Perda de Heterozigosidade e Leucoplasia

Autores: Dra. Marina Gonalves Diniz Prof. Ricardo Santiago Gomez e-mail: marinadiniz@gmail.com e-mail: rsgomez@ufmg.br

A perda de heterozigosidade (LOH) um fenmeno biolgico resultante de variaes ambientais e/ou genticas como instabilidades genmicas, incluindo no disjuno mittica e recombinao, perda cromossomal, mutao e deleo do DNA, translocao e converso gnica. Os estudos de LOH identificam mudanas na dosagem de um alelo heterozigoto em relao ao outro alelo, em um marcador gentico ( Ver figura abaixo). A anlise em neoplasias geralmente conduzida com amostras pareadas tumor/tecido normal. Esta anlise identifica regies de LOH examinando alteraes no status genmico de clulas normais com clulas tumorais do mesmo paciente. Se a LOH acontece em um gene supressor de tumor e o alelo remanescente sofre mutao, deleo ou silenciamento gentico, este evento leva a clula ao estado de hemizigose (uma alelo deletrio e um deletado) ou homozigose para o alelo deletrio. A consequncia deste estado pode ser a inativao da funo supressora de tumor, contribuindo para o desenvolvimento de cncer ou metstase. Identificao de regies de LOH aumenta o entendimento dos mecanismos de formao de tumores, podendo facilitar o desenvolvimento de marcadores de prognstico gentico e de alvos teraputicos. Atualmente, tcnicas moleculares bem estabelecidas e rotineiramente usadas para examinar LOH incluem hibridizao genmica, hibridizao fluorescente in situ e reao em cadeia da polimerase (PCR). Esta ltima abordagem analtica baseada na amplificao por PCR de sequencias polimrficas em locais estratgicos do genoma utilizando iniciadores fluorescentes, seguido de anlise dos picos do eletroferograma que foram gerados pela presena dos produtos fluorescentes da PCR (ver figura abaixo). Metodologias com anlises mais amplas do genoma so tambm utilizadas. Leucoplasias orais apresentam com frequncia LOH em alguns genes supressores de tumor. Esta alterao encontrada com maior frequncia nas leucoplasias com displasias ou atipias epiteliais intensas em comparao com

as leses sem atipia. Leses que exibem LOH utilizando-se vrios marcadores apresentam maior probabilidade de transformao maligna. Entretanto, na anlise individual estes marcadores no so confiveis como ferramentas para diagnstico porque mesmo leses sem LOH podem sofrer transformao maligna. curioso tambm que a mucosa normal adjacente leucoplasia ou ao carcinoma pode tambm exibir LOH. Leiamais: http://www.ricardosgomez.com/temas-relevantes/perda-deheterozigosidade-e-leucoplasias/

Curvas representativas da anlise de perda de heterozigosidade (LOH). O tecido normal heterozigoto e apresenta dois picos referentes a presena de dois alelos. As clulas tumorais que apresentam LOH exibem reduo de um dos picos ou at mesmo ausncia completa do pico. Uma alterao na relao: (altura alelo 1 normal/ altura alelo 2 normal) / (altura do alelo 1 tumor/altura do alelo 2 tumor) que seja >2 ou <0.5 indica LOH. Leitura complementar: - Rosin MP, Cheng X, Poh C, Lam WL, Huang YH, Lovas J, Berean K, Epstein JB, Priddy R, Le ND, Zhang L. Use of allelic loss to predict malignant risk for low-grade oral epitelial dysplasia. Clin Can Res 2000;6:357-362. - Smith J, Rattay T, McConkey C, Helliwell T, Mehanna H. Biomarkers in dysplasia of the oral cavity: A systematic review. Oral Oncology 2009;647-653.