INSTITUTO DE EDUCACIN SUPERIOR TECNOLGICO

PBLICO TRUJILLO

LABORATORIO CLNICO VI

DETERMINACIN DE PERFILES BIOQUMICOS EN MUESTRAS BIOLGICAS HUMANAS II

PROFESORA: BERTHA GUZMN ARANGUR

ALUMNO: YHORSE MIULER CULQUE JAPA TEMA:

DETERMINACIN DE HDL-COLESTEROL EN SUERO

TRUJILLO PER

2012

I. INTRODUCCIN El colesterol HDL es en realidad una lipoprotena de alta densidad, que se encarga de transportar el colesterol desde los tejidos al hgado, para su metabolizacin. El colesterol bueno o HDL acta transportando el colesterol desde los tejidos al hgado. Esto es muy importante porque esta lipoprotena cumple la funcin de barrer el exceso de colesterol de los tejidos, arterias, vasos, etc, para ser primero metabolizado en el hgado y luego eliminado por el organismo. Debido a que las HDL pueden retirar el colesterol de las arterias y transportarlo de vuelta al hgado para su excrecin, se les conoce como el colesterol o lipoprotena buena. Cuando se miden los niveles de colesterol, el contenido en las partculas, no es una amenaza para la salud cardiovascular del cuerpo. HDL son las lipoprotenas ms pequeas y ms densas, estn compuestas de una alta proporcin de protenas. El hgado sintetiza estas lipoprotenas como protenas vacas y, tras recoger el colesterol, incrementan su tamao al circular a travs del torrente sanguneo. La LDL es una de las clases de lipoprotenas que transportan el colesterol en la sangre. La LDL se considera indeseable ya que deposita el exceso de colesterol en las paredes de los vasos sanguneos y contribuye al endurecimiento de las arterias y a la enfermedad cardiaca. Por ello el colesterol LDL recibe frecuentemente el nombre de colesterol malo. La prueba de colesterol LDL mide la concentracin de colesterol de LDL presente en la sangre. La determinacin de colesterol LDL se utiliza para evaluar el riesgo de desarrollar una enfermedad cardiaca. De entre todas las formas de colesterol presentes en la sangre, se considera que el colesterol LDL es el ms importante para establecer el riesgo de enfermedad cardiaca. Las decisiones sobre el tratamiento se toman en funcin de los valores de LDL.

OBJETIVOS:
Determinar la concentracin de HDL-colesterol en suero. Demostrar la tcnica enzimtica para la determinacin de HDLcolesterol en suero.

 Interpretar los resultados comparando con los valores de referencia

II.

MATERIAL Y MTODO 2.1 MATERIALES: TUBOS DE ENSAYO DE 13 x 100mm 1 PIPETA DE 10ml 1PIPETA DE 0.5 ml 1PIEPTA DE 100l 1PIEPTA DE 10l 1 GRADILLA PUNTAS PARA MICROPIPETAS CUBETAS ESPECTROFOMTRICAS EQUIPOS: ESPECTROFOTOMETRO GENESYS 20 TM BAO MARIA CENTRIFUGA CRONMETRO

2.2

2.3

MTODO: ENZIMTICO 2.3.1 SIGNIFICACIN CLNICA: El colesterol se encuentra presente en la sangre, bilis y tejido cerebral. Es precursor de los cidos biliares, esteroides, y vitamina D. El colesterol es transportado por tres lipoprotenas. Lipoprotena de alta densidad (HDL), la de baja densidad (LDL), y la de muy baja densidad (VLDL). Castelli y colaboradores han reportado que hay una estrecha relacin entre los niveles de HDLcolesterol y el riesgo de enfermedad coronaria. La evaluacin de los niveles de HDL-colesterol y triglicridos provee una valiosa herramienta para la prediccin de enfermedad coronaria, y la clasificacin y la clasificacin de las dislipidemias. 2.3.2 FUNDAMENTO: Colesterol ester CEH colesterol + cidos grasos Colesterol + O2 CHOD colest-4-en-3-ona + H2O2 2H2O2 + 4-AAP + p-HBA POD comp. Coloreado + 4H2O 2.3.3 REACTIVO SEGN VALTEK: RTVO DE TRABAJO: cido fosfotngstico.0.55Mm Cloruro de magnesio...25mM SLUCIN STANDARD: colesterol en solucin acuosa 76.5mg/dl 2.3.4 MUESTRA: SUERO 2.3.5 TCNICA: PRIMER PASO: PRECIPITACION:

o Agregar 0.5ml de reactivo precipitante y 0.2ml de muestra.

o Mezclar y esperar 15 a T ambiente. o Lugo centrifugar 15 a 3000 r.p.m.

SEGUNDO PASO:

B S D SOBRENADANTE 100 (l) STANDARD (L) 10 REACTIVO (mL) 1 1 1 Mezclar e incubar, 5minutos a 37c o 20 minutos a temperatura ambiente (20 - 25c). Leer las absorbancias a cero en el espectrofotmetro con el blanco de reactivo. cumplido el tiempo de incubacin es estable 30minutos

2.3.6 CALCULOS: FACTOR = 76.5mg/dl Abs. Standard HDL-Colesterol (mg/dl)= factor x abs. Muestra 2.3.7 VALORES DE REFERENCIA: SEGN VALTEK: BAJO RIESGO RIESGO STANDARD HOMBRES >55 mg/dl 35 65 mg/dl MUJERES >65 mg/dl 45 65 mg/dl

ALTO RIESGO <35 mg/dl <45mg/dl

2.3.8 INTERPRETACIN:

III.

RESULTADOS

IV.

DISCUSIN

Lipoprotenas de alta densidad. Estos complejos lipo-proteicos se llaman tambin alfa-lipoprotenas y son las ms densas de las lipoprotenas. Su acrnimo ms usado es HDL por "High-Density Lipoprotein." LDL: Lipoprotenas de baja densidad. Transportan el colesterol malo y se obtienen mediante el consumo de grasa animal, como huevos, derivados de la leche y carnes rojas. stas son agresoras, porque se depositan directamente en las arterias, lo que aumenta el riesgo de sufrir un accidente cardiovascular. VLDL: Lipoprotenas de muy baja densidad, que transportan triglicridos. stos provienen del azcar refinado y el alcohol. Cuando estn muy altas hacen que el LDL sea an ms malo, ms denso, pequeo y con mayor predisposicin a depositarse en las arterias. Por lo tanto, en las personas con triglicridos altos no es conveniente el consumo de alcohol. HDL: Lipoprotenas de alta densidad. Transportan el colesterol bueno y son protectoras, porque estn encargadas de evitar que las lipoprotenas agresoras se peguen a las clulas y provoquen daos en nuestro cuerpo.

V.

CONCLUSIN

VI.

BIBLIOGRAFA DOcon Navaza C, Garca-Saavedra MJ, Vicente Garca JC (1999): Fundamentos y Tcnicas de Anlisis Bioqumico, Anlisis de Muestras Biolgicas. Editorial Paraninfo, Madrid. Gonzlez de Buitrago JM, Arilla Ferreiro E, Rodrguez-Sedade M, Snchez Pozo A (1998): Bioqumica Clnica . Editorial McGraw-Hill.Interamericana, Madrid. Informacin detallada a cerca de los productos analticos de Linear Chemical SL lo encontrar en htp:// www.linear.es

VII.

CUESTIONARIO DE INVESTIGACIN

1. Cules son las fuentes del colesterol - HDL? 2. Qu son las lipoprotenas y las funciones y clases? 3. Cul es el mecanismo de accin del HDL, LDL, colesterol total y triglicridos?

Valores de referencia:
Actualmente, los valores ms aceptados internacionalmente de colesterol LDL son los definidos por la American Heart Association (Sociedad Estadounidense del Corazn) (AHA): Menos de 100 mg/dL: Nivel ptimo de colesterol LDL, correspondiente a un nivel reducido de riesgo para cardiopata isqumica 100 a 129 mg/dL: Nivel de LDL prximo al ptimo 130 a 159 mg/dL: Fronterizo o limtrofe con alto nivel de LDL 160 a 189 mg/dL: Alto nivel de LDL 190 mg/dL y superiores: Nivel excesivamente elevado, riesgo incrementado de cardiopata isqumica. Sin embargo, los niveles ptimos de colesterol LDL deben determinarse despus de un anlisis exhaustivo de los factores de riesgo de cada paciente, anlisis que debe llevar a cabo un mdico especialista.

Significado Clnico:
Valores elevados de colesterol LDL son indicativos de riesgo de enfermedad cardiaca. El tratamiento (dieta o frmacos) tiene como objetivo hacer disminuir los valores de colesterol LDL hasta unos valores que no supongan riesgo de enfermedad cardiaca. Los objetivos son: colesterol LDL inferior a 70 mg/dL (1.82 mmol/L) si se tiene un muy alto riesgo de enfermedad cardiaca. colesterol LDL inferior a 100 mg/dL (2.59 mmol/L) si se padece enfermedad cardiaca o diabetes. colesterol LDL inferior a 130 mg/dL (3.37 mmol/L) si se tienen 2 o ms factores de riesgo (riesgo intermedio de enfermedad cardiaca). colesterol LDL inferior a 160 mg/dL (4.14 mmol/L) si se tiene 0 1 factor de riesgo (bajo riesgo de enfermedad cardiaca).

Un colesterol HDL elevado (60 mg/dL o superior) se considera como un factor de riesgo negativo y su presencia permite eliminar un factor de riesgo del total. Los factores de riesgo incluyen: Fumador de cigarrillos Edad (hombre mayor de 45 aos o mujer mayor de 55 aos) Colesterol HDL bajo (inferior a 40 mg/dL (1.04 mmol/L)) Hipertensin (tensin sangunea de 140/90 o superior, o tomar medicacin para la hipertensin) Historia familiar de enfermedad cardiaca prematura (enfermedad cardiaca en familiares de primer grado, en hombres menores de 55 aos o en mujeres menores de 65 aos)