Vias alternativas, controle da respirao e via das pentose fosfato

Respirao

Respirao
Citosol Gliclise

Oxidao do piruvato

Ciclo de Krebs Mitocndrias

Cadeia respiratria Fosforilao oxidativa

Respirao
acoplamento

CTE

Respirao

Inibidores da CTE mitocondrial

Cadeia respiratria (transporte de eltrons)

Respirao

Vias alternativas

Respirao
Razes ADP/O (terica e experimental) ao utilizar mitocndrias isoladas
Razo ADP/O Terica* Experimental

Substrato

Malato Succinato NADH externo

2,5 1,5 1,5

2,4-2,7 1,6-1,8 1,6-1,8

*- Considera-se que os complexos I, III e IV bombeiam, respectivamente, 4, 4 e 2 H+ por 2 eltrons (1 NADH), que o custo para a sntese e exportao de 1 ATP de 4 prtons e que as vias alternativas no esto atuantes.

Respirao

Respirao

Respirao
Vias alternativas para oxidao do NAD(P)H
Desidrogenases NAD(P)H insensveis Rotenona
Espao intermembranas

Complexo I

Membrana interna NADH gerado no citosol tem menor rendimento energtico

Matriz

Respirao
NADH gerado no citosol tem menor rendimento energtico

Respirao
Mecanismos dissipadores de energia

Oxidase alternativa (OxAlt, resistente a cianeto) Protena desacopladora (UCP)

Respirao
Oxidase alternativa

Respirao

Acoplamento da transferncia de eltrons com a sntese de ATP na mitocndria. A adio de apenas ADP e Pi resulta em um pequeno ou nenhum aumento tanto da respirao (consumo de O2, em preto) como da sntese de ATP (em vermelho). Quando o succinato adicionado, a respirao comea imediatamente e o ATP sintetizado. A adio de cianeto (CN-), que bloqueia a transferncia de eltrons entre a citocromo oxidase e o O2 e inibe tanto a respirao quanto a sntese de ATP.

Respirao

Oxidase alternativa

Termognese Controle da produo de ATP em funo da demanda celular Gerar ADP Resposta a estresses

Espdice

lrio vudu (Sauromatum guttatum)

Respirao

Oxidase alternativa
Espdice superior

Brctea

Termognese em Arceas Sauromatum guttatum

Aumento da temperatura em at 15C acima da temperatura ambiente

Volatizao de compostos aromticos Flores masculinas Atrao de insetos polinizadores Espdice inferior

Flores femininas

Respirao

Oxidase alternativa

Relao entre a taxa de consumo de oxignio e a temperatura da espdice de Symplocarpus foetidus. O pico respiratrio (consumo de oxignio; seta vermelha) ocorre e uma temperatura da espdice e do ambiente pouco acima de 5C (www.plantphys.net; Cap.11, Ensaio 11.4)

Respirao

Protena desacopladora

Regulao da velocidade de respirao por ADP, durante a oxidao de succinato, em mitocndrias isoladas de plantas.

Respirao

Protena desacopladora

Acoplamento da transferncia de eltrons com a sntese de ATP na mitocndria. A adio de inibidores da ATP sintase, bloqueia tanto a sntese de ATP quanto a respirao. O dinitrofenol (DNP) um desacoplador e permite que a respirao continue sem a sntese de ATP.

Respirao

Protena desacopladora

Dois exemplos de desacopladores artificiais clssicos

Respirao

Protena desacopladora

Efeito da adio de ADP sobre a velocidade de consumo de oxignio em mitocndrias isoladas e o impacto da adio de um desacoplador ao meio de incubao

Respirao

Protena desacopladora

Atuao da protena desacopladora (UcP) como dissipadora do gradiente eletroqumico de prtons, com funo termognica nos vertebrados

Respirao
Protena desacopladora

Respirao
Descoberta da protena desacopladora em mitocndrias de plantas
Observao de similaridades entre mitocndrias de plantas e de tecido adiposo marrom de vertebrados Tentativas de isolamento de protena vegetal (PUMP) semelhante UCP, a partir de mitocndrias de batata Identificao do gene da PUMP em batata (StUCP) Anlise de expresso do gene da PUMP em diferentes rgos de plantas de batata Verificao de que a expresso desse gene induzida pelo frio

Respirao
Possveis funes fisiolgicas da UcP em plantas

Possvel papel termognico (pouco provvel ?) Genes de UCPs de plantas, em geral, tm expresso aumentada pelo frio Envolvimento da UCP nos processos de maturao de frutos climatricos (em associao com AOX) Possvel relao com proteo contra estresse oxidativo Participao nos processos de desenvolvimento vegetal

Respirao
Qual seria o papel dos sistemas dissipadores de energia em plantas?
Produo de calor
Produo de intermedirios metablicos quando a [ATP] Regenerao de NAD+ quando a CTE estiver saturada Respirao em frutos climatricos Mecanismo antioxidativo (evitar produco radicais livres)

Respirao
Gliclise

Regulao

Oxidao do piruvato

Ciclo de Krebs

Cadeia respiratria Fosforilao oxidativa

Respirao
Regulao da gliclise

Respirao
Regulao da gliclise

Respirao
Regulao da oxidao do piruvato

Respirao
Regulao da oxidao do piruvato

Reao de descarboxilao oxidativa do piruvato

Respirao
Regulao da oxidao do piruvato

Regulao Metablica da Atividade da Desidrogenase do Piruvato

Efeito na Atividade da PDH
ATIVADOR Piruvato Inibe Cinase

Mecanismo

ADP
Mg2+ INATIVADOR ATP NADH Acetil CoA NH4+

Inibe Cinase
Estimula Fosfatase

Ativa Cinase Inibe PDH Estimula Cinase

Inibe PDH Estimula Cinase

Inibe PDH Estimula Cinase

Respirao

1) Sinais de fome: Pi, AMP, ADP, potencial de membrana baixo Conseqncia: Estmulo respirao, estmulo sntese de ATP 2) Sinais de fartura: ATP, PEP, NADH, potencial de membrana elevado Consequncias: Inibio da respirao, inibio da sntese de ATP e NADH

Respirao
Regulao do ciclo de Krebs

Respirao
Controle de baixo para cima (bottom up)
[PEP]/[Pi] fosfofrutoquinase

Intermedirios do CAT ATP-Fosfofrutocinase

PPi-Fosfofrutocinase

Piruvato cinase

Piruvato desidrogenase

Respirao

A rota das pentoses-fosfato uma alternativa da via glicoltica que consiste de reaes oxidativas, nas quais glicose-6-fosfato (hexose-P) convertida em ribulose-5-fosfato (pentose-P), com perda de CO2 e a gerao de NADPH e intermedirios metablicos (eritrose-4-fosfato, ribose-5-fosfato).

Respirao

Respirao

Respirao

Suprimento de NADPH (biossntese e respirao) Suprimento de substratos para biossntese Intermdirios

Respirao

Etapa oxidativa irreversvel

Etapas no-oxidativa reversvel

Respirao
3x

3x

3x

Respirao

Respirao
3x

3x

3x

Intermedirios

Produtos

Respirao

Hexose fosfato isomerase

Frutose-6fosfato

Regenerao da Glicose-6fosfato

Frutose-1,6 -bisfosfatase

Frutose-1,6bisfosfato

Aldolase

Diidroxiaceto na fosfato Triose-fosfato isomerase

Hexose fosfato isomerase

Respirao
Equao geral pentoses fosfato

6 G6P + 12 NADP+ 6 CO2 + 12 NADPH + 5 F6P 1 G6P + 12 NADP+ 6 CO2 + 12 NADPH

Respirao

Parede celular

Importncia Geral
a -Gerao de intermedirios utilizados em outras vias biossintticas

Respirao

Importncia Geral
Onde o NADPH utilizado?

Importncia Geral
b - Gerao de poder redutor na forma de NADPH

Fonte de eltrons
para NAD(P)H desidrogenase

mitocondrial externa

Outras reaes biossintticas....

Respirao
Funes da rota oxidativa das pentoses-P
Produo de NADPH para reaes biossintticascitosol Fonte de eltrons para NAD(P)H mitocondriais externos Produo de ribulose-5-P Ribulose 1,5-bisfosfato

Produo de ribose-5-P
Produo de eritrose-4-P

Ribose e desoxirribose
Compostos fenlicos, aminocidos aromticos, lignina

Produo de intermedirios do Ciclo de Calvin no incio de enverdecimento

Produo alternativa de intermedirios da via glicoltica