PARTE

I
Cromossomos humanos em metfase, cada um composto de duas cromtides-irms unidas por um centrmero comum. A metfase a fase da diviso celular em que os membros de cada par de cromtides esto em vias de se separar e de ser distribudos entre as duas novas clulas.

CONCEITOS
A gentica da transmisso o processo geral em que as caractersticas controladas por fatores (genes) so transmitidas, por meio dos gametas, de gerao a gerao. Seus princpios fundamentais foram formulados primeiramente por Gregor Mendel em meados do sculo XIX. Trabalhos posteriores, realizados por outros pesquisadores, mostraram que os genes esto nos cromossomos e que as linhagens mutantes podem ser usadas para mape-los cromossomicamente. O reconhecimento de que o DNA codifica a informao gentica, a descoberta da estrutura do DNA e a elucidao do mecanismo de expresso gnica constituem o fundamento da gentica molecular. A tecnologia do DNA recombinante, a qual possibilita aos cientistas o preparo de grandes quantidades de sequncias especficas de DNA, revolucionou a gentica, lanando a base para novos campos e para esforos como o do Projeto Genoma Humano que combinam a gentica com a tecnologia da informao. A biotecnologia inclui o uso de organismos geneticamente modificados e seus produtos em uma ampla variedade de atividades que envolvem a agricultura, a medicina e a indstria. Os organismos-modelo, empregados nas pesquisas genticas desde o incio do sculo XX, so atualmente usados em associao tecnologia do DNA recombinante e genmica para estudar as doenas humanas. A tecnologia gentica est se desenvolvendo mais rapidamente do que as polticas, as leis e as convenes que regulam o seu uso.

Introduo Gentica

CAPTULO 1

INTRODUO GENTICA

m dezembro de 1998, aps meses de veemente debate, o Parlamento Islands aprovou uma lei que concedia deCODE Genetics, uma empresa de biotecnologia com sede na Islndia, uma licena para criar e administrar um banco de dados com informaes detalhadas obtidas dos registros mdicos de todos os 270.000 residentes naquele pas. Nesse banco de dados do Setor de Sade Islands (ou HSD), os registros foram codificados de modo a garantir seu anonimato. A nova lei tambm permitia que a deCODE Genetics cruzasse os dados de informaes mdicas do HSD com um amplo banco de dados genealgico dos Arquivos Nacionais. Alm disso, a referida empresa estaria apta a correlacionar as informaes desses dois bancos de dados com os resultados dos perfis de cido desoxirribonucleico (DNA) coletados de doadores islandeses. Essa combinao de informaes mdicas, genealgicas e genticas seria um recurso poderoso, disponvel exclusivamente deCODE Genetics, para negociar com os pesquisadores e outras empresas durante um perodo de 12 anos, a comear no ano 2000. Esse no um roteiro de fico cientfica de um filme como Gattaca, mas um exemplo real da interao cada vez mais complexa da gentica com a sociedade no incio do sculo XXI. O desenvolvimento e o uso desses bancos de dados na Islndia geraram projetos semelhantes em outros pases tambm. O mais amplo o empenho do UK Biobank, lanado na Gr-Bretanha em 2003, no qual um vasto banco de dados com informaes genticas de 500.000 britnicos ser compilado a partir de um grupo inicial de 1,2 milho de habitantes. Esse banco de dados ser usado para pesquisar genes de suscetibilidade que controlam as caractersticas complexas. Desde ento, j foram anunciados outros projetos na Estnia, Letnia, Sucia, Singapura e no Reino de Tonga, enquanto nos Estados Unidos programas em menor escala, envolvendo dezenas de milhares de indivduos, encontram-se em andamento na Clnica Marshfield, em Marshfield, Wisconsin; na Northwestern University, em Chicago, Illinois, e na Howard University, em Washington, D. C. A deCODE Genetics selecionou a Islndia para seu projeto sem precedente porque seus habitantes tm um nvel de uniformidade gentica raramente observado ou acessvel investigao cientfica. Esse alto grau de relacionamento gentico deriva da fundao daquele pas, h aproximadamente 1.000 anos, por uma pequena populao oriunda principalmente de localidades escandinavas e clticas. As redues peridicas subsequentes da populao, por doenas e desastres naturais, diminuram posteriormente sua diversidade gentica, e, at as ltimas dcadas, poucos imigrantes chegavam para trazer novos genes populao. Alm disso, uma vez que o sistema de sade da Islndia tem suporte estatal, os registros mdicos de todos os habitantes remontam at o incio do sculo XX. As informaes genealgicas esto disponveis nos Arquivos Nacionais e nos registros eclesisticos para quase todos os residentes e para mais de 500.000 dos 750.000 indivduos estimados que tenham vivido sempre na Islndia. Por todas essas razes, os dados islandeses constituem uma enorme vantagem para os geneticistas na pesquisa dos genes que controlam as doenas complexas. Esse projeto j tem muitos resultados bem-sucedidos a seu crdito. Os cientistas da deCODE Genetics isolaram 15 genes com 12 doenas comuns, incluindo a asma, a doena cardaca, o acidente vascular cerebral e a osteoporose.

No lado inverso desses sucessos, esto questes de privacidade, consentimento e comercializao problemas centrais de muitas controvrsias surgidas das aplicaes da tecnologia gentica. Cientistas e no cientistas esto disputando, de modo semelhante, o destino e o controle das informaes genticas, bem como o papel da lei, do indivduo e da sociedade nas decises a respeito de como e quando a tecnologia gentica deve ser usada. Por exemplo, como ser usado o conhecimento da sequncia nucleotdica completa do genoma humano? A revelao das informaes genticas sobre os indivduos causar discriminao em empregos ou seguradoras? Tecnologias genticas como o diagnstico pr-natal ou a terapia gnica devem ser disponibilizadas para todos, independentemente de sua capacidade de pagamento? Mais do que em qualquer outra poca na histria da cincia, a avaliao das questes ticas que envolvem uma tecnologia emergente to importante quanto a obteno de informao a partir dessa tecnologia. Este captulo introdutrio fornece uma viso geral da gentica, em que examinamos alguns pontos importantes de sua histria e fornecemos descries preliminares de seus princpios centrais e dos avanos recentes. Todos os tpicos discutidos neste captulo sero analisados com muito mais detalhes em outras partes do livro. Os ltimos captulos tambm voltaro a abordar as controvrsias j aludidas e discutiro outros inmeros problemas que so fontes atuais de debate. Jamais existiu um perodo mais estimulante para participar da cincia das caractersticas hereditrias, mas nunca a necessidade de cautela e de conscincia das consequncias sociais foi mais evidente. Este texto ir habilit-lo a alcanar uma compreenso profunda da gentica moderna e de seus princpios fundamentais. Ao longo do caminho, deleite-se com seus estudos, mas se encarregue de suas responsabilidades, como um geneticista iniciante, com muita seriedade.

1.1

A gentica progrediu de Mendel ao DNA em menos de um sculo

Uma vez que os processos genticos so fundamentais para a prpria vida, a cincia da gentica unifica a biologia e funciona como seu centro. Desse modo, no surpreendente que a gentica tenha uma longa e rica histria. Seu ponto de partida foi o jardim de um mosteiro da Europa Central na dcada de 1860.

O trabalho de Mendel sobre a transmisso de caractersticas

Nesse jardim (Figura 1-1), Gregor Mendel, um monge agostiniano, realizou uma srie de experimentos com ervilhas-de-jardim durante uma dcada. O trabalho de Mendel mostrou que as caractersticas dos seres vivos so transmitidas dos genitores para a prole de maneira previsvel. Esse monge concluiu que as caractersticas das ervilheiras, tais como altura da planta e cor da flor, so controladas por unidades descontnuas de herana, que agora denominamos genes. Posteriormente, concluiu que cada caracterstica da planta controlada por um par de genes e que os membros de um par de genes se separam durante a formao de gametas (a formao dos vulos e dos espermatozoides).

1.1

A GENTICA PROGREDIU DE MENDEL AO DNA EM MENOS DE UM SCULO

FIGURA 1-2 Imagem colorizada dos cromossomos humanos que se duplicaram durante a preparao para a diviso celular, quando so visualizados ao microscpio eletrnico de varredura.

FIGURA 1-1 O jardim do mosteiro em que Gregor Mendel realizou seus experimentos com ervilhas-de-jardim. Em 1866, Mendel formulou os principais postulados da gentica da transmisso.

Seu trabalho foi publicado em 1866, mas continuou desconhecido at ser parcialmente duplicado e citado em artigos de Carl Correns e outros, em torno de 1900. Confirmados por outros, os resultados de Mendel tornaram-se reconhecidos como a explicao da transmisso de caractersticas nas ervilhas-de-jardim e em todos os demais organismos superiores. Seu trabalho constitui a fundao da gentica, a qual definida como o ramo da biologia envolvido no estudo da hereditariedade e da variao. A histria de Gregor Mendel e do incio da gentica contada em um livro cativante, The Monk in the Garden: The Lost and Found Genius of Gregor Mendel, the Father of Genetics (O monge no jardim: o gnio perdido e reencontrado de Gregrio Mendel, o pai da gentica), de Robin M. Henig. A gentica mendeliana ser discutida nos Captulos 3 e 4.

os cromossomos existem aos pares, chamados cromossomos homlogos. Os membros de um par so idnticos em tamanho e localizao do centrmero, uma estrutura qual se ligam as fibras do fuso durante a diviso celular. Nas ltimas dcadas do sculo XIX, os pesquisadores tambm descreveram o comportamento dos cromossomos durante duas formas de diviso celular, a mitose e a meiose. Na mitose (Figura 1-4), os cromossomos so copiados e distribudos, de modo que cada clula-filha receba um conjunto diploide de cromossomos. A meiose associada formao de gametas. As clulas produzidas por meiose recebem somente um membro de cada par cromossmico, e, nesse caso, o nmero de cromossomos resultante denominado nmero haploide (n). Essa reduo no nmero de cromossomos essencial se a prole que surge da unio de dois gametas parentais deve manter, ao longo das geraes, um nmero constante de cromossomos caracterstico de seus genitores e de outros membros de sua espcie.

A teoria cromossmica da herana: unindo Mendel e a meiose

Mendel realizou seus experimentos previamente ao conhecimento da estrutura e do papel dos cromossomos. Cerca de 20 anos depois de seu trabalho ser publicado, os avanos em microscopia possibilitaram aos pesquisadores a identificao dos cromossomos (Figura 1-2) e o estabelecimento de que, na maioria dos eucariontes, os membros de cada espcie tm um nmero de cromossomos caracterstico, denominado nmero diploide (2n), na maioria de suas clulas. Por exemplo, os humanos tm um nmero diploide de 46 (Figura 1-3). Nas clulas diploides,

FIGURA 1-3 Imagem colorizada do conjunto cromossmico humano masculino. Nessa disposio, o conjunto denominado caritipo.

CAPTULO 1

INTRODUO GENTICA

scute bristles, sc white eyes, w ruby eyes, rb crossveinless wings, cv singed bristles, sn lozenge eyes, lz vermilion eyes, v

sable body, s
FIGURA 1-4 Fase da mitose em que os cromossomos (corados em azul) se separam.

scalloped wings, sd Bar eyes, B carnation eyes, car little fly, lf

No incio do sculo XX, Walter Sutton e Theodore Boveri notaram, independentemente, que os genes, de acordo com a hiptese formulada por Mendel, e os cromossomos, como eram observados ao microscpio, tm vrias propriedades em comum e que o comportamento dos cromossomos durante a meiose idntico ao comportamento presumido dos genes durante a formao de gametas. Por exemplo, os genes e os cromossomos existem aos pares; alm disso, os membros de um par gnico e os membros de um par cromossmico se separam um do outro durante a formao de gametas. Com base nesse paralelismo, Sutton e Boveri propuseram, individualmente, que os genes esto contidos nos cromossomos (Figura 1-5). Essa proposio a base da teoria cromossmica da hereditariedade, a qual afirma que as caractersticas hereditrias so controladas por genes localizados nos cromossomos, esses so fielmente transmitidos por meio dos gametas, mantendo a continuidade gentica de gerao a gerao. Os geneticistas encontraram muitos exemplos diferentes de caractersticas hereditrias, entre 1910 e em torno de 1940, possibilitando-lhes testar essa teoria repetidamente. s vezes, os padres de herana diferiam dos exemplos simples descritos por Mendel, mas a teoria cromossmica da herana sempre podia ser aplicada. E continua a explicar como as caractersticas so transmitidas de gerao a gerao em uma variedade de organismos, inclusive os humanos.

FIGURA 1-5 Representao esquemtica do cromossomo I (o cromossomo X, um dos cromossomos que determinam o sexo) de D. melanogaster, mostrando a localizao de vrios genes.* Os cromossomos podem conter centenas de genes.

Variao gentica
Aproximadamente na mesma poca em que a teoria cromossmica da herana foi proposta, os cientistas comearam a estudar a herana de caractersticas da mosca-das-frutas, Drosophila melanogaster. Uma mosca de olhos brancos (Figura 1-6) foi descoberta em um frasco que continha moscas normais (do tipo selvagem) de olhos vermelhos. Essa variao era produzida por uma mutao em um dos genes que controla a cor de olhos. As mutaes so definidas como qualquer modificao hereditria e constituem a fonte de toda a variao gentica.
FIGURA 1-6 A cor de olhos vermelha normal de D. melanogaster (inferior) e a cor e de olhos branca mutante (superior). * N. de T. Traduo das denominaes dos genes: scute bristles, cerdas em escudo; white eyes, olhos brancos; ruby eyes, olhos vermelho-rubi; crossveinless wings, asas sem nervuras transversais; singed bristles, cerdas curtas; lozenge eyes, olhos em losango; vermilion eyes, olhos vermelho-vivo; sable body, corpo preto; scalloped wings, asas recortadas; Bar eyes, olhos em barra; carnation eyes, olhos vermelhos; little fly, mosca pequena.

1.2

A DESCOBERTA DA HLICE DUPLA INICIOU A ERA DA GENTICA MOLECULAR

O gene da cor de olhos variante descoberto em Drosophila um alelo do gene que controla a cor de olhos. Os alelos so definidos como formas alternativas de um gene. Os diferentes alelos podem produzir dissimilaridades nos aspectos observveis, ou fentipo, de um organismo. O conjunto de alelos para uma dada caracterstica, carregado por um organismo, chamado gentipo. Usando genes mutantes como marcadores, os geneticistas foram capazes de mapear a localizao dos genes nos cromossomos.

tagem de mais fagos. Essa evidncia de que o DNA contm a informao gentica, juntamente com outras pesquisas realizadas durante os anos seguintes, forneceu uma prova consistente de que o DNA, no a protena, o material gentico, estabelecendo a fase de trabalho para definir a estrutura do DNA.

1.2

A descoberta da hlice dupla iniciou a Era da Gentica Molecular

Uma vez aceito que o DNA o portador da informao gentica, os esforos concentraram-se em decifrar a estrutura da molcula de DNA e os mecanismos pelos quais a informao nele armazenada expressa para produzir uma caracterstica observvel, denominada fentipo. Nos anos subsequentes consecuo desses objetivos, os pesquisadores aprenderam a isolar e fazer cpias de regies especficas de molculas de DNA, abrindo o caminho para a era da tecnologia do DNA recombinante.

A pesquisa sobre a natureza qumica dos genes: DNA ou protena?

O trabalho sobre a Drosophila de olhos brancos mostrou que a caracterstica mutante podia ser rastreada at um nico cromossomo, confirmando a ideia de que os genes esto localizados nos cromossomos. Uma vez estabelecida essa relao, os investigadores voltaram sua ateno para identificar qual componente qumico dos cromossomos carregava a informao gentica. Por volta de 1920, os cientistas estavam cientes de que as protenas e o DNA eram os principais componentes qumicos dos cromossomos. As protenas so o componente mais abundante nas clulas. Existe uma grande quantidade de protenas diferentes, e, devido sua distribuio universal no ncleo e no citoplasma, muitos investigadores pensavam que as protenas seriam apresentadas como sendo as portadoras da informao gentica. Em 1944, Oswald Avery, Colin MacLeod e Maclyn McCarty, trs pesquisadores do Instituto Rockefeller, em Nova York, publicaram os experimentos que mostraram que o DNA era o portador da informao gentica em bactrias. Essa evidncia, embora bem clara, no conseguiu convencer muitos cientistas influentes. A evidncia adicional do papel do DNA como portador da informao gentica veio de outros pesquisadores que trabalhavam com vrus que infectam e matam clulas da bactria Escherichia coli (Figura 1-7).Os vrus que atacam as bactrias so chamados bacterifagos, ou fagos, para abreviar, e, como todos os vrus, consistem em uma capa proteica que circunda um ncleo de DNA. Os experimentos mostraram que, durante a infeco, a capa proteica do vrus permanece fora da clula bacteriana, ao passo que o DNA viral entra na clula e dirige a sntese e a mon-

As estruturas do DNA e do RNA

O DNA uma longa macromolcula, semelhante a uma escada que se espiraliza para formar uma hlice dupla (Figura 1-8). Cada fita da hlice um polmero linear composto de subunidades chamadas nucleotdeos. No DNA, h quatro nucleotdeos diferentes, e cada nucleotdeo desses contm uma das quatro bases nitrogenadas, abreviadas por A (adenina), G (guanina), T (timina) e C (citosina). Essas quatro bases, em vrias combinaes de sequncias, especificam, em ltima anlise, as sequncias de aminocidos das protenas. Uma das grandes descobertas do sculo XX foi feita em 1953, por James Watson e Francis Crick, os quais estabeleceram que as duas fitas de DNA so complementos exatos uma da outra, de modo que, na hlice dupla, os degraus da escada so sempre constitudos pelos pares de bases A T e G C. Juntamente com Maurice Wilkins, Watson e Crick receberam o Prmio Nobel de 1962 por seu trabalho sobre a estrutura do DNA. Um relato em primeira mo da corrida para descobrir a estrutura do DNA efetuado no livro The Double Helix (A hlice dupla), de James Watson. A estrutura do DNA ser discutida no Captulo 10. Como veremos em captulos posteriores, a relao de complementaridade entre adenina e timina e entre guanina e citosina essencial para a funo gnica, servindo como a base tanto para a replicao do DNA (Captulo 11) quanto para a expresso gnica (Captulos 14 e 15). Durante ambos os processos, as fitas de DNA servem como moldes para a sntese de molculas complementares. Na Figura 1-8, so mostradas duas representaes da estrutura e dos componentes do DNA. O RNA, outro cido nucleico, quimicamente similar ao DNA, mas contm um acar diferente (ribose em lugar de desoxirribose) e a base nitrogenada uracila em lugar de timina nos seus nucleotdeos. Alm disso, ao contrrio da estrutura em hlice dupla do DNA, em geral o RNA de fita nica. Note-se que o RNA pode formar estruturas complementares com uma fita de DNA.

Expresso gnica: do DNA ao fentipo

FIGURA 1-7 Fotomicrografia eletrnica que mostra um fago T infectando uma clula da bactria E. coli.

Como observado anteriormente, a complementaridade de nucleotdeos a base para a expresso gnica, a cadeia de eventos que leva um gene a produzir um fentipo. Esse processo comea no ncleo com a transcrio, na qual a sequncia nucleotdi-

CAPTULO 1

INTRODUO GENTICA

P A P C P G P T C A G T

Acar P (desoxirribose) Nucleotdeo P P P Fosfato DNA Transcrio

mRNA

Traduo

Par de bases complementares (timina-adenina)

FIGURA 1-8 Esquema da estrutura do DNA, ilustrando a disposio da hlice dupla ( esquerda) e os componentes qumicos que compem cada fita ( direita).

Aminocido

ca em uma fita de DNA usada para construir uma sequncia de RNA complementar (parte superior da Figura 1-9). Uma vez produzida, a molcula de RNA se move para o citoplasma. Na sntese proteica, esse RNA denominado RNA mensageiro, ou mRNA, abreviadamente se liga a um ribossomo. A sntese de protenas sob a orientao do mRNA denominada traduo (parte inferior da Figura 1-9). As protenas, produto final de muitos genes, so polmeros compostos de monmeros de aminocidos. Existem 20 aminocidos diferentes encontrados, comumente, nas protenas. Como a informao contida no mRNA pode orientar o acrscimo de aminocidos especficos nas cadeias proteicas medida que so sintetizadas? A informao codificada no mRNA e denominada cdigo gentico consiste em sries lineares de trincas de nucleotdeos. Cada trinca, chamada cdon, complementar informao armazenada no DNA e especifica a insero de um aminocido especfico em uma protena. A juno proteica realizada com o auxlio de molculas adaptadoras, chamadas RNA transportador (tRNA). Dentro do ribossomo, os tRNAs reconhecem a informao codificada nos cdons do mRNA e transportam os aminocidos apropriados para a construo da protena durante a traduo. Como a anlise anterior mostra, o DNA faz o RNA, o qual, na maior parte das vezes, faz a protena. Essa sequncia de eventos, conhecida como o dogma central da gentica, ocorre com grande especificidade. Usando um alfabeto de somente quatro letras (A, T, C e G), os genes dirigem a sntese de protenas com alto grau de especificidade, as quais funcionam, em conjunto, como a base de todas as funes biolgicas.

tRNA Ribossomo

Protena
FIGURA 1-9 A expresso gnica consiste na transcrio do DNA para o mRNA (superior) e na traduo (ao centro) do mRNA (com o auxlio de um ribossomo) em uma protena (inferior).

10 Uma vez que 20 ultrapassa 5 como grande o nmero

1012, ou 5 trilhes, imagine

20

100

Protenas e funo biolgica

Como j mencionamos, as protenas so os produtos finais da expresso gnica. Essas molculas so responsveis pela atribuio das propriedades dos sistemas vivos. A diversidade das protenas e das funes biolgicas que elas podem desempenhar a diversidade da prpria vida origina-se do fato de que as protenas so constitudas de combinaes de 20 aminocidos diferentes. Considerando que uma cadeia proteica que contenha 100 aminocidos pode ter em cada posio qualquer um dos 20 aminocidos, o nmero possvel de protenas diferentes com 100 aminocidos, cada uma com uma sequncia exclusiva, igual, portanto, a 20100.

O nmero imenso de sequncias de aminocidos possveis, nas protenas, conduz enorme variao em suas conformaes tridimensionais possveis. Obviamente, a evoluo se apoderou de uma classe de molculas com potencial para uma diversidade estrutural imensa, a qual funciona como o sustentculo dos sistemas biolgicos. A maior categoria de protenas a das enzimas (Figura 1-10). Essas molculas funcionam como catalisadores biolgicos, estimulando essencialmente as reaes bioqumicas, para que ocorram nas taxas necessrias sustentao da vida. Reduzindo a energia de ativao nas reaes, as enzimas capacitam o metabolismo celular a prosseguir em temperaturas corporais, quando, de outro modo, essas reaes exigiriam intenso calor ou presso para ocorrerem. Inmeras protenas, diferentes das enzimas, so componentes essenciais das clulas e dos organismos. Essas protenas incluem: a hemoglobina, o pigmento que se liga ao oxignio e o transporta nos eritrcitos (ou hemcias); a insulina, o hormnio pancretico; o colgeno, a molcula de tecido conjuntivo; a queratina, a molcula estrutural do cabelo; as histonas, protenas integrantes da estrutura cromossmica em eucariontes (isto , os organismos cujas clulas tm ncleo); a actina e a miosina,

1.2

A DESCOBERTA DA HLICE DUPLA INICIOU A ERA DA GENTICA MOLECULAR

FIGURA 1-10 Conformao tridimensional de uma protena. A protena aqui mostrada uma enzima.

FIGURA 1-11 A molcula da hemoglobina, mostrando as duas cadeias alfa ( ) e as duas cadeias beta ( ). Uma mutao no gene da cadeia beta produz molculas de hemoglobina anormais e doena das clulas falciformes.

as protenas dos msculos contrteis e as imunoglobulinas, as molculas de anticorpos do sistema imune. A forma e o comportamento qumico de uma protena so determinados por sua sequncia linear de aminocidos, a qual determinada pela informao armazenada no DNA de um gene que transferida para o RNA, cido nucleico que, ento, orienta a sntese dessa protena. Repetindo, o DNA produz o RNA, o qual, ento, produz a protena.

B-GLOBINA NORMAL
DNA...........................TGA mRNA........................ACU Aminocido............. thr 4 GGA CCU pro 5 GGA CCU pro 5 CTC GAG glu 6 CAC GUG val 6 CTC............ GAG............ glu ......... 7 CTC............ GAG............ glu ......... 7

B-GLOBINA MUTANTE
DNA...........................TGA mRNA........................ACU Aminocido............. thr 4

Ligando o gentipo ao fentipo: a doena das clulas falciformes

Uma vez construda a protena, seu comportamento bioqumico ou estrutural em uma clula desempenha um papel na produo do fentipo. Quando uma mutao altera um gene, pode modificar ou at eliminar a funo usual da protena codificada, causando um fentipo alterado. Para seguir o curso da cadeia de eventos que se origina da sntese de uma dada protena presena de um determinado fentipo, examinaremos a doena das clulas falciformes (anteriormente denominada anemia falciforme), uma doena gentica humana. A doena das clulas falciformes causada por uma forma mutante de hemoglobina, a protena que transporta o oxignio dos pulmes para as clulas corporais (Figura 1-11). A hemoglobina uma molcula composta, formada por duas protenas diferentes, a -globina e a -globina, codificadas por genes diferentes. Cada molcula de hemoglobina funcional contm duas -globinas e duas -globinas. Na doena das clulas falciformes, uma mutao no gene que codifica a -globina causa a substituio de um aminocido dos 146 aminocidos dessa protena. A Figura 1-12 mostra parte da sequncia do DNA, os cdons correspondentes do mRNA e a sequncia de aminocidos para as formas normal e mutante da -globina. Observe que, na doena das clulas falciformes, a mutao consiste na substituio de uma base em um nucleotdeo do DNA, que acarreta a mudana no cdon 6 do mRNA, de GAG para GUG, o que, por sua vez, troca o 6 aminocido na -globina de cido glutmico para valina. Os outros 145 aminocidos dessa protena no so alterados por essa mutao.

FIGURA 1-12 A substituio de um nico nucleotdeo no DNA que codifica a -globina (CTC S CAC) causa uma alterao no cdon do mRNA (GAG S GUG) e a insero de um aminocido diferente (glu S val), produzindo a verso alterada da protena -globina, responsvel pela doena das clulas falciformes.

Os indivduos com duas cpias mutantes do gene da -globina tm a doena das clulas falciformes. Suas -globinas mutantes levam as molculas de hemoglobina a se polimerizarem nos eritrcitos, quando a concentrao de oxignio do sangue baixa, formando longas cadeias de hemoglobina que distorcem a forma dessas clulas (Figura 1-13). As clulas deformadas so frgeis e se rompem facilmente, de modo que o nmero de eritrcitos na circulao reduzido (a anemia uma insuficincia de eritrcitos). Alm disso, quando as clulas sanguneas tomam a forma de foice, bloqueiam o fluxo sanguneo nos vasos capilares e nos pequenos vasos sanguneos, causando dor grave e dano ao corao, ao encfalo, aos msculos e aos rins. A doena das clulas falciformes pode causar infartos e acidentes vasculares cerebrais, podendo ser fatal, se no for tratada. Todos os sintomas dessa doena so causados por uma mudana em um nico nucleotdeo de um gene, que troca um s aminocido dos 146 aminocidos da molcula de -globina, demonstrando a ntima relao entre o gentipo e o fentipo.

CAPTULO 1

INTRODUO GENTICA

Fragmento de DNA Vetor

Molcula de DNA recombinante

Insero na clula bacteriana

FIGURA 1-13 Eritrcitos normais (de forma discoide) e falciformes. As clulas falciformes bloqueiam os vasos capilares e os pequenos vasos sanguneos.

A bactria se reproduz

Os clones so produzidos

1.3

O desenvolvimento da tecnologia do DNA recombinante iniciou a Era da Clonagem

A era do DNA recombinante comeou no incio da dcada de 1970, quando os pesquisadores descobriram que as bactrias se protegem das infeces virais mediante produo de enzimas que clivam, ou cortam, o DNA viral em stios especficos. Quando cortado, o DNA viral no pode comandar a sntese das partculas de fagos. Os cientistas perceberam, imediatamente, que essas enzimas, chamadas enzimas de restrio, poderiam ser usadas para cortar o DNA de qualquer organismo em sequncias nucleotdicas especficas, produzindo um conjunto de fragmentos reproduzveis. Isso determinou a fase de desenvolvimento da clonagem do DNA, isto , a produo de grande nmero de cpias das sequncias de DNA. Pouco depois que os pesquisadores descobriram que as enzimas de restrio produzem fragmentos especficos de DNA, foram desenvolvidos os mtodos para inserir esses fragmentos em molculas portadoras de DNA, chamadas vetores, para a produo de molculas de DNA recombinante e sua transferncia para as clulas bacterianas. Quando as clulas bacterianas se reproduzem, so produzidas milhares de cpias, ou clones, do conjunto de vetor e fragmentos de DNA (Figura 1-14). Essas cpias clonadas podem ser recuperadas das clulas bacterianas, podendo ser isolada uma grande quantidade de fragmentos de DNA clonados. Logo que esse montante de fragmentos especficos de DNA se tornou disponvel mediante clonagem, foi usado para diferentes objetivos: para isolar genes, estudar sua organizao e expresso e analisar sua sequncia nucleotdica e evoluo. Ao mesmo tempo em que as tcnicas se tornaram mais sofisticadas, foi possvel clonar fragmentos de DNA cada vez maiores, preparando o caminho para criar colees de clones que representassem o genoma de um organismo, ou seja, o contedo haploide completo do DNA especfico do organismo considerado. As colees de clones que contm um genoma inteiro

FIGURA 1-14 Na clonagem, o vetor e o fragmento de DNA resultante de clivagem com uma enzima de restrio so reunidos, produzindo uma molcula de DNA recombinante. Esse DNA transferido para uma clula bacteriana, onde clonado em muitas cpias por replicao da molcula recombinante e por diviso da clula bacteriana.

so denominadas bibliotecas genmicas, as quais atualmente so disponveis para centenas de organismos. A tecnologia do DNA recombinante no apenas acelerou imensamente o ritmo das pesquisas, mas tambm deu origem indstria da biotecnologia, a qual nos ltimos 25 anos cresceu tanto a ponto de se tornar uma grande contribuinte da economia norte-americana.

1.4

O impacto da biotecnologia est em contnua expanso

Tranquilamente e sem provocar muita publicidade nos Estados Unidos, a biotecnologia revolucionou muitos aspectos da vida cotidiana. Os humanos usaram microrganismos, plantas e animais durante milhares de anos, mas o desenvolvimento da tecnologia do DNA recombinante e de tcnicas associadas permite-nos modificar geneticamente os organismos de novas maneiras e us-los, ou seus produtos, para tornar as nossas vidas mais intensas. A biotecnologia o uso desses organismos modificados ou de seus produtos;

1.4

O IMPACTO DA BIOTECNOLOGIA EST EM CONTNUA EXPANSO

atualmente, encontra-se em evidncia nos supermercados, nos consultrios mdicos, nas farmcias, nos magazines, nos hospitais e nas clnicas; nas fazendas e nos pomares; em imposies legais e proteo infantil judicial, e at em substncias qumicas industriais. H uma anlise minuciosa da biotecnologia no Captulo 24, mas, por enquanto, vamos considerar o impacto da biotecnologia somente em uma pequena amostragem de exemplos cotidianos.

Plantas, animais e proviso alimentar

As modificaes genticas de plantas cultivadas constituem uma das reas da biotecnologia de mais rpida expanso. Seus esforos se concentraram em caractersticas como: a resistncia a herbicidas, insetos e vrus; o aumento do contedo oleaginoso, e o atraso do amadurecimento (Tabela 1.1). Atualmente, foram aprovadas mais de uma dezena de plantas cultivadas geneticamente modificadas para uso comercial nos Estados Unidos, com mais de 75 outras sendo testadas em experimentos de campo. O milho e a soja (ou feijo-de-soja) resistentes a herbicidas foram plantados pela primeira vez em meados da dcada de 1990, e agora cerca de 45% do cultivo de milho e 85% do de soja, nos Estados Unidos, so geneticamente modificados. Alm disso, mais de 50% do cultivo de canola e 75% do de algodo originam-se de linhagens geneticamente modificadas. Estima-se que mais de 60% dos alimentos processados, naquele pas, contenham ingredientes de plantas cultivadas geneticamente modificadas. Essa transformao agrcola uma fonte de controvrsia. Os crticos se preocupam com o fato de que o uso de plantas cultivadas resistentes aos herbicidas acarretar dependncia da manipulao qumica das ervas daninhas e poder, finalmente, resultar no surgimento de ervas daninhas resistentes aos herbicidas. Tambm se inquietam com a possibilidade de que as caractersticas de plantas cultivadas geneticamente modificadas possam ser transferidas para plantas selvagens, de maneira a causarem mudanas irreversveis no ecossistema. A biotecnologia tambm est sendo utilizada para aumentar o valor nutritivo das plantas cultivadas. Mais de um tero da populao mundial usa o arroz como alimento principal em sua dieta, mas a maioria das variedades dessa gramnea contm pouca ou nenhuma vitamina A, cuja deficincia causa mais de 500.000 casos de cegueira infantil anualmente. Uma linhagem geneticamente modificada, chamada arroz dourado, tem altos nveis de dois

compostos que o organismo converte em vitamina A. No futuro prximo, o arroz dourado estar disponvel para plantio, com o objetivo de reduzir a carga de morbidade. Outras plantas cultivadas, incluindo o trigo, o milho, os feijes e a mandioca, tambm esto sendo modificadas com o intuito de elevar seu valor nutritivo, mediante aumento de seu contedo vitamnico e mineral. Rebanhos de gado ovino e bovino j so clonados comercialmente h mais de 25 anos, principalmente pelo mtodo conhecido como diviso de embries. Em 1996, a ovelha Dolly (Figura 1-15) foi clonada por transferncia nuclear, um mtodo em que o ncleo de uma clula diferenciada adulta (significando uma clula reconhecvel como pertencente a algum tipo de tecido) transferido para um vulo cujo ncleo foi previamente removido. Esse mtodo de transferncia nuclear possibilita a produo de dezenas ou centenas de proles com caractersticas desejveis. A clonagem por transferncia nuclear tem muitas aplicaes na agricultura, nos esportes e na medicina. Alguns traos importantes, como a grande produo de leite nas vacas ou a alta velocidade nos cavalos de corrida, s aparecem na idade adulta; em vez de cruzar dois adultos e esperar para ver se sua prole herda as caractersticas desejadas, atualmente os animais sabidamente possuidores desses traos podem ser produzidos por clonagem de clulas diferenciadas de um adulto com alguma de tais caractersticas. Para as aplicaes mdicas, os pesquisadores transferiram genes humanos para animais os chamados animais transgnicos , de modo que, quando adultos, esses animais produzem protenas humanas em seu leite. Por meio de seleo e clonagem de animais com altos nveis de produo de protenas humanas, as empresas biofarmacuticas podem fornecer um rebanho com taxas uniformemente altas de produo proteica. As protenas humanas provenientes de animais transgnicos esto agora sendo testadas como frmacos teraputicos para doenas como o enfisema. Se bem-sucedidas, tais protenas logo estaro disponveis comercialmente.

A quem pertencem os organismos transgnicos?

Uma vez produzidos, uma planta e um animal transgnicos podem ser patenteados? A resposta positiva. Em 1980, a Supre-

TABELA 1.1

Algumas caractersticas geneticamente alteradas em plantas cultivadas Resistncia a herbicidas Milho, soja (feijo-de-soja), arroz, algodo, beterraba sacarina, canola Resistncia a insetos Milho, algodo, batata Resistncia a vrus Batata, abbora amarela, mamo Reforo nutricional Arroz dourado Contedo oleaginoso alterado Soja (feijo-de-soja), canola Atraso do amadurecimento Tomate

FIGURA 1-15 Dolly, uma ovelha Finn Dorset clonada a partir do material gentico de uma clula mamria adulta, mostrada junto ao seu cordeiro primognito, Bonnie.

10

CAPTULO 1

INTRODUO GENTICA

FIGURA 1-16 O primeiro organismo geneticamente alterado a ser patenteado foi a linhagem de camundongo onc, a qual, por meio de engenharia gentica, tornou-se suscetvel a muitas formas de cncer. Esses camundongos destinavam-se ao estudo do desenvolvimento do cncer e ao projeto de novos medicamentos anticancergenos.

ma Corte dos Estados Unidos decidiu que os organismos vivos e os genes individuais podem ser patenteados, e em 1988 foi patenteado, pela primeira vez, um organismo modificado pela tecnologia do DNA recombinante (Figura 1-16). Desde ento, j foram patenteados inmeros animais e plantas. A tica de requerer patente de organismos vivos uma questo litigiosa. Os defensores do patenteamento argumentam que, sem a capacidade de patentear os produtos de pesquisa para recuperar seus custos, as empresas de biotecnologia no investiro em pesquisa e desenvolvimento em grande escala. Alm disso, argumentam que as patentes representam um incentivo para desenvolver novos produtos, pois essas empresas colhero os lucros da tomada de riscos para oferecer novos produtos ao mercado. Os crticos argumentam que as patentes para organismos como as plantas cultivadas concentraro a propriedade da produo alimentar nas mos de um pequeno nmero de empresas de biotecnologia, tornando os agricultores economicamente dependentes das sementes e dos pesticidas produzidos por essas empresas e reduzindo a diversidade gentica das plantas cultivadas, medida que os agricultores descartarem as cultivares locais que possam conter importantes genes para resistncia a pragas e doenas. A resoluo dessas questes e de outras suscitadas pela biotecnologia e suas utilizaes exigir conscincia pblica e educao, poltica social esclarecida e legislao de cuidadosa redao.

uma grande quantidade de doenas hereditrias. A combinao de testagem e aconselhamento genticos fornece informaes objetivas aos casais, nas quais podem basear suas decises quanto gerao de prole. Atualmente, a testagem gentica j acessvel para vrias centenas de distrbios hereditrios, e esse nmero crescer medida que mais genes forem identificados, isolados e clonados. O uso da testagem gentica e de outras tecnologias, incluindo a terapia gnica, aumenta os problemas ticos que ainda tm de ser resolvidos. Em lugar de testar um gene de cada vez para descobrir se algum contm um gene mutante que possa produzir um distrbio em sua prole, est em desenvolvimento uma nova tecnologia que permitir a triagem de um genoma inteiro para determinar o risco de um indivduo desenvolver uma doena gentica ou de ter um filho com uma doena gentica. Essa tecnologia usa dispositivos chamados microarranjos de DNA, ou chips de DNA (Figura 1-18). Cada microarranjo pode conter milhares de genes. Na realidade, atualmente j so comercializados microarranjos que contm um genoma humano inteiro, sendo usados para testar a expresso gnica em clulas cancerosas como uma etapa no desenvolvimento de terapias talhadas especialmente para formas especficas de cncer. Quando a tecnologia se desenvolver mais, ser possvel fazer a varredura do genoma de um indivduo em uma s etapa para identificar os riscos de fatores genticos e ambientais que possam desencadear uma doena. Na terapia gnica, os clnicos transferem genes normais para indivduos afetados por distrbios genticos. Lamentavelmente, embora em princpio muitas tentativas de terapia gnica tenham parecido bem-sucedidas, os fracassos teraputicos e as mortes de pacientes desaceleraram o desenvolvimento dessa tecnologia. Espera-se, contudo, que novos mtodos de transferncia gnica reduzam esses riscos; portanto, parece indiscutvel que a terapia gnica venha a se tornar um recurso importante no tratamento das doenas hereditrias e que, quanto mais for aprendido sobre a base molecular das doenas humanas, mais terapias desse tipo sero desenvolvidas.

1.5

A genmica, a protemica e a bioinformtica so novas reas em expanso

Logo que as bibliotecas genmicas se tornaram disponveis, os cientistas comearam a considerar os meios de sequenciar todos os clones de tais bibliotecas, a fim de decifrarem as sequncias nucleotdicas dos genomas dos organismos. Laboratrios de vrias partes do mundo iniciaram projetos para sequenciar e analisar os genomas de diferentes organismos, incluindo os que causam doenas humanas. At hoje, foram sequenciados os genomas de mais de 550 organismos, estando em andamento aproximadamente mil projetos de genomas adicionais. O Projeto Genoma Humano comeou em 1990 como um esforo governamental internacional para sequenciar o genoma humano e os genomas de cinco organismos-modelo usados nas pesquisas genticas (a importncia desses organismos-modelo analisada a seguir). Quase ao mesmo tempo, foram iniciados vrios projetos genmicos patrocinados por empresas privadas. O primeiro genoma sequenciado de um organismo de vida livre, uma bactria (Figura 1-19), foi relatado em 1995 por cientistas de uma empresa de biotecnologia.

Biotecnologia em gentica e medicina

A biotecnologia, na forma de testagem gentica e terapia gnica, j sendo uma parte importante da medicina, ter um papel de liderana na deciso sobre a natureza da prtica clnica no sculo XXI. Nos Estados Unidos, mais de 10 milhes de crianas ou adultos sofrem de alguma forma de doena gentica, e cada casal gerando um filho se encontra em um risco de aproximadamente 3% de ter uma criana com alguma forma de m formao gentica. A base molecular de centenas de doenas genticas j conhecida atualmente (Figura 1-17). Os genes da doena das clulas falciformes, da fibrose cstica, da hemofilia, da distrofia muscular, da fenilcetonria e de muitos outros distrbios metablicos foram clonados, sendo usados para a deteco pr-natal de fetos afetados. Alm disso, presentemente se dispe de testes que informam os genitores sobre seu estado de portadores para

1.5

A GENMICA, A PROTEMICA E A BIOINFORMTICA SO NOVAS REAS EM EXPANSO

11

teste de DNA disponvel atualmente Adrenoleucodistrofia (ALD) Doena neurolgica fatal Distrofia muscular Deteriorao progressiva dos msculos Hemofilia A Deficincia da coagulao sangunea Sndrome de m-absoro da glicose-galactose Distrbio digestivo potencialmente fatal Esclerose lateral amiotrfica (ALS) Doena neurolgica degenerativa letal, de incio tardio Imunodeficincia de ADA (adenosino-desaminase) Primeira condio hereditria tratada por terapia gnica Hipercolesterolemia familiar Nveis de colesterol extremamente altos Distrofia miotnica Uma forma de distrofia muscular do adulto Amiloidose Acmulo de uma protena fibrilar insolvel nos tecidos Neurofibromatose 1 (NF1) Tumores benignos do tecido nervoso subcutneo Cncer de mama 5% de todos os casos Doena do rim policstico Cistos que resultam em aumento dos rins e insuficincia renal Doena de Tay-Sachs Distrbio hereditrio fatal que envolve o metabolismo dos lipdeos e ocorre frequentemente nos judeus asquenazes Doena de Alzheimer Distrbio enceflico degenerativo, marcado pela senilidade prematura Retinoblastoma Tumor ocular infantil 22 21 20 19 18 17 16 15 14 13 12 11 10 Azoospermia Ausncia de espermatozoides no smen Doena de Gaucher Deficincia enzimtica crnica que ocorre frequentemente entre os judeus asquenazes Sndrome de Ehlers-Danlos Doena do tecido conjuntivo Retinite pigmentar Degenerao progressiva da retina Doena de Huntington Doena neurolgica degenerativa, de incio tardio e letal Polipose adenomatosa familiar (FAP) Plipos intestinais que levam ao cncer colorretal X Y 1 2 3 4 5 Hemocromatose Absoro anormalmente alta do ferro consumido na dieta 6 7 8 9 Ataxia espinocerebelar Destruio dos neurnios do encfalo e da medula espinal, resultando em perda do controle muscular Fibrose cstica Muco nos pulmes, interferindo na respirao Sndrome de Werner Envelhecimento prematuro Melanoma Tumores que se originam na pele Neoplasia endcrina mltipla, tipo 2 Tumores nas glndulas endcrinas e em outros tecidos Doena das clulas falciformes Anemia crnica hereditria em que os eritrcitos se tornam falciformes, obstruindo as arterolas e os vasos capilares Fenilcetonria (PKU) Distrbio metablico hereditrio que, se no for tratado, resulta em deficincia mental

Nmero do cromossomo humano

FIGURA 1-17 Diagrama do conjunto cromossmico humano, mostrando a localizao de alguns genes cujas formas mutantes causam doenas hereditrias. As condies diagnosticveis mediante anlise do DNA esto indicadas por um ponto vermelho.

FIGURA 1-18 Parte de um microarranjo de DNA. Os microarranjos contm milhares de campos (os crculos), aos quais se ligam as molculas de DNA. Disposto em um microarranjo, o DNA de um indivduo pode ser testado para detectarem-se cpias mutantes dos genes.

FIGURA 1-19 Fotomicrografia eletrnica colorizada de Haemophilus influenzae, uma bactria que foi o primeiro organismo de vida livre a ter seu genoma sequenciado. Essa bactria causa infeces respiratrias e meningite bacteriana em humanos.

12

CAPTULO 1

INTRODUO GENTICA

Em 2001, o Projeto Genoma Humano, de financiamento pblico, e um projeto genmico privado, patrocinado pela empresa Celera, relataram o primeiro esboo da sequncia do genoma humano, abrangendo cerca de 96% do seu contedo gnico. Em 2003, foi completada e publicada a sequncia do contedo gnico codificador remanescente. Atualmente, os esforos se concentram no sequenciamento das regies no codificadoras do genoma. Os cinco organismos-modelo cujos genomas foram tambm sequenciados pelo Projeto Genoma Humano so: Escherichia coli (bactria), Saccharomyces cerevisiae (levedura), Caenorhabditis elegans (nematdeo; verme cilndrico), Drosophila melanogaster (mosca-das-frutas) e Mus musculus (camundongo). proporo que os projetos genmicos se multiplicaram e cada vez mais sequncias genmicas foram obtidas, surgiram vrias disciplinas novas na rea biolgica. Uma delas, denominada genmica (o estudo dos genomas), sequencia os genomas e estuda a estrutura, a funo e a evoluo dos genes e genomas. Uma segunda disciplina, a protemica, derivada da genmica. A protemica identifica o grupo de protenas presentes em uma clula, sob um dado conjunto de condies, e estuda adicionalmente a modificao ps-traducional dessas protenas, sua localizao no interior das clulas e as interaes protenaprotena que ali ocorrem. Para armazenar, recuperar e analisar a quantidade macia de dados gerados pela genmica e pela protemica, foi criado um subcampo especializado da tecnologia da informao, chamado bioinformtica, cuja finalidade desenvolver hardware e software para processar os dados nucleotdicos e proteicos. Considere que o genoma humano contm mais de 3 bilhes de nucleotdeos, representando cerca de 25.000 genes que codificam dezenas de milhares de protenas, e voc poder avaliar a necessidade de bancos de dados para armazenar tantas informaes. Essas novas disciplinas esto transformando drasticamente a biologia, de uma cincia de base laboratorial para uma cincia que combina os experimentos laboratoriais com a tecnologia da informao. Atualmente, os geneticistas e outros bilogos usam as informaes de bancos de dados que contm sequncias de cidos nucleicos e de protenas, bem como redes de interao gnica, para resolver problemas experimentais em uma questo de minutos, em lugar de meses e anos. Um destaque denominado Explorando a genmica, localizado ao final de todos os captulos deste manual, fornece-lhe a oportunidade de explorar sozinho esses bancos de dados, enquanto completa um exerccio interativo de gentica.

(a) (b)
FIGURA 1-20 A primeira gerao de organismos-modelo, na anlise gentica, incluiu (a) o camundongo e (b) a mosca-das-frutas.

eram os mesmos na maioria dos organismos, e a segunda, as espcies preferenciais tinham diversas caractersticas que as tornavam especialmente adequadas para as pesquisas genticas. Cresciam facilmente, tinham ciclos vitais relativamente curtos, produziam muitas proles, e sua anlise gentica era razoavelmente simples. Ao longo do tempo, os pesquisadores criaram um grande catlogo de linhagens mutantes dessas espcies preferenciais, e as mutaes foram cuidadosamente estudadas, caracterizadas e mapeadas. Graas sua gentica bem caracterizada, essas espcies se tornaram organismos-modelo, definidos como organismos usados para o estudo de processos biolgicos bsicos. Apesar de desenvolvidos originalmente para o estudo de mecanismos genticos, os organismos-modelo atualmente esto sendo utilizados no estudo de eventos celulares em geral, bem como da origem e dos mecanismos de muitas doenas humanas (genticas ou no), e no desenvolvimento de terapias inovadoras para trat-las. Nos ltimos captulos, veremos como as descobertas nos organismos-modelo esto esclarecendo muitos aspectos da biologia, como o envelhecimento, o cncer, o sistema imune e o comportamento.

O atual conjunto de organismos-modelo genticos

Gradualmente, os geneticistas acrescentaram outras espcies sua coleo de organismos-modelo, abrangendo os vrus (como os fagos T e o fago lambda) e os microrganismos (a bactria Escherichia coli e a levedura Saccharomyces cerevisiae) (Figura 1-21). Alguns desses organismos foram escolhidos pelas razes resumidas anteriormente, enquanto outros foram selecionados em virtude de outras caractersticas que facilitavam mais o estudo de certos aspectos genticos. Mais recentemente, trs espcies adicionais foram desenvolvidas como organismos-modelo, cada uma escolhida para o estudo de algum aspecto do desenvolvimento embrionrio. Para estudar o sistema nervoso e seu papel no comportamento, foi escolhido o nematdeo Caenorhabditis elegans [Figura 1-22(a)] como um sistema-modelo. um animal pequeno, fcil de crescer, e seu sistema nervoso contm somente algumas centenas de clulas. A Arabidopsis thaliana [Figura 1-22(b)] uma planta pequena com um ciclo vital curto que pode desenvolver-se em

1.6

Os estudos genticos contam com o uso de organismos-modelo

Aps a redescoberta dos trabalhos de Mendel, em 1900, as pesquisas genticas sobre uma ampla variedade de organismos confirmaram que os princpios da hereditariedade que esse cientista descreveu eram de significncia universal entre as plantas e os animais. Ainda que continuassem a pesquisar a gentica de muitos organismos diferentes, os geneticistas gradualmente passaram a focalizar com ateno especial um pequeno nmero de organismos, incluindo a mosca-das-frutas (Drosophila melanogaster) e o camundongo (Mus musculus) (Figura 1-20). Essa tendncia se desenvolveu por duas razes principais: a primeira a evidncia de que os mecanismos genticos

1.6

OS ESTUDOS GENTICOS CONTAM COM O USO DE ORGANISMOS-MODELO

13

(a)

(b)

(a) (b)
FIGURA 1-21 Os microrganismos que se tornaram organismosmodelo para os estudos genticos incluem (a) a levedura S. cerevisiae e (b) a bactria E. coli.

laboratrio. Foi usada inicialmente para o estudo do desenvolvimento floral, mas se tornou um organismo-modelo para o estudo de outros inmeros aspectos da biologia vegetal. O peixezebra, ou paulistinha, Danio rerio [Figura 1-22(c)], tem diversas vantagens para o estudo do desenvolvimento de vertebrados: tem tamanho pequeno, reproduz-se rapidamente, e seus ovos, embries e larvas so transparentes.

(c)

Organismos-modelo e doenas humanas

O desenvolvimento da tecnologia do DNA recombinante e os resultados do sequenciamento genmico confirmaram que todas as formas de vida tm uma origem comum. Devido a essa origem comum, os genes com funes similares, em diferentes organismos, tendem a ter estrutura e sequncia nucleotdica semelhantes ou idnticas. Portanto, grande parte do que os cientistas aprendem estudando a gentica de outras espcies pode ser aplicada aos humanos e serve como base para a compreenso e o tratamento das doenas humanas. Alm disso, a capacidade para transferir genes entre as espcies possibilitou aos cientistas o desenvolvimento de modelos de doenas humanas em organismos que abrangem das bactrias aos fungos, plantas e animais (Tabela 1.2). A ideia de estudar uma doena humana como o cncer colorretal mediante utilizao de E. coli pode surpreend-lo como algo estranho, mas os passos bsicos de reparao do DNA (um processo que est defeituoso em algumas formas de cncer colorretal) so os mesmos em ambos os organismos, e o gene envolvido (mutL em E. coli e MLH1 em humanos) encontrado tambm nos dois organismos. O mais notvel que E. coli tem a vantagem de se multiplicar mais facilmente (as clulas dividemse a cada 20 minutos), de modo que os pesquisadores podem criar e estudar novas mutaes, sem dificuldade, no gene bacteriano mutL, a fim de imaginar como esse gene funciona. Esse conhecimento poder levar finalmente ao desenvolvimento de

FIGURA 1-22 Os organismos-modelo mais recentes na gentica incluem (a) o nematdeo C. elegans, (b) a planta A. thaliana e (c) o peixe-zebra, D. rerio.

frmacos e outras terapias para tratar o cncer colorretal em humanos. A mosca-das-frutas, D. melanogaster, tambm est sendo usada para o estudo especfico de doenas humanas. Foram identificados genes mutantes em D. melanogaster que produzem fentipos com anormalidades do sistema nervoso, incluindo anormalidades da estrutura enceflica, degenerao do sistema nervoso com incio no adulto e defeitos visuais como a degenerao da retina. As informaes provenientes de projetos de

14

CAPTULO 1

INTRODUO GENTICA

TABELA 1.2

Organismos-modelo usados no estudo de doenas humanas Organismo E. coli S. cerevisiae D. melanogaster C. elegans D. rerio M. musculus Doenas humanas Cncer colorretal e outros cnceres Cncer, sndrome de Werner Distrbios do sistema nervoso, cncer Diabete Doena cardiovascular Doena de Lesch-Nyhan, fibrose cstica, sndrome do X- frgil e muitas outras doenas

e a biotecnologia esto mudando rapidamente a vida cotidiana. No entanto, como ser discutido na prxima seo, ainda temos de alcanar um consenso sobre como e quando essa tecnologia segura e eticamente aceitvel.

1.7

Vivemos na idade da gentica

Mendel descreveu seu projeto de uma dcada sobre a hereditariedade nas ervilheiras em um artigo de 1865, apresentado-o em um encontro da Sociedade de Histria Natural de Brunn, na Moravia. Exatamente 100 anos mais tarde, o Prmio Nobel de 1965 foi concedido a Franois Jacob, Andr Lwoff e Jacques Monod por seu trabalho sobre a base molecular da regulao gnica em bactrias. Esse intervalo abrange os anos que prepararam o caminho para a aceitao do trabalho de Mendel, a descoberta de que os genes se localizam nos cromossomos, os experimentos que provaram que o DNA codifica as informaes genticas e a elucidao da base molecular da replicao do DNA. O rpido desenvolvimento da gentica, do jardim do mosteiro de Mendel ao Projeto Genoma Humano e eventos posteriores, est resumido em uma cronologia constante na Figura 1-23.

sequenciamento genmico indicam que quase todos esses genes tm correspondentes humanos. Por exemplo, os genes envolvidos em uma doena humana complexa da retina, chamada retinite pigmentar, so idnticos aos genes de Drosophila causadores de degenerao retiniana. O estudo dessas mutaes nas moscasdas-frutas est ajudando a anlise dessa doena complexa e a identificao das funes dos genes envolvidos. Outra abordagem do uso de Drosophila para estudar as doenas do sistema nervoso humano a transferncia de genes de doenas humanas para as moscas, por meio da tecnologia do DNA recombinante. As moscas transgnicas so, ento, usadas para o estudo dos prprios genes humanos mutantes, dos genes que afetam a sua expresso e dos efeitos das drogas teraputicas na atividade daqueles genes, consistindo todos em estudos difceis ou impossveis de serem realizados em humanos. A abordagem da transferncia gnica est sendo usada no estudo de praticamente uma dzia de distrbios neurodegenerativos humanos, incluindo a doena de Huntington, a doena de Machado-Joseph, a distrofia miotnica e a doena de Alzheimer. medida que estiver lendo este livro, voc encontrar esses organismos-modelo repetidamente. Sempre que os encontrar, lembre-se de que eles no somente tm uma valiosa histria em pesquisa de gentica bsica, mas tambm esto na vanguarda dos estudos de distrbios genticos e doenas infecciosas em humanos. O uso de organismos-modelo para a compreenso da sade e doena humanas um dos vrios meios pelos quais a gentica

O Prmio Nobel e a gentica

Embora outras reas cientficas tambm apresentem expanso recente, nenhuma tem igualado a exploso de informaes e a instigao gerada pelas descobertas em gentica. Em parte alguma esse impacto mais aparente do que na lista de Prmios Nobel relacionados gentica, iniciando com os que foram concedidos no incio e em meados do sculo XX, e continuando at o perodo atual (veja o verso da capa). Os Prmios Nobel das categorias de Medicina ou Fisiologia e Qumica foram compativelmente concedidos para trabalhos em gentica e reas associadas. O primeiro Prmio Nobel atribudo para tais trabalhos foi dado a Thomas Morgan, em 1933, por sua pesquisa sobre a teoria cromossmica da herana. A essa distino, seguiram-se muitas outras, inclusive prmios pela descoberta da recombinao gentica, relao entre os genes e as protenas, estrutura do DNA e o cdigo gentico. Neste sculo, os geneticistas continuam a ser recompensados por seu impacto na biologia no presente milnio. O Prmio de 2002 para Medicina ou Fisiologia foi outorgado a

Comprovou-se que o DNA contm a informao gentica. Modelo do DNA proposto por Watson-Crick Trabalho de Mendel publicado proposta a teoria cromossmica da herana. A gentica da transmisso evoluiu Desenvolveu-se a tecnologia do DNA recombinante. Inicia-se a clonagem do DNA Comea a aplicao da genmica

1860s 1870s 1880s 1890s 1900s 1910s 1920s 1930s 1940s 1950s 1960s 1970s 1980s 1990s 2000s . . . . . . . . . ........ O trabalho de Mendel redescoberto e correlacionado com o comportamento dos cromossomos na meiose Era da Gentica Molecular. A expresso e a regulao gnica so compreendidas Inicia-se a genmica. O Projeto Genoma Humano iniciado

FIGURA 1-23 Cronologia que mostra o desenvolvimento da gentica, do trabalho de Gregor Mendel com as ervilheiras atual era da genmica e suas inmeras aplicaes em pesquisa, medicina e sociedade. O conhecimento da histria das descobertas em gentica deve propiciar-lhe um proveitoso embasamento medida que voc prosseguir a leitura deste livro texto.

GENTICA, TECNOLOGIA E SOCIEDADE

15

Sydney Brenner, H. Robert Horvitz e John E. Sulston pelo seu trabalho sobre a regulao gentica do desenvolvimento orgnico e da morte celular programada. Em 2006, as distines agraciaram Andrew Fire e Craig Mello pela sua descoberta de que as molculas de RNA desempenham um papel importante na regulao da expresso gnica e Roger Kornberg pelo seu trabalho sobre a base molecular da transcrio eucaritica. O Prmio Nobel de 2007 foi concedido a M. R. Capecchi, O. Smithies e M. J. Evans pelo desenvolvimento de tecnologia de marcao gnica, essencial para a criao dos camundongos nocaute, que servem como modelos animais de doenas humanas.

Gentica e sociedade
Assim como jamais houve uma poca to estimulante para estudar gentica, o impacto dessa rea na sociedade nunca foi mais

profundo do que agora. A gentica e suas aplicaes em biotecnologia esto se desenvolvendo com muito maior rapidez do que as convenes sociais, as polticas pblicas e as leis necessrias para regular seu uso (veja o ensaio na seo Gentica, tecnologia e sociedade deste captulo). Como membros da sociedade, estamos lutando com uma grande quantidade de questes delicadas relacionadas gentica, as quais abrangem as preocupaes com testagem pr-natal, cobertura de seguros, discriminao gentica, direito de propriedade dos genes, acesso terapia gnica e segurana dessa forma de terapia e privacidade gentica. Na poca em que voc terminar o seu curso, ter visto evidncias mais do que suficientes para convenc-lo de que o momento atual a Idade da Gentica e compreender a necessidade de ponderar e tornar-se participante no dilogo relativo cincia da gentica e ao seu uso.

GENTICA, TECNOLOGIA E SOCIEDADE

Gentica e sociedade: a aplicao e o impacto da cincia e da tecnologia

m dos aspectos especiais deste texto a srie de ensaios sobre Gentica, tecnologia e sociedade que voc encontrar na concluso da maioria dos captulos. Esses ensaios exploram tpicos relacionados com a gentica que exercem um impacto na vida de cada um de ns e, desse modo, na sociedade em geral. Hoje em dia, a gentica envolve todos os aspectos da vida moderna, acarretando rpidas mudanas em medicina, agricultura, direito, indstria farmacutica e biotecnologia. Os mdicos agora usam centenas de testes genticos para diagnosticar e predizer o curso de uma doena, bem como para detectar defeitos genticos intra-uterinamente. Os mtodos com base no DNA permitem aos cientistas traar a rota de evoluo seguida por muitas espcies, inclusive a nossa. Os fazendeiros e agricultores desenvolvem o cultivo de plantas resistentes s doenas e seca e criam animais domsticos mais produtivos, originados por meio de tcnicas de transferncia gnica. Os mtodos de obteno do perfil do DNA aplicam-se aos testes de paternidade e s investigaes criminais. As biotecnologias resultantes das pesquisas genmicas exercem efeitos dramticos sobre a indstria em geral. Enquanto isso, a prpria indstria biotecnolgica gera mais de 700.000 empregos e uma receita de US$ 50 bilhes anuais, duplicando seu tamanho a cada dcada. Juntamente com essas tecnologias genticas que rapidamente se modificam, sobrevm uma srie de dilemas ticos. Quem

possui e controla as informaes genticas? As plantas e os animais domsticos submetidos a melhoramento gentico so seguros para os humanos e seu ambiente? Temos o direito de patentear organismos e tirar proveito de sua comercializao? Como podemos assegurar-nos de que as tecnologias genmicas sero acessveis a todos, e no apenas aos indivduos sadios? Quais so as provveis consequncias sociais das novas tecnologias reprodutivas? uma poca em que todos precisam conhecer a gentica, a fim de tomar decises pessoais e coletivas complexas. Os ensaios da seo Gentica, tecnologia e sociedade exploram a interface da sociedade e da tecnologia gentica. Esperamos que esses textos representem vias de acesso para sua explorao da infinidade de aplicaes da gentica moderna e suas implicaes sociais. A seguir, listamos os tpicos que servem de base para muitos desses ensaios, acompanhados do nmero do captulo em que cada um encontrado. Ainda que sua disciplina de gentica no abranja certos captulos, esperamos que voc considere interessantes os ensaios desses captulos. Boa leitura! Cncer de mama: a faca de dois gumes da testagem gentica (2) Doena de Tay-Sachs: a base molecular de um distrbio recessivo em humanos (3) Melhorando o destino gentico dos ces de raa pura (4) Genes bacterianos e doenas: da expresso gnica s vacinas comestveis (6)

Uma questo de gnero: seleo sexual em humanos (7) O elo entre os stios frgeis e o cncer (8) O DNA mitocondrial e o mistrio dos Romanovs (9) As tores e as voltas da revoluo helicoidal (10) Telmeros: definindo o fim da linha? (11) Alm de Dolly: a clonagem de humanos (13) Silenciamento de genes com base em cidos nucleicos: atacando o mensageiro (14) A doena da vaca louca: a histria do pron (15) sombra de Chernobyl (16) Quorum Sensing: como as bactrias se comunicam entre elas (17) Regulao gnica e distrbios genticos humanos (18) As guerras das clulas-tronco (19) O cncer na mira: fazendo pontaria com terapias objetivas (20) Projetos genmicos personalizados e a busca do genoma de $ 1.000,00 (21) Afinal de contas, de quem o DNA? (23) Terapia gnica dois passos frente e dois passos atrs? (24) A revoluo verde revisitada: pesquisas genticas com o arroz (25) Gentica da orientao sexual (26) Rastreando nossos vestgios genticos africanos (27) O que podemos aprender do fracasso do movimento eugenista? (28) Os conjuntos gnicos e as espcies ameaadas: a difcil situao da pantera da Flrida (29)

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CAPTULO 1

INTRODUO GENTICA

EXPLORANDO A GENMICA

Recursos da Internet para o conhecimento dos genomas de organismos-modelo

genmica uma das reas da gentica de mais rpida mudana. As novas informaes, nesse campo, esto acumulando-se em uma velocidade espantosa. O acompanhamento do desenvolvimento atual na genmica, protemica, bioinformtica e outros exemplos da era mica da gentica moderna uma tarefa verdadeiramente desafiadora! Em consequncia, os geneticistas, os bilogos moleculares e outros cientistas valem-se de bancos de dados on-line para compartilhar e comparar novas informaes. O objetivo da seo Explorando a genmica, que aparece no fim de cada captulo, apresentar ao leitor um conjunto de bancos de dados da Internet, com os quais os cientistas de todo o mundo contam para compartilhar, analisar, organizar, comparar e armazenar os dados dos estudos em genmica, protemica e reas afins. Exploraremos esse conjunto incrvel de novas informaes abrangendo alguns dos melhores recursos pblicos disponveis mundialmente e iremos mostrar-lhe como usar as estratgias da bioinformtica para analisar os dados de estrutura e sequncia ali encontrados. Cada srie de exerccios da seo Explorando a genmica fornecer uma introduo bsica sobre um ou mais bancos de dados ou programas especialmente teis ou relevantes, e depois ir orient-lo ao longo dos exerccios que usam esses bancos de dados para ampliar ou reforar os conceitos importantes analisados no captulo. Esses exerccios so elaborados para ajud-lo a navegar nos bancos de dados, mas suas exploraes no precisam limitar-se a tais experincias. Parte do prazer da aprendizagem em genmica consiste em descobrir, por si prprio, esses importantes bancos de dados, de maneira que voc possa obter as informaes mais recentes sobre qualquer tpico que lhe interesse. Aproveite suas pesquisas! Neste captulo, discutimos a importncia dos organismos-modelo para as abordagens experimentais clssicas e modernas da gentica. Em nossa primeira srie de exerccios de Explorando a genmica, apresentamos vrios sites da Internet que

so excelentes fontes de informaes atualizadas sobre uma ampla variao de projetos genmicos completos ou em andamento que envolvem os organismos-modelo.

gentica. Visite o site relativo ao seu organismo-modelo preferido para aprender mais sobre o seu genoma!

Exerccio I Genome News Network (Rede de Informaes Genmicas)

A partir de 1995, quando os cientistas descobriram o genoma de Haemophilus influenzae, fazendo dessa bactria o primeiro organismo a ter seu genoma sequenciado, foram completadas as sequncias de mais de 500 organismos. O Genome News Network um site* que d acesso s informaes bsicas sobre sequncias genmicas recm-completadas. 1. Visite o Genome News Network em www.genomenewsnetwork.org. 2. Clique no link Quick Guide to Sequenced Genomes (Guia Rpido para Genomas Sequenciados). Role a pgina; clique nos links apropriados para encontrar as informaes sobre os genomas de Anopheles gambiae, Lactococcus lactis e Pan troglodytes e responda s seguintes questes para cada organismo: a. Quem sequenciou o genoma desse organismo, e em que ano esse sequenciamento se completou? b. Qual o tamanho do genoma de cada organismo em pares de bases? c. Quantos genes existem em cada genoma aproximadamente? d. Descreva brevemente por que os geneticistas esto interessados em estudar o genoma desse organismo.

Exerccio II Explorando os genomas dos organismos-modelo

Dispe-se de uma imensa quantidade de informaes sobre os genomas de muitos organismos-modelo que desempenharam papis inestimveis no progresso de nosso conhecimento de gentica. A seguir, constam links para diversos sites* que so recursos excelentes para o seu estudo de
* A manuteno e a disponibilizao dos sites (em ingls) so de responsabilidade de seus desenvolvedores.

Ensembl Genome Browser www.ensembl.org/index.html. Site importante para informaes genmicas sobre muitos organismosmodelo. Flybase: flybase.bio.indiana.edu. Grande banco de dados sobre os genes e genomas de Drosophila. TM Gold Genomes OnLine Database: www.genomesonline.org/gold. cgi. Acesso amplo aos projetos genmicos mundiais completos e em andamento. Model Organisms for Biomedical Research: www.nih.gov/science/ models/. Site dos Institutos Nacionais de Sade com uma riqueza de recursos sobre organismos-modelo. Mouse Genome Informatics: www.informatics.jax.org/. Gentica e genmica de camundongos de laboratrio. Rat Genome Project: www.hgsc.bcm.tmc.edu/projects/ rat/. Site do Baylor College of Medicina sobre o genoma de rato. Saccharomyces Genome Database: www.yeastgenome.org/. Banco de dados para a gentica de Saccharomyces cerevisiae, conhecido como o fermento do padeiro. Science Functional Genomics: www.sciencemag.org/feature/plus/ sfg/. Hospedada pelo peridico Science, uma boa fonte de informaes sobre os genomas de organismos-modelo e outras reas atuais da genmica. The Arabidopsis Information Resource: www.arabidopsis.org/. Banco de dados genticos para a plantamodelo Arabidopsis thaliana. WormBase: www.wormbase.org. Banco de dados genmicos para o nematdeo cilndrico Caenorhabditis elegans.

TESTE SEU CONHECIMENTO

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Resumo
1. O trabalho de Mendel sobre as ervilheiras estabeleceu os princpios da transmisso gnica dos genitores para a prole, que so os fundamentos da cincia da gentica. 2. Os genes e os cromossomos so as unidades fundamentais na teoria cromossmica da herana. Essa teoria explica a transmisso das informaes genticas que controlam as caractersticas fenotpicas. 3. A gentica molecular com base no dogma central de que o DNA um molde para formar o RNA, o qual codifica a estrutura linear das protenas explica os fenmenos descritos pela gentica mendeliana, tambm referidos como gentica da transmisso. 4. A tecnologia do DNA recombinante, uma metodologia de longo alcance usada em gentica molecular, possibilita que os genes de um organismo sejam encadeados em vetores e clonados. 5. Genmica, protemica e bioinformtica so novas reas derivadas da tecnologia do DNA recombinante. Essas novas reas combinam a gentica com a tecnologia da informao, possibilitando que os cientistas explorem as sequncias dos genomas, a estrutura e a funo dos genes, o conjunto de protenas intracelulares e a evoluo dos genomas. O Projeto Genoma Humano um exemplo de genmica. 6. A biotecnologia revolucionou a agricultura, a indstria farmacutica e a medicina. Tornou possvel a produo em massa de produtos gnicos clinicamente importantes. A testagem gentica permite a deteco dos indivduos com distrbios genticos e dos que se encontram em risco de ter prole afetada, enquanto a terapia gnica oferece a esperana de tratamento de distrbios genticos graves. 7. Na gentica, o estudo de organismos-modelo acelerou o conhecimento dos mecanismos genticos e, conjugado tecnologia do DNA recombinante, produziu modelos de doenas genticas humanas. 8. Os efeitos da tecnologia gentica na sociedade so profundos, e o desenvolvimento de poltica e legislao est retardando as inovaes resultantes.

Teste seu conhecimento

1. Descreva as concluses de Mendel sobre como as caractersticas so transmitidas de gerao a gerao. 2. Qual a teoria cromossmica da herana, e como se relaciona com as descobertas de Mendel? 3. Defina gentipo e fentipo e descreva como esto relacionados. 4. Que so alelos? possvel que existam mais de dois alelos de um gene? 5. Dado o estado do conhecimento na poca do experimento de Avery, MacLeod e McCarty, por que foi difcil, para alguns cientistas, a aceitao de que o DNA o portador da informao gentica? 6. Diferencie cromossomos e genes. 7. Como codificada a informao gentica em uma molcula de DNA? 8. Descreva o dogma central da gentica molecular e como ele serve como a base da gentica moderna. 9. Quantas protenas diferentes, cada uma com uma sequncia de aminocidos nica, podem ser construdas com a extenso de cinco aminocidos? 10. Esquematize os papis desempenhados pelas enzimas de restrio e pelos vetores na clonagem do DNA. 11. Quais so alguns dos impactos da biotecnologia sobre as plantas cultivadas nos Estados Unidos? 12. Resuma os argumentos favorveis e contrrios ao patenteamento de organismos geneticamente modificados. 13. Possumos de 25 mil a 30 mil genes em nosso genoma. At agora, foram fornecidas patentes para mais de 6 mil desses genes. Voc pensa que as empresas ou os indivduos estariam qualificados para patentear os genes humanos? Por que, ou por que no? 14. Como o uso de organismos-modelo acelerou nosso conhecimento dos genes que controlam as doenas humanas? 15. Se voc soubesse que uma doena hereditria de incio tardio ocorre em sua famlia (em outras palavras, uma doena que s aparece muito mais tarde na vida) e pudesse ser testado quanto a essa doena aos 20 anos de idade, desejaria saber se voc um portador? provvel que sua resposta se modifique quando voc chegar aos 40 anos? 16. A Idade da Gentica foi ocasionada por avanos marcantes nas aplicaes da biotecnologia na manipulao dos genomas de plantas e animais. Dado que a populao mundial alcanou 6 bilhes, e esperado que esse nmero duplique nos prximos 50 anos, alguns cientistas propuseram que somente a introduo mundial de alimentos geneticamente modificados (GM) possibilitar o atendimento s futuras demandas nutricionais. A resistncia a pestes, a herbicidas, ao frio e seca e a tolerncia salinidade, juntamente com o aumento do valor nutritivo, so vistos como atributos positivos dos alimentos GM. No entanto, outros advertem que o dano involuntrio a outros organismos, a eficincia reduzida aos pesticidas, a transferncia gnica a espcies no objetivadas, a alergizao e, por enquanto, os efeitos desconhecidos na sade humana so possveis preocupaes em relao aos alimentos GM. Se voc estivesse em posio de controlar a introduo de um produto alimentcio bsico GM (o arroz, por exemplo), quais seriam os critrios que voc estabeleceria antes de permitir tal introduo? 17. O evento da BIO (Biotechnology Industry Organization; Organizao das Indstrias de Biotecnologia) realizado na Filadlfia (junho de 2005) reuniu os lderes mundiais das indstrias biotecnolgica e farmacutica. Simultaneamente, a BioDemocracy 2005, um grupo composto de pessoas que procuram ressaltar os riscos das aplicaes disseminadas da biotecnologia, se reuniu tambm na Filadlfia. Os benefcios da biotecnologia esto esboados em seu texto. Faa uma predio de alguns dos riscos que, sem dvida, foram discutidos no encontro da BioDemocracy.