Replicao do DNA

Figura 1: Clssico esquema da replicao, demonstrando o modelo de replicao semi-conservativo. Obs.: foi omitido as enzimas que participam do processo

A replicao o processo de duplicao de uma molcula de DNA de dupla cadeia (hlice). Os mecanismos de replicao dos procariotos eeucariotos no so idnticos. Como cada cadeia de DNA contm a mesma informao gentica, qualquer uma delas podem servir como molde. Por isso a replicao do DNA dita semi-conservativa. A replicao deve acontecer antes da diviso celular. Em procariotos a replicao ocorre entre as divises celulares, enquanto que nos eucariotos ocorre na fase S da interfase (para maiores detalhes, veja ciclo celular). A replicao tambm pode ser reproduzida em laboratrio atravs de um ensaio conhecido como PCR.

Introduo

O DNA um polmero de nucleotdeos unidos entre si por ligaes fosfodister. As fitas complementares esto ligadas por ligaes de hidrognio. Nas clulas, cada cadeia est orientada em sentido contrrio ao da outra (anti-paralelismo). Os nucleotdeos so compostos por acar (pentose), radicais fosfatos e bases nitrogenadas. As bases nitrogenadas so:

Adenina Guanina Citosina Timina

Os nucleotdeos de uma cadeia da molcula de DNA podem interagir com os da cadeia complementar atravs de ligaes de hidrognio entre suas bases nitrogenadas, sendo que a Adenina se liga por meio de duas ligaes de hidrognio Timina, e a Citosina se liga atravs de trs ligaes com a Guanina. Para mais detalhes, veja a figura 3 ou clique aqui.

O DNA no se replica sozinho

Para que o processo de replicao se inicie, necessria a atuao de uma enzima, a Helicase. A enzima liga-se cadeia de DNA e desliza sobre esta, quebrando as ligaes entre as duas cadeias de nucletidos -ligaes de hidrognio - ficando ento as duas cadeias de DNA separadas. Em seguida, os nucleotdeos livres existentes no ncleo ligam-se, por complementaridade de bases, cadeia de DNA. De uma cadeia original de DNA formam-se duas. A replicao do DNA o processo de auto-duplicao do material gentico, mantendo o padro de herana ao longo das geraes.

Cada cadeia do DNA duplicada formando uma fita hbrida, isto , a cadeia velha pareia com a cadeia nova formando um novo DNA; de uma molcula de DNA formam-se duas outras iguais a ela. Cada DNA recm formado possui uma das cadeias da molcula-me, por isso o nome semiconservativa. Ao mesmo tempo em que a helicase vai abrindo a molcula de DNA, outra enzima chamada polimerase liga um grupo de nucleotdeos que se pareiam com os nucleotdeos da molcula-me. Alm da capacidade de duplicao, o DNA tambm responsvel pela sntese de outro cido nucleico muito importante para a clula: o cido ribonucleico ou RNA. Da mesma forma que o DNA, o RNA tambm uma molcula grande, formada por vrias partes menores chamadas nucleotdeos. Por isso diz-se que tanto DNA como RNA so polinucleotdeos. A duplicao do DNA explica a grande semelhana existente entra as vrias geraes de uma determinada espcie,uma vez que o equipamento gentico-representado basicamente pelo conjunto de molculas de DNA que um organismo possui-mantm-se mais ou menos inalterado ao se transferir de pais para filhos. Lembrando que a duplicao acontece sempre antes da diviso da clula, semiconservativa,e deve ser feita de maneira muito eficiente.

Etapas da polimerizao do DNA

A replicao inicia-se numa zona da cadeia denominada tripleto de iniciao. Neste local as helicases comeam a abrir a cadeia para ambos os lados da origem quebrando as ligaes de hidrognio existentes entre as bases complementares e dando origem a uma bolha de replicao que constituda por duas forquilhas de replicao. Em seguida liga-se s cadeias de DNA a enzima RNA primase que sintetiza um Primrio (tinta), que consiste numa sequncia de bases de RNA que iniciam a sntese, visto que a DNA polimerase III no tem a capacidade de o fazer pela ausncia de grupos hidroxila -OH expostos. Aps a sntese do Primrio (tinta), a DNA polimerase III vai continuar o processo que ocorre no sentido da extremidade 5' para a extremidade 3' da nova cadeia. Como a DNA polimerase vai atuar para ambos os lados da origem de replicao, por cada cadeia simples de DNA existente, uma parte da nova cadeia ser sintetizada na direo da replicao. Esta cadeia sintetizada de modo contnuo e denomina-se cadeia contnua. Existe uma outra parte da cadeia em que a direo da replicao contrria direo da sntese, esta cadeia sintetizada descontinuamente, isto , a RNA primase vai sintetizar vrios Primrio (tinta)s ao longo da cadeia, inicialmente prximo da origem de replicao e posteriormente a maior distncia. Os fragmentos formados so denominados fragmentos de Okazaki. Entre estes fragmentos existem os Primrio (tinta)s que sero removidos e substitudos por DNA, pela ao de uma outra DNA polimerase, a DNA polimerase I. Como a DNA polimerase no consegue estabelecer a ligao entre esses nucletidos e os que se encontram nas extremidades dos fragmentos de Okazaki, formam-se lacunas entre o grupo fosfato de um e o carbono 3' do outro. Esses nucletidos so posteriormente ligados pela DNA ligase. A esta cadeia chama-se cadeia descontnua. As partes finais da cadeia de DNA denominadastelmeros so sintetizadas pela enzima telomerase. A telomerase uma DNA

polimerase com atividade de transcriptase reversa. Apresenta um molde interno de RNA e a partir da capaz de sintetizar o DNA das extremidades cromossmicas, evitando a perda progressiva e encurtamento dos telmeros. Durante todo o processo de replicao atuam outras enzimas entre elas as SSB e as topoisomerases que tm como funo evitar o enrolamento da cadeia durante a sntese.

Transcrio
A transcrio o processo de formao de uma molcula de RNA a partir de uma molcula molde de DNA. Neste processo, as fitas do DNA se separam e uma serve de molde para o RNA, enquanto a outra fica inativa. Ao fim da transcrio, as fitas que foram separadas voltam a se unir. A transcrio um processo altamente seletivo, pois apenas pequenas pores da fita de DNA molde copiada. Isso muito importante, pois o primeiro passo da regulao de um gene. O processo iniciado quando a polimerase do DNA se liga a uma das extremidades do DNA. Essa extremidade muito especfica, possuindo uma seqncia especial de bases, e chamada de promotor. Neste local, existe um stio de iniciao, com a primeira base a ter transcrita. A polimerase do RNA segue pela extenso da cadeia, transcrevendo o DNA em RNA at encontrar a seqncia de terminalizao, que contm bases especficas que determinam o fim da transcrio.

Etapas da transcrio
1 Reconhecimento da fita molde de DNA O DNA e as polimerases do RNA (enzimas catalizadoras da reao) esto livres na clula e podem se encontrar ao acaso, porm a transcrio s tem incio quando a enzima encontra e liga-se fortemente ao stio promotor. Quando isso acontece, a dupla-hlice desenrolada e as fitas so separadas. 2 Incio da transcrio A polimerase ligada regio promotora inicia o processo de transcrio, adicionando os primeiro nove nucleotdeos da seqncia de RNA. Essa fase chamada de fase de iniciao. 3 Elongao

Aps a produo de aproximadamente nove nucleotdeos, a polimerase do RNA passa a se deslocar pela molcula de DNA, desenrolando sua hlice e produzindo uma molcula de RNA, cada vez mais alongada. O DNA j transcrito volta a ser enrolado, quase que imediatamente, recompondo a sua dupla-hlice. Esse processo chamado de fase de elongao. A fita de RNA produzida simples e livre. Cerca de 40 nucleotdeos podem ser produzidos por segundo, a uma temperatura de 37C em bactrias. 4 Trmino Quando a polimerase do RNA encontra a seqncia de terminalizao, o RNA para de ser transcrito. A partir desse momento, nenhuma outra base nitrogenada incorporada ao RNA. Neste momento, a bolha de transcrio se desprende, liberando uma molcula de RNA e imediatamente a molcula de DNA se enrola completamente. A seqncia de DNA que contm os genes sinalizadores do trmino chamada de regio terminalizadora.

Traduo Gnica
Por Fabiana Santos Gonalves
As protenas so substncias essenciais da estrutura das clulas vivas, alm de atuar como enzimas, participando de todos os processos bioqumicos dentro e fora das clulas. O processo de traduo gnica consiste em unir aminocidos de acordo com o a sequncia de cdons do RNA mensageiro. Cdon uma trinca de bases nitrogenadas do mRNA, que tem sua trinca complementar (anticdon) no RNA transportador correspondente. Como a sequncia do mRNA determinada pelo gene (sequncia de bases nitrogenadas do DNA), ento a sntese de protena representa a traduo da informao gentica, por isso chamada de traduo gnica. Participam da traduo gnica um grande grupo de macromolculas: mais de 50 polipeptdeos e trs a cinco molculas de RNA em cada ribossomo, pelo menos 20 enzimas ativadoras de aminocidos, 40 a 60 molculas diferentes de RNA transportador e vrias protenas solveis envolvidas em iniciao, alongamento e trmino da traduo. A traduo ocorre nos ribossomos, que esto situados no citoplasma. O mRNA traduzido em protena pela ao de uma variedade de molculas de tRNA, cada uma especfica para cada aminocido. A sequncia de nucleotdeos de uma molcula de mRNA traduzida na sequncia apropriada de aminocidos de acordo com as determinaes do cdigo gentico. Existem 64 trincas possveis de nucleotdeos, sendo que apenas 61 codificam a produo de

aminocidos (2 sinalizam o incio da traduo), enquanto 3 trincas correspondem a sequncias de trmino da traduo. A traduo tem incio com a associao de um ribossomo, um mRNA e um tRNA carregando o amincido metionina, que se ligam ao stio P do ribossomo. O anticdon deste tRNA UAC e seu cdon no mRNA AUG. Essa trinca consiste no cdon de inicializao. Um outro tRNA liga-se ao ribossomo no stio A. Assim que os dois primeiros tRNAs se encaixam nos stios P e A, o ribossomo catalisa a ligao dos aminocidos de seus tRNAs, deslocando-se pela molcula de mRNA, espao correspondente a uma trinca de bases. Conforme o ribossomo se desloca, os stios so ocupados por novos tRNAs com seus aminocidos correspondentes ao mRNA, e as ligaes entre os aminocidos so sintetizadas, at encontrar as sequncias de sinalizao de trmino da traduo. A traduo termina quando um cdon finalizador encontrado na mesma fita de mRNA que est sendo traduzida. Os cdons so UGA, UAA ou UAG. Como estes cdons no so lidos, eles no tm efeito na traduo. Por fim, o polipeptdeo liberado do ribossomo, que se torna disponvel para comear a sntese de outra protena.