UNIVERSIDAD AUTNOMA DE QUERTARO

MECANISMOS DE TRANSPORTE DE MEMBRANA

Laboratorio de Fisiologa

22/08/2012

Introduccin:
Las membranas celulares estn constituidas por una bicapa lipdica, dentro de la cual se insertan protenas, en una proporcin variable. Estas protenas pueden ser perifricas o integrales. Segn atraviesen o no la bicapa lipdica; tambin es comn la presencia de hidratos de carbono. Dichas membranas fueron desarrolladas para controlar la fluidez de las molculas necesarias para la clula. La permeabilidad se refiere a la capacidad de un material para que un fluido lo atraviese sin alterar su estructura interna; de esta manera se vuelve semipermeable dejando pasar slo algunos elementos necesarios; y esto depende de varios factores como polaridad, tamao, temperatura, etc. La permeabilidad de una clula para un soluto pude definirse por la facilidad con la que el soluto puede desplazarse a travs de la membrana por difusin. El concepto de permeabilidad es vlido tanto para lo que se disuelve en el interior tanto como para lo que pasa a travs de canales. La difusin es el proceso mediante el cual los tomos o la s molculas se mueven debido a su movimiento trmico aleatorio, llamado tambin movimiento browniano. La difusin suele conducir a un estado en el que la concentracin de las especies que difunden es constante en el espacio y el tiempo y tiende a igualar concentraciones a ambos lados de la membrana. El trfico molecular a travs de las membranas biolgicas es vital para la mayora de los procesos celulares, algunas molculas se mueven a travs de ella por difusin simple entre las molculas que constituyen la membrana, por ejemplo benceno, oxgeno y nitrgeno. Otro tipo de difusin es la facilitada donde utiliza canales (formados por protenas de membrana) para permitir que molculas cargadas (que de otra manera no podran atravesar la membrana) difundan libremente hacia afuera y adentro de la clula. Estos canales son usados sobre todo por iones pequeos tales como K+, Na+, ClLa smosis es un tipo especial de transporte pasivo en el cual slo las molculas de agua son transportadas a travs de la membrana. El movimiento de agua se realiza desde el punto en que hay menor concentracin de solutos al de mayor concentracin para igualar concentraciones en ambos extremos de la membrana bicapa fosfolipdica La funcin de la osmosis es mantener hidratada a la membrana celular. Dicho proceso no requiere gasto de energa. Una solucin ser isotnica cuando una clula, sumergida en ella, no cambie su volumen. Eso se debe a que no ha habido un flujo neto de agua desde adentro hacia afuera o desde afuera hacia adentro de la clula. Esto quiere decir que la

presin osmtica efectiva es la misma adentro que afuera. De all el nombre de isotnica: de igual presin. En una solucin hipotnica, el total de la concentracin molar de todas las partculas disueltas, es menos que el de otra solucin o menos que el de la clula. Si las concentraciones de solutos disueltos son menos fuera de la clula que dentro, la concentracin de agua afuera es correspondientemente ms grande. Cuando una clula es expuesta a condiciones hipotnicas, hay un movimiento neto de agua hacia dentro de la clula. Las clulas sin pared celular se inflan y pueden explotar (lisis). si el exceso de agua no es removido de la clula. Las clulas con paredes celulares a menudo se benefician de la presin que da rigidez en medios hipotnicos.En una solucin hipertnica, la concentracin molar total de todas las partculas de soluto disuelto, es ms grande que el de la otra solucin, o ms grande que la concentracin el la clula. Si las concentraciones de solutos disueltos es mayor fuera de la clula, la concentracin de agua es correspondientemente menor. Como resultado, el agua dentro de la clula sale para alcanzar el equilibrio, produciendo un encogimiento de la clula. Al perder agua la clula tambin pierden su habilidad para funcionar o dividirse. Los medios hipertnicos, como la salmuera o jarabes, han sido utilizados desde la antigedad para preservar la comida, debido a que los microbios que causan la putrefaccin, son deshidratados en esos medios hipertnicos y son incapaces de funcionar. Todos estos tipos de difusin ocurren sin ningn ingreso de energa por lo cual se dice que es un transporte pasivo; sin embargo existen un transporte activo que es un mecanismo celular por medio del cual algunas molculas atraviesan la membrana celular contra un gradiente de concentracin, es decir, desde una zona de baja concentracin a otra de alta concentracin con el consecuente gasto de energa. Los ejemplos tpicos son la bomba de sodio-potasio, la bomba de calcio o simplemente el transporte de glucosa. El proceso mediante el cual una clula ingiere macromolculas, material particulado y otras sustancias desde el espacio extracelular se conoce como endocitosis. La fagocitosis es el proceso de englobamiento de material particulado grande como microrganismos, fragmentos celulares, y clulas los ms comunes son los glbulos blancos, neutrfilos y monocitos, lo hacen cuando la clula repliega su membrana para englobar a la macromolcula. Una bomba transportadora se refiere una protena transmembrana que transporta iones de afuera hacia dentro y de adentro hacia afuera al mismo tiempo, un ejemplo es la bomba Na-K y los procesos que tienen lugar en el transporte son: 1. Unin de tres Na+ a sus sitios activos. 2. Fosforilacin de la cara citoplasmtica de la bomba que induce a un cambio de conformacin en la protena. Esta fosforilacin se produce por la transferencia del grupo terminal del ATP a un residuo de cido asprtico de la protena. 3. El cambio de conformacin hace que el Na+ sea liberado al exterior.

4. Una vez liberado el Na+, se unen dos iones de K+ a sus respectivos sitios de unin de la cara extracelular de las protenas. 5. La protena se desfosforila producindose un cambio conformacional de sta, lo que produce una transferencia de los iones de K+ al citosol.

Hiptesis:
1.- En la difusin simple pasan molculas pequeas y liposolubles 2.- La osmosis depender de los gradientes de concentracin que existan en ambos lados de una membrana buscando siempre llegar a una solucin isotnica. 3.-Si una sustancia no pasa por difusin simple o facilitada significa que es muy grande, hidrosoluble y que necesita forzosamente una protena trasportadora y un gasto de energa para pasar.

Materiales y mtodos:
Es necesario el programa de escritorio physioEx. Computadora. Actividad 1 difusin simple: Consiste bsicamente en poner dos soluciones y una membrana semipermeable entre ellas para poder ver cules son capaces de pasar a travs de ella por difusin simple; se realizaron varios ensayos , todos con una cantidad de 9mM y cada suluto(NaCl, urea, glucosa y albina) se probaron con todas las membranas (20, 50, 100 y 200MNCO); y los resultados fueron los siguientes:
Cantidad 9 mM 9 mM 9 mM 9 mM Soluto NaCl Urea Albumina Glucosa 20 MNCO No difusin No difusin No difusin No difusin 50 MNCO 4.5/10min No difusin No difusin No difusin 100 MNCO 4.5/10min Eq. 16 min No difusin No difusin 200 MNCO 4.5/10min Eq. 16 min No difusin Eq. 37 min

Actividad 2 difusin facilitada: Nuevamente se ponen dos soluciones pero esta vez es con una membrana con trasportadores para poder ver como acta la difusin facilitada y los resultados fueron:
Soluto 500 glucose carriers 700 glucose carriers 900 glucose carriers Glucosa 2mM Eq. 43 min Eq. 33 min Eq. 27 min Glucosa 8mM Eq. 58 min Eq. 43 min Eq. 35 min

Actividad 3 presin osmtica En esta actividad se ve cmo viaja por smosis un soluto de NaCl en varias membranas y si se establece una presin, los resultados fueron:
Soluto 8mM NaCl 20 MNCO de No difusin, rechazado, presin de 272 mm Hg. 50 MNCO equilibro Equilibrio 10 min. 100 MNCO Eq. 10 min 200 MNCO Eq. 10 min

Resultados:
Act. 1 1. El soluto que fue capaz de difundir del recipiente izquierdo al derecho fue: NaCl en 50, 100 y 200 MNCO; urea en 100 y 200 MNCO; y glucosa nicamente en 200 MNCO. 2. La albmina no difundi porque la forma en que entra a la clula no es pasiva. 3. Si en un recipiente hubiera albmina y urea para poder remover esta ultima de ah sera necesario una membrana de 100 o 200 MNCO ya que por ellas puede pasar libremente la urea mientras que la albumina no; un ejemplo clnico en la que es til es en la determinacin del filtrado glomerular donde se puede determinar algunas enfermedades como nefropata diabtica. 4. Si en el recipiente hubiera una mezcla de urea, albmina y NaCl, para separar este ltimo solo sera necesario poner una membrana de 50 MNCO ya que ni la urea ni la albmina son capases de difundir en ella. Act. 2 1. Conforme se aumenta el nmero de protenas transportadoras los solutos difunden ms pronto, esto se debe a que no se saturan por ser ms. 2. Si hubiera glucosa en ambos recipientes no pasara nada con el transporte ya que no se buscara un equilibrio puesto que ya lo alcanz 3. Si hubiera NaCl presente no se afectara la concentracin de glucosa porque NaCl usa difusin simple y la glucosa facilitada. Act. 3 1. Solamente en la membrana de 20 hubo una presin de 272 mm Hg mientras que en las otras ninguna. 2. Solo las membranas de 50, 100 y 200 MNCO permiten el paso de NaCl 3. Como la de 20 no permite difusin de NaCl se ejerci presin ya que esta no poda salir, sin embargo las otras no presentaron pues las membranas si permiten la difusin. 4. Si todos los solutos difunde no se ejerce presin de ningn tipo porque el soluto puede pasar libremente y alcanzar un equilibrio.

Discusin y conclusiones:
El conocimiento del paso de diversos solutos a travs de una membrana es muy importante, al igual que el mtodo por como lo hacen ya que nos puede ayudar en varios exmenes y diagnsticos, por ejemplo separando sustancias. Algo interesante es que no pasa por difusin simple solo las sustancias liposolubles.

Bibliografa
http://faa.unse.edu.ar/document/apuntes/biol/Permembr.pdf Hill, Wyse, Anderson; Fisiologa Animal, Ed. Panamericana, Espaa, 2004, 79 pp. Berney y Levy, Fisiologa, ed. Elsevier, Espaa, 2006, 806 pp. Leslie P. Gartner, texto Atlas de Histologa, Ed. Mc Graw Hill, Mxico 2008