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UNIVERSIDAD NACIONAL DE HUANCAVELICA FACULTAD CIENCIAS

E. A .P. D N IA E ZOO TE C

DE INGENIERIA
E.A.P ZOOTECNIA

DETERMINACION DE NITROGENO Y PROTEINA DE INSUMOS

ALUMNO

IER

IA

TEMA
CTEDRA

DOCENTE

: Ing. Marlene TOMASSINI VIDAL :

RAMIREZ MONTES, Jhonny. LIZANA HILARIO, Epifanio. QUISPE MULATO, David. RAMOS QUISPE, Vicente PACO LAZO, Nataly Maria ROCA INGA, Liber QUICHCA PALOMINO, Raul Gerardo

CICLO :

SECCIN : B

HUANCAVELICA PER

2010

VA DEDICADO PARA TODOS LOS ALUMNOS DE LA FACULTAD DE CIENCIAS DE INGENIERIA.

INTRODUCCION
La determinacin de la cantidad de protena y nitrgeno presente en alimentos y en otros compuestos por el mtodo de Kjeldahl es una de las ms usadas aunque no la nica. Esta determinacin se realizo con insumo o alimento concentrado para conejos lo cual es la conejina comnmente conocido, pues para ello tuvimos que utilizar distintos materiales las cuales son muy importantes y siempre teniendo las precauciones necesarias dentro del laboratorio y los equipos que se utilizaran, para poder determinar el porcentaje de nitrgeno tanto como de protena usamos dos formulas matemticas las cuales nos ayudan a determinar despus de todos los pasos seguidos de acuerdo a la gua y al docente quien dirige dicha prctica. El nitrgeno es el elemento qumico que permite diferenciar las protenas de otros compuestos, particularmente de grasas y carbohidratos. Sin embargo, la fraccin de protena del sistema biolgico no es la nica fuente de nitrgeno ya que puede derivarse tambin de ppticos, aminocidos libres y compuestos nitrogenados de naturaleza no proteica (generalmente presentes en menor proporcin). A todo este proceso de determinacin de la cantidad de protena, nitrgeno, porcentaje de materia seca, % de humedad, EE, GRASA, etc. Se le conoce como el anlisis proximal, este anlisis se determina para conocer cunto es la captacin del animal en cuanto a protena presenta un alimento para lo cual realizamos esta prctica, de acuerdo a los resultados deduciremos si el alimento es bueno o que requerimientos ms necesitan los animales suministrados con dichos alimentos balanceados.

OBJETIVOS
Determinar el anlisis proximal del insumo conejina por el mtodo de Kjeldahl. Conocer cunto es la variacin que el animal necesita en cuanto a protena que requiere y que dicho animal presenta en cuanto al alimento que se le suministra si al tipo de insumo que consume o de acuerdo a la digestibilidad que tiene. Conocer si los clculos realizados por este mtodo de Kjeldahl va ser igual que presenta un insumo en cuanto a su anlisis proximal. Buscar la manera ms fcil de determinar el anlisis proximal de insumos que son muy importantes para el racionamiento a animales de inters econmico. Determinar cunto es el incremento de protena en un animal de acuerdo con este insumo analizado, si hay ventajas o no para suministrar este tipo de alimento.

MARCO TEORICO
CUANTIFICACIN DE NITRGENO TOTAL Y DETERMINACIN DEL CONTENIDO DE PROTENA EN UN INSUMO PARA ANIMALES DOMESTICOS
LAS PROTENAS.- son un grupo de biopolmeros constituidos de aminocidos que exhiben una amplia gama de estructuras y funciones. Las protenas como un grupo de biomoleculas, desempean una gran variedad de funciones, algunas participan en la contraccin muscular y sirven para dar soporte estructural, otras trasportan y almacenan molculas pequeas. Los anticuerpos (molculas que sirven para como proteccin inmunolgica) son protenas al igual que las enzimas (catalizadores biolgicos) y algunas hormonas. Las protenas pueden llevar a cavo funciones tan diversas por la enorme posibilidad de combinaciones en la composicin y secuencia de aminocidos. Las protenas tambin se clasifican segn su composicin, las que se forman solo de residuos de aminocidos y no tienen otras biomoleculas son PROTENAS SIMPLES; no odas las protenas son solubles en agua, de hecho las protenas insolubles son esenciales para dar soporte y mantener la integridad estructural de las clulas y organismos.

Mtodo de Kjeldahl
El mtodo de Kjeldahl se basa en la hidrlisis cida de la materia orgnica de la muestra por calentamiento con cido sulfrico concentrado y sulfato de potasio en presencia de un catalizador sulfato de cobre. El nitrgeno se reduce en la sal sulfato de amonio, de la cual se libera con hidrxido de amonio en la forma de amoniaco y se destila. El destilado se valora con una solucin patrn de cido clorhdrico o sulfrico.

MATERIAL 5 tubos digestin Kjeldahl con capacidad de 125 ml. 1 matraz de Erlenmeyer 1 matraz volumtrico de 100 ml. 1 mechero de Bunsen. 2 pinzas (nueces). 1 pipeta 1 frasco gotero 1 par de guantes 1 pinzas largas. 1 mortero 1 balanza analtica 5 vasos precipitados 1 esptula

EQUIPO Aparato digestor Kjeldahl (1 para todo el grupo). 1 aparato destilador bshi 1. REACTIVOS Sulfato de cobre Verde de bromocresol al 0.1% diluido en alcohol al 95%. Rojo de metilo al 0.1% diluido en alcohol al 95%. cido brico al 2%. cido clorhdrico 0.01N (solucin valorada). Hidrxido de sodio al 30%. cido sulfrico concentrado.

Mezcla catalizadora para la digestin: 2.5 g de dixido de selenio + 100 g de sulfato de potasio + 20 g de sulfato de cobre pentahidratado (proporcionada por la coordinacin de laboratorios). MTODO ELABORACION DE REACTIVOS

1.- Mezcla Indicadora.- Prepare por separado los indicadores verde de bromocresol al 0.1% y el rojo de metilo al 0.1% diluidos en alcohol al 95%. Mezcle 10 ml. de verde de bromocresol con 2 ml. de la solucin de rojo de metilo en un frasco gotero.

2.- cido Brico al 2%.- Disuelva 10 g de cido brico (en cristales) en 500 ml. de agua destilada hirviendo. Despus de que se enfre transfiera la solucin a un frasco tapado. Se conserva indefinidamente.

3.- cido Clorhdrico 0.01N.- Prepare un litro y valrela con una solucin de NaOH de la misma normalidad.

4.- Hidrxido de Sodio al 30%.- Disuelva 150g de perlas de hidrxido de sodio en 350 ml. de agua destilada. Almacene la solucin en un frasco mbar con tapn de vidrio.

5.- H2SO4 concentrado.

6.- Catalizadores para la Digestin.- Mezcle 2.5g de dixido de selenio (SeO2), 100g de sulfato de potasio (K2SO4) y 20 g de sulfato de cobre pentahidratado (CuSO4 . 5H2O).

PROCEDIMIENTO DIGESTIN 1.- Triturar la muestra conejina en un mortero

2.- Pese exactamente 0.2500g de conejina en la balanza analtica y luego echar al tuvo digestor cuidando que la muestra no se adhiera a las paredes o al cuello del tubo digestor.

3.- Aada 3ml. de H2SO4, aproximadamente 1.0 g de mezcla catalizadora.

4.- Someta a digestin la muestra en el aparato de Kjeldahl, con el tubo digestor usando un temperatura ( ) al inicio rotando los tubos de vez en cuando para asegurarse de que se digiera toda la muestra. La digestin terminar cuando el color de la muestra sea azl-verde claro. El proceso tomar aproximadamente 120 minutos.

5.- Enfre el matraz durante unos 4 minutos para que no se endurezca al solidificarse la muestra.

DESTILACIN 6.- Encienda la unidad destiladora.

7.- Si es posible ajuste la velocidad de destilacin a aproximadamente 5 ml. por minuto 8.- Abra la llave del agua para tener H2O circulando por el refrigerante todo el tiempo.

9.- Aada la muestra a la cmara de ebullicin por medio de un embudo (para recuperar las perlas de ebullicin) y enjuague el matraz con aproximadamente 5ml. de H2O destilada. 10.- Coloque 1 frasco Erlenmeyer con 10 ml de cido brico y 2 gotas de indicador bajo la salida de destilacin.

11.- Aada aproximadamente 10 ml. de la solucin de NaOH a la cmara de ebullicin LENTAMENTE. La mezcla digerida se tornar oscura (azl-gris o caf oscuro). Si no cambia de color aada ms NaOH. 12.- Deje un poco de NaOH en la copita superior del destilador. 13.- Colecte aproximadamente 20 ml. del destilado (4-5 minutos). El destilado estar listo para ser titulado cuando se torna verde en el matraz receptor. 14.- Retire el tubo digestor y limpie la unidad destiladora enjuagando la cmara de ebullicin varias veces con agua destilada. Cada vez que se aada agua destilada hasta llenar la copita superior de la unidad destiladora para el enjuague deje que sta hierva primero. Luego abra la llave de la parte que permite salir las muestras hacia fuera de la unidad destiladora. Una vez vaca la parte en donde se procesa la muestra asegrese de que est bien vaca. Si queda todava un poco de agua en el fondo permita que hierva para que se vaya toda hacia esa segunda parte de la unidad destiladora. El siguiente tubo debe estar listo para realizar el mismo proceso.

NOTA: La llavecita de la segunda parte de la unidad destiladora (que conduce la muestra procesada hacia el vasito permanece cerrada (en posicin horizontal) durante el procesamiento de la muestra. Slo se abre cuando se enjuaga el destilador.

TITULACIN 15.- Titule la muestra con 0.1N de HCl. Un color violeta indica el punto final de la titulacin. Comprese este color con el del blanco. Cada equivalente del HCl usado corresponde a un equivalente de NH3 o a un equivalente de N en la muestra original. El peso del N en mg est dado por miliequivalentes del cido X 14 (el peso equivalente del N).

RECUPERACIN DEL AMONACO

Una posible fuente de variacin en este mtodo es la prdida del gas amonaco o una falla en atrapar el amonaco en el cido brico. Esto puede ocurrir en diferentes pasos del proceso. Una tcnica para buscar la recuperacin del amonaco consiste en destilar cantidades conocidas de amonaco lquido y titularlo con HCl. Se obtendr otra vez el color prpura en el cido brico.

Mientras se digieren las muestras, se puede destilar una solucin de sulfato de amonio. Aada 5, 10 15 ml (mediante una pipeta) de solucin de sulfato de amonio a la cmara de ebullicin de la unidad destiladora. Enjuguela despus con agua destilada y, si es posible, desionizada. Coloque inmediatamente la punta de la unidad destiladora en 10 ml de cido brico + indicador. Colecte aproximadamente 20 ml. de destilado.

Titule la muestra con el HCl estandarizado, registre los ml. de HCl empleados y calcule el peso del nitrgeno en el (NH4)2SO4.

RESULTADOS
Clculos

Moles de HCl = Moles de NH3 = Moles de N en la muestra % N = NHCl x Volumen de cido corregido x 0.0014 g N x 100

gr. de muestra
14 x N x V x 100 x factor % Protena =--------------------------------m x 1000 ; factor = 6.25

gastos: gasto 1 = 5.56 gasto 1 = 9.75 gasto 1 = 10.25 gasto 1 = 7.2 gasto 1 = 6.3

Desarrollo:

% N1 = 5.56 x 0.05 x 0.0014 g N x 100 0.2500 % N1 = 0.15568 % Protena ( 1 )= 0.15568 x 6.25 = 0.973

% N2 = 9.75 x 0.05 x 0.0014 g N x 100 0.2500 % N2 = 0.273 % Protena (2)= 0.273 x 6.25 = 1.70625

% N3 = 10.25 x 0.05 x 0.0014 g N x 100 0.2500 % N3 = 0.287 % Protena (3)= 0.287 x 6.25 = 1.79375

% N4 = 7.2 x 0.05 x 0.0014 g N x 100 0.2500 % N4= 0.2016 % Protena(4) = 0.2016 x 6.25 = 1.26

% N5 = 6.3 x 0.05 x 0.0014 g N x 100 0.2500 % N5 = 0.1764

% Protena(5) = 0.1764 x 6.25 = 1.1025

Promedio de % N = 0.15568 + 0.273 + 0.287 + 0.2016 + 0.176 = 0.218736 5

Promedio de % de prot = 0.973 + 1.70625 + 1.79375 + 1.26 + 1.1025 = 1.3671 5

En donde: NHCl = Normalidad del HCl en moles/1000ml (gasto) Volumen del cido corregido = (ml. del cido estandarizado para la muestra) (ml. de cido estandarizado para el blanco). 14 = Peso atmico del nitrgeno. Se utiliza un factor para convertir el porcentaje de N a porciento de protena cruda. El porcentaje promedio de N en protena para la conejina es de

0.218736 y el % de protena promedio es de 1.3671.

CONCLUCION

BIBLIOGRAFA

A.O.A.C. 1980. Association of Official Agricultural Chemists. Methods of Analysis. Washington, D.C.

Official

Nielsen, S.S. 1994. Introduction to the Chemical Analysis of Foods. Ed. Jones and Bartlett Publishers. U.S.A. pp 209-212.

Ranganna, S. 1977. Manual of Analysis of Fruit and Vegetable Products. Ed. McGraw-Hill Publishing Co. Ltd. New Delhi.

Yeshajahu P. y Meloan C.E. 1987. Food Analysis. Theory and Practice. 2. Ed. AVI U.S.A. pp 753-758.