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Nutritivo Agar

Medio de cultivo utilizado para propsitos generales, para el aislamiento de microorganismos poco exigentes en lo que se refiere a requerimientos nutritivos. Su uso est descripto en muchos procedimientos para el anlisis de alimentos, aguas y otros materiales de importancia sanitaria.

Fundamento
Por las caractersticas de sus componentes es un medio usado para el cultivo de microorganismos poco exigentes en sus requerimientos nutricionales. No contiene inhibidores del desarrollo bacteriano. La pluripeptona es la fuente de carbono y nitrgeno para el desarrollo bacteriano. El agregado de cloruro de sodio permite el enriquecimiento con sangre de carnero u otras sustancias para facilitar el cultivo de microorganismos exigentes.

El Agar Nutritivo es utilizado para el cultivo de una amplia variedad de microorganismos.


El agar nutritivo es una de las sustancias gelatinosas que se pueden usar en el fondo de una placa de petri. Este material contribuye a un entorno hospitalario para el crecimiento microbiolgico, proporcionando tanto comida para los organismos y una base para crecer que no se degrade cuando se expone al crecimiento de microorganismos. El agar nutritivo es diferente de otros medios de crecimiento en los que se usa agar, que es derivado de algas, como el agente gelatinoso.

utilizado para el aislamiento de especies de Salmonella y Shigella a partir de muestras clnicas y de alimentos. El Agar Salmonella Shigela es una modificacin del Agar Desoxicolato y Citrato descrito por Leifson. El Agar Salmonella Shigella tiene un desempeo superior a otros medios para el aislamiento de especies de Salmonella y Shigella. Ewing y Bruner encontraron que el Agar SS tiene la ventaja de que puede ser utilizado con inculos grandes de muestras clnicas en las que se pretende poner de manifiesto la presencia de especies de Salmonella y Shigella caudill reporta resultados muy satisfactorios con el uso del Agar SS para el aislamiento de Shigella hormaeche y col. usaron el Agar SS junto con otros medios para el aislamiento de Shigella como el agente causal de diarreas infantiles. En este medio las sales biliares No. 3 y el verde brillante actan como inhibidores de bacilos Gram positivos, de la mayora de bacilos coliformes y del swarming en Proteus spp., mientras que permiten el crecimiento de Salmonella spp. El tiosulfato de sodio y el citrato frico permiten la deteccin de la

produccin de H2S. La lactosa proporciona la fuente de carbohidratos, el rojo neutro y el verde brillante actan como indicadores de pH y el agar es agregado como agente solidificante.
gar altamente selectivo que se utiliza para el aislamiento de Salmonella y de alguna especies de Shigella. Se dise para diferenciar fermentadores de lactosa de los que no la fermentan, proporcionando buena inhibicin de coliformes sin restringir el crecimiento de otros BGN patgenos. Salmonella y Shigella (y otros no fermentadores de lactosa) producen colonias

transparentes, translcidas, mientras los pocos fermentadores de lactosa que se desarrollan dan colonias mucosas, rojizas.

PEPTONA DE CASEINA TIPO I: Excelente nutriente, usado en medios de cultivo, para producir antibiticos, toxinas, enzimas y otros productos. Laboratorios farmacuticos y veterinarios usan este medio de cultivo. PEPTONA DE CASEINA TIPO II:Mezclas de pptidos y amino cidos obtienen casena de la digestin pancretica. Su uso es para la fabricacin de vacunas, toxinas, enzimas y medios de cultivo microbiolgicos. El Caldo Lactosado es utilizado para el cultivo de Salmonella y organismos coliformes en agua, productos lcteos, alimentos y productos farmacuticos. El Caldo Lactosado frecuentemente es utilizado como un medio de pre-enriquecimiento en la bsqueda de Salmonella en alimentos y derivados lcteos. En alimentos deshidratados o procesados pueden encontrarse salmonellas daadas y en bajo nmero; adicionalmente, la presencia de otras bacterias o componentes de los alimentos puede enmascarar el crecimiento y recuperacin de las mismas. El preenriquecimiento en un medio no selectivo como el Caldo Lactosado, permite reparar el dao celular y diluir las sustancias txicas e inhibidoras proporcionando factores nutricionales especialmente para el desarrollo

de Salmonella. El Caldo Lactosado est incluido en varios procedimientos de los Mtodos Estndar para el anlisis de alimentos, lcteos y otros materiales. En este medio el extracto de carne y la peptona proporcionan la fuente de carbono y nitrgeno. La lactosa es el carbohidrato fermentable.

Lactosado Caldo.
Se recomienda como prueba presuntiva para investigar la presencia de bacterias del grupo coliforme en agua, productos lcteos, etc. Actualmente tambin est indicado para el preenriquecimiento no selectivo en la bsqueda de Salmonella spp. a partir de alimentos

Fundamento

Es un medio rico en nutrientes,y no contiene inhibidores del crecimiento bacteriano. El extracto de carne y la peptona, son la fuente de carbono y nitrgeno, mientras que la lactosa es el hidrato de carbono. Por la fermentacin de la lactosa, se produce cido y gas, y ste ltimo se demuestra al usar las campanas Durham. Se lo usa tambin como medio de preenriquecimiento, porque permite recuperar clulas injuriadas, diluye sustancias txicas o inhibitorias y favorece el desarrollo de Salmonella con respecto a otras bacterias

El Agar Verde Brillante es utilizado para el aislamiento de Salmonella. El Agar Verde Brillante fue descrito por Kristensen, Lester y Jurgens quienes lo reportaron como un medio til para la diferenciacin de Salmonella paratyphi B. Posteriormente Kauffman modific la frmula y utiliz el Caldo Tetrationato junto con el Agar Verde Brillante para el aislamiento de Salmonella. Gallon y Quant incrementaron los aislamientos positivos de Salmonella utilizando la frmula de Kauffman para el Agar Verde Brillante y el Caldo Tetrationato. Este medio es recomendado para ser usado con muestras clnicas y de alimentos. La alta selectividad de este medio, permite el uso de inculos moderados y pesados. El Agar Verde Brillante es de mucho valor cuando se quiere investigar la presencia de especies de Salmonella diferentes a S. typhi y S. paratyphi. Este medio tambin es utilizado en las pruebas de lmites microbianos recomendadas en la USP. Las

pruebas de lmites microbianos son realizadas para asegurar que los productos farmacuticos estn libres de Salmonella sp. En este medio las peptonas y el extracto de levadura proporcionan la fuente de nitrgeno, vitaminas y minerales. La lactosa y la sacarosa son los carbohidratos fermentables. El rojo de fenol es un indicador de las variaciones de pH y cambia el color del medio a amarillo en presencia del cido derivado de la fermentacin de los carbohidratos. El cloruro de sodio mantiene el balance osmtico. El verde brillante acta como inhibidor de bacterias Gram positivas y de la mayora de bacterias Gram negativas diferentes a Salmonella. El agar es adicionado como agente solidificante.

Verde Brillante Agar.


Medio de enriquecimiento altamente selectivo para el aislamiento de Salmonella spp., excepto S. typhi y S. paratyphi, a partir de muestras clnicas, alimentos, y otros materiales de importancia sanitaria. No se recomienda para el aislamiento de Shigella spp. Es de un valor excepcional cuando se investiga un gran nmero de muestras de heces o alimentos, por su alta capacidad de diferenciacin de las colonias sospechosas.

Fundamento

En el medio de cultivo, la pluripeptona y el extracto de levadura, constituyen la fuente de nitrgeno, vitaminas y minerales. La lactosa y la sacarosa son los hidratos de carbono fermentables, el rojo fenol es el indicador de pH, que vira al amarillo cuando hay produccin de cido a partir de la fermentacin de azcares, el cloruro de sodio mantiene el balance osmtico, y el verde brillante acta como agente selectivo.

El Agar TCBS es utilizado como medio selectivo para el aislamiento y cultivo de Vibrio cholerae. El Agar TCBS, por las iniciales de Tiosulfato-Citrato-Bilis-Sacarosa, es preparado de acuerdo con la frmula de Kobayashi y col. siendo una modificacin del medio de Nakanishi. En el Agar TCBS crecen todas las especies de Vibrio patgenas para el humano excepto V. hollisae. Las muestras pueden ser de materiales tanto clnicos como no clnicos. El Agar TCBS es altamente selectivo para las especies de Vibrio debido a sus componentes nutricionales y a la alta concentracin de sales y es ampliamente utilizado en placa para el primoaislamiento. Este medio junto en el Agua Peptonada

Alcalina es utilizado para el aislamiento de V.cholerae y otras especies a partir de muestras fecales. En este mediio el extracto de levadura y las peptonas proporcionan la fuente de nitrgeno, vitaminas y aminocidos. El citrato de sodio, el tiosulfato de sodio y la bilis actan como agentes inhibidores de microorganismos Gram positivos y coliformes dando alcalinidad al medio. La sacarosa es el carbohidrato fermentable. El cloruro de sodio promueve el crecimiento. El tiosulfato de sodio es la fuente de sulfuro y el citrato de hierro es un indicador para detectar la produccin de H2S. El azul de timol y de bromotimol actan como indicadores de pH. El agar bacteriolgico es agregado como agente

TCBS Medio
Medio selectivo para el aislamiento y cultivo de Vibrio cholerae, Vibrio parahemolyticus y otras especies de Vibrio a partir de heces, agua y alimentos contaminados. Tambin es conocido como Agar Tiosulfato Citrato Bilis Sacarosa, o como Agar Selectivo para Vibrios.

Fundamento

En el medio de cultivo, el extracto de levadura, la peptona de carne y la triptena aportan nutrientes para el desarrollo bacteriano. Es este, el medio selectivo ms adecuado para el aislamiento de las especies de Vibrio, e inhibidor para la mayora de las enterobacterias. Esta inhibicin se basa en las altas concentraciones de tiosulfato y citrato, la presencia de bilis y un pH fuertemente alcalino. La degradacin de la sacarosa es variable entre las especies de Vibrio y las colonias son verdes para las cepas que no la utilizan y amarillas para aquellas que producen cido a partir de este azcar. Esto es debido al viraje del color de los indicadores de pH azul de timol y azul de bromotimol, del color azul al amarillo en medio cido. Es importante tener en cuenta, que la proporcin de sacarosa en el medio est equilibrada de forma tal que no inhiba el crecimiento bacteriano por exceso de cido. El cloruro de sodio favorece el crecimiento de microorganismos. El tiosulfato de sodio aporta azufre y junto con el citrato frrico permiten la deteccin de produccin de cido sulfhdrico. Aumentando la concentracin de cloruro de sodio y disminuyendo la temperatura de incubacin, pueden aislarse especies marinas sin importancia sanitaria.

CARACTERISTICAS DEL RENDIMIENTO Y LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO BD Baird-Parker Agar es uno de los medios estndar para el aislamiento y recuento de Staphylococcus aureus, adems de su diferenciacin de otros estafilococos. Se utiliza principalmente para el aislamiento del organismo a partir de materiales no clnicos tales como alimentos, pero tambin se utiliza para su aislamiento a partir de muestras clnicas 2-8 . Es necesaria una incubacin de 46 a 48 h para la aparicin caracterstica de colonias de S. aureus 2

. Es posible que en el medio crezcan estafilococos diferentes de S. aureus. No obstante, dado que su crecimiento depende de la especie y las cepas, no debe utilizarse BD Baird-Parker Agar para su aislamiento. En cambio, se puede utilizar BD Mannitol Salt Agar para tal finalidad. Deben incluirse medios que permitan el aislamiento de patgenos involucrados en una infeccin 8 . Es posible que en este medio crezcan organismos diferentes de los estafilococos, que pueden producir colonias de color de marrn a negro: por ejemplo, Proteus mirabilis. Por tanto, se requieren pruebas adicionales para obtener una identificacin completa de los aislados 2-4,6,9

. Baird Parker Medio Base.


Medio de alta especificidad diagnstica, selectivo y diferencial para el aislamiento y recuento de estafilococos coagulasa positiva en alimentos y otros materiales de importancia sanitaria.

Fundamento

En el medio de cultivo preparado y completo la peptona y el extracto de carne constituyen la fuente de carbono y nitrgeno, el extracto de levadura aporta vitaminas del complejo B, la glicina y el piruvato estimulan el crecimiento de los estafilococos. Este medio de cultivo es selectivo y diferencial debido al telurito de potasio y al cloruro de litio, los cuales inhiben el desarrollo de la flora acompaante. La yema de huevo permite demostrar la actividad lecitinsica. Los estafilococos coagulasa positiva reducen el telurito a teluro y originan colonias de color grisceo-negro, y dan reaccin sobre la yema de huevo produciendo alrededor de la colonia una zona opaca que a menudo tiene una zona clara mas externa. Se pueden encontrar cepas no lipolticas, que presentan igual caractersticas de colonias pero sin la zona opaca y clara. Se debe confirmar la presencia de S. aureus mediante pruebas bioqumicas.

Caractersticas del medio:

Medio preparado: mbar claro opalescente (sin el agregado de yema de huevo).

Selenito Cistina Caldo.

Medio utilizado para el enriquecimiento selectivo de Salmonella spp. a partir de muestras de alimentos, productos lcteos y otros materiales de importancia sanitaria.

Fundamento

En el medio de cultivo, la peptona aporta los nutrientes necesarios para el desarrollo bacteriano. La lactosa es el hidrato de carbono fermentable, el selenito de sodio inhibe flora Gram positiva y la mayora de la flora entrica excepto Salmonella spp.. La l-cistina es el agente reductor y fue propuesta por la FDA para el aislamiento de Salmonella en productos alimenticios incrementando la recuperacin por reduccin de la toxicidad del selenito.

Caractersticas del medio


Medio preparado: mbar muy claro de transparente a ligeramente opalescente.

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