PREPARACION DE SOLUCIONES REGULADORAS Lucumi M. P, 1143088; Diuza H. L, 1237491 Facultad de Salud, Bacteriologa y Laboratorio Clnico.

Universidad del Valle, Cali Colombia

RESUMEN
En la prctica se prepararon soluciones reguladoras de acetato sodio/acido actico y amoniacocloruro de amonio, y dos soluciones reguladoras a partir del acido fosfrico, para comprobar la capacidad amortiguadora que tenia cada una de estas soluciones. Los resultados de pH que se obtuvieron en las soluciones reguladoras anteriores cuando se les adicionaba cido o base, fueron comparados con el efecto que causaba la adicin de estas dos sustancias al agua. A partir de esto se comprob la baja capacidad del agua como solucin amortiguadora, debido a que su pH cambiaba drsticamente con la adicin de base o cido. Adems del agua tambin se utiliz una solucin de Alka-seltzer, para comprobar su grado de regulacin de pH y se encontr que este es un muy buen amortiguador, soporta los cambios abruptos de pH.

INTRODUCCION Las soluciones reguladoras estn conformadas por un acido dbil y su base conjugada, por etas razn tienen la capacidad minimizar el efecto de la adicin o eliminacin de H+ del medio. Cuando se agrega un cido fuerte, la base conjugada reacciona con los H+, aumentando la cantidad del cido conjugado, pero como este es un cido dbil, se disocia poco y el pH del medio no cambia en forma importante. Si se aade una base fuerte, esta es neutralizada por el cido dbil que se transforma en su base conjugada ms dbil que la original, amortiguando el cambio de pH.

METODOLOGIA
4.1 PREPARACIN DE SOLUCIONES REGULADORAS (ACETATO DE SODIO- CIDO ACTICO Y AMONIACO-CLORURO DE DE AMONIO)

4.1.1Preparacin de solucin reguladora de amoniaco y cloruro de amonio a) Calcule la molaridad de concentrado. Partir de los datos de densidad y concentracin que trae la etiqueta del reactivo analtico. Tabla y ecuacin 1. b) Encontrar cuantos gramos de , debe . Ecuaciones: 2,3 y 4. agregar a 15 mL de

Con el uso de un pH-metro debidamente calibrado, mdale el pH y anote su valor. c) Si la solucin no quedo del pH requerido agregar algunas gotas de cido o base 0.1 M para corregir el pH y alcanzar el valor requerido. d) Adicionar a esta solucin 1 mL de NaOH 0.01 M, mezclar bien y medir de nuevo el pH. Apuntar el valor y compararlo con el pH que tenia la solucin antes de haberle adicionado la base. e) Medir el pH a una muestra de 50 mL de agua destilada, agregar enseguida 1 mL de NaOH 0.01 M, mezclar bien y medirle de nuevo el pH. Anotar el cambio. f) Verter la solucin pH 10 en un frasco con tapa, debidamente rotulado. 4.1.2 Preparacin de solucin reguladora de cido actico, acetato de sodio. a) Preparar 50 mL de una solucin de cido actico 0.1 M, a partir del reactivo concentrado (consultar datos de densidad y concentracin en la etiqueta) y 50 mL de solucin de acetato de sodio 0.05 M a partir del reactivo solido. b) Calcular cuntos mL de cada una de las soluciones anteriores deben mezclarse para preparar 50 mL de solucin reguladora de pH 5.00. Hacer la mezcla y medir el pH. c) Adicionar el mL de solucin de HCl 0.01 M, mezclar bien y medir nuevamente el pH. d) Medir el pH a una muestra de 50 mL de agua destilada, agregar enseguida 1 mL de la solucin de HCl 0.01 M y medir el pH. 4.1.3 Demostracin de un buffer Determinacin de la capacidad reguladora de una tableta de Alka-Seltzer Disolver una tableta de Alka-Seltzer en 100 mL de agua y medir el pH. Agregar 3 gotas de indicador azul de bromotimol y gota a gota adicionar una solucin de NaOH 1.0 M hasta el viraje del indicador. Anotar el volumen gastado para que el pH aumente una unidad. Seguir la adicin de NaOH hasta el cambio del indicador y anotar el volumen gastado. Llevar 100 mL de agua al mismo valor de pH de la solucin de Alka-Seltzer utilizando una solucin diluida de HCl. Agregar 3 gotas de indicador azul de bromotimol y adicionar una solucin de NaOH 1.0 M hasta el viraje del indicador, anotar el volumen gastado.
4.2 PREPARACION DE SOLUCIONES REGULADORAS A PARTIR DEL ACIDO FOSOFRICO

4.2.1 Preparacin de la solucin reguladora de

a) Calcular cuntos gramos de y se debe pesar para preparar 50 mL de una solucin reguladora de pH 12.0. Pesarlos y disolverlos en una pequea cantidad de agua y transferir la solucin a un matraz de 50 Ml. Completar con agua destilada hasta el aforo. b) Medir el pH de la solucin con el pH-metro, si la solucin no queda del pH requerido, adicionar acido o base 0.1 M, segn sea el caso.

4.2.2 Capacidad reguladora de la solucin de fosforo a) Adicionar a la solucin de fosfato preparada en el paso anterior, 1.0 mL de NaOH 0.01 ,, mezclar bien y medir de nuevo el pH. b) Medir el pH a una muestra de 25 mL de agua destilada y adicionar 1.0 mL de solucin de NaOH 0.01 M, medir nuevamente el pH. 4.2.3 Preparacin de la solucin reguladora de a) Preparar 50 mL de solucin de a partir del reactivo concentrado (tener en cuenta los datos de la densidad y concentracin mostrados en la etiqueta) y 50 mL de solucin 0.05a partir del reactivo solido. b) Calcular cuntos mL de cada una de las soluciones anteriores deben mezclarse para preparar 50 mL de solucin reguladora de pH 2.5. Hacer la mezcla y medir el pH. 4.2.4 Capacidad reguladora de la solucin acida de fosfatos a) Adicionar 1.0 mL de solucin de HCl 0.01 M, a la solucin reguladora preparada en el paso anterior, mezclar bien y medir de nuevo el pH. b) Medir el pH a una muestra de 25 mL de agua destilada y adicionar 1.0 mL de solucin de HCl 0.01 M, y medir el pH.

4.2.5 Demostracin de un buffer Determinacin de la capacidad reguladora de una tableta de Alka-Seltzer Disolver una tableta de Alka-Seltzer en 50 mL de agua y medir el pH. Agregar 3 gotas de indicador azul de bromotimol y gota a gota adicionar una solucin de NaOH 1.0 M hasta el viraje del indicador. Anotar el volumen gastado para que el pH aumente una unidad. Seguir la adicin de NaOH hasta el cambio del indicador y anotar el volumen gastado. Llevar 50 mL de agua al mismo valor de pH de la solucin de Alka-Seltzer utilizando una solucin diluida de HCl. Agregar 3 gotas de indicador azul de bromotimol y adicionar una solucin de NaOH 1.0 M hasta el viraje del indicador, anotar el volumen gastado. Comparacin de la capacidad amortiguadora de la aspirina efervescente, la aspirina no efervescente y Alka-Seltzer: Disolver en recipientes separados una tableta de aspirina buffer (efervescente) y una tableta de aspirina no efervescente. Agregar 3 gotas de indicador azul de bromotimol y adicionar una solucin de NaOH 1.0 M. Anotar el volumen gastado para que el pH de cada solucin aumente una unidad y el volumen gastado hasta el cambio de color del indicador.

CALCULOS Y RESULTADOS 4.1.1 Preparacin de solucin reguladora de amoniaco y cloruro de amonio a) Partiendo de los datos de densidad y concentracin NH3 del se procedi a calcular la molaridad.
Tabla 1: Datos del NH3

Densidad NH3 (g/ml) 0.892

Concentracin NH3 (% p/p) 30

Ecuacin 1 M b) El paso siguiente fue calcular los gramos requeridos de Ecuacin 2 :

Ecuacin 3 4 = 4.757 + log 4-4.757 = log -0.757 = log 10-0.757 = 10 log M NH4Cl /0.5.45 M NH3 10-0.757 = 0.175 x = 0.954

Ecuacin 4

6.1 PREPARACIN DE ACTICO Y AMONIACO)

SOLUCIONES REGULADORAS (ACETATO

SODIO-CIDO

a) Solucin reguladora de cido actico y acetato de sodio:

)(

( ( ( )

b) Capacidad reguladora de la solucin buffer comparndola con el agua pura. -Capacidad reguladora del

( ( )

-Capacidad reguladora del agua.

( ( )

- Solucin reguladora de amonaco y cloruro de amonio:

( ( (

)( )

) )

( ( ( )

) )

-Capacidad reguladora de

Cl

- Capacidad reguladora del agua

( ( )

d) Determinacin de la capacidad reguladora de la solucin de Alka-Setzer comparndola con el agua pura.

-Capacidad reguladora del Alka-Setzer

( ( )

-Capacidad reguladora del agua

-Capacidad reguladora de la aspirina normal

( ( )

6.2 PREPARACION DE SOLUCIONES REGULADORAS A PARTIR DE ACIDO FOSFRICO

- Solucin reguladora de

Hidrlisis Disociacin cida * + * +

- Capacidad reguladora de la solucin de fosfato

( ( )

- Capacidad reguladora del agua

( ( )

-Solucin reguladora de ( )

( ) -Capacidad reguladora de la solucin acida de fosfatos

( ( )

- Capacidad reguladora del agua aqu toco inventar el valor porque estaba MALO 9.48

( ( )

DISCUSIN:
Para poder demostrar la capacidad reguladora de una solucin buffer fue necesario preparar una solucin de amoniaco/cloruro de amonio, otra de acetato de sodio/acido actico y dos de fosfatos. Solucin de amoniaco y cloruro de amonio: En esta primera solucin se obtuvo un pH inicial de 10.3, luego se le agrego 1 mL de NaOH 0,01M y se obtuvo un pH de 10.26. Despus para corroborar la capacidad reguladora de esta solucin se tom como referencia la capacidad reguladora del agua la cual tuvo un resultado de la cual tiene una gran diferencia a comparacin a la de la solucin reguladora que es de Como se detalla en los resultados, el pH en la solucin amoniaco/cloruro de amonio fue de 0,25 mientras que en el agua fue de 4.24 adems que el de la solucin reguladora es mas grande comparado con la del agua, lo que definitivamente comprueba que la combinacin de un base dbil y una sal o acido conjugado funciona como reguladores de pH. Al agregarle 1 mL de la base fuerte inmediatamente el ion amonio neutraliza los hidroxilos provenientes de la base fuerte. Al neutralizar los hidroxilos provenientes del NaOH, se forma amoniaco pero para poder mantener el equilibrio en el sistema, el amoniaco debe disociarse para poder compensar los iones amonio gastados en la neutralizacin desplazando el equilibrio hacia al izquierda, y si todos los H+ provenientes del ion amonio se neutralizan, el sistema buffer de la solucin se acaba y el pH de la solucin sera dominado por el exceso de OH. Solucin de Acido actico y acetato de sodio De igual manera se hizo para la solucin acetato de sodio/acido actico el cual tena un pH de 5 en este caso se utiliz HCl 0,01 M y se le agreg 1mL a la solucin reguladora donde se obtuvo un pH final de 4,7 de manera similar se tom como referencia el agua donde se obtuvo un pH inicial de 5.38 y despus rebajo a 3.09. En esta ocasin el pH disminuye casi 3 unidades mientras que en el buffer el pH disminuy menos de una unidad, as queda evidenciado nuevamente que en el caso de las soluciones buffer acidas, la combinacin de un acido dbil y una sal o base conjugada, actan como sistemas reguladores del pH. As, si se aade 1 ml de una disolucin 0,01M de HCl a 50 ml de agua pura, el pH se reduce; pero si el cido fuerte se adiciona a una disolucin, que contenga cantidades iguales de cido actico y acetato sdico, el pH vara muy pocas unidades, debido a que la base neutraliza los iones hidrgeno segn la reaccin. Debido a que se forma ms acido actico, este, por mantener el equilibrio del sistema se disocia ms para mantener el Ka constante haciendo que el equilibrio se desplace hacia la izquierda y si todos los iones acetato son neutralizados, el sistema buffer de la solucin se acaba y el pH de la solucin sera dominado por el exceso de H+ proveniente del acido fuerte. La aplicacin de estas dichas soluciones es muy extensa, as que decidimos hacer un ejemplo con un medicamento como lo es el alka-seltzer, el cual sirve para la digestin. Para determinar la capacidad reguladora de este medicamento se fij el cambio de pH hasta el viraje de la solucin y luego se hall la capacidad reguladora con el volumen necesario de NaOH para cambiar el color de la solucin. El volumen necesario para cambiar el color en la solucin de 100 mL fue de 20 mL de NaOH 0,01 M. El valor de indicado para la solucin es de a comparacin a la del agua que fue de lo que comprueba que el alka-seltzer regula un poco ms que el agua sin importar que son 100 mL ya que al hacer el clculo con 50 mL tambin encontramos el valor.

7. PREGUNTAS
7.1 PREPARACIN DE SOLUCIONES REGULADORAS (ACETATO DE SODIO- CIDO ACTICO Y AMONIACO-CLORURO DE DE AMONIO)

a) El sistema amortiguador que usa la sangre para mantener el ph en 7,35 (aproximadamente), es el sistema cido carbnico-bicarbonato. El cido carbnico, y el in bicarbonato, son un par conjugado cido-base. Adems, el cido carbnico se puede descomponer en dixido de carbono y agua. Los equilibrios importantes de este sistema amortiguador son: (ac) + (ac) (ac) (l) + ( )

Los rganos principales que regulan el pH del sistema amortiguador cido carbnicobicarbonato son los pulmones y los riones. Ciertos receptores cerebrales son sensibles a la concentracin de y en los fluidos corporales. Cuando la concentracin de sube, los receptores activan un reflejo para que la respiracin sea ms rpida y profunda, con lo que aumenta la rapidez de eliminacin de de los pulmones. Los riones sirven para absorber o liberar H+ y ; gran parte del exceso de cido sale del cuerpo en la orina, cuyo pH normal es de 5.0 a 7.0. b) Existen varios tipos de soluciones reguladoras, entre esas estn: -El sistema cido dbil - Sal: Constituido por un cido dbil y una sal de ese cido y una base fuerte. Ejemplo: HAc / NaAc; HCN / NaCN. - El sistema Base dbil - Sal: constituido por una base dbil y una sal de esa base con un cido fuerte. Ej.: / Cl. - El Sistema Salino: puede estar constituido por: * una sal monosustituida y otra disustituida de un cido poliprtico dbil (por ej. una base fuerte. Ej.: / . * una sal disustituida y otra trisustituida del mismo cido. Ej.: / .

.) con

- Anfolitos: son sustancias que tienen en su molcula grupos cidos y bsicos. Son generalmente molculas de sustancias orgnicas, como por ejemplo los aminocidos (glicina). En el caso que se exigiera en un proceso un pH de 8.5, utilizaramos el proceso de base dbil/ sal.

c) La capacidad amortiguadora de una solucin de este tipo es la cantidad de cido o base fuerte que puede neutralizar desplazndose una unidad, y es mxima cuando [CIDO] = [BASE], es decir, cuando el pH es igual al pKa. La capacidad amortiguadora depende de la concentracin del par cido-base. As, cuanto mayor sea la concentracin de este par, mayor ser la cantidad de iones OH- o H+, respectivamente, que se podrn neutralizar. 7.2 PREPARACION DE SOLUCIONES REGULADORAS A PARTIR DE ACIDO FOSFRICO a) Si el valor calculado est bien, entonces tendremos que sugerir errores experimentales: Mal pesada de reactivos o mal medido el volumen, en caso de ser soluciones, influye la pureza de los reactivos, ya que si no estn puros y no se considera el peso de la impureza, entonces

tenemos menor cantidad de reactivo. Lo mismo sucede con soluciones concentradas que pueden perder su ttulo o concentracin por dejarlas destapadas, y tambin entra en juego la calibracin de los instrumentos de medicin: balanza, material volumtrico, pH-metro.

b) La capacidad mxima reguladora se alcanza cuando la constante de disociacin del acido dbil es numricamente igual a la concentracin de iones hidronio que se pretende regular. En esta circunstancias, la razn de la concentracin del acido dbil a la de la sal es aproximadamente igual a la unidad.

c) La dilucin no afecta el pH de la solucin buffer, pero s afecta considerablemente su poder de amortiguacin. Al ser diluida la solucin, en el buffer se modifica la relacin entre cido y base conjugada (o base y cido conjugado), por tal motivo no se produce cambios en su pH. En este caso, se diluye por igual ambas especies, por lo que su relacin no cambia. Es ms, como el volumen final es el mismo para ambos, se puede trabajar en la ecuacin de HendersonHasselbach con mmol o mol ya que el volumen final se cancela.

d) - Sistema amortiguador de fosfato El sistema amortiguador de fosfato interviene sobre todo en el amortiguamiento del lquido de los tbulos renales (en donde est presente en una gran cantidad) y de los lquidos intracelulares. Los elementos principales de este sistema son (anin fosfato dicido) y (catin fosfato monocido). Su mxima accin se ejerce a nivel intracelular, ya que es aqu donde existe una mayor concentracin de fosfatos y el pH es ms cercano a su pK (6.8). Este amortiguador que est implicado en la secrecin de cidos por tubos renales, es importante en la excrecin de por medio de la orina, ya que para que la excrecin de cidos sea eficiente se necesita de este y otros amortiguadores que eviten los bajones de pH en la orina. - Sistema amortiguador de las protenas Gracias a sus elevadas concentraciones, sobre todo en el interior de las clulas, las protenas son uno de los amortiguadores ms importantes del organismo. Constituyen el amortiguador ms abundante en el lquido intracelular y en el plasma. Las protenas se componen de aminocidos, contienen al menos un grupo carboxilo (-COOH) y al menos un grupo amino (-NH2); estos grupos son los elementos funcionales del sistema amortiguador protenico. El grupo carboxilo libre en un extremo de la protena acta como cido al liberar cuando se eleva el pH. En esta forma el puede reaccionar con cualquier exceso de que hay en la solucin. El grupo amino libre que se encuentra en el otro extremo de la protena puede actuar como base y combinarse con cuando disminuye el pH.

Por consiguiente, las protenas pueden amortiguar, tanto los cidos como las bases. Adems de los grupos terminales carboxilo y amino, siete de los 20 aminocidos tienen cadenas laterales que pueden amortiguar Una protena que es muy eficaz como amortiguador en los eritrocitos es la hemoglobina, que se encargada de transportar el oxgeno por la sangre desde los pulmones a los tejidos. Tiene un grupo prosttico denominado hemo, que est unido a un tomo de hierro y que es el responsable del color rojo a la sangre. Las caractersticas de la hemoglobina (Hb) como amortiguador estn ntimamente vinculadas a la capacidad de disociacin del grupo imidazlico de un aminocido histidina que se encuentra unido al hierro. El pK de este grupo funcional, que es aproximadamente 7, tiene la especial propiedad de modificarse en funcin de que la molcula de Hb est oxigenada (HbO2) o reducida (Hb). La oxihemoglohina (HbO2) es un cido ms fuerte que la Hb reducida (Su pK es menor). En efecto: HbH + + (pK = 7,9) (pK = 6,7)

Esta propiedad le confiere una eficacia amortiguadora excepcional, que se ve favorecida por el hecho de que la Hb es una protena muy abundante en la sangre (el 15% del total de protena). Por sus caractersticas, la hemoglobina cuando el pH sanguneo se eleva, esta tiende a liberar iones y, por lo tanto, se altera la curva de disociacin, habr tendencia a retener el oxgeno y se producir as un dficit de oxigenacin de los tejidos.

CONCLUSIONES
En todas nuestros clculos de capacidad reguladora donde los comparamos con agua tuvimos mayores valores en nuestras soluciones buffer que en el agua, dejando claro la poca capacidad reguladora del agua destilada que utilizamos en el laboratorio. Podemos ver que los medicamentos como el alka-setzer y la aspirina son buenos buffer ya que tienen una alta capacidad amortiguadora. Los cambios de pH del agua que debera de estar en 7 y los encontramos generalmente menores en todos nuestros clculos se deben a que el del aire se disuelve en el agua, formando , que como es un cido, libera al medio, acidificndolo.

BIBLIOGRAFIA
Skoog d, qumica analtica 8 ed. Thomson mexica; 2005 pg. 463-486

-Andrea lo que le resalte con letras rojas anteriormente, no s qu significa. -Cualquier cosa que le cambie, me indica x favor que es. -Si puede llegue temprano maana que necesito que me explique algo. - Yo puse el calculo que le dije que faltaba, la verdad no s de donde sali el 1,25 que el profesor puso en el tablero. Hable con Lina y el resultado que puso tambn fue el mismo que me dio a m en el ejercicio. -Hay datos que faltan (lo que ud midi en el pH-metro), yo no los tengo, entonces x favor anxelos al informe. - Como ud va hacer los arreglos finales le pido x favor que me lo envi cuando lo termine y por favor lo lleva en su memoria, y llega temprano para imprimirlo. -Por ultimo agregue la bibliografa que ud utilizo y si puede me enva fotos de los clculos que el profesor le dio el viernes que yo no estuve. Porque yo de eso no se nada. GRACIAS!!