FACULDADES METROPOLITANAS UNIDAS CURSO: FARMCIA DISCIPLINA: BIOQUMICA CLNICA PROFESSORA: CARMEN VINAGRE Ana Carolina Sakamoto Bruno

Joseph Camila C. Almeida Rosiane Cavalcante Roney Amrico

RELATRIO Determinao colesterol no soro

SO PAULO 2012

Introduo O colesterol uma lcool integrante da frmula de alguns lipdios, encontrado nas membranas celulares de todos os tecidos do corpo humano,que transportado no plasma sanguneo de todos os animais. Pequenas quantidades (formas clivadas) de colesterol tambm so encontradas nas membranas celulares das plantas. Tambm uma reagente necessrio biossntese de vrios hormnios, da vitamina D e do cido biliar. O nome de origina do grego chole- (bile) e stereos (slido) sufixo qumico ol para um lcool, j que os pesquisadores identificaram o colesterol pela primeira vez na sua forma slida em pedras de vesculas biliar em 1784. O colesterol pode ser obtido pela dieta, porm a maior parte do colesterol presente no corpo sintetizada pelo organismo, sendo apenas uma pequena parte adquirida pela dieta. Portanto, ao contrrio de como se pensava antigamente, o nvel de colesterol no sangue no aumentado ao se aumentar a quantidade de colesterol na dieta. O colesterol mais abundante nos tecidos que mais sintetizam ou tm membranas densamente agrupadas em maior nmero, como o fgado, medula espinhal, crebro e placas ateromatosas (nas artrias). O colesterol tem papel central em muitos processos bioqumicos, mas mais conhecido pela associao existente entre doenas cardiovasculares e as diversas lipoprotenas que o transportam, e os altos nveis de colesterol no sangue (hipercolesterolemia). Colesterol insolvel em gua e, consequentemente, insolvel no sangue. Para ser transportado atravs da corrente sangunea ele se liga a diversos tipos de lipoprotenas, partculas esfricas que tem sua superfcie exterior composta principalmente por protenas hidrossolveis. Existem vrios tipos de lipoprotena, e elas so classificadas de acordo com sua densidade. As duas principais lipoprotenas usadas para diagnstico dos nveis de colesterol so:

Lipoprotenas de baixa densidade (Low Density Lipoproteins ou LDL): acredita-se que so a classe malfica ao ser humano, por serem capazes de transportar o colesterol do fgado at as clulas de vrios outros tecidos. Nos ltimos anos, o termo colesterol ruim tem sido usado para referir ao LDL que, de acordo com a hiptese de Rudolf

Virchow,

acredita-se

ter

aes

danosas

(formao

de

placas

arterosclerticas nos vaoss sanguneos). Lipoprotenas de alta densidade (High Density Lipoproteins ou HDL): acredita-se que so capazes de absorver os cristais de colesterol, que comeam a ser depositados nas paredes arteriais (retardando o processo aterosclertico). Tem sido usado o termo colesterol bom para referir ao HDL, que acredita-se que tem aes benficas.

Objetivo Determinar colesterol em amostras de soro.

Materiais Espectrofotmetro Centrfuga Banho-maria a 35C Pipetador e ponteira Galeria Tubo de ensaio Material para colheita de sangue Kit de colesterol Reagente

Mtodos Colesterol Foi colhida uma amostra de sangue e adicionada em um tubo de ensaio, logo em seguida foi levada a uma centrfuga por 5 minutos. Foram separados trs tubos de ensaio e foram identificados com as letras B (branco), T (teste) e P (padro). Retirou a amostra de dentro da centrfuga e foi colhido o soro. Foram pipetados os seguintes volumes nos trs tubos de ensaio: B 2,0 mL P 2,0 mL 2,0 L T 2,0 mL 2,0 L

Reagente Reagente padro colesterol Soro

Em seguida os tubos de ensaio foram homogeneizados e levados ao banhomaria por 10 minutos 37C. Em seguida foram levadas ao espectrofotmetro e lida a absorbncia da amostra e do padro em 500 nm e acertando o zero com o branco. HDL-C Em um tubo cnico foi inserido 250 L do plasma e 250 L do reagente precipitante (kit) e logo em seguida foi levado centrfuga por 15 minutos. Retirou a amostra de dentro da centrfuga e foi colhido o sobrenadante (HDL). Foram pipetados os seguintes volumes nos trs tubos de ensaio: B 2,0 mL P 2,0 mL 100 L T 2,0 mL 100 L

Reagente de colesterol Reagente padro HDL Amostra (sobrenadante)

Em seguida os tubos de ensaio foram homogeneizados e levados ao banhomaria por 10 minutos 37C. Em seguida foram levadas ao espectrofotmetro e lida a absorbncia da amostra e do padro em 500 nm e acertando o zero com o branco. Resultados e discusses

Aps lida a absorbncia, foram obtidos os seguintes valores atravs do clculo abaixo: Colesterol: [A] = Abs A x [P] Abs P [A] = 140 x 200 131 [A] = 213,74 mg/dL HDL-C [A] = Abs A x [P] Abs P [A] = 84 x 40 x 2 113 [A] = 59,47mg/dL

Concluso

Os valores de referencia para colesterol : Desejvel : At 200 Discretamente elevado : 200 a 239 Elevado : Maior ou igual 240 E para o HDL-C: Desejvel : Maior ou igual 60 Indesejvel : At 40 Portanto de acordo com os valores de referencia para colesterol e os experimentos realizados em aula pratica o valor do colesterol esta um pouco elevado, mas temos que considerar que a amostra no foi obtida de um individuo em jejum e o valor do HDL esta o desejvel, pois est muito prximo de 60mg/dL.

Bibliografia

PARADA, C; JARROUGE, M; MARTIN, N. Bioqumica Bsica 9 ed. So Paulo: Editora MNP Ltda., 2010. Biossntese do Colesterol. Disponvel em <http://www.slideshare.net/JuciVasconcelos/bioqumica-ii-12-biossntese-docolesterol-arlindo-netto> acesso em 01/09/2012 Colesterol e triglicrides. Disponvel em <http://www.portalendocrino.com.br/doencas_colesterol.shtml> acesso em 02/09/2012 Valores de referencia. Disponvel em < http://www.endoclinicasp.com.br/exames-que-realizamos/colesterol-total-efracoes/> acesso em 03/09/2012