Introduo:

O ADN, ou cido desoxirribonucleico, composto de vrios nucleotdos e essencialmente constitudo por aminocidos; inanimado, ou seja, no reactivo e quimicamente inerte. Controla a funo das clulas e responsvel pela existncia de vida, pois contm o seu esquema. Em organismos vivos, o DNA no existe como uma molcula nica (fita simples), mas sim como um par de molculas firmemente associadas. As duas longas fitas de DNA enrolam-se formando uma dupla hlice. Os nucletidos esto presentes em ambas as fitas da dupla hlice, unidos com nucletidos da mesma fita por ligaes fosfodister e fita complementar atravs de pontes de hidrognio formadas pelas suas bases. A dupla hlice do DNA estabilizada por pontes de hidrognio, entre as bases presas s duas fitas. As quatro bases encontradas no DNA so a adenina (A), a citosina (C), a guanina (G) e a timina (T). A dupla hlice uma espiral dextra. Como as fitas de DNA giram uma ao redor da outra, elas deixam espaos entre cada cerne de fosfato, revelando os stios das bases que esto localizadas na parte interna. Contm as bases do plano gentico que copiam as mensagens biolgicas e as transferem para molculas muito mais geis conhecidas por RNA (a transmisso dos nossos pais para ns, onde metade do nosso ADN ser materno e a outra metade paterno) Sendo o ADN inerte e quimicamente inactivo ele pode ser extrado de uma srie de fontes, incluindo amostras de cabelo, cigarro, sangue, saliva, recortes navalha, smen ou pele para anlises, mesmo que secos milhares de anos. importante porque biologicamente, o ADN essencial vida. Encontra-se em todos os seres vivos, em cada clula, e armazena informaes sobre a forma como somos, herdados dos nossos pais. Isto significa que o DNA absolutamente nico e individual, o que perfeito para determinar as circunstncias factuais em alguns casos. Atravs de testes de ADN, as relaes de parentesco pode ser facilmente estabelecido como pode siblingship e ainda mais distante relaes familiares. Ela tambm pode ajudar a determinar quando dois espcimes de ADN so diferentes, permitindo assim a identificao do mesmo perfil de ADN a ser feita por razes jurdicas.

Objectivo:

Esta actividade laboratorial tem como objectivos: conhecer as tcnicas de extraco de ADN das clulas e compreender o processo necessrio extraco do ADN.

Material:
. Kiwi; . Almofariz; . Varinha mgica; . Gobel; . Bisturi; . Banho Maria (37C); . Gaze (pano); . Proveta (100ml); . Lminas e lamelas; . Tubos de ensaio; . gua destilada; . Detergente da loia; . NaCl; . Etanol a 5C; . Disco de aquecimento; . Tina; . Pipetas de Pasteur; . Fucsina Bsica; . MOC.

Preparao da Fucsina Bsica:

MATERIAL: . 0,1g de Fucsina; . 100ml de gua destilada. PREPARAO: . Mede-se 0,1g de Fucsina numa balana; . Junta-se gua e mexe-se.

Procedimento Experimental:

1) Depois de ter descascado um kiwi, este foi cortado em pequenos cubos e esmagado num almofariz; 2) Foi adicionada uma soluo composta por : . 100 ml de H2O; . 10 ml de detergente da loua; . 3 g de NaCl. 3) Continumos o processo de esmagamento; 4) Colocmos a preparao em banho-maria (37) durante 15 minutos; 5) Filtramos, atravs da gaze de forma a obter 5ml de lquido para um tubo de ensaio. 6) Adicionamos lentamente preparao, 5 ml de etanol 96% a 5C. 7) Deixmos repousar at observarmos a ascenso de uma camada gelatinosa. 8) Observmos ao microscpio, utilizando a fucsina bsica.

Apresentao de Resultados:
Figura 1. Objectiva 4x, Ocular 15 - Concentrado em ADN

Figura 2. Objectiva 4x, Ocular 15 - Meio no concentrado em ADN Esfergao

Figura 3. Objectiva 4x, Ocular 15 Concentrado em ADN

Recorrendo a um determinado nmero de processos, realizados em funo da composio e estrutura do ADN, possvel extraco desta molcula e posterior visualizao da mesma.

(esquema de ADN)

Discusso de Resultados:
O kiwi muito bem passado (usando a tcnica do esmagamento, mas com uma varinha mgica) que permitiu a destruio da membrana nuclear e da membrana celular da parede celular para que houvesse um extravazamento celular. Depois de se derramar o lcool no extracto de kiwi, deixou-se repousar durante 15 minutos e a partir dai comeou-se a observar acima da camada do extracto um outro extracto mas este dum material gelatinoso, constitudo por fitas brancas muito finas. Era o ADN ! O porqu da utilizao do sal: O sal utilizado para ajudar a manter as protenas dissolvidas no lquido extrado, impedindo que elas precipitem com o ADN. O sal tambm d um ambiente favorvel ao ADN, e contribui com ies positivos que neutralizam a carga negativa impedindo a repulso elctrica entre as molculas de ADA, permitindo a sua agregao de modo a formar filamentos mais espessos e compridos que so mais facilmente visveis. O porqu da utilizao do detergente:

O detergente ajuda a dissolver e desagregar as membranas nucleares constitudas pela bicamada fosfolipdica que compe a membrana plasmtica e as membranas dos organelos e que acabam emulsionados. O porqu da utilizao do lcool (etanol): Utilizamos o lcool porque o ADN no solvel neste composto. Possibilita assim a separao do ADN e desta forma estas molculas localizam-se os filamentos de ADN a ascenderem na camada de lcool surgindo mais prximos da superfcie. As bolhas de ar que se desenvolveram devido ao choque trmico colaboraram na ascenso do ADN.

Concluso:
A observao do ADN decorreu como previsto e sem qualquer problema tendo assim sido concretizado todo o objectivo com sucesso.