Introduo: A cromatografia um mtodo fsico-qumico de separao.

. Ela est fundamentada na migrao diferencial dos componentes de uma mistura, que ocorre devido a diferentes interaes, entre duas fases imiscveis, a fase mvel e a fase estacionria. uma tcnica verstil e de grande aplicao, pois possui uma variedade de combinaes entre fases mveis e estacionrias. O termo cromatografia foi primeiramente empregado em 1906 e sua utilizao atribuda a um botnico russo ao descrever suas experincias na separao dos componentes de extratos de folhas. Nesse estudo, a passagem de ter de petrleo (fase mvel) atravs de uma coluna de vidro preenchida com carbonato de clcio (fase estacionria), qual se adicionou o extrato, levou separao dos componentes em faixas coloridas. Este provavelmente o motivo pelo qual a tcnica conhecida como cromatografia (chrom = cor e graphie = escrita), podendo levar errnea ideia de que o processo seja dependente da cor. Esta tcnica foi praticamente ignorada at a dcada de 30, quando foi redescoberta. A partir da, diversos trabalhos na rea possibilitaram seu aperfeioamento e, em conjunto com os avanos tecnolgicos, levaram-na a um elevado grau de sofisticao, o qual resultou no seu grande potencial de aplicao em muitas reas. A cromatografia pode ser utilizada para a identificao de compostos, por comparao com padres previamente existentes, para a purificao de compostos, separando-se as substncias indesejveis e para a separao dos componentes de uma mistura. Cromatografia de Camada Delgada (CCD) consiste na separao dos componentes de uma mistura atravs da migrao diferencial desses componentes quando arrastados pela fase mvel (solvente) sobre uma camada delgada de adsorvente. Oferece separao em breve espao de tempo, verstil, apresenta grande reprodutibilidade, de fcil execuo. Por todas estas vantagens, indispensvel em laboratrios que realizam anlise de substncias orgnicas e organometlicas. mais usada na separao de substncias hidrofbicas.

Objetivo: Aplicar a tcnica da cromatografia de camada delgada e absoro. Material Utilizado: A tabela a seguir traz os materiais e os reagentes utilizados durante o procedimento experimental da cromatografia de camada delgada. Materiais Bquer Vidro de relgio Pipeta graduada Placa de alumnio revestida com slica gel Rgua Capilar Acetona cido Actico Glacial lcool etlico absoluto Fluorescena Verde de Malaquita Azul de metileno Reagentes

Procedimento: Foi feio marcas na placa de alumino, uma a 2 cm. da borda e outro aps 10 cm. da primeira marca. Com auxilio de um capilar foi colocado uma gota de cada soluo de indicador e uma com a mistura dos 3 indicadores. Por fim a placa foi introduzida em um bquer com cerca 10 mL. da fase mvel. Quando a fase mvel atingiu o ponto de chegada placa foi retirada e o solvente foi deixado evaporar. Esquema do procedimento:

Resultado e discusses: Aps o eluente ser adicionado no bquer, o mesmo foi tampado at o sistema ser homogeneizado, de modo que no houvesse diferentes concentraes no meio, o que causaria um erro experimental. A placa devidamente preparada foi ento introduzida no bquer e as amostras foram sendo arrastadas sobre a fase estacionaria pela fase mvel. A placa foi retirada quando o eluente chegou linha final, e a distancia percorrida pela a amostra foi medida. A distncia percorrida pela amostra depende da afinidade entre a amostra com as fases estacionaria e mvel. Um dado componente que tenha uma maior afinidade com o solvente ira percorrer uma distancia maior do que um componente que tenha uma maior afinidade com a fase estacionaria. Com a distancia percorrida e a distancia entre a aplicao da amostra e a linha final obtemos o fator de reteno da amostra analisada atravs da seguinte equao:

No experimento houve a aplicao de quatro amostras: azul de metileno, verde de malaquita, fluorescena e a mistura dessas trs substancias. Utilizando a equao acima calculamos os seguintes fatores de reteno: Azul de metileno: Rf = 2,1/7,4 Rf = 0,28 Rf = 5,8/7,6 Rf = 0,76 Rf = 7,6/7,6 Rf = 1,00 Rf1 = 1,9/7,5 Rf = 0,25 Rf2= 5,6/7,5 Rf = 0,75 Rf3= 7,6/7,6 Rf = 1,00

Verde de malaquita:

Fluorescena:

Mistura:

Material Utilizado: A tabela a seguir traz os materiais e os reagentes utilizados durante o procedimento experimental da cromatografia de adsoro. Materiais Almofariz Coluna Cromatogrfica Bquer Esptula Reagentes Folhas de espinafre gua Destilada ter de petrleo Acetona Acar refinado

Procedimento: Foi adicionado cerca de 12 cm. de altura de acar refinado na coluna cromatogrfica, aps foi adicionado cerca de 50 mL. de ter de petrleo na coluna cromatogrfica, aps a torneira foi aberta deixando o ter de petrleo escoar. Em seguido foi adicionado 4 mL. de soluo de espinafre e, aps foi adicionado 50 mL. de ter de petrleo, aps a torneira foi aberta. Por fim foi adicionado 50 mL. de acetona e a torneira foi aberta novamente. Esquema do Procedimento:

Resultados e Discusses: Era para ocorrer uma separao do extrato de espinafre, uma parte com o ter de petrleo era para sair amarelada que uma mistura de carotenos e outra com a acetona com a cor esverdeada que a mistura de clorofilas. Isso iria ocorrer porque a parte amarelada iria interagir com o ter de petrleo que mais apolar. A parte esverdeada iria interagir com a acetona por ser mais polar. O procedimento realizado no ocorreu separao do espinafre, o extrato saiu todo aps adicionar o ter de petrleo. Isso pode ter ocorrido por erros ao adicionar o reagente, no empacotamento da coluna e a aplicao da mistura sobre a coluna. Concluso: Com esse procedimento foi possvel concluir que a cromatografia de camada delgada e de coluna so formas diferentes para se fazer a separao e identificao de misturas utilizando a sua interao molecular. Referencias Bibliogrficas: COLLINS, C.H.; BRAGA, G.L. e BONATO, P.S. Introduo a mtodos

cromatogrficos. 6 ed. Campinas: Editora da Unicamp, 1995.