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Mtodos de aislamiento
Tcnicas de Aislamiento de hongos y
Aislamiento de hongos y bacterias
bacterias fitopatgenas.
Aislamiento de flora epiftica, de suelo,
rizosfera.
Unidad de Fitopatologa Dto. de Proteccin Vegetal Facultad de Agronoma. Dr. Pedro Mondino 24 de abril al 5 de mayo de 2012
indirectos.
Uso de medios selectivos. Uso de cebos.
Mtodos de aislamiento
Sembrando trozos de tejido vegetal de la zona de
aislar a los patgenos. Se busca tomar trozos de la zona de avance para incrementar las chances de aislar al patgeno. Los trozos de tejido vegetal se someten a una desinfeccin superficial. En el caso de bacterias es posible macerar un trozo de tejido afectado y luego sembrar
Bistur
Zona de avance
posible tomar una pequea porcin del mismo y sembrar en una placa con medio de cultivo.
posible tomar una pequea porcin del mismo y sembrar en una placa con medio de cultivo.
tomar una pequea porcin del mismo y sembrar en una placa con medio de cultivo.
Ansa
Estriado en placa
cmara hmeda.
Uso de cebos
Trozos de manzana verde son utilizados para
Uso de cebos
Cebos utilizados para aislar Pythium: ptalos de clavel (Dianthus caryophyllus L.) Caamones (Cannabis sativa L.) hervidos. Trozos de zanahoria (Daucus carota L.) Papa (Solanunt tuberosum L.) + agar-agua. Trozos de tomate verde (Lycopersicon esculentum L) Acculas de pino (Pinus spp.).
Colonizadores de patgenos
Se pueden encontrar antagonistas colonizando
Colonizadores de esclerotos
placas con 100 L (0.1 ml) en medios de cultivo (dependiendo del tipo de microorganismos que queramos aislar) y luego se incuban.
Se aslan colonias separadas de distinta morfologa y
Microorganismos rizofricos.
Microorganismos aislados de la rizosfera de
plantas de tomate.
de suelo.
Cultivos puros
para obtener un cultivo puro se debe inocular o
Mtodos de aislamiento
Para aislar clulas individuales, los
introducir, una sola clula o propgulo de un microorganismo en un medio slido o lquido, esterilizado previamente.
microorganismos han de ser diluidos, debido al gran numero en que normalmente estn presentes. La dilucin se realiza, normalmente, por uno de los siguientes sistemas:
Colonias aisladas
Aislamiento de bacterias
Aislamiento por estriado
Cultivos monospricos
Para asegurarnos la homogeneidad gentica de un
cultivo de hongos se recurre a la tcnica de cultivo a partir de una nica espora. Los cultivos monospricos se pueden realizar:
sembrando en superficie una suspensin de esporas y luego observando bajo lupa o microscopio repicar. Sembrando diluciones de forma que crezcan colonias aisladas.mm
Cultivos monospricos
Monospricos de Venturia inaequalis.
Metodologa
Metodologa
Monospricos a partir de colonias aisladas de una