Universidade do Estado do Rio de J aneiro

Faculdade de Tecnologia
Campus Regional de Resende
Departamento de Qumica e Ambiental
PROCESSOS BI OQU MI COS
I nt r odu o
Conc ei t os Ger ai s
Pr oc esso
Equi pament os
Profa: Denise Godoy
E-mail: denisegodoy@uerj.br
TECNOLOGIA DAS
FERMENTAES
Produo industrial de bens de
consumo
Microorganismos (biomassa)
Polissacardeos & Aminocidos
cidos, lcoois e solventes
Enzimas e vitaminas
Antibiticos e esterides
MICROBIOLOGIA INDUSTRIAL
Utilizao industrial de microrganismos
como agentes de degradao e sntese
Preservao de madeiras
Produo de alimentos
Tratamento de efluentes
CORROSO MICROBIOLGICA
Deteriorao de materiais
Produo materiais biodegradveis
ENGENHARIA BIOQUMICA
Processos de esterilizao, agitao, aerao e
separao
Cintica e termodinmica dos processos bioqumicos
Operao e controle de processos
Construo de equipamentos e escala de trabalho
Processos Contnuos e Descontnuos de fermentao
BIOTECNOLOGIA
o conjunto de conhecimentos tcnicos e
mtodos, de base cientfica ou prtica, que
permite a utilizao de seres vivos como
parte integrante e ativa do processo de
produo industrial de bens e servios
BIOTECNOLOGIA VERDE
Abrange a rea de utilizao
da cultura moderna de plantas.
Introduzidas resistncias
direcionadas contra insetos,
fungos, vrus e herbicidas
Classificao
moderna
BIOTECNOLOGIA BRANCA
Utilizao da biotecnologia
dentro da indstria qumica.
Produzir bioprodutos de
interesse comercial aplicando
recursos naturais.
BIOTECNOLOGIA VERMELHA
Utilizao da biotecnologia
na rea mdica.
Desenvolvimento de novos
medicamentos; diagnstico
(chips de DNA, sensores
biolgicos)
COMPARAO
PROCESSOS BIOQUMICOS X PROCESSOS QUMICOS
PROCESSOS QUMICOS: conjunto de reaes qumicas
classificado de acordo com a natureza das matrias primas e
produtos
Exemplos:
Processo Inorgnico- Metalurgia do Alumnio Metlico
Processo Orgnico- Produo do cido Acetil Saliclico (AAS)
B A
A
2
3
2
0 / /
3 2
2
6 3
O Al O Al
e AlF Na
+

A
O H H CO CO CH H C o O CO CH H CO OH H C o
SO H
2 2 3 4 6
/
2 3 2 4 6
) ( ) ( ) (
4 2
+ +
A
COMPARAO
PROCESSOS BIOQUMICOS X PROCESSOS QUMICOS
PROCESSOS BIOQUMICOS: so tambm processos qumicos,
caracterizados pelo mecanismo das transformaes produzidas por
catalisadores biolgicos (ENZIMAS) contidos nas clulas vivas
(microrganismos).
Exemplos:
Processo Inorgnico- Oxidao de minrios sulfurosos por bactrias
Processo Orgnico- Fermentao alcolica da sacarose
P S
A
( )
2 4 2
4 4 xH SO Me O xH MeS
x
enzimas
x
+ +
2 5 2 6 12 6
2 2 CO OH H C O H C
enzimas
+
Normalmente empregam FASE AQUOSA como solvente
Operam em condies brandas (fisiologicamente compatveis) -
as enzimas so biomolculas que atuam em FAIXAS ESTREITAS de:
temperatura
presso
pH
potencial redox
fora inica
presso osmtica
A energia gerada nas reaes a energia qumica proveniente da
transformao da molcula do substrato (matria prima, reagente).
No necessita normalmente de energia trmica ou radiante.
CARACTERSTICAS DOS PROCESSOS BIOQUMICOS
BIOQUMICOS
Decorrentes de atividade microbiana
Catalisadores de alta especificidade
Condies Brandas: T, p, pH, redox
Maiores volumes
Requerem Esterilidade
COMPARAO
PROCESSOS BIOQUMICOS X PROCESSOS QUMICOS
QUMICOS
Decorrentes de reaes qumicas
Catalisadores no especficos
Condies Enrgicas: T, p, pH, redox
Menores volumes
NO Requerem Esterilidade
PROCESSOS FERMENTATIVOS: so promovidos em sua
totalidade por ao de clulas microbianas vivas. (fase heterognea)
X = clulas microbianas (integras, vivas)
PROCESSOS ENZIMTICOS: so promovidos por ao de enzimas
extradas das clulas microbianas. (fase homognea)
E = enzimas (extrato celular)
TIPOS DE PROCESSOS BIOQUMICOS
P S
X

P S
E

So os processos qumicos conduzidos por meio de clulas
microbianas.
Conceito antigo(Pasteur sc XIX) - processos qumicos atravs dos
quais substncias orgnicas do origem a outras substncias mais
simples por meio do metabolismo celular.
Conceito Atual - processos qumicos conduzidos por
microorganismos cujo produto pode ser:
um excreta da clula
um componente celular
a prpria clula
PROCESSOS BIOQUMICOS - Fermentativos
Processos Desassimilativos
degradao do substrato (molcula complexa) produzindo
molculas mais simples, para obter energia sob forma de ATP.
tambm chamado de catabolismo.
Respirao Anaerbica Incompleta(Ciclo Glicoltico), (32,6Kcal/ mol)
Respirao Aerbica Completa(Ciclo de Krebs), (688Kcal/ mol)
PROCESSOS DE BIOTRANSFORMAO
E O H CO O O H C
levedura
+ + +
2 2 2 6 12 6
6 2 6
E OH H C CO O H C
cerevisae S
+ +
5 2 2
.
6 12 6
2 2
OXIDAO
PARCIAL
OXIDAO
TOTAL
Processos Assimilativos
a partir de substratos simples so sintetizados produtos mais
complexos, com gasto de energia armazenada na forma de ATP.
tambm chamado de anabolismo.
Exs: Obteno de antibiticos, enzimas, protenas, hormnios
Produo de Vitamina B12 (Streptomyces griseus)
Tempo de Produo: 3 a 5dias
Produtividade (gL
-1
h
-1
): 2x10
-5
PROCESSOS DE BIOTRANSFORMAO
PCo O N H C O H C
Co
14 14 88 63 6 12 6
2

+
Exemplos
cido Ctrico (Aspergillus niger)
cido Lctico (Lactobacillus delbrueckii)
cido Glucnico (Aspergillus niger)
PROCESSOS DE BIOTRANSFORMAO
O H O H C O O H O H C
2 7 8 6 2 2 11 22 12
4 2 + + +
Tempo de Produo: 72h
Produtividade (gL
-1
h
-1
): 2,22
Tempo de Produo: 72h
Produtividade (gL
-1
h
-1
): 1,06
( ) H CO OH CH CH O H C
2 3 6 12 6
2
Tempo de Produo: 36h
Produtividade (gL
-1
h
-1
): 5,20 7 12 6 2
2
1
6 12 6
O H C O O H C +
Exemplos
cido Itacnico (Aspergillus terreus)
Acetona-Butanol (Clostridium acetobutilicum)
Etanol (Saccharomyces cerevisiae)
PROCESSOS DE BIOTRANSFORMAO
Tempo de Produo: 72h
Produtividade (gL
-1
h
-1
): 0,28 2 2 4 6 5 6 12 6
3H CO O H C O H C + +
%) 10 ( %) 30 ( ) ( %) 60 (
5 2 2 3 9 4 6 12 6
OH H C CO CH OH H C n O H C + +
Tempo de Produo: 40h
Produtividade (gL
-1
h
-1
): 0,30
Tempo de Produo: 12h
Produtividade (gL
-1
h
-1
): 5,0
OH H C CO O H C
5 2 2 6 12 6
2 2 +
A prpria clula
Lvedo Prensado
Saccharomyces cerevisiae
Microbiomassas de Algas(SCP*)
Scenedesmus quadricauda
Spirulina ssp.
Microbiomassas de Leveduras (SCP*)
:
Torula utilis
Candida ssp.
Componente Celular no Excretado
Pigmentos carotenides(pr-vitamina A)
leveduras do gnero Rhodotorula
algas do gnero Chlorella.
Lipdeosproduzidos por certos gneros de fungos no interior dos miclios.
Estes produtos so obtidos por ruptura das clulas e extrao destes.
PRODUTOS VISADOS
Um excreta celular
lcool etlico
Saccharomyces cerevisiae
cido Lctico
Lactobacillus
PRODUTOS BIOTECNOLGICOS
VOLUME X VALOR
CATEGORIA ATIVIDADE
VOLUME ELEVADO & Metano, etanol, biomassa para
BAIXO VALOR animais, depurao de guas,
tratamento de resduos/despejos.
VOLUME ELEVADO & Aminocidos, c. orgnicos,
VALOR INTERMEDIRIO gneros alimentcios, lvedo panificao,
acetona, butanol, polmeros, metais
(lixiviao e acumulao).
VOLUME BAIXO & Antibiticos, hormnios, vacinas e demais
VALOR ELEVADO frmacos, enzimas, vitaminas.
Processo Bioqumico
H milhares de anos, o homem faz uso da microbiologia aplicada,
mesmo sem ter conscincia da existncia dos microrganismos. A
fabricao de po, vinho, cerveja, leites fermentados, queijos,
transcende de muito a era crist.
H mais de meio sculo, a explorao econmica da fermentao
restringia-se quase que unicamente produo de bebidas
alcolicas e de lcool retificado. Hoje, abrange reas mais amplas,
sendo empregada na obteno de alimentos fermentados,
protenas, vitaminas, cidos orgnicos e antibiticos.
Algumas substncias que so produzidas atravs da fermentao,
como solventes e etanol, hoje, pelo desenvolvimento das tcnicas
qumicas, podem, eventualmente, ser preparadas de forma mais
econmica por processos sintticos. Para a produo de
substncias mais complexas como os antibiticos e as enzimas,
necessria a utilizao da fermentao.
PROCESSOS BIOQUMICOS
ETAPAS FUNDAMENTAIS
UPSTREAM PROCESS
Tratamento da matria-prima
PROCESS = PRODUO
AGENTE CONVERSOR
(catalisador biolgico, microorganismo)
MEIO DE REAO REATOR
(solvente, nutrientes) (Biorreator)
DOWNSTREAM PROCESS
Separao / Purificao do Produto
FASES DE UM PROCESSOS BIOQUMICO
PREPARO DO
INCULO
(agente microbiano)
PREPARO DO MEIO
(nutrientes, matria
prima, solvente)
BIORREATOR
(Fermentador)
controle de parmetros
de processo
SUPRIMENTO
DE AR (O
2
)
RECUPERAO &
PURIFICAO DO
PRODUTO
ESTERILIZAO
DO MEIO
ESTERILIZAO
DO AR
Sub-produtos
Resduos
FORMAS DE CULTIVO DOS AGENTES MICROBIANOS
EMPREGADOS EM PROCESSOS INDUSTRIAIS
Cultivo Puro - Todas as clulas so da mesma espcie (ocorre na maioria
dos processos industriais).
Ex.: Produo de antibiticos por cepas de actinomicetos.
Cultivo Misto - Vrias espcies de microrganismos atuam em conjunto.
Ex.: Tratamento de resduos e macerao de fibras.
FONTES DOS AGENTES MICROBIANOS
EMPREGADOS EM PROCESSOS INDUSTRIAIS
Isolamento a partir de recursos naturais
compra em colees de culturas
obteno de mutantes naturais
obteno de mutantes induzidos por mtodos convencionais
obteno de microrganismos recombinantes por tcnicas de engenharia
gentica
CARACTERSTICAS DOS AGENTES MICROBIANOS
EMPREGADOS EM PROCESSOS INDUSTRIAIS
- Ser de fcil cultivo - exigncia nutritiva simples
- No ser patognico
- No produzir subprodutos txicos, permitindo elevado
acmulo de substncias no meio (efeito de inibio, custo de
purificao, alta quantidade resduos de processo)
- No produzir substncias incompatveis com o produto
(Ex.:protenas x proteases)
- Constncia no comportamento fisiolgico
- Produtividade mais alta possvel
- Elevada converso de substrato em produto
- No apresentar facilidade de mutao
FASES DE UM PROCESSOS BIOQUMICO
PREPARO DO
INCULO
(agente microbiano)
PREPARO DO MEIO
(nutrientes, matria
prima, solvente)
BIORREATOR
(Fermentador)
controle de parmetros
de processo
SUPRIMENTO
DE AR (O
2
)
RECUPERAO &
PURIFICAO DO
PRODUTO
ESTERILIZAO
DO MEIO
ESTERILIZAO
DO AR
Sub-produtos
Resduos
CARACTERSTICAS DO MEIO DE FERMENTAO
- ser o mais barato possvel (abundncia,
disponibilidade da matria-prima)
- atender exigncias nutricionais do
microrganismo (agente transformao)
- auxiliar no controle do processo
(efeito tamponante, evitar formao de espuma)
- estabilidade dos componentes durante armazenagem
- ter composio razoavelmente fixa
- no causar dificuldades na recuperao do produto
ou no tratamento final do(s) resduo(s)
P
S
NUTRIO DOS ORGANISMOS
- ANIMAIS
quimiotrficos- obtm energia atravs de reaes qumicas
heterotrficos- exigncia de fontes orgnicas de carbono
- VEGETAIS
fotossintticos - obtm energia da luz solar
autotrficos- exigncia de substncias inorgnicas
litotrficas- utilizam compostos inorgnicos como aceptores de eltrons
organotrficas- utilizam compostos orgnicos como aceptores de eltrons
(algas e algumas bactrias)
(fungos e bactrias)
COMPONENTES DO MEIO DE FERMENTAO
- MACRO-NUTRIENTES: C, N, O, H, S, P
fontes de carbono: CO
2
, CO
3
2-
/ HCO
3
-
, lipdeos, cidos
orgnicos, lcoois, acares, polissacardeos (amido, celulose)
fontes de nitrognio: N
2
(fixao nitrognio - algas e bactrias),
sais inorgnicos - NH
4
+
e NO
3
_
(fungos, algas e bactrias), fontes
orgnicas - aminocidos ou hidrolisados proteicos (fungos e
algumas bactrias)
fontes de fsforo: PO
4
3-
fontes de enxofre: SO
4
2-
COMPONENTES DO MEIO DE FERMENTAO
- MICRO-NUTRIENTES
potssio (K
+
): ativador de enzimas, regulador presso osmtica
magnsio (Mg
2+
): ativador de enzimas, fator de esporulao
ferro (Fe
2+
): sntese de citocromos e pigmentos
Fatores de crescimento : vitaminas, cidos graxos, alguns
aminocidos (compostos orgnicos essenciais = fornecimento
indispensvel)
- GUA - papel na solubilizao dos nutrientes, regulao
presso osmtica e trmica
- O
2
- receptor final de eltrons
TIPOS DE MEIOS DE FERMENTAO
- SINTTICOS
Ex: NH
4
Cl 1,0 g
K
2
HPO
4
1,0 g
MgSO
4
0,2 g
FeSO
4
0,2 g
CaCl
2
0,02 g
MnCl
2
0,002 g
NaMoO
4
0,001 g
dissolver em 1,0 L gua
- COMPLEXOS
Ex: extrato de carne, extrato de fgado (rgos/ vsceras animais)
extrato de vegetais (soja, arroz), extrato de malte
sangue, soro, peptona (hidrolisado de protenas)
extrato de levedura
caldo-de-cana, melao, farinha de trigo / milho / soja / cevada
gua de macerao de milho
composio qualitativa e
quantitativa bem definidas
contm produtos cuja composio
qumica no bem definida
TIPOS DE MEIOS DE FERMENTAO
- SINTTICOS
meios de alto custo
- COMPLEXOS
menos onerosos
composio varivel (fabricante, lote, clima, safra, solo, variedade,
colheita, processamento)
necessitam instalaes para ajuste da composio do meio a
cada novo lote de matria-prima.
Problemas adicionais nas etapas de recuperao / purificao
do produto final, ou no tratamento dos resduos / efluentes.
Exemplos de matrias-primas
e substratos
MATRIA-PRIMA SUBSTRATO
Melao ART*, Sacarose (60%)
Mandioca Amido (50-70%)
Madeira Celulose (40-45%)

MATRIA-PRIMA FONTE EXEMPLO
Sacarneas
Monossacardeos
Dissacardeos
Caldo de Cana
(16% ART*)
Amilceas Amido
Farinhas de Arroz,
Mandioca e Milho
Celulsicas Celulose
Bagao de Cana
Raspas de Madeira

Tabela 1 - Matrias-primas e Teores de Fermentveis
Tabela 2 - Classificao das Matrias-primas
(*) ART - Acares Redutores Totais
Matrias-primas
convencionais
Mis e
Caldos
Sacarose Frutose
Razes e
Tubrculos
Ami do Maltose
Madeiras,
Sabugos,
Cascas e
Partes Areas
Celul ose Glicose
Degradao dos substratos
pelos microrganismos
Depende da diversidade enzimtica dos microrganismos industriais
SUBSTRATO ENZIMA PRODUTO MICRORGANISMOS
Glicose Glicofosfoquinase G-6-P
(
*
)
Todos microrganismos
Sacarose Invertase Glicose Saccharomices. cerevisiae
Amido Amilases Glicose +Maltose Aspergillus. niger

Celulose

Celulases

Glicose
Fusariumsolani
Trichoderma reesei
Clostridiumthermocellum

Tabela 3 - Enzimas existentes nos microrganismos fermentadores
Degradao dos substratos
pelos microrganismos
Enzimas no existentes nos
microrganismos fermentadores
Usando Enzimas Isoladas:
Amido Glicose Etanol
Amilases Leveduras

Celulose Glicose Etanol
Celulases Microrganismos

SACARIFICAO
Degradao dos substratos
pelos microrganismos
Empregando Tratamento Qumico:
Sacarose
Amido
Celulose
Hemicelulose
Glicose
Etanol, etc.
H+ / / p Microrgani smos
Classificao das
matrias-primas
MATRIAS-PRIMAS EXEMPLOS
Amilceas Gros, cereais, razes, tubrculos, etc.
Sacarneas Caldos, mis (melado e melao), etc.
Celulsicas Raspas de madeira, serragem, partes areas, etc.
Proticas Milhocina, vsceras de animais, etc.

Tabela 4 - Matrias-primas empregadas como substratos fermentveis
Matrias-primas
sacarneas
Sacarose Glicose produto
Hidrlise Fermenta
o
Glicose
+
Frutose
Matrias-primas
amilceas
Polissacardeo composto, formado por unidades glicosdicas.
a principal reserva energtica das plantas verdes.
O amido concentra-se principalmente nas razes e gros dos
vegetais.
O amido no assimilvel pelas bactrias e leveduras
diretamente, que so os microrganismos responsveis por
alguns processos.
A sacarificao a hidrlise das ligaes glicosdicas,
transformando o amido em aucares, carboidratos de
constituio e P.M. menores.
Matrias-primas
amilceas
Amido Aucares Produto
Sacarificao Fermentao
Sacarificao:
-Qumica
-Biolgica
-Bioqumica/Enzimtica
Matrias-primas
amilceas
Sacarificao Qumica:
Promovida por solues aquosas de cidos fortes
como o cido sulfrico (H
2
SO
4
) ou cido clordrico (HCl),
a temperatura e presso elevadas.
Baixo rendimento na etapa de fermentao por inibio
dos microrganismos
Corroso dos equipamentos
Degradao dos acares formados.
Amido
H
2
O / H+
Glicose
/ p
Matrias-primas
amilceas
Sacarificao Biolgica:
Empregam-se os microrganismos vivos como agentes
da sacarificao enzimtica.
Industrialmente o conhecido Processo Amilo, no qual
inocula-se inicialmente no mosto, um bolor altamente
sacarificante, como o Rhizopus delemar.
Aps a converso do amido pelo bolor, este eliminado
por aquecimento a ebulio do mosto, e posteriormente
inocula-se o agente da fermentao.
Matrias-primas
amilceas
Sacarificao Bioqumica:
Pool" de enzimas amilolticas, onde cada uma possui
uma forma especfica de ao.
As enzimas podem provir do malte, bactrias ou
bolores, e de acordo com suas propriedades pode-se
originar:
Amido
Enzimas /
H
2
O
Dextrinas
Maltose
Glicose
Matrias-primas
amilceas
Sacarificao
pelo Malte
Gros limpeza e classificao
Macerao
gua:gro 3:1; 10-12C
Germinao
Malte verde Malte seco
Amido
Pesagem/Moagem
Hidratao
Cozimento
Goma de amido
Agitao 65C/1h
Resfriamento 28 a 30 C
Matrias-primas
celulsicas
Fermentam aps hidrlise, que extrai acares presentes na
madeira, como a glicose presente na celulose:
* qumica
* enzimtica
* microbiolgica
Madeira e resduos da fabricao da pasta de papel podem ser
utilizados. Por causa da grande quantidade de resduos de material
celulsico disponvel, a fermentao direta desses materiais pode ser
de grande importncia econmica.
Matrias-primas
celulsicas
A converso da celulose atualmente, uma das opes exploradas
e investigadas em grande nmero de centros de pesquisa e
instituies cientficas .
A dificuldade em se obter uma hidrlise completa da celulose no
devida s ligaes da estrutura primria, |-1,4, mas s estruturas
secundrias e tercirias, respectivamente, ao estado cristalino e ao
invlucro protetor de lignina
Matrias-primas
celulsicas
Hidrlise cida
Com H
2
SO
4
a 150-180C
Acarreta danos ao equipamento
Degrada os acares formados
Proporciona um meio agressivo para a maioria dos agentes
fermentativos.
Hidrlise enzimtica
A hidrlise enzimtica vem mostrando ser o melhor caminho para
esta fase do processo, faltando apenas obter-se um pool
enzimtico eficiente.
Matrias-primas
celulsicas
Matria Prima
Lignocelulsica
Lignina
Celulose
cristalina
Pr-tratamento
Desli gni ficao
Glicose
Hidrlise
cida ou
Enzimtica
Fermentao
lcool
Outros
Produtos
Esquema para fermentao de
lignocelulsicos para produo de etanol
Matrias-primas
celulsicas
No Brasil, torna-se interessante o aproveitamento do bagao de
cana-de-acar que, por exemplo, produz um excedente de 4,7x 106
toneladas com 50% de umidade, correspondendo a uma grande
massa de celulose e hemicelulose, ambos fermentveis em condies
apropriadas.
COMPONENTE TEOR (%)
Celulose 40 - 45%
Hemicelulose 20 - 30%
Lignina 25 - 40%
Tabela 5 - Composio mdia do bagao de cana-de-acar
FASES DE UM PROCESSOS BIOQUMICO
PREPARO DO
INCULO
(agente microbiano)
PREPARO DO MEIO
(nutrientes, matria
prima, solvente)
BIORREATOR
(Fermentador)
controle de parmetros
de processo
SUPRIMENTO
DE AR (O
2
)
RECUPERAO &
PURIFICAO DO
PRODUTO
ESTERILIZAO
DO MEIO
ESTERILIZAO
DO AR
Sub-produtos
Resduos
Classificao dos Processos
Bioqumicos
QUANTO AO CATALISADOR
clulas vivas
enzimas
QUANTO DIVERSIDADE DO AGENTE MICROBIANO
cultura pura
cultura mista
QUANTO AO DESENVOLVIMENTO DO AGENTE
MICROBIANO
em superfcie
em profundidade
Classificao dos Processos
Bioqumicos
Cultivo em Superfcie
Classificao dos Processos
Bioqumicos
QUANTO DISTRIBUIO DO AGENTE
MICROBIANO
Biocatalisador/Biomassa suspensa (livre, imobilizada ou
confinada)
Biocatalisador/Biomassa fixa (biofilmes)
QUANTO TENSO DE OXIGNIO NO
BIORREATOR
aerbio (aerao natural ou forada)
anaerbio (sem aerao)
Classificao dos Processos
Bioqumicos
QUANTO CINTICA DO PROCESSO
Crescimento Associado
Crescimento Semi-Associado
Crescimento No-Associado
QUANTO FORMA DE CONDUO DO
PROCESSO
Batelada (Descontnuo)
Batelada Alimentada (Descontnuo)
Contnuo
As resistncias da transferncia de oxignio
para as clulas se d de acordo com o
esquema abaixo:
O Oxignio e a respirao
celular
Classificao dos Processos
Bioqumicos
Equipamentos
Propagadores: So utilizados para obteno
de clulas. So pequenas dornas, podendo
ter aerao e agitao. Em pequena escala,
os propagadores podem ser frascos
Erlenmeyer, colocados em agitadores
orbitais, onde haver, obrigatoriamente, o
controle de temperatura.
Equipamentos
Fermentadores: So dornas grandes
(escala industrial) com a finalidade de
obteno do produto. Deve possuir aparatos
que permitam dar condies adequadas de
crescimento ao microrganismo e monitorar a
formao do produto como, por exemplo,
sistema de agitao, aerao (processo
aerbico), registrador de temperatura e pH,
serpentina, um local apropriado para a
adio do inculo, entre outros.
Equipamentos
Fermentadores
Classificao dos
Fermentadores
Quanto natureza do meio de fermentao
De fermentao submersa meio lquido
De fermentao superficial meio slido
Quanto ao fechamento do reator
Aberto
Fechado
Classificao dos
Fermentadores
Quanto ao material de construo
Madeira
Al venaria
Ao carbono
Ao inoxidvel
Ao carbono revestido ao inox, borracha,
esmalte, plstico,
resinas
Plsticos e resinas
Classificao dos
Fermentadores
QUANTO CONFIGURAO DO BIORREATOR
Al tura / Dimetro 3 reator tipo TANQUE
Al tura / Dimetro 3 reator tipo COLUNA
Reator de mistura completa Continuous Stirred
Tank Reactor (CSTR)
Reator de fluxo pisto Plug-Flow Reactor (PFR)
Classificao dos
Fermentadores
Reator tipo Tanque
Exemplo:
Tanque de 100.000L: produo de penicilina
Classificao dos
Fermentadores
Reator tipo Coluna
Exemplo: Torre de fermentao para
produo contnua de cerveja
Classificao dos
Fermentadores
Reator de mistura completa
A
B
C
0
A
C
0
B
C
A
C
B
C
C
A + B C
[ ]
volume
Classificao dos
Fermentadores
Reator de fluxo pisto
A
B
x
C
[ ]
x
A + B C
Classificao dos
Fermentadores
QUANTO FORMA DE AGITAO DO LQUIDO NO
BIORREATOR
Reator mecanicamente agitado
Reator hidraulicamente agitado
Reator pneumaticamente agitado
Classificao dos
Fermentadores
Reator Mecanicamente Agitado
Classificao dos
Fermentadores
Reator Pneumaticamente Agitado
Classificao dos
Fermentadores
Reator Hidraulicamente Agitado
Sistema de Agitao
Homogeneizao (transferncia
de massa, transferncia de calor)
suspenso de slidos
disperso de misturas lquido-
lquido
Gaseificao/aerao do lquido
tenso de cisalhamento (celular)
Esquema da Agitao de
Reatores:
esquemas da agitao no meio
Sistema de Agitao
TCNICAS PARA O AUMENTO DA
CONCENTRAO DO BIOCATALISADOR
NO REATOR.
RETENO NO SISTEMA PARA USO/REUSO
CONTNUO
Separao do biocatalisador na sada do reator, por
sedimentao, filtrao, flotao, centrifugao e
posterior reciclo da biomassa.
TCNICAS PARA O AUMENTO DA
CONCENTRAO DO BIOCATALISADOR
NO REATOR.
RETENO NO SISTEMA PARA USO/REUSO
CONTNUO
Fixao do catalisador em suportes (imobilizao) por
encapsulamento/aprisionamento em matriz
polimrica, adsoro em superfcies ou colonizao
de materiais porosos.
I mobilizao Ativa I mobilizao Passiva
ligao covalente encapsulamento
MTODOS DE I MOBILI ZAO
adsoro colonizao
TCNICAS PARA O AUMENTO DA
CONCENTRAO DO BIOCATALISADOR
NO REATOR.
TCNICAS PARA O AUMENTO DA
CONCENTRAO DO BIOCATALISADOR
NO REATOR.
RETENO NO SISTEMA PARA
USO/REUSO CONTNUO
Reteno do biocatalisador no reator por micro-
ou ultra-filtrao em membranas (placas porosas
ou fibras ocas).
TCNICAS PARA O AUMENTO DA
CONCENTRAO DO BIOCATALISADOR
NO REATOR.
Formas de conduo de um
processo fermentativo
Cultivo Descontnuo
O mosto colocado na dorna, esterilizado e
posteriormente recebe o inculo requerido. Aps
a fermentao, efetuada em tempo adequado, o
processo interrompido e o produto, subproduto
e resduos so separados.
A cada nova fermentao necessrio que todas
as etapas sejam repetidas.
Formas de conduo de um
processo fermentativo
Cultivo Descontnuo
Este processo pode ser conduzido de trs formas
diversas:
Com Inculo para cada Dorna
Com Cortes
Com Recuperao de Inculo
Formas de conduo de um
processo fermentativo
Cultivo Descontnuo
Formas de conduo de um
processo fermentativo
Processo Descontnuo com
Cortes
Neste tipo de processo, uma
dorna inoculada e o
material em fermentao
nesta dorna, aps
determinado tempo de
propagao, empregado
parcialmente para se dar
partida em uma segunda
dorna. Finalmente as duas
dornas tm seus volumes
operacionais recompletados.
Etapa 03
Nova Ferment ao
Etapa 01
Ferment ao
Etapa 02
Corte
Formas de conduo de um
processo fermentativo
Processo Descontnuo com Cortes
o nmero de cortes no pode ser ilimitado, e
este nmero limitado pelo controle do
rendimento das fermentaes sucessivas.
fatores que desencadeiam a necessidade de
nova inoculao so:
Rendimento
Degenerescncia do Agente
Qualidade do Produto
Economia nos Custos de Preparo
n
o
de cortes
Rend.
(%)
Formas de conduo de um
processo fermentativo
Processo Descontnuo com Recuperao de Inculo
O meio completamente fermentado
centrifugado, de forma a obter-se um
concentrado de suspenso de microrganismos.
A suspenso submetida a tratamento visando a
eliminao de clulas inativas e microrganismos
contaminantes.
A suspenso tratada ento reciclada para a
dorna de fermentao. As clulas recuperadas
no so indefinidamente utilizadas, pois sofrem
degenerescncia e contaminao aps vrios
reciclos.
Formas de conduo de um
processo fermentativo
Processo Descontnuo com Recuperao de Inculo
Vinho
Reci clo das
Leveduras
Tratamento
Qumi co
Centrif ugao
Formas de conduo de um
processo fermentativo
Processo Semicontnuo
Neste processo a dorna carregada com o mosto,
adiciona-se o inculo, procedendo-se a fermentao. Ao
trmino da fermentao, retira-se uma parte do vinho,
adicionando-se a seguir igual volume de mosto novo,
repetindo-se o processo.
Este procedimento possvel de se repetir durante meses
consecutivos, antes que o rendimento diminua a ponto de
necessitar a interrupo, reiniciando-se o processo de
fermentao com inculo recm preparado.
Formas de conduo de um
processo fermentativo
Processo Contnuo
O substrato adicionado continuamente de modo que
a sua concentrao fique constante. Ao mesmo
tempo, retira-se o mosto fermentado.
Vinho
Mosto
Formas de conduo de um
processo fermentativo
Processo Contnuo
Vinho
Mosto
Formas de conduo de um
processo fermentativo
Processo Contnuo
Mosto
Vinho
Mosto
Vinho
Formas de conduo de um
processo fermentativo
Processo Descontnuo Alimentado
um processo descontnuo, semelhante ao de
batelada, s que com o passar do tempo coloca-se o
substrato em pequenas propores
Controle de processo
Monitoramento de parmetros fsicos,
qumicos e biolgicos
Parmetros fsicos
Tempo
Temperatura
Atividade de gua
Presso
Vazo de lquidos
Vazo de gases
Velocidade de agitao
Controle de processo
Parmetros qumicos
pH e acidez
Slidos solveis (Brix)
O
2
dissolvido
O
2
na fase gasosa
CO
2
na fase gasosa
Parmetros biolgicos
Medidas de crescimento biomassa
Medida de contaminao
FASES DE UM PROCESSOS BIOQUMICO
PREPARO DO
INCULO
(agente microbiano)
PREPARO DO MEIO
(nutrientes, matria
prima, solvente)
BIORREATOR
(Fermentador)
controle de parmetros
de processo
SUPRIMENTO
DE AR (O
2
)
RECUPERAO &
PURIFICAO DO
PRODUTO
ESTERILIZAO
DO MEIO
ESTERILIZAO
DO AR
Sub-produtos
Resduos
Recuperao de Produtos
Recuperao separao, purificao e
concentrao
Localizao dos produtos de fermentao
Intracelular cidos nucleicos, vitaminas, enzimas,
antibiticos;
Extracelular AA, cidos orgnicos, lcoois,
enzimas, antibiticos;
Intra e extracelular antibiticos e vitaminas
Recuperao de Produtos
Recuperao de Produtos
Operaes unitrias usadas na recuperao de
produtos
Floculao flotao e sedimentao
Filtrao
profunda ou convencional separao de miclios de
fungos e de actinomicetos;
Filtrao absoluta em membrana ou tangencial
Microfiltrao 0,1 - 10 m bactrias e leveduras
Ultrafiltrao 0,001 - 0,1 m PM >1000
macromolcula
Osmose reversa 0,0001 0,001 m PM <1000
solutos
Recuperao de Produtos
Operaes unitrias usadas na recuperao de
produtos
Centrifugao
Sistema lquido / slido separao de clulas
Sistema lquido / lquido separao de solvente
Extrao solventes alguns antibiticos
Destilao ponto de ebulio etanol
Cristalizao
Desidratao
Uso do calor produto sem vida levedura seca
Liofilizao produto vivo inculos
Vol. 1: cap. 1 (p.13 a 18 e 20 a 26)
Vol. 3: cap. 1 item 1.3
Notas de aula
Referncias
Artigo sobre biotecnologia, disponvel no
grupo
Leitura complementar