MG Rev Fac Med UNAM Vol.46 No.

6 Noviembre-Diciembre, 2003

Monografa

Estrs oxidativo y neurodegeneracin

Claudia Dorado Martnez,1 Concepcin Rugerio Vargas,2 Selva Rivas Arancibia1
2 1 Departamento de Fisiologa. Departamento de Biologa Celular y Tisular de la Facultad de Medicina, UNAM.

Introduccin El cuerpo humano mantiene un balance de xido-reduccin constante, preservando el equilibrio entre la produccin de pro-oxidantes que se generan como resultado del metabolismo celular y los sistemas de defensa antioxidantes. La prdida en este balance de xido-reduccin lleva a un estado de estrs oxidativo2,6,8,9,15 y este estado se caracteriza por un aumento en los niveles de radicales libres y especies reactivas, que no alcanza a ser compensado por los sistemas de defensa antioxidantes causando dao y muerte celular. Esto ocurre en patologas degenerativas, de tipo infeccioso, inmune, inflamatorio, etc. La alteracin del balance entre pro-oxidantes y antioxidantes, puede tener diversos grados de magnitud. En el estrs oxidativo leve, las defensas antioxidantes bastan para restablecer dicho balance, pero en el estrs oxidativo grave se llega a graves alteraciones en el metabolismo celular, como rompimiento de DNA, aumento de la concentracin de calcio intracelular, descompartamentalizacin de iones de Fe+2 y Cu+2 catalticos, dao a los transportadores membranales de iones y otras protenas especficas, y peroxidacin de lpidos. El dao por estrs oxidativo, puede ser reversible o irreversible dependiendo de factores como el tiempo que dure el estrs, la efectividad de las defensas antioxidantes, la edad del organismo, el estado nutricional y factores genticos que codifican sistemas antioxidantes.8 Radicales libres Los radicales libres son molculas que contienen un electrn no apareado, esta caracterstica los hace sumamente reactivos y capaces de daar a otras molculas transformndolas a su vez en molculas muy reactivas, una reaccin en cadena que causa dao oxidativo, desde clulas hasta tejidos (cuadro 1). Especies reactivas

geno (RNS).7 Las especies reactivas se forman como productos del metabolismo de los radicales libres, y aunque no todas son radicales libres, son molculas oxidantes que se transforman fcilmente en radicales libres lo que les confiere la caracterstica de ser compuestos muy dainos para las clulas. Estas especies reactivas daan tanto al DNA como a las protenas transportadoras. Las de cobre a travs de protenas detectoras especficas de oxidacin (como oxyR), pueden alterar la expresin gentica; asimismo causan dao en las enzimas reparadoras y las polimerasas y dejan pasar una mayor cantidad de errores. Aunado a esto los productos finales de la lipoperoxidacin provocan dao a las protenas y al DNA. El radical hidroxilo ataca las bases del DNA, este dao se suma al de los productos derivados del NO (HNO2 y ONOO-),19 los cuales provocan nitracin y desaminacin (en adenina, guanina y citosina), lo que ocasiona alteraciones en la codificacin y transcripcin del material gentico. Aparicin de las especies reactivas de oxgeno (ROS) Durante el proceso evolutivo, con la aparicin de los organismos fotosintticos, se dio un aumento en los niveles de oxgeno, permitiendo a los organismos desarrollar los mecanismos necesarios para utilizar esta molcula como aceptor final de electrones, lo que permiti a las clulas tener sistemas de produccin de energa altamente eficientes a travs de la oxidacin de la glucosa. A travs de esta ruta metablica se producen hasta 38 molculas de ATP por la oxidacin de una molcula de glucosa. Esta ventaja evolutiva de los organismos aerobios, trajo como efecto colateral, el aumento en la produccin de radicales libres y especies reactivas de oxgeno, ya que la reduccin parcial de oxgeno lleva a la formacin de ROS. El aumento en los niveles de las especies reactivas llev a la evolucin de sistemas de defensa antioxidantes intra y extracelulares tanto enzimticos como no enzimticos para mantener el equilibrio redox. El equilibrio de xido-reduccin es esencial para mantener la fisiologa de los organismos y durante este proceso evolutivo las ROS pasaron a formar parte de un sistema de sealizacin involucrada tanto en la deteccin como en la

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Las especies reactivas incluyen a las de oxgeno (ROS), las especies reactivas de hierro (RIS), las especies reactivas de cobre (RCS), as como a las especies reactivas de nitr-

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Cuadro 1. A. Ejemplo de los radicales libres ms frecuentemente producidos por los sistemas biolgicos que dan origen a especies reactivas y B: reacciones ms comunes que los origina. B: Reaccin ms comn que los origina

A: Radical libre O2 - Radical superxido

NADPH + 2 O2 NADPH+ + H+ + 2 O2OH- Radical hidroxilo UQ- + H2O2 UQ + OH + OHLH + RO2 L + H2O RO2 Radical peroxilo RO Radical alcoxilo o fenoxilo R + O2 RO L Radical perxido lpido L O2 + LH LOOH + L NO2 Radical de xido ntrico OH + NO2- OH- + NO2

que terminan esta reaccin en cadena. Los barredores pueden definirse como aquellas sustancias que donan e- a otras, reducindolas y hacindolas menos reactivas. Los sistemas antioxidantes trabajan en forma coordinada en una serie de pasos metablicos, por ejemplo en los sistemas enzimticos el O2- al ser metabolizado por la SOD se produce H2O2, los perxidos a su vez son metabolizados hasta H2O y O2 por la catalasa o la glutatin peroxidasa que acta en forma acoplada con la glutatin reductasa. Estos sistemas antioxidantes disminuyen con la edad, en ciertos procesos patolgicos y bajo condiciones ambientales como la contaminacin atmosfrica. Reacciones redox El metabolismo oxidativo, siempre se acompaa de reacciones de transferencia de un electrn que involucran la generacin de especies reactivas de oxgeno. Las reacciones de transferencia de un e- son difciles de controlar. Las especies de oxgeno parcialmente reducidas son una fuente continua de ROS. Paradjicamente, es la reduccin de un e- de O2 y sus productos intermediarios, los que llevan a la produccin de las ROS ms peligrosas como O2-, H2O2, y OH-, que son generadas en presencia de metales de transicin y oxgeno. Las reacciones de un e- con otras molculas llevan a la formacin de ROS secundarios tales como radicales peroxilo, radicales alcoxi y otros radicales orgnicos. Estos radicales secundarios no son tan txicos y reactivos como los OH-, que son muy electroflicos, pero inducen y promueven una reaccin en cadena que conduce a la co-oxidacin y peroxidacin de biomolculas. La reaccin de radicales libres es catalizada por metales de transicin, se da en tres pasos; iniciacin, propagacin y terminacin. En fase de iniciacin hay substraccin de un tomo de H (inducida por un metal de transicin o radiacin), de un grupo metilo de un cido graso que contenga dos o ms enlaces dobles separados, originando un radical alquilo (L) con un rearreglo que da lugar a radicales peroxilo (LOO). En la fase de propagacin se toma un tomo de H de un cido graso insaturado adyacente, resultando la formacin de hidroperxidos (LOOH) y un nuevo radical que puede reaccionar con Fe+2 produciendo un radical alcoxilo (LO). Este radical que es ms reactivo que LOO puede reiniciar la lipoperoxidacin quitando un H de un cido graso insaturado adyacente con la formacin de L y un alcohol LOH, LOOH, y degradarse en hidrocarburos, (etano, pentano), alcoholes, teres, epxidos y aldehdos (como malonildialdehdo, MDA). Esta cadena de reacciones qumicas explica el dao que producen los RLs sobre los fosfolpidos de las membranas celulares. La fase de terminacin se da entre dos radicales para formar un no radical. La oxidacin de protenas de membrana puede estar mediada por radicales derivados de lpidos,

sntesis y en la regulacin de biomolculas, as como en otros procesos fundamentales del organismo. Aunque en todos los procesos metablicos inherentes al organismo se producen pequeas cantidades de radicales libres (RL), como sucede en el retculo endoplasmtico, los microsomas y los peroxisomas, la fuente endgena de especies reactivas ms importante es el sistema mitocondrial de transporte de electrones, donde las ROS se generan como producto secundario del metabolismo energtico oxidativo. Sistemas de defensa antioxidantes Un antioxidante, es cualquier sustancia que presente en bajas concentraciones, retrasa o inhibe la oxidacin. Pueden actuar en las formas siguientes:1 1. Disminuyendo la concentracin de oxidantes. 2. Evitando la iniciacin de la reaccin en cadena al barrer (cubrir o detener una reactividad qumica muy alta), los primeros radicales libres que se forman. 3. Unindose a iones metlicos para evitar la formacin de especies reactivas. 4. Transformando los perxidos en productos menos reactivos. 5. Deteniendo la propagacin y el aumento de radicales libres. Entre stos se incluyen sistemas enzimticos como las enzimas derivadas del sistema citocromo-oxidasa, las superxidodismutasas (Cu-ZnSOD y MnSOD), las catalasas y peroxidasas como la glutatin-peroxidasa y la glutatin-reductasa. As como sistemas no enzimticos, como las vitaminas A, C, E, c. rico, aminocidos como, glicina y taurina, y el tripptido glutatin, etc. a los que se denominan barredores (scavengers) de radicales libres. En general todos los RL son electrfilos (que aceptan electrones), causando la produccin de otro RL menos reactivo y todava inestable que reacciona con otra molcula para producir otro RL, continuando as una reaccin en cadena. Los barredores de RLs reaccionan con stos, formando RLs

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como los productos finales MDA y 4-HNE, que pueden unirse covalentemente a aminocidos. La oxidacin de DNA dependiente de ROS ocurre de forma parecida a la oxidacin de protenas y es sitio-especfica. Involucra una reaccin entre DNA, metales de transicin y H2O2. El DNA mitocondrial es ms susceptible al dao oxidativo. La evidencia disponible indica que el escape de e- , que conduce a la formacin de O2- y H2O2 ocurre en los complejos I, II y III de la cadena respiratoria por la auto-oxidacin de algunos componentes.3,12 Homeostasis redox La concentracin de RL de oxgeno o nitrgeno (ROS o RNS) est determinada por el balance entre la velocidad de produccin de especies reactivas y la velocidad de eliminacin por compuestos y enzimas antioxidantes. Las clulas :rop odarobale FDP cuentan con diversos mecanismos para reestablecer el estado redox despus de una exposicin temporal a concentraciones VC ed AS, cidemihparG elevadas de RL. El aumento en los niveles de estas especies reactivas, induce la expresin de genes cuyos productos tiearap nen actividad antioxidante, como son las enzimas antioxidantes o molculas que aumentan el:cihpargideM cistina que acidmoiB arutaretiL transporte de aumenta en los niveles intracelulares de glutatin. Tambin sustradode-m.e.d.i.g.r.a.p.h.i.c el aumento en la protelisis provee aminocidos libres que contribuyen al mantenimiento de la homeostasis redox. El xito en la regulacin redox depende de la magnitud y duracin del cambio en las concentraciones, la produccin constante de grandes cantidades de especies reactivas, puede conducir a cambios persistentes en la transduccin de seales y en la expresin gentica dando lugar a condiciones patolgicas. Tambin el envejecimiento involucra un cambio en los procesos de regulacin mediados por radicales libres que resultan en una alteracin de la expresin gentica. Bajo ciertas condiciones, cuando la produccin de radicales de O2 aumenta mucho y de manera prolongada y la respuesta antioxidante no es suficiente, el sistema puede alcanzar el equilibrio en un punto diferente (homeoresis en lugar de homeostasis), que se acompaa de concentraciones altas de aminocidos libres, as como diferencias en los patrones de expresin gentica, permitiendo la supervivencia pero causando un dao irreversible a largo plazo (figura 1).15 Sealizacin redox El trmino sealizacin redox, se utiliza para describir a las funciones reguladas por seales oxidativas que inducen respuestas protectoras contra el dao oxidativo. Muchas de las respuestas mediadas por las ROS protegen a las clulas contra el estrs oxidativo y restablecen la homeostasis redox. La utilizacin de ROS y RNS como molculas de sealizacin dentro de los procesos fisiolgicos, incluyen: regulacin del tono vascular, monitoreo de la tensin de oxgeno en el control de la

ventilacin y en la produccin de eritropoyetina, as como la transduccin de seales de receptores membranales en diversos procesos. Otros procesos fisiolgicos que involucran a los mecanismos de xido-reduccin y los RL son: la renovacin de las membranas y fenmenos plsticos celulares, la supervivencia celular en el sistema nervioso durante etapas embrionarias, mitosis, migracin celular, sntesis y liberacin de algunas hormonas y factores de crecimiento, aumento de la transcripcin de citocinas durante los procesos inflamatorios, hasta sealizacin celular por mecanismos de segundos mensajeros. Se ha encontrado que niveles bajos de ROS estimulan la proliferacin celular, mientras que niveles ms altos tienen una accin inhibitoria. Las ROS tienen una participacin fundamental en la regulacin del sistema inmune.4,10 Mientras que altas concentraciones de ROS pueden resultar en un dao oxidativo masivo e sustradode-m.e.d.i.g.r.a.p.h.i.c indiscriminado, es posible que bajas concentraciones cihpargidemedodabor de ROS sean suficientes para activar genes especficos. Las ROS pueden activar al factor de transcripcin nuclear B (NFB). El NFB juega un papel fundamental en la regulacin de las respuestas inmune e inflamatoria; muchas citocinas pro-inflamatorias, quimocinas, molculas de adhesin celular, factores estimulantes de colonias y enzimas inflamatorias son producto de genes regulados por NFB. Las ROS tienen un papel muy importante en la comunicacin clula-clula, ya que actan como mensajeros celulares, activan la expresin del factor de crecimiento derivado de plaquetas (PDGF) en msculo liso, la adenilato ciclasa, y tambin activan a las protenas reguladoras de Fe+2 (transferrina, ceruloplasmina, hemosiderina y ferritina). La regulacin redox de la expresin gnica se da a travs de Oxy R (un activador de la transcripcin inducida por perxido de hidrgeno). La presencia de perxido de hidrgeno, radiaciones ultravioleta y otras condiciones durante las cuales hay estrs oxidativo, induce la expresin de la oxidorreductasa tioredoxena (Trx). La Trx, junto con el sistema de glutatin, se ocupa de mantener un estado intracelular reducido, ya que la secuencia del gen humano para la Trx contiene sitios de unin para los factores de transcripcin.4 Dao oxidativo Un estado de estrs oxidativo, induce en la clula efectos txicos por oxidacin de lpidos, protenas, carbohidratos y nucletidos, lo cual produce acumulacin de agregados intracelulares, disfuncin mitocondrial, excitotoxicidad y apoptosis. Este dao oxidativo es comn en las enfermedades neurodegenerativas y an no est claro si contribuye iniciando el proceso o es una consecuencia del mismo.13 La formacin de lpidos modificados por oxidacin puede causar disfuncin celular y en clulas posmitticas como las

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neuronas, la muerte. La peroxidacin de cidos grasos poliinsaturados en las membranas celulares, inicia un deterioro acumulativo de las funciones membranales y provoca disminucin en la fluidez, reduccin en el potencial electroqumico y el aumento de la permeabilidad de la membrana. La oxidacin causa alteraciones en la estructura de algunas protenas y la formacin de agregados protenicos, estas protenas anormales inducen dao oxidativo y estn presentes en las enfermedades neurodegenerativas.5,9 Un ejemplo de lo anterior es la enfermedad de Alzheimer en la cual los -amiloides pueden estimular la oxidacin a travs de mltiples vas, actan sobre el receptor p75, el receptor a productos de glicosilacin avanzada (RAGE), lo que provoca una entrada masiva de Ca+2 y la activacin de caspasas que llevan a la muerte celular. Aumento en los niveles de calcio intracelular La produccin aumentada de ROS y un aumento sostenido de Ca+2 intracelular son componentes muy importantes en varios tipos de neuropatologas. Un aumento en la concentracin de Ca+2 intracelular activa la liberacin de neurotransmisores, pero cuando este aumento se mantiene por ms tiempo tambin se activan proteasas, lipasas, y endonucleasas. La activacin de proteasas dependientes de Ca+2 puede daar al citoesqueleto y a las protenas de membrana. La activacin de las lipasas, cataliza la hidrlisis de los fosfolpidos de la membrana, (por ejemplo la activacin de la fosfolipasa A2, al actuar sobre los fosfolpidos de membrana libera cido araquidnico, cuyos metabolitos son de considerable importancia como mediadores del dao oxidativo en varios trastornos clnicos). Adems la activacin de las endonucleasas dependientes de Ca+2, provoca fragmentacin del DNA el cual es un evento importante en la apoptosis.8 El aumento intracelular de Ca+2 tambin estimula la conversin de xantina deshidrogenasa (XDH) en xantina oxidasa (XO), as como la activacin de la NOS dependiente de calmodulina. La entrada masiva de Ca+2 a la mitocondria hace

que se forme el poro de transicin en la membrana mitocondrial interna (MTP), llevando a un colapso en el potencial electroqumico de protones, lo que provoca una disminucin en los niveles de ATP y un aumento en las especies de oxgeno parcialmente reducidas. La disminucin en la produccin de ATP resulta en una despolarizacin de la membrana plasmtica y la entrada de ms Ca+2 a travs de varios canales inicos creando un crculo vicioso que lleva a la prdida de la funcin neuronal y muerte de la clula.14 Apoptosis y necrosis La apoptosis y la necrosis involucran una serie de eventos morfolgicamente distinguibles. La apoptosis es un proceso activo que involucra muerte celular en la cual no se desarrolla inflamacin y se caracteriza por cambios morfolgicos que inicialmente se manifiestan en el ncleo, como condensacin de la cromatina en la periferia por fuera de la membrana nuclear, en agregados bien delimitados de diversas formas y tamaos, nuclolos remanentes y fragmentacin del ncleo, vacuolas citoplasmticas, mitocondrias electrodensas con cambios morfolgicos, ribosomas desprendidos del retculo endoplsmico rugoso y de los polirribosomas y fragmentacin celular en cuerpos apoptticos, que finalmente son fagocitados. Las ROS pueden inducir apoptosis mediante la activacin de caspasas, de genes apoptticos, de enzimas lticas etc. La necrosis es un fenmeno pasivo que se presenta como consecuencia de alguna agresin y que lleva a un exceso de flujo de calcio.18 Generalmente va acompaada de una respuesta inflamatoria aguda, involucra cambios metablicos progresivos, con una importante reduccin de ATP, edema celular, ruptura de membranas, edema mitocondrial, dilatacin de las cisternas en retculo endoplsmico, liberacin de hidrolasas, ruptura lisosomal, la cromatina se condensa y el DNA se fragmenta por endonucleasas. El dao oxidativo lleva a una muerte celular por necrosis que implica una prdida en la regulacin por dficit de ATP que impide el funcionamiento de bombas y la entrada masiva de agua y Na+ lo que provoca un edema celular irreversible. Esta muerte celular repentina causa la activacin de procesos apoptticos en clulas vecinas (figura 2). Excitotoxicidad La excitotoxicidad se refiere a la activacin excesiva de los receptores glutamatrgicos y causa muerte neuronal. La excitotoxicidad es importante en la degeneracin neuronal resultado de hipoxia, isquemia y trauma, el estrs oxidativo es un mediador en la muerte celular por excitotoxicidad. El glutamato juega un papel muy importante en el proceso neurodegenerativo que se desarrolla en la enferme-

Cuadro 2. Relacin entre la protena alterada por estrs oxidativo, la lesin fisiopatolgica que ocasiona y la enfermedad neurodegenerativa asociada. Enfermedad neurodegenerativa

Protena alterada -Amiloides Protena TAU Huntingtina -Sinuclena

Lesin Formacin de placa

Enfermedad de Alzheimer Maraa neurofibrilar Demencia frontotemporal Inclusiones nucleares Enfermedad de Huntington Cuerpo de Lewy Enfermedad de Parkinson

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UQH2

UQ-

SOD O2

CATALASA H2O H2O2 GLUT PEROX GSH GSSG

LH ONOOL O2 LOO UQH2 TOCOFEROL TOCOFERIL LOOH UQMDA 4HNE

NO

GLUT RED NADPH NADP+

Figura 1. Esquema que resume la interrelacin que existe entre las principales especies reactivas de oxgeno y nitrgeno con los sistemas de defensa antioxidante. El esquema muestra en rojo las ROS: superxido (O2_), perxido de hidrgeno (H2O2). En anaranjado las RNS: xido ntrico (NO), y peroxinitrito (ONOO-). En amarillo productos metablicos de las anteriores como lpidos oxidados (LH, L y LOO), as como los productos finales de su oxidacin como: malonildialdehdo, (MDA) y 4-hidroxinonanenal (4HNE). En azul se muestran los sistemas de defensa antioxidante enzimticos tales como: superxido dismutasa (SOD), catalasa, glutatin peroxidasa y los sistemas antioxidantes no enzimticos; en verde ubiquitina (UQH2), tocoferol, cido ascrbico y dinucletido de nicotn adenina (NADP).

AC. ASCRBICO RAD. ASCORBATO

NADH

NAD
MICROGLIA ACTIVADA RNS ROS IFNg

NEURONA PRESINPTICA GLUTAMINA

ASTROCITO GLUT iNOS NO GLUT K+ NMDA

FOSFOLIPASAS PROTEASAS ENDONUCLEASAS AC. ARAQ PROTEINAS DNA

H2O2 NO CATEPSINA B/L ACT DE PLASMINGENO IL-1 TNFa APP GLUTAMATO

TNFa IL-1

ROS
ATP

ROS

GLUT

Ca++ ATP

Na+ H2O

ROS
NEURONA POSTSINPTICA

EDEMA NOS Arg NO APOPTOSIS CELULAR Cit O2 ONOONECROSIS ATP MTP

Figura 2. Esquema que muestra la secuencia de eventos que ocurren durante el dao que lleva a la muerte neuronal. El aumento en los niveles de ROS producen que la neurona presinptica libere el neurotransmisor excitatorio glutamato que es captado por el receptor NMDA en la neurona posinptica, la entrada de glutamato (Glut) junto con la presencia de especies reactivas llevan a un aumento de los niveles intracelulares de Ca+2 que activa a fosfolipasas, proteasas, y endonucleasas, as como a la sintasa de xido ntrico (NOS). El aumento de los niveles de calcio y xido ntrico en la mitocondria hace que disminuya la produccin de ATP y se forme el poro de transicin mitocondrial (MTP), el dficit de ATP no permite el funcionamiento de las bombas dependientes de ATP que se encuentran en la membrana citoplsmica, este hecho provoca una entrada masiva de agua (H2O) y sodio (Na+) y una salida de potasio (K+) causando edema celular y muerte por necrosis. El dao mitocondrial y el dao al DNA induce la activacin de genes que llevan a la muerte por apoptosis. Los astrocitos normalmente captan glutamato y lo regresan a la neurona en forma de glutamina (su precursor), pero cuando hay estrs oxidativo los astrocitos liberan glutamato y xido ntrico, incrementando y extendiendo el dao a las neuronas vecinas.

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Figura 3. Esquema que muestra la relacin entre la microglia activada y la neurona cuando ocurre estrs oxidativo. El dao oxidativo y los mediadores inflamatorios provocan que se active la microglia, su activacin produce perxido de hidrgeno (H2O2), xido ntrico (NO), catepsina B/L, activacin de plasmingeno, interleucina 1, factor de necrosis tumoral alfa (TNF), protena precursora de amiloides (APP) y glutamato, lo que provoca dao en la neurona y a su vez mayor activacin de la microglia, la presencia de dao neuronal incrementa la produccin de especies reactivas de oxgeno (ROS), especies reactivas de nitrgeno (RNS), interleucina 1, y factor de necrosis tumoral alfa (TNF), produciendo una mayor activacin de la microglia.

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dad de Alzheimer, enfermedad de Parkinson e isquemia. La activacin de cualquiera de los tres receptores glutamatrgicos ionotrpicos (NMDA, kainato, o AMPA) causan muerte celular por excitotoxicidad. El glutamato es una potente neurotoxina y su toxicidad est mediada por ROS. En la regin sinptica la recaptura de glutamato se acompaa de la liberacin simultnea de ascorbato por el transportador de glutamato, mientras que la carnosina se libera junto con el glutamato. El receptor de glutamato NMDA posee un sitio de regulacin redox sensible a grupos sulfhidrilo hacindolo un mecanismo de retroalimentacin negativa. La activacin de los receptores NMDA lleva a la liberacin de H2O2 y de NO. El NO juega un papel importante en este proceso al regular la liberacin de glutamato.5 Procesos inflamatorios Las clulas de la microglia son clulas inmunoefectoras que se activan por dao o por cambios en el microambiente, con frecuencia la microglia se activa antes de que ocurran daos detectables en otros tipos de clulas. Los neurotransmisores pueden actuar como molculas seal en la microglia. La microglia activada libera una serie de productos citotxicos que provocan dao y muerte neuronal; ROS como H2O2, NO (particularmente cuando se estimula con interfern gamma, IFN, y factor de necrosis tumoral alfa, TNF-), protenas como catepsina B/L, activador de plasmingeno tipo urocinasa, interleucinas como IL-1 y TNF-, glutamato y aspartato (aminocidos excitatorios), y protena precursora de amiloides (APP) (figura 3). El NO producido por la glia activada o por los astrocitos en respuesta a ROS, acta como mediador en la neurodegeneracin y activa procesos inflamatorios. El aumento excesivo de NO y ROS inhibe la respiracin mitocondrial en las neuronas que estn alrededor, provocando la liberacin de glutamato (a travs del transportador de glutamato GluT) proveniente de las neuronas (y de los astrocitos en menor medida) estimulando a los receptores NMDA (NMDAR). La activacin de estos receptores dispara la entrada masiva de Ca+2 a las neuronas, llevando a las clulas a muerte necrtica o apopttica (cuadro 2). Enfermedades neurodegenerativas Enfermedad de Parkinson

lar C1 y C3.11 La substantia nigra tiene caractersticas que la hacen ms vulnerable al ataque de ROS como son: niveles bajos de glutatin y vitamina E, y niveles altos de hierro libre (prooxidante) mono amina oxidasa MAO (generadora de ROS), NO (radical prooxidante neurotxico) y neuromelanina. La neuromelanina es un pigmento negro que se encuentra en ciertas subpoblaciones de neuronas monoaminrgicas, y es el resultado de autooxidacin, condensacin y polimerizacin de la dopamina y de sus productos de oxidacin; las neuronas que contienen mayor cantidad de neuromelanina en la substantia nigra pars compacta mueren con mayor facilidad. La neuromelanina se une a cualquier especie reactiva neutralizndola, pero se puede convertir en un depsito de elementos txicos que bajo ciertas condiciones (ataque oxidativo, niveles bajos de glutatin) libera estas especies reactivas. Los metales de transicin catalizan la formacin de ROS altamente reactivas. Adems de esto, tambin existen anormalidades en la ruta metablica de oxidacin de catecolaminas.17 Las neuronas dopaminrgicas son especialmente sensibles al estrs oxidativo debido a su alta tasa metablica de O2 y debido tambin a la oxidacin de la dopamina, ya sea por autooxidacin o por la ruta metablica de la MAO. La desaminacin oxidativa de la dopamina produce H2O2. El glutatin (GSH) que es la molcula intracelular ms importante en cuanto a la eliminacin de hidroperxidos en el cerebro, se encuentra disminuido en el Parkinson, as como tras la eliminacin por conjugacin de otros metabolitos txicos productos del estrs oxidativo como el 4-HNE. En esta patologa la concentracin de MDA (un marcador de oxidacin de lpidos) y de 4-HNE estn aumentadas. En esta enfermedad hay niveles altos de productos finales de glicosilacin (AGE, resultado de una oxidacin alterada de glucosa y que causan oxidacin irreversible de protenas) en la substantia nigra y en la corteza. Otro factor que contribuye al dao oxidativo es que la distribucin de metales de transicin en el cerebro muestra grandes diferencias regionales, las regiones con grandes cantidades de hierro (que es fcilmente oxidable) como substantia nigra tienen un riesgo de sufrir un ataque oxidativo ms agresivo. Enfermedad de Alzheimer La enfermedad de Alzheimer se caracteriza por una disminucin progresiva de la funcin cognitiva y asociada con una prdida neuronal masiva. Los cerebros de pacientes afectados con esta enfermedad muestran placas amiloides y maraas neurofibrilares.10,11 En estos pacientes tambin se observa un aumento significativo en los niveles de lipoperoxidacin y en los niveles de 4-hidroxinonenal (4HNE, un aldehdo producto secundario de la peroxidacin

La enfermedad de Parkinson se caracteriza por temblor de reposo, bradiquinesia (lentitud en los movimientos voluntarios), rigidez e inestabilidad en el equilibrio y se debe a la destruccin de neuronas que contienen neuromelanina en la substantia nigra, el locus coeruleus, y el grupo medu-

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de lpidos). Diversas evidencias sugieren que la capacidad de los -amiloides para causar dao en las neuronas hipocampales en esta patologa se debe a la acumulacin de ROS, las cuales disminuyen la viabilidad celular. El dao oxidativo, ya sea directamente a las ATPasas insertas en la membrana plasmtica o a los lpidos, lleva a una disminucin en la actividad de las ATPasas y a un aumento en los niveles intracelulares de Ca+2. Los -amiloides hacen a las neuronas hipocampales ms susceptibles a la toxicidad por glutamato. Los -amiloides disminuyen la funcin mitocondrial y al causar dao a los transportadores gliales de alta afinidad al glutamato, con el consecuente efecto de aumentar los niveles extracelulares de glutamato, aparentemente mediante la produccin de 4-HNE. La microglia activada que rodea las placas seniles es una fuente importante de NO y O2, los -amiloides y AGEs en presencia de metales de transicin producen tambin radicales libres.16 Esclerosis lateral amiotrfica La esclerosis lateral amiotrfica es una enfermedad neurodegenerativa que comienza afectando neuronas motoras superiores e inferiores que se manifiesta como una debilidad progresiva en miembros y cara, atrofia, espasticidad, reflejos hiperactivos y finalmente compromiso respiratorio y muerte.11 Aproximadamente el 10% de los casos se heredan de manera autosmica dominante, estos pacientes tienen mutaciones en el gen de la CuZnSOD, mutacin que causa un aumento en la generacin de radicales libres, lo que lleva a la muerte de neuronas motoras por apoptosis a travs de la activacin de caspasa 1 y caspasa 3.6 La activacin de la caspasa1 provoca el aumento en los niveles de interleucina-1, lo cual induce una respuesta inflamatoria local en la microglia, aumentando el estrs oxidativo y de esta manera aumenta el nmero de neuronas afectadas. Corea de Huntington La Corea de Huntington es una enfermedad relacionada con la edad que se caracteriza por movimientos involuntarios y demencia progresiva, es una enfermedad hereditaria debida a una expansin del trinucletido CAG en el cromosoma.4 Esta mutacin resulta en la degeneracin de un grupo de neuronas GABArgicas en los ganglios basales por defectos metablicos preexistentes que causan un metabolismo energtico deficiente en la mitocondria.10,12 La disminucin en ATP, y el aumento en los niveles de ROS y RNS, hace que aumenten los niveles de glutamato en este grupo de neuronas que es muy sensible al efecto neurotxico de este neurotransmisor excitatorio.5,12

El mantenimiento del equilibrio redox es una necesidad fundamental para los seres vivos, y la prdida de esta funcin lleva a un deterioro progresivo del rgano o sistema afectado, la comprensin de los mecanismos que mantienen este equilibrio son fundamentales en un futuro prximo para prevenir y detener los procesos de neurodegeneracin.

Referencias
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