MINISTRIO DA EDUCAO UNIVERSIDADE FEDERAL RURAL DA AMAZNIA GRADUAO EM AGRONOMIA

Translocao de Solutos Orgnicos no Floema

Biloga Alessandra Cunha da Conceio Mestranda em Botnica Tropical UFRA/MPEG
Belm Par 2008

INTRODUO
Os primeiros autores consideravam que os vegetais obtinham seus nutrientes diretamente do solo Desde o sculo XVII, j se tinha evidncias experimentais de que o floema transporta substncias importantes para o crescimento das plantas. Uma dessas evidncias foi apontada pelo bilogo italiano Marcelo Malpighi, o qual chamou ateno para o intumescimento resultante do anelamento de troncos e galhos.

Em 1679, Malpighi demonstrou que a seiva bruta originria do solo era modificada nas folhas atravs da ao da luz solar, sendo convertida em seiva elaborada que alimentava outras partes da planta.

Anelamento ou Cintamento (Anel de Malpighi)

Figura 1: Anel de Malpighi. O intumescimento da regio logo acima do anel evidencia que substncias so transportadas pelo floema. Se o anelamento for realizado no caule principal, a falta de suprimentos provocar a morte das razes e posteriormente do vegetal como um todo. O floema , portanto, a ponte que permite a passagem de suprimentos da parte area (produtos da fotossntese) para as razes. Esses suprimentos permitem que as razes continuem exportando gua e sais minerais para a parte area. Extrado de www.cpa.unicamp.br/sbfv

Ainda no sculo XVIII consideravam-se que as correntes de seiva ascendente e descendente moviam-se no xilema.

Em 1837, Hartig descobriu os tubos crivados no floema secundrio de espcies arbreas, considerando que os mesmos eram os canais de movimento da seiva elaborada. 23 anos depois, Hartig observou a ocorrncia de exsudao de seiva que este estava relacionado com a corrente descendente originria das folhas, verificando que ele continha at 33 % de acar. Somente em 1930 as idias de Hartig receberam o devido reconhecimento como resultado de novos experimentos envolvendo anelamento, enxertia, sombreamento da folhagem e remoo das folhas.

Estudou-se mais detalhadamente com o advento da microscopia eletrnica e com a utilizao de corantes fluorescentes e radioistopos como: 14C, 13C, 13P, 35S, dentre outros usados como traadores radioativos. A aplicao simultnea de 13C na folha e de 32P no sistema radicular demonstrou que o anelamento do floema no interfere com o movimento de substncias no xilema. O movimento descendente do 13C assimilado impedido pelo anelamento, enquanto o transporte ascendente do 32P no. Em 1945 Rabideau e Burr acondicionaram folhas de feijoeiro, realizando fotossntese no interior de uma cmara de vidro com a introduo de 13CO2, e com o bloqueamento do floema comprovou a translocao dos fotoassimilados contendo 13 C pelo floema. A sacarose marcada com 14C no s tem confirmado o movimento destas substncias no floema, como tambm tm demonstrado de forma conclusiva que os acares so transportados nos tubos crivados.

Figura acima: translocao de solutos orgnicos em uma folha de fava (Vicia faba) com a utilizao de corantes fluorescentes vermelho (que cora as membranas) e verde (que cora protenas-P). Figura abaixo: experincia realizada com a utilizao do istopo radioativo carbono 14 (14C), atravs da incorporao de 14CO2 em folhas de beterraba (Beta vulgaris) produo de fotoassimilados marcados com 14C e rotas de translocao dos assimilados das fontes para os drenos. (extrado Taiz & Zeiger, 2005)

Experincia de Rabideau e Burr (1945)

CMARA DE VIDRO

13

CO2

Fonte

Utilizao do carbono 13, do gs carbnico (13CO2), Rabideau e Burr comprovaram a translocao de assimilados no floema.

OS AFDEOS Pequenos insetos sugadores que parasitam os canais de translocao da seiva orgnica comprovao do floema como condutor de assimilados orgnicos. Introduo de estruturas bucais (estiletes) no caule ou nas folhas, at que a ponta perfure um tubo crivado. A presso de turgor fora a seiva pelo trato digestivo que sai na extremidade posterior como gotculas de uma soluo aucarada. OS PESQUISADORES Durante a alimentao os afdeos so anestesiados e separados dos seus estiletes, a exsudao da seiva do tubo crivado sai continuamente. Anlises do exsudato coletado com uma micropipeta revelou que a seiva do tubo contm de 10 a 25% de matria seca, sendo 90% dela acar (principalmente sacarose) e menos de 1% de aminocidos e outras substncias contendo nitrognio. Esse mtodo biolgico estabelece a localizao das clulas funcionais do floema e permite obter amostras da seiva orgnica sem nenhum tipo de contaminao.

Utilizao dos Afdeos na translocao orgnica

O afdeo Longistigma caryae alimentando-se no caule da Tlia (Tilia americana). Gotculas de secreo aucarada vista saindo do afdeo. Esta soluo altamente rica em sacarose, que por sua vez ser consumida por formigas. Estas conseguem capturar alguns afdeos e mant-los presos no formigueiro numa relao de sinfilia denominada esclavagismo. Extrado de Raven, P.H; Evert, R.F & Eichhorn, S.E Biologia Vegetal, 2001.

Esclavagismo Formigas Soluo Aucarada rica em sacarose

Objetivos
Conhecer os aspectos anatmicos e fisiolgicos do floema atravs da anlise ultraestrutural dos elementos de tubo crivado e clulas companheiras. Determinar os mecanismos de transporte de solutos orgnicos no floema Identificar as substncias transportadas no floema das fontes para os respectivos drenos Relacionar a translocao no floema com a produtividade vegetal Contribuir para o acervo material das disciplinas anatomia, morfologia, fisiologia vegetal e bioqumica voltadas para o ensino da graduao e ps-graduao.

Caractersticas do Floema

CONCEITO: Tecido de conduo transporte e distribuio de nutrientes reas de sntese ou rgos de reserva

reas de consumo ou armazenamento

FOLHAS NOVAS

FLORES FRUTOS SEMENTES

Caractersticas do Floema
Constituio: Conjunto de clulas vivas especializadas: - elementos crivados - clulas companheiras - clulas do parnquima vascular - fibras, escleredes e clulas lactferas Origem: A partir da diferenciao das clulas do cmbio vascular em direo ao exterior, dispondo-a na parte mais externa da rea vascular - origem primria (protofloema) - origem secundria (floema).

Caractersticas do Floema
Origem celular: Uma clula meristemtica no cmbio
vascular divide-se longitudinalmente, sendo que uma das clulas-filhas se diferencia em um elemento crivado e a outra clula-filha se diferencia em uma ou mais clulas companheiras.

Tubos crivados (TCs): clulas vivas que contm mitocndrias, plastdeos e retculo endoplasmtico liso. Contudo perdem seu ncleo e tonoplasto durante o desenvolvimento. Cada TC tem uma ou mais clulas companheiras (CC). Na maturidade, essas clulas irms permanecem interligadas por plasmodesmas. Componentes presentes nos TCs: So a calose e a protena P (encontradas em dicotiledneas e muitas monocotiledneas, mas est ausente em gimnospermas). Clulas Companheiras: So fonte de ATP e de diversas substncias para os TCs.

A protena P constituda de 2 subunidades: PP1 e PP2. A PP1 um filamento do floema e PP2 uma lectina do floema. As 2 subunidades proticas so sintetizadas nas CC. Uma das funes da protena P selar os poros dos TCs que so danificados. Os TCs esto sob continua presso e as protenas P so importantes para que o contedo transportado no floema no extravase. A calose um -1,3 glucano, que tambm serve para selar os TCs, sendo, contudo uma soluo a longo prazo. A calose sintetizada no TC em resposta a um dano, incio de dormncia ou alta temperatura. Quando o TC se recupera, a calose desaparece. A calose sintetase a enzima que produz calose, localiza-se na parede celular e reage com anilina azul.
Figura 7: Acima, maturao de um tubo crivado. Abaixo, 2 elementos de tubos crivados maduros

Alocao de Assimilados
Conceito: a regulao da diviso do carbono fixado entre as vrias vias metablicas. Ela compreende o armazenamento, a utilizao e o transporte do carbono fixado. Destinos metablicos do carbono fixado: a utilizao na respirao, sntese de reservas e sntese de materiais estruturais (parede celular,lignificao, etc.) O processo de alocao pode ocorrer tanto na fonte como no dreno. - Fontes: aps a fotossntese, sob a forma de amido nos cloroplastos e sacarose nos vacolos (noite) A regulao entre a sntese de amido ou de sacarose um processo regulado de modo competitivo nos vegetais. A sacarose sintetizada no citosol, a triose fosfato destinada para isso deve vir do cloroplasto. Ao mesmo tempo, a sntese de ATP no cloroplasto requer um suprimento de fosfato vindo do citosol.

O translocador de fosfato o responsvel pela troca entre o fosfato (ou fosfato inorgnico Pi) vindo da sntese da sacarose no citoplasma para a sntese de ATP nos cloroplastos e a triose fosfato vinda do cloroplasto para a sntese de sacarose. As enzimas chaves na biossntese de sacarose no citoplasma so a sacarose fosfato sintase (SPS) e a frutose -1,6- bifosfatase. No cloroplasto, a enzima chave para na sntese do amido a ADP-glicose pirofosfatase A ADP-glicose pirofosfatase inibida por fsforo inorgnico (P.i). Se o nvel de P.i alto no citossol, ele ser trocado por triose fosfato para a sntese de sacarose e a sntese de amido ser inibia
Figura : A sntese de sacarose libera fosfato (Pi) no citoplasma e o Pi trocado com a triose fosfato pelo translocador de fosfato (TPi) favorecendo a contnua sntese de sacarose. A luz tambm afeta a alocao de assimilados, sendo que ela promove a desfosforilao da enzima SPS, tornando-a ativa Nodificado e Taiz $ Zeiger; e www.cpa.unicamp.br/sbfv.

Partio de Assimilados
Conceito: processo de redistribuio de nutrientes (inorgnicos e orgnicos) entre as vrias partes da planta atravs do floema, sendo importante para que todos os rgos sejam supridos. A fora motriz que transporta os solutos inorgnicos a transpirao,porm os nutrientes provenientes do solo tendem a se acumular nos rgos que transpiram mais, como as folhas maduras, em detrimento dos que transpiram menos , como os brotos novos e frutos. Para corrigir isso, os vegetais redistribuem os nutrientes de um rgo para outro atravs do floema.
O grfico ao lado fornece um exemplo de distribuio de nutrientes (partio de assimilados) mveis e imveis no floema entre as folhas e os frutos de tomateiro. Note que os elementos mveis no floema (nitrognio, fsforo e potssio) tendem a se acumular nos frutos, mas os que no se movem (Clcio) ficam retidos nas folhas. Nutrientes como Ca=2, SO4- e Fe ficam em baixas concentraes. Elaborado a partir de dados apresentado por Adams, 1986 apud castro, Kluge & Peres, 2005). www.cpa.unicamp.br/sbfv.

A partio de nutrientes feita atravs do floema segue um critrio relativamente simples: ela feita no sentido da fonte para o dreno, sendo que os drenos mais fortes recebem mais nutrientes. Fonte: qualquer rgo exportador de nutrientes,tipicamente folhas maduras expandidas, que so capazes de produzir fotossintatos em excesso para as necessidades. Os rgos de reserva exportadores tambm so fontes Em plantas bianuais, no primeiro ano o rgo de reserva funciona como dreno e no segundo como fonte. Muitas razes tuberosas so resultados da seleo de plantas bianuais que passaram a ser drenos permanentes (beterraba e cenoura)

Drenos: rgos no fotossintticos do vegetais e que portanto no produzem fotossintatos em quantidades suficientes para sua prprias necessidades de crescimento ou de reserva. Exemplo de Drenos: tecidos vegetativos em crescimento (pices caulinares e radiculares), tecidos de armazenamento quanto esto importando assimilados (razes e caules) e unidades de reproduo e disperso (frutos e sementes).

Fatores que definem a fora do Dreno so: Proximidade: Normalmente as fontes translocam nutrientes para os drenos que esto mais prximos dela. Como critrio geral, as folhas da poro superior das plantas costumam translocar nutrientes para o folhas novas e caules em crescimento, as folhas da poro basal exportam para o sistema radicular. Desenvolvimento: Durante a fase vegetativa ao maiores drenos so os pices radiculares e pices caulinares.Na fase reprodutiva os frutos se tornam dominantes. Conexo vascular: fontes translocam assimilados preferencialmente para drenos com os quais elas tm conexo vascular direta. Pode-se levar em conta alguns desses critrios para o manejo correto de culturas a fim de se aumentar a fora dos drenos desejveis e conseqentemente a produtividade.
Figura: Modelo esquemtico fonte dreno: folhas mais velhas e outras folhas so fontes para o desenvolvimento de flores e frutos

Mecanismos de Transporte no Floema

Fluxo de Massa ou Presso Fluxo Eletrosmtico Corrente Protoplasmtica Protenas Contrcteis

H2 O

H2 O

H2 O H2 O

H2 O

H2 O

Carregamento do Floema
Envolve o movimento dos produtos dos cloroplastos nas clulas do mesfilo para as clulas do tubo crivado (TC) Existem dois tipos principais de carregamento: simplstico (atravs de plasmodesmas) e o apoplstico (os acares presentes no espao intercelular e na parede celular devem ser transportados ativamente para atravessarem a membrana citoplasmtica e entrarem no complexo TC CC. A via apoplstica ocorre em plantas que possuem CC comuns ou clulas de transferncia nas nervuras terminais. Essas espcies transportam quase que exclusivamente sacarose (famlias: Solanaceae (batata, tomateiro), Fabaceaea (feijo, ervilha), Chenopodiaceae (beterraba), Asteraceae, etc.. A via simplstica ocorre em plantas que possuem CC intermedirias. Essas espcies transportam 20 a 80% de seus acares na forma de rafinose e/ou estaquiose, alm de sacarose. (famlias: Cucurbitaceae (abobrinha, melo), Labiatae (Coleus blumei) e Convolvulaceae

Carregamento do Floema por via Simplstica

GLICOSE FRUTOSE GALACTOSE

SACAROSE

RAFINOSE

Carregamento do Floema por via Apoplstica

Apoplasto

Citoplasma

Descarregamento do Floema

Descarregamento do Floema

Descarregamento do Floema
APOPLASTO

Descarregamento do Floema

APOPLASTO

CITOPLASMA

Substncias Transportadas
A concentrao de sacarose transportada varia entre 0,3 a 0,9 M. Alm da sacarose, o floema transloca outros acares no redutores (pois so menos reativos), tais como: rafinose (sacarose + galactose), estaquiose (sacarose + 2 galactoses) e verbascose (sacarose + 3 galactoses). Acares cujos grupos aldedo e cetonas foram reduzidos a lcool (manitol, sorbitol) tambm so translocados O nitrognio ocorre no floema na forma de aminocidos (glutamato e aspartato) e aminas (glutamina, asparagina), mas nunca na forma de nitrato. Protenas essenciais para o funcionamento celular (tiorredoxina, quinases, ubiquitina, chaperonas) tambm so translocadas. O floema tambm transporta substncias sinalizadoras, sendo importante na comunicao entre as vrias partes das plantas. Entre as substncias sinalizadoras transportadas no floema, esto os hormnios vegetais do tipo auxina, giberelina, citocinina e cido abscsico. Outro importante sinal transportado pelo floema o RNA mensageiro (mRNA). A gua a substncia mais abundante transportada no floema. Os solutos translocados, sobretudo carboidratos, esto dissolvidos em gua. Apesar do floema no transportar nitrato, ele transporta muitos nutrientes minerais, tais como: Mg2+,PO43-, Cl- e K+. , o floema tambm transporta outras macromolculas como peptdeos (ex. sistemina) e partculas virais

Velocidades de Transporte
Em geral, as velocidades medidas por vrias tcnicas so, em mdia, da ordem de 10 a 100 cm h-1, com obtenes ocasionais de 300 cm h-1, em plntulas jovens. As velocidades de transporte no floema so bastante altas, muito alm da taxa de difuso em grandes distncias. Portanto, qualquer mecanismo proposto para translocao no floema deve levar em conta essas altas velocidades.

PLANTAS
Metasequia Batata Beterraba Feijoeiro Cucrbita sp. Trigo Cana-de-acar

VELOCIDADE(cm. H-)
48 - 60 20 - 80 50 - 135 107 250 300 100 240 - 350

Poda e Partio de Assimilados

A poda uma tcnica de manipulao de fontes e drenos utilizada por horticultores com a finalidade de modificar a partio de assimilados. Tem como objetivo deslocar os fotoassimilados para os drenos de interesse e conseqentemente aumentar a produtividade. comum eliminar - se os ramos ladres em fruteiras perenes e brotaes laterais em culturas anuais de tomateiro. A poda til para quebrar a dominncia apical em plantas ornamentais e frutferas para incrementar o florescimento e a melhor produo dos frutos.
Figura 22 : Prtica do anelamento na produo de uva (videiras). Nessa cultura, faz-se o anelamento dos ramos que contm racemos ainda em flor para provoca a reteno dos assimilados. Com isto, ocorre um aumento na quantidade de assimilados nesse ramo que translocado para o dreno de interesse. ( o caso dos frutos) conseqentemente ocorre a melhoria na produo e na qualidade das uvas produzidas naquele cacho. Extrado de www.cpa.unicamp.br/sbfv

Elementos de tubos crivados maduros unidos, formando um tubo crivado. Com destaque para as placas crivadas e as reas laterais crivadas. Extrado de Taiz & Zeiger, 2004; Raven; Evert & Eichorn, Biologia vegetal, 2001.

Seco transversal de caules de rvores revelando o crescimento primrio e secundrio. O floema e o xilema primrios so formados diretamente atravs da diferenciao do meristema apical. Porm o floema e xilema secundrios so formados pelo cmbio, o qual diferencia ao mesmo tempo clulas de floema para fora (centrifugamente) e clulas de xilema para dentro (centrpetamente). Extrado de Raven, P.H; Evert, R.F & Eichhorn, S.E Biologia Vegetal, 2001 e www.cpa.unicamp.br/sbfv.