NORMA TCNICA COLOMBIANA

NTC 235-2
2002-04-30

GRASAS Y ACEITES ANIMALES Y VEGETALES. DETERMINACIN DE LA MATERIA INSAPONIFICABLE MTODO DE EXTRACCIN CON HEXANO

E:

ANIMAL AND VEGETABLE FATS AND OIL. DETERMINATION OF INSAPONIFIABLE MATTER. METHOD USING HEXANO EXTRACTION

CORRESPONDENCIA:

esta norma es una adopcin equivalente (EQV) de la ISO 18609:2000 determinacin de la materia insaponificable por extraccin con hexano; grasas; alimentacin; grasa vegetal; grasa animal; aceite vegetal; aceite animal; grasas y aceites.

DESCRIPTORES:

I.C.S.: 67.200.10
Editada por el Instituto Colombiano de Normas Tcnicas y Certificacin (ICONTEC) Apartado 14237 Bogot, D.C. Tel. 6078888 Fax 2221435

Prohibida su reproduccin

Editada 2002-05-14

PRLOGO El Instituto Colombiano de Normas Tcnicas y Certificacin, ICONTEC, es el organismo nacional de normalizacin, segn el Decreto 2269 de 1993. ICONTEC es una entidad de carcter privado, sin nimo de lucro, cuya Misin es fundamental para brindar soporte y desarrollo al productor y proteccin al consumidor. Colabora con el sector gubernamental y apoya al sector privado del pas, para lograr ventajas competitivas en los mercados interno y externo. La representacin de todos los sectores involucrados en el proceso de Normalizacin Tcnica est garantizada por los Comits Tcnicos y el perodo de Consulta Pblica, este ltimo caracterizado por la participacin del pblico en general. La NTC 235-2 fue ratificada por el Consejo Directivo del 2002-04-30. Esta norma est sujeta a ser actualizada permanentemente con el objeto de que responda en todo momento a las necesidades y exigencias actuales. A continuacin se relacionan las empresas que colaboraron en el estudio de esta norma a travs de su participacin en el Comit Tcnico 311501 Aceites y grasas vegetales y animales comestibles. ACEGRASAS S.A. CARULLA VIVERO S.A. CENIPALMA COMESTIBLES RICOS S.A. COMPAA NACIONAL DE LEVADURAS FBRICA DE GRASAS Y PRODUCTOS QUMICOS S.A. SOCIEDAD INDUSTRIAL DE GRASAS Y ACEITES UNILEVER ANDINA S.A.

Adems de las anteriores, en Consulta Pblica el Proyecto se puso a consideracin de las siguientes empresas: ASOCIACIN NACIONAL DE INDUSTRIALES ANDI COLOMBINA S.A. COMPAA NACIONAL DE CHOCOLATES S.A. COMPAA NACIONAL DE LEVADURAS S.A. CORPORACIN COLOMBIA INTERNACIONAL DISA S.A. FBRICA DE ACEITES Y MARGARINAS DEL MAGDALENA FABRICAS UNIDAS DE ACEITES Y GRASAS VEGETALES FEDERACIN NACIONAL DE CULTIVADORES DE PALMA FIRMENICH S.A. GRASAS S.A. INDUSTRIAS ALIMENTICIAS NOEL - ZEN S.A. INDUSTRIAS DEL MAZ S.A. INSTITUTO NACIONAL DE VIGILANCIA DE MEDICAMENTOS Y ALIMENTOS INVIMA IVONNE BERNIER LABORATORIO LTDA. IBLAB LLOREDA GRASAS S.A. MERCADEO DE ALIMENTOS DE COLOMBIA S.A. MINISTERIO DE AGRICULTURA MINISTERIO DE DESARROLLO ECONMICO MINISTERIO DE SALUD NESTL DE COLOMBIA NULAB LTDA PRODUCTOS ALIMENTICIOS CRONCH S.A. SANTANDEREANA DE ACEITES SGS COLOMBIA S.A.

SUPERINTENDENCIA DE INDUSTRIA Y COMERCIO UNIVERSIDAD DEL VALLE

UNIVERSIDAD INCCA DE COLOMBIA UNIVERSIDAD JORGE TADEO LOZANO UNIVERSIDAD NACIONAL DE COLOMBIA

ICONTEC cuenta con un Centro de Informacin que pone a disposicin de los interesados normas internacionales, regionales y nacionales.

DIRECCIN DE NORMALIZACIN

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NTC 235-2

GRASAS Y ACEITES ANIMALES Y VEGETALES. DETERMINACIN DE LA MATERIA INSAPONIFICABLE MTODO UTILIZANDO HEXANO PARA LA EXTRACCIN

1.

OBJETO

La presente norma especifica un mtodo que usa una extraccin con hexano para la determinacin del contenido de materia insaponificable en las grasas y aceites animales y vegetales. Este mtodo se aplica a todas las grasas y aceites pero no a las ceras.

ADVERTENCIA. Sin embargo, en comparacin con el mtodo presentado en la NTC 235-1, da resultados que son sistemticamente bajos. 2. REFERENCIAS NORMATIVAS

La siguiente norma contiene disposiciones que, mediante la referencia dentro de este texto, constituyen la integridad del mismo. En el momento de la publicacin eran vlidas las ediciones indicadas. Todas las normas estn sujetas a actualizacin; los participantes, mediante acuerdos basados en esta norma, deben investigar la posibilidad de aplicar la ltima versin de la norma mencionada a continuacin: NTC 5033: 2002, Grasas y aceites animales y vegetales. Preparacin de la muestra para ensayo. 3. DEFINICIONES

Para los propsitos de la presente norma se aplica la siguiente definicin: 3.1 Materia insaponificable: todas las sustancias presentes en el producto, que, despus de saponificacin de ste por hidrxido de potasio y extraccin por hexano, no son voltiles bajo las condiciones especificadas.
Nota. El material insaponificable incluye lpidos de origen natural, como esteroles, hidrocarburos y alcoholes superiores, alcoholes alifticos y terpnicos, al igual que cualquier material extrao extrado por el solvente, y no voltil a 103 C (por ejemplo: aceites minerales) que pueden estar presentes.

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4. PRINCIPIO

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Saponificacin de la grasa o aceite por ebullicin bajo reflujo con una solucin de hidrxido de potasio etanlica. Extraccin de la materia insaponificable de la solucin de jabn con hexano, o en ausencia de ste, ter de petrleo liviano. Evaporacin del solvente y pesaje del residuo despus de secado. 5. REACTIVOS

Todos los reactivos deben ser de grado analtico reconocido. El agua usada debe ser agua destilada o agua de pureza al menos equivalente. 5.1 n-Hexano, o en ausencia de ste, ter de petrleo liviano, destilado entre 40 C y 60 C, nmero de bromo menor de 1. Ambos solventes deben estar libres de residuos. 5.2 5.3 Etanol, solucin 10 % (v/v). Fenolftalena, solucin de 10 g/l en 95 % de etanol (v/v).

5.4 Hidrxido de potasio, solucin etanlica, c(KOH) 1 mol/l. Se disuelven 60 g de hidrxido de potasio en 50 ml de agua y se diluye hasta 1 000 ml con etanol al 95 % (v/v). La solucin debe ser incolora o de un amarillo pajizo. 6. EQUIPO

El usual de laboratorio y, en particular, el siguiente: 6.1 6.2 Baln de 250 ml, con boca esmerilado. Condensador de reflujo con junta esmerilada para unin a los balones (vase el numeral 6.1).

6.3 Embudos de separacin con capacidad de 250 ml, con llaves y tapones de politetrafluoroetileno (PTF). 6.4 Bao de agua hirviendo o manta de calentamiento.

6.5 Horno con capacidad para mantenerse a 103 C 2 C o un aparato de secado al vaco, por ejemplo, un evaporador giratorio o un aparato similar. 7. MUESTREO

El muestreo no es parte del mtodo especificado en la presente norma. En la NTC 217 se presenta un mtodo de muestreo recomendado. Es importante que el laboratorio reciba una muestra representativa y que no haya sido daada o alterada durante el almacenamiento o transporte. 8. PREPARACIN DE LA MUESTRA DE ENSAYO

La muestra de ensayo se prepara de acuerdo con la NTC 5033. 2

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9. 9.1 PROCEDIMIENTO PORCIN DE ENSAYO

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Se pesan aproximadamente 5 g de la muestra de ensayo (vase el numeral 8), con aproximacin a 0,01 g, en un baln de 250 ml (vase el numeral 6.1). 9.2 SAPONIFICACIN

Se agregan 50 ml de solucin de hidrxido de potasio (vase el numeral 5.4) y algunas perlas de vidrio. Se conecta el condensador de reflujo (vase el numeral 6.2) al baln y se deja el contenido en ebullicin lenta durante 1 h. Al terminar este perodo, se suspende el calentamiento, se agregan 50 ml de agua destilada por la parte superior del condensador y se agita. 9.3 EXTRACCIN DE LA MATERIA INSAPONIFICABLE

Despus del enfriamiento, se transfiere la solucin a un embudo de separacin de 250 ml (vase el numeral 6.3). Se enjuagan el baln y las perlas varias veces con n-hexano (vase el numeral 5.1) usando 50 ml en total, y se vierten estos enjuagues en el embudo de separacin. Se coloca el tapn, se agita vigorosamente durante 1 min y se libera presin peridicamente invirtiendo el embudo y abriendo la llave con cuidado. Se deja reposar hasta que haya separacin completa de las dos fases, y luego se separa la capa inferior (capa acuosa) en un segundo embudo de separacin. Si se forma una emulsin, sta se destruye agregando pequeas cantidades de etanol o hidrxido de potasio concentrado, o solucin de cloruro de sodio. Se extrae la solucin jabonosa etanlica acuosa dos veces ms, cada una de ellas en la misma forma con 50 ml de hexano. Se recogen los tres extractos de n-hexano en el embudo de separacin. 9.4 LAVADO DEL EXTRACTO CON HEXANO

Se lavan los extractos combinados tres veces con porciones de 25 ml de solucin de etanol (vase el numeral 5.2), agitando vigorosamente y decantando la solucin etanlica acuosa despus de cada lavada. Se decanta cada solucin de lavado, dejando 2 ml, luego se gira el embudo alrededor de su eje. Se espera algunos minutos para recolectar la capa etanlica acuosa restante. Al decantar, se cierra la llave cuando la solucin de hexano alcanza el dimetro interior de la misma. Se contina lavando con la solucin de etanol hasta que los enjuagues no presenten color rosado al agregar una gota de solucin de fenolftalena (vase el numeral 5.3). 9.5 EVAPORACIN DEL SOLVENTE

Se transfiere cuantitativamente la solucin de hexano, poco a poco si es necesario, a travs del embudo de separacin, hacia un baln de 250 ml secado previamente a 103 C 2 C en el horno (vase el numeral 6.5), enfriado y pesado con aproximacin a 0,1 mg. Se evapora el solvente en un bao de agua hirviendo (vase el numeral 6.4).

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9.6

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SECADO DEL RESIDUO Y DETERMINACIN

9.6.1 Se seca el residuo durante 15 min en el horno (vase el numeral 6.5) a 103 C 2 C, con el baln en posicin casi horizontal. Se deja enfriar en un desecador y se pesa con aproximacin a 0,1 mg. Como alternativa, se conecta el baln al aparato para secado en vaco (vase el numeral 6.5) y se seca sobre el bao de agua hirviendo con el mximo de vaco de la bomba de agua, aproximadamente durante 15 min. Se deja enfriar a temperatura ambiente con el mximo de vaco de la bomba de agua, se seca cuidadosamente el baln y se pesa con aproximacin a 0,1 mg. Se repite el secado por perodos sucesivos de 15 min hasta que la prdida de masa entre dos pesajes sucesivos sea menor de 1,5 mg. Si no se obtiene masa constante despus de tres perodos de secado, la materia insaponificable probablemente est contaminada y, entonces, se debe repetir la determinacin. 9.6.2 Si se considera necesaria una correccin para cidos grasos libres, despus del pesaje del residuo, se disuelve ste en 4 ml de hexano y luego se agregan 20 ml de etanol, previamente neutralizado, hasta obtener un color rosado suave en presencia de fenolftalena (vase el numeral 5.3) como indicador. Se titula con solucin etanlica volumtrica estndar de hidrxido de potasio, c(KOH)=0,1 mol/l hasta obtener el mismo color final. La masa de los cidos grasos libres se calcula como cido olico y la masa del residuo se corrige de acuerdo con esto (vase el numeral 10). 9.7 NMERO DE DETERMINACIONES

Se llevan a cabo dos determinaciones en la misma muestra de ensayo. 9.8 ENSAYO EN BLANCO

Se lleva a cabo un ensayo en blanco usando el mismo procedimiento y las mismas cantidades de todos los reactivos, pero omitiendo la porcin de ensayo. Si el residuo excede 1,5 mg, se investigan la tcnica y los reactivos. 10. EXPRESIN DE LOS RESULTADOS

El contenido de materia insaponificable, expresado como un porcentaje en masa de la muestra, es igual a:

100 ( m1 m 2 m 3 ) m0

Donde:
m0 m1 m2

= = =

es la masa, en gramos, de la porcin de ensayo; es la masa, en gramos, del residuo; es la masa, en gramos, del residuo obtenido con el blanco;

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m3

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es la masa, en gramos, de los cidos grasos libres, si los hay (vase el numeral 9.6.2) y es igual a 0,28 Vc.

Donde: V = es el volumen, en mililitros, de la solucin etanlica volumtrica estndar de hidrxido de potasio usada para la titulacin; es la concentracin exacta, en moles por litro, de la solucin etanlica volumtrica estndar de hidrxido de potasio.

El resultado se considera como la media aritmtica de las dos determinaciones.

11.

PRECISIN

El Anexo A contiene los detalles de un ensayo interlaboratorio sobre la precisin del mtodo. Los valores derivados de este ensayo pueden no ser aplicables a rangos y matrices diferentes a las que se dan. 12. INFORME DE ENSAYO

En el informe se debe especificar:

toda la informacin necesaria para completar la identificacin de la muestra; el mtodo de acuerdo con el cual se llev a cabo el muestreo, si es conocido; el mtodo utilizado; tambin se deben mencionar todos los detalles operativos no especificados en la presente norma, o considerados como opcionales, junto con los detalles de cualquier evento que pueda haber influido en los resultados del ensayo; el(los) resultado(s) de ensayo obtenidos, o, si la repetibilidad ha sido verificada, el resultado final obtenido.

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Anexo A (Informativo) Resultados del ensayo interlaboratorio

A1.

PARTICIPACIN

En el estudio colaborativo organizado por The Institut des Corps Gras Centre Technique Industriel" tomaron parte cuarenta laboratorios de seis diferentes pases (Francia, Alemania Hungra, Malasia, Pases Bajos y Gran Bretaa. A2. MUESTRAS

Se ensayaron tres muestras:

A3.

Muestra A. Aceite crudo de girasol Muestra B. Aceite crudo de palma Muestra C. Sebo crudo

RESULTADOS

En la Tabla A1, A2 y A3 se registran los datos de los resultados obtenidos por los laboratorios de las muestras A, B y C. En la Tabla A4 se registran los datos de los resultados muestra por muestra. Para la muestra A se eliminaron dos laboratorios sobre la base de los ensayos the Cochran (Laboratorio 6) y Dixon (Laboratorio 9), un laboratorio para la muestra C sobre la base del ensayo Dixon (Laboratorio 11). Para la muestra B no se elimin ningn laboratorio. El promedio del contenido de la materia insaponificable para las tres muestras estuvo entre 0,15 % y 0,58 % (en masa). El lmite de repetibilidad se aproxima a 0,06 % (en masa) y el coeficiente de variacin de repetibilidad est entre 3,6 % y 10,5 %. El lmite de reproducibilidad se aproxima a 0,18 % (en masa) y el coeficiente de variacin de reproducibilidad esta entre 9 % y 36 %.

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Tabla A1. Muestra A. Aceite crudo de girasol Resultado 1 Resultado 2 % (en masa) % (en masa) 1 0,56 0,58 2 0,541 0,545 3 0,51 0,52 4 0,62 0,58 5 0,57 0,63 6 0,78 0,61 7 0,54 0,51 8 0,64 0,62 9 0,89 0,89 10 0,54 0,57 11 0,62 0,64 12 0,6 0,63 13 0,68 0,68 14 0,56 0,52 Nota. El laboratorio 6 fue eliminado con base en el ensayo de Cochran (5 %). El laboratorio 9 fue eliminado con base en el ensayo de Dixon (5 %). Laboratorio

Tabla A2. Muestra B. Aceite crudo de palma Laboratorio 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 Resultado 1 % (en masa) 0,35 0,2625 0,37 0,30 0,35 0,44 0,35 0,35 0,18 0,25 0,51 0,24 0,34 0,38 Resultado 2 % (en masa) 0,33 0,2485 0,32 0,30 0,42 0,45 0,3 0,35 0,18 0,32 0,48 0,26 0,32 0,34

Tabla A3. Muestra C. Sebo crudo Resultado 1 Resultado 2 % (en masa) % (en masa) 1 0,16 0,18 2 0,1337 0,106 3 0,18 0,17. 4 0,15 0,14 5 0,22 0,23 6 0,09 0,12 7 0,09 0,11 8 0,2 0,21 9 0,04 0,03 10 0,13 0,18 11 0,40 0,41 12 0,13 0,14 13 0,23 0,22 14 0,16 0,19 Nota. Laboratorio 11 fue eliminado con base en el ensayo de Dixon (5 %). Laboratorio

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Tabla A4. Anlisis estadstico de los resultados del estudio colaborativo Aceite crudo de girasol Muestra A Numero de laboratorios Nmero de laboratorios retenidos luego de eliminar estadsticas falsas Promedio, % (en masa) Desviacin estndar de repetibilidad, sr ,% Coeficiente de variacin de repetibilidad (%) Desviacin estndar de reproducibilidad, sR, % Coeficiente de variacin de reproducibilidad, (%) Lmite de repetibilidad, r, % Lmite de reproducibilidad, R, % 14 12 0,58 0,02 3,64 0,05 8,99 0,06 0,15 Aceite crudo de Sebo crudo palma Muestra C Muestra B 14 14 14 13 0,33 0,03 7,81 0,08 24,63 0,07 0,23 0,15 0,02 10,49 0,05 36,32 0,04 0,16

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DOCUMENTO DE REFERENCIA

NTC 235-2

INTERNATIONAL ORGANIZATION FOR STANDARDIZATION. Animal and Vegetable Fats and Oils. Determination of Unsaponiable Matter. Method Using Hexano Extraction. Geneve: ISO 2000, 8 p. (ISO 18609).