Nombre _____________________________________________________Grupo __________

OBTENCIN Y TINCIN DE UN FROTIS DE SANGRE IDENTIFICACIN DE LAS CLULAS SANGUNEAS

TIPO CELULAR ERITROCITOS ASPECTO Forma de disco bicncavo. Anucleados. Dan el color rojo a la sangre por poseer hemoglobina. TAMAO 7 m
(referencia)

ABUNDANCIA RELATIVA ~700 por cada leucocito ~1 por cada 700 eritrocitos

FUNCIONES Transporte de oxgeno (98%) y, secundariamente, dixido de carbono (25%).

LEUCOCITOS Ncleo con 3-5 lbulos unidos por un filamento. Granulacin muy fina, difcilmente perceptible. Ncleo con dos lbulos unidos por un delgado filamento. Las granulaciones acidfilas dan una coloracin rojiza al citoplasma. Ncleo voluminoso bilobulado. Los grnulos basfilos son gruesos, tien el citoplasma de color oscuro y frecuentemente dificultan la observacin del ncleo. Ncleo esfrico que ocupa la mayor parte de la clula. Citoplasma muy escaso. Ncleo ovoide, en forma de rin o de herradura. El ncleo es ms claro que el de los linfocitos (cromatina menos densa) Anucleados. Esfricos, ovales o alargados. Aparecen en grupos (aglutinados) en las extensiones.

NEUTRFILOS

12 m

~1 de cada 2 leucocitos

EOSINFILOS

9 m

~3 de cada 100 leucocitos

BASFILOS

12 m

~1 de cada 200 leucocitos

AGRANULOCITOS

LINFOCITOS

6-8 m

~1 de cada 3 leucocitos

MONOCITOS

9-12 m

~1 de cada 15 leucocitos

Fagocitosis. Pueden abandonar el torrente circulatorio y penetrar en los tejidos para realizar all la fagocitosis. Fagocitan los complejos antgeno-anticuerpo. Su nmero aumenta en las reacciones alrgicas y en las infecciones parasitarias. Contienen heparina (anticoagulante) e histamina (vasodilatador). Responsables de los cambios producidos en los vasos sanguneos durante los procesos inflamatorios. Producen anticuerpos. Son responsables del rechazo de los injertos y los transplantes. Fagocitosis. Se vuelven muy activos despus de atravesar la pared de los capilares y penetrar en el tejido conjuntivo. Fagocitan sobre todo virus, hongos y protozoos. Forman un tapn cuando los vasos sanguneos son lesionados. Liberan tromboplastina, que interviene en la formacin del cogulo, y serotonina , un vasoconstrictor.

GRANULOCITOS

TROMBOCITOS

3 m

Difcil de estimar por aparecer aglutinados

Cuestiones Adems de los que aparecen en la tabla anterior, qu otros componentes constituyen la sangre? _________ ________________________________________________________________________ _________________________________________________________________________________ _________________________________________________________________________________ Dnde se forman las clulas sanguneas? _________________________________________________________________________________ _________________________________________________________________________________ _________________________________________________________________________________

Material Algodn Alcohol Reactivos Set de coloracin rpida para frotis sanguneos Diff-Quik: Solucin fijadora (Fast Green en metanol) Solucin colorante I (Eosina G en tampn fosfato) Solucin colorante II (Tiazina en tampn fosfato) Procedimiento Con un algodn empapado en alcohol limpia el dedo que te vayas a pinchar. Coge una lanceta estril por el extremo en el que no est el pincho, para que se mantenga estril y pnchate en la yema del dedo. El pinchazo debe ser profundo, de tal manera que la sangre salga por simple flexin de la falange, sin necesidad de apretar. Una vez recogida la sangre necesaria vuelve a limpiar el dedo con el algodn mojado en alcohol. Deposita una gota de sangre en un extremo del porta. Para realizar el frotis (extensin) se procede como indica el dibujo. A. Deposita una pequea gota de sangre en un extremo del portaobjetos. Si la cantidad de sangre es excesiva las clulas quedarn apelotonadas en la extensin y ser difcil observarlas. Coloca el segundo portaobjetos formando un ngulo de unos 45 con el primero y asegurndote de que apoya todo el borde. Desliza lentamente el portaobjetos hacia la gota de sangre hasta que entren en contacto. Vers como la sangre se extiende por el borde. B. Desliza ahora el porta en el sentido contrario en un movimiento rpido y procurando que no pierda el contacto con el otro. C. Todo el procedimiento se debe realizar apoyado en la mesa y sujetando el porta como indica el dibujo. D. Deja secar el frotis al aire antes de comenzar el proceso de tincin. Evita el deterioro de la estructura celular Tie de rosa plido el citoplasma y las granulaciones acidfilas (eosinfilas) Tie de color azul-violeta oscuro los ncleos de las clulas y las granulaciones basfilas. Lancetas estriles Portaobjetos Frascos de tincin Microscopio

Sumerge el portaobjetos con la extensin de sangre durante un segundo en la solucin fijadora, djalo escurrir y vuelve a sumergirlo durante otro segundo y repite el procedimiento hasta haber completado diez inmersiones de un segundo. Repite el procedimiento con las soluciones colorantes I y II. Es importante que no se altere el orden de los colorantes, ya que, de otra manera, no se obtendra el resultado esperado. Debes evitar tambin la contaminacin de unos lquidos con otros. Por ltimo debe lavarse el exceso de colorante con abundante agua. El chorro de agua no debe ser fuerte, para evitar que arrastre las clulas sanguneas. La mejor manera es colocar el porta inclinado y dejar caer un pequeo chorro de agua sobre el extremo superior.

Nombre _____________________________________________________Grupo __________

Observacin Las clulas ms abundantes son, con gran diferencia, los eritrocitos. Son clulas anucleadas y quedan teidos de color anaranjado plido. Se puede observar distinta intensidad de coloracin entre el centro y la periferia, debido a su forma caracterstica de disco bicncavo. Si recorremos la extensin lentamente, de vez en cuando nos llamarn la atencin los leucocitos, generalmente ms grandes que los eritrocitos y con sus ncleos intensamente teidos de color azulvioleta. Utiliza el cuadro de los elementos formes de la sangre para intentar identificar los distintos tipos de leucocitos; los rasgos que te van a ser ms tiles en la identificacin son: el tamao de las clulas, que podrs determinar por comparacin con los glbulos rojos, la forma del ncleo y la coloracin del citoplasma. Las plaquetas son difciles de identificar porque se confunden con partculas de polvo u otras impurezas que aparecen dispersas por la extensin, pero son bastante abundantes.

Dibujos Dibuja los tipos celulares que observes, calcula su tamao aproximado utilizando como referencia el de los glbulos rojos e indica el nmero de clulas de cada tipo que has podido ver. Seala qu rasgos te han permitido identificar cada tipo de clula. No olvides poner junto a cada dibujo los aumentos con los que has realizado la observacin.

Eritrocitos

Tamao aproximado: 7 m

Cantidad de clulas observadas:

Neutrfilos

Tamao aproximado:

Cantidad de clulas observadas:

Linfocitos

Tamao aproximado:

Cantidad de clulas observadas: Se diferencian de las otras clulas sanguneas en:

Monocitos

Tamao aproximado:

Cantidad de clulas observadas: Se diferencian de las otras clulas sanguneas en:

Eosinfilos

Tamao aproximado:

Cantidad de clulas observadas: Se diferencian de las otras clulas sanguneas en:

Basfilos

Tamao aproximado:

Cantidad de clulas observadas: Se diferencian de las otras clulas sanguneas en: