EL LABORATORIO EN EL ESTUDIO DE LAS PROTEINAS

1) LAS PROTEINAS Y SU ANALISIS: DEFINICION DE PROTEINAS: Las protenas son macromolculas constituidas por 1-alfa-aminocidos unidos entre si por enlaces covalentes amino-carboxlicos parcialmente ionizados que tambin se conocen como enlaces peptdicos y son particularmente adecuados para formar a su vez enlaces por puente de Hidrgeno. ESTRUCTURA DE LAS PROTEINAS: - PRIMARIA: Formada por la secuencia de aminocidos unidos por enlaces covalentes - SECUNDARIA: Producida por la conformacin que causen los enlaces de puente de Hidrgeno. Puede ser de distintos tipos como: Hlice-Alfa, Hlice de Colgeno, Hoja plegada Beta, Bucle Beta, etc - TERCIARIA: Es la estructura tridimensional y espacial de la protena. Se debe a interacciones electrostticas, fuerzas de Van der Waals, etc -CUATERNARIA: Se refiere a la estructura que adopta la protena cuando est formada por ms de una unidad proteica o ms de una secuencia de aminocidos como la Hemoglobina o los anticuerpos. La estructura cuaternaria tiene relacin directa con la funcin de la protena. Es esencial para el correcto funcionamiento de la protena respecto a la accin biolgica que tenga.

FUNCIONES DE LAS PROTEINAS: - Formacin y conservacin estructural: Colgeno, Histonas. - Funcin transportadora: Hemoglobina, Prealbmina, canales inicos. - Funcin protectora y de defensa: Inmunoglobulinas, Complemento, Sistema HLA. - Funcin de control y regulacin: Hormonas (Insulina), Factores de transcripcin. - Catlisis: Enzimas (actuan degradando otras protenas) - Movimiento: Protenas de la contraccin muscular (Actina, Miosina). - Almacenamiento : Ferritina. METABOLISMO DE LAS PROTEINAS: Las protenas se sintetizan en diferentes lugares: Hgado Clulas plasmticas: Localizadas en diferentes rganos como bazo, gnglios linfticos, mdula sea, intestino, pulmones, etc Sintetizan Inmunoglobulinas. - Macrfagos: Sintetizan parte del sistema del complemento. La sntesis puede disminuir por: - Baja disponibilidad de aminocidos (por malnutricin, caquexia, sndromes de malabsorcin, ayuno, etc) - Disminucin de clulas sintetizadoras de protenas (por defectos congnitos, txicos como frmacos o radiaciones, por inflamacin y/o necrosis como en hepatitis, cirrosis, metstasis hepticas o medulares, inmunodeficiencias, etc) La sntesis puede estar aumentada por: Causas fisiolgicas: Embarazo. Neoplasias: Mieloma. Causas reactivas: inflamacin, cirrosis, enfermedades del Colgeno, etc - Causa reactiva con fin compensador: Dficits de Fe con aumento de Transferrina.
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La eliminacin o catabolismo de las protenas se realiza en: - Piel, intestino, glndulas exocrinas, sistema respiratorio, etc por prdidas externas. - hgado, sistema retculo-endotelial, etc por catabolismo endgeno. El catabolismo puede estar aumentado por: Aumento de prdidas externas: (hemorragia, proteinuria, gastroenteropatas, quemaduras) - Aumento de consumo de protenas con funcin biolgica concreta y definida: Fibringeno, Haptoglobina, Complemento, etc - Aumento del catabolismo celular en los tejidos como en casos de inflamacin, neoplasias, etc

2) TECNICAS INSTRUMENTALES PARA el estudio de las PROTEINAS Pueden ser de diferentes tipos: - Tcnicas espectrofotomtricas: Basadas en la Ley de Lambert-Beer. - Tcnicas para determinacin de protenas totales en suero: a) protenas-Cu. c) Refractometra d) Absorbancia a 270-290 nm: debido a la absorcin de aminocidos con grupos aromticos como Tirosina, Fenilalanina y Triptfano. - Tcnicas para determinacin de Albmina en suero: Basadas en la formacin de complejos de Albmina-BCG que a un determinado pH producen un colorante azul verdoso cuya intensidad es proporcional a la concentracin de Albmina. - Tcnicas para determinacin de protenas totales en LCR: a) Mtodo de Lowry: A partir de un reactivo de Folin-Cioucalteau, las protenas reaccionan con Cu en medio alcalino y se forma un producto coloreado que se lee a 750 nm de longitud de onda.
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Mtodo de Kjeldahl: mtodo de referencia.

b) Mtodo de Biuret: Basado en la formacin de complejos

b) Mtodo de fijacin de colorante: El colorante Azul brillante de Coomasie se fija a las protenas y cambia de color anaranjado parduzco a azul intenso cambiando su absorbancia de 465 a 595 nm. El problema de este mtodo es que diferentes protenas presentan diferente sensibilidad por lo que la estandarizacin del mtodo es complicada. - Tcnicas para determinacin de protenas totales en orina: La principal se basa en un mtodo colorimtrico con formacin de complejo Rojo de PirogalolMolibdato. - Tcnicas turbidimtricas y nefelomtricas: La luz de una determinada longitud de onda que choca con una partcula puede ser: Absorbida (espectrofotometra), transmitida (turbidimetra) o dispersada (nefelometra). La turbidimetra mide la radiacin transmitida de forma similar a la espectrofotometra de absorcin molecular (aunque en sta se mide la radiacin absorbida). Se puede llevar a cabo en un espectrofotmetro convencional, aunque requiere ser aplicada a soluciones suficientemente concentradas que originen disminuciones importantes en la potencia de la radiacin transmitida. La nefelometra consiste en evaluar la dispersin de la radiacin por las partculas de una disolucin o suspensin, midindose la potencia de la radiacin dispersada en un ngulo diferente al de la radiacin incidente, por lo general, en un ngulo igual o menor a 90 respecto al eje horizontal. - Tcnicas electroforticas: La electroforesis es una tcnica de separacin que se basa en el transporte de iones a travs de una disolucin por la accin de un campo elctrico. Se aplica una diferencia de potencial entre dos electrodos de carga opuesta de forma que los cationes, con carga positiva, se mueven hacia el electrodo negativo o ctodo y los aniones, con carga negativa, se mueven hacia el electrodo positivo o nodo. Sobre una molcula con carga elctrica en un sistema electrofortico, actuan fuerzas como la fuerza del campo elctrico aplicado o la fuerza debida a la resistencia (Ley de Stokes)

Las protenas son sustancias anfteras o anfolitos, es decir, que sus carga elctrica puede ser positiva, negativa o cero, dependiendo del pH del medio en el que estn. Hay un valor de pH en el cual la carga elctrica neta es cero. Ese valor de pH se denomina punto isoelctrico. La resolucin de un sistema electrofortico va a depender de diferentes factores como el gradiente de potencial, la temperatura, el pH, etc La electroforesis se realiza sobre distintos medios, que pueden ser no selectivos (inertes, que no intervienen de forma directa en la separacin, como el gel de agarosa o el acetato de celulosa) y selectivos (separan mediante el tamao molecular, como el almidn o la poliacrilamida). El especimen, se suele preparar previamente con sustancias como mercaptoetanol, glicerol, sacarosa, urea, detergentes o hialuronidasa (usada mucho en el estudio de protenas en liquido sinovial). Tras separar los componentes por electroforesis, se puede hacer determinacin cualitativa (fijando protenas con determinadas sustancias y luego identificando con colorantes o mtodos inmunolgicos) o determinacin cuantitativa (por elucin, espectrofotometra de absorcin molecular, etc). Existe una variante de la electroforesis, llamada INMUNOELECTROFORESIS, en la que tras separar por electroforesis las protenas, se enfrentan con un suero y se observa la reaccin antgenoanticuerpo, que se pone de manifiesto por un anillo de precipitacin. Otras tcnicas que se pueden usar son: ISOELECTROENFOQUE (se separan las protenas segn su punto isoelctrico en un medio con gradiente de pH ISOTACOFORESIS (se separan los componentes segn sus diferentes movilidades electroforticas en un sistema discontinuo, con distintas fases de diferente composicin entre ellas), ULTRACENTRIFUGACION (como se hace en la VSG, donde el resultado es proporcional a la diferencia de densidad y tamao molecular), la PRECIPITACION SALINA o la CROMATOGRAFIA.
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3) EL PROTEINOGRAMA: DEFINICION: Es una representacin grfica de la distribucin de las distintas fracciones de las protenas plasmticas. Se basa en la separacin de las protenas en funcin de su masa y su carga, tras someterlas a un campo elctrico. Es una representacin densitomtrica de las bandas obtenidas tras someter al suero a electroforesis y es complementario a la determinacin de protenas totales en suero.

RANGOS DE NORMALIDAD Albmina -------------- 55-68% Globulinas ------------ 32-45% Alfa-1 globulina -------- 1.5-5% Alfa-2 globulina -------- 6.5-11% Beta globulina --------9-13% Gamma globulina -------- 14-19%

FRACCIONES DEL PROTEINOGRAMA: - FRACCION DE ALBUMINAS: Contiene: Albmina srica: Es la banda mayoritaria del proteinograma (53-66%). Sus valores normales oscilan desde 2,7 g/100ml en mujeres o 2,9 g/100ml en neonatos, hasta 6,1 g/100ml en varones adultos. Su funcin es de transporte y de mantenimiento de la presin onctica del plasma, siendo tambin marcador del estado nutricional. - Prealbmina: Compuesta a su vez por la Prealbmina, propiamente dicha, llamada tambin transtiretina, que transporta tiroxina y triyodotironina, y por la Protena ligada al Retinol o RBP, que transporta Vit. A mediante la formacin de complejos con la prealbmina. Ambas son indicadoras de malnutricin y patologa heptica.

- FRACCION ALFA-1: Contiene: - Alfa-1-antitripsina: Es reactante de fase aguda. Tiene funcin antiproteasa. Es el 90% del total de la regin Alfa-1. Alfa-1-glicoprotena cida: Llamada tambin Factor Orosomucoide. Tiene papel en el proceso inflamatorio. - Alfa-1-fetoprotena: Presente mayoritariamente en la circulacin fetal. Es til en adultos como marcador de cncer hepato-celular y tumores testiculares de clulas germinales. - Alfa-1-lipoprotena: Corresponde a la fraccin HDL colesterol. Es transportadora de lpidos. Tambin migran a esta fraccin: - Transcortina - Globulina fijadora de Tiroxina (TBG) En general, la fraccin Alfa-1, aumenta en procesos inflamatorios agudos, neoplasias, y cuadros de infarto y de necrosis. - FRACCION ALFA-2: Contiene: - Haptoglobina: Transporta oxi-hemoglobina en el plasma. Es reactante de fase aguda. - Alfa-2-macroglobulina: Forma complejos con proteasas e inhibe la lisis de compuestos proteicos de gran tamao. Tiene relacin con el sndrome nefrtico. Ceruloplasmina: Transportadora de Cu. Es una catalizadora de procesos oxidativos y reactante de fase aguda. - Alfa-2-lipoprotena: Corresponde a la fraccin VLDL colesterol. Tiene relacin con el metabolismo de triglicridos, sobre todo los de sntesis endgena. En ocasiones, la Protena C reactiva o PCR migra a esta fraccin aunque otras veces migra a la fraccin Beta. La fraccin Alfa-2 aumenta en el sndrome nefrtico, ictericia obstructiva, inflamacin crnica, TBC, etc

- FRACCION BETA-1: Contiene: - Transferrina. O Siderofilina. Transporta Fe y es capaz de unir otros iones metlicos. Aumenta en anemias. Se relaciona con el sndrome nefrtico y hepatitis agudas. - Hemopexina: Acta ligando grupos Hemo. -Beta-lipoprotena: hipotiroidismo. - C4: factor del complemento. Reactante de fase aguda. Relacionado con dermatopatas y disminuido en procesos auto-inmunes. A veces aparece migrando a esta fraccin la PCR y tambin en ocasiones, la Ceruloplasmina. La fraccin Beta, en general, est aumentada en el sndrome nefrtico, ictericias obstructivas, cirrosis, TBC, procesos inflamatorios crnicos y agudos, dermatopatas, hipotiroidismo, etc - FRACCION BETA-2: Contiene: - Fibringeno: Reactante de fase aguda que es un precursor de la formacin del cogulo de fibrina. Su aparicin en el proteinograma, se evita, en gran medida, con el uso de suero en lugar de plasma, como muestra. - Beta-2-microglobulina: Constituyente de cadena ligera de los Antgenos de Histocompatibilidad Leucocitarios (HLA). Es un marcador de insuficiencia renal y se relaciona con cuadros de Amiloidosis. - C3: Factor del complemento y reactante de fase aguda. - Fibronectina: Aumentada en sndrome nefrtico, colestasis, neoplasias y disminuida en politraumatismos, quemaduras, sepsis, etc - Beta-2-glicoprotena: Cofactor con papel desencadenante en el sndrome antifosfolpido. - Lactgeno placentario: Hormona placentaria con papel estimulador en la resistencia insulnica y la intolerancia a hidratos de Carbono. - SP-1-glicoprotena: Glicoprotena Especfica del Embarazo. Utilidad como marcador de tumores testiculares de clulas germinales. Corresponde con la fraccin LDL colesterol. Transporta lpidos y se relaciona con el sndrome nefrtico y el

- FRACCION GAMMA-1: Contiene: - Inmunoglobulina A: es la inmunoglobulina que predomina en las secreciones mucosas. A veces, migra a la fraccin Beta, cerca del fibringeno, al igual que ste puede migrar a la fraccin Gamma-1. La IgA aumenta en procesos inflamatorios, cirrosis alcohlica, hepatitis, artritis, Lupus, TBC y otras infecciones crnicas, fibrosis qustica, Celiaqua, cncer G-I, gammapata monoclonal IgA, etc Disminuye en la agammaglobulinemia IgA, en la inmunodeficiencia combinada severa, ataxia-telangiectasia, frmacos en inmunodeficiencias adquiridas, neoplasias malignas, como

quimioterapia o corticoides, gastroenteropata pierde-protenas, etc - Inmunoglobulina A secretora: Tipo especial de IgA que aumenta en fumadores, alcoholismo, cnceres orofarngeos y de pulmn, procesos inflamatorios orales, infecciones bacterianas, etc Disminuye en enfermedades sino-pulmonares, procesos G-I, enfermedades autoinmunes como artritis reumatoide o Lupus, frmacos, sndromes malabsortivos, ataxiatelangiectasia, etc - Inmunoglobulina D: Aumenta en el mieloma mltiple, aunque lo hace de forma inespecfica. - FRACCION GAMMA-2: Contiene: Inmunoglobulina M: Se ve aumentada en la macroglobulinemia de Waldestrom, artritis reumatoide y Lupus, en la brucelosis, en el linfosarcoma, en cirrosis biliar primaria, enfermedades autoinmunes, mononucleosis micticas, IgM, y otras etc... Est enfermedades disminuida ligada al virales, en la sexo, paludismo,infecciones agammaglobulinemia

hipergammaglobulinemia

inmunodeficiencia combinada severa, leucemias, amiloidosis,etc - Inmunoglobulina G: Aumenta en infecciones crnicas, hiperinmunizacin, sarcoidosis, fiebre reumtica,artritis reumatoide, hepatitis crnica activa, cirrosis, mieloma mltiple IgG, SIDA, etc Disminuye en hipogammaglobulinemia ligada al sexo, en inmunodeficiencia combinada severa, en sndrome nefrtico, en gastroenteropata pierde-protenas, en prdidas cutaneas, amiloidosis, preeclampsia, leucemias, etc

En mltiples ocasiones, es til la determinacin de subclases de IgG (IgG1,2,3,4). - Inmunoglobulina E: Glicoprotena sintetizada en amigdalas, adenoides, gnglios linfticos bronquiales y peritoneales, mucosa nasal, respiratoria y gastro-intestinal. Se eleva en el sndrome hiper-IgE, parasitosis, lepra, aspergilosis bronco-pulmonar alrgica, SIDA, etc Disminuye en ataxiatelangiectasia, dficit de IgE, hipogammaglobulinemia, etc 4) PATRONES CONCRETOS DE PROTEINOGRAMA ALTERADO (ver ejemplos a partir de la pgina 15) - SINDROME NEFROTICO: Caracterizado por un descenso a nivel de la fraccin de Albmina y aumento a nivel de la fraccin Alfa-2 - INFLAMACION CRONICA: Caracterizada por aumentos a nivel de Alfa-1 y Alfa-2 y de Gamma. - CIRROSIS O HEPATOPATIA CRONICA: Con aumento a nivel de Alfa-2 y de Gamma que describen una curva continuada ascendente denominada solapamiento Beta-Gamma. - BISALBUMINEMIA: Doble pico a nivel de la fraccin de Albmina sin significacin patolgica a nivel clnico. - REACCION DE FASE AGUDA: Caracterizada por aumento extremo de PCR y Protena S Amiloide del suero(SAA) con aumento moderado de Alfa-1-antitripsina, Alfa-1-glicoprotena cida, ferritina, IgG, complemento C3 y C4, y ceruloplasmina, y disminucin de Albmina y Transferrina, lo que se traduce en aumento a nivel de Alfa-1 y Alfa-2, diferenciandose de la inflamacin crnica en que en la fase aguda no hay aumento en la fraccin Gamma. - GAMMAPATIA MONOCLONAL: Su deteccin es la principal utilidad clnica del proteinograma. Las gammapatas policlonales aparecen como bandas anchas y difusas que se localizan en la regin gamma del proteinograma y se originan en enfermedades inflamatorias, infecciosas o reactivas. En cambio, las gammapatas monoclonales se reflejan como bandas estrechas o densas en la fraccin Gamma o Beta y casi nunca en la zona Alfa10

2. Se deben a enfermedades en las que ocurre proliferacin de un nico clon de Clulas B que produce una protena anormal de tipo Inmunoglobulina homogenea formada por dos cadenas pesadas de una misma clase (G, A, M, D o E) y dos cadenas ligeras de una nica clase (Kappa o Lambda). Las gammapatas monoclonales pueden clasificarse en clnicamente manifiestas (incluyen Mieloma mltiple y sus variantes, Enfermedades linfoproliferativas como la Macroglobulinemia de Waldestrom, Leucemia linfoide crnica y Linfoma no Hodking, y otras enfermedades como la Amiloidosis, la Crioglobulinemia, coagulopatas, etc) y clinicamente silentes, como la Gammapata monoclonal de significado incierto o Gammapatas monoclonales transitorias como las que pueden ocurrir en infecciones vricas, reacciones de hipersensibilidad a drogas, etc En estos casos, para identificar la protena anmala se trata el suero del paciente con anticuerpos especficos frente a cada una de las cadenas pesadas y a las cadenas ligeras. El nuevo patrn electrofortico mostrar prdida del pico correspondiente a la cadena sobreproducida. 5) GAMMAPATIAS MONOCLONALES (GM): GM DE SIGNIFICADO INCIERTO: Es la ms frecuente de las GM que se detectan en el laboratorio. Tiene origen desconocido y su prevalencia aumenta con la edad. Suele ser secundaria a hepatopatas vricas, enfermedades autoinmunes, etc Tiene un pronstico y evolucin inciertos. Si se produce la muerte, suele deberse a otras causas ajenas a la GM. En algunas ocasiones, aunque limitadas, evolucionan a enfermedades malignas como Mieloma mltiple, Waldestrom o Amiloidosis. En otra serie de casos, desaparece espontaneamente. No presenta clulas plasmticas en mdula sea, ni anemia, hipercalcemia, ni lesiones seas, a diferencia del Mieloma Mltiple. MIELOMA MULTIPLE: Se caracteriza porque en mdula sea proliferan clulas plasmticas y hay sobreproduccin de Ig monoclonal completa, que puede ser de tipo IgG, IgA, IgD o IgE o de cadenas ligeras, Kappa o Lambda. Su edad media de aparicin es a partir de 69 aos ms o menos. En el proteinograma se presenta como una banda compacta, estrecha,
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de migracin Gamma, Beta, o, menos frecuentemente, Alfa-2. Clnicamente hay dolor seo y fracturas patolgicas, en sangre hay anemia, hipercalcemia e hiperproteinemia, en orina se da proteinuria de Bence-Jones y en mdula sea se encuentra ms de un 10% de clulas plasmticas. MACROGLOBULINEMIA (WALDESTROM): Se caracteriza por proliferacin de clulas plasmticas anormales que invaden mdula sea, ganglios linfticos y bazo. Hay sobreproduccin de Ig monoclonal completa tipo IgM, Kappa o Lambda. Cursa con hiperviscosidad sanguinea y puede afectar a jvenes, aunque suele darse ms en varones de ms de 65 aos. No presenta lesiones seas y cursa con hepatomegalia, adenopatas, fenmenos hemorrgicos, neuropatas y trastornos visuales. En el laboratorio, da anemia normoctica y normocrmica con hiperviscosidad sanguinea. 6) ENFERMEDADES GENETICAS QUE ALTERAN EL PROTEINOGRAMA: BISALBUMINEMIA: Trastorno heterocigoto que produce la aparicin de dos fracciones de Albmina en el proteinograma con concentracin de albmina srica no alterada o normal. Puede ser de causa adquirida (por frmacos como penicilinas o cefalosporinas o en enfermedades como la pancreatitis aguda) o congnita (por alteracin en un gen 4q11-q13). Su prevalencia es 1:3000. No suelen causar manifestaciones clnicas, salvo algunos casos descritos de Acrocianosis. ANALBUMINEMIA: Ausencia de Albmina en el proteinograma por alteracin en su sntesis. No presenta alteraciones clnicas graves, salvo casos de hiperlipidemia, edemas mnimos, fatigabilidad, etc y no compromete la expectativa de vida. DEFICIT DE ALFA-1-ANTITRIPSINA: La Alfa-1-antitripsina, constituye 90% de la fraccin Alfa-1. Es una potente antiproteasa. Su dficit se debe a un trastorno autosmico recesivo que cuando cursa con fenotipo PIZZ produce enfermedad clnica y en otros casos de distintos fenotipos puede cursar con trastornos pulmonares en individuos personalmente susceptibles. El dficit de Alfa-1-antitripsina produce enfermedad pulmonar obstructiva tipo enfisema pulmonar en adultos. Puede producir tambin enfermedad heptica con evolucin a cirrosis e incluso hepatocarcinoma y puede producir
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enfermedades a otros niveles como patologa renal, artritis reumatoide, enfermedades vasculares, paniculitis, etc ENFERMEDAD DE WILSON: Por disminucin o ausencia de Ceruloplasmina que lleva a un acmulo de Cu que da toxicidad a nivel de hgado y otros rganos y sistemas. La herencia es autosmica recesiva y existe mutacin en el cromosoma 13q. Puede cursar con hepatitis, colestasis, cirrosis o esteatosis heptica, con trastornos neurolgicos como distonas, rigidez, etc, con trastornos psiquitricos como depresin, con trastornos hematolgicos como anemia hemoltica, con trastornos endocrinos, renales, oculares (anillo de Kayser-Flescher a nivel corneal), articulares, cardacos, etc es una enfermedad mortal. El tratamiento es paliativo con quelantes de Cu o con Sulfato o Acetato de Zn, o recurriendo a trasplante heptico.

DEFICIENCIAS DEL COMPLEMENTO: Son unos trastornos autosmicos recesivos que cursan con infecciones de repeticin, enfermedades por inmunocomplejos circulantes, glomerulonefritis, vasculitis, sndrome hemoltico-urmico, etc INMUNODEFICIENCIAS se permite la supervivencia. En la Inmunodeficiencia Combinada Grave, hay ausencia total de Igs sricas con linfopenia T y B y grave alteracin de la inmunidad celular. Su solucin es el diagnstico precoz y trasplante de mdula sea o bien Inmunoglobulinas y Antibiticos o terapia gnica. El Dficit de Adenosindeaminasa (ADA), es otro trastorno clnicamente similar al anterior que en ausencia de tratamiento produce la muerte en edad inferior a los 2 aos. Las Inmunodeficiencias por defecto de anticuerpos son las ms numerosas. Producen alteraciones de las clulas B con no produccin de Anticuerpos. Cursan con infecciones bacterianas de repeticin, sobre todo pulmonares, ticas y sinusales, gastro-intestinales, etc
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COMBINADAS:

Son

las

alteraciones hereditarias de clulas T y B. Con la terapia correctora adecuada,

en el cuadro de la Agammaglobulinemia ligada al sexo (Sndrome de Bruton), la herencia es recesiva ligada al X y hay prdida de rganos linfoides secundarios (ganglios, amigdalas) con respuesta normal a bacterias intracelulares y a virus. El Dficit de IgA es la ms frecuente de las inmunodeficiencias primarias. Puede asociarse a dficit de subclases de IgG. Suelen ser sanos o presentar infecciones respiratorias, asma, infecciones G-I, alergias alimentarias, atopia cutnea o enfermedades autoinmunes. El Sndrome de Wiscott-Aldrich presenta herencia ligada al X y cursa con trombocitopenia, eccema e infecciones de repeticin. La Ataxia-Telangiectasia da una afectacin de linfocitos T y B con aumento de Alfa-fetoprotena y Antgeno Crcino-embrionario. La herencia es autosmica recesiva y hay trastornos cromosmicos y en la reparacin del ADN que dan lugar a neoplasias y alta sensibilidad a radiaciones ionizantes. El Sndrome de Di George cursa con malformaciones de los rganos derivados del 3 y 4 arcos faringeos (Timo, Glndulas Paratiroides). Los individuos afectos tiene delecciones en el cromosoma 22q11. Presentan un fenotipo particular con rasgos faciales caractersticos (hipertelorismo, micrognatia, orejas de implantacin baja) y cursan con linfopenia T que necesita de trasplante de Timo u hormonas tmicas o, en casos parciales, con gammaglobulina.

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IMGENES DE ELECTROFORESIS Y GRAFICAS DE PROTEINOGRAMA DE DISTINTAS ALTERACIONES A NIVEL DE PROTEINAS PLASMATICAS

ALFA-1 ALFA-2 BETA GAMMA

NORMAL

REACCION INFLAMATORIA (FASE AGUDA)

REACCION INFLAMATORIA (CRONICA)

La reaccion inflamatoria, se caracteriza, respecto al espectro electrofortico normal, por un aumento a nivel de la fraccin ALFA-1 Y ALFA-2. Adems, podemos distinguir entre inflamacion crnica y reaccin de fase aguda por la existencia de aumento a nivel de fraccin GAMMA en la de tipo crnico que no aparece en la reaccin de fase aguda, como se ve en la grfica de proteinograma que aparece a la derecha.

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ALFA-1 ALFA-2 BETA

GAMMA

NORMAL

SINDROME NEFROTICO

CIRROSIS

La electroforesis del sndrome nefrtico, se caracteriza por un descenso de intensidad en la fraccin de Albmina junto con un marcado aumento a nivel de fraccin ALFA-2 (recordar que a este nivel migra la ALFA-2-MACROGLOBULINA, a la que se le atribuye papel importante en esta patologa). En la cirrosis, es muy caracterstico el aumento de fraccin ALFA-2, pero sobre todo, el aumento y prcticamente fusin de las fracciones BETA y GAMMA (que se conoce como SOLAPAMIENTO O ACABALGAMIENTO BETA-GAMMA).

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ALFA-1

ALFA-2

BETA

GAMMA

IgA

IgG

IgG

Waldestrom (IgM)
Las alteraciones (Paraproteinemias) a nivel de la fraccin gamma (Gammapatas Monoclonales), se caracterizan en la electroforesis por la aparicin de bandas compactas (estrechas) que guardan relacin con el componente monoclonal que las origina. Aparecen en diferente subzonas o subfracciones de la regin GAMMA segn la estirpe a que corresponda la paraprotena que se presente alterada. Tambin a nivel de fraccin GAMMA pueden darse Gammapatas Policlonales, entre las que pueden incluirse procesos inflamatorios crnicos, cirrosis, infecciones, enfermedades autoinmunes, etc que se caracterizan por la aparicin de bandas difusas (anchas y poco definidas). En la grfica del proteinograma, una Gammapata Monoclonal aparece como un pico agudo, de ms o menos altura y de base estrecha, frente a las curvas menos agudas, de base ms ancha y forma acampanada que suelen caracterizar a los Procesos Policlonales.

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Dficit de Alfa-1 Antitripsina

Normal

La electroforesis del Dficit de Alfa-1-Antitripsina, se caracteriza por la desaparicin casi total de la fraccin ALFA-1 (recordar que la ALFA-1-ANTITRIPSINA constituye casi el 90 % de esta fraccin).

La Bisalbuminemia se caracteriza por la aparicin en la electroforesis de una o ms bandas en la fraccin de la Albmina acompaando a la banda de migracin habitual. No suele acompaarse de manifestaciones clnicas o de trascendencia patolgica y si lo hace suele ser de mnima importancia. En el proteinograma hay ms de un pico de Albmina.

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EVALUACION (protenas)
1- Respecto a la estructura de las protenas, seale la respuesta INCORRECTA. a) La estructura primaria se corresponde con la secuencia de Aminocidos b) La secundaria puede adoptar diferentes formas segn la disposicin de los enlaces puente de Hidrgeno. c) La terciaria se corresponde con la estructura tridimensional que la protena adquiere o adopta en el espacio. d) La terciaria es la que condiciona las funciones biolgicas de las protenas 2- En relacin al proteinograma, es CORRECTO. a) La Albmina srica puede migrar a veces a la fraccin ALFA-2. b) El Factor Orosomucoide se identifica con la ALFA-1-ANTITRIPSINA. c) La ALFA-1-ANTITRIPSINA constituye casi el 90% de la fraccin ALFA-1. d) La BETA-LIPOPROTEINA se identifica con la fraccin HDL-Colesterol. 3- Respecto a las alteraciones del proteinograma es CIERTO. a) La Bisalbuminemia cursa casi siempre con trastornos graves y de acentuada significacin patolgica. b) En el sndrome nefrtico es muy caracterstico un aumento a nivel de la fraccin BETA. c) Las Gammapatas Monoclonales se caracterizan en el proteinograma por picos agudos y de base estrecha (bandas compactas). d) El patron de Inflamacin aguda coincide con el de inflamacin crnica en un aumento a nivel de ALFA-1 y ALFA-2 pero presenta aumento a nivel GAMMA que no se da en la inflamacin crnica.

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4- La Gammapata Monoclonal de Significado Incierto se caracteriza por todo lo siguiente EXCEPTO. a) Es la ms frecuente de las Gammapatas Monoclonales que se detectan en el laboratorio. b) Suele ser de origen desconocido y a veces tambin secundaria a enf. autoinmune, hepatopata, viriasis, etc c) En un 20-30% de casos puede evolucionar a Mieloma mltiple, Waldestrom, Amiloidosis, etc d) Cursa con anemia, hipercalcemia y lesiones seas de forma tpica y caracterstica. 5- Respecto al Mieloma Mltiple seale lo CORRECTO. a) Presenta menos de un 10% de clulas plasmticas en mdula sea. b) Su edad media de presentacin es la 3 dcada de la vida. c) Se presenta en la electroforesis como una banda compacta, estrecha y definida, de migracin Gamma o, a veces, Beta. d) Nunca cursa con alteraciones a nivel de la orina. 6- La Macroglobulinemia de Waldestrom se caracteriza por todo lo siguiente EXCEPTO. a) Hiperviscosidad sanguinea b) Lesiones seas c) Sobreproduccin de IgM monoclonal que puede ser Kappa o Lambda. d) Proliferacin de Clulas plasmticas anormales que invaden mdula sea, ganglios linfticos y bazo. 7- Respecto a la Enfermedad de Wilson es CIERTO. a) Presenta herencia Autosmica Dominante b) Se origina por mutacin en cromosoma 15q c) Se da por dficit-ausencia de Ceruloplasmina
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d) Altera el proteinograma a nivel Alfa-1

8- A nivel de la fraccin Beta-2 NO MIGRA. a) b) c) d) El factor C3 del complemento La Beta-2-Microglobulina La Transferrina El Fibringeno

9- El patrn de SOLAPAMIENTO BETA-GAMMA es tpico de a) La Bisalbuminemia b) El dficit de Alfa-1-Antitripsina c) Procesos inflamatorios crnicos, sobre todo del tipo hepatopatas, cirrosis y en general de procesos de naturaleza policlonal. d) Las Gammapatas Monoclonales 10- Sobre el dficit de Alfa-1-Antitripsina, todo es cierto EXCEPTO. a) Tiene herencia autosmica recesiva b) El fenotipo PIZZ es el que produce enfermedad clnicamente manifiesta. c) Se caracteriza en el proteinograma por aumento a nivel de la fraccin Alfa-1. d) Cursa con alteraciones pulmonares, hepticas y renales fundamentalmente.

Responsable del tema: Dr. Enrique Garcia Lara

enriquegarcialara@hotmail.com

Tutor: mariaa.bailen.sspa@juntadeandalucia.es

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