Bioqumica Mdica I Jorge Contreras Pineda Prctica: TOMA DE MUESTRA DE SANGRE

OBJETIVO: Conocer todos los fundamentos tericos y prcticos para tomar una muestra de sangre venosa en la fosa antecubital.

MATERIALES Y REACTIVOS: Algodn y gasa Bandas adhesivas 12 torniquetes 12 tubos tapa lila 12 tubos tapa roja 24 agujas color verde 12 caperusas para vacutainer 12 jeringas de 3 mL Guantes Alcohol Agua y jabn Centrfuga 3 micropipetas de 1 mL 12 puntas azules

Nota: Los estudiantes deben tener la gua de laboratorio, bata, guantes, cada uno una jeringa de 3 mL.

FUNDAMENTOS TERICOS Y PRCTICOS La sangre es un tejido lquido del organismo, el cual esta formado por dos partes bsicas que son: Clulas y plasma. Paquete celular .- esta constituido por glbulos rojos eritrocitos, glbulos blancos leucocitos y plaquetas trombocitos Plasma .- Para las muestras de sangre tomadas con anticoagulante; parte lquida que transporta protenas, hormonas, minerales, gases, polisacridos, azcares, electrolitos, etc Suero Para las muestras tomadas sin anticoagulante, parte lquida que por activacin de los factores de coagulacin el fibringeno se ha activado para producir una malla de fibrina que forma el cogulo. En el cogulo se atrapan componentes celulares de la sangre.

Plasma Glbulos blancos

Glbulos rojos

Elementos Formes
(nmero por mm) Leucocitos 5,000 -10,000

Neutrfilos 57 - 67 %

Eosinfilos 1-3%

Total
( volumen)

Eritrocitos 4.2 - 6.2 Millones

Basfilos 0 - 0 75 %

Elemento s Formes

Peso Corporal
Sangre 8 % Plasma 55 %

Plaquetas 140,000 -340,000

Linfocitos 25 - 33 %

Peso del Plasma Protenas 7%

Monocitos 3-7%

Otros Lquidos y Tejidos 92 %

Agua 91.5 %
Sales, enzimas hormonas etc. 1.5 %

PROCEDIMIENTO IDEAL PARA LA VENOPUNCIN Entablar comunicacin con el paciente Identificarlo adecuadamente Inspeccionar el rea de la fosa antecubital Identificar visualmente la vena Colocar el torniquete Palpar la vena (Asegurarse de que no pulse, si pulsa es una arteria) Limpiar el rea con el desinfectante del centro hacia la periferia. No volver a tocar el rea una vez desinfectada. Colocar la aguja alineada con la vena, en un ngulo de 15 grados y con el bisel hacia arriba. Puncionar la vena en lo posible con un solo movimiento directo y nico piel y vena Retirar el torniquete tan pronto comience a fluir la sangre dentro del tubo o la jeringa, los hematomas se pueden producir por dejar el torniquete ms tiempo del estrictamente necesario. Una vez lleno el tubo retire la aguja Coloque una gasa o algodn firmemente en el sitio de la venopuncin mnimo por 1minuto. Finalmente coloque una banda adhesiva por 15 minutos

VARIACIN PRE-ANALITICA Cualquier factor (fisiolgico, tcnico de procedimiento) que puede afectar la concentracin de un analito, previo a su determinacin medicin en el laboratorio

INTERFERENCIAS EN LOS RESULTADOS DE LOS ANALISIS DE LA FASE PREANALTICA Estrs: glucosa, colesterol, protenas transportadoras, factores de la coagulacin y clulas sanguneas (aumentan valores). Ejercicios: glucosa, creatinina, CPK, HDL, potasio, factores de la coagulacin, eritrosedimetacin (VSG), prolactina, cortisol (aumentan valores). Ingestin de alcohol: Gamma glutamil transpeptidasa (GGT), alanino amino transferasa (ALAT), aspartato amino transferasa (ASAT), lpidos, factores de la coagulacin, glucosa, uratos y triglicridos (disminuyen valores). Hbito de fumar: glucosa, PTG, colesterol, HDL, amilasa y lipasa (aumentan valores). Cambios posturales y estasis venoso: Producen de 10 a 20 % de hemoconcentracin de protenas, enzimas y sustancias ligadas a protenas como: cortisol, tiroxina, calcio, hierro, fsforo y lpidos (aumentan valores).

INTERFERENCIAS QUE MEDICAMENTOS.

PUEDEN

PRODUCIRSE

POR

ALGUNOS

Salicilatos: Recuento de plaquetas (disminuyen) y de eosinfilos (aumentan). Glicemia, PTG, colesterol, lpidos, eritrosedimentacin (aumentan valores). ALAT, ASAT y CPK (aumentan o disminuyen valores). Vitamina C: Creatinina y uratos (aumentan valores), Glicemia (disminuyen valores). Anticonceptivos orales: Glicemia, PTG, fosfatasa alcalina, lipasa, hierro, potasio, eritrosedimentacin y triglicridos (aumentan valores). Colesterol y protenas (disminuyen valores). Esteroides: Glicemia y PTG (aumentan valores). Lpidos, eosinfilos y eritrosedimentacin (disminuyen valores). Tiazidas: Glicemia, GPT, uratos, calcio, lipasa y filtracin glomerular (aumentan valores); sodio y potasio (disminuyen valores).

Estrgenos: Lipasa y potasio (aumentan valores); Colesterol y lpidos (disminuyen valores). Hipotensores: Lipasa (aumenta valores); Filtrado glomerular (aumenta o disminuye valores).

PARAMETROS AFECTADOS POR LA HEMOLISIS Glucosa AST Bilirrubinas Calcio, Potasio Hierro LDH Potasio

NORMAS IMPORTANTES TOMA DE MUESTRAS DE SANGRE Tomar antes de cualquier procedimiento Diagnostico y/o Teraputico. No colocar el torniquete por ms de 2 minutos. Marcar los tubos antes de la toma de muestra. Invertir por 5 veces todos los tubos Dejar llenar hasta la marca. Registrar la hora de la toma Durante 15 minutos el paciente deber permanecer sentado o acostado

NUNCA EXTRAIGA MUESTRAS DE: Mismo brazo de una mastectoma Zonas de Petequias Venas lesionadas y/o obstruidas Zonas de terapia intravenosa reas quemadas, cicatrizadas o tatuadas Desviaciones o injertos reas con hematomas, edemas o infectadas

TIPO DE PUNCIONES Puncin Venosa Venas del brazo Venas de la mano Puncin Capilar: Se obtiene poca cantidad de muestra, riesgo de hemlisis y coagulacin. De sencilla ejecucin, adecuada para pacientes: peditricos, obesos y quemados. Dedo Taln

Puncin Arterial

IMPORTANCIA DE LA PUNCIN VENOSA La puncin venosa es la ms comnmente utilizada en el Laboratorio Clnico para poder obtener una muestra sangunea., se puede realizar en la mayora de los pacientes ambulatorios o de consulta externa y en algunos pacientes en el rea de hospitalizacin.

OPCIONES EN TOMA DE LA MUESTRA DE SANGRE

Cubital Ceflica Baslica Yugular

RECOLECCIN DE SANGRE

Sistema de Extraccin al VacoBD Vacutainer

Caractersticas Sistema cerrado Sistema estril Relacin apropiada entre sangre y aditivo Proceso fcil de llenado de los tubos

Beneficios Disminuye el riesgo de hemlisis Previene la contaminacin de la muestra Reduce el riesgo de infeccin en el personal (Bioseguridad) Se mantiene la integridad de la muestra Disminuye el riesgo de errores analticos Simplifica la preparacin de la muestra

AGUJAS

Agujas para toma de muestras con tubos al vaco Normalmente agujas de calibre 20 G (color amarillo), 21 G (color verde), 22 G (color negro) con longitudes de 1 a 1 1/2 pulgada, son adecuadas para toma de sangre, a seleccionar de acuerdo con el vaso sanguneo a puncionar. Agujas hipodrmicas estriles y desechables. Se consiguen en el mercado un amplio surtido ya sea por longitud (de 1/2 a 1 1/2 pulgadas) y calibres (18 a 30 G) Las mas usadas son 18, 19, 20 y 21 con longitudes de acuerdo con la prctica que se quiera manejar.

PUNCION AGUJA CONVENCIONAL VS. VACUTAINER Dimetros externos iguales Dimetro interno del vacutainer es mayor Aumenta la posibilidad de hemlisis

CODIFICACION DE COLORES PARA LOS TUBOS

TAPA LILA EDTA (Acido etilen-diamino-tetra-actico, quela calcio), no afecta la morfologa celular ni VSG, baja toxicidad. Citrato de sodio, quela calcio Amarillo Sin Anticoagulante Cuadro Hemtico Pruebas de Coagulacin Qumica, Serologa, Hormonas.

TAPA AZUL TAPA ROJA

TAPA VERDE Heparina, no altera tamao de eritrocitos, inhibe efecto de trombina sobre fibringeno TAPA GRIS Oxalatos

Inmunogentica, gasometra Glucosa

CRITERIOS DEL LABORATORIO PARA EL RECHAZO DE MUESTRAS Identificacin inadecuada Volumen de sangre inadecuado

Transporte inapropiado Muestras de sangre total coagulada.

Utilizacin de tubos de sangre inadecuados. Hemlisis

TECNICA DE TOMA DE MUESTRA Preparar el material necesario Identificar al paciente por su nombre y apellido Pedirle al paciente se siente Colocarse guantes Coloque el brazo dejndolo apoyado sobre un lugar firme Solicite empue la mano Escoger el sitio de venopuncin Seleccionar la vena Aplicar el torniquete Limpiar la piel con algodn impregnado en solucin antisptica, Puncionar la vena Introducir el tubo para su llenado Retirar el torniquete y aguja Colocarle un algodn Descartar la aguja en un recipiente para material corto punzante

COMPLICACIONES - RIESGOS Infeccin- Recomendacin, estricta tcnica asptica, lavado de manos, utilizar material estril. Consecuencia: Tromboflebitis

Hemorragia- Factores de riesgo: administracin de medicamentos anticoagulantes. Qu hacer?: aplicar presin local constante, tomar signos vitales, colocar apsitos, avisar al medico Desmayo- Qu hacer?: Retirar la aguja inmediatamente del lugar de puncin, sostener al paciente para evitar cada, acostar al paciente en una camilla, adoptar posicin de Trendelemburg, Colocar algodn impregnado con alcohol frente a la nariz, Inspeccionar Signos Vitales, Aflojar ropas apretadas, Mantenerlo acostado durante 10 a 15 min. Hematoma: Causa: perforacin de la pared venosa , deslizamiento de la aguja fuera de la vena, derrame sanguneo. Qu hacer?: : retirar el torniquete, retirar la aguja, aplicar presin local, la puncin venosa se realiza en el otro brazo. Recomendaciones: remueva el torniquete antes de remover la aguja, aplique presin sobre el sitio de la puncin, aplicar hielo local, analgsico. Dolor Causa: Puncin de un nervio, excesiva tensin del torniquete. Recomendaciones Comprobar presin del torniquete, retirar la aguja.

Punciones Mltiples: Causa: Fallo en la extraccin de sangre despus de varios intentos, puncin repetitiva en el mismo sitio, por el tamao de las venas, falta de entrenamiento adecuado, utilizacin de aguja de tamao inadecuado

PROCEDIMIENTO DE LA PRCTICA Los estudiantes deben organizarse en parejas, un estudiante debe tomar una muestra de su compaero con vacutainer y otra con jeringa. Posteriormente, el otro estudiante de la pareja hace lo mismo con su compaero. Un estudiante de cada pareja trabaja con tubo de tapa lila y el otro con tubo de tapa roja. Una vez tomadas las muestras en los tubos, se procede a hacer centrifugacin y transferir en otro tubo el plasma o suero segn se trate de tubo lila o rojo, respectivamente. Centrifugue las muestras 5 minutos a 3000 x g en una centrfuga sexolgica.