1 1. OBJETIVOS Observar os diferentes tipos de fungos existentes no ar.

Aprender tcnicas de isolamento de fungos e leveduras e estudar as caractersticas macroscpicas e microscpicas dos mesmos.

2.

INTRODUO

A identificao dos fungos baseada quase que exclusivamente em sua morfologia tanto macro como microscopicamente. Macroscopicamente os fungos podem apresentar vrios tipos morfolgicos com colnias filamentosas, cotonosas, pulverulentas e outras (bolores) e cremosas (leveduras) e com os mais diversos tipos de pigmentos.

A grande maioria dos fungos vive no solo fazendo parte da reciclagem dos materiais na natureza. So encontrados tambm nos vegetais, gua, nos animais, etc. Os fungos formam diversas estruturas de disperso, sendo a principal, os esporos, e atravs de dispositivos especiais, essas estruturas entram em contato com vrias vias de disperso. A principal via de disperso o ar atmosfrico, atravs dos ventos. Os fungos que se dispersam pelo ar atmosfrico so denominados de fungos anemfilos e tem importncia em alergias no homem e como agentes deteriorantes de diversos materiais.

O isolamento de fungos pode ser feito diretamente a partir de algum substrato ou de um compartimento ambiental (ar, gua, solo), utilizando vidraria (tubos de ensaio, placas de petri) e instrumentos (estiletes, pinas, agulhas) esterilizados, com a manipulao em uma zona de segurana prximo a uma chama e/ou em uma cmara de fluxo laminar. Para que ocorra o isolamento dos fungos, necessrio oferecer condies propcias para o desenvolvimento dos mesmos. O isolamento pode ser realizado a partir de cmaras midas (recipiente semi-fechado com fonte de umidade (ex. placas de petri forradas com papel filtro embebido com gua destilada estril) ou a partir de um meio de cultura slido ou lquido, semi-sinttico ou sinttico (ex. tubos de ensaio ou placas de petri contendo meio de cultura).

3. MATERIAIS Tubos de ensaio para fermentao com caldo glicosado (CG) Placas de Petri contendo meio de cultura Agar Sabouraud (AS); Ala de platina; Bico de bunsen; Tubos de cultura; Lminas para observao.

4. PROCEDIMENTO Selecionou-se trs placas de petri, contendo meio de cultura AS e identificou-se as mesmas de acordo com o ambiente a ser analisado; No ambiente escolhido, as placas foram abertas e deixadas expostas com o ar por um perodo de 10 minutos; Tampou-se as placas, e em seguida esse material foi levado para a encubadora temperatura ambiente; Cinco dias depois, observou-se o crescimento das colnias de fungos nas placas e cada integrante escolheu sua colnia para isolamento e observao; Em seguida, foi transferido com a ala de platina, devidamente flambada, parte da colnia para um tubo e para uma placa com meio de AS. Foi necessrio tomar o devido cuidado na hora de transeferir parte da colnia para a placa, para evitar o excesso de esporos no meio de cultura; Dois dias depois, observou-se o crescimento da colnia gigante e a partir da cultura crescida no tubo foi feita uma observao ao microscpio para determinar tipo de esporos, classe e gnero do fungo analisado; Tambm foi realizado um isolamento de leveduras a partir de uma cultura previamente inoculada; Tambm observou-se as caracteristicas macroscpicas e microscpicas das mesmas; Observou-se tambm o poder fermentativo das mesmas, inoculando uma pequena quantidade da colnia nos tubos de ensaio com caldo glicosado;

5. RESULTADOS Observou-se um grande crescimento de fungos em todas as placas, principalmente na que foi exposta na sala de aula, impossibilitando at o isolamento do mesmo, para evitar possveis contaminaes. Em seguida, foram escolhidas colnias das placas considerveis seguras que foram transferidas com ala de platina para uma placa de petri e para um tubo com AS e incubou-se a temperatura ambiente para obter a colnia gigante e a cultura pura, como foi descrito no procedimento.

5.1. CARACTERSTICAS MACROSCPICAS A colnia escolhida era de tamanho grande, com colorao superior preta e fundo creme, forma arredondada, consistncia aveludada, com bordas brancas, sem brilho caracterstico e nem pigmento solvel. J a colnia de levedura escolhida era de tamanho pequeno, com colorao branca, forma arredondada, bordas irregulares, sem brilho e sem pigmento solvel.

5.2. CARACTERSTICAS MICROSCPICAS A observao microscpica foi feita a partir da cultura pura do microorganismo crescido em tubo com AS. Foram feitas obsevaes in vivo para os fungos e para as leveduras. Foi possvel observar, na colnia de fungos do ar, a presena de hifas septadas e ramificadas, alm de condeos (tipo de esporo assexuado), indicando assim, que o fungo isolado pertence a classe Eurotiomycetes, do gnero Aspergillus. J na colnia de leveduras, foi possvel observar sua forma arredondada, a presena de vacolos dentro das clulas e tambm a presena de broto, indicando a reproduo assexuada por brotamento. Constatou-se tambm que a cultura estava pura, ou seja, sem a presena de outros microorganismos (bactrias, fungos...)