INMUNIDAD INNATA Una visin evolutiva A lo largo de la evolucin han surgido distintos organismos con distintos grados de organizacin

(hay organismos menos complejos pero no menos evolucionados), y estas organizaciones que han surgido han sido siempre expuestas a agentes que tratan de invadirlos para aprovecharlos. Por ej, en una infeccin el propsito de un patgeno como un virus que ingresa a un hospedero, es la energa, la maquinaria biosinttica para generar protenas y poder sobrevivir (por s solo no puede) o en una bacteria que para poder replicarse necesita ciertos nutrientes. Entonces el concepto de invasin ocurri a lo largo de la evolucin siempre. Hay patgenos de plantas, de gusanos, de mamferos. Entonces no es un concepto nuevo la respuesta inmune, y la resp inmune innata no es la excepcin. Los organismos menos complejos han tenido la resp inmune innata, o sea, ha sido sper necesaria para poder sobrevivir y hacer frente a la infeccin. Todos los organismos multicelulares tienen mecanismos de defensa contra microbios e infecciones virales Para vertebrados, la defensa inmune puede ser dividida en inmunidad innata y adaptativa Los elementos de la inmunidad innata estn estrechamente relacionados con los componentes de la inmunidad en invertebrados En este diagrama se ven mamferos, peces, gusanos, o sea vertebrados, y ms atrs moluscos (menos complejos). La resp adaptativa, es la que se ha estudiado mucho ms en los ltimos 100 aos y es la que ha sido desarrollada en los vertebrados, y los invertebrados tienen una resp inmune innata. La C3 es una protena del complemento (inmunidad innata) y est en organismos ancestrales, entonces si ha perdurado a lo largo de toda la evolucin, debe ser importante la resp inmune innata. Despus surgieron otros mecanismos de inmunidad (resp inmune adaptativa) ms eficientes y con memoria, la inmunidad innata no tiene memoria pero es especfica. La inmunidad Innata es importante como: Una primera lnea de defensa, disminuyendo el crecimiento del agente infeccioso hasta que la inmunidad adaptativa se activa. Si graficamos cantidad de patgeno/tiempo, vamos a ver que el numero bacteriano aumenta en la circulacin o en el rgano infectado, llega a un equilibrio y despus decae en el tiempo. Para que esto ocurra tienen que coexistir la inmunidad innata y adaptativa. La primera etapa est a cargo de la resp inmune innata y es la que mantiene a raya a una infeccin, le pone un freno para que no siga subiendo (se ha visto en animales deficientes en macrfagos, clula resp innata, que el titulo de bacterias y virus se dispara. Sin embargo, si un individuo solo tiene macrfagos y no tiene linfocitos no puede eliminar el patgeno y el titulo tambin va a aumentar. Una manera de direccionar la inmunidad adaptativa (induccin de inflamacin, activacin de clulas dendrticas, y produccin de citoquinas especializadas en la respuesta inmune)

Inmunidad innata y adquirida Las barreras en la inmunidad innata son la piel, mucosas, todo tejido que est en contacto con el exterior como el epitelio respiratorio, gastrointestinal, genitourinario, entonces hay barreras que tienen que estar integras para que no sean una va de entrada de los patgenos y entren a rganos que tienen que protegerse como el sistema nervioso. Tambin a nivel del sistema nervioso hay barreras como la barrera hematoencefalica, donde si hay una infeccin perifrica se va a reflejar a nivel del sistema nervioso, y va a tener un impacto en su funcionamiento y en la permeabilidad en la barrera hematoencefalica (va aumentar permeabilidad y pueden acceder patgenos y clula al sistema nervioso). Hay algunos marcadores de inflamacin caractersticos que son citoquinas, y una de ellas, que aumenta durante el proceso infeccioso, es el TNF (factor de necrosis tumoral) y lo que hace el TNF es aumentar la permeabilidad de las barreras tanto epiteliales como hematoencefalica. Entonces estas barreras constituyen una barrera fsica que evitan q un patgeno acceda. Si hay una corte o quemadura o picadura de mosquito la barrera se puede perder. En caso de la resp inmune adquirida a nivel de las barreras en las mucosas, existen secreciones, como las inmunoglobulinas de la mucosa, y la IgA es exclusiva de las mucosas tanto a nivel respiratorio como gastrointestinal. Existen tambin molculas q circulan en la periferia q dan cuenta de una resp para eliminar a un patgeno. Existen en la resp innata elementos de produccin inmediata como es el complemento, q son protena solubles q se generan en el hgado y al igual q otras protenas de resp aguda como el PCR, q es un indicador bastante inmediato ante un proceso infeccioso o inflamatorio, tambin se produce en el hgado. En el caso de protena que da cuenta de una resp a ms a largo plazo (resp adquirida) producida por los linfocitos B, son los anticuerpos. Los tipos celulares como macrfagos, clulas polimorfonucleares y NK, son clulas clsicas y que dan cuenta de la resp inmune innata. Los linfocitos tanto T y B son las clulas q representan a la resp inmune adaptativa. En cuanto a los mediadores solubles son Citoquinas, pero aqu lo que cambia es la fuente celular que las secretan; macrfagos en resp inmune innata y linfocitos en adquirida. Estos mediadores dan comunicacin entre una clula y otra. A nivel del epitelio, existe uno que recubre y tapiza mucosa. El lumen nos comunica al exterior x ej si tamos hablando de intestino, y existen clulas asociadas a este epitelio, y si llega un patgeno q impacta con estas clulas va a activar a clulas escamatorias q se encuentran en la vecindad, y estas clulas son las clulas dendrticas y existen clula dendrticas y macrfagos q residen en la mucosa. Y estas clulas dendrticas estn siempre sensando, no producen una resp inflamatoria, xq imagnense ms aun en el intestino, si estamos expuestos a antgenos de la comida y hay una resp frente a cada estimulo q esta sensando la clula dendrtica o el macrfago, viviramos con un inflamacin, la caracterstica q tienen estas clula es q tienen una tolerancia o una baja capacidad de hacer una resp inflamatoria, de mantener una homeostasis, pero si existe un patgeno, si lo van a reconocer, xq van a presentar ciertas molculas q los hacen distintivos a una bacteria de la flora comensal. La clula dendrtica va a capturar el antgeno y va a migrar al ganglio linftico ms cercano u rgano linfoide secundario para presentarle el antgeno al linfocito. En el rgano linfoide es donde ocurre la conexin entre la resp inmune innata y adaptativa. Estos procesos de reconocimiento inicial ocurre en el primer da y la activacin de los linfocitos T y B requieren entre 5 a 7 das, entonces tiene que haber un proceso de maduracin de ciertos clones, que parte en esta presentacin de antgeno en el rgano linfoide ms cercano. Si estos patgenos llegan a la circulacin sangunea, estos van acceder al Bazo, y ah va haber una activacin de una respuesta inmune adaptativa. Entonces depende el lugar de encuentro del antgeno, si es a nivel de la mucosa o est libre en la circulacin.

La barrera epitelial es una estructura no tan solo fsica, sino q tiene cierta actividad, como lo muestra a nivel de los epitelios tanto respiratorio como gastrointestinal, donde existen cilios, q evitan q un patgeno se adhiera a la superficie del epitelio. Otra caracterstica de los epitelios (nivel respiratorio, intestino) es q existen clula secretoras de glicoprotenas q forman un mucus y otras clulas secretan pptidos bactericidas (antimicrobianos), q se llaman defensinas, q defienden una resp bacteriana. Son molculas pequeas, pptidos, q x ej en el intestino, las clula de Paneth, se encuentran en la base de la cripta intestinal, y estas clulas llenas de grnulos producen estas defensinas q tienen un efecto bactericida, o sea, generan poros en la superficie de las bacterias y virus y los destruyen. Estas clulas defensinas tienen capacidad de evitar una infeccin y tambin tienen una funcin quimiotactica, o sea, es una mol q a travs de un gradiente de concentracin puede atraer a una clula a un sitio. Entonces si se secretan al lumen van a ser bactericidas y se secretan hacia el lado basolateral del epitelio van a poder reclutar clulas inflamatorias. Otro componente de la resp inmune innata es el Complemento, q son protena producidas en el hgado y que existen ciertas protena q cumplen funciones, por ej, lectinas q reconocen azucares como manosa de los patgenos, protenas de Surfactante pulmonar y Ficolinas, y estas molculas reconocen la parte hidrocarbonada del patgeno y generan un complejo q se llama complejo ataca membrana. Estas protenas del complemento estn preformadas y rpidamente ejercen su efecto antes q se active la resp adaptativa. Existen 3 vas por las q el Complemento se puede activar, directamente a travs del reconocimiento o combinados con anticuerpos. Clulas centinelas del sistema inmune innato presente en los tejidos: macrfagos de tejido, mastocitos y clulas dendrticas inmaduras que inducen inflamacin y activan la inmunidad adaptativa. Como parte del proceso de la resp inmune, van de la mano un evento q tiene q ver con la resp inflamatoria, y sta tiene ciertas caractersticas q estn representadas en el diagrama: Calor, rubor, hinchazn, dolor y prdida de la funcin. Si esto se perpeta y no hay una resolucin de estos procesos se pierde la funcin. Si hay un proceso infeccin, inevitablemente va a haber una resp inflamatoria y eso es lo q pasa x ej en la injuria despus de un corte en la piel y se ven clulas q van reclutndose y acercndose al sitio de dao, estas clulas son de la resp inmune innata como clulas polimorfonucleares, macrfagos fundamentalmente. Si este proceso se mantiene en algunas patologas inflamatorias crnicas, x ej artritis reumatoide, enfermedad de crohn q duran aos y tienen recurrencia, en ese caso, esos procesos inflamatorios van a estar representados por clulas de la resp inmune adquirida, va haber una infiltracin masiva de linfocitos y eso nos va a permitir histolgicamente distinguir un proceso ms crnico de uno ms agudo. Entonces en el dao de la piel, genera una resp temprana (reclutamiento celular) q va acompaada de una resp inflamatoria.

Estas clulas q estn conformando esta barrera, ya sean, queratinocitos de la piel o clulas epiteliales q se irritan por un patgeno intestinal, van a producir citoquinas inflamatorias. Existen 3 citoquinas caractersticas en el proceso inflamatorio, la TNF, la Interleuquina (IL) 1 - y la IL 6, y pueden ser producidas por un queratinocito cuando es dao en la piel, por una clula epitelial frente a una infeccin bacteriana y por clulas de la resp inmune. Estas mol, fundamentalmente TNF, van a tener q ver con este aumento de la permeabilidad de las barreras, incluso de la hematoencefalica. Tambin la IL1-. Esto tiene q ver con una desorganizacin de las Tights junctions o uniones estrechas, donde estas citoquinas las desorganizan, entonces esa integridad q exista entre clulas epiteliales y endoteliales se pierde y eso tambin se ha visto q ocurre en la barrera hematoencefalica. En esta imagen de MB, se muestra un vaso y algunas clulas estn en contacto con la pared del vaso, existen algunas q estn ms adheridas q otras y eso ocurre normalmente siempre en la proporcin de clulas q esta como ms pegada a la pared del endotelio pero recirculan como mas en el lumen. Despus del dao en la piel o en alguna de las barreras, estas clulas q estaban migrando y q estaban en contacto directo con el endotelio, ahora van a empezar a traspasar hacia los tejidos donde hay un proceso infeccioso. En el traspaso, estas clulas sufren deformaciones y van estableciendo asociaciones con las clulas del endotelio, pueden llegar a la lmina basal y acceder a otros territorios. Una de las clulas q primero atraviesan y llegan a un territorio, son los neutrofilos. Esta clula es fagocitica y tiene un ncleo polimrfico y esta es la primera clula q es atrada o reclutada. Los neutrofilos tienen una mb plasmtica en la cual expresan molculas en la superficie, q le ayudan a poder atravesar y llegar hacia el otro lado, estas son receptores y molculas de adhesin y una de ellas son las integrinas, q le permiten establecer con el endotelio, una conexin ya q tienen su contraparte, ligando en el endotelio. Cuando ocurre este dao, adems de las citoquinas inflamatorias, el epitelio y los queratinocitos producen una citoquina q es la predilecta de neutrofilos, q se llama IL-8. Es predilecta porq es una quimioquina. Cuando hay un dao, el epitelio o los queratinocitos producen mucha cantidad de IL-8, hay una gradiente de concentracin, hay mucha cantidad y se va diluyendo pero es capaz de llegar hacia el endotelio, y este neutrofilo q est circulando en el endotelio va a sensar esta IL-8 q viene de otro tejido. La va a reconocer o sensar las trazas de IL-8 a travs de receptores (aumenta la cantidad para detectar) en la superficie del neutrofilo, de esta manera el neutrofilo, adems de unirse con el endotelio, va a tener que arreglrselas para migrar, entonces si estaba normalmente rodando y a veces en contacto con el endotelio, aqu cuando se produzca esta adhesin, este neutrofilo se va a activar, se va adherir mucho mas fijo y va a tratar de migrar. Estos queratinocitos o algn macrfago tambin van a producir TNF, IL 1 y la IL 6, entonces si hay algn dao, van a aumentar tanto la permeabilidad del epitelio o de la piel como del endotelio, y al aumentar la permeabilidad se le hace ms fcil al neutrofilo poder migrar. El neutrofilo adems, cuando va migrando se deforma, y lo que lo mantiene es el citoesqueleto, entonces estas mol inflamatorias lo que hacen tambin es alterar el citoesqueleto para q l se pueda abrir paso en el endotelio y pueda

acceder a donde est el patgeno. Esto siempre siguiendo el gradiente de IL-8. El TNF adems de aumentar la permeabilidad del endotelio va a aumentar cantidad de protenas en la superficie del endotelio (ligandos del neutrofilo). Inflamacin: Neutrofilos vs. Monocitos Inflamacin aguda se caracteriza inicialmente como un aumento neutrofilos; posteriormente predominan los monocitos. Este proceso es controlado por quimioquinas secretadas por las clulas endoteliales. Los neutrfilos se encargan de destruir bacterias y presentan vida corta. En general, estos daan los tejidos como un efecto secundario a su funcin principal. Los monocitos son clulas MULTIPOTENCIALES, dependiendo de las seales de citoquinas: +IFN-: adquiere un fenotipo altamente destructor, similar a neutrofilos +IL-10: adquiere un fenotipo cicatrizador de heridas o reparador +GM-CSF: adquiere un fenotipo de clula dendrtica, que propaga la activacin de la respuesta inmune adaptativa Los monocitos q se encuentran en la circulacin, cuando migran a los tejidos, se diferencian a macrfagos q tienen mayor capacidad fagocitica. El macrfago y el neutrofilo son fagociticos, pero la vida media del neutrofilo es sper corta comparada con el macrfago q puede seguir viviendo y seguir fagocitando. Otra diferencia es q los neutrofilos tienen distintos tipos de grnulos, uno de ellos q tienen q ver con el proceso de fagocitosis, q al fagocitar un patgeno despus se fusionan con el lisosoma y pueden generar un fagolisosoma y se va a tratar de eliminar al patgeno por enzimas q generan radicales de oxigeno y nitrgeno, alteran PH, todos mecanismos q puedan destruir al patgeno y de tal manera de alterar las protenas y el acido nucleico de l. Pero tambin tienen otros grnulos q algunos producen mieloperoxidasa, lisosimas y defensinas, o sea, adems de fagocitar al patgeno, lo bombardea con defensinas para poder tenerlo un poco mas domado, xq generan orden en la pared del patgeno. Tambin tienen unas enzimas metaloproteinasas q degradan el colgeno y protenas de la MEC, entonces para poder el macrfago acceder tiene q ir abrindose camino y al ir secretando estas protenas pueden ir digregando la MEC, entonces en procesos inflamatorios sostenidos si hay una alta produccin de metaloproteinasas puede generar un dao de los tejidos, si esto es para poder q el neutrofilo acceda no va hacer gran dao, pero si esto se mantiene en el tiempo puede generar una gran dao. Esto es ancestral. Hay un reconocimiento de mol q estn presentes en los patgenos pero no en los hospederos y se llaman PAMPs (patrones moleculares asociados a patgenos). Son importantes para q el patgeno sobreviva y no han cambiado a lo largo de la evolucin. Un ej son los proteoglicanos, y las bacterias gram + no lo tienen. Otros PAMPs son los lipopolisacaridos y estn en las bacterias gram - . Tambin se ha visto q los cidos nucleicos virales y bacterianos, q son necesarios para q el virus y la bacteria se duplique y propague, tambin son PAMPs. Los PAMPs son reconocidos por receptores q se llaman PRRs. Hay muchos tipos de receptores q reconocen a las gram -, a las gram + y hay muchos PRRs. Estos receptores de manosa q son parte del sistema del complemento y reconocen las lectinas, ellas serian PAMPs, los receptores Scavengers o basureros, estos q reconocen formyl- metionina llamados receptores N-formyl-metionina. Hay otros muy conocidos llamados Toll-like receptors. Los receptores basureros estn presentes en los macrfagos, y uno de ellos es el CD-14. Este fue el primero q estuvo asociado con el reconocimiento de el lipopolisacarido el L3 de las gram - , pero a diferencia de otros receptores este scavenger est inserto en la mb plasmtica y no se saba como poda funcionar solo anclado a la mb, esa funcin era produccin de TNF, IL 1, IL-6 y quimioquinas como la IL-8, hasta que aos despus (1985) una alemana, Christiane Nusslein-Volhard, descubri un gen (gen Toll) en la mosca q tenia q ver con el desarrollo polar, todo el eje dorsoventral de la mosca, al tratar de ver en q parte del desarrollo tenia q ver ese gen, vio q la mosca era un monstruo porque se infectaba con hongos, o sea en alguno de estos mutantes q genero en ese gen vio q la mosca se infectaba con hongos.

10 aos despus vieron q ese gen tenia q ver, aparte con el desarrollo embrionario de la mosca, con la resp inmune y el doctor Janeway descubri un homologo en mamferos, y lo llamo receptor de tipo toll o toll-like receptors (TLR). Este homologo direcciona la resp inmune adaptativa. Se vio q el lipopolisacarido (LPS) era reconocido por el TLR-4, pero el CD14 era el q reconoca al LPS entonces haba algo q no cuadraba, lo q pasaba era q el TLR tiene un dominio intracelular, y tiene una regin interna, q es lo q le permite guiar la seal de reconocer al LPS para q el macrfago o clula dendrtica produzca todas estas citoquinas. En cambio el CD14 no tiene esta parte intracelular para q a nivel del ncleo, active factores de transcripcin y nuevos genes. Lo que hacen, el CD-14 y el TLR-4, es una cooperativa, se juntan y funcionan en bloque para inducir la produccin de citoquinas. Los PAMPs q hablbamos, los peptidoglicanos, los cidos nucleicos virales de los retrovirus, compuestos antivirales, DNA de bacterias, entre otros, son reconocidos por los receptores toll-like, o sea, son bastantes selectivos para reconocer, a pesar de q no es tanta la diversidad. Estos receptores forman dmeros. En el caso de una clula dendrtica, cuando se encuentre inmadura tiene una alta capacidad fagocitica, y la pierde cuando fagocito, pero para poder fagocitar y poder reconocer a ese patgeno, tiene q tener mucho TLR en la superficie. La clula dendrtica proviene de un monocito. Cuando madura, la clula dendrtica aumenta de tamao pero los TLRs disminuyeron significativamente y aumenta su capacidad para presentar el antgeno (aumenta CD80 y MHC clase II). Hay otros TLRs, los q reconocen partculas virales, mas q nada los cidos nucleicos de retrovirus x ej el del HIV, q se encuentran en compartimientos endosomales o en fagolisosomas.