DETERMINACION DE LA HEMOGLOBINA EN SANGRE POR EL METODO DRABKIN.

OBJETIVO: El objetivo de esta prctica es calcular la cantidad de la hemoglobina en sangre, a travs de una muestra de esta, ya sea venosa o capilar por un mtodo llamado Drabkin.

MATERIALES: Los materiales necesarios para la elaboracin de esta prctica son los siguientes: Espectrofotmetro o analizador para lecturas a 540nm. Cubetas de una medida de 1,0cm de paso de luz. Equipamiento habitual de laboratorio: el cual est formado por: pipetas, puntas de pipetas, micropipetas, tubos de ensayo (3), gradillas, propipetas o auxiliares de pipetas, vaso de precipitados. EPI (equipo de proteccin individual): bata de laboratorio, guantes de ltex, gafas. MUESTRA: en este caso de sangre capilar o venosa. DRABKIN: PATRON DE HEMOGLOBINA: HEMOGLOBINA DE CAL. Material de limpieza y desinfeccin (alcohol, esponjas, escobillas, jabones especiales)

PROCEDIMIENTO: Comenzaremos la prctica, vertiendo un poco de Drabkin(al menos 15ml) en un vaso de precipitados, y con la ayuda de una pipeta, tomamos tres veces 5ml de Drabkin y los introducimos en tres tubos de ensayo, es decir, en cada tubo de ensayo debe de haber 5ml de Drabkin. A continuacin, debemos aclarar que estos tres tubos de ensayo van a tener diferentes contenidos:
TUVO 1: BLANCO. Solo tendr 5ml de Drabkin. TUVO 2: PATRON. 5ml de Drabkin + 20Cl del patrn de hemoglobina. TUVO 3: MUESTRA. 5ml de Drabkin + 20ml de sangre.

Una vez elaborado el contenido de los tres tubos de ensayo, introduciremos cierto contenido de cada uno de ellos en tres cubetas, y procederemos pues al mtodo de espectrofotometra, introduciendo estas cubetas en un espectrofotmetro de 540nm. Despus de haber obtenido los resultados, pasaremos entonces a realizar los bculos para determinar la hemoglobina en sangre del sujeto ofrecido. CALCULOS: Los resultados obtenidos en el espectrofotmetro son los siguientes: 1) PATRON = 0,448 2) MUESTRA = 0,482

Para calcular la cantidad en sangre de hemoglobina, se usar la siguiente frmula: CANTIDAD DE HEMOGLOBINA EN SANGRE ABS. DE LA MUESTRA /ABS. DEL PATRON x [CONCENTRACION DEL PATRON]

0,482/0,448 x 15(concentracin del patrn) = 16,13 g/dl de Hb en la muestra.

Para finalizar la prctica, una vez obtenidos los g/dl de la hemoglobina en la muestra, la compararemos con las recomendaciones generales que se reflejan a continuacin:

VALORES DE REFERENCIA: HOMBRES: 14-18 g/dl MUJERES: 12-16 g/dl

OBSERVACIONES: Como conclusin de esta prctica podemos aclarar que el resultado obtenido segn los clculos realizados, se encuentra dentro de los valores de referencia. El sujeto ofrecido para aportar la muestra de sangre era de sexo femenino, esto es importante a la hora de comparar los valores de referencia de la cantidad de hemoglobina en la sangre. El resultado obtenido era 16,13, luego podemos aclarar que su nivel de hemoglobina es correcto.

VOCABULARIO:

HEMOGLOBINA: es una heteroprotena de la sangre, de masa molecular 64.000 g/mol (64 kDa), de color rojo caracterstico, que transporta el oxgeno desde los rganos respiratorios hasta los tejidos, el dixido de carbono desde los tejidos hasta los pulmones que lo eliminan y tambin participa en la regulacin de pH de la sangre, en vertebrados y algunos invertebrados. La hemoglobina es una protena de estructura cuaternaria, que consta de tres subunidades. Su funcin principal es el transporte de oxgeno. Esta protena hace parte de la familia de las hemoprotenas, ya que posee un grupo hemo.

ESPECTROFOTOMETRIA: es el mtodo de anlisis ptico ms usado en las investigaciones qumicas y bioqumicas. El espectrofotmetro es un instrumento que permite comparar la radiacin absorbida o transmitida por una solucin que contiene una cantidad desconocida de soluto, y una que contiene una cantidad conocida de la misma sustancia.

DRABKIN: El reactivo de Drabkin se utiliza en Laboratorio para medir Hemoglobina (no se usa para aumentar la Hemoglobina; ms an, no se coloca dentro del cuerpo humano, porque es latsimamente txico= directamente mortal). Se compone de: Na.+ Bicarbonato; Cianuro de K (Txico que mata por inhibicin de la respiracin celular), y Ferrocianuro de K (K=Potasio), tan txico como el anterior.