UNIVERSIDAD PERUANA CAYETANO HEREDIA

FACULTAD DE MEDICINA ALBERTO HURTADO ESCUELA DE TECNOLOGA MDICA

PROYECTO DE INVESTIGACION

Comparacin de la Tcnica de Sedimentacin espontanea en tubo y el Mtodo de McMaster en parsitos intestinales

Investigadores: Snchez Jacinto Billy Joel Zeballos Conislla Holger Elmer

Lima-Per 2012

Introduccin Las helmintiasis persisten como un problema de salud pblica en los pases en va de desarrollo en donde afectan principalmente a la poblacin infantil. Se estima que en el mundo 2.000 millones de individuos se encuentran infectados por geohelmintos y de ellos 300 millones sufren morbilidad severa asociada a las helmintiasis como anemia, desnutricin, dficit cognitivo y trastornos del crecimiento y desarrollo 1-3. Para planear y evaluar cualquier intervencin efectiva de control de las geohelmintiasis, as como de cualquier problema de salud pblica, uno de los insumos fundamentales es el conocimiento vlido y preciso de su situacin epidemiolgica. En general la informacin disponible sobre frecuencia, distribucin y severidad de una enfermedad se basa principalmente en el rendimiento y las caractersticas de las pruebas empleadas para el diagnstico rutinario o para programas de control. Por esta razn, tanto los estudios de diagnstico a nivel individual como los estudios poblacionales para el desarrollo de estrategias de control deberan incorporar, evaluaciones de la validez y la fiabilidad de las pruebas diagnsticas empleadas 4. Objetivos: El objetivo del estudio es evaluar la Tcnica de Sedimentacin Espontanea determinando su eficacia frente al Mtodo de McMaster en la deteccin de huevos de helmintos. Material y mtodo: Diseo de estudio: Se realizara un estudio de fiabilidad de pruebas diagnsticas. Se comparara la variabilidad de la determinacin de infecciones de parsitos intestinales realizada en la misma muestra, por el mismo observador, usando las siguientes tcnicas: la Tcnica de Sedimentacin espontanea en tubo y el Mtodo de McMaster. Poblacin: Las muestras de pacientes ambulatorios del Hospital Nacional Cayetano Heredia en el 2012. Se est considerando una poblacin infinita ya que el flujo de pacientes puede variar durante un mes. Tamao muestral Asumiendo el escenario de prevalencia de 50% en donde se maximiza el tamao muestral necesario, asumiendo precisin de +/- 5% y poblacin infinita, el nmero de muestras de las cuales necesitaremos datos ser de 384. Esperando una proporcin de prdidas del 5% el total de muestras a recolectar sera de 400. El clculo se realiz utilizando el programa estadstico Openepi, que es un programa de uso libre diseado por la Universidad de Emory

con financiamiento de la Fundacin Bill y Melinda Gates (detalles del clculo se adjuntan en el ANEXO 1). Criterio de inclusin: Todas las muestras que lleguen al servicio de parasitologa del Hospital Nacional Cayetano Heredia en el ao 2013. Criterio de exclusin El nico criterio de exclusin fue presentar alguna contraindicacin mdica para la administracin de cualquiera de los frmacos indicados para el tratamiento de las parasitosis intestinales producidas por helmintos o protozoarios. Procedimientos y tcnicas Se presentar el proyecto a la Facultad de Medicina Alberto Hurtado de la Universidad Peruana Cayetano Heredia (FAMED - UPCH) para su evaluacin y aprobacin .Despus el protocolo se elevara al comit de tica de la universidad para su aprobacin. Una vez obtenido la constancia correspondiente, se solicitara autorizacin al comit del Hospital Nacional Cayetano Heredia, elegido por factibilidad de cercana. Con los permisos correspondientes se podr comenzar a procesar las muestras de heces por las dos tcnicas. Tcnica de sedimentacin espontanea en tubo: Se separara aproximadamente 4g de heces de cada recipiente y se realizara un homogenizado en 10 ml de solucin salina hasta que se logr una suspensin adecuada. La mezcla fue vertida en un tubo cnico de plstico de 13 x 2.5cm, de 50 ml de capacidad filtrndola a travs de gasa. Se completara el volumen del tubo con solucin salina y se tapara hermticamente. Se agita enrgicamente por 30 segundos y se deja reposar por 45 minutos. Se eliminara el sobrenadante y con una pipeta se toma una muestra del fondo del tubo. Se coloca 4 gotas en dos lminas distintas, agregndole luego gotas de lugol y de solucin salina a cada una. Finalmente, las lminas portaobjetos fueron cubiertas con laminillas de celofn de 6x2cm. Se observa al microscopio (100X y 400X).

Tcnica de McMaster Se utiliza 2g de heces que es suspendida en 30ml de una solucin de saturada de sal a temperatura ambiente (densidad 1.2 preparado mediante la adicin de NaCl en 5 litros de agua destilada (40-50C)) La solucin fecal se vierte tres veces en una malla de alambre (250 micras) para eliminar los residuos de gran tamao .Luego alcuotas de 0.5 ml se aade a cada una de las dos cmaras de McMaster y se examina en un microscopio a 100x

Plan de anlisis: Se realizar anlisis de frecuencia, porcentaje, tablas y grficos de barras utilizando el programa de Excel. Referencia bibliogrfica 1. De Carvalho GL, Moreira LE, Pena JL, Marinho CC, Bahia MT, MachadoCoelho GL. A comparative study of the TF-Test, Kato-Katz, Hoffman-PonsJaner, Willis and Baermann-Moraes coprologic methods for the detection of human parasitosis. Mem Inst Oswaldo Cruz. 2012;107:80-4. http://dx.doi.org/10.1590/S0074-02762012000100011 2. World Health Organization. Schistosomiasis and soil transmitted helminth infections. WHO, Geneva. Wkly Epidemiol Rec. 2006;81:145-63.

3. De Silva NR, Brooker S, Hotez PJ, Montresor A, Engels D, Savioli L. Soiltransmitted helminth infections: updating the global picture. Trends Parasitol. 2003;19:547-51. http://dx.doi.org/10.1016/j.pt.2003.10.002 4. Szklo M, Nieto J. Epidemiologa intermedia: conceptos y aplicaciones. Madrid: Ediciones Daz de Santos; 2003. p. 395-999.

Presupuesto y cronograma Numero Recursos humanos Investigador* Asesor* Recursos materiales Computadora** Impresora** Tinta de impresora Papel bond Lapiceros Tablas acrlicas para ficha de datos Servicios Fotocopias Otros Transporte 500,00 TOTAL 500,00 4250,00 2000 Unidades 0,10 200,00 0 0 1 1 1 3 Computadora porttil Impresora de blanco y negro Cartucho Paquete de 500 hojas caja Unidades 0,00 0,00 60,00 20,00 10,00 20,00 0 0 60,00 20,00 10,00 60,00 90 50 Horas Horas 10,00 50,00 900,00 2500,00 Unidad Costo Unitario S/. Costo Total S/.

Cronograma OCTU BRE Bsqueda bibliogrfica, artculos X relacionados con el proyecto Redaccin de protocolo Elaboracin de planeacin de actividades a desarrollar (inicio, desarrollo y evaluacin) Solicitud de permisos (Facultad, comit de tica) Desarrollo de las actividades (inicio, desarrollo y evaluacin) Realizacin estadstica de los resultados obtenidos Elaboracin del informe y observaciones Presentacin y publicacin del proyecto NOVI EMB RE DICI EMB RE ENE RO FEB RER O MA ABRIL RZO MAY O

JUNIO

Anexo 1 Tamao de la muestra para la frecuencia en una poblacin Tamao de la poblacin (para el factor de correccin de la poblacin finita 1000000 o fcp)(N): frecuencia % hipottica del factor del resultado en la poblacin (p): 50%+/-5 Lmites de confianza como % de 100(absoluto +/-%)(d): 5% Efecto de diseo (para encuestas en grupo-EDFF): 1 Tamao de la muestra(n para varios Intervalos de Confianza Intervalo 95% 80% 90% 97% 99% 99.9% 99.99% Confianza (%) Tamao de la muestra 384 165 271 471 664 1082 1512

Ecuacin Tamao de la muestra n = [EDFF*Np(1-p)]/ [(d2/Z21-/2*(N-1)+p*(1-p)]