3.

3 EXPERIMENTAO APLICADA A PROGRAMAS DE SELEO DE VARIEDADES E MELHORAMENTO GENTICO PARTICIPATIVO DE MILHO

Juliana Bernardi Ogliari, Volmir Kist, Mrcia Terezinha Eli, Henrique Viana e Silva, Antonio Carlos Alves e Walter Simon de Boef
Quando iniciada uma discusso sobre experimentao, em comunidades que se propem a realizar pesquisa participativa, a primeira pergunta a ser feita : - Para que so conduzidos os experimentos? De um modo geral, os experimentos so conduzidos para atender perguntas que, normalmente, no so respondidas pela simples observao. Neste sentido, o experimento uma ferramenta de pesquisa usada para responder questes no conhecidas, ou ainda, para testar princpios ou um conjunto de fatos a respeito de um assunto (hiptese), que podem ser interpretados e explicados a partir da experimentao. Assim como na pesquisa cientfica, a aplicao de tcnicas e princpios experimentais tambm imprescindvel para o sucesso dos programas de pesquisa participativa, onde as investigaes conduzidas por pesquisadores, agricultores e tcnicos locais, so realizadas de forma acoplada s atividades de campo dos agricultores familiares. A complexidade requerida para os desenhos experimentais ser maior em condies heterogneas de ambiente e medida que a expresso das caractersticas de importncia econmica, agronmica, ecolgica, ou de qualquer outro atributo de interesse regional ou local, for mais afetada por tais variaes. Este captulo foi elaborado justamente com a finalidade de aprimorar o conhecimento em tcnicas experimentais teis para o desenvolvimento de um bom trabalho de Manejo Comunitrio da Biodiversidade (MCB), com nfase na conduo de programas de Seleo Participativa de Variedades (SPV) e Melhoramento Gentico Participativo (MGP) de milho. Para tanto, inicialmente sero abordadas questes conceituais sobre os recursos genticos manejados em programas de SPV e MGP pelo NEABio, bem como sobre tcnicas experimentais consideradas essenciais para um bom planejamento dos experimentos de campo. A seguir, sero apresentados os trs princpios da experimentao e os delineamentos experimentais mais comuns em programas de avaliao de milho. A partir da experincia adquirida pelo NEABio com a cultura do milho, o presente texto busca tratar de questes-orientadoras para agricultores-pesquisadores, tcnicos locais e estudantes, que estejam envolvidos em programas participativos de MCB.

Recursos Genticos Vegetais usados em Programas de Pesquisa Formal e Participativo de Milho

Em programas de Avaliao e Recomendao de Cultivares (ARC), conduzidos pelo setor formal de pesquisa, comumente so efetuadas avaliaes e comparaes entre diferentes populaes, em experimentos desenhados especificamente para cada etapa do processo. Os programas de ARC, em geral, envolvem a conduo de Ensaios de Introduo (EI), Ensaios Preliminares (EP) e Ensaios Regionais de Competio de Cultivares (ECC) (Figura 3.10),

conduzidos em diferentes anos e locais, segundo o Zoneamento Agroclimtico definido para cada cultivo. As populaes avaliadas nesses experimentos, em geral, so produtos recentes gerados pelos programas regionais de melhoramento gentico. Alm desses materiais, tambm podem ser includos nesses experimentos, os cultivares melhorados exticos ou as variedades locais (VL) e crioulas (VC) (vide definies de VL e VC, no Boxe 1.1, Captulo 1.1), mantidos em bancos de germoplasma estaduais, nacionais ou internacionais, ou ainda, variedades resgatadas diretamente do campo de cultivo dos agricultores. Os materiais mais promissores, por sua vez, podem ser avaliados em diferentes sistemas de produo, a partir de experimentos denominados Ensaios de Validao de Cultivares (EVC). Esses experimentos so conduzidos com a finalidade de responder quaisquer questes relacionadas ao potencial gentico dos diferentes cultivares frente a fatores biticos (doenas, pragas, associaes simbiticas) e abiticos (acidez do solo, estresse hdrico, temperatura, fotoperodo, baixo fsforo) do ambiente de cultivo e diante de prticas de manejo diferenciadas, segundo o espaamento, a densidade, a fertilizao ou quaisquer outros fatores de interesse do experimentador. Os materiais superiores selecionados nos programas de ARC podem ser registrados junto ao Registro Nacional de Cultivares (RNC) do MAPA (Ministrio da Agricultura e do Abastecimento) e, finalmente, recomendados para cultivo nas reas representadas pelos experimentos, dentro do zoneamento climtico definido para cada cultura. A partir disso, o material multiplicado e mantido pela rede oficial de produtores de sementes autorizada pelo MAPA, aps inscrio junto ao Registro Nacional de Sementes e Mudas (RENASEM).

Programas de Melhoramento Gentico

Ensaios de Introduo (EI)

Bancos de Germoplasma Variedades Locais e Crioulas

Ensaios Preliminares (EP)

diferentes anos e locais

Ensaios Regionais de Competio (ECC) e Validao de Cultivares (EVC)

diferentes anos, locais e sistemas de cultivo

Recomendao de Cultivares
Figura 3.10- Representao das etapas gerais dos programas formais de Avaliao e Recomendao de Cultivares.

De forma similar, os experimentos tambm podem ser utilizados como ferramenta auxiliar e valiosa dos programas formais de Melhoramento Gentico Institucional (MGI). O desenvolvimento de uma nova variedade melhorada de polinizao aberta (VMPA) ou de um cultivar hbrido (CH) de milho (vide definies de VMPA e CH, no Boxe 3.3, Captulo 3.1), por exemplo, um processo que se inicia com a identificao de populaes de elevado potencial. Normalmente, tais populaes so avaliadas em experimentos conduzidos dentro do programa de ARC, ou ainda, a partir de experimentos similares, porm elaborados com a finalidade de caracterizar e avaliar populaes a serem destinadas aos programas MGI. A partir disso, as populaes portadoras de atributos desejveis e transferveis s geraes descendentes, podem ser usadas como populaes-base dos programas de MGI. A Figura 3.11 ilustra as diferentes etapas de avaliao e seleo de gentipos superiores, conduzidas por programas de MGI, em geral, focado em alguns atributos de importncia agronmica e de valor econmico.

Programas de Melhoramento Gentico Institucionais (MGI)

Fonte doadora de genes

Variedades Locais e Crioulas

Avaliao de Cultivares EI EP ECC

Bancos de Germoplasma Internacionais Bancos de Germoplasma Estaduais

Bancos de Germoplasma Nacionais

Recomendao de Cultivares
Fonte doadora de genes

Produo de Sementes de Cultivares Comerciais

Figura 3.11 Representao das etapas gerais de um programa de Melhoramento Gentico Institucional (MGI) e suas fontes de germoplasma

fato que os esforos dos programas de MGI nas ltimas dcadas tm sido direcionados para alguns poucos cultivos economicamente viveis, com elevada produtividade e quase sempre manejados em sistemas agrcolas de elevado consumo de insumos externos s propriedades (Boef e Ogliari, 2007). Em geral, os cultivares modernos tm sido melhorados para se adaptarem ao cultivo em reas favorveis produo e a sistemas onde existe alto consumo de energia e um bom controle sobre os fatores de risco da produo. A expectativa desses programas era de que alguns cultivares desenvolvidos para tais sistemas tambm tivessem um bom comportamento em ambientes rsticos, onde os

fatores de risco eram pouco ou nada controlados pelas novas tecnologias agrcolas emergentes. Entretanto, os efeitos positivos esperados sobre o rendimento de gros quase sempre foram limitados para a maior parte dos cultivos (Boef e Ogliari, 2007), inclusive para a cultura do milho. Particularmente, para os agricultores familiares que viviam em reas marginais de produo, os impactos agroecolgicos e scio-econmicos causados pelos cultivares desenvolvidos pelos programas de MGI foram visivelmente negativos. A pesquisa participativa dos cultivos surgiu nos pases em desenvolvimento, justamente como uma alternativa aos programas de MGI. Na busca de solues para as limitaes de cultivo impostas pelos cultivares modernos, que exigem grande consumo de energia, justificou-se o advento de abordagens de pesquisa participativa destinadas agricultura de base familiar e com o envolvimento de todos os atores locais. Diante dessa nova proposta, os dados gerados a partir de experimentos participativos passam a ter um papel decisivo para a implantao de novos modelos de manejo da agrobiodoversidade. Em programas de Manejo Comunitrio da Biodiversidade (MCB) (Captulo 4.1), por exemplo, o uso de tcnicas experimentais pode ser particularmente til para avaliar o potencial gentico de variedades cultivadas e conservadas pelos agricultores, dentro de programas de Seleo Participativa de Variedades (SPV), bem como para desenvolver populaes mais apropriadas para a agricultura familiar, em programas de Melhoramento Gentico Participativo (MGP). Assim como nos programas de MGI, o desenvolvimento de uma nova variedade em programas de MGP um processo que se inicia com a avaliao e a identificao de populaes de interesse, nesse caso, avaliadas em programas de SPV. Particularmente, nos programas de SPV de milho conduzidos pelos NEABio, o material avaliado nos experimentos so preferencialmente variedades locais (VL) e crioulas (VC), manejadas por agricultores familiares ao longo de muitos anos. Alm das VL e VC, tambm so avaliadas VMPA antigas, que foram posteriormente assumidas e conservadas por agricultores familiares, bem como Populaes Compostas Crioulas (PCC) e Variedades Locais Melhoradas (VLM), desenvolvidas pelos programas de MGP. Nesse texto, o termo Populao Composta Crioula (PCC) ser usado para o produto intencionalmente planejado e desenvolvido por agricultores familiares, com ou sem orientao de tcnicos locais, e que resulta da combinao de duas ou mais VL ou VC entre si ou destas com outras variedades exticas, ou ainda, com populaes derivadas de cultivares comerciais, recentemente introduzidas nas comunidades e multiplicadas pelos agricultores. A base gentica das PCC, portanto, constituda pelas VL ou VC conservadas por agricultores tradicionais, podendo ou no ter alguma contribuio adicional de produtos do melhoramento formal. Assim como ocorre para as VL e VC, se PCC so cultivadas ao longo de muitos anos em agroecossistemas marginais, quase sempre acabam se tornando muito diferentes daqueles cultivares que foram cultivados em reas mais favorveis a produo, principalmente pela adaptao peculiar dos primeiros frente ao estresse provocado por fatores biticos e abiticos. Seja qual for o material mantido pelos agricultores, as variedades testadas nos ensaios de SPV e escolhidas pela comunidade como as preferenciais do ensaio, podem ser multiplicadas pelos programas comunitrios de produo de sementes ou pelos prprios agricultores, para serem usadas diretamente para cultivo, ou ento, para serem direcionadas como populaes-base de um programa de MGP. A base gentica dos programas SPV e MGP conduzidos pelo NEABio, bem como a origem da diversidade introduzida nas comunidades de

agricultores familiares do Oeste de Santa Catarina, esto representadas na Figura 3.12. A escolha do material a ser usado como populao-base do MGP pode ser feita pelos seus valores de uso e cultivo, envolvendo desde atributos de importncia agronmica, adaptativa, nutricional, cultural e at religiosa, ou ainda, por tratar-se de variedade de rara ocorrncia na comunidade e, portanto, ameaada de eroso. Nesse ltimo caso, os programas de MGP podem contribuir de forma decisiva para a conservao da biodiversidade local, agregando novos valores s variedades locais pouco freqentes e aparentemente de pouco uso dentro da comunidade.
VL/VC/PCC/derivados de Cultivares Comerciais Conservao on farm (Unidades de Produo Familiares)

Fonte de diversidade
Feiras de Sementes

Avaliao de Variedades (SPV)

Fonte de diversidade
Cultivares Comercias Agropecurias Bancos de Germoplasma

Troca Vizinhos do Municpio

Bancos Comunitrios de Sementes

Melhoramento Gentico Participativo (MGP)

Conservao ex situ Troca Agricultores de outros Municpios

Fonte de diversidade
Variedade Local Melhorada (VLM)

Figura 3.12 Esquema do programa de Seleo Participativa de Variedades (SPV) e Melhoramento Gentico Participativo (MGP) em comunidades de agricultores do Oeste de Santa Catarina.

Os mtodos usados nos programas de MGP de milho conduzidos pelo NEABio aplicam estratgias de seleo recorrente populacionais, que se baseiam na avaliao de plantas individuais ou no comportamento mdio dos descendentes obtidos da populao-base submetida seleo. A primeira abordagem adotada apenas quando o alvo dos programas de MGP envolve a seleo de caracteres de herana mais simples (caracteres qualitativos), cuja expresso pouco influenciada pelo ambiente, tal como ocorre para a definio da cor do gro (vermelho e descolorido) e do tipo de gro (opaco ou translcido) em milho (Captulo 3.1). A conduo de experimentos nesses casos dispensvel, pois possvel efetuar-se a identificao dos tipos desejveis apenas com base em avaliaes e comparaes visuais entre plantas da populao-base. Por outro lado, a segunda abordagem indicada toda vez que a seleo envolve caracteres de herana mais complexa (caracteres quantitativos), cuja expresso muito

influenciada pelo ambiente, tal como ocorre com o rendimento de gros e seus componentes (Captulo 3.1), resistncia frente a doenas (resistncia horizontal, parcial e durvel) (Captulo 3.2), teor de matria fresca e matria seca da planta e dos gros, dentre tantos outros atributos de importncia para o milho. Nesse caso, a seleo dos tipos mais promissores efetuada com base em avaliaes conduzidas em experimentos, desenhados com o propsito de comparar entre si os descendentes oriundos de certa populao de interesse. Seja qual for os atributos de interesse no milho, os programas de MGP visam desenvolver variedades mais adaptadas e melhoradas para as necessidades da agricultura familiar, sempre respeitando as preferncias indicadas pelos agricultores familiares. Para diferenciar das VMPA produzidas pelos programas de MGI, o termo Variedade Local Melhorada (VLM) ser usado neste texto para referir-se ao produto dos programas de MGP de milho, iniciados a partir da seleo recorrente efetuada dentro de populaes-base representadas por VL, VC e PCC. Essa distino entre VMPA e VLM fundamental, pois a estratgia de multiplicao e manuteno dos produtos desenvolvidos pelos programas de MGP diferente daquela conduzida pelo sistema formal, especialmente para as espcies de polinizao aberta como o milho. Enquanto a produo de sementes comerciais de VMPA feita pelo sistema formal um processo esttico, que visa a manuteno da performance dos cultivares melhorados e recomendados para cultivo, pelo sistema informal, esse processo de produo dinmico (vide Captulo 3.1). Em outras palavras, pela prpria natureza do manejo local, VLM pode perder os ganhos obtidos com os ciclos de seleo recorrente participativa, se os prprios agricultores forem encarregados de multiplicarem, manterem e produzirem suas prprias sementes, A contaminao por plens estranhos por falta de isolamento e a mistura de sementes (migrao), as presses de seleo frente aos fatores bitico e abitico e a prpria seleo efetuada pelos agricultores (seleo), as modificaes genticas casuais (mutaes) e os problemas decorrentes do manejo inadequado (deriva gentica), so alguns fatores responsveis pelas perdas de ganho gentico detalhados no Captulo 3.1. Essas preocupaes tambm foram destacadas recentemente em programas participativos desenvolvidos na Amrica Latina, descritos em Daniel et al (2007).

Tratamentos, Parcelas, Variveis e Erro Experimental

Antes de comentar sobre os trs princpios da experimentao (controle local, repetio e casualizao) importante conceituar os termos tratamento, parcela, erro experimental e varivel, bem como os fatores que afetam o estabelecimento do erro experimental e, portanto, a definio da preciso dos experimentos. Tratamentos do Experimento O que so os tratamentos de um experimento? Os tratamentos podem ser vistos como o objeto de interesse a serem testados e comparados dentro de um experimento. Nos sistemas institucionais, se o objeto da pesquisa tratar-se do desempenho de diferentes cultivares de milho para cultivo em certa regio, os tratamentos do experimento podem ser constitudos por VMPA ou por cultivares hbridos (CH). Neste caso, VMPA e CH so os tratamentos deste experimento, cujas avaliaes quase sempre so efetuadas a partir de caracteres definidos pelos prprios

pesquisadores, com a finalidade de recomendar para cultivo o(s) tratamentos mais promissor(es). Em geral, o potencial desses tratamentos analisado a partir de comparaes efetuadas em relao a uma testemunha usada como padro. Essa testemunha com freqncia um cultivar recomendado pelas instituies de pesquisa pelo seu reconhecido valor agronmico, comercial, ou ainda, pelo seu valor adaptativo na regio de interesse. Na pesquisa participativa, freqente o interesse em se avaliar o comportamento de um conjunto de VL, VC e PCC, em programas de Seleo Participativa de Variedades (SPV), conservadas pelas comunidades rurais nas prprias unidades de produo familiares. Neste caso, o objeto de interesse da pesquisa do programa de SPV so as variedades de milho indicadas pelos prprios agricultores. Supondo que as variedades locais denominadas Roxo, MPA-01, Pixurum-06 e Branco so indicadas para serem comparadas entre si em um programa de SPV, ento a variedade Roxo pode ser reconhecida como um primeiro tratamento (tratamento 1), MPA-01, como um segundo tratamento (tratamento 2), Pixurum-06, como o terceiro tratamento (tratamento 3) e, assim por diante. As comparaes entre tais variedades podem ser efetuadas com base nos caracteres definidos conjuntamente pelos agricultores e pesquisadores, usando como padro de referncia uma testemunha, que pode ser uma VMPA recomendada para a regio, ou ainda, um material reconhecidamente adaptado e com potencial de uso comercial, dentre as prprias VL e VC avaliadas, ou ento, algum produto desenvolvidos pelo programa de MGP. Contudo, os atributos de interesse, nesses casos, nem sempre so restritos aos seus valores de cultivo, mas tambm podem incluir valores de natureza ecolgica, cultural, social e at religiosa. Em programas de MGP de milho, por sua vez, os tratamentos do experimento so constitudos pelos descendentes de plantas-mes de certa populao, avaliada e selecionada anteriormente nos ensaios de SPV. Os descendentes podem usados como unidades de seleo podem ser famlias de meio-irmos (FMI), conforme ilustrado na Figura 3.13, bem como irmos-germanos (FIG) ou famlias endogmicas S1 ou S2 (FES1 ou S2). Alm disso, as famlias superiores com diferentes graus de parentesco tambm podem ser usadas como unidades de recombinao para encerrar o ciclo de seleo recorrente (Boxe 3.11) e, a partir disso, produzir a semente gentica da populao melhorada.

Figura 3.13 Esquema da origem de uma famlia de meio-irmo a partir das sementes de uma espiga da populao-base. O smbolo representa as plantas masculinas doadores de plens e representa a planta-me dos vulos e espiga, geradora da famlia de meio-irmos.

As comparaes entre os tratamentos podem ser efetuadas com base no comportamento mdio das famlias para os caracteres de interesse local, os quais so definidos conjuntamente entre agricultores, tcnicos locais e pesquisadores. Nesse caso, a testemunha usada como padro para as comparaes pode ser a prpria populao original, antes de iniciado os ciclos de seleo recorrente, bem como uma variedade comercial (VMPA) desenvolvida pelos programas de MGI, que seja adaptada e recomendada para a regio do experimento.
Boxe 3.11 Famlias de meio-irmos, irmos-germanos e endogmicas As sementes de cada espiga, que constituem uma famlia de meioirmo, so geradas a partir de uma mistura de plens de vrias plantas prximas planta-me (polinizao natural). As plantas nascidas destas sementes tm em comum a planta-me doadora dos vulos, mas os genitores masculinos so diferentes e desconhecidos, ainda que os mesmos pertenam a mesma populao. As sementes de cada espiga, que constituem uma famlia de irmogermano, so geradas a partir do cruzamento controlado entre duas plantas escolhidas como genitores. As plantas nascidas destas sementes tm em comum a planta-me doadora dos vulos e o genitor masculino doador dos plens. Finalmente, as sementes de cada espiga, que constituem uma famlia endogmica S1, so geradas a partir da autopolinizao controlada de uma planta no endogmica de uma populao de gerao So. As plantas nascidas destas sementes so constitudas a partir dos vulos e plens procedentes de uma nica planta e, por isso, so ditas famlias endogmicas de primeira gerao.

Parcelas ou Unidades Experimentais

O que so as parcelas ou as unidades experimentais de um experimento? A parcela a unidade do experimento que recebe cada tratamento para ser avaliado e, por isso, tambm denominada de unidade experimental. O termo parcela foi criado para designar a unidade de rea de terra usada no experimento. Segundo Vieira (1999), essa unidade de rea, originalmente, era uma faixa de terra, mas tambm podia ser um vaso. Atualmente, o termo parcela tem um significado mais geral e, dependendo do experimento, pode ser constituda por uma folha ou por um conjunto de folhas de uma ou mais plantas, por uma planta, ou ainda, por uma ou mais fileiras contendo vrias plantas. Em experimentos de campo, elaborados para a avaliao de variedades de milho (Programas de SPV), a parcela uma rea de terra, constituda por uma ou mais fileiras de plantas, onde colocada cada variedade. Por outro lado, em experimentos de campo destinados seleo recorrente de famlias de meioirmos de milho (Programas de MGP), a parcela uma rea de terra, onde colocada cada famlia ou unidade de seleo, geralmente, constituda por uma nica fileira de plantas. Isso quer dizer que a parcela pode ter vrios tamanhos, formatos e orientaes na rea experimental, de acordo com a finalidade do experimento, a disponibilidade de recursos humanos, fsicos e financeiros disponveis, a preciso experimental desejada e a magnitude das diferenas a serem detectadas entre tratamentos. Ainda neste captulo, tais aspectos sero discutidos com maior detalhe. Erro Experimental O que erro experimental e como este pode ser minimizado mediante a conduo de experimentos? Os delineamentos experimentais so planejados com o objetivo de minimizar o erro experimental, o qual representa a variao no controlada ou aleatria que ocorre aps a implantao do experimento. Entretanto, importante destacar que possvel ser feito um maior controle dos fatores causadores do erro experimental, antes da implantao do experimento, desde que seja efetuado um bom planejamento do experimento. H duas principais fontes de variao que causam erro experimental em experimentos de campo. A primeira e mais importante aquela devida heterogeneidade do solo e a segunda, devida variabilidade gentica do material biolgico a ser testado no experimento. Ambas as fontes de variao ocorrem em programas de SPV e MGP conduzidos pelo NEABio, especialmente pelo fato dos experimentos de campo serem todos conduzidos nas prprias unidades de produo familiares e a partir de tratamentos, cujo material gentico heterogneo. Todo pesquisador tem conscincia de que praticamente impossvel obter um campo completamente homogneo ou uniforme para instalar um experimento, ainda que a rea experimental esteja situada em uma estao experimental de certa instituio de pesquisa. Todas as reas apresentam, em maior ou menor grau, heterogeneidade derivada das diferentes caractersticas fsicas (textura, estrutura, capacidade de reteno de gua), qumicas (acidez do solo, contedo de matria orgnica, contedo de fsforo, potssio, clcio, etc.) e biolgicas (microflora, microfauna, etc) do solo. Esta heterogeneidade, constatada em reas de campo, est ligada aos processos de formao do solo e a outros fatores decorrentes do manejo e das prticas agronmicas recebidas. A m amostragem gentica efetuada a partir de material biolgico heterogneo outra fonte de erro experimental, conforme refeerido

anteriormente. Nestes casos, so requeridas amostras maiores de plantas para comporem as unidades experimentais, para que o material a ser testado como tratamento do experimento, esteja representado adequadamente. A preciso de um experimento est relacionada magnitude das diferenas entre dois tratamentos que o mesmo permite ou capaz de detectar. Quando as diferenas entre dois tratamentos para uma dada caracterstica so pequenas, o pesquisador tem dificuldade em detect-las (Bernardi, 1986). Particularmente nestes casos, o sucesso de um experimento depende amplamente de um controle efetivo das causas do erro experimental (amostras representativas do material biolgico e heterogeneidade do solo), uma vez que sua magnitude est diretamente relacionada ao grau de confiabilidade dos resultados experimentais. Considerando que as variaes no controladas pelos experimentos de campo (variabilidade aleatria) so decorrentes da heterogeneidade do solo e do material experimental, ento pertinente a aplicao de tcnicas experimentais para reduzir a contribuio destas variaes para o erro experimental. A definio adequada do tamanho, forma e orientao das parcelas de campo, bem como do nmero de repeties, so aspectos que podem contribuir sobremaneira para a minimizao do erro experimental e, por isso, boa prtica inclu-los no planejamento de um experimento. Efeitos do Tamanho, Forma e Orientao da Parcela sobre o Erro Experimental Por que a definio do tamanho, da forma e da orientao das parcelas no campo experimental importante para a reduo do erro experimental? Desde o incio do sculo XX, a dimenso da unidade experimental (parcela) tem merecido a ateno de muitos pesquisadores como fator influente na definio do erro experimental. A parcela pode ter vrios tamanhos e formatos, segundo as finalidades para as quais os experimentos so planejados. As variaes do ambiente da rea experimental, a variabilidade gentica do material usado como tratamento e a magnitude das diferenas a serem detectadas entre tratamentos tambm so outros fatores que podem interferir na definio da forma e dimenso das parcelas. Em experimentos de campo, a utilizao de parcelas pequenas geralmente est associada limitao de recursos humanos, financeiros e at de espao fsico. Nestes casos, o pesquisador busca obter o mximo de informao, por um custo mnimo. Contudo, a opo por parcelas pequenas pode ser inadequada quando o material usado como tratamento geneticamente heterogneo ou, ainda, quando as condies ambientes da rea experimental no so uniformes. Em ambos os casos, os prejuzos podem ser maiores quando a avaliao dos tratamentos feita a partir de caracteres, cuja expresso significativamente afetada pelo ambiente, tal como ocorre para os caracteres quantitativos. O uso de parcelas de maiores tamanhos consenso entre pesquisadores, quando os recursos disponveis para a realizao dos experimentos no forem limitantes. Este procedimento resulta na reduo do erro experimental e, conseqentemente, permite a obteno de estimativas mais confiveis para a mdia dos tratamentos (Bernardi, 1986). Ainda importante considerar que os decrscimos do erro experimental so relativamente mais acentuados para os acrscimos iniciais no tamanho da parcela e, posteriormente, tendem a se estabilizar medida que parcelas de maior tamanho so consideradas no experimento (Chaves, 1984; Chaves & Miranda Filho, 1992; Bernardi, 1986).

De acordo com o material biolgico usado como tratamento, as parcelas devem ser de tal tamanho, que o nmero de plantas seja representativo da variabilidade gentica dos gentipos que constituem a populao testada. A preocupao do pesquisador, portanto, deve ser maior quando o material usado como tratamento tratar-se de material heterogneo. So exemplos de material vegetal heterogneo as FMI, VMPA, VL ou VC, PCC, VLM, hbrido de variedades e populaes sintticas derivadas de hbridos simples, duplos e triplos obtidos a partir de linhagens. Nestes casos, o uso de parcelas pequenas ou de amostragem gentica inadequada pode comprometer o comportamento mdio das plantas contidas em diferentes repeties do mesmo experimento e, consequentemente, o erro experimental pode aumentar. Por outro lado, quando os tratamentos do experimento so linhagens homozigticas ou hbridos simples entre duas linhagens, a amostragem gentica no fonte de erro experimental, pelo fato de tratar-se de material homogneo. Nestes casos, as diferentes repeties de um mesmo tratamento tm o mesmo potencial gentico para a manifestao dos caracteres de interesse. Ainda assim, um nmero mnimo de plantas deve ser exigido devido variao indesejada de ambiente existente dentro das parcelas. Seja qual for o tamanho da parcela, para que suas dimenses sejam consideradas ideais, as mesmas devem representar com fidelidade o tratamento submetido ao teste. Isso significa que o comportamento apresentado pelo tratamento dentro do experimento deve corresponder ao comportamento que o mesmo teria quando utilizado em grande escala. fato que o coeficiente de herdabilidade, especialmente dos caracteres quantitativos, e a eficincia da seleo sempre reduzida ao serem usadas parcelas de menor tamanho para a avaliao de um grande nmero de tratamentos com reduzida uniformidade gentica. Danial et al (2007) destacam que, para agricultores no treinados, esse efeito muito mais intenso do que quando so usadas parcelas de maiores tamanhos. Portanto, o uso de parcelas de maior tamanho em experimentos de SPV e MGP de milho sempre prefervel nas fases iniciais destes programas para permitir aos agricultores uma maior visibilidade do potencial dos tratamentos pela simples avaliao visual. A parte da parcela que deve ser considerada para a definio do tamanho ideal refere-se rea til, a partir da qual so obtidos os dados ou as informaes usadas nas subseqentes anlises estatsticas. Em experimentos de campo, a rea til da parcela constituda por uma ou mais fileiras centrais. As linhas laterais so chamadas de bordaduras e servem para evitar que o tratamento colocado numa parcela afete o comportamento da rea til das parcelas vizinhas, que contm outros tratamentos (Vieira, 1999). Em programas destinados avaliao de variedades de milho, por exemplo, comum o uso de parcelas com cerca de 9,0 m2 de rea til, distribudas em duas fileiras (Vieira et al, 2005a e 2005b). Nos ensaios conduzidos pelo NEABio, as VL e VC so avaliadas nos ensaios de SPV mediante parcelas constitudas por cinco fileiras de 5,0 m lineares cada, espaadas de 1,0 m entre si, a uma densidade de 40.000 plantas por hectare. Neste caso, a rea til de 12 m2 foi constituda apenas pelos 4,0 metros lineares centrais das trs fileiras internas da parcela. O restante da rea, constituda pelas duas fileiras externas e as duas plantas da cabeceira de cada extremo da parcela, considerada rea de bordadura. Um segundo exemplo de experimento com tamanhos de parcela particulares pode ser encontrado em programas de melhoramento gentico populacional. Particularmente nos processos de seleo recorrente de famlias de meio-irmos, parcelas de 3,0 a 4,0 m2 de rea til so consideradas dimenses timas para avaliar com preciso os principais caracteres quantitativos de interesse

econmico do milho (Chaves, 1984; Chaves & Miranda Filho, 1992). No entanto, prtica comum dos melhoristas de milho usar parcelas constitudas por fileiras simples de 10,0 m lineares de comprimento ou duplas de 5,0 m lineares para avaliao deste mesmo tipo de famlia. Considerando um espaamento entre plantas de 0,20 m ou 0,25 m e uma distncia entre fileiras de 1,0 m, ento 50 ou 40 plantas, respectivamente, dispostas em 10 m2 de rea til, a amostra usada para representar os tratamentos em questo (Figura 3.14). Nos ensaios de MGP conduzidos no Oeste de Santa Catarina, o NEABio tem usado fileiras simples de 5,0 m lineares de comprimento, espaadas 1,0 m entre si, para a avaliao de famlias de meio-irmos. Considerando que o espaamento entre plantas de 0,25 m e a distncia entre linhas de 1,0 m, ento uma quantidade total de 20 plantas, dispostas em 5,0 m2 de rea, representaram a rea total da parcela. Dentre estas plantas, apenas as 16 centrais foram usadas como rea til da parcela (4,0 m2) para representar a amostra gentica dos tratamentos sob avaliao. As duas plantas localizadas nos dois extremos de cada parcela no foram avaliadas e, por isso, tais plantas constituram a bordadura de cabeceira do experimento (Figura 3.15). Alm do tamanho, o formato e a orientao das parcelas dentro da rea do experimento e o nmero de vezes em que cada tratamento repetido, tambm so fatores que afetam a preciso das estimativas de um experimento (Bernardi, 1986). Em relao ao efeito da forma da parcela sobre o erro experimental, as opinies so bastante conflitantes, apesar de existir consenso de que a forma tem um efeito menos pronunciado do que o tamanho. A melhor maneira de entender qual a forma ideal da parcela discuti-la em termos de gradientes de variaes do solo. Quando existe um gradiente mais acentuado num dos sentidos do campo experimental, a maioria dos pesquisadores sugere a utilizao de parcela de formato retangular, desde que sua maior dimenso esteja voltada para o sentido da mxima variao do solo (El-Kalla e Gomma, 1977; Chacin Lugo, 1977) quanto s condies de fertilidade, umidade e estrutura, bem como quanto s condies microclimticas.

Figura 3.14 Unidade experimental representada por uma famlia de meio-irmo de milho distribuda em uma fileira de 10,0 m2 de rea til.

Figura 3.15 Unidade experimental representada por uma famlia de meio-irmo de milho distribuda em uma fileira de 5,0 m2 de rea til.

De fato, a forma retangular da parcela, orientada neste sentido mais eficiente em controlar os efeitos da heterogeneidade do solo do que uma parcela quadrada ou aproximadamente quadrada de mesma dimenso. Ainda assim, a escolha de parcelas quadradas pode ser prefervel quando se desconhece qual a direo da rea experimental mais varivel. A forma quadrada ainda prefervel, quando o efeito da bordadura da parcela tem grande influncia entre parcelas contguas, pois nestas situaes, o permetro da parcela mnimo (Chacin Lugo, 1977). Variveis do Experimento O que so as variveis de um experimento? O atributo que est sendo medido ou avaliado no experimento a varivel em anlise no experimento (Vieira, 1999). Quando os experimentos so realizados para avaliar um conjunto de variedades de milho ou de descendentes retirados de plantas de certa populao, a escolha dos tratamentos mais apropriados s necessidades locais pode ser estabelecida mediante comparaes efetuadas a partir de diferentes caracteres. Se o interesse do experimento verificar o efeito que certo patgeno foliar do milho apresenta sobre a resistncia gentica dos diferentes gentipos, ento a percentagem de rea foliar com leses pode ser uma varivel interessante para anlise. Outros atributos como rendimento de gros, altura de plantas e de espiga, acamamento de planta, quebra de colmo, espessura do colmo, poca da antese (abertura da flor) masculina, grau de empalhamento da espiga, resistncia seca, resistncia a doenas, presena de razes adventcias (razes do caule), qualidade da farinha, teor de leo, ou ainda, outros atributos ligados maciez da palha, colorao de gros e da palha, teor de antocianinas, so exemplos de alguns caracteres de importncia para a cultura do milho, que podem ser usados como variveis dos experimentos de SPV e MGP. Em programas de pesquisa com enfoque participativo, a definio dos critrios (caractersticas) usados na avaliao dos experimentos de campo efetuada conjuntamente por pesquisadores, tcnicos locais e agricultores. Esse procedimento visa minimizar as discrepncias existentes entre os critrios de

interesse do melhoramento formal e daqueles da preferncia dos agricultores. Enquanto os programas institucionais enfatizam a seleo de gentipos com elevado rendimento de gros e significativa resposta diante da aplicao de insumos, os agricultores familiares observam mais caracteres associados estabilidade de colheita e a outros atributos aparentemente secundrios (Thiele et al, 1997). Essas diferenas contriburam para que o produto do melhoramento formal no atendesse por completo s necessidades particulares da produo familiar. Esse comportamento foi observado pelo NEABio, em um programa de MGP de milho, desenvolvido junto a comunidades de agricultores do municpio de Anchieta (Kist et al, 2005; Kist, 2006). Nesse trabalho, foram destacados pelos agricultores 13 caracteres, os quais foram priorizados na seguinte ordem de importncia pela comunidade, a saber: produtividade de gros (Prod), grau de empalhamento (Gemp), dimetro do colmo (Dcol), resistncia a doenas (Rdoena), resistncia seca (Rseca), posio da espiga no momento da colheita (Poesp), tipo de gro (TipoG), altura de planta (Aplan), nmero de fileiras na espiga (Nfil), quantidade de raiz adventcia (Qraiz), direo das fileiras de gros na espiga (Dirfil), prolificidade (Prolif) e nmero mdio de gros por fileira da espiga (Gfil) (Figura 3.16). Este resultado reporta o interesse dos agricultores desta regio para um conjunto de caracteres que fornece a estabilidade produtiva frente s condies adversas de cultivo e de armazenamento de gros. Em adio a estes caracteres, foram includos outros 15 atributos considerados importantes para a cultura do milho pelos pesquisadores e tcnicos locais. No melhoramento formal, a importncia relativa dos vrios caracteres pode ser descrita por um ndice de seleo. A rejeio de variedades pelos agricultores aponta situaes em que o ndice de seleo usado pelos melhoristas com freqncia no corresponde s preferncias dos agricultores. Atributos aparentemente secundrios e sem importncia econmica podem ser critrios muito importantes para a adoo ou rejeio por parte dos agricultores dos cultivares recomendadas pelos programas de MGI. Mediante um rpido exame da Figura 3.16, possvel prever as razes dessa rejeio. O envolvimento de todos os atores locais para a escolha dos critrios de seleo a serem usados em programas de MGP pode ser ainda mais imprescindvel, quando os critrios definidos pelo melhoramento formal forem inversamente correlacionados aos critrios priorizados pelos agricultores. Ainda que tais atributos secundrios no faam parte do ndice de seleo, certo que as correlaes indiretas estabelecidas entre os mesmos e as variveis do ndice devem ser observadas pelos melhoristas envolvidos em programa de MGP. Os efeitos negativos das correlaes inversas entre variveis foi observado no programa de MGP de milho conduzido pelo NEABio, em Anchieta. A partir de anlises de simulao de ganhos genticos esperados no primeiro ciclo de seleo da populao composta MPA-01, foi possvel estimar que incrementos da ordem de 10% para o rendimento de gros, resultavam em alteraes indesejveis para outros atributos de interesse dos agricultores da regio. Dentre tais atributos prejudicados e priorizados pelos agricultores destacam-se a espessura do colmo, a inclinao da espiga na colheita, a altura de plantas e a quantidade de razes adventcias (Figura 3.16). Contudo, quando o progresso gentico era estimado com base na definio de um ndice de seleo que no alteravam indesejavelmente tais atributos de importncia local, os incrementos em rendimento no eram to espetaculares, mas as demais variveis melhoravam levemente ou, pelo menos, no pioravam em relao populao

20 15 ual

original. Maiores detalhes desse programa de MGP pode ser encontrado no Captulo 7.2, bem como em Kist (2006) e Ogliari (2006).

Figura 3.16 Critrios de avaliao de milho priorizados (em percentagem) pelos agricultores da Regio do Oeste e Extremo Oeste de Santa Catarina (NEABio, 2004).

Sejam quais forem os caracteres analisados nos experimentos de SPV ou MGP, estes podem ser quantificados ou qualificados como as variveis do experimento. A varivel, portanto, resultado da mensurao, contagem, classificao ou ordenao de atributos, avaliados a partir das parcelas, visando comparao dos tratamentos entre si e a conseqente identificao daqueles mais promissores quanto s necessidades econmicas, agronmicas ecolgicas e, at mesmo, as de interesse cultural e artesanal das comunidades. Os caracteres quantitativos avaliados pelos melhoristas so definidos a partir de mensuraes ou contagens e, por essa razo, esto associados s variveis contnuas e discretas (descontnuas), respectivamente. A resistncia da planta a certa doena, medida em percentagem de rea foliar da planta atacada pelo patgeno (escala diagramtica de severidade da doena), bem como o rendimento de gros, so exemplos de variveis contnuas. O nmero total espigas da parcela, o nmero de plantas tombadas e acamadas, bem como o nmero de plantas doentes por parcela (incidncia), so exemplos de variveis discretas. Em todos esses casos (contnua ou discreta), os dados desses caracteres quantitativos so estabelecidos a partir da mensurao ou da contagem, visando comparar entre si os tratamentos de um experimento. Por outro lado, os caracteres qualitativos so definidos a partir da classificao ou do ordenamento e, por isso, esto associados s variveis classificadas como nominais e ordinais, nessa ordem. A classificao dos gentipos em resistente e suscetvel para reao frente a doenas, pode ser definida pela simples constatao da presena ou ausncia de leso, ou ainda, pelo tipo de leso apresentado. Normal e braqutico (ano) para altura de planta, vermelho e branco para colorao de gros, opaco e translcido para tipo de gro, so outros exemplos de varivel nominal. Quando so atribudas notas a partir de escalas descritivas dos sintomas de certa doena, visando o ordenamento dos gentipos quanto resistncia, a varivel obtida classificada como qualitativa ordinal. Em ambos os casos (nominal ou ordinal), a classificao ou ordenao dos gentipos quanto resistncia qualitativa definida pela descrio visual. Ainda que o erro experimental no possa ser totalmente evitado, os pesquisadores reconhecem a importncia da sua magnitude e tambm conhecem as tcnicas experimentais disponveis para minimizar seus efeitos sobre as variveis obtidas a partir da avaliao dos tratamentos. Quando o carter

avaliado em um experimento quantitativo, os fatores que interferem na preciso do experimento devem ser levados em considerao com muito mais rigor. Nestes casos, alm da necessidade prvia de determinar a forma, tamanho timo e orientao das parcelas, fatores como delineamento experimental adequado (sorteio aleatrio dos tratamentos ou casualizao nas parcelas), escolha de reas experimentais uniformes (controle local), nmero adequado de repeties dos tratamentos, forma e orientao dos blocos no campo, tambm devem ser investigados previamente para cada espcie e material gentico em particular, conforme ser discutido nos prximos itens deste captulo.

Princpios da Experimentao
Repetio Repetio significa repetir o tratamento que se deseja testar em mais de uma rea (parcela) do experimento e, assim, aumentar o nmero de observaes medido em cada tratamento. Em experimentao, a idia comparar grupos de parcelas e no apenas parcelas ou unidades experimentais. Tais unidades do mesmo grupo recebem o nome de repeties (Vieira, 1999). Sua principal funo permitir uma estimativa mais precisa do comportamento mdio dos tratamentos, alm de possibilitar a quantificao da magnitude do erro experimental. Nos ensaios de competio de cultivares (ECC) de milho, por exemplo, variedades melhoradas de polinizao aberta (VMPA) e cultivares hbridos (CH) so os tratamentos a serem repetidos, assim como em experimentos de seleo recorrente populacional dessa cultura, os tratamentos a serem repetidos so representados pelas famlias (FMI, FIG ou FES1/S2). O nmero de vezes que o tratamento deve ser repetido depende de vrios fatores, dentre eles destacam-se: o grau de preciso desejado para as estimativas do comportamento mdio dos tratamentos; a magnitude das diferenas entre tratamentos que se deseja detectar; a disponibilidade de rea e de sementes para a conduo dos experimentos; o nmero de tratamentos a serem testados; o tamanho, forma e orientao da parcela; os recursos financeiros disponveis para custear as atividades de mo-de-obra, e; a variabilidade gentica inerente ao material estudado e a homogeneidade (uniformidade) da rea experimental (Federer, 1963; Bernardi, 1986). Com relao a estes dois ltimos aspectos, quanto mais homognea for a condio do ambiente experimental e quanto mais uniforme for o material gentico, menor ser o nmero de repeties necessrio para distinguir com preciso o efeito de tratamentos. Ainda que um terreno seja uniforme ou homogneo, sempre existe o risco de algum imprevisto acarretar danos rea experimental e, portanto, aos tratamentos. Destacamos como imprevistos mais comuns em experimentos de campo, a m germinao de sementes, o ataque inesperado de pragas ou doenas, a invaso de animais na rea do experimento, dentre outros problemas. Por estas e outras situaes, responsveis pelas variaes no controladas do ambiente, so conduzidos os experimentos contendo mais de uma repetio por tratamento. Alguns dos fatores acima citados podem afetar ainda mais a definio do nmero de repeties, nos casos onde a pesquisa conduzida com enfoque participativo. Isso ocorre pelo fato de que tais experimentos envolverem atividades de campo, conduzidas em propriedades de agricultores, cujos

ambientes esto relativamente mais propensos ocorrncia de fatores no controlados. Em condies de alta preciso experimental, as informaes geradas a partir da avaliao dos tratamentos devem ser mais prximas do comportamento que estes apresentariam, quando conduzidos em grande escala. Contrariamente, a baixa preciso de um experimento pode comprometer o processo de tomada de deciso, uma vez que o tratamento escolhido como o melhor pode no reproduzir o mesmo comportamento, quando fora das condies experimentais. Do ponto de vista estatstico, sempre desejvel que os experimentos tenham o maior nmero de repeties possvel, ainda que na prtica, a quantidade de repeties seja limitada pelos recursos disponveis. Tal fato decorre da observao de que um maior nmero de repeties de tratamentos, resulta em reduo do erro experimental e, conseqentemente, em estimativas mais confiveis (preciso) para as mdias de tratamentos. Experimentos conduzidos com quatro repeties, portanto, tendem a ser mais precisos do que experimentos conduzidos com duas repeties, admitindo-se que as condies de ambiente, sorteio de tratamentos e tamanho de parcelas sejam as mesmas (Bernardi, 1986). Contudo, Bernardi (1986) ainda destaca que h de considerar-se que cada experimento tem um nmero timo de repeties, a partir do qual os ganhos em preciso no compensam os custos adicionais gastos com recursos humanos, financeiros e espao fsico. Quanto relao entre tamanho de parcela e nmero de repeties, tambm consenso entre os pesquisadores, que um maior nmero de repeties de pequenas parcelas mais vantajoso em relao a um nmero reduzido de repeties de grandes parcelas, considerando que a rea experimental e o grau de preciso desejado sejam os mesmos (Bernardi, 1986; Chaves & Miranda Filho, 1992). Ainda assim, alguns pesquisadores tm reconhecido como um mtodo complementar e eficiente para a eleio de cultivares, o uso de parcelas grandes repetidas poucas vezes, principalmente, pelo fato de propiciar condies de cultivo mais prximas daquelas de uma cultura extensiva. Nos Ensaios de Competio de Cultivares, quando diferentes VMPA ou CH de milho so comparados entre si, comum repetir o mesmo tratamento pelo menos 4 vezes (Vieira et al, 2005a e 2005b). Entretanto, para implementar a recomendao de um cultivar, cada programa institucional tem sua prpria estratgia de avaliar as diferentes espcies quanto ao nmero de repeties por experimento e quanto ao nmero de locais e anos de conduo dos mesmos. A importncia de se avaliar os mesmos tratamentos em diferentes momentos e reas de cultivo est associada possibilidade dos gentipos interagirem com o ambiente de cultivo no tempo e no espao. As razes e as implicaes desse comportamento para a agricultura familiar j foi detalhada no Captulo 3.1, especialmente com relao aos impactos negativos proporcionados pela falta de adaptao de alguns cultivares recomendados pela pesquisa formal, nos agroecossitemas estressados. A repetio do mesmo experimento em vrios anos e locais permite isolar o efeito decorrente da interao GxA e identificar materiais mais estveis e adaptados para cultivo. Os ensaios de SPV conduzidos pelo NEABio para comparar VL, VC e PCC de milho procedentes do Extremo Oeste de Santa Catarina, foram realizados com quatro repeties, para testar 30 variedades, em dois locais e durante dois anos (Alves et al, 2004; Ogliari, et al, 2003 e 2004). Esta atividade participativa teve o objetivo de estudar o comportamento dessas variedades frente s condies de cultivo praticadas por agricultores familiares do Extremo Oeste e do Planalto Norte do Estado (vide Captulo 6.1).

Por outro lado, em experimentos de melhoramento gentico de milho, cuja estratgia de seleo recorrente envolve famlias como tratamentos, mais comum utilizar de duas ou no mximo trs repeties por experimento, uma vez que o nmero de tratamentos testados est, quase sempre, na ordem das centenas. No programa de MGP desenvolvido pelo NEABio, a partir da populao composta denominada MPA-01, foram avaliadas 186 FMI em trs experimentos com trs repeties cada um, conduzidos em propriedades de agricultores de Anchieta. Em cada propriedade, foram avaliadas 62 FMI, alm de duas testemunhas usadas como padro, desenhando um processo de seleo recorrente convergente-divergente de FMI, visando desenvolver uma variedade local melhorada (VLM) de polinizao aberta. A idia de convergncia-divergncia no nova e foi proposta inicialmente por Lonquist et al (1979) para gerar populaes compostas com ampla adaptao para cultivo em regies heterogneas. No programa de MGP conduzido pelo NEABio, a adaptao dessa estratgia para o melhoramento da populao composta MPA1 foi considerado adequado, uma vez que o relevo da regio do Extremo Oeste de Santa Catarina bastante acidentado e com variaes de altitude de at 500 m. Essa irregularidade no relevo proporciona condies heterogneas de solo, umidade e temperatura nas reas de cultivo do municpio. Mais detalhes desse Programa de MGP so descritos no captulo 7.2. Sorteio ou casualizao dos tratamentos As repeties de cada tratamento podem ser distribudas de vrias maneiras dentro da rea do experimento e, com base nessa distribuio, so definidos os delineamentos experimentais. O termo casualizao (ao acaso) usado como sinnimo de distribuio aleatria dos tratamentos dentro da rea experimental. Para visualizar a casualizao dos tratamentos de um experimento, inicialmente adequado dar um exemplo de tratamentos repetidos, mas sem efetuar o sorteio. Para tanto, suponha que haja interesse em estudar o potencial agronmico de quatro variedades locais de milho (Roxo, MPA-01, Pixurum-06 e Branco) procedentes de certa comunidade de agricultores. Para testar o comportamento de tais variedades, poderia ser feito um experimento de campo, usando como unidade experimental, uma rea constituda por quatro fileiras de plantas. Considerando que cada variedade fosse repetida quatro vezes, ento a distribuio das mesmas poderia ser feita conforme ilustrado na Figura 3.17.

Figura 3.17 Esquema de um experimento de avaliao de quatro variedades de milho, repetidas quatro vezes e sem casualizao.

A Figura 3.17 ilustra um esquema de distribuio de variedades sem casualizao, uma vez que as quatro repeties de um mesmo tratamento esto agrupadas e posicionadas em certa rea do terreno. Neste caso, se as plantas das quatro repeties da variedade Pixurum-06 apresentarem maior rendimento de gros, a causa para tal comportamento pode no ser decorrente do melhor potencial gentico desta variedade. Alternativamente, o melhor comportamento destas plantas pode ser conseqncia das melhores condies de ambiente (ventilao, luz, unidade, fertilidade, etc) apresentadas nessa parte do terreno, onde as mesmas esto posicionadas. Para formar grupos constitudos por uma repetio de cada tratamento que sejam to similares quanto possvel, fundamental que os tratamentos sejam sorteados dentro das reas experimentais (Vieira, 1999). A casualizao dos tratamentos feita para que as medidas tomadas a partir das repeties de um mesmo tratamento no sofram influncia intencional ou no intencional do pesquisador. Nesse sentido, a casualizao ou sorteio tem a funo de garantir a obteno de estimativas no tendenciosas das mdias dos tratamentos e, portanto, do erro experimental. O sorteio dos tratamentos nas unidades experimentais pode ser feito de vrias formas. O mais usual atribuir um nmero para cada unidade experimental, colocar todos os nmeros dentro de uma urna, mistur-los e retir-los um a um. Por exemplo, se o experimento tem quatro repeties, ento, as quatro primeiras unidades sorteadas recebem o tratamento 1 (variedade

Roxo), as quatro seguintes, recebem o tratamento 2 (variedade MPA-01) e, assim por diante. Seja qual for a tcnica usada para a casualizao dos tratamentos, esta deve ser conduzida de tal forma que cada unidade experimental (parcela) tenha igual probabilidade de receber cada tratamento. Em alguns casos, quando a rea experimental muito heterognea, necessrio o uso do terceiro princpio da experimentao, que trata do controle local. Neste caso, a casualizaco conduzida com algumas restries. Controle Local O local de conduo do experimento sempre deve ser bastante uniforme quanto fertilidade do solo, disponibilidade de gua e incidncia do sol, declividade do terreno e outras particularidades do ambiente que so possveis de serem identificadas. No h necessidade do terreno destinado rea experimental ser o melhor terreno do campo ou da propriedade, mas este precisa ser o mais uniforme possvel. Fornecer condies uniformes para a rea experimental no significa que o terreno deve ser cuidado de maneira artificial, mas significa que este deve ser protegido da eroso do solo, do pisoteio de animais, da presena de pedras, tocos, formigueiros, brotaes de outras plantas indesejveis, plantas espontneas (plantas daninhas) com distribuio desuniforme pelo terreno, bem como da presena de qualquer outro fator que possa ser responsvel pela desuniformidade da rea utilizada para o experimento. A escolha da rea experimental com o mesmo tipo de solo, sem manchas de fertilidade e umidade e sem desigualdades decorrentes do pisoteio de animais ou cultivos anteriores, associado ao uso de parcelas com o mesmo espaamento entre plantas (densidade) e a mesma profundidade de semeadura (mesma competio entre plantas), uma boa prtica adotada por todo pesquisador que conduz pesquisa em condies de campo. Um ambiente ou local que no atende s condies mencionadas acima, considerado heterogneo, por outro lado, um terreno que as atende uniforme ou homogneo e, por isso, pode ser utilizado para que sejam efetuadas comparaes seguras dentro dos experimentos. Na Figura 3.18a, esto ilustrados alguns fatores que causam a desuniformidade da rea experimental, tal como a presena de estradas recortando o terreno, o aparecimento de sombra decorrente da vegetao local, irregularidades do relevo, presena de formigueiros e distribuio casual do esterco no terreno (pontos pretos). A Figura 3.18b ilustra uma rea manejada de maneira uniforme, uma vez que no esto presentes os principais fatores causadores da heterogeneidade do terreno, tal como aqueles descritos anteriormente. Assim sendo, a rea (b) mais apropriada para a realizao de experimentos de campo em programas de SPV e MGP. O uso de reas experimentais heterogneas pode beneficiar um tratamento e prejudicar outro, no permitindo a expresso do verdadeiro potencial intrnseco a cada tratamento. Assim, se o experimento tem a finalidade de comparar variedades locais de milho entre si quanto ao rendimento de gros, por exemplo, ento o valor estimado com base nas medidas obtidas a partir das parcelas pode ser pouco confivel, caso este terreno no seja adequado como rea experimental. So freqentes s crticas de alguns segmentos da pesquisa participativa aos procedimentos adotados pela pesquisa formal, com relao busca de reas homogneas para a realizao dos experimentos. Sob a alegao das reas de cultivo dos agricultores no serem uniformes como nas estaes experimentais,

atribui-se parte da ineficcia do melhoramento formal em atender com cultivares adaptados diversidade desses agroecossistemas.

Figura 3.18 Ilustrao de terreno heterogneo (a) e homogneo (b).

Nosso entendimento sobre esse debate defende a idia de que as condies homogneas buscadas pelos pesquisadores para os experimentos so necessrias, uma vez que permite a identificao dos gentipos superiores com maior segurana, independentemente de estarem sendo conduzidos na estao experimental ou em uma unidade de produo familiar. O fato de controlar as variaes de ambiente pela homogeneizao da rea experimental sempre um aspecto positivo dos programas formais de pesquisa, pois permitem a identificao de gentipos e populaes superiores, mais em decorrncia de seus atributos genticos e menos pela interferncia das condies de ambiente sobre a expresso genotpica. Essa preocupao deve ser ainda maior, quando os caracteres de interesse so quantitativos, desde que os mesmos esto mais propensos a mudanas de comportamento, em decorrncia das variaes nas condies de ambiente. No entanto, relevante considerar alguns aspectos do freqente insucesso de alguns programas de melhoramento formais discutidos por Boef e Ogliari (2007). Os problemas levantados pelos autores no esto na prtica experimental ou na homogeneidade buscada para os experimentos em si, mas sim nas estratgias adotadas pelos pesquisadores para atingirem seus objetivos. Em geral, nos programas de melhoramento formal convencionais, as condies homogneas dos experimentos so conseguidas a custa da aplicao de fertilizantes qumicos, irrigao abundante, agrotxicos para o controle de pragas, doenas e plantas consideradas invasoras. Essas prticas, na maioria das vezes, minimizam as condies heterogenias de ambiente que prejudicam as comparaes entre tratamentos, ao mesmo tempo em que controlam os fatores de risco da produo, colocando em evidncia o potencial de rendimento dos gentipos para aquelas condies controladas, encontradas em sistemas de produo de mdia a alto consumo de energia.

Sem dvida, a homogeneizao das reas experimentais permite que as comparaes entre os diferentes fentipos do experimento possam ser efetuadas com base no alto grau de correspondncia que possuem com seus respectivos gentipos. Ainda assim, os tratamentos considerados superiores por esses programas de pesquisa, quase sempre so imprprios para cultivo em ambientes estressados, tais como aqueles encontrados em sistemas de produo de baixo consumo de energia (Boef e Ogliari, 2007), onde os fatores biticos e abiticos de risco da produo quase sempre esto presentes. Esse comportamento decorre dos efeitos da interao gentipo e ambiente j discutidos no Captulo 3.1. A conduo de experimentos em reas homogneas e descentralizadas das condies ideais de tecnologia das estaes experimentais, buscando repeti-los em diferentes unidades de produo familiares e sob ambientes e sistemas de cultivo representativos da regio, uma boa prtica de manejo local a ser adotada pelos programas imbudos no desenvolvimento de tecnologias apropriadas para a agricultura familiar. Essa estratgia est sendo adotada com sucesso pelo programa de MGP da populao composta de milho MPA-01 (Captulo 7.2), conduzido pelo NEABio nas unidades de produo familiares do Oeste de Santa Catarina. Contudo, ainda que a escolha da rea experimental seja feita pelos programas de pesquisa participativa com muito rigor quanto uniformidade, existem muitos aspectos do ambiente que contribuem para a desuniformidade e que no podem ser identificados facilmente com base na simples observao. Nesse caso, alm da repetio e da casualizao dos tratamentos, o controle local outro princpio da experimentao que deve ser levado em considerao para que seja feita uma estimativa mais confivel das variveis de interesse da pesquisa. O princpio do controle local corresponde a certas restries no processo de casualizao, visando reduzir o erro experimental. Para entender a importncia deste princpio da experimentao, cabe iniciar uma discusso sobre os delineamentos experimentais mais usados em programas de pesquisa de campo e que tambm so indicados para o desenvolvimento de programas de SPV e MGP, destinados anlise dos recursos fitogenticos locais.

Delineamentos Experimentais
Os delineamentos experimentais, se inteiramente casualizados, em blocos casualizados ou em blocos incompletos (ltice) so definidos com base na maneira como as repeties de cada tratamento so distribudas na rea do experimento. A diferena fundamental entre estes trs delineamentos experimentais est relacionada ao esquema de sorteio dos tratamentos no campo e, consequentemente, ao mtodo de anlise dos dados experimentais e a preciso das informaes obtidas a partir dos experimentos. Sorteio Inteiramente Casualizado O sorteio inteiramente ao acaso usado quando o local do experimento muito homogneo. Esta situao ocorre quando o experimento realizado dentro de laboratrios ou de casas de vegetao, onde existe um rigoroso controle de todas as variaes que podem confundir a avaliao do tratamento, tal como horas de luz, umidade, temperatura, sombra, deslocamento do ar, dentre outras. Nestes casos, os tratamentos so sorteados nas parcelas posicionadas em

qualquer parte da rea experimental. Por essa razo, toda rea destinada ao experimento tida como o universo espacial destinado a casualizao dos tratamentos. Considere como exemplo um experimento conduzido em propriedades de agricultores familiares, onde se deseja comparar os teores de protenas nos gros de quatro variedades locais de milho (Branco, Pixurum-06, MPA-01 e Roxo), repetidas quatro vezes cada uma sobre o campo experimental. O objetivo da avaliao identificar a variedade mais nutritiva para o preparo de farinha pela indstria local para uso na alimentao humana. Para executar o experimento se dispe de uma rea homognea correspondente a 320 m2, onde ser comparado o comportamento das quatro variedades, repetidas quatro vezes dentro da rea disponvel para o experimento. Assim, a rea total ser dividida em 16 canteiros de 4 m x 5 m (4 fileiras de 5 metros lineares), totalizando 20 m2/canteiro. A Figura 3.19 ilustra o croqui da rea desse experimento de SPV, conduzido no delineamento inteiramente casualizado.

Figura 3.19 Croqui do experimento de avaliao de quatro variedades locais de milho, repetidas quatro vezes, no delineamento inteiramente ao acaso.

Para o sorteio das quatro variedades locais, inicialmente enumera-se os canteiros de 1 a 16, conforme ilustrado na referida figura. A seguir, cada nmero de canteiro escrito em pequenos pedaos de papis, os quais so dobrados igualmente e colocados em uma caixa. A escolha da posio de cada variedade

no campo definida com base no sorteio um a um dos papis, sem devolv-los caixa. Para a variedade local denominada Branco, por exemplo, foram sorteados os nmeros de canteiros 1, 4, 8 e 16; para Roxo, foram retirados os nmeros de canteiros 5, 6, 10 e 12 e, assim por diante. Devido casualizao, as unidades de um mesmo grupo, ou seja, as repeties de uma mesma variedade no se concentram de um s lado do campo experimental, tal como aconteceu com a Figura 3.17. Este procedimento evita que as plantas da mesma variedade fiquem concentradas no lado mais favorvel ou, alternativamente, mais desfavorvel da rea experimental. Apesar da reconhecida utilidade do delineamento inteiramente ao acaso para os experimentos conduzidos em condies controladas (laboratrio e casa de vegetao), no campo, difcil encontrar uma rea experimental com esta situao de homogeneidade (uniformidade) e, portanto, outros esquemas de sorteio so utilizados. Sorteio em Blocos Casualizados O sorteio dos tratamentos no delineamento em blocos ao acaso o esquema mais usado em experimentos de campo, quando no possvel encontrar uma rea de terra que seja uniforme quanto fertilidade, estrutura e umidade de solo, ou ainda, quanto s condies micro-climticas. Contudo, ainda que a rea destinada ao experimento seja heterognea, busca-se identificar partes do terreno, cujas condies de ambiente sejam mais uniformes para constiturem os blocos. O esquema de sorteio em blocos ao acaso consiste em dividir a rea experimental no homognea em reas menores ou subreas mais homogneas, para constiturem os blocos do experimento. Os tratamentos, por sua vez, so agrupados em blocos, de forma que cada um contenha uma repetio de todos os tratamentos. A determinao do nmero de blocos, depende de quantas vezes cada tratamento repetido na rea experimental. No caso dos experimentos balanceados, o nmero de blocos igual ao nmero de repeties dos tratamentos. Assim, se quatro o nmero de vezes que cada tratamento repetido, ento a diviso da rea total feita em quatro reas menores ou em quatro blocos. Aps a definio do nmero de blocos ou repeties, ocorre a distribuio aleatria dos tratamentos dentro dos blocos. Pelo fato da rea de cada bloco ser o universo espacial destinado casualizao dos tratamentos, ento cada bloco deve conter pelo menos uma repetio de cada tratamento. A casualizao dos tratamentos feita separadamente para cada bloco e, portanto, a posio relativa dos mesmos tende a no se repetir de um bloco a outro. Esta restrio imposta pela casualizao (controle local), permite que as possveis diferenas entre os blocos (efeito de blocos) sejam removidas do efeito de tratamentos e, a partir disso, possvel obter estimativas mais precisas para as mdias de tratamentos. A Figura 3.20 ilustra o croqui de um experimento sorteado em blocos ao acaso, conduzido com a finalidade hipottica de comparar quatro variedades de milho quanto ao rendimento de gros (Roxo, MPA-01, Pixurum-06 e Branco), repetidas quatro vezes na rea experimental. Nesta figura, pode ser observada a disposio dos blocos 1, 2, 3 e 4 no campo experimental. Note que cada bloco formado por quatro variedades de milho e que o sorteio destes tratamentos foi feito dentro de cada bloco. Constituindo cada bloco em reas homogneas, as

comparaes dos diferentes tratamentos dentro de cada repetio ficam mais equilibradas. Isso significa que a restrio imposta pela casualizao em blocos (controle local) confere ao experimento uma maior segurana ao aceitar que as diferenas de comportamento entre variedades sejam, de fato, decorrentes das diferenas de potencial gentico existente entre as mesmas.

Figura 3.20 Croqui do experimento de avaliao de quatro variedades locais de milho, repetidas quatro vezes, no delineamento de blocos ao acaso.

Assim como a orientao das parcelas, a orientao dos blocos dentro dos experimentos de campo tambm pode contribuir para o aumento da preciso das estimativas das mdias dos tratamentos. recomendado que o maior comprimento do bloco seja posicionado no sentido da menor variao da rea experimental (estrutura e fertilidade de solo, umidade, etc), para que as condies de ambiente de todos os tratamentos dentro de cada bloco sejam as mais uniformes possveis. Sorteio em Ltice Os delineamentos inteiramente ao acaso e em blocos ao acaso so mais usuais em experimentos de campo. No entanto, na rea de melhoramento gentico, onde o nmero de tratamentos muitas vezes elevado, o desenho mais indicado o de blocos incompletos ou ltice. A razo disso decorre da dificuldade de se conseguir um bloco homogneo para agrupar centenas de unidades experimentais, tal como sucede na conduo dos mtodos de seleo recorrente de FMI, FIG e FES1/S2 de milho. Nesses casos, a alternativa mais adequada usar delineamentos experimentais que recebam somente alguns tratamentos por bloco, tais como os referidos.

Para entender a razo do desenho experimental em blocos incompletos, basta imaginar um experimento, cujo objetivo seja avaliar 100 FMI, em parcelas de 10 m2. Neste caso, uma rea correspondente a 1.000 m2 seria necessria para constituir uma nica repetio ou bloco do experimento no delineamento em blocos casualizados. Para um experimento com trs repeties, seriam necessrios pouco mais de 3.000 m2. Em geral, reas de campo com estas dimenses, apresentam variaes de ambiente que devem ser controladas. O delineamento experimental de blocos incompletos ou ltice apresenta apenas um sorteio diferente dentro das repeties, de forma a conferir um maior controle tambm sobre as variaes da heterogeneidade dentro das repeties. Neste delineamento, cada repetio constituda por diferentes blocos e cada bloco por certa parte dos tratamentos. Os tratamentos, por sua vez, esto agrupados em blocos e os diferentes blocos agrupados em repeties. Cada repetio contm todos os tratamentos repetidos uma vez, no entanto, apenas parte dos tratamentos distribuda dentro de cada bloco. O nmero de blocos dentro de cada repetio corresponde raiz quadrada do nmero de tratamentos e, por essa razo, no delineamento em ltice, o nmero de tratamentos deve ser um quadrado perfeito. Se 100 a quantidade de tratamentos do experimento, ento 10 o nmero de tratamentos em cada um dos 10 blocos que constitui uma repetio do experimento. Finalmente, os tratamentos que so sorteados dentro de um bloco em uma repetio, no aparecem juntos em qualquer outra repetio do experimento. A Figura 3.21 ilustra o sorteio efetuado para esse desenho experimental, considerando um exemplo hipottico envolvendo apenas quatro tratamentos e duas repeties.

Figura 3.21 Sorteio de tratamentos em delineamento de blocos inconpletos (ltice 2 x 2) com duas repeties.

Neste caso, dois blocos so distribudos dentro de cada uma das duas repeties, cada qual contendo dois tratamentos diferentes dentro de cada bloco. Pelo fato de tratar-se de um ltice 2 x 2, dois tratamentos diferentes so sorteados em cada um dos dois blocos que constituem cada repetio. Os tratamentos que aparecem em cada um dos blocos numa dada repetio, no aparecem juntos em outro bloco, na segunda repetio. Esta restrio imposta a casualizao (controle local), permite que as possveis diferenas existentes entre os blocos (efeito de blocos) e entre as repeties (efeito de repeties) sejam removidas do efeito de tratamentos. A partir disso, possvel obter estimativas mais precisas para as mdias de tratamentos e, consequentemente, as comparaes efetuadas entre os tratamentos so mais confiveis.

Consideraes Finais
A importncia de usar os princpios da experimentao e as tcnicas experimentais ao planejar os experimentos reside na maior confiana que os resultados obtidos oferecem a partir dos dados experimentais juntamente com a possibilidade de se realizar as anlises estatsticas destes resultados. Conseqentemente, as informaes obtidas a partir dessas anlises tambm so mais confiveis e, por isso, valiosas para a tomada de decises acertadas. Estes princpios devem ser aplicados em trabalhos desenvolvidos por instituies de pesquisa e tambm em trabalhos de pesquisa participativa, conduzidos junto a comunidades de agricultores familiares. Isso no quer dizer que no existam diferenas nos propsitos das pesquisas conduzidas por esses atores sociais. As diferenas entre as pesquisas formal e participativa com nfase nos recursos genticos comeam pelas razes que levam a escolha de uma variedade para cultivo ou para ser usada como populao-base de um programa de melhoramento gentico. Enquanto nas instituies de pesquisa, a identificao das populaes superiores feita prioritariamente com base no seu potencial gentico, em processos de pesquisa participativa, a necessidade de conservao de um recurso local ameaado de eroso pode ser a razo para desencadear um processo de multiplicao e distribuio de sementes, ou ainda, de um programa de SPV ou MGP. O fato do MPG comumente agregar novos valores s variedades raras pode contribuir para aumentar o interesse da comunidade pelo cultivo desses recursos, garantindo-lhes a conservao. Essa uma boa razo para considerar o MGP uma boa prtica de MCB agrcola. A descentralizao das atividades de pesquisa de campo das estaes experimentais para as unidades de produo familiares, bem como a avaliao do potencial dos tratamentos, segundo os critrios estabelecidos pelos agricultores locais, so duas outras particularidades do SPV e MGP conduzido pelo NEABio. Ambas as estratgias conferem aos programas participativos maiores chances para a identificao de variedades que atendam efetivamente s necessidades locais. A razo disso decorrente dos efeitos da interao entre gentipo e ambiente, j bastante discutido no Captulo 3.1. Embora os agricultores no tenham uma compreenso cientfica da parte analtica do trabalho experimental, freqentemente, eles contribuem com xito para o aperfeioamento das atividades de campo, a comear pela definio dos prprios critrios a serem usados para a identificao de gentipos superiores. Alm disso, a valiosa capacidade de observao inerente natureza dos agricultores, associada ao conhecimento tradicional acumulado em relao aos recursos fitogenticos locais, possibilitam o redirecionamento das aes de

pesquisa como parte de um processo dinmico de construo da prpria identidade local. A realizao de experimentos de forma acoplada s atividades das comunidades rurais, busca unir aos princpios da experimentao cientfica, a capacidade natural dos agricultores como experimentadores. Espera-se com isso, que os recursos humanos, fsicos e financeiros direcionados para pesquisa com agricultores familiares sejam otimizados, considerando que as chances de sucesso passam a ser maiores medida que os agricultores participam de todo o processo. Finalmente, esta pode ser considerada uma boa prtica comunitria de manejo gentico e uso da agrobiodiversidade, desde que propicia aos agricultores e pesquisadores a redescoberta do valor e a conseqente reintegrao dos recursos genticos locais disponveis, dentro de sistemas de produo to particulares. Este tem sido o foco do trabalho do NEABio, quando busca desenvolver aes de pesquisa participativa junto a comunidade de agricultores do municpio de Anchieta e de outros municpios da regio Oeste de Santa Catarina.

Bibliografia
ALVES, AC; OGLIARI, JB; VOGT, GA; CANCI, A; BALBINOT JR,AA; FONSECA, JA da (2004). Milho crioulo: rendimento de gros e caractersticas agronmicas. In: Canci, A; Vogt, GA; Canci, IJ (Eds.). A diversidade das espcies crioulas em Anchieta-SC. So Miguel DOeste-SC: Editora MClee, p.87-94. BERNARDI, J (1986). Efeito e Determinao do Tamanho de Parcela para Seleo de prognies de arroz (Oryza sativa L.) de Sequeiro. Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz, Universidade de So Paulo, Piracicaba-SP, 168p (Dissertao de Mestrado). BELLON, MR; BRUSH, SB (1994). Keepers of maize in Chiapas. Economy Botanic, 48: 196-209. BOEF, WS, OGLIARI, JB (2007). Seleo de variedades e melhoramento gentico participativo. In: BOEF, WS; THIJSSEN, M; OGLIARI, JB; STHAPIT, B (Eds). Biodiversidade e Agricultura: fortalecendo o manejo comunitrio. ? Edio. L&PM, Porto Alegre, p.77-88. BORM, A (1997). Melhoramento de Plantas. Viosa: UFV, 574p. CHACIN LUGO, F. Tamao de parcela experimental y su forma. Revista de la Faculdad de Agronomia, 9(3):55-74, 1977. CHAVES, LJ (1985). Tamanho da Parcela para Seleo de Prognies de Milho (Zea mays L.). Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz, Universidade de So Paulo, Piracicaba-SP, 148p. (Tese de Doutorado). CHAVES, LJ; MIRANDA FILHO, JB (1992). Plot size for progeny selection in maize (Zea mays L.). Theoretical and Applied Genetics, 84(7-8): 963 970, 1992. DANIAL, D ...(2007) EL-KALLA, SE; GOMMA, AA. Estimation of soil variability and optimum plot size and shape from wheat (Triticum aestivum L.) Trials. Agricultural Research Review, 55: 81-88, 1977. FEDERER, WT (1963). Experimental Design. New York: Mac Millan Company, 544p. FEHR, WR (1987). Principles of Cultivar Development: theory and tecnique. Vol. 1. London: Mac Millan Publishing Company, 536p.

KIST, V (2006). Seleo Recorrente de Famlias de meio-irmos em populao composta de milho (Zea mays L.) procedente de Anchieta-SC. Centro de Cincias Agrrias, Universidade Federal de Santa Catarina, Florianpolis-SC, 163p. (Dissertao de Mestrado). KIST, V; ELI, MT; SILVA, HV; CANCI, I; ALVES, AC; BOEF, WS; OGLIARI, JB (2005). Estabelecimento de critrios de seleo em melhoramento gentico de variedade local de milho (Zea Mays L.) Mediante Estratgias Participativas. In: III Congresso Brasileiro de Agroecologia, 2005, Florianpolis-SC, Brasil (resumo expandido CD). LONQUIST, JH; COMPTON, WA; GEADELMANN, JL; LOEFFEL, FA; SHANK, B; TROYER, AF (1979). Convergent-divergent selection for ??? improvement in maize. Crop Science, 19(5): 602-604. LOUETTE, D; CHARRIER, A; BERTHAUD, J (1997). In situ conservation of maize in Mexico: genetic diversity and maize and seed management in traditional community. Economy Botanic, 51: 20-38. OGLIARI, JB (2006). Melhoramento Gentico Participativo a partir de Variedade Local de Milho procedente do Extremo Oeste de Santa Catarina. Relatrio de Pesquisa/CNPq, Braslia-DF, Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Tecnolgico (CNPq), 24p. (www.cnpq.br). OGLIARI, JB; ALVES, AC; FONSECA, JA da; BALBINOT, A (2003). Anlise Gentica da Diversidade de Variedades Locais de Milho (Zea mays L.). Relatrio de Pesquisa/CNPq, Braslia-DF, Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Tecnolgico (CNPq), 18p. OGLIARI, JB; ALVES, AC; FONSECA, JA da; BALBINOT Jr., AA; KIST, V (2004). Anlise Gentica da Diversidade de Variedades Locais de Milho do Extremo Oeste de Santa Catarina In: Anais do III Congresso de Agroecologia, 2004, Porto Alegre-RS, Brasil (resumo expandido CD). TESHOME, A; BAUM, BR; FAHRIG, L; TORRANCE, JK; ARNASON, TJ; LAMBERT, JB (1007). Sorghum (Sorghum bicolor ( L) Moench) landrace variation and classification in North Shewa and South Welo, Ethiopia. Euphytica, 122(3): 255-263. THIELE, G; GARDNER, G; TORREZ, R; GABRIEL, J (1997). Farmer involvement in selection of new varieties: potatoes in Bolivia. Experimental Agriculture, 33: 116. VIEIRA, S (1999). Estatstica Experimental. 2 ed. So Paulo: Editora Atlas, 185p. VIEIRA, LC; NUSS, C; DUFLOTH, JH; ZANATTA, JC; ALEXANDRE, AD (2005). Ensaios de avaliao de cultivares de milho em Santa Catarina: I Cultivares de ciclo super precoce Safra 2004/2005. In: V Reunio Tcnica Catarinense de Milho e Feijo, ChapecSC, Brasil, p. 46-48 (Resumo expandido) VIEIRA, LC; NUSS, C; DUFLOTH, JH; ZANATTA, JC; ALEXANDRE, AD (2005). Ensaios de avaliao de cultivares de milho em Santa Catarina: II Cultivares de ciclo precoce Safra 2004/2005. In: V Reunio Tcnica Catarinense de Milho e Feijo, ChapecSC, Brasil, p. 49-52 (Resumo expandido) VOGT, GA, BALBINOT JR., AA; VIEIRA, LC; SILVA, DAS (2005). Avaliao preliminar de variedades de polinizao aberta de milho (VPAs). In: V Reunio Tcnica Catarinense de Milho e Feijo, Chapec-SC, Brasil, p. 43-45 (Resumo expandido).