MICROBIOLOGIA

SEMINARIO N 01: BACTERIAS 2012

INTRODUCCIN
Las bacterias poseen una estructura relativamente simple. Son microorganismos procariotas, es decir, unos microrganismos unicelulares sencillos, sin membrana nuclear y se reproducen por divisin asexual. La pared celular que rodea a las bacterias es compleja, y existen dos formas bsicas: una pared celular grampositiva con una gruesa capa de peptidoglucano y una pared celular gramnegativa con una delgada capa de peptidoglucano. Para realizar una clasificacin preliminar de las bacterias se utiliza su tamao (1- 20 m), forma (esferas, bastoncillos y espirales) y disposicin espacial (clulas aisladas, en cadenas y formando cmulos); mientras que su clasificacin definitiva se refiere a sus propiedades fenotpicas y genotpicas. A pesar de su simplicidad, las bacterias tienen una enorme gama de capacidades metablicas, por las diferentes funciones que cumplen en el organismo y el medio ambiente. Las bacterias son los organismos ms abundantes del planeta. El organismo humano est habitado por miles de especies bacterianas distintas. Tambin se encuentran bacterias en el ambiente (aire, agua y alimentos); aunque muchas de ellas son avirulentas, otras son capaces de provocar enfermedades mortales (clera , sfilis, difteria, etc).

En el presente trabajo describiremos la morfologa, estructura, metabolismo, reproduccin y nomenclatura de los diferentes tipos de bacterias, para as

conocer la forma de produccin de enfermedades o de ayuda al organismo y medioambiente.

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OBJETIVOS

Comprender la morfologa bacteriana.

Identificar la diferencia ms importante entre las bacterias grampositivas y gramnegativas. Explicar la estructura bacteriana y establecer diferencias con las clulas eucariotas.

Explicar el mecanismo de reproduccin de las bacterias y entender los procesos metablicos que tienen lugar en la clula bacteriana.

Comprender que la nomenclatura bacteriana trata de asignar a los organismos bacterianos un nombre cientfico correcto, admitido

internacionalmente Reconocer sus caractersticas mediante mtodos de exmenes, ya sea en fresco o por tincin.

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I.

MARCO TEORICO

CARACTERSTICAS GENERALES DE LAS BACTERIAS

Las bacterias son los microorganismos ms pequeos que contienen la maquinaria necesaria para crecer y multiplicarse. Se trata de organismos primitivos, de estructura sencilla que han sido capaces de poblar todos los hbitats terrestres. Son por ello un grupo muy heterogneo con muy diferentes necesidades nutricionales y energticas.

Hasta el desarrollo del microscopio electrnico no se pudo observar la estructura interna de las bacterias, consideradas hasta entonces como simples contenedores de enzimas sin estructura alguna, poseen una membrana celular que regula el intercambio de nutrientes y desechos con el exterior, y lo que es caracterstico de este grupo, una pared celular rodeando a la membrana, til en medios de baja presin osmtica evitando que estalle la clula. Sin embargo carecen de ncleo y de otros rganos rodeados por membrana (como las mitocondrias). Las dimensiones ms frecuentes de estos organismos oscilan entre 0,5 - 1 por 2 5 pm. Para hacerse una idea de lo que este tamao representa, se puede poner el ejemplo de que en un centmetro cbico caben aproximadamente un milln de billones de bacterias de tamao medio. Consecuencia de este pequeo tamao es la elevada relacin superficie - volumen de estos seres, lo que explica el rpido intercambio de sustancias con el exterior y por ello su gran velocidad de desarrollo.

La forma de las bacterias es variada, pueden ser esfricas (cocos), alargadas como un bastn (bacilos), con forma de estrella, de espiral (espirilos), comas, anulares, etc. Tambin se encuentran agrupadas, normalmente en cadenas ms o

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menos ramificadas (estreptococos, estafilococos, diplococos) carentes de estas estructuras son capaces de moverse mediante un mecanismo parecido a la reptacin.

Presentan estructuras especiales como pelos, flagelos, fimbrias, etc, que facilitan su movimiento y adherencia Bacterias carentes de estas estructuras son capaces de moverse mediante un mecanismo parecido a la reptacin.

Algunas bacterias estn rodeadas por una sustancia viscosa denominada cpsula puede ser un depsito de sustancias nutrientes de reserva e incluso productos de desecho. La presencia de cpsula es determinante, en algunas bacterias infecciosas, al impedir la accin de los fagocitos. El desarrollo de bacterias con cpsula mucosa ha producido graves problemas de colmatacin de filtros en sondeos.

Algunos gneros (Bacillus y Clostridium) presentan la capacidad de producir esporas extraordinariamente resistentes a las condiciones ambientales y agentes desinfectantes.

Sus necesidades nutricionales y energticas son muy variables. Existen grupos fotoauttrofos (obtienen la energa de la luz solar, como las clorobacterias y bacterias prpura). quirnioauttrofos (la obtienen de reacciones qumicas, como azobacterios, sulfobacterias, siderobacterias), aunque en su mayor parte son hetertrofas (obtienen la energa de la materia orgnica). Los elementos necesarios para el desarrollo de los rnicroorganismos se agrupan en dos categoras elementos mayoritarios (C, O, N, P, S, K, Na, Ca, Fe) y elementos minoritarios o traza, necesarios solo en cantidades muy pequeas (Mn, Mg, Cu, Sn, Mo) El carbono, necesario para la fabricacin de metabolitos intermedios y en general para los esqueletos carbonatados se obtiene del CO2 o de los compuestos orgnicos. El azufre, necesario para la sntesis de aminocidos y protenas, se obtiene de compuestos orgnicos azufrados o de sulfatos y sulfuros.

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El fsforo, empleado principalmente en la sntesis de fosfolpidos se obtiene de compuestos inorgnicos (fosfatos).

Dentro del grupo de las bacterias hetertrofas se encuentran los agentes causantes de enfermedad en el hombre, animales y plantas, constituyendo adems la mayor parte de la poblacin microbiana que nos rodea. En el, agua se encuentran principalmente bacterias Gramnegativas caracterizndose por ser capaces de vivir en medios oligotrficos (con baja concentracin de nutrientes).

MORFOLOGA BACTERIANA
Las bacterias presentan una amplia variedad de tamaos y formas. La mayora presentan un tamao diez veces menor que el de las clulas eucariotas, es decir, entre 0,5 y 5 m. Sin embargo, algunas especies como Thiomargarita namibiensis y Epulopiscium fishelsoni llegan a alcanzar los 0,5 mm, lo cual las hace visibles al ojo desnudo. En el otro extremo se encuentran bacterias ms pequeas conocidas, entre las que cabe destacar las pertenecientes al gnero Mycoplasma, las cuales llegan a medir solo 0,3 m, es decir, tan pequeas como los virus ms grandes. La forma de las bacterias es muy variada y, a menudo, una misma especie adopta distintos tipos morfolgicos, lo que se conoce como pleomorfismo. De todas formas, podemos distinguir tres tipos fundamentales de bacterias: Coco: de forma esfrica.

Diplococo: cocos en grupos de dos.

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Tetracoco: cocos en grupos de cuatro.

Estreptococo: cocos en cadenas.

Estafilococo: cocos en agrupaciones irregulares o en racimo.

Bacilo: en forma de bastoncillo.

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Formas helicoidales: Vibrio: ligeramente curvados y en forma de coma.

Espirilo: en forma helicoidal rgida o en forma de tirabuzn.

Espiroqueta: en forma de tirabuzn (helicoidal flexible).

Algunas especies presentan incluso formas tetradricas o cbicas. Esta amplia variedad de formas es determinada en ltima instancia por la composicin de la pared celular y el citoesqueleto, siendo de vital importancia, ya que puede influir en la capacidad de la bacteria para adquirir nutrientes, unirse a superficies o moverse en presencia de estmulos.

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ESTRUCTURA BACTERIANA

Las bacterias son organismos relativamente sencillos. Sus dimensiones son muy reducidas, unos 2 m de ancho por 7-8 m de longitud en la forma cilndrica (bacilo) de tamao medio; aunque son muy frecuentes las especies de 0,5-1,5 m. Carecen de un ncleo delimitado por una membrana aunque presentan un nucleoide, una estructura elemental que contiene una gran molcula circular de ADN. El

citoplasma carece de orgnulos delimitados por membranas y de las formaciones protoplasmticas propias de las clulas eucariotas. En el citoplasma se pueden apreciar plsmidos, pequeas molculas circulares de ADN que coexisten con el nucleoide, contienen genes y son comnmente usados por las bacterias en la conjugacin. El citoplasma tambin contiene vacuolas (grnulos que contienen sustancias de reserva) y ribosomas (utilizados en la sntesis de protenas).

Una membrana citoplasmtica compuesta de lpidos rodea el citoplasma y, al igual que las clulas de las plantas, la mayora posee una pared celular, que en este caso est compuesta por peptidoglicano (murena). Algunas bacterias, adems, presentan una segunda membrana lipdica (membrana externa) rodeando a la pared celular. El espacio comprendido entre la membrana citoplasmtica y la pared celular (o la membrana externa si esta existe) se denomina espacio periplsmico. Algunas bacterias presentan una cpsula y otras son capaces de desarrollarse como endosporas, estados latentes capaces de resistir condiciones extremas. Entre las formaciones exteriores propias de la clula bacteriana destacan los flagelos y los pili.

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- Fermentacin del cido butrico: Se ve en bacterias del gnero Clostridium (bacilo Gram+, anaerobio, esporulado). Las bacterias litotrofas pueden utilizar compuestos inorgnicos como fuente de energa. Los donadores de electrones inorgnicos ms comunes son el hidrgeno, el monxido de carbono, el amonaco (que conduce a la nitrificacin), el hierro ferroso y otros iones de metales reducidos, as como varios compuestos de azufre reducidos. En determinadas ocasiones, las bacterias metanotrofas pueden usar gas metano como fuente de electrones y como sustrato simultneamente, para el anabolismo del carbono. En la fototrofa y quimiolitotrofa aerobias, se utiliza el oxgeno como receptor terminal de electrones, mientras que bajo condiciones anaerbicas se utilizan compuestos inorgnicos. La mayora de los organismos litotrofos son auttrofos, mientras que los organismos organotrofos son hetertrofos. Adems de la fijacin del dixido de carbono mediante la fotosntesis, algunas bacterias tambin fijan el gas nitrgeno usando la enzima nitrogenasa. Esta caracterstica es muy importante a nivel ambiental y se puede encontrar en bacterias de casi todos los tipos metablicos enumerados anteriormente, aunque no es universal. El metabolismo microbiano puede jugar un papel importante en la biorremediacin pues, por ejemplo, algunas especies pueden realizar el tratamiento de las aguas residuales y otras son capaces de degradar los hidrocarburos, sustancias txicas e incluso radiactivas. En cambio, las bacterias reductoras de sulfato son en gran parte responsables de la produccin de formas.

GENTICA BACTERIANA
ntercambio y variabilidad gentica: La variabilidad gentica es interesante desde el punto de vista de que muchas de estos cambios genticos aportan resistencia a estas bacterias a ciertos medios, antibiticos. Mutacin ;cambio transmisible en el genoma bacteriano, que estransmisible.Estas mutaciones pueden ser puntuales y suficientes para dar lugar,por ejemplo, a una resistencia por el cambio en la transduccin de un proteina.

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Pueden ser mutaciones de segmentos del DNA, sustituciones de nucletidos, y microinserciones, o por el contrario provocar alteraciones en regiones ms grandes( inserciones y delecciones). Recordar que un slo cambio de en un nucletido lleva a la fabricacin de un proteina totalmente distinta, con lo que cambios leves pueden conllevar importantes consecuencias. Transferencia de genes Movimiento de material gentico entre bacterias. Transmisin vertical; Una bacteria transmite sus informacin gentica a traves de la divisin celular. Transmisin horizontal;Transmisin de material gentico de una bacteria a otra. Mecanismos de transmisin horizontal; transformacin, conjugacin, y transduccin. TRANSFORMACIN;

Las bacterias se transmiten material gentico atravs de DNA libre en el medio,elementos episomiales. La bacteria receptora tiene mecanismos para captar el DNA a travs de sus envolturas externas e introducirlo en su cromosoma. Los genes intracrosomales se recombinan dando lugar a genes mosaico.

CONJUGACIN;

Se produce cuando dos bacterias tienen contacto entre ellas para intercambiar material gentico. As se transmiten plsmidos, y otros elementos. Durante la conjugacin las bacterias donadoras poseen una estructura, conocida como '' pili'' en gram negativos, lo cual hace contacto con la clula receptora. Pasa una cadena de los plsmidos a la bacteria receptora quedando una en la bacteria donadora. Los plsmidos pueden adquirir genes de resistencia por conjugacin ( transposones e integrones).

TRANSDUCCIN

Transferencia de informacin gentica de una clula a otra atravs de un virus. Estos virus se denominan bacteriofagos o fagos. Penetran las membranas y la pared celular de la bacteria para inyectarle su material gentico. Durante la replicacin del fago, ste puede llevarse material gentico de la bacteria huesped,tanto plsmidos como material cromosmico.Luego salen de la bacteria, e infectan a otras, a las cuales les transmite e integran el DNA que llevan.

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BACTERIAS GRAM POSITIVAS Y GRAM NEGATIVAS

1. BACTERIAS GRAMPOSITIVAS En microbiologa, se denominan bacterias Gram positivas a aquellas bacterias que se tien de azul oscuro o violeta por la tincin de Gram: de aqu el nombre de "Gram-positivas" o tambin "grampositivas". Esta caracterstica est ntimamente ligada a la estructura de la envoltura celular por lo que refleja un tipo natural de organizacin bacteriana. Son uno de los principales grupos de bacterias, y cuando se tratan como taxn se utiliza tambin el nombre de Posibacteria. ESTRUCTURA Una bacteria grampositiva posee una pared celular gruesa que, consta de varias capas y est formada principalmente por peptidoglucano (150 a 500 A) que rodea la membrana citoplsmica. PEPTIDOGLUCANO: Es un elemento clave para la estructura, la replicacin y la supervivencia de las clulas en las condiciones normalmente hostiles en las que

proliferan las bacterias. Es un polmero de N-acetil-2-D-glucosamina, unido en orientacin -1,4 con N-acetil murmico, a ste se agregan por el grupo lactilo cuatro o ms aminocidos. Esta molcula se polimeriza gran cantidad de veces, de modo que se forma una malla especial, llamada sculo de murena. Durante una infeccin, el peptidoglucano puede interferir en la fagocitosis y estimular diversas respuestas inmmunitarias, como procesos pirognicos (es decir, que inducen la aparicin de fiebre).

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La capa de peptidoglicano confiere una gran resistencia a estas bacterias y es la responsable de retener el tinte durante la tincin de Gram.

Las siguientes caractersticas estn presentes generalmente en una bacteria Gram-positiva:

Membrana citoplasmtica. Capa gruesa de peptidoglicano. cidos teicoicos y lipoteicoicos, que sirven como agentes quelantes y en ciertos tipos de adherencia.

Polisacridos de la cpsula. Si algn flagelo est presente, este contiene dos anillos como soporte en oposicin a los cuatro que existen en bacterias Gram-negativas porque las bacterias Gram-positivas tienen solamente una capa membranal.

FILOGENIA Se reconocen dos filos principales de bacterias Gram-positivas. Uno de ellos es Firmicutes, que incluye muchos gneros bien conocidos tales como Bacillus, Listeria, Staphylococcus, Streptococcus, Enterococcus, y Clostridium. Este filo se ha expandido con la introduccin de los Mollicutes, bacterias similares a Mycoplasma que pierden las paredes celulares y no pueden ser teidas por el mtodo de Gram, pero son derivadas de tales formas. El otro filo es Actinobacteria, que incluye algunas de las bacterias ms tpicas de vida terrestre, desempeando un importante papel en la descomposicin de materia orgnica. stas y los Firmicutes son referidos, respectivamente, como grupos de G+C alto y bajo, basndose en el contenido de guanosina y la citosina en su ADN. Las bacterias Deinococcus-Thermus tambin presentan bandas Gram-positivas, sin embargo se clasifican con las bacterias Gram-negativas, pues son similares estructuralmente a estas.

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De acuerdo con la ltima revisin del Bergey's Manual of Systematic Bacteriology (2nd ed., April 2001) las bacterias Gram+ se subdividen en: FIRMICUTES Clase I: Clostridia orden I: Clostridiales

Clase II: Mollicutes (micoplasmas, sin inters medioambiental) Clase III: Bacilli orden I:Bacillales orden II: Lactobacillales.

ACTINOBACTERIA. Clase I. Actinobacteria.

Los phyla Firmicutes y Actinobacteria se corresponden con las dos grandes ramas en que en base a la composicin del DNA- tradicionalmente se han subdividido a los Gram +: Con bajo contenido en G+C (<50%): el grupo de Bacillus-

Clostridium-Streptococcus/Lactobacillus). Son los actuales Firmicutes Con alto contenido en G+C (aprox. 55%): la rama de los actinomicetos, o Actinobacteria.

Por razones didcticas vamos a agruparlas como: 1. "unicelulares" formadoras de endosporas (bacilos y clostridios) 2. "unicelulares" no formadoras de endosporas (bacterias del cido lctico) 3. con desarrollo miceliar (actinomicetos)

Su caracterstica ms distintiva y unitaria es que dan positivo en la tincin de Gram cuando sta se realiza sobre cl. creciendo exponencialmente.

I: UNICELULARES FORMADORES DE ENDOSPORAS

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Caractersticas: Forma bacilar Mviles por flagelos pertricos Quimiohetertrofos, con respiracin aerobia (algunos utilizan nitratos) o

fermentacin Su hbitat tpico es el suelo, siendo algunas patgenas (producen toxinas) Forman de clulas o estructuras de reposo y resistencia denominadas

endosporas Aerobios: gen. Bacillus. La mayora de las especies son saprfitas y se encuentran en el suelo (mayoritarios), agua, aire y vegetacin, siendo importantes agentes

mineralizadores de la materia orgnica. Ver inters clnico, industrial y medioambiental de: B. subtilis (bacitracina, indicador biolgico, fiebre del heno). B. cereus (intoxicacin alimentraria) B. anthracis (nico parsito: carbunco o ntrax) B. thuringiensis (insecticida biolgico contra orugas y mosquitos) B. stearothermophilus (indicador biolgico esterilizacin autoclave,

compostaje) Anaerobios: gen. Clostridium. Grandes, a veces pleomorfos. Esporas deformantes (centrales o terminales). Habitantes del suelo, incluyendo algunas especies patgenas (exotoxina, sin capacidad invasiva). Ver inters clnico, tecnolgico y medioambiental de: C. botulinum (botulismo, neurotoxina, intoxicacin alimentaria mortal) C. tetani (ttanos, neurotoxina, infeccin heridas mortal) C. perfringes (gangrena gaseosa, toxina histoltica, nico parsito invasivo)

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C. pasteurianum (fija N2 atmosfrico) C. butiricum y C. acetobutilycum (fermentaciones industriales, enriado)

II: UNICELULARES NO ESPORULANTES: BACTERIAS DEL CIDO LCTICO

Propiedades: forma bacilar o esfrica, inmviles anaerobios aerodricos, obtienen la energa mediante fermentacin (sin citocromos, catalasa negativa) de carbohidratos. Producen cido lctico: fermentacin homolctica o fermentacin heterolctica.

Hbitat (medios ricos en nutrientes): asociados con plantas en la leche (ver inters industrial :productos lcteos, vegetales

fermentados, etc.) formando parte de la biota normal del cuerpo humano

Taxonoma Orden Lactobacillales Familia I: Lactobacillaceae Gnero: Lactobacillus (bacilos regulares). Familia Enterococcaceae Gnero . IV:

Enterococcus Familia: V. Leoconostocaceae

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Gnero: Leuconostoc Fam. VI: Streptococcaceae Gnero: Streptococcus (S. pneumoniae , S. pyogenes);

Lactococcus (L. lactis, L. cremoris)

Nota: clsicamente las especies del gen. Streptococcus (cocos en pares o en cadena) se clasificaban en funcin de su capacidad hemoltica: 13-hemolticos: producen lisis total de los glbulos rojos. Autnticos patgenos. Incluye S. pneumoniae o pneumococo y S. pyogenes a-hemolticos: producen lisis parcial. Parsitos oportunistas. Y-hemolticos: sin lisis. Saprfitos, microbiota normal. Incluan S. faecalis (enterococo, indicador de contaminacin fecal. Hoy gn. Enterococcus) y S. lactis y S. cremoris (productos lcteos. Hoy gn. Lactococcus).

III: ACTINOMICETES

Grupo muy diverso de bacterias Gram + con mayor o menor desarrollo miceliar. Hetertrofos aerobios (algunos anaerobios facultativos). Tienden a crecer lentamente formando filamentos ramificados. En base a la extensin del filamento pueden hacerse dos grandes subdivisiones (sin rango taxonmico): proactinomicetes: desarrollo miceliar incompleto, transitorio o ausente euactinomicetes o esporoactinomicetes: se desarrollan exclusivamente en estado miceliar. Ver estructura de una colonia (micelio de substrato, micelio areo, zoosporas)

Taxonoma. Infinidad de grupos. Algunos gneros interesantes son:

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Propionibacterium Bifidobacterium

ACTINOBACTERIAS Y MICROCOCOS. Escaso o nulo desarrollo miceliar. Son saprfitas del suelo donde actan como importantes agentes mineralizadores (Arthrobacter) o forman parte de la biota normal (Micrococcus, Actinomyces).

CORINEBACTERIAS. C. diphteriae, agente de la difteria. Mycobacterium: M. tuberculosis y M. leprae son los agentes causales de la tuberculosis y la lepra. Nocardia. Micelio fragmentario. Saprfitas del suelo donde degradan muchos compuestos. OTROS SUB-ORDENES Frankia. Verdadero micelio. Forma ndulos fijadores de N2 en rboles (no leguminosas). Streptomyces. Arquetipo de bacterias con desarrollo miceliar: micelio de sustrato, areo y esporas reproductivas en el extremo de las hifas. Habitantes naturales del suelo. Inters: ambiental: capaces de degradar sustancias complejas (lignocelulosa, quitina o peptidoglicano) contribuyendo notablemente a la mineralizacin de estos compuestos en el suelo, compostaje, ... clnico: son los principales productores de antibiticos. V.g.: S. aureofaciens (tetraciclina), S. erythraeus (eritromicina), S. fradiae (neomicina), S. griseus (estreptomicina), S. racemosus (terramicina), S. venezuelae (cloranfenicol), etc.

2. BACTERIAS GRAM NEGATIVAS Bacterias Gram negativas a aquellas bacterias que no se tien de azul oscuro o violeta por la tincin de Gram: de ah el nombre de "Gram-negativas" o tambin

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"gramnegativas". Esta caracterstica est ntimamente ligada a la estructura de la envoltura celular, por lo que refleja un tipo natural de organizacin bacteriana. Son uno de los principales grupos de bacterias y cuando se tratan como taxn se utiliza tambin el nombre de Negibacteria.

ESTRUCTURA: La envoltura celular de las bacterias Gram-negativas est compuesta por una membrana citoplasmtica (membrana interna), una pared celular delgada de peptidoglicano, que rodea a la anterior, y una membrana externa que recubre la pared celular de estas bacterias. Entre la membrana citoplasmtica interna y la membrana externa se localiza el espacio periplsmico relleno de una sustancia denominada periplasma, la cual contiene enzimas importantes para la nutricin en estas bacterias. La membrana externa contiene diversas protenas, siendo una de ellas las porinas o canales protecos que permiten el paso de ciertas sustancias.

CUADRO COMPARATIVO DE LAS BACTERIAS GRAM POSITIVAS Y GRAM NEGATIVAS:

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MICROBIOLOGIA Bacterias Espesor de pared GRAMPOSITIVAS Oscila entre 15 y 30 nm

SEMINARIO N 01: BACTERIAS 2012 GRAMNEGATIVAS De 10 nm

Componente pared

de

Capa gruesa y compacta con Capa de aspecto trilaminar, macromolcula denominada con lamina la PEPTIDOGLUCANO adicional(membrana externa) LIPOPOLISACARIDO Pared celular de tie de color Pared celular se torna de color VIOLETA ROSADO Rugoso y cerebriforme

Tincin de GRAM

Membrana impregnada Homogneo y compacto con tetraoxido de osmio

Presenta

ACIDO TEITOICO

Entre la membrana plasmticas y pared celular al ESPACIO PERIPLASMATICO

Causante de enf. resp: Haemophilus influenzae Legionella pneumophila Causante de enf. urinarias: Escherichia coli Enterobacter cloacae. Causantes de enf. gastroint:

Genero que incluye

Bacillus Listeria Estaphilococcus Estreptococcus clostridium

Helicobacter pylori salmonella enteritis Salmonella tiphi Este tipo de bacteria no es La membrana externa tan resistente al antibitico (lipopolisacaridos) proporciona penicilina a estas bacterias resistencia a la lizosima y penicilina

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TAXONOMIA BACTERIANA
El desarrollo de la biologa molecular abri posibilidades para la caracterizacin de los organismos, cosa que tiene gran impacto en la taxonoma bacteriana. Tiene particular inters ciertas tcnicas que profundizan las propiedades genotpicas completando as las hasta ahora caracterizaciones exclusivamente fenotpicas de estos organismos. Las bacterias pueden clasificarse con base en diferentes criterios, como estructura celular, metabolismo o con base en diferencias en determinados componentes como ADN, cidos grasos, pigmentos, antgenos o quinonas.

a) Clasificacin fenotpica Las morfologas microscpica y macroscpica de las bacterias fueron las primeras caractersticas utilizadas para identificarlas. Por ejemplo: Clasificar segn su capacidad de retencin de la tincin de Gram (microorganismos grampositivos y gramnega-tivos) Por la forma de cada clula (cocos, bacilos, espirilos). La pigmentacin, el tamao y la forma de las colonias y el olor de las colonias) tambin se emplea en la identificacin de las bacterias. Los mtodos ms frecuentes y que todava se utilizan en la identificacin de las bacterias consisten en determinar la presencia o la ausencia de unos marcadores bioqumicos especficos. Por ejemplo: capacidad de fermentacin de hidratos de carbono especficos o la utilizacin de diferentes compuestos como fuente de carbono para poder proliferar.

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presencia de protea-sas, lipasas o nucleasas especficas; o presencia de enzimas hidrolticas especficas como lipasas y nucleasas.

El empleo de ciertas pruebas bioqumicas permite

se han empleado para

subdividir los grupos de microorganismos ms all del nivel de especie, principalmente con fines epidemiolgicos. Por ejemplo: Tcnica de la determinacin del biotipo o biotipado: determinar si un

grupo de microorganismos pertenecientes al mismo gnero y especie comparten un origen comn o bien proceden de fuentes distintas. Tcnica del serotipado: se realizan con el fin de identificar microorganismos que son inertes frente a las pruebas bioqumicas, Dado que numerosas bacterias poseen antgenos caractersticos, los anticuerpos utilizados para su deteccin constituyen una potente herramienta diagnstica (p. ej., Francisella, el microorganismo causante de la tularemia), cuyo cultivo es difcil o imposible (p. ej., Trepo-nema pallidum, el microorganismo responsable de la sfilis), asociados a sndromes especficos (p. ej., el serotipo 0157 de Escherichia coli, responsable de la colitis hemorrgica) o deben identificarse de forma rpida (p. ej., S. pyogenes, responsable de la faringitis estreptoccica). Por otra parte, la determinacin de los serotipos se emplea tambin con fines epidemiolgicos. Otros ejemplos: Antibiograma: El estudio de los patrones de sensibilidad del microorganismo frente a distintos antibiticos. Lisotipado:(susceptibilidad a determinados virus que infectan a las bacterias). Las tcnicas de susceptibilidad a los antibiticos tienen un menor poder de discriminacin. El lisotipado es una tcnica engorrosa, por lo que actualmente ha sido sustituida por tcnicas genticas con mayor sensibilidad.

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b) Clasificacin analtica Las caractersticas analtica de las bacterias se han utilizado tambin para clasificarlas en gneros, especies y subes-pecies. El patrn cromatogrfico de los cidos miclicos de la pared celular es caracterstico de un gran nmero de especies de micobacterias, por lo que durante muchos aos se ha utilizado en la identificacin de las especies aisladas con mayor frecuencia. El anlisis de los lpidos presentes en la totalidad de la clula tambin es un mtodo til para la descripcin de numerosas especies bacterianas y de levaduras. Otras tcnicas empleadas para la caracterizacin, fundamentalmente a nivel de subespecie y con fines epidemiolgicos, son el anlisis de las protenas celulares (anlisis protemico mediante espectroscopia de masas) y las enzimas celulares (electroforesis enzimtica tipo multi-loci). Sin embargo, y pese a que estos mtodos analticos son precisos y reproducibles, requieren un gran trabajo y una instrumentacin muy cara. Por tal motivo, estos anlisis se emplean

principalmente en los laboratorios de referencia

c) Clasificacin genotpica Este tipo de clasificacin es el ms preciso ya que el anliza el material gentico de las bacterias. La hibridacin del ADN (cido desoxirribonucleico) se utiliz en un principio para establecer la relacin existente entre las cepas bacterianas (es decir, para determinar si dos cepas pertenecan al mismo gnero o especie), ms recientemente esta tcnica se ha empleado para conseguir una rpida identificacin de los microorganismos mediante el uso de sondas moleculares. Se extrae el ADN del microorganismo a identificar y se expone a unas sondas moleculares especficas de unas especies concretas. La fijacin de la sonda al ADN permite confirmar la identidad del microorganismo. Esta tcnica tambin se ha utilizado para la identificacin directa de microorganismos en muestras clnicas, lo cual evita la necesidad de cultivarlos.

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Una ampliacin del mtodo de hibridacin es el llamado anlisis de secuencias de cidos nucleicos. Estas secuencias se amplifican hasta producir millones de copias, tras lo cual se secuencia el material gentico amplificado con el propsito de definir la identidad exacta de la cepa. La aplicacin ms frecuente de este mtodo es el anlisis de secuencias de ADN ribosmico, puesto que existen tanto secuencias de ADN muy conservadas (especficas de familia o genero) como secuencias muy variables (especficas de especie o de subespecie). Esta tcnica tambin se ha empleado para definir la relacin evolutiva existente entre distintos microorganismos, as como para identificar microorganismos de crecimiento difcil o imposible. La mayor parte de los cambios recientes introducidos en la nomenclatura taxonmica se han relacionado con la aplicacin del anlisis de secuencias de cidos nucleicos. Una ampliacin de este mtodo es la secuenciacin del genoma completo de una bacteria, la cual es ya posible desde el punto de vista tcnico, aunque an no se haya utilizado con fines diagnsticos. Otros mtodos utilizados fundamentalmente para clasificar los microorganismos a nivel de subespecie y con fines epidemiolgicos son el anlisis de plsmidos, el ribotipado y el anlisis de fragmentos del ADN cromosmico.

d) Otro criterio de clasificacin de las bacterias es el medio en el que podemos encontrarlas: Bacterias que degradan materia orgnica en descomposicin. Cumplen un papel esencial en el ciclo del carbono. Simbiticas: bacterias asociadas a otro ser vivo. Esta relacin genera un beneficio mutuo. Un ejemplo de estas bacterias son las bacterias de la flora intestinal que producen vitamina K. El hospedador, es decir, el individuo al que parasita, le otorga a cambio, energa en forma de materia orgnica y un medio apropiado para vivir.

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Comensales: bacterias asociadas a otro ser vivo, sin desprenderse de esta relacin, ni un beneficio, ni un perjuicio para el hospedador. Ejemplo de este tipo de bacterias podemos encontrarlo en las bacterias que viven sobre nuestra piel, alimentndose de clulas descamadas. muchas bacterias de este tipo son bacterias oportunistas, ya que pueden causar enfermedad en el hospedador Parsitas: bacterias que sobreviven a expensas de otro ser al que causan un perjuicio. Ejemplo de este tipo de bacterias sera cualquiera de ellas que nos produzca una enfermedad.

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