane activated sludge process. Membrane Technology, 83, Pginas 5-9. 1997. 41) CHURCHOUSE S., WILDGOOSE D. Membrane bioreactors progress from the laboratory to full-scale use. Membrane Technology, 111, Pginas 4-8. 1999. 42) NUENGJAMNONG C., KWEON J.H., CHO J., POLPRASERT C., AHN K.-H.; Membrane fouling caused by extracellular polymeric substances during microfiltration processes. Desalination, 179 1-3 SPEC. ISS., Pginas 117-124. 2005. 43) LE CLECH P., JEFFERSON B., CHANG I.S., JUDD S.J. Critical flux determination by the flux-step method in a submerged membrane bioreactor. Journal of Membrane Science, 227 1-2, Pginas 81-93. 2003. 44) PROFESSOR A FANE AND SHENG CHANG, Membrane Bioreactors: Design & Operational Options. 2002. 45) AL-AHMAD M., ABDUL ALEEM F.A., MUTIRI A., UBAISY A.Biofouling in RO membrane systems Part 1: Fundamentals and control. Desalination, 132 1-3, Pginas 173-179. 2000.

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ANEXOS 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. Protocolo para a determinao de Carboidratos. Proposta de ensaios para validar o protocolo de determinao de Carboidratos. Protocolo para a determinao de Protenas. Propostas de ensaios para validar o ensaio de determinao de Protenas. Protocolo para a determinao da Srie de Slidos. Propostas de ensaios para validar o ensaio da srie de slidos. Levantamento de mtodos padronizados para a determinao da demanda bioqumica do oxignio (DBO). 8. Testes para verificao de acurcia e preciso do respirmetro Oxitop. 9. Protocolo de uso do respirmetro Oxitop. 10. Manual de uso do Oxitop para o laboratrio de Microbiologia Ambiental ICB/USP. 11. Determinao da acurcia e preciso dos equipamentos na avaliao da eficincia dos pr-tratamentos (pHmetro, Turbidmetro, Condutivmetro e Colormetro).

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Anexo 1 - Protocolo para a determinao de Carboidratos

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Carboidratos (Mtodo Fenol-cido Sulfrico) Carboidratos so determinados pelo mtodo do fenol-cido sulfrico utilizando a glicose como padro de referncia. Dependendo do comprimento de onda utilizado (350 a 600nm) pode-se determinar a quantidade de hexoses, heptoses e demais acares. Referencias Dubois M., Gilles K. A., Hamilton J. K., Rebers P. A., Smith F. (1956)Colorimetric method for determination of sugars and related substances, Anal. Chem., 28: 350-356. Ilkka Miettinen e Gabriela Schaule (2003) - Handbook for analytical methods and operational criteria for biofilm reactors v1.0 Material Espectrofotmetro; Agitador de vrtice; Glicose (padro); Fenol (5 % massa/volume em gua destilada deionizada); cido Sulfrico Concentrado ALTAMENTE CORROSIVO; Banho maria; gua destilada deionizada; Cubetas e acrlico, estireno ou de vidro com 1mL; Tubos de ensaio com tampa. Procedimentos Preparar as solues de calibrao dissolvendo glicose em gua destilada deionizada em concentraes de 25 g/mL, 50g/mL, 100 g/mL, 150 g/mL e 200 g/mL.

Colocar 0,5mL de cada soluo em um tubo de ensaio e tampar. Colocar 0,5mL das amostras (dissolvidas ou no) em tubos de ensaio.

Na capela, rapidamente adicionar 0,5 mL de fenol 5% em cada tubo, agitar no vrtice, adicionar 0,5mL de cido sulfrico concentrado e agitar novamente.

As misturas devem ser incubadas por exatos 10 minutos a 30C em um banho maria. Deixar esfriar por 5 minutos a temperatura ambiente. Medir em triplicatas a absorbncia a 490nm (Hexoses).

Construir a curva padro (absorbncia x concentrao de glicose) e utilizar os valores para inferir as concentraes nas amostras. Caso as leituras das solues extrapolem a curva, criar padres mais ou menos diludos de glicose ou diluir as amostras.

Daniel Brooke Peig (daniel@brookepeig.com) 12/06/2006

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Anexo 2 - Proposta de ensaios para validar o protocolo de determinao de Carboidratos

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Carboidratos 30/05/2006 Daniel Brooke Peig daniel@brookepeig.com Fone: (11) 9427-3974 1. Objetivos Levantar os procedimentos padronizados disponveis para a determinao de carboidratos e polissacardeos em amostras de gua. Analisar a aplicabilidade da metodologia padro para determinao de carboidratos em tortas de filtro e amostras de gua. Verificar a confiabilidade e preciso dos ensaios. 2. Quantificao dos Carboidratos Existem dois principais grupos de mtodos para a determinao de Carboidratos. O primeiro deles a cromatografia e o segundo so as anlises colorimtricas. A cromatografia pode ser utilizada na identificao dos diferentes acares e suas propores j as anlises colorimtricas ficam restritas a alguns tipos de monossacardeos como as hexoses e heptoses. 3. Mtodos para a quantificao de carboidratos O protocolo que pretendemos utilizar o de determinao das hexoses pelo mtodo da reao fenol-cido sulfrico. A curva-padro construda baseando-se em concentraes conhecidas de glicose e a leitura desta proporo dos carboidratos feita a 490nm. possvel realizar leituras em outros comprimentos de ondas e determinar outras fraes de acares. 4. Experimentos Sero realizados experimentos em amostras de EPS e gua para verificar a confiabilidade e repetitibilidade dos ensaios. 4.1 Material necessrio Ver protocolo. 4.2 Metodologia utilizada

Fontes das amostras: EPS extrado de biofilme atravs do protocolo de resinas de troca inica; Solues padronizadas de glicose Nmero de amostras a serem ensaiadas: 5 de cada fonte; Coleta das amostras: no mximo 2 horas antes da realizao dos ensaios; Ensaios a serem realizados: Quantificao de Carboidratos pelo mtodo do fenol-cido sulfrico

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5. Referncia Bibliogrfica Dubois M., Gilles K. A., Hamilton J. K., Rebers P. A., Smith F. (1956)Colorimetric method for determination of sugars and related substances, Anal. Chem., 28: 350-356. Ilkka Miettinen e Gabriela Schaule (2003) - Handbook for analytical methods and operational criteria for biofilm reactors v1.0

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Anexo 3- Protocolo para a determinao de Protenas

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Protenas (Mtodo Bradford) A quantidade total de protenas dissolvidas pode ser determinada utilizando o kit BioRad, baseado no mtodo Bradford. Esta metodologia envolve a adio de um corante cido (Coomassie brilliant blue) soluo de protenas seguido de uma leitura da densidade ptica a 595nm. O resultado comparado com uma curva padro obtida a partir da albumina bovina (BSA). Referncia Protocolo do Bio-Rad Protein Assay Ilkka Miettinen e Gabriela Schaule (2003) - Handbook for analytical methods and operational criteria for biofilm reactors v1.0 Materiais Bio-Rad Protein Assay Dye Reagente Concentrado 1x; Agitador de vrtice; Padro de BSA de concentrao conhecida (ordem de 2mg/mL); Espectrofotmetro (capacidade para leitura no comprimento de 595nm); Hidrxido de Sdio - NaOH 3M; cido Clordrico - HCl 3M; Membrana de filtrao 11 m (Whatman 1); gua destilada deionizada; Tubos de ensaio; Cubetas descartveis de acrlico, estireno ou de vidro com 1mL. Procedimentos Diluir as suspenses de biofilme 2x, 5x e 10x usando gua deionizada.

Adicionar 2,3 mL de 3 M NaOH para cada mL de suspenso diluda. Hidrolisar as misturas por 1 hora a temperatura ambiente. Neutralizar as misturas com 3 N HCl.

Diluir em 5x o Reagente Bio-Rad, previamente agitado, e filtrar atravs da membrana (esta soluo estvel por duas semanas caso seja mantida na temperatura ambiente).

Preparar os padres de BSA com concentraes variando de 0,1 mg/mL; 0,3mg/mL; 0,5 mg/mL; 0,7mg/mL e 0,9 mg/mL.

Pipetar, em duplicata, 100 L de cada soluo padro, de cada suspenso, e de gua destilada deionizada em tubos de ensaio.

Adicionar 5 mL de corante diludo e homogeneze no vrtice.

Manter incubando por 5 min temperatura ambiente. No deixar incubando por mais de uma hora.

Transferir para as cubetas e fazer a leitura da absorbncia a 595 nm.

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Construir a curva padro (absorbncia x concentrao de BSA) e utilizar os valores para inferir as concentraes nas suspenses de protenas. Caso as leituras das solues extrapolem a curva, criar padres mais ou menos diludos de BSA.

* O reagente tende a tingir as cubetas de acrlico e estireno, por isso, s devem ser usadas uma vez. As cubetas de vidro podem ser limpas colocando-se de molho por diversas horas em 0,1 N de HCl e enxaguadas com gua destilada. Certifique-se de que as cubetas de estireno so apropriadas para leituras a 595nm.

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Anexo 4- Propostas de ensaios para validar o ensaio de determinao de Protenas

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Protenas 12/05/2006 Daniel Brooke Peig daniel@brookepeig.com Fone: (11) 9427-3974 1. Objetivos Levantar os procedimentos padronizados disponveis para a determinao de protenas em amostras de gua. Analisar a aplicabilidade da metodologia padro para determinao de protenas em tortas de filtro e amostras de gua. Verificar a confiabilidade e preciso dos ensaios. 2. Quantificao das Protenas As metodologias de quantificao de protenas so divididas em 3 grandes grupos. Os mtodos de absorbncia direta, baseiam-se no princpio da absoro de determinadas faixas do espectro eletromagntico de acordo com o tipo de protena. Sua principal vantagem a velocidade de determinao e o fato de no alterarem a estrutura protica. A desvantagem a grande variabilidade e a quantidade de fatores que podem afetar o resultado como por exemplo a presena de slidos em suspenso ou compostos coloridos. Nos mtodos colorimtricos, um conjunto de reagentes, quando se ligam estrutura protica, alteram suas caractersticas de absoro da luz. Utiliza-se um espectrofotmetro para medir esta alterao e inferir a quantidade de protenas em uma amostra. Possuem uma boa acurcia todavia podem ser influenciados por substncias qumicas como complexantes, detergentes ou ainda o pH. O ltimo tipo de quantificao o gravimtrico. Estima-se a quantidade de protenas atravs da diferena de massa em um recipiente, aps a gua ter sido evaporada em dois estgios, um a 95C e outro a 105C. Este mtodo acuraz apenas quando a soluo composta apenas por protenas e no costuma ser utilizado. 3. Mtodos para a quantificao de protenas Existem diversas fontes na literatura com protocolos para a determinao de protenas. Todas os que utilizam como medida a absoro de um espectro de luz, estimam os valores de concentrao baseando-se em uma curva montada a partir da absorbncia e de concentraes conhecidas. A diferena entre processos adotados se d pela quantidade de reagentes utilizados e o volume de amostras. Para nossas experincias, decidi utilizar os protocolos descritos no Handbook for analytical methods and operational criteria for biofilm reactors (ver referncia), que seguem os mesmos passos do Methods in Enzymology (ver referncia) porm com adaptaes para o uso em Biofilmes e EPS. 64

Os ensaios com comprimentos de onda iguais ou inferiores a 280nm (Ultra Violeta) devem ser feitos utilizando-se cubetas de quartzo uma vez que o vidro e o acrlico funcionam como filtros para este tipo de radiao. 3.1 Anlises de Absorbncia Absorbncia a 280nm e 260nm Protenas em soluo absorvem a luz ultravioleta com pico entre 280 e 200nm. Aminocidos com anis aromticos so a principal razo para a absoro a 280nm. Ligaes peptdicas so responsveis pelo pico a 200nm. Para reduzir a interferncia dos cidos nuclicos (quando existem em pouca quantidade), executa-se tambm uma medio a 260nm e corrige-se o resultado atravs de uma frmula. Faixa: 20 mg a 3 mg Volume: Depende da cubeta de 200 mL a 3mL Acurcia: Ruim Convenincia: Excelente Maiores interferncias: Detergentes, cidos nuclicos, material particulado, lipdios

Absorbncia a 205nm Pode-se utilizar este tipo de medio se houver uma contaminao excessiva por cidos nuclicos pois estes absorvem muito pouca radiao a 205nm. Faixa: De 1 a 100 microgramas Volume: Depende da cubeta Acurcia: Ruim Convenincia: Muito boa Maiores interferncias: Detergentes, cidos nuclicos, material particulado, lipdios

3.2 Anlises Colorimtricas Biuret Em solues alcalinas o on de Cobre (II) liga-se com as protenas que possuam duas ou mais ligaes peptdicas formando um composto prpura com absoro mxima na faixa de 540 a 560nm. A sensibilidade de 1 a 6mg/L. Tris e amnia interferem nas medies. Areao no influenciada pelos aminocidos. A desvantagem a baixa sensibilidade.

Faixa: 1 a 6 mg Volume: 5 ml (depende do tamanho da cubeta) Acurcia: Boa Convenincia: Boa Maiores interferncias: Sais de amnia

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Lowry Modificado O protocolo de Lowry foi desenvolvido em 1951, trata-se de uma complementao do Biuret, inclui compostos para oxidar os aminocidos aromticos, tornando-o mais preciso que seu antecessor. Existem diversas adaptaes para o Lowry original que aumentam sua preciso, eliminam interferncias especficas. A absorbncia medida nas faixas: 750nm para o original e 650 para o Hartree-Lowry (mais preciso). Diversos fatores influenciam nos resultado, dentre eles a presena de Aminocidos, detergentes, lipdios, acares e principalmente o pH que deve estar sempre entre 10 e 10,5. Uma grande desvantagem deste mtodo a instabilidade dos reagentes. Faixa: 2 a 100 microgramas Volume: 1 ml (depende do tamanho da cubeta) Acurcia: Boa Convenincia: Ruim Maiores interferncias: cidos fortes e sulfato de amnia

cido Bicinchoninco - BCA (Smith) Quando uma protena liga-se como cido Bicinchoninco, a cor da amostra passa de verde para prpura com absoro mxima a 562nm. A sensibilidade linear de 0,1 a 2mg/ml de protenas. Esta reao sofre interferncia por acares reduzidos e quelantes de cobre todavia tolera aminocidos, detergentes, lipdios, acares e cidos nuclicos melhor do que o Lowry. Outra vantagem a estabilidade dos reagentes que interfere diretamente na praticidade do ensaio. Existem dois protocolos, um para medir pequenas e outro para maiores concentraes de protenas. o Faixa: 0.2 to 50 microgramas Volume: 1 ml (depende do tamanho da cubeta) Acurcia: Boa Convenincia: Boa Maiores interferncias: cidos fortes, sulfato de amnia e lipdios

Bradford A absorbncia do Coomassie Brillian Blue G-250 (CBB), quando ligado a protenas, mxima na faixa entre 465nm e 595 nm. A reao dependente da composio dos aminocidos uma vez que o CBB liga-se preferencialmente a resduos bsicos e aminocidos aromticos. Os reagentes para este tipo de medio so fornecidos comercialmente em kits (Bio-Rad) ou podem ser produzidos no laboratrio. Este mtodo tem com vantagem sobre os demais a praticidade de realizao e a boa acurcia. Sofre interferncia de compostos qumicos utilizados em processos de cromatografia.

Faixa: 1 a 20 microgramas (micro anlise); 20 a 200 microgramas (macro anlise) Volume: 1 ml (micro); 5.5 ml (macro) Acurcia: Boa Convenincia: Excelente 66

Maiores interferncias: Nenhuma

Amido Black Este mtodo trata da colorao de uma membrana de filtrao, saturada de protenas, com Amido Black seguida de uma lavagem da mesma e leitura da absorbncia a 630nm. A principal vantagem a eliminao de interferentes dissolvidos atravs da filtrao. A desvantagem o excessivo nmero de passos at o resultado final. Faixa: 2 a 24 microgramas Volume: 2 ml Acurcia: Boa Convenincia: Ruim Maiores interferncias: Nenhuma foi reportada Colloidal Gold Faixa: 20 a 640 nanogramas Volume: 1 ml (depende do tamanho da cubeta) Acurcia: Ruim Convenincia: Ruim Maiores interferncias: Bases Fortes

4. Experimentos Sero realizados experimentos para validar o mtodo de Bradford comparando seus resultados com o Biuret, antes utilizado no laboratrio. A extrao do EPS ser realizada conforme o protocolo em anexo. 4.1 Material necessrio Ver protocolos.

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Anexo 5- Protocolo para a determinao da Srie de Slidos

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Slidos em Suspenso, Dissolvidos, Fixos e Volteis (Standard Methods) A classificao dos slidos feita segundo os processos pelos quais a amostra foi submetida. As duas categorias principais, dissolvidos e em suspenso, so de especial interesse para a avaliao de sistemas de membranas, pois so definidas atravs do resultado de uma filtrao. As subdivises entre fixos e volteis so feitas de acordo com o processo trmico a que a amostra foi submetida. Os valores determinados atravs da secagem em estufa so denominados fixos e aqueles resultantes da ignio em forno mufla recebem o nome de volteis. importante ressaltar que a frao de volteis no permite distinguir com preciso a quantidade de matria orgnica, pois, no processo de ignio, alguns minerais tambm so volatilizados. SM a sigla para Standard Methods, o nmero do lado do procedimento indica o cdigo do protocolo padronizado. Referncias Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater. (1998) , 20th ed. APHA.Washington DC. Manual de Procedimentos e Tcnicas Laboratoriais voltado para anlise de guas e esgotos sanitrio e industrial. (2004). Laboratrio de Saneamento Prof. Lucas Nogueira Garcez, Escola Politcnica da USP Material Bomba de Vcuo; Balana analtica com preciso de 0,0001g; Dessecador; Estufa com temperaturas de operao de 100C a 180C ( 2C); Forno mufla para a operao a 550C (Para determinao de fixos e volteis) ; Pina de Mohr; Pina simples e esptula; Cpsula de porcelana de 80mL de capacidade; Cpsula de porcelana de 130mL de capacidade; Kitassato/Sistema de filtrao p/ membranas com 47mm de dimetro; Membrana de filtrao de slica 1,2m, 47mm de dimetro*; Pipeta graduada e volumtrica; Becker; Agitador magntico; gua destilada; * Whatman 934AH ou Millipore AP-40 ou ED-Scientific Grade 161 ou Environmental Express Pro Weigh Procedimento (SM 2540 B) Slidos Totais Calcinar a cpsula de porcelana (130 mL), na mufla a 550 C 50 C por 1 hora; Deixar resfriar em dessecador; Tarar, anotando o peso P0; Retirar uma alquota (anotar o volume) de amostra e passar para um becker de 600mL e manter sob agitao; 69

Retirar, com balo volumtrico ou pipeta volumtrica, um volume pr-determinado de amostra; Transferir para a cpsula e transportar, manuseando com luvas, at a estufa; Deixar em estufa 103-105 C at peso constante (24 horas); Retirar a cpsula da estufa, com auxlio de uma pina de Mohr, e deixar esfriar em dessecador; Pesar e anotar o peso P1.

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Procedimento (SM 2540 C) Slidos em Dissolvidos Totais Calcinar a cpsula de porcelana (130 mL), na mufla a 550 C 50 C por 1 hora;

Deixar resfriar em dessecador; Tarar, anotando o peso P0;

Retirar uma alquota de amostra (anotar o volume) e passar para um becker de 600mL. Manter sob agitao;

Montar o sistema de filtrao; Acomodar a membrana utilizando uma pina (frgil, cuidado para no rompFiltrar um volume pr-determinado de amostra;

la);

Retirar do filtrado, com auxlio de um balo volumtrico ou pipeta volumtrica, um volume pr-determinado de amostra; Transferir para a cpsula previamente tarada; Deixar em estufa 180 2 C at peso constante (24 horas);

Retirar a cpsula da estufa, com auxlio de pina de Mohr, e deixar esfriar em dessecador;

Pesar e anotar o peso P1.

Procedimento (SM 2540 D) Slidos em Suspenso Totais Calcinar a membrana de filtrao umedecida dentro de uma cpsula de porcelana de 80mL, na mufla a 550 C 50 C por 15 minutos;

Deixar resfriar em dessecador; Tarar, anotando o peso P0;

Retirar uma alquota de amostra (anotar o volume) e passar para um becker de 600mL e manter sob agitao; Retirar, com balo volumtrico ou pipeta volumtrica, um volume prdeterminado de amostra;

Acondicionar a membrana tarada num sistema de filtrao (usar pinas para manusear a membrana);

Passar a amostra pelo sistema de filtrao e acionar o vcuo; Aps o trmino, lavar, com gua destilada, as paredes do copo de filtrao;

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Retirar a membrana, com uma pina, e acomod-la na cpsula; Deixar em estufa 103-105 C at peso constante (aproximadamente 2h); Retirar a cpsula da estufa e deixar esfriar em dessecador; Pesar e anotar o peso P1.

Procedimento (SM 2540 E) Slidos Fixos e Volteis Acondicionar os resduos dos mtodos A, B e C (cpsulas e membranas) na mufla a 550C; Manter a essa temperatura por aproximadamente 20 minutos; Retirar, com auxlio de uma pina de Mohr, e deixar esfriar em dessecador; Pesar e anotar o P2.

Clculos Slidos Totais :

Slidos Totais Fixos:

Slidos Totais Volteis:

Slidos em Suspenso Totais:

Slidos em Suspenso Fixos:

Slidos em Suspenso Volteis:

Slidos Dissolvidos Totais:

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Slidos Dissolvidos Fixos:

Slidos Dissolvidos Volteis:

Daniel Brooke Peig (daniel@brookepeig.com) 12/06/2006

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Anexo 6- Propostas de ensaios para validar o ensaio da srie de slidos

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Slidos em guas 12/06/2006 Daniel Brooke Peig daniel@brookepeig.com Fone: (11) 9427-3974 1. Objetivos Levantar os procedimentos padronizados disponveis para a determinao de resduos slidos em suspenso na gua. Analisar a aplicabilidade da metodologia padro para determinao de slidos em sistemas ultrafiltrao em membranas, reatores de filme fixo e filtros em espiral. Verificar a confiabilidade e preciso dos ensaios. 2. Slidos em guas Em processos de tratamento e classificao de guas, slidos correspondem a toda matria que permanece como resduo, aps evaporao, secagem ou calcinao da amostra a uma temperatura pr-estabelecida durante um tempo fixado (Standard Methods) . A classificao dos slidos feita segundo os processos pelos quais a amostra foi submetida. As duas categorias principais, dissolvidos e em suspenso, so de especial interesse para a avaliao de sistemas de membranas, pois so definidas atravs do resultado de uma filtrao. As subdivises entre fixos e volteis so feitas de acordo com o processo trmico a que a amostra foi submetida. Os valores determinados atravs da secagem em estufa so denominados fixos e aqueles resultantes da ignio em forno mufla recebem o nome de volteis. importante ressaltar que a frao de volteis no permite distinguir com preciso a quantidade de matria orgnica, pois, no processo de ignio, alguns minerais tambm so volatilizados. 3. Procedimentos para a quantificao dos resduos slidos Os procedimentos para a determinao a determinao de slidos so baseados em mtodos gravimtricos. Atravs da utilizao de balanas analticas, compara-se a massa de um filtro saturado com a massa do mesmo antes do processo antes da passagem da gua ou ainda, no caso de slidos dissolvidos, do recipiente aonde a gua foi evaporada. A referncia para metodologia dos testes de qualidade de gua no Brasil a coletnea norte-americana Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater, publicada pela American Public Health Association, American Water Works Association e o Water Environment Federation. As informaes deste texto foram retiradas da 20 edio de 1998. Existem 6 tipos de metodologias padronizadas diferentes para a avaliao e quantificao dos slidos em guas, cada uma identificada por um cdigo alfanumrico. Os mtodos de B at F, de acordo com a referncia so adequados para 75

medies em guas superficiais e salinas bem como esgotos domsticos e industriais at concentraes de 20.000mg/L. 2540 B Slidos Totais resultantes da evaporao a 103-105C O princpio a evaporao de uma amostra bem misturada, em uma estufa com temperaturas de 103C at 105C at que o seu peso esteja constante. O resultado da comparao da massa cpsula limpa e aps a evaporao representa os slidos totais. As interferncias se do atravs de partculas grandes ou higroscpicas, que retm muita gua, em virtude disso, leos, gorduras flutuantes e partculas maiores devem ser removidos antes do ensaio. A referncia aponta como desvio padro de 41 medidas, o valor de 6mg/L.
2540 C Slidos Totais Dissolvidos a 180C Uma amostra bem misturada filtrada atravs de uma membrana de fibra de vidro (1,2 micrmetros) padronizada e, o filtrado, evaporado a 180C em estufa at adquirir o peso constante. A diferena de massa na cpsula representa a quantidade de slidos dissolvidos. Os valores obtidos atravs deste mtodo podem no concordar com os resultados obtidos atravs de anlises qumicas da amostra, todavia existem mtodos para efetuar a correlao. Em virtude da reteno de gua nos resduos, as amostras no devem ter mais de 200mg/L de slidos, o tempo de filtrao tambm no deve ultrapassar 10 minutos (a colmatao do filtro pode passar a reter slidos menores invalidando os resultados).

A referncia aponta como desvio padro de 77 medidas, o valor de 21,20mg/L em amostras de conhecidas 293mg/L de concentrao. O material retido no filtro e o filtrado seco, podem ser utilizados em outras determinaes, como para slidos em suspenso totais (2540 D) ou na determinao dos fixos e volteis (2540 E).
2540 D Slidos em Suspenso Totais a 103-105C Uma amostra bem misturada filtrada atravs de uma membrana de fibra de vidro (1,2 micrmetros) padronizada e o resduo retido no filtro seco em estufa a temperaturas de 103C a 105C. A diferena de massa na cpsula representa a quantidade de slidos em suspenso totais. Uma estimativa do valor dos slidos em suspenso totais pode ser obtida atravs da diferena entre os slidos totais e os slidos dissolvidos totais. Assim como na determinao das fraes anteriores, partculas maiores e flutuantes devem ser removidas antes da anlise. recomendado no filtrar amostras com mais de 200mg de slidos ou 1L de volume e evitar tempos de filtrao superiores a 10 minutos.

O desvio padro, de acordo com a referncia foi de 5,2mg/L em 15mg/L conhecidos (33%), 24mg/L em 242mg/L (10%) e 13mg/L em 1707mg/L (0,76%) conhecidos em quatro baterias de 10 amostras. 2540 E Slidos Fixos e Volteis atravs da ignio a 550C Os resduos slidos dos mtodos B, C e D sofrem ignio em forno mufla at adquirirem a massa constante a 550C. Os slidos restantes representam os totais fixos, dissolvidos fixos e em suspenso fixos, a massa perdida representa os slidos volteis para cada uma das fraes. Valores negativos podem ser obtidos nos slidos volteis em

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virtude da perda de matria voltil durante a secagem. A presena de baixas concentraes de slidos volteis em detrimento de grandes quantidades de slidos fixos pode levar a erros considerveis. Nestes casos recomendado mensurar a matria suspensa atravs de outros mtodos como por exemplo o TOC (5310). O desvio padro foi de 11mg/L, de acordo com a referncia, para amostras com 170mg/L de totais volteis feitos em 3 laboratrios diferentes com 4 amostras e 10 duplicatas.
2540 F Slidos Sedimentveis Este mtodo utiliza o mtodo volumtrico ou gravimtrico para determinar a quantidade de slidos sedimentveis em guas salinas, superficiais e em esgotos. O mtodo volumtrico tem capacidade de deteco de 0,1 a 1,0mL/L e baseia-se na leitura do volume em cone graduado, aps 1h de decantao. O Mtodo gravimtrico, determina os sedimentveis atravs da diferena entre o valor dos slidos em suspenso (em uma amostra misturada) e os slidos em suspenso da mesma amostra, aps a decantao por 1h.

No existem informaes na referncia sobre a preciso do mtodo. 2540 G Slidos Totais, Fixos e Volteis em amostras Slidas e Semi Slidas Aplica-se na determinao do total de slidos e suas fraes em amostras semi-slidas ou slidas como sedimentos de rios, lodos desidratados e tortas de filtros. A metodologia a mesma dos procedimentos anteriores, dispensando os misturadores e as pipetas e incrementando-se o tempo de secagem e ignio. Durante a secagem, resultados negativos podem aparecer em decorrncia do carbonato de amnia e matria orgnica. As medies tambm devem ser efetuadas rapidamente, pois a evaporao maior neste tipo de amostras. 4. Experimentos O objetivo dos experimentos, determinar se os ensaios da srie de slidos aplicam-se s guas que desejamos tratar. Utilizando amostras de gua bruta, do filtrado do sistema em espirais e do filtrado das membranas submersas de ultrafiltrao, pretendo encontrar uma estimativa preliminar da quantidade de slidos e confrontar a varincia dos ensaios, com os valores obtidos na referncia. 4.1 Material necessrio Bomba de Vcuo; Balana analtica com preciso de 0,0001g; Dessecador; Estufa com temperaturas de operao de 100C a 180C ( 2C); Forno mufla para a operao a 550C (Para determinao de fixos e volteis) ; Pina de Mohr; Pina simples e esptula; Cpsula de porcelana de 80mL de capacidade; 77

Cpsula de porcelana de 130mL de capacidade; Kitassato/Sistema de filtrao p/ membranas com 47mm de dimetro; Membrana de filtrao de slica 1,2m, 47mm de dimetro*; Pipeta graduada e volumtrica; Becker; Agitador magntico; gua destilada;

* Whatman 934AH ou Millipore AP-40 ou ED-Scientific Grade 161 ou Environmental Express Pro Weigh 4.2 Metodologia adotada - Fonte das amostras gua bruta, coletada na Raia Olmpica da Cidade Universitria; - Utilizao de triplicatas. - Coleta das amostras: no mximo 2 horas antes da realizao dos ensaios; - Ensaios a serem realizados com filtro de 1,2m: Slidos Totais a 105C (Standart Methods 2540B) Slidos Totais Dissolvidos a 180C (Standart Methods 2540C) Slidos Totais Suspensos a 103-105C (Standart Methods 2540D) Slidos Fixos e Volteis (Standart Methods 2540E) - O volume das amostras foi indicado na tabela abaixo e os equipamentos sofreram as seguintes modificaes em virtude da indisponibilidade no laboratrio: - cpsulas de 130mL e 80mL substitudas por cpsulas de 20mL - triplicatas em slidos totais reduzido para duplicatas em funo da ausncia de cpsulas

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4.3 Resultados
Ensaio - Amostra Volume (mL) P0 (mg) P1(mg) P2(mg) Totais (mg/L) Volteis (mg/L) Fixos (mg/L) Slidos Totais - A 20 141042,2 141035,7 141022,5 Erro Erro Erro Slidos Totais - B 10 13229,4 13229,5 13227,6 Erro Erro Erro Slidos em Susp. - A 400 13518,4 13526,9 13519,8 21,25 17,8 3,5 Slidos em Susp. - B 400 13190,2 13197,5 13190,5 18,25 17,5 0,7 Slidos em Susp. - C 390 13199,2 13206,5 13200,6 18,72 15,1 3,6 Slidos Dissolvidos - A 20 136383,5 136374,2 136364,8 Erro Erro Erro Slidos Dissolvidos - B 20 139247,5 139240,1 139225,3 Erro Erro Erro Slidos Dissolvidos - C 20 134552,2 134543,8 134534,8 Erro Erro Erro Mdia 19,41 16,79 2,61 Desvio Padro 1,61 1,45 1,61

Os resultados da amostragem, indicados na tabela acima forneceram informaes confiveis apenas para a frao de slidos em suspenso, dentro dos valores previstos pelo Standard Methods. Os demais resultados, indicados na tabela como erro foram decorrentes do insignificante volume de gua coletado nas amostras que levou o teor de slidos a valores inferiores preciso da balana. O ideal seria fazer a evaporao com no mnimo 100mL, 5 vezes mais que o utilizado nesta experincia. 5. Referncia Bibliogrfica Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater. (1998) , 20th edn. APHA.Washington DC. Manual de Procedimentos e Tcnicas Laboratoriais voltado para anlise de guas e esgotos sanitrio e industrial. (2004). Laboratrio de Saneamento Prof. Lucas Nogueira Garcez, Escola Politcnica da USP

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Anexo 7- Levantamento de mtodos padronizados para a determinao da demanda bioqumica do oxignio (DBO)

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DEMANDA BIOQUMICA DE OXIGNIO (DBO) Bruna de Sandre Oristanio (bruky82@yahoo.com) Maio / 2006

1. Objetivos Levantar os procedimentos padronizados disponveis para a determinao da demanda bioqumica de oxignio (DBO). Analisar a aplicabilidade de cada uma das metodologias de determinao da DBO. Verificar a confiabilidade e preciso de cada um dos mtodos de ensaios. Definir a melhor metodologia para medio de DBO rotineira em sistemas ultrafiltrao em membranas, biorreatores de filme fixo e filtros em espiral.

2. Introduo A Demanda Bioqumica de Oxignio (DBO) um teste emprico no qual procedimentos padronizados de laboratrio so usados para determinar a quantidade de oxignio relativa em guas naturais, efluentes domsticos e industriais. O teste de DBO empregado para determinar os nveis de poluio, para avaliar cargas poluidoras e para avaliar a eficincia de um determinado sistema de tratamento. Pode-se relacionar os valores obtidos no teste de DBO com os obtidos nos testes de DQO.

3. Mtodos de determinao da DBO Os mtodos disponveis para se medir a DBO, citados neste relatrio, so: a DBO5, 20 de acordo com o Standard Methods (SM); o Mtodo Respiromtrico com a utilizao do equipamento Oxitop Control System e a inferncia dos valores da DBO partir da correlao com as medidas de DQO (demanda qumica de oxignio). 3.1. Mtodo de determinao da DBO - Teste de DBO5, 20 (5dias, 20C) Protocolo SM 5210 B Princpio do mtodo: grande parte dos organismos vivos dependem, direta ou indiretamente, de oxignio para manter seus processos metablicos que produzem energia necessria para o seu crescimento e reproduo. Chama-se de organismos aerbios queles que dependem exclusivamente do oxignio da forma livre para mineralizao da matria orgnica, resultando como produtos finais substncias inorgnicas mais simples tais como o CO2, NH3, H2O etc. A matria orgnica presente nas guas naturais e nos efluentes domsticos e industriais tende a ser mineralizada naturalmente pelos microrganismos aerbios existentes,

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consumindo oxignio dissolvido no meio aquoso. O teste de DBO tem por objetivo, determinar essa quantidade de oxignio consumido, e assim, relacionar com a quantidade de matria orgnica biodegradvel presente na amostra. O mtodo usualmente empregado para a determinao da DBO o da diluio, incubao por um perodo de 5 dias a 20oC, com a determinao dos nveis iniciais e finais de oxignio atravs do mtodo eletromtrico com oxmetro, da Azida modificado. Para garantir uma melhor eficincia no metabolismo dos microrganismos envolvidos no teste, adicionado ao frasco de incubao, solues nutritivas e uma soluo tampo, a fim de garantir um pH neutro de 6,5 a 7,5 (chamada de gua de Diluio). importante frisar que, durante os 5 dias do teste, as amostras ficaro num ambiente desprovido de luz, fim de evitar o aparecimento de seres clorofilados fotossintticos.

3.1.1. Interferncias no Mtodo - Teste de DBO5, 20 (5dias, 20C) O mtodo de determinao da DBO5, 20 padro do Standard Methods, pode sofrer interferncias em sua acurcia e preciso devido : diferenas entre material orgnico particulado e solvel, slidos dissolvidos e sedimentveis, oxidao de compostos de ferro e sulfato, mistura incompleta da amostra e oxidao de compostos nitrogenados. As interferncias deste mtodo ainda no possuem ajustes para o correto clculo da DBO, exceo da oxidao dos compostos nitrogenados, que tambm gera uma demanda de oxignio. Para esta interferncia, utiliza-se um inibidor de nitrificao padro (frmula 2533/HACH), recomendado pelo Standard Methods, de forma a se obter, atravs destes testes de DBO, apenas a demanda de oxignio associada matria orgnica, chamada de DBO carboncea.

3.2. Mtodo Respiromtrico com a utilizao do Oxitop Control System O mtodo respiromtrico trata-se de uma medida direta do oxignio consumido por microorganismos em um ambiente enriquecido com oxignio ou ar contido em um recipiente lacrado, sob condies constantes de temperatura e agitao. Os mtodos respiromtricos fazem uma medida razoavelmente contnua ao longo do tempo. Esses mtodos so utilizados para se analisar: biodegradao especfica de algumas substncias qumicas; tratabilidade de efluentes industriais orgnicos; efeito de componentes txicos no consumo de oxignio em um efluente ou produto qumico orgnico; a concentrao em que um dado componente inibe a degradao biolgica; demanda necessria de oxignio para oxidao completa de matria orgnica; necessidade de implantao de sementes em outras medidas de demanda de oxignio, como a DBO com diluio e estabilizao de lodos. Os resultados de testes respiromtricos so tipicamente utilizados por comparao, ou entre as demandas de oxignio de duas amostras, ou entre a amostra e um branco/ controle. Devido s diferenas inerentes s culturas das sementes, instrumentao e condies de testes, o Standard Methods no define um procedimento nico que seja vlido para todos os mtodos respiromtricos. A seguir esto as definies para o

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mtodo respiromtrico utilizando o Oxitop Control System. 3.2.1. Tipos de Respirmetros Volumtricos: medem a variao no volume da amostra, mantendo-a sob presso constante Eletrolticos: monitoram a quantidade de oxignio produzido pela eletrlise da gua, necessria para manter constante a presso dentro do recipiente da amostragem Entrada-direta: fornecem oxignio para a amostra, a cada minuto, partir de uma fonte de oxignio puro, de forma a manter a diferena de presso. Manomtricos: relacionam o consumo de oxignio em uma amostra variao de presso causada no recipiente de amostragem, mantido seu volume constante. Este o tipo de medio realizado pelo Oxitop Control System. 3.2.2. Interferncias no Mtodo Respiromtrico Oxitop Control System O mtodo de determinao da DBO partir de um respirmetro manomtrico pode sofrer interferncias em sua acurcia e preciso devido : evoluo de outros gases diferentes do CO2, adsoro incompleta do CO2, variao de temperatura ou condies de mistura, e flutuao da presso baromtrica. Por se tratar de um mtodo manomtrico, o sistema se utiliza de alguns controles de forma minimizar as interferncias citadas anteriormente, que levariam alteraes na medio da presso no interior do frasco de amostragem. 3.3. Demanda Qumica de Oxignio (DQO) - Protocolo SM 5220 Demanda Qumica de Oxignio (DQO) definida como a quantidade de oxignio necessria para oxidar quimicamente a matria orgnica e inorgnica oxidvel de uma determinada gua. O Dicromato reduzido a on Cromo trivalente (Cr+3) mediante reao com a matria oxidvel presente na amostra, em presena de cido Sulfrico (H2SO4). O parmetro DQO largamente empregado na medida de poluentes presentes em guas e esgotos; seu valor pode ser correlacionado com a DBO. Princpio do mtodo: a matria orgnica/inorgnica oxidvel oxidada em meio cido (H2SO4) por um forte agente oxidante (K2Cr2O7) em excesso conhecido num condensador de refluxo do tipo Friedrichs. Toda reao catalisada por Sulfato de Prata (Ag2SO4) e calor. Aps a digesto o excesso de Dicromato titulado contra uma soluo de Sulfato Ferroso Amoniacal SFA (Fe(SO4)2(NH4)2), e assim determina-se a quantidade de oxidante consumida na reao; tal quantidade ser expressa em termos equivalentes de oxignio. O tempo ideal para a digesto de 2 horas. necessria a adio de Sulfato de Mercrio (HgSO4), para que assim precipite o Cloreto de Mercrio (HgCl2) e no haja interferncia no consumo de dicromato. 4. Equipamentos e vidrarias Oxitop OC 110 Controller (controle remoto)

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 Oxitop-C Measuring Heads (cabeas de medio) Oxitop IS12 Stirrer (misturador com capacidade para 12 frascos) Incubadora (termo-regulvel) ou sala climatizada; Oxmetro; Frascos de DBO; Pipetas volumtricas; Bales volumtricos; Bckeres; Erlenmeyer; Bureta de 50mL; Garrafo para gua de diluio provido de sistema de sifo; Chapa de aquecimento contendo condensadores Friedrichs; Balo de fundo chato de 500mL; Prolas de vidro para controlar ebulio; Dispenser; 5. Reagentes As quantidades indicadas so apenas um parmetro indicador para a preparao de 1 litro de soluo ou a quantidade suficiente para uma calibrao de oxmetro ou para uma amostragem com 12 frascos de DBO. Verificar a necessidade real de uso de cada reagente. Soluo Tampo de Fosfatos: 207g de fosfato bibsico de sdio heptahidratado (Na2HPO4.7H2O); Soluo de Sulfato de Magnsio (MgSO4): 101g de sulfato de magnsio heptahidratado (MgSO4.H2O) Soluo de Cloreto de Clcio (CaCl2): 27,7g de cloreto de clcio anidro (CaCl2) Soluo de Cloreto Frrico (FeCl3): 4,84g de cloreto frrico hexahidratado (FeCl3.H2O) Sulfito de sdio; 1,575g de (Na2SO3) Sulfato de Mercrio Soluo Padro de Hidrogenoftalato de Potssio (HFP): 425mg de HFP

Soluo Padro de cido glutmico/glucose 150mg de glucose e 150mg de cido glutmico,

Soluo de Trao (trace element solution): 40g de sulfato manganoso monohidratado (MnSO4.H2O) 43mg de (ZnSO4.7H2O) 35mg (NH4)6 Mo7O24 84

100mg Fe-chelate (FeCl3-EDTA) Soluo de cloreto de Amnia (NH4Cl): 38,2g de (NH4Cl) Soluo de Hidrxido de Potssio (KOH) 336g de KOH cido Sulfrico (H2SO4) 28ml de cido sulfrico concentrado (H2SO4) Cloreto de cobalto (uma ponta de esptula) Soluo de Alcali-Iodeto-Azida (AIA): 500g de hidrxido de Sdio (NaOH); 135g de iodeto de sdio (NaI); 10g de Azida Sdica (NaN3) Soluo Padro de Tiossulfato de Sdio (Na2S2O3.5H2O) 0,025M 6,205g de tiossulfato de sdio pentahidratado, juntamente com 1,5mL de Hidrxido de Sdio 6N (ou 0,4g de NaOH), Soluo indicadora de Amido 5g de amido 1,25g de cido saliclico 4g de cloreto de zinco Soluo de Hidrxido de Sdio (NaOH) 40g de (NaOH) Hidrxido de Sdio (NaOH) Pastilhas de hidrxido de sdio Inibidor de Nitrificao (2-cloro-6-(triclorometil)piridina), frmula 2533/HACH cido Sulfrico com Sulfato de Prata: 10g de Sulfato de Prata em 1L de cido Sulfrico concentrado Soluo de Dicromato de Potssio 0,25N: 12,259g de Dicromato de Potssio p.a. Soluo de Sulfato Ferroso Amoniacal (SFA) 0,25N: 98g de SFA 20mL de cido Sulfrico concentrado Soluo Indicadora de Ferroin: 1,485g de 1,10 fenantrolina monohidratada 695mg de Sulfato Ferrosos heptahidratado

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6. Amostras ensaiadas Para os testes sero utilizadas: gua bruta da Raia Olmpica da USP, sem resfriamento gua destilada (branco) gua destilada com inculo Esgoto ou inculo em meio de cultura (TSB) As amostras devero ser coletadas no mximo 2h antes do incio dos ensaios. Sero feitas diluies de cada fonte amostrada, de forma a se obter no mnimo 2 de 5 frascos de DBO atendendo aos padres de: OD residual mnimo=1mg/l e OD consumido mnimo=2mg/l aps 5 dias de incubao.

7. Metodologia adotada Os seguintes testes sero realizados:

Teste de integridade do Oxitop: uma rodada de experimento (DBO5) com os 4 tipos de gua, de forma a se analisar o funcionamento geral do equipamento (testes de acordo com manual do fabricante) 3 amostras da raia, 2 brancos, 2 TSB e 2 amostras de gua com inculo Teste de preciso do Oxitop: uma rodada de experimento (DBO5) para averiguao da preciso de cada cabea de medio (testes de acordo com manual do fabricante) 9 amostras com a Soluo Padro de cido glutmico/glucose Teste padro para DBO5 (teste 5210 do Standard Methods) 3 amostras para cada tipo de fonte Teste padro para DQO (teste 5220 do Standard Methods) 3 amostras para cada tipo de fonte Comparao dos resultados para uma mesma amostra nos 3 tipos de ensaios.

8. Referncia Bibliogrfica
Standart Methods for the Examination of Water and Wastewater (1998), 20th edition APHA.Washington DC. Manual de Procedimentos e Tcnicas Laboratoriais voltado para anlise de guas e esgotos sanitrio e industrial. (2004). Laboratrio de Saneamento Prof. Lucas Nogueira Garcez, Escola Politcnica da USP

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Anexo 8- Testes para verificao de acurcia e preciso do respirmetro Oxitop

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TESTES PARA VERIFICAO DE ACURCIA E PRECISO DO RESPIRMETRO OXITOP Bruna de Sandre Oristanio (oristaniobruna@yahoo.com) Agosto / 2006 1. Objetivos Testar o repirmetro Oxitop Control System de forma a definir: o Protocolo para a utilizao deste equipamento nas condies do laboratrio de Microbiologia Ambiental do ICB-USP e nos tipos de amostras ensaiadas o Interferncias e erros influenciadores nos resultados deste equipamento o Faixa de preciso de leitura e resultados do equipamento

2. Condies de ensaio Todos os ensaios foram realizados de acordo com as instrues do manual do fabricante. Adaptaes e melhorias foram feitas, de forma a adequar o uso deste equipamento para as condies do laboratrio e tipos de amostras analisadas.

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Ensaio 1- Variao de concentraes 2- Variao de concentraes 3- Variaes do Equipamento 4- Variaes do Equipamento 5- Variao de volumes 6 Variao de clulas 7 Variao de clulas

Tipos de amostras

Volumes amostrados

Objetivo

Resultados

4 diferentes 12 iguais (raia, branco, (Vt=300ml, inculo e TSB) Vl=200ml) 4 diferentes 12 iguais (raia, branco, (Vt=300ml, inculo e TSB) Vl=100ml) 2 iguais (soluo sem nutrientes) 12 iguais (soluo sem nutrientes) 12 iguais (gua da raia) 2 iguais (Vt=300ml, Vl=290ml) 12 iguais (Vt=300ml, Vl=100ml) 3 diferentes (Vl=100, 300 e 500ml)

Valores mximos Temperatura no controlada e mnimos de interferiu nos resultados leitura Valores mximos Temperatura no controlada e mnimos de interferiu nos resultados leitura Acurcia das cabeas de medio Acurcia das cabeas de medio Sensibilidade do fundo de escala Tempo mnimo de ensaio Tempo mnimo de ensaio Tempo de amostragem de apenas 2h foi insuficiente Controle de temperatura ineficaz interferiu nos resultados Quanto menor o volume maior a sensibilidade de deteco do equipamento Fase lag ainda muito extensa, resultados confiveis Fase lag ainda muito extensa, resultados confiveis Fase lag ainda muito extensa, resultados confiveis

12 iguais (TSB) 12 iguais (Vt=300ml, Vl=100ml) 12 iguais (soluo PO4 com 1g/l de TSBTSB) 12 iguais (soluo PO4 com 1g/l de TSB) 12 iguais (Vt=300ml, Vl=220ml) 12 iguais (Vt=300ml, Vl=220ml)

8 Variao de clulas

Tempo mnimo de ensaio

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3. Resultados dos ensaios Ensaio 1: Variao de concentraes sem controle de temperatura

DBO: Mtodo Respiromtrico com Oxitop Control System - Ensaio 1
40 20 0 DBO (mg/l) -20 -40 -60 -80 -100 -120 0 0,29 0,58 0,88 1,17 1,46 1,75 2,04 2,33 2,63 2,92 3,21 3,5 3,79 4,08 4,38 4,67 4,96

Raia1 Raia 2 Raia 3 Branco 1 Branco 2 TSB1 Inculo 2

Tem po (dias)

Comentrios: - A curva no padronizada foi causada pelo lacre plstico do frasco Schott. Esse lacre no ser utilizado em nenhum frasco nos prximos experimentos - A variao de temperatura, de acordo com os horrios do dia, influenciaram no teste. Deve ser previsto um controle de temperatura para os prximos testes. Ensaio 2: Variao de concentraes sem controle de temperatura
DBO: Mtodo Respiromtrico com Oxitop Control System - Ensaio 2 Raia 2
500 400 DBO (mg/l) 300 200 100 0 -100 -200 0 0,54 1,08 1,63 2,17 2,71 3,25 3,79 4,33 4,88 Tem po (dias) Raia 3 Raia 1 TSB1 Branco 2 Inoculo 1 Branco 1 Inoculo 2 TSB2

Comentrios: - O ensaio foi realizado em sala com temperatura controlada por ar condicionado, mas no houve controle eficaz de temperatura, o que interferiu nos resultados - Apenas 2 frascos com maior concentrao de clulas apresentaram resultados relevantes, os demais frascos tinham baixos valores de nutrientes e clulas, impossibilitando leituras relevantes no equipamento.

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DBO (mg/l) Ensaio 3: Variaes do Equipamento amostragem em 2h Ensaio 3 - 2h, com gua destilada 0,4 0,2 0 -0,2 0 10,721,3 32 42,753,3 64 74,785,3 96 107 117 -0,4 -0,6 -0,8 Tempo (minutos) 1 2

Comentrios: - Tentou-se realizar um teste com durao menos extensa, porm o tempo de amostragem de apenas 2h foi insuficiente para as condies ensaiadas, onde a variao de temperatura teve maior interferncia Ensaio 4: Variaes do Equipamento soluo sem nutrientes
Ensaio 4 - Variaes do equipamento
80 60 DBO (mg/l) 40 20 0
Dia 00 Dia 00 Dia 01 Dia 01 Dia 01 Dia 01 Dia 02 Dia 02 Dia 02 Dia 03 Dia 03 Dia 03 Dia 03 Dia 04 Dia 04 Dia 04 Dia 04 Dia 05 Dia 05

3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 Tempo (dias) 13 14

-20 -40 -60

Comentrios: - Novamente, outra sala com controle de temperatura por ar condicionado foi insuficiente para a estabilizao das leituras. Os prximos testes devero contar com controle mais eficaz de temperatura.

91

Ensaio 5: Variao de volumes

Ensaio 5 - Variao de Volumes
20 15 DBO (mg/l) 10 5
Dia 00 - 16:58 Dia 00 - 20:58 Dia 01 - 00:58 Dia 01 - 04:58 Dia 01 - 08:58 Dia 01 - 12:58 Dia 01 - 16:58 Dia 01 - 20:58 Dia 02 - 00:58 Dia 02 - 04:58 Dia 02 - 08:58 Dia 02 - 12:58 Dia 02 - 16:58 Dia 02 - 20:58 Dia 03 - 00:58 Dia 03 - 04:58 Dia 03 - 08:58 Dia 03 - 12:58

128 128 128 128 310 310 310 310 622 622 622 622

0 -5

Tempo (dias)

Comentrios: - Observa-se que quanto menor o volume ensaiado, maior a sensibilidade de deteco do equipamento - Os prximos testes sero realizados sempre em frascos de 300ml Ensaio 6: Variao da concentrao de clulas em TSB
DBO para diferentes D.O. (580nm) - pseudomonas
600 500 400

DBO (mg/l)

2,0E+07

300 200 100 0 -100

0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25

2,85E+07 2,85E+07 2,85E+07 6,67E+07

Tempo (h)

Comentrios: - Considerou-se proporcional a relao entre o aumento da turvao nas amostras (medida por densidade tica, DO) e o aumento do crescimento microbiano nas amostras. - O controle de temperatura feito em armrio climatizado o ideal - A fase lag do crescimento microbiano ainda muito extensa - Os resultados j so confiveis e relevantes - Prximos passos: incubar os microorganismos em soluo menos nutritiva

92

26

Ensaio 7: Variao da concentrao de clulas inoculao de Pseudomonas a DOs pr-definidas

Ensaio 7 - Densidades ticas fixadas - TODAS
100 80 DBO (mg/l) 60 40 20 0
Head1 - DO=0,48 Head2 - DO=0,48 Head3 - DO=0,48 Head4 - DO=0,48 Head5 - DO=0,33 Head6 - DO=0,33 Head7 - DO=0,33 Head8 - DO=0,33 Head9 - DO=0,12 Head10 - DO=0,12 Head11 - DO=0,12 Head12 - DO=0,12

Comentrios: - Fase lag ainda muito extensa, resultados j bastante confiveis. - Prximos passos: Repetir o ensaio com 100% do volume do frasco em fase log Ensaio 8: Variao da concentrao de clulas Diferentes DOs em cada frasco
Ensaio 8 - Densidades ticas fixadas - TODAS
160 140 120 100 80 60 40 20 0 0,0 1,0 2,0 3,0 4,0 5,0 6,0 7,0 8,0 9,0 10,0 11,0 12,0 DO=0,12 (1) DO=0,12 (2) DO=0,12 (3) DO=0,20 (1) DO=0,20 (2) DO=0,20 (3) DO=0,37 (1) DO=0,37 (2) DO=0,37 (3) DO=0,27 (1)

DBO (mg/l)

Comentrios: - Limitao do crescimento devido ao grande nmero de clulas 4. Concluses Os resultados obtidos nos testes com o respirmetro Oxitop Control System permitiram validar e verificar os fatores causadores de erro, formas de controle de eficincia e metodologia adequada para sua utilizao. Os resultados destas experincias geraram dois documentos, onde esto apresentadas todas as concluses advindas destes estudos: ORISTANIO, B.S. Protocolo de uso do Oxitop (Respirmetro). Agosto, 2006. ICB-USP. ORISTANIO, B.S. Manual de uso do Oxitop para o laboratrio de Microbiologia Ambiental. Agosto, 2006. ICB-USP. 93

0, 00 1, 33 2, 67 4, 00 5, 33 6, 67 8, 00 9, 33 10 ,6 7 12 ,0 0
Tempo (horas)
Tempo (horas)

-20

Anexo 9- Protocolo de uso do respirmetro Oxitop

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Protocolo de uso do OxiTop (Respirmetro) Utilizado para avaliar taxa de respirao em cultura de clulas e seu crescimento biolgico. Os valores de leitura do equipamento so representados em DBO (mg/l) que, neste equipamento, um valor proporcional presso desenvolvida no interior dos frascos de medio, causada pelo consumo de gases no interior do frasco devido ao crescimento biolgico. Referncias Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater. Protocolo 5210D. (1998) , 20th ed.APHA.Washington DC. Operating Manual: Sistem Oxitop Control . (1997). WTW, Germany. Manual de uso do Oxitop para o laboratrio de Microbiologia AmbientalICB/USP. (2006). Bruna de Sandre Oristanio. Achat Help Ajuda ao software de comunicao entre o Controller e o computador.(2006). Bruna de Sandre Oristanio. Material

12 schotts 300ml (sem o plstico de vedao na rosca do gargalo) 12 cabeas de medio 12 roscas de vedao de schott (vermelhas perfuradas) 12 suportes para pastilhas de NaOH 12 borrachas de vedao de pastilhas de NaOH (preta, cilndrica e perfurada) 12 barras magnticas (peixinhos) Controller (controle remoto do Oxitop) 1 misturador magntico para 12 frascos (Stirrer, da Oxitop) 1 armrio climatizado 1 balana analtica 1 esptula 1 proveta volumtrica Pastilhas de NaOH Inibidor de Nitrificao (Standard Methods)

Procedimentos Adicionar 1 ponta de esptula de pastilhas de NaOH em cada suporte para pastilha, e rosque-lo j com a borracha de vedao em seu interior. Rosquear o suporte de NaOH com a cabea de medio, colocando entre eles uma rosca de vedao. Preparar o Controller, clicando em GLP/Tools (boto 4) -> Settings e atualizando as seguintes informaes do local de ensaio: Operation Mode: BOD Special Measuring time: tempo de durao do ensaio. Para ensaio de poucas horas recomenda-se selecionar a opo Measuring Time para 24h ou mais. High: altitude acima do nvel do mar; Air Pressure: presso atmosfrica; Temperature: temperatura de incubao no armrio climatizado Ainda no Controller, selecionar o boto de transmisso de dados (boto 6) -> 95

Start Sample Selecionar a opo Measuring Range Bottle: volume total do frasco (medir colocando gua at o limite do gargalo). Filling Vol.: volume de amostra ensaiada, em ml. ID Number: utilize esta opo para facilitar a associao do ID das amostras aos resultados finais No frasco Schott, adicione o volume pr-determinado da amostra a ser ensaiada, uma barra magntica e o inibidor de nitrificao, quando necessrio. Rosqueie firmemente a rosca de vedao (j acoplada ao suporte de NaOH). No Controller, clique em Start e aproxime o controle remoto a cerca de 5cm da cabea de medio a ser iniciada. Caso tenha feito mais de uma cpia de um mesmo ensaio, possvel iniciar estas amostras em srie. Aguarde o som de bip e verifique a mensagem na tela confirmando o incio da primeira amostra, antes de aproximar das prximas cabeas, uma aps a outra. Acondicionar a amostra no armrio climatizado, sobre o stirrer, at o final do experimento. Anlise de dados (Software ACHAT OC) Para obter valores parciais durante a experincia, clique no boto de transmisso de dados (boto 6) -> Call up all data. Aponte o Controller, no mximo a 1 metro de distncia, para as cabeas iniciadas, e todos os dados atualizados sero passados para o controle remoto. A tela do controle remoto indica quantas cabeas de medio passaram seus dados ao controle e quantas esto em andamento. Utilize o cabo RS232 e o software Achat OC para passar os dados ao computador. Conecte o cabo ao controller e porta serial do computador. Ligue o controller e abra o software Achat OC. No software, clique em Fetch Sample List e aguarde o download completo da lista de dados disponveis no controller. Clique duas vezes sobre uma das linhas da lista para abrir a tela de Measuring Data. Esta tela exibe todos os dados de uma cabea de medio, ou de vrias cabeas que tenham sido iniciadas com os mesmos parmetros e no mesmo processo de start em srie. Clique no comando Copy to Clipboard para copiar todos os dados da tabela. Com esta opo possvel colar estes valores para manipulao em outro software (como uma planilha Excel).

Agosto/ 2006 Bruna de Sandre Oristanio oristaniobruna@yahoo.com

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Anexo 10- Manual de uso do OxiTop para o laboratrio de Microbiologia Ambiental ICB/USP

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Manual de uso do OxiTop para o laboratrio de Microbiologia Ambiental ICB/USP System OxiTop Control OxiTop OC110 Controller + OxiTop-C Measuring Heads

Para que serve? De acordo com o manual do fabricante: Medir DBOx Avaliao de biodegradabilidade Avaliao de respirao e toxicidade em solo, lodo, esgoto e sedimentos Avaliao de taxa de respirao em cultura de clulas Crescimento microbiolgico e exames de stress Medida de processos de degradao anaerbica (avaliao de biogs) Como mede? O equipamento mede presso. Trata-se de um mtodo respiromtrico. Se houver consumo de oxignio no interior do frasco lacrado, ser desenvolvida uma presso negativa. Se algum gs for liberado, ser desenvolvida uma presso positiva. O Oxitop seguinte

BOD =

M O2 R T m

V t V l Vl

T p O 2
0

Tm

utiliza a frmula:

M(O2) - Peso molecular (32000 mg/mol) R - Constante dos gases (83.144 lmbar/molK) - Temperatura de referncia (273.15 K) T0 - Temperatura da amostragem Tm Vt - Volume nominal do frasco (em ml) Vl - Volume da amostra (em ml) - Coeficiente de absoro de Bunsen (0.03103) - Diferena da presso parcial de Oxignio (mbar) p(O2) Manipulao dos dados Os dados so medidos e ficam armazenados nas cabeas de medio (Measuring Heads). Utiliza-se o controle remoto (Controller) para se coletar e visualizar estes dados. No controller possvel visualizar grficos e avaliaes estatsticas dos dados amostrados. possvel tambm enviar os dados para um PC, atravs de uma interface RS232, utilizando-se o software Achat OC.

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Modos de operao: Modo de Routine BOD Operao Tempo mximo de medio

Standard BOD

Special BOD

Pressure

0,5h at 99 dias --

Volume do frasco 7 valores pr7 valores pr50ml a 9.999ml fixados a escolher fixados a escolher Volume de amostragem AutoTemp GLP Altitude (m) Temperatura da incubao (C) Presso (hPa) Presso Limite (hPa) Diluio Intervalo de medio

7 valores pr7 valores pr10ml at (Volume -fixados a escolher fixados a escolher do frasco 10ml) ON OFF 500 20 954 -0 ON/OFF ON/OFF 500 20 954 -0 ON/OFF ON/OFF -698 a 5572 5 a 40 500 a 1100 -0 - 99 OFF ON/OFF ---50 a 150 --

A cada 20 minutos A cada 20 minutos A cada 20 minutos Grava apenas 10 medidas

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Operao

1 Liga/ Desliga 2 Imprimir atravs de interface IV (infra-vermelho) 3 Gerenciamento de amostras Lista de amostragens, leitura de dados individuais de cabeas de medio ou de amostras, exibir cabeas de medio ou exibir amostras 4 GLP / Tools Exibir ou alterar configuraes, exibir cabeas de medio disponveis, realizar testes ou manuteno 5 Exibio grfica ou numrica de dados medidos 6 Comunicao com cabeas de medio 7 Seleo de opes 8 Confirmao de opes MENUS e suas FUNES: 4 - GLP/Tools: Show free Exibe cabeas de medio disponveis para medir novas amostras. Selecione esta opo -> tecle ENTER -> aponte o Controller para as cabeas de medio -> as cabeas disponveis piscaro por 5 segundos Show settings Exibe configuraes atuais. Aqui possvel modificar os seguintes parmetros: GLP: (Good Laboratory Practice) ON: Utilizado para fazer calibraes. So registrados os intervalos e as medidas de calibrao realizadas. Neste perodo, fica bloqueado o incio de novas medies. AutoTemp: OFF: as medies so iniciadas imediatamente ON: as medies so iniciadas aps a estabilizao da temperatura da amostra, conforme a tabela. Neste caso, o erro obtido ser inferior a 1%. 100

Limit pressure: p limite, a partir da qual o aparelho exibir as medies realizadas. No exibe p inferiores definida (ou superiores? O manual no claro, opo no foi testada) Check Show (finished/all) Exibe cabeas de medio: concludas ou todas. info (with report printout) Selecione esta opo -> aproxime o controller a 5 cm da cabea de medio desejada. Voc poder visualizar as informaes: -Serial number; battery status; next calibration date (quando GLP=ON); Status (free/used/defective); -No caso de Status=USED, ainda exibe: Start date; Final date; sample number; type and range of measurement Controller info (with report printout) Exibe os dados do Controller Cal test Teste de vedao das cabeas de medio. necessrio possuir o WTW test resource, OxiTop PM, (WTW order number 209 333). Pneumatic test Teste de preciso de medidas das cabeas de medio. necessrio possuir o pneumatic test resource, OxiTop PT (WTW order number 209 334). Maintenance Erase finished samples (Apaga medies selecionadas no Controller) Reset/release (Reseta as cabeas de medio) Restore data (Se os dados forem perdidos, essa funo permite atualizar no Controller a informao de cada uma das cabeas de medio)

101

Experimentos realizados para validao Diversos testes foram realizados, com o objetivo de analisar a influncia dos seguintes fatores nos valores de leitura do equipamento: temperatura de incubao (Tm); volume amostrado (Vl) ideal; volume do frasco (Vt) ideal; agitao das amostras; sensibilidade da leitura de equipamento de acordo com a quantidade de clulas encubadas (valores mximos e mnimos permitidos); acurcia do equipamento (desvio de leitura em duplicatas de uma mesma amostra); tempo de leitura do equipamento (tempo de incubao).

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Segue abaixo uma tabela resumo de cada um dos ensaios realizados. Tabela: Condies de ensaio Ensaio Tipo de amostras Volumes amostrados Objetivo Acurcia das cabeas de medio Sensibilidade do fundo de escala Resultados Desvio padro mdio de x% do fundo de escala. Desvio padro mdio de 5% do fundo de escala para Vt=300ml e de mais de 10% para Vt=500ml. Utilizar Vt=300ml e Vl de acordo com o range necessrio. Baixa concentrao de nutrientes ou baixa concentrao de clulas no apresentam leituras significativas.

Variaes do Soluo sem Vl = 100ml Vt = 304ml Equipamento nutrientes Tempo= 5 dias Variao de volumes gua da raia Vl=100, 280, 560ml Vt=128, 320, 622ml Tempo= 5 dias Vl = 100ml Vt = 304ml Tempo= 5 dias

Variao de gua da concentrae raia, inculo, s branco e TSB Com e sem agitao

Valores mximos e mnimos de leitura

gua da raia Vl = 100ml Vt = 300ml Tempo= 5 dias

Relevncia da Confirmada a necessidade de agitao agitao das amostras. Influncia da Variaes maiores do que 2C na temperatura na temperatura de incubao amostragem interferem na correta leitura do equipamento Definir valores No possvel distinguir as mximos e curvas de cada uma das DOs. mnimos de Valores muito prximos. leitura Definir valores mximos e mnimos de leitura Definida curva ideal de medio. Para pseudomonas, leituras adequadas apenas entre 0,01 < DO < 0,10

Variao de gua da raia Vl = 100ml Vt = 300ml temperatura Tempo= 5 dias de incubao Variao de Densidades ticas Variao de Densidades ticas DOs: 0,0; Vl = 220ml 0,2; 0,4; 0,9 Vt = 308ml e 0,18 DO = 0,12; 0,20 e 0,37 Vl = 220ml Vt = 308ml

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Concluses e comentrios sobre o mtodo respiromtrico com o Oxitop System: Interferncias no mtodo que alteram os resultados: variao da temperatura de incubao, montagem inadequada do experimento, agitao de amostras, volume ensaiado (fundo de escala), quantidade muito baixa ou muito alta de nutrientes ou clulas da amostra. Valor final da DBO obtido partir de muitas inferncias: Microorganismos consomem O2 => Gera P no interior do Schott => Oxitop mede P baseado na Presso atmosfrica fixa, informada ao equipamento => Oxitop estima volume inicial de O2 => Oxitop estima consumo de O2 => Oxitop multiplica P por uma constante k, obtendo o valor de DBO K ( Tensaio, P baromtrica, Altitude do ensaio, Vol. amostrado, Vol. recipiente, R, M, )

Ensaio para validao de concentrao mxima e mnima de clulas Procedimento 1 Inocular Pseudomonas em TSB 2 Acompanhar crescimento microbiano at o valor de Densidade tica (DO) de 0,8. 3 Centrifugar a amostra e lavar duas vezes com soluo tampo: Soluo tampo: gua destilada + 10mM PO4 e pH=7,0. 4 Ressuspender em soluo tampo nos valores de densidades ticas variando de 0,01 a 0,10. 5 Montar experimento do oxitop com triplicadas de cada um dos valores de DO, adicionando 1g/l de TSB em cada frasco. 6 Traar o grfico de p/t X DO ou quantidade de clulas. Com este experimento foi possvel obter o grfico indicativo de limite mximo e mnimo de concentrao de clulas para os quais o equipamento Oxitop retorna valores significantes.

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Inclinaes Significantes
1 4 1 2

Inclinao da curva (DBO/ tempo)

1 0 8 6 4 2 0
0,02 0,04 0,06 0,08 0,1 0,1 2 0,1 5 0,2 0,37

rea das Inclinaes Significantes

Densidade tica

Agosto/ 2006 Bruna de Sandre Oristanio oristaniobruna@yahoo.com

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Anexo 11 - Determinao da acurcia e preciso dos equipamentos na avaliao da eficincia dos pr-tratamentos (pHmetro, Turbidimetro, Condutivmetro e Colormetro).

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1. Objetivo A anlise dos equipamentos que sero utilizados para medir a qualidade da gua do sistema de pr-tratamento em desenvolvimento importante para assegura uma confiabilidade necessria nos dados obtidos que sero avaliados posteriormente. A descrio dos mtodos operacionais de cara aparelho e o mtodo de calibragem destes ser descrito a seguir, sendo essenciais para garantir a preciso dos dados coletados. 2. Turbidmetro 2.1. Introduo A turbidez causada por matrias slidas em suspenso, ela medida atravs do turbidmetro, comparando-se o espalhamento de um feixe de luz ao passar pela amostra com o espalhamento de um feixe de igual intensidade ao passar por uma suspenso padro. Quanto maior o espalhamento maior ser a turbidez. A turbidez medida pelo mtodo nefelomtrico, um equipamento dotado com uma fonte de luz (filamento de tungstnio), que incide na amostra, e um detector fotoeltrico capaz de medir a luz que dispersa em um ngulo de 900 em relao luz incidente. A turbidez assim medida fornecida em unidades nefelomtricas de turbidez (UNT). Aparelho da marca PoliControl, modelo AP-2000iR. O aparelho possui faixa de leitura de 0 a 9,99 ou de 0 a 99,99 ou de 0 a 1000 (NTU), a seleo da faixa de leitura feita automaticamente. Com preciso de 2% at 100 NTU e de 3% acima de 100 NTU. A leitura feita automaticamente a cada 3 segundos. Os tubos de amostra possuem 20 mL (cubeta redonda). 2.2. Operao do turbidmetro Aparatos utilizados: -Turbidmetro AP-200 iR PoliControl; -Amostras padro: 0,02 NTU, 10,0 NTU, 100 NTU, 1000 NTU; -Lenos de papel; -Frascos para anlise das amostras (cubetas); Conectar o turbidmetro a tomada (110 volts) e apertar a tecla Liga. Selecionar a unidade de leitura da turbidez. Caso a unidade de leitura que estiver aparecendo no visor for EBC, apertar rapidamente a tecla Cal para mud-la para NTU, e vice-versa. A calibrao do aparelho deve ser feita sempre que o aparelho for ligado. Ao lidarmos com amostras com baixa turbidez, aconselhvel a utilizao apenas das amostras padro de 0,02 NTU, 10 NTU e 100 NTU, de modo a obter uma curva de calibrao coerente ao intervalo que ser amostrado. Pegar a amostra padro de 0,02 NTU. Segurar o frasco evitando tocar na parte de vidro. Limpa-lo de modo suave, utilizando um leno de papel. Introduzir a amostra no turbidmetro de modo que o ponto acima do C do frasco coincida com a marca (risco) assinalada no aparelho. Apertar a tecla Cal por 3 segundos. No visor surgir a palavra calibrar. Ajuste a leitura para o valor correto (0,02 NTU) utilizando as setas pra cima ou para baixo. Pressione novamente a tecla Cal por 3

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segundos. Surgir temporariamente no visor Gravar calibrao. Aguarde 5 segundos, o aviso ir desaparecer, a calibrao esta concluda. Para as outras amostras padro, o procedimento de calibrao anlogo. Os outros padres devem ser introduzidos conforme ordem crescente de turbidez. Terminada a calibrao, completar o frasco de anlise com a amostra e fech-lo. Limpar suavemente o frasco com um leno de papel. Introduzi-lo no turbidmetro (de forma anloga das amostras padro) e aguardar a leitura. Para desligar o aparelho basta desconect-lo da tomada. 2.3. Informaes importantes para medio As amostras devem ser coletadas em um recipiente de vidro ou polietileno limpo. Para se obter melhores resultados, a amostra deve ser analisada imediatamente aps a coleta. Tubos de amostra sujos, arranhados ou lascados podem causar resultados alterados. Tomar cuidado no manuseio, de modo a garantir uma superfcie ntida e limpa da cubeta. Antes de proceder leitura de turbidez a amostra deve ser gentilmente misturada. Tome cuidado para no produzir bolhas de ar; elas provocam leituras de turbidez indesejveis. No se pode remover bolhas deixando a amostra parada por muito tempo, pois durante este perodo partculas podem sedimentar e a temperatura pode ser alterada. Vibraes podem aumentar a disperso de luz e, por conseqncia, provocar leituras de turbidez no desejveis. O turbidmetro deve ser colocado sobre uma bancada de superfcie firme. Aps terminar o manuseio e o preparo da amostra, remova as marcas de dedos no tubo de amostra com um pano seco e limpo antes de inser-lo na cmara do turbidmetro.

3. pH-metro

3.1. Introduo O pH uma caracterstica de todas as substncias, determinado pela concentrao de ons de Hidrognio (H+). determinado pela concentrao de ons de hidrognio. A medio do pH feita pelo o mtodo eletromtrico, o princpio bsico da medio por este mtodo a determinao da atividade dos ons de hidrognio utilizando uma medida potenciomtrica com eletrodos padres de hidrognio e um eletrodo de referncia. Os conjuntos de eletrodos de vidro permitem somente medies relativas a pH. Alm disso, seus potenciais esto sujeitos a terem pequenos desvios com relao a valores ideais. Portanto, necessrio calibr-los com solues tampo de valores de pH conhecidos, o que far coincidir a indicao de pH do aparelho com os respectivos eletrodos. Para fins de controle e compensao do desvio, recomendamos aferi-los em intervalos de tempo regulares.

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3.2. Operao do pH-metro Aparatos utilizados: -pHmetro microprocessado QUIMIS; -Lenos de papel; -Pisseta com gua destilada; -2 Solues padro (buffers de calibrao) ex.: 6,86 e 4,01; Conectar ao aparelho o sensor de temperatura assim como o eletrodo de pH. Retirar o envoltrio azul de proteo do eletrodo de pH e abaixar o anel esbranquiado deste at que aparea um orifcio redondo no vidro do eletrodo. Fazer estes passos com cautela. Verificar a voltagem demarcada do pHmetro, conectar o equipamento tomada, e apertar a tecla Liga/Desliga para ligar o aparelho. Aperte a tecla Sel para mover o selecionador digital e escolha Outros no visor digital, apertando Enter. Em seguida para efetuar a calibrao, na prxima tela selecione Cal e tecle Enter Lavar o eletrodo de pH e o sensor de temperatura com gua destilada, secando-os suavemente com um leno de papel. Pegar o primeiro buffer de calibrao (ex. pH 6,86). Mergulhar o eletrodo de pH e o sensor de temperatura no frasco que contm o buffer, apertar a tecla Enter e aguardar. Em seguida, ser solicitada a escolha do segundo buffer de calibrao. Lavar o eletrodo de pH e o sensor de temperatura com gua destilada, secando-os suavemente com um leno de papel. Pegar o segundo buffer de calibrao (ex. pH 4,01). Mergulhar o eletrodo de pH e o sensor de temperatura no frasco que contm o buffer, apertar a tecla Enter e aguardar. Aps a segunda calibrao ter sido aceita, aperta Set. Lavar o eletrodo de pH e o sensor de temperatura com gua destilada, secando-os suavemente com um leno de papel. Para fazer a medio do pH de uma amostra, mergulhe o eletrodo de pH e o sensor de temperatura nesta. Utilizando a tecla Sel selecione pH e tecle Enter. Terminada a anlise, lavar o eletrodo de pH e o sensor de temperatura com gua destilada, secando-os suavemente com um leno de papel. Aperte a tecla Liga/Desliga para desligar o aparelho. Recolocar o envoltrio azul de proteo do eletrodo de pH e levantar o anel esbranquiado deste at que o orifcio redondo no vidro do eletrodo fique coberto. Fazer estes passos com cautela. 4. Condutivmetro 4.1. Introduo Condutividade a medida da capacidade de uma soluo aquosa de conduzir corrente eltrica. Esta capacidade depende da presena de ons, da concentrao, da mobilidade e a temperatura de medio. 4.2. Operao do condutivmetro

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Aparatos utilizados: -Soluo padro de condutividade 1413uS 25oC; -Lenos de papel; -Bqueres; -Pisseta com gua destilada; -Condutivmetro INL-30; Verificar a voltagem do equipamento e conect-lo a tomada. Ligar o aparelho (chavinha atrs deste prateada). Lavar o eletrodo de condutividade com gua destilada, secando-o suavemente com um leno de papel. Mergulhar o eletrodo na soluo padro de condutividade (1413 uS 25oC). A escala apropriada 2 mS. Selecionar temperatura de 25oC. Efetuar a calibrao rotacionando o boto clula, at ser atingido o valor de 1413 uS. Lavar o eletrodo de condutividade com gua destilada, secando-o suavemente com um leno de papel. Para fazer a medio da condutividade de uma amostra, mergulhe o eletrodo de condutividade nesta. Escolha a escala apropriada e efetue a leitura. Terminadas as anlises, lavar o eletrodo de condutividade com gua destilada. Desligar o aparelho. Deixar o eletrodo imerso em bquer com gua destilada. 5.1 Colormetro 5.1. Introduo A cor de uma amostra de gua est associada ao grau de reduo de intensidade que a luz sofre ao atravess-la (e esta reduo d-se por absoro de parte da radiao eletromagntica), devido presena de slidos dissolvidos, principalmente material em estado coloidal orgnico e inorgnico.

5.2. Calibrao do aparelho Pressione a tecla <LIGA> at a inicializao do equipamento. Aguarde 5 minutos para sua estabilizao. Limpe a cubeta com um papel fino e absorvente. Insira uma cubeta com a reao de branco (gua deionizada), alinhando a marca | para frente na marcao indicativa. Tecle <LIGA> para fazer a leitura. Pressione a tecla <CAL> at que o display indique calibrar e na seqncia Cal Zero e <Cal> F. Escala. Pressione a tecla seta para cima at o display indicar Memorizando Zero. Em seguida aparecer 0,00 mg/L. Retire a cubeta. Insira a cubeta com um padro de cor conhecido de 10, 100 ou 500 unidades de cor. Feche a tampa. Pressione a tecla <LIGA> para fazer a leitura deste padro. Pressione a tecla <CAL> at que o display indique Cal Zero e <Cal> F. Escala. Tecle <Cal> F. Escala e o display ir indicar o valor de padres, em seguida, pressionando as teclas seta para cima e para baixo, ajuste para 10, 100 ou 500 uC.

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Pressione a tecla <CAL> at que o display indique Gravar Cal para que o equipamento memorize o valor. Repita os passos de 7 a 10 para os dois outros padres.

5.3. Operao do colormetro Rinse a cubeta com a amostra. Feche e limpe a cubeta com papel fino e absorvente (segurando-a pela tampa). Introduza a cubeta na clula de leitura, alinhando a marcao com o trao indicativo na borda da cmara de luz. Feche a tampa. Pressione a tecla <LIGA> para que seja efetuada a leitura. Para desligar pressione a tecla <LIGA> at que o display indique Desligar. Tempo aproximado de 5 segundos. 6. Experincia I - CIRRA (31/05/2006) Para os testes, foi coletado uma amostra de 2L de gua da raia da cidade universitria, e o tempo de coleta e medio no ultrapassou o perodo de 2 horas. A
Cor (uC) 78 81 76 80 79 78 78 79 80 80 79 76 78 79 79 76 76 78 77 79 78 79 78 81 78 80 79 79 81 81 79 79 79 80 78 78 77 80 77 78 1,39 78,63 Turbidez (NTU) 23,5 25,1 21,2 24,2 20,1 24,4 23,9 23,2 23,8 23,8 21,9 22,6 24,1 23,9 22,8 23,7 21,7 22,8 20,8 22,2 22,6 25,6 21,1 20,3 20,7 24,8 21,4 21,5 25,5 25 23,2 23 22,8 23,6 21,9 24,6 22,1 22,7 21,1 22,6 1,46 22,9 Condutividade (uS) 105,2 104,1 102,7 106,3 101,8 101,3 106,8 103,6 105,2 103,2 100,8 102,9 103,4 100,8 104,1 104,6 103,2 102,8 101,4 103,3 102,5 102,6 101,5 103,4 102,9 102,7 103,5 105,1 101,2 104,7 101,1 102 102,9 103,1 102,7 102,5 101,3 102,7 102,5 103,4 1,43 103,05 pH (20,5oC) 7,79 7,8 7,8 7,81 7,8 7,79 7,81 7,79 7,81 7,8 7,82 7,83 7,83 7,82 7,81 7,83 7,82 7,82 7,83 7,82 7,82 7,83 7,82 7,83 7,84 7,83 7,84 7,83 7,82 7,82 7,84 7,81 7,84 7,85 7,84 7,82 7,81 7,83 7,83 7,83 0,01 7,82

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temperatura mdia nas anlises foi de 20,5 oC. Dados obtidos: O desvio padro representado pela penltima linha e a mdia pela ltima linha. 7. Experincia II - CIRRA (18/07/2006) Anlise 1 60 mL Amostra 140 mL gua destilada
Cor (uC) 24 25 24 24 24 24 24 23 24 24 0,4714 24 Turbidez (NTU) 5,45 5,74 5,57 5,37 5,47 5,52 5,64 5,65 5,78 5,36 0,1465 5,56 Condutividade (uS) 47,2 46,8 46 45,8 46,2 44,3 44,4 45,2 45,3 46,1 0,9440 45,73 PH (19oC) 6,906 6,902 6,895 6,888 6,893 6,881 6,877 6,902 6,900 6,893 0,0097 6,89

Desvio Padro Mdia

Anlise 2 100 mL Amostra 100 mL gua destilada

Desvio Padro Mdia

Cor (uC) 37 38 38 36 36 37 37 38 38 38 0,8233 37,3

Turbidez (NTU) 10 9,36 9,44 10,3 11,2 10 10,4 8,96 10,2 9,79 0,6295 9,97

Condutividade (uS) 56 56,4 55,9 55,2 55,5 55,6 55,3 55,8 56,2 56 0,3872 55,79

PH (19oC) 7,110 7,114 7,117 7,114 7,091 7,148 7,129 7,168 7,117 7,110 0,0217 7,12

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Anlise 3 160 mL Amostra 40 mL gua destilada

Desvio Padro Mdia

Cor (uC) 64 63 63 64 64 65 65 63 64 64 0,7379 63,9

Turbidez (NTU) 16 15,2 15,5 16,9 15,4 16,3 14,9 16 15,4 15,5 0,5896 15,71

Condutividade (uS) 78,2 78,5 76,4 77,4 77,5 77,3 77,8 77,6 78,2 78,6 0,6604 77,75

PH (19oC) 7,618 7,588 7,581 7,605 7,601 7,599 7,594 7,593 7,616 7,583 0,0124 7,6

Anlise 4 200 mL Amostra 0 mL gua destilada

Desvio Padro Mdia

Cor (uC) 81 80 82 81 82 82 80 81 81 82 0,7888 81,2

Turbidez (NTU) 20,5 22,7 22,7 21,2 20,8 20,7 22,6 21,1 21,5 20,8 0,8784 21,46

Condutividade (uS) 93,5 94,8 94,4 94,2 94,1 94,5 93,7 93,9 94,1 94 0,3824 94,12

PH (19oC) 7,937 7,874 7,906 7,945 7,915 7,939 7,904 7,924 7,926 7,911 0,0208 7,92

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Segue abaixo os grficos representando o desvio padro obtido por cada aparelho em suas respectivas anlises. Concluindo que os valores obtidos esto de acordo com o grau de diluio da amostra analisada, seguindo um valor proporcional ao

Desvio Padro - Colormetro

0,9000 0,8000 Valores Obtidos 0,7000 0,6000 0,5000 0,4000 0,3000 0,2000 0,1000 0,0000 Amostras 1 2

grau de diluio da amostra.

Desvio Padro - Turbidmetro

1,0000 4 Valores Obtidos 0,8000 0,6000 0,4000 0,2000 0,0000 Amostras 1 2 3

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Desvio Padro - Condutivimetro

0,8000 0,7000 Valores Obtidos 0,6000 0,5000 0,4000 0,3000 0,2000 0,1000 0,0000 0 1 2 Amostras 3 4 5 1 2 4

Desvio Padro - pH-metro

0,0250 Valores Obtidos 0,0200 0,0150 0,0100 0,0050 0,0000 0 1 2 Amostras 3 4 5 1 2 3 4

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