CENTRO UNIVERSITRIO DAS FACULDADES METROPOLITANAS UNIDAS FMU DEPARTAMENTO DE ENGENHARIA - PROJETO INTEGRADO

Tcnicas microbiolgicas bsicas.

Nome: Fernando dos Santos Braga Nome: Guilherme de Freitas Nome: Chico Laismar Prof Patricia - Orientador
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Depto de Engenharia

Resumo

Palavras-chave: Tcnicas. Microrganismos. Desinfeco. Esterilizao.

Introduo O objetivo do presente trabalho .

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Objetivo O projeto tende realizar.

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O que so micro-organismos. Os microrganismos so ubquos, isto , esto presentes em todo o lado. Por isso, para obter e manter uma cultura pura essencial evitar que outros microrganismos (contaminantes), entrem em contacto com ela. Quais so as Tcnicas. O objetivo de evitar a ocorrncia de contaminaes, o micro bilogo recorre a tcnicas de (assepsia, esterilizao e desinfeco) dos materiais que usa no manuseamento das culturas puras de microrganismos. Estas tcnicas so crticas no controle e preveno do desenvolvimento de microrganismos, quer seja no laboratrio quer em processos industriais, nomeadamente nas indstrias alimentar e farmacutica, ou na preveno de doenas infecciosas. Tcnicas de Esterilizao e Desinfeco 1. Esterilizao: Em Microbiologia importante esterilizao de meios, solues e material de vidro ou metal que utilizado de vrias formas. Uma das formas de esterilizao obtm atravs do uso do calor mido, para grandes quantidades de meios, ou de uma panela de presso, para pequenas quantidades de meios. Um produto microbiologicamente estril quando no contem nenhuma forma de microrganismo vivo. 2. Esterilizao por calor mido: 1. Autoclavagem Faz-se atravs do autoclave cujo funcionamento idntico ao da panela de presso sendo a temperatura necessria para esterilizao de 121C, e o tempo de esterilizao de cerca de 15 minutos. Este tempo de esterilizao dever ser aumentado quando se enche bastante o autoclave com meios para esterilizar. Existem vrios tipos de autoclaves verticais ou horizontais.

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A utilizao de calor em ambiente mido um dos mtodos mais eficazes de destruio de microrganismos. A morte das clulas microbianas por ao do calor mido resulta da desnaturao das protenas e da desestabilizao da membrana citoplasmtica. Ocorre quando as clulas so sujeitas a temperaturas superiores temperatura mxima de crescimento dos microrganismos em causa. A esterilizao por calor mido efetuada em autoclave (figura 1), que consiste numa cmara com vapor de gua saturado presso de 1atm at acima da presso atmosfrica, a que corresponde em locais ao nvel do mar, uma temperatura de ebulio da gua de 121C. No laboratrio de Microbiologia, usual sujeitar o material a esterilizar a 121C (1 atm; presso relativa) durante 15 minutos, de modo a assegurar a morte de todas as formas de vida microbianas, incluindo a dos endsporos bacterianos, mais resistentes ao calor que as clulas vegetativas. Contudo, o tempo necessrio para se esterilizar convenientemente os materiais, a esta temperatura, depende da natureza do material a esterilizar e/ou do seu volume. O calor mido sob presso utilizado na esterilizao de meios de cultura que no contenham componentes termolbeis e na esterilizao de material de plstico e de vidro a utilizar nos trabalhos experimentais de Microbiologia. tambm usado na descontaminao de roupas e instrumentos mdicos e cirrgicos, assim como de diversos materiais, reutilizveis ou descartveis, contaminados com culturas de clulas viveis, antes de serem lavados ou colocados no lixo. Objetivo: morte de todos os possveis organismos vivos. 3. Tindalizao Este mtodo consiste numa esterilizao fracionada em que o meio sofre 3 aquecimentos em 3 dias consecutivos, para destruio de formas vegetativas bacterianas que evoluem de esporos. 4

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Utiliza temperaturas inferiores a 100C, e faz-se em banho-maria, onde se mergulham os frascos de meio a esterilizar hermeticamente fechados, durante cerca de 1h, repetindo-se o tratamento em 3 dias consecutivos. Nesse processo, o aquecimento feito de maneira descontnua. Aps o acondicionamento das matrias primas alimentcias, a serem submetidas ao tratamento, em recipiente fechado, o produto submetido ao tratamento trmico. Dependendo de cada produto e do rigor trmico desejado, as temperaturas variam de 60 a 90 C, durante alguns minutos. As clulas bacterianas que se encontram na forma vegetativa so destrudas, porm os esporos sobrevivem. Depois do resfriamento, os esporos entram em processo de germinao e depois de 24 horas a operao repetida. O nmero de operaes pode variar de 3 a 12 vezes at a obteno da esterilizao completa. A vantagem desse processo que podem ser mantidos praticamente todos os nutrientes e as qualidades organolpticas do produto, em propores maiores do que quando se utilizam outros tratamentos trmicos.

Mtodos utilizados para esterilizao e conservao de alimentos. Objetivo: Eliminao de formas esporuladas, as quais germinam quando submetidas a temperaturas de 100C, resultando desta germinao as formas vegetativas no resistentes a essa temperatura. 1. Pasteurizao: Esterilizao utilizando uma temperatura de geralmente 57 a 600 C em banho-maria. Objetivo: eliminao de microrganismos sensveis ao calor, entre estes, estirpes patognicas, sem adulterao das qualidades do produto a pasteurizar. um mtodo para eliminar a flora patognica e, com isso conservar os alimentos por mais tempo. As bactrias so micro-organismos que podem transmitir doenas ao ser humano. Esse processo inativa as fosfatases (enzima encontrada no leite que no submetido a nenhum tratamento trmico), reduz o nmero total de bactrias e destri as patognicas, como o bacilo tuberculoso, as salmonelas e os estreptococos, entre outras.Existem vrios tipos de pasteurizao consoante o tempo e a temperatura utilizada: pasteurizao prolongada (30 minutos a 62-63C); Pasteurizao elevada (1 minuto a 85 C, em placas aquecedoras); e pasteurizao rpida (40 segundos a 71-74 C). Na pasteurizao, o leite elevado a uma temperatura de 72 e 75 graus centgrados por um tempo de 15 a 20 segundos e, em seguida, resfriado rapidamente a 3 graus centgrados para garantir a conservao do A assepsia extremamente importante na microbiologia. Entende-se por assepsia todas as condies, gestos e atitudes tendentes a manterem o estado de ausncia de microrganismos contaminantes no meio em que atua. 5

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Alguns instrumentos de disseco como tesouras, pinas podem ser esterilizadas mergulhando em 70% de lcool (70 ml de etanol absoluto e 30 ml de gua destilada). O material contaminado, por exemplo, as ansas que tocaram em cultura de bactrias, devem ser descontaminados atravs da chama de um bico de Bunsen, aparelho igualmente necessrio num laboratrio de microbiologia. As bocas de tubos contendo cultura de bactrias, as bocas de frascos de vidro contendo os meios de cultura, devem sempre que destapados ser chamuscados chama do Bunsen. Meios contaminados com as culturas de bactrias devem ser descontaminados por autoclavagem, e em seguida despejados em sacos plsticos fortes. Placas de petri de plstico com culturas, bem como outro material de plstico utilizado, devem ser colocados em sacos de plstico e enviados para incinerao. O material de vidro contaminado por sua vez aps autoclavagem deve ser lavado com lixvia e detergente, passado por gua destilada e seco na estufa de secagem. As pipetas de vidro utilizadas no laboratrio devero ser imersas numa proveta de plstico grande contendo lixvia ou outro liquido desinfetante, e posteriormente lavadas e autoclavadas. As bancadas devem ser esterilizadas passando um lquido desinfetante, e idealmente o laboratrio deve ser isolado, ou ento o trabalho dever ser realizado dentro de uma cmara de fluxo laminar. 2. Esterilizao por calor seco Pode constar do processo de chamuscar o material chama do Bunsen, o uso do calor seco, por no ser penetrante como o calor mido, requer o uso de temperaturas muito elevadas e tempo de exposio muito prolongado, por isso este mtodo de esterilizao s deve ser utilizado quando o contato com vapor inadequado. Cabe observar tambm que o uso de temperaturas muito elevadas pode interferir na estabilidade de alguns materiais, como por exemplo o ao quando submetido a temperaturas muito elevadas perde a tmpera; para outros materiais como borracha e tecidos alm da temperatura empregada ser altamente destrutiva, o poder de penetrao do calor seco baixo, sendo assim a esterilizao por este mtodo inadequada. Os materiais indicados para serem esterilizados por este mtodo so instrumentos de ponta ou de corte, que podem ser oxidados pelo vapor, vidrarias, leos e pomadas. A esterilizao atravs do calor seco pode ser alcanada pelos seguintes mtodos: Flambagem: aquece-se o material, principalmente fios de platina e pinas, na chama do bico de gs, aquecendo-os at ao rubro. Este mtodo elimina apenas as formas vegetativas dos microrganismos, no sendo portanto considerado um mtodo de esterilizao. Este mtodo no muito seguro e devido ao longo tempo de exposio acaba estragando o material. Incinerao: um mtodo destrutivo para os materiais, eficiente na destruio de matria orgnica e lixo hospitalar.

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Voc est aqui: Pgina Inicial Tratamento e Destinao de Resduos Incinerao

Incinerao

A Incinerao um processo de destruio trmica realizado sob alta temperatura - 900 a 1200 C com tempo de residncia controlada - e utilizado para o tratamento de resduos de alta periculosidade, ou que necessitam de destruio completa e segura.

PROCESSO
Nesta tecnologia ocorre a decomposio trmica via oxidao alta temperatura da parcela orgnica dos resduos, transformando-a em uma fase gasosa e outra slida, reduzindo o volume, o peso e as caractersticas de periculosidade dos resduos. Todos os materiais provenientes deste processo so tratados com as mais modernas tecnologias antes de sua destinao final. As escrias e cinzas so dispostas em Aterro prprio, os efluentes lquidos so encaminhados para estao de tratamento, onde 100% retornaro processo, e os gases oriundos da queima so tratados e monitorados on-line, sob os seguintes parmetros: vazo, temperatura, nveis de O2,CO e tambm ndices de (Nmeros de Oxidao NOx), (Dixido de Enxofre SOx) e materias particulado.

Raios infravermelhos: utiliza-se de lmpadas que emitem radiao infravermelha, essa radiao aquece a superfcie exposta a uma temperatura de cerca de 180O C. Estufa de ar quente: constitui-se no uso de estufas eltricas. o mtodo mais utilizado dentre os de esterilizao por calor seco. Como o processo de esterilizao em estufas de ar quente o mtodo mais utilizado dentre os de esterilizao por calor seco, iremos descrever o equipamento utilizado neste mtodo, que a estufa ou forno de Pasteur. Estes so equipados com um termmetro que mostra temperatura do 7

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interior da cmara; um termostato, onde se programa a temperatura desejada; uma lmpada que mostra a situao de aquecimento ou a estabilizao da temperatura interna da cmara; algumas com um ventilador para promover a circulao do ar, garantindo um aquecimento rpido e uniforme na cmara (estufas de conveco mecnica). No h um controlador de tempo, este controle feito pelo operador do aparelho. As estufas podem ser divididas em dois tipos: as de conveco por gravidade e a de conveco mecnica. As estufas de conveco por gravidade possuem uma resistncia eltrica na parte inferior da cmara e um orifcio na parte superior onde ocorre a drenagem do ar frio que empurrado pelo ar quente medida que o ar esquenta dentro da cmara. Neste processo qualquer obstculo que esteja no caminho dificulta a circulao do ar, interferindo na uniformidade da temperatura na cmara. As estufas de conveco mecnica possuem um dispositivo que produz movimento do ar quente, favorecendo a circulao do ar uniformemente e limitando a variao da temperatura nos vrios pontos da cmara em 1o C. Este tipo de estufa reduz o tempo necessrio para que se atinja a temperatura ideal para a esterilizao.

3. Irradiao e Filtrao Outros mtodos de esterilizao incluem a irradiao e a filtrao. A filtrao especialmente utilizada para esterilizao de meios e solues. Unidades de filtrao (acetato) que podem ser posteriormente autoclavadas. 4. Esterilizao Qumica Com substncias volteis, lcool etlico a 70%, com sais metlicos ou compostos orgnicos de metais, como mertiolato e mercurocromo, com halogneos, como o cloro sob a forma de hipoclorito de clcio e o iodo, os cidos e lcalis aumentam a concentrao hidrogeninica do meio e aceleram a taxa de mortalidade dos micro-organismos. Os compostos de amnio quaternrios so atxicos e extremamente enrgicos sobre bactrias e vrus. A glicerina em soluo a 50%, tem utilizao na preservao de alguns vrus, que mantm a sua virulncia ou viabilidade nessa soluo. Os antibiticos so produtos orgnicos no bactericidas, mas bacteriostticos, ou seja, impedem a evoluo de germes. So geralmente produtos do metabolismo de fungos e alguns so produzidos por bactrias. Alguns exemplos de antibiticos: Bacteriostticos: Penicilina, Estreptomicina, Neomicina, Tetraciclina Fungostticos: Micostatina, Fungisone Compostos sulfonamdicos, sulfamidas, so tambm utilizados para bacteriostase em trabalhos de laboratrio.

4. 1.

Concluso 8

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Por fim.

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5. 1.

Referncias

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