HOSPITAL REGIONAL DEL CUSCO INTERNADO-2013

CONTROL DE CALIDAD EN PROCEDIMIENTOS EN LABORATORIO DE ANATOMIA PATOLOGICA

INTERNO DE TECNOLOGA MDICA: MANUEL JACINTO CONCHA CHVEZ

QUE ES CALIDAD?
La calidad es el factor principal en el desarrollo e implementacin exitosa de procedimientos dados para alcanzar las metas propuestas

Es el resultado total de las caractersticas del producto y servicio el cual satisfar las expectativas del cliente

SEGURIDAD EN EL LABORATORIO
Comentario general de la seguridad en el laboratorio Manual de procedimientos y Manual de seguridad Debe cubrir: Todos los procedimientos, reactivos, qumicos, partes de equipos de laboratorio, seguridad elctrica, infecciones, primeros auxilios, reporte se accidentes, inspecciones y entrenamiento.

SEGURIDAD EN EL LABORATORIO
Entrenamiento en materiales de seguridad Letreros y rtulos de preparacin Vestimenta protectora y primeros auxilios Desechos de sustancia qumicas peligrosas Almacenamiento de materiales inflamablees

SEGURIDAD EN EL LABORATORIO
Inspeccion de seguridad: 1. Inspeccin para autoridades independientes:
Revisin detallado de procedimientos de seguridad, equipo y trabajo Debe haber documentos de quien recibi entrenamiento, cuando fue dad y por quin Los documentos de mantenimeintos de equipos y funcionamiento correcto debe estar disponible para todos

2. Inspeccin interna:
Programados a intervalos regulares Debe haber una lista de los detalles y preguntas (cuestionario)

PROCESOS ANALTICOS: FASE ANALTICA

Matemticas en el laboratorio: Solucin porcentual
v/v p/v diluciones contenido del colorante
Manufacturador, % vara de lote a lote contenido porcentual radio de correccin

Solucin molar Solucin normal Conversin de temperatura

PROCESOS ANALTICOS: FASE ANALTICA

Preparacin de soluciones: Formol al 10% Alcohol (100, 90, 80, 70) Hematoxilina: solucin matriz A + solucin matriz B Alcohol cido: 1ml HCL + 99ml etanol (70%) Agua amoniacal: 2-4ml NH2OH (28%) + 800-1000ml H2O Eosina: 100ml eosina+10ml floxina B+780ml de etanol (95%)+4ml de cido actico

PROCESOS ANALTICOS: FASE ANALTICA

Fijacin de tejidos:
Tejido endurecido ligeramente pero no se debe encoger ni fragmentar Formol al 10% Tener en cuenta ventajas y desventajas de los fijadores tiempo mnimo: 1-2 h Tiempo mximo: 24h Volumen 1/10

PROCESOS ANALTICOS: FASE ANALTICA

Fijacin de tejidos
Tipos lquidos Alcohol: glucgeno Acetona: IHQ (lipasa fosfatasa) Formol (formalina):
No precipita proteinas Fijacin suave Puede desarrollar burbujas Estabilizar la formalina con fosfatos (fosfato monobsico y dibsico de sodio) No estabilizado cido frmico: produccin de pigmento acido formalina hemtica (se observa donde hay acumulacin de hemates)

Glutaraldehido:
Penetracin ms lenta Necesita temperatura baja Bueno en microscopa electrnica

PROCESOS ANALTICOS: FASE ANALTICA

Fijacin de tejidos
Tipos lquidos Acido tricloractico:
Preserva aminocidos con azufre: cisteina, metionina Decalcificante

Acido actico:
Rpido y penetra completamente Lisa los eritrocitos

Tipos slidos Dicromato de potasio cido crmico Tetrxido de osmio: para microscopa electrnica

PROCESOS ANALTICOS: FASE ANALTICA

Deshidratacin, Aclaramiento e Infiltracin
Remover toda el agua del tejido y reemplazarla con un medio que se solidifique para cortarlo Uso de alcoholes No es ventajoso tomar atajos (los tejidos pueden ser mal deshidratados, aclarados o infiltrados)

PROCESOS ANALTICOS: FASE ANALTICA

Orientacin del espcimen Posicin del tejido en el bloque Se debe conocer lo mas posible la anatoma y la histologa Los mrgenes de las superficies tisulares pueden marcarse con tinta china para indicar la orientacin correcta.

PROCESOS ANALTICOS: FASE ANALTICA

Inclusin de tejidos
Parafina a utilizar depender del tejido que se va a incluir

PROCESOS ANALTICOS: FASE ANALTICA

Microtoma
La eleccin de la cuchilla depende de la estructura del espcimen que se va a seccionar ngulo Grosor Colocacin correcta del bloque Corte del bloque

PROCESOS ANALTICOS: FASE ANALTICA

Flotacin El bao de flotacin debe estar a una temperatura de unos cuantos grados menos del punto de fusin

PROCESOS ANALTICOS: FASE ANALTICA

Coloracin
Se debe filtrar periodicamente los colorantes con papel filtro Colorear aproximadamente 200 lminas Observar el color y el detalle nuclear al microscopio El control de calidad de las coloraciones se realizar mediante la observacin en el microscopio

PROCESOS ANALTICOS: FASE ANALTICA

Montaje
Medios de montaje Laminillas apropiadas segn el tejido

Acido formico

CONTROL DE CALIDAD EN CITOLOGA

CONTROL DE CALIDAD EN CITOLOGA

Los tres aspectos fundamentales para tener resultados confiables y en los cuales debemos trabajar son: Toma de la muestra Preparacin Lectura

TOMA DE LA MUESTRA
Existe evidencia de que dos terceras partes de los errores se dan durante la toma de la muestra y el resto durante la lectura. Para asegurar una toma de calidad se necesita: Solicitud de estudio y laminilla perfectamente etiquetados (nombre, edad, antecedentes gineco-obsttricos, si es de primera vez o de control) La paciente no debe estar menstruando No usar lubricante No estar con tratamiento tpico desde una semana antes Sin relaciones sexuales Lavado o ducha 24 hrs antes.

TOMA DE LA MUESTRA
Para tomar la muestra debe observarse directamente el crvix, y anotar observaciones macroscpicas La toma debe ser con cepillo y esptula de madera (debe contener clulas endocervicales y exocervicales) o cytobrush. Fijar la muestra inmediatamente con spray fijador a una distancia de 20-30 cm o con alcohol del 95 en Pap convencional, o depositar el cytobrush en el frasco en Papanicolaou mono capa.

PREPARACIN DE LA MUESTRA
Laminilla perfectamente identificada, no rota, con solicitud de estudio perfectamente requisitado (de lo contrario se considera muestra inadecuada). Actualmente un estudio de Pap se considera una consulta mdica. La muestra se tie con el mtodo de Papanicolaou. Las diferentes soluciones deben tener marcada la concentracin y fechas de almacenamiento y caducidad.

LECTURA DE LA MUESTRA
Debe ser por citlogo, citotecnlogo o patlogo calificado Las laminillas deben guardarse por 5-10 aos. Se considera que un laboratorio de calidad debe leer por lo menos 25 000 muestras al ao La citologa se debe realizar a pacientes de 25 a 65 aos con una periodicidad de cada 3 aos cuando tuvo 3 resultados anuales negativas. Con respecto a periodicidad es importante sealar que el intervalo puede ser anual dependiendo esto de el juicio mdico en casos individuales y de los factores de riesgo. El control de calidad ser siempre la biopsia de cervix

CONTROL DE CALIDAD EN INMUNOHISTOQUMICA

EL CONTROL DE CALIDAD EN IHQ (I)

La gran complejidad de los test empleados en inmunohistoqumica, la dificultad para estandarizarlos y la ausencia de valores de referencia ha llevado a que: Los procedimientos de control de calidad vayan muy por detrs de los de Anlisis Clnicos. An no estn definidas la sensibilidad y la especificidad de cada determinacin en numerosos laboratorios.

EL CONTROL DE CALIDAD EN IHQ (II)

No hay definicin precisa o acuerdo sobre que muestras deben usarse como controles positivos y negativos. Los calibradores estandarizados para las pruebas apenas existen.

REQUISITOS BSICOS PARA LA CALIDAD EN IHQ

Fijacin y procesamiento apropiados del tejido Eficiente recuperacin antignica Adecuada eleccin del anticuerpo primario y el clon en su caso Sistema de deteccin especfico, seguro y potente Controles positivos y negativos apropiados Evitar guardar cortes de control para inmunohistoqumica ms de 30 das. Si deben guardarse algunos envolverlos en papel de aluminio y almacenarlos en el congelador a - 20 C.

EL CONTROL DE CALIDAD EN IHQ: RESUMEN

Es un reto importante pero no misin imposible Se basa en: Usar controles apropiados Emplear un sistema de deteccin lo ms preciso, fiel, sensible y especfico posible Manejar con eficiencia el desemascaramiento antignico por calor y enzimas cuando sea preciso Usar anticuerpos primarios optimizados para inmunoteidores automticos y clones apropiados Armonizar, optimizar y estandarizar al mximo posible todos los procesos

Conclusin
Cada laboratorio debe analizar sus experiencias y problemas de vez en cuando, pero lo que debe evitarse es arrastrar problemas crnicos que pueden evolucionar en situaciones fuera de control.

GRACIAS