Universidade de Cabo Verde Departamento de Cincias e Tecnologia Curso: Cincias Biolgicas 2 ano Ano Lectivo:2012/2013 Bioqumica

Docente: Denise Colito

Discente: Ricardo Barros

ndice
1-Introduo ................................................................................................................................ 3 2 -Classificao dos processos cromatogrficos .................................................................. 4 2.1- De acordo com o sistema cromatogrfico................................................................. 4 2.2- De acordo com a fase mvel ...................................................................................... 5 2.3- De acordo com a fase estacionria............................................................................ 5 2.4- De acordo com o modo de separao ...................................................................... 5 3-Principais tcnicas cromatogrficas..................................................................................... 5 3.1-Cromatografia de adsoro .......................................................................................... 5 3.2-Cromatografia de partio ............................................................................................ 6 3.3-Cromatografia planar..................................................................................................... 7 3.4-Cromatografia em papel (CP) ...................................................................................... 7 3.5-Cromatografia em coluna.............................................................................................. 8 3.6-Cromatografia de leito mvel ....................................................................................... 9 3.7-Cromatografia por troca inica..................................................................................... 9 4.Concluso............................................................................................................................... 10 5.Referncias Bibliogrficas ................................................................................................... 10

1-Introduo

O trabalho que se segue est inserido na disciplina de Bioqumica que coordenado pela docente Denise Colito que solicitou um trabalho de pesquisa sobre o tema cromatografia, tema este que um tema que abrange uma vasta rea e por isso neste trabalho encontra-se algumas informaes essenciais e importantes para melhor entender a cromatografia. O termo cromatografia atribudo ao botnico russo Mikhael Semenovich Tswett que, no incio do sculo empregou a tcnica para a separao de pigmentos presentes em folhas de plantas, atravs da passagem de extractos de folhas, arrastados por ter de petrleo, atravs de leitos de carbonato de clcio finamente dividido. As espcies separadas (clorofilas e xantofilas) apareciam nos leitos como bandas coloridas, e por isso Tswett chamou o mtodo de cromatografia, do grego chroma (cor) e graphein (escrever). A definio de cromatografia dada pela IUPAC em 1993 a seguinte: cromatografia o mtodo fsico de separao no qual os componentes a serem separados se distribuem entre duas fases, uma das quais estacionria, enquanto a outra se movimenta numa direo definida. Existem vrias formas de realizar uma separao por meio de um processo cromatogrfico. Diversas combinaes so possveis: a fase estacionria pode ser um slido, um lquido imiscvel fase mvel ou um gel, fixado numa superfcie plana ou dentro de uma coluna; a fase mvel pode ser um lquido, um gs, ou um fludo supercrtico (um vapor pressurizado, em temperatura acima de sua temperatura crtica, que possui a vantagem de ter menor viscosidade que o lquido, mas mantendo as propriedades de interaco com os solutos).

2 -Classificao dos processos cromatogrficos A cromatografia um processo muito complexo e pode ser descrito pelo esquema seguinte:

2.1- De acordo com o sistema cromatogrfico

Em Coluna
o o o

Cromatografia lquida Cromatografia gasosa Cromatografia supercrtica

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Planar

o o o

Centrfuga Cromatografia em camada delgada (CCD) Cromatografia em papel (CP)

2.2- De acordo com a fase mvel

Utilizao de gs
o o

Cromatografia gasosa (CG) Cromatografia gasosa de alta resoluo (CGAR)

Utilizao de lquido
o o

Cromatografia lquida clssica (CLC) Cromatografia lquida de alta eficincia (CLAE)

Utilizao de gs pressurizado Cromatografia supercrtica (CSC)

2.3- De acordo com a fase estacionria

Lquida Slida Quimicamente ligadas

2.4- De acordo com o modo de separao

Por adsoro Por partio Por troca inica Por afinidade

3-Principais tcnicas cromatogrficas

3.1-Cromatografia de adsoro Neste processo, o de mais ampla utilizao, duas substncias so ligadas por uma interface onde no ocorre solubilizao. A fase estacionria slida e a fase mvel pode ser lquida ou gasosa. Baseia-se nas atraes eletrostticas ou dipolares da superfcie da
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fase estacionria pelas molculas da substncia a separar. As separaes ocorrem atravs de interaces electrostticas e foras de Van Der Waals entre a fase estacionria (slido) e os componentes a separar da fase mvel (lquido ou gs). A natureza da fase estacionria pode ser muito diversa, nomeadamente slica gel, alumina ou celulose e baseia-se nas atraes eletrostticas ou dipolares da superfcie da fase estacionria pelas molculas da substncia a separar.

Fig1. Diferena entre Cromatografia de Adsoro e Cromatografia de Partio

3.2-Cromatografia de partio A fase estacionria lquida. Este processo baseado na diferente solubilidade dos componentes da mistura nas duas fases lquidas.

Fig2.Representao da cromatografia de partio

3.3-Cromatografia planar Na cromatografia planar, tambm chamada de camada fina a fase estacionria, por exemplo alumina ou slica, suportada sobre uma placa plana ou nos poros de um papel. Nesse caso, a fase mvel desloca-se atravs da fase estacionria, slida e adsorvente, por ao da capilaridade ou sob a influncia da gravidade. til em separao de compostos polares. Encontra-se bastante difundida devido sua facilidade experimental e ao seu baixo custo.

3.4-Cromatografia em papel (CP)

Fig3.Fases da Cromatografia em Camada Delgada. uma tcnica de partio, utiliza dois lquidos, ou misturas de lquidos, um atuando como fase mvel (eluente) e outro, suportado sobre papel, atuando como fase estacionria. Ocorre a reteno das substncias devido s diferentes afinidades para com as fases estacionria e mvel. Utiliza-se papel normal ou papel de filtro (mais utilizado) como suporte da fase estacionria. Exemplificando: a mistura aplicada no papel e mergulhada na mistura das fases lquida e estacionria. A tira de papel de suporte colocada em um cuba contendo o eluente. Esta fase mvel (solvente) sobe por capilaridade e arrasta a substncia pela qual tem mais afinidade, separando-a das substncias com maior afinidade pela fase estacionria. Como a maioria das substncias separadas so incolores, utiliza-se um revelador. As manchas podem ser reveladas por meio de luz UV, vapores de iodo, solues de cloreto frrico e tiociano ferrato de potssio, fluorescncias, radioatividade, etc.

3.5-Cromatografia em coluna

Fig4.Representao da cromatografia de coluna

A cromatografia em coluna costuma ser citada como o mais antigo procedimento cromatogrfico. Foi descrito pela primeira vez pelo botnico russo M. S. Tswett, que o utilizou para o isolamento dos pigmentos existentes nas folhas verdes dos vegetais. Consiste em uma coluna de vidro, metal ou plstico, preenchida com um adsorvente adequado. O adsorvente pode ser colocado na coluna diretamente (seco) ou suspendido em um solvente adequado (geralmente o prprio eluente a ser usado no processo de separao). Os principais adsorventes normalmente utilizados so a slica gel, a alumina, o carbonato de clcio, o xido de magnsio, o carvo ativado, a sacarose e o amido, entre outros. A substncia a ser separada ou analisada colocada na coluna pela parte superior e o eluente vertido aps, em quantidade suficiente para promover a separao. A coluna pode ser um simples tubo de vidro, aberto em ambas as extremidades, ou semelhante a uma bureta. Em alguns casos aplica-se vcuo pela parte inferior da coluna ou uma ligeira sobrepresso pela parte superior da mesma. Quando a amostra a ser cromatografada possui cor, pode-se visualizar as diferentes zonas coloridas descendo pela coluna, que so recolhidas, separadamente, pela extremidade inferior. Quando a amostra no possui cor, recolhem-se vrias fraes iguais de eluente, testando-as quanto presena ou no de substncias dissolvidas atravs do uso de reveladores adequados (luz UV, reveladores qumicos, etc.).

Um exemplo de aplicao da cromatografia em coluna a separao dos pigmentos do espinafre.

3.6-Cromatografia de leito mvel A cromatografia de leito mvel verdadeiro uma forma de transformar a cromatografia de leito fixo num processo contnuo em contracorrente, e desta forma maximizar as taxas de transferncia de massa entre fases. Nesta tcnica, o absorvente move-se no sentido oposto ao do eluente com uma velocidade compreendida entre as velocidades de migrao dos dois componentes.

3.7-Cromatografia por troca inica A cromatografia inica uma variante da cromatografia lquida que utiliza resinas de troca inica para separar ies atmicos ou moleculares com base na sua interaco com a resina. A separao dos analitos conseguida de forma isocrtica ou por aplicao de gradiente. A vantagem desta tcnica prende-se com a simplificao da determinao de espcies inicas em simultneo cuja alternativa mais complexa e demorada. utilizada para a anlise de ies inorgnicos em vrias matrizes como guas residuais ou caldos de fermentao (anies tais como cloreto, fluoreto, nitrito, nitrato e sulfato; caties como ltio, clcio, amnia, magnsio, potssio e sdio). Permite analisar cidos orgnicos alifticos e cidos sulfnicos orgnicos, espcies bioqumicas como carboidratos mono, dissacridos e alguns oligossacridos; lcoois derivados de carbohidratos, aminocidos, protenas e outros compostos. Alm das aplicaes enunciadas possvel desenvolver mtodos especficos para outros analitos desde que estejam dentro da gama de operao do equipamento. O limite de deteco da ordem dos ppm podendo-se identificar analitos aninicos na ordem dos ppb

4.Concluso Existem vrias tcnicas cromatogrficos, neste breve trabalho de pesquisa s foi possvel exemplificar alguns porque so vrios assim as tcnicas cromatogrficas existentes. Espera-se que com esse trabalho cientfico de pesquisa onde se recolheu informaes de vrias fontes consiga explicar um pouco mas do que a tcnica de cromatografia, tcnica esta que muito usada em vrios laboratrios por todo o mundo, tcnica que surgiu no comeo do sculo passado mas at hoje ficou cada vez mais complexo e est classificada de vrias formas e ganhou outros significados.

5.Referncias Bibliogrficas http://pt.wikipedia.org/wiki/Cromatografia www.dq.fct.unl.pt Servios Externos http://www.pucrs.br/quimica/professores/arigony/cromatografia_FINAL/COLU NA.htm www.ebah.com.br

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