Degradacin, Sntesis, Utilizacin

A pesar de su aparente estabilidad, las clulas vivas deben experimentar un continuo proceso de renovacin. Para mantener su funcionamiento, repararse, y/o reproducirse, las clulas deben adquirir nutrientes de su ambiente. Estos nutrientes sern utilizados tanto para generar los intermediarios requeridos en los procesos de sntesis de molculas y macromolculas necesarias, como para producir la energa requerida para estos procesos. Uno de los aspectos ms claros en los procesos de renovacin celular es el rpido recambio de protenas y cidos nucleicos, las macromolculas que son ms importantes en la complejidad de los procesos responsables del funcionamiento de las clulas vivas. Adicionalmente, la capacidad tanto de degradar, como de sintetizar estas molculas en los tiempos precisos permite a los organismos responder adecuadamente a las seales fisiolgicas o fisio-patolgicas procedentes del organismo mismo o de su ambiente.

Metabolismo Aminocidos
1) 2)

3)

Ciclo del nitrgeno y sntesis de compuestos orgnicos nitrogenados Funcin biolgica de las protenas. Requerimientos de protenas de la dieta. Recambio de protenas y vida media de las protenas. Balance nitrogenado positivo, negativo y Equilibrio Nitrogenado. Aminocidos esenciales y Valor Biolgico de las protenas. Efectos del dficit de protenas en la dieta. Desnutricin. Digestin de las protenas y enzimas digestivas proteolticas. Absorcin y transporte de aminocidos: Cotransporte con Na+ y sistema del -glutamato.

Metabolismo Aminocidos
4)

5) 6) 7)

8)

Catabolismo de los aminocidos. Destino y eliminacin del grupo amino. Transaminaciones, transaminasas y Piridoxal Fosfato (PxP). Sntesis de aminocidos noesenciales y transporte de N entre los tejidos. Deaminaciones, detoxificacin del amonaco (o amonio) y sntesis de urea. Patologas asociadas a alteraciones metablicas del ciclo de la urea y de la sntesis de aminocidos. Catabolismo de los aminocidos. Utilizacin del esqueleto carbonado o -cetocidos. Integracin con el metabolismo de hidratos de carbono y lpidos. Aminocidos glucognicos y cetognicos: gluconeognesis, cetognesis y lipognesis. Regulacin del metabolismo de los aminocidos.

El Grupo Amino
En casi todos los tejidos extra hepticos, el grupo amino del glutamato es liberado por desaminacin oxidativa como NH4+. El amonio es llevado al hgado como el grupo amida de la glutamina. La reaccin dependiente de ATP en la cual el glutamato es convertido a glutamina es catalizada por la glutamina sintetasa: L-Glutamato + NH4+ + ATP > L-Glutamina Despus de su transporte al hgado, la glutamina es hidrolizada por la glutaminasa para formar glutamato y NH4+. Un NH4+ es generado por la glutamato deshidrogenasa que convierte el glutamato a -cetoglutarato: L-Glutamina + H2O > L-Glutamato + NH4+ L-Glutamato + H2O + NAD+ > -Cetoglutarato + NADH + H+ + NH4+ La mayor parte del amonio producido por la degradacin de aminocidos es debida a la desaminacin oxidativa del L-glutamato. El resto del amonio es producido por otras reacciones catalizadas por otras enzimas que veremos a continuacin.

Metabolismo general de los aminocidos

Poza de Aminocidos Circulantes

Ciclo de la Urea

Sntesis de Protenas Recambio protenas Protena Estructural Hormonas enzimas

Sntesis de copuestos nitrogenados no proteicos Hemo Aminas Purinas Pirimidinas creatina

Ciclo de Krebs

CO2 + H2O + ATP

Absorcin Intestinal de Amino cidos

El nitrgeno es obtenido por la gran mayora de los seres vivos mediante la protena adquirida como alimento. En los vertebrados las protenas son digeridas para formar aminocidos por la accin combinada de las proteasas producidas por el estmago, el pncreas y las clulas del epitelio intestinal. Las clulas del epitelio intestinal son capaces de absorber los aminocidos as formados y transportarlos al torrente sanguneo, de donde pueden ser captados por otras clulas del organismo. El transporte de aminocidos a nivel intestinal es estimulado por la presencia de Insulina. Los aminocidos son utilizados por las clulas para la sntesis de protenas, ste es un proceso sumamente dinmico; las protenas se encuentran en un proceso continuo de recambio y la mayora son rpidamente sintetizadas y degradadas.

Esenciales y No Esenciales
Los aminocidos esenciales (histidina, isoleucina, leucina, lisina, metionina, fenilalanina, treonina, triptofano y valina) son requeridos en la dieta. La arginina y cantidades suplementarias de histidina son requeridas durante periodos de crecimiento. Los aminocidos no esenciales pueden ser sintetizados en el organismo. El esqueleto carbonado de 10 de los aminocidos no esenciales puede ser derivado de la glucosa.

La cistena deriva su azufre del aminocido esencial metionina. La tirosina se produce por hidroxilacin del aminocido esencial

fenilalanina.

Los aminocidos son utilizados para la sintesis de muchos otros compuestos nitrogenados, tales como las bases pricas y pirimdicas, hemo, creatina, nicotinamida, tiroxina, epinefrina y otras aminas nitrogenadas, melanina, y esfingosina.

Liberacin del -amino Nitrgeno como NH4+

Algunos aminocidos poseen mecanismos enzimticos que les permiten liberar su -amino nitrgeno directamente como ion amonio, NH4+.
1.

2. 3.

4.

La Glutamato deshidrogenasa cataliza la desaminacin oxidativa del glutamato. La reaccin libera NH4+ y forma cetoglutarato. La reaccin de la Glutamato deshidrogenasa es completamente reversible y requiere como coenzima NAD o NADP. La Histidina es desaminada por la histidasa para formar NH4+ y urocanato. La serina y la treonina son desaminadas por la serina dehidratasa, utilizando Piridoxal fosfato como coenzima. La serina es convertida en piruvato y la treonina en cetobutirato; se libera NH4+. El grupo amida de la glutamina y de la asparagina son liberados por hidrlisis como ion amonio. La Glutaminasa convierte a la glutamina en glutamato y NH4+. La Asparaginasa convierte a la asparagina en aspartato y NH4+.

Adicin y Supresin del Nitrgeno de Aminocidos

Cuando los aminocidos son sintetizados, debe agregarse el -amino nitrgeno a los precursores carbonados. Cuando los aminocidos son oxidados para producir energa, el nitrgeno debe ser liberado y convertido a urea. El -amino nitrgeno puede ser transferido de un aminocido a otro por el mecanismo de transaminacin, en el cual siempre intervienen dos diferentes pares de aminocidos y sus correspondientes -cetocidos. El glutamato y el -cetoglutarato fungen usualmente como uno de los pares. La transaminacin requiere Piridoxal fosfato como cofactor. El Glutamato es pues, un compuesto eje en el metabolismo de los aminocidos

Aminocidos
Los -aminocidos, adems de su papel como unidades monomricas de las protenas, son metabolitos energticos y precursores de muchos compuestos biolgicos importantes que contienen nitrgeno, tales como el hemo, las aminas fisiolgicamente activas, el glutatin, los nucletidos y las coenzimas nucleotdicas. El exceso de aminocidos de la dieta ni se acumula para su uso futuro, ni se excreta. Son convertidos en metabolitos intermediarios comunes tales como el piruvato, el oxalacetato y el -cetoglutarato. Los aminocidos tambin son precursores de la glucosa, de los cidos grasos y de los cuerpos cetnicos y, por lo tanto, son combustibles metablicos. Los intermediarios no aminados ms importantes producidos por la degradacin de los aminocidos son piruvato, intermediarios del Ciclo de cidos tricarboxlicos, acetil-CoA y acetoacetato.

Metabolismo de Aminocidos
Degradacin, Sntesis, Utilizacin

Empezaremos examinando las etapas comunes que participan en la degradacin de los aminocidos
1. La desaminacin (la eliminacin del grupo amino), mediante la cual los grupos

amino se convierten en amonaco o en los grupos amino del aspartato. 2. La incorporacin de los tomos de nitrgeno del amonaco a molculas orgnicas. 3. Mecanismo de sntesis de la urea para excrecin de amonaco 4. La conversin de los esqueletos de carbono de los aminocidos (los cetocidos producidos por la desaminacin) en intermediarios metablicos comunes.

A continuacin, estudiaremos las rutas biosintticas de los aminocidos. Despus examinaremos las rutas mediante las cuales se utilizan los aminocidos para la sintesis del hemo, de las aminas fisiolgicamente activas y del glutatin Terminaremos con una breve discusin sobre la fijacin del nitrgeno, un proceso que convierte el N2 atmosfrico en amonaco y constituye la fuente ltima del nitrgeno metablicamente til.

Grupo Amino

Existe una caracterstica importante que distingue el destino metablico de los aminocidos: cada aminocido contiene un grupo amino. Por tanto, las rutas de sntesis o degradacin de los aminocidos incluyen un paso clave en el que se fija o separa el grupo amino del esqueleto carbonado. En el caso del catabolismo de los aminocidos el grupo amino debe ser desviado hacia rutas especiales encargadas del metabolismo del grupo amino y su excrecin como producto txico. Trataremos en primer lugar el metabolismo del grupo amino y la excrecin de nitrgeno y seguiremos con el destino de los esqueletos carbonados obtenidos a partir de los aminocidos.

Grupo Amino

Los aminocidos obtenidos a partir de las protenas de la dieta son la fuente de la mayor parte de grupos amino. La mayora de aminocidos se metabolizan en el hgado. Parte del amonaco generado en este proceso se recicla y se utiliza en diversas rutas biosintticas. El exceso se excreta directamente o se convierte en urea o cido rico para su excrecin, segn el organismo de que se trate. El exceso de amonaco generado en otros tejidos (extra hepticos) se transporta al hgado (en forma de grupos amino) para ser convertido en la forma adecuada para su excrecin.

Utilizacin del Nitrgeno (NH3)

Catabolismo

Los aminocidos no solo son parte de la estructura de las protenas, sino que constituyen intermediarios indipensables en una gran variedad de procesos metablicos y regulatorios. Los aminocidos no se almacenan son convertidos invariablemente a otros intermediarios metablicos. Su catabolismo comprende tres etapas fundamentales:
Desaminacin: el grupo amino debe ser convertido en

amonio Incorporacin del amonaco a la sntesis de urea Conversin de los esqueletos carbonados en intermediarios comunes que puedan ser reutilizados como fuente de energa o en otras rutas metablicas

1. Aminotransferasas (suelen usar -Cetoglutarato y son especficas para el aa

Desaminacin de Aminocidos
La primera reaccin en la degradacin de los aminocidos es

En los vertebrados terrestres el exceso de nitrgeno se excreta

casi siempre la eliminacin de su grupo -amino con el objeto de excretar el exceso de nitrgeno y degradar el esqueleto de carbono restante

como urea, sintetizada a partir de amonio y aspartato El esqueleto carbonado es degradado o convertido en glucosa por el proceso de transaminacin:
Aminocido + -cetoglutarato -cetocido + glutamato Glutamato + oxaloacetato -cetoglutarato + aspartato

La mayora de los aminocidos pierden su grupo amino

Las aminotransferasas (o transaminasas) son un conjunto de enzimas del grupo de las transferasas, que transfieren grupos amino desde un metabolito a otro, generalmente aminocidos. Estas enzimas son inducibles, porque su actividad puede aumentarse por la accin de diversas hormonas como la tiroxina o los glucocorticoides, su reaccin es libremente reversible y su constante de equilibrio est cercana a la unidad.

Las transaminasas necesitan de una coenzima llamada piridoxal fosfato (derivado de la piridoxina o vitamina B6) para ejercer su funcin. Esta coenzima acta como transportador del grupo amino entre los sustratos, alternando su estructura entre la forma aldehdica (piridoxal) y la forma aminada (piridoxamina).

Piridoxal Fosfato

Todas las aminotransferasas contienen como grupo prosttico al fosfato de Piridoxal (PLP), el cual es un derivado de la piridoxina (vitamina B6).

El fosfato de Piridoxal incluye un anillo de piridina que es levemente bsico y un grupo hidroxilo que es levemente acdico. As pues, los derivados del fosfato de Piridoxal pueden tomar formas tautomricas estables en donde el nitrgeno de la piridina est protonado y, por lo tanto, cargado positivamente, mientras que el grupo hidroxilo est desprotonado, formando un fenolato.

Ocurre por mecanismos enzimticos multisustrato de tipo ping-pong Requiere Fosfato de Piridoxal como cofactor, el cual pasa de su forma de piridoxal a la forma de piridoxamina. Presentan diferentes afinidades por el sustrato aminado inicial, pero slo aceptan como segundo sustrato dos cetocidos: oxaloacetato y -cetoglutarato.

As, grupos amino de varias procedencias convergen a slo dos aminocidos, glutamato y aspartato Que son interconvertibles por la Aspartato aminotransferasa

Las aminotransferasas o transaminasas catalizan la transferencia del grupo -amino de muchos aminocidos al -cetoglutarato, formando glutamato, el cual puede ser desaminado oxidativamente en las mitocondrias hepticas liberando un ion amonio (NH4+). El mecanismo de accin de las aminotransferasas incluye dos pasos: 1. El grupo amino de un aminocido es transferido a la enzima, produciendo el correspondiente -cetocido y la enzima aminada. Aminocido + enzima -cetocido + enzima-NH2 2. El grupo amino es transferido al cetocido aceptor (Vgr. el cetoglutarato) formando el aminocido producto (Vgr. el glutamato) y regenerando la enzima. -Cetoglutarato + enzima-NH2 enzima + glutamato

Mecanismo enzimtico de las aminotransferasas es del tipo ping-pong

Aminocido I
Glutamato

-Cetocido I
-Cetoglutarato

Para transportar el grupo amino, las transaminasas requieren la participacin del piridoxal-5'-fosfato (PLP), un derivado de la piridoxina (vitamina B6). El PLP se une covalentemente a la enzima mediante una unin por base de Schiff (imina) formada por la condensacin de su grupo aldehdo con el grupo -amino de un resto de lisina de la enzima. Esta base de Schiff, que est conjugada al anillo piridnico de la coenzima, es el foco de la actividad de la coenzima. El grupo amino del aminocido se acomoda por conversin de esta coenzima a piridoxamina-5'-fosfato (PMP). Esmond Snell, Alexander Braunstein y David Metzler demostraron que la reaccin ocurre mediante un mecanismo de bi bi ping pong

Aminotransferasa

El fosfato de Piridoxal se fija a la enzima formando una base de Schiff con la lisina 268 de la enzima. Un residuo de arginina en el sitio activo ayuda a orientar los sustratos fijndose a sus grupos -carboxilato.

Treonina y Lisina

Existen transaminasas para todos los aminocidos, excepto para treonina y para lisina Con estas dos excepciones podemos concluir que el efecto de las reacciones de transaminacin es recoger los grupos amino de casi todos los aminocidos en forma de Lglutamato. El glutamato funciona a continuacin como dador de grupos amino, sea para rutas biosintticas o bien para iniciar las rutas de excrecin que conducen a la eliminacin de productos nitrogenados de desecho.

Aspartato Aminotransferasa
La Aspartato Aminotransferasa (EC 2.6.1.1), antes conocida

como transaminasa glutmico-oxalactica (GOT). Se encuentra en varios tejidos del organismo de los mamferos, especialmente el hgado, el corazn y el tejido muscular. Cataliza la reaccin de transferencia de un grupo amino desde el L-aspartato al 2-oxoglutarato formndose L-glutamato y oxaloacetato. L-aspartato + 2-oxoglutarato oxaloacetato + L-glutamato
Esta enzima tambin puede actuar sobre la L-tirosina, la L-

fenilalanina y el L-triptofano. Esta actividad la hace semejante a la transaminasa especializada en aminocidos aromticos: aminocido aromtico transaminasa

Aspartato Aminotransferasa (EC 2.6.1.1), antes conocida como transaminasa glutmico-oxalactica (GOT).

Degradacin de Aminocidos
La degradacin de aminocidos ocurre en todos los tejidos,

no solo en el hgado. Por ejemplo, los msculos utilizan aminocidos como combustible durante los periodos largos de ejercicio, as como durante el ayuno prolongado. En el msculo. como en el hgado, el primer paso para catabolizar aminocidos es la supresin del grupo amino. Sin embargo el msculo carece de la maquinaria enzimtica necesaria para procesar el amoniaco que es un producto sumamente txico. Por lo tanto el nitrgeno debe ser liberado en una forma que pueda ser transportada al hgado para su conversin a urea.

Ciclo de la Glucosa-Alanina
El Nitrgeno es transportado del msculo al hgado principalmente de dos maneras.
Por el ciclo llamado de la Glucosa-Alanina, en el cual el

grupo amino de los aminocidos es transportado al hgado como alanina. El nitrgeno puede ser tambin transportado como glutamina. La enzima Glutamino Sintetasa de msculo cataliza la sntesis de glutamina a partir de glutamato y NH4+ en una reaccin dependiente de ATP. Los nitrgenos de la glutamina pueden ser convertidos a urea en el hgado.

Ciclo Glucosa-Alanina
Una excepcin importante a esta situacin lo constituyen

un grupo de aminotransferas musculares que aceptan al piruvato como su sustrato -cetocido. La reaccin produce alanina, la cual es liberada al torrente sanguneo y transportada al hgado donde sufre transaminacin para producir nuevamente piruvato que puede ser utilizado en la gluconeognesis. La glucosa resultante vuelve al msculo donde ser degradada glucolticamente a piruvato. Este es el ciclo de la glucosa-alanina. El grupo amino termina en amonaco o aspartato para la biosntesis de la urea. Evidentemente, el ciclo de la glucosa-alanina funciona para transportar nitrgeno del msculo al hgado.

Una excepcin importante a esta situacin lo constituyen un grupo de aminotransferas musculares que aceptan al piruvato como su a-cetocido sustrato. El aminocido producido, la alanina, es liberado al torrente sanguneo y transportado al hgado donde sufre transaminacin para producir nuevamente piruvato que ser utilizado en la gluconeognesis. La glucosa resultante vuelve al msculo donde ser degradada glucolticamente a piruvato. El grupo amino termina en amonaco o aspartato para la biosntesis de la urea. Este es el ciclo de la glucosa-alanina. Evidentemente, el ciclo de la glucosa-alanina funciona para transportar nitrgeno del msculo al hgado.

 El hgado es el sitio principal de formacin de urea Existe un grupo importante de aminotransferasas musculares

que aceptan piruvato como sustrato, produciendo alanina

Otras formas de Desaminacin

La accin consecutiva, sobre un aminocido dado, de

una transaminasa seguida de la accin de la glutamato deshidrogenasa, implica la desaminacin de dicho aminocido y se conoce como transdesaminacin Enzimas inespecficas de oxidacin de aminocidos que utilizan FAD
D-Aminocido oxidasa L-Aminocido oxidasa

Mecanismo importante para muy pocos aminocidos

(serina e histidina) Aminocido + FAD + H2O FADH2 + O2

-Cetocido + NH3 + FADH2 FAD + H2O2

Desaminacin Oxidativa
Actividad de la L-aminocido Oxidasa

La transaminacin no produce desaminacin neta, sino redistribucin del grupo amino La desaminacin neta se produce generalmente por la desaminacin oxidativa del glutamato catalizada por la Glutmico Deshidrogenasa. La reaccin requiere NAD+ o NADP+ como agente oxidante y regenera el -cetoglutarato para ser usado en nuevas reacciones de transaminacin
Glutamato + NAD(P)+ + H2O -cetoglutarato + NH4+ +NAD(P)H

Existen otras formas de desaminacin que son especficas para determinados aminocidos

La transaminacin, por supuesto, no produce desaminacin neta, sino redistribucin del grupo amino La desaminacin neta se produce generalmente por la desaminacin oxidativa del glutamato catalizada por la Glutmico Deshidrogenasa.

L-glutamato + H2O + NAD(P)+ -Cetoglutarato + NH3 + NAD(P)H

Hasta la fecha se han encontrado tres enzimas diferentes en la naturaleza:

Glutamato deshidrogenasa (NAD (P)+), EC 1.4.1.3, llamada

abreviadamente GLUD y utiliza tanto NADH como NADPH. Esta es la forma presente en los mamferos. Glutamato deshidrogenasa, EC 1.4.1.2, utiliza solamente NADH. Glutamato deshidrogenasa (NADP+), EC 1.4.1.4, utiliza solamente NADPH.

La glutamato deshidrogenasa es inhibida por el GTP y activada por el ADP in vitro sugiriendo que estos nucletidos regulan la enzima in vivo. Sin embargo, estudios de las concentraciones de los sustratos y productos celulares indican que la enzima funciona in vivo cerca del equilibrio (GO). Es poco probable que cambios en la actividad de la glutamato deshidrogenasa debidos a interacciones alostricas produzcan cambios en el flujo. El NAD(P)(H) se puede unir a la enzima en un segundo sitio en cada subunidad. El NAD (H) se une 10 veces mejor que el NADP (H), y la forma reducida mejor que la oxidada. Se ha sugerido que la unin de la coenzima reducida inhibe la enzima y que la unin de la coenzima oxidada la activa, aunque los efectos an no estn claros. Lo ms probable es que el flujo est controlado por las concentraciones de sustratos y productos. La posicin de equilibrio favorece la formacin de glutamato sobre la formacin de amonaco. Dado que las concentraciones elevadas de amonaco son txicas, la posicin de equilibrio ayuda a mantener bajas las concentraciones de amonaco, lo cual es fisiolgicamente importante. El amonaco producido se convierte en urea

 Hemos visto que, los grupos

amino de muchos aminocidos se recogen en el hgado en forma de grupos amino de la molcula del L-glutamato. El glutamato libera su grupo amino en forma de amonaco en el hgado En los hepatocitos el glutamato es transportado desde el citosol a la mitocondria en donde ser utilizado como sustrato para su desaminacin oxidativa por una enzima clave, la Glutamato Deshidrogenasa (GLUD) (Mr 330 000).

El ser humano posee dos isozimas de la glutamato deshidrogenasa, la GLUD1 y la GLUD2. Ambas forman homohexmeros y su localizacin es la matriz mitocondrial. La GLUD1 tiene un rol clave en el metabolismo del nitrgeno, del glutamato y de la homeostasis energtica. Se expresa en altos niveles en el hgado, cerebro, pncreas y riones, pero no en los msculos. Se piensa que en las clulas pancreticas la GLUD1 participa en el mecanismo de secrecin deinsulina. La GLUD2 se expresa principalmente en la retina, testculos y en un menor nivel en elcerebro. Es importante para reciclar el principal neurotransmisor excitatorio, el glutamato, durante la neurotransmisin.

Serina y Treonina Dehidratasas

La mayora de los grupos amino de los aminocidos son transferidos a un -cetoglutarato antes de ser liberados y metabolizados. Existen dos excepciones, el grupo amino de la serina y de la treonina pueden ser liberados directamente y convertidos en NH4+ Estas desaminaciones directas son catalizadas por dos enzimas, la serina dehidratasa y la treonina dehidratasa. En estas reacciones tambin se utiliza el fosfato de Piridoxal como cofactor: Serina Piruvato + NH4+ Treonina a-cetobutirato + NH4+

 Estas enzimas son llamadas

dehidratasas porque la deshidratacin precede a la desaminacin. La Serina pierde un hidrgeno de su -carbono y un grupo hidrxido de su carbno , producindose como intermediario un aminoacrilato. Este derivado es sumamente inestable y reacciona con agua para dar finalmente piruvato y NH4+ Es pues aparente que la presencia del grupo hidroxilo fijo al carbono de cada uno de estos dos aminocidos es lo que permite que ocurra la desaminacin de manera directa.

Glutamina Sintasa
Produce glutamina, uno de los 20 aminocidos de las protenas. Glutamato + NH4+ + ATP glutamina + ADP + Pi + H+ La glutamina sirve como donador de nitrgeno en varias vas biosintticas: purinas, citosina. La glutamina es muy abundante en la circulacin, pues sirve como una forma de transporte inocua del amonaco, que es txico, hacia el hgado y el rin El hgado y el rin poseen la enzima mitocondrial Glutaminasa que libera el amonio, Glutamina + H2O glutamato + NH3

En los mamferos y en las plantas, la Glutamato Deshidrogenasa se encuentra en mitocondria y cataliza una reaccin cercana al equilibrio, aunque usualmente con un flujo neto hacia la transformacin de glutamato en -cetoglutarato. El papel principal de la Glutamato Deshidrogenasa en los animales es la degradacin de aminocidos y la liberacin de NH4+. Probablemente los mamferos utilizan la degradacin de protenas y nucletidos de su alimentacin como fuente primaria de nitrgeno y requieren utilizar muy pequeas cantidades de amonio libre. Otro mecanismo crtico para la asimilacin de amonio en muchos organismos es la formacin de glutamina a partir de glutamato y NH4+, reaccin catalizada por la enzima Glutamina Sintetasa. La glutamina funciona como un donador de nitrgeno en varias reacciones biosintticas y funciona como un acarreador de amonio para evitar la produccin de concentraciones altas de este intermediario txico en los tejidos.

La formacin de Glutamina es catalizada por la Glutamina Sintasa mitocondrial. Puesto que la sntesis del enlace amdico esta acoplada a la hidrlisis del ATP para formar ADP y Pi, la reaccin favorece fuertemente la formacin de Glutamina. Una funcin de la Glutamina es la de secuestrar el amonio en una forma no txica.

La actividad de la Glutaminasa, liberando el nitrgeno amdico de la Glutamina en la forma de NH4+, favorece fuertemente la produccin de Glutamato. As pues, la reaccin de la Glutaminasa procede de manera esencialmente irreversible en la direccin de formacin de glutamato y NH4+. La actividad de la Glutaminasa hidroliza el nitrgeno amdico de la glutamina, no el nitrgeno del carbono alfa. Las reacciones concertadas de la Glutamina Sintasa y la Glutaminasa producen la interconversin de Glutamina y amonio libre lo que produce un importante mecanismo regulatorio sobre la concentracin de este in txico. Una reaccin anloga es catalizada por la enzima LAsparaginasa.

Prcticamente todos los organismos poseen algunos mecanismos comunes para la utilizacin del nitrgeno inorgnico en forma de amonio. Todos los organismos utilizan el amonio en rutas metablicas que producen glutamato, glutamina, asparagina, y carbamil fosfato El amonio funciona como sustrato para cinco enzimas que lo convierten en varios compuestos nitrogenados.

La mayor parte del nitrgeno inorgnico (amonio) que es convertido a aminocidos o a otros compuestos nitrogenados lo hace por medio del glutamato y de la glutamina. Es pues claro, que el amino-nitrgeno del glutamato y el amidonitrgeno de la glutamina son puntos extraordinariamente activos durante la biosntesis de compuestos nitrogenados.

Formacin de Glutamato - Glutamato deshidrogenasa Glutamato sintasa. Cataliza una accin semejante Formacin de Glutamina - Glutamina Sintetasa Formacin de Asparagina - Asparagina Sintetasa Formacin de Carbamil fosfato- Carbamil Fosfato Sintetasa

Mecanismos Particulares

a. Intermediarios de la gluclisis sirven como precursores en la sntesis de serina, glicina, cistena, y alanina. b. La serina puede ser sintetizada a partir del intermediario glucoltico 3-fosfoglicerato, el cual es oxidado, transaminado por el glutamato y defosforilado. c. La glicina y la cistena pueden ser derivados de la serina.
(1) La glicina, deriva de la serina mediante una reaccin en la

d. La alanina puede ser sintetizada por transaminacin del piruvato

cual un grupo metileno es transferido al tetrahidrofolato. (2) La cistena deriva su esqueleto carbonado y el -amino nitrgeno a partir de la serina. La metionina, un aminocido esencial, proporciona el azufre.

a. El aspartato es producido por transaminacin del oxaloacetato. b. La asparagina se produce por la amidacin del aspartato. c. El glutamato es producido a partir del -cetoglutarato por la fijacin de NH4+ catalizada por la glutamato deshidrogenasa o bien por transaminacin d. La glutamina, la prolina y la arginina son derivadas del glutamato:
(1) La glutamina es producida por amidacin del glutamato. (2) La prolina y la arginina son derivados del semialdehdo glutmico, el cual es formado por la reduccin del glutamato. La prolina es producida por la ciclizacin del semialdehdo glutmico. (3) La arginina deriva de la ornitina mediante el ciclo de la urea, la ornitina misma es producida por la transaminacin del semialdehdo glutmico

La degradacin de los aminocidos los convierte en intermediarios del ciclo del cido ctrico o sus precursores, de modo que pueden ser metabolizados a CO2 y H2O o utilizados en la gluconeognesis. De hecho, la degradacin oxidativa de los aminocidos representa entre el 10 y el 15% de la energa metablica generada por los animales. Los 20 aminocidos "'estndar" (los aminocidos de las protenas) tienen esqueletos de carbono muy diferentes, por lo que sus conversiones a intermediarios del ciclo del cido ctrico siguen vas muy diversas. No describiremos todas las mltiples reacciones involucradas en detalle. En cambio, consideraremos cmo estn organizadas estas rutas y nos centraremos en unas pocas reacciones de inters qumico y/o mdico.

Todos los aminocidos "estndar" son degradados a uno de estos siete intermediarios metablicos: piruvato, a-cetoglutarato, succinil-CoA, fumarato, oxalacetato, acetil-CoA o acetoacetato Por lo tanto, los aminocidos pueden dividirse en dos grupos segn su ruta catablica:

Aminocidos glucognicos, cuyos esqueletos de carbono se degradan a piruvato, a-cetoglutarato, succinil-CoA, fumarato u oxalacetato y son, por lo tanto, precursores de la glucosa. 2. Aminocidos cetognicos, cuyos esqueletos de carbono son degradados a acetil-CoA o acetoacetato y pueden ser convertidos en cidos grasos o cuerpos cetnicos
1.

La leucina y la lisina son los nicos aminocidos cuyo catabolismo es claramente cetognico; su esqueleto de carbono se convierte en acetil-CoA y en acetoacetato. Dado que los animales carecen de rutas metablicas para la conversin neta de acetil-CoA o de acetoacetato en precursores gluconeognicos, la sntesis neta de carbohidratos a partir de leucina, o de lisina no es posible. La isoleucina, la fenilalanina, la treonina, el triptfano y la tirosina son tanto glucognicos como cetognicos; la isoleucina, por ejemplo, se degrada a succinil-CoA y acetilCoA y, por lo tanto, es precursor tanto de carbohidratos como de cuerpos cetnicos (Seccin 24-3E). Los 13 aminocidos restantes son puramente glucognicos.

la fenilalanina, el triptfano y la tirosina son tanto glucognicos como cetognicos

leucina y lisina son los nicos dos aminocidos cuyo catabolismo es claramente cetognico

Cinco aminocidos, la alanina, la cistena, la glicina, la serina y la treonina se degradan para producir piruvato. El triptfano tambin debera ser incluido en este grupo dado que su producto de degradacin es la alanina, la que, como hemos visto, es sujeta de transaminacin formando piruvato. La serina se convierte en piruvato a travs de la deshidratacin mediada por la serina deshidratasa. Esta enzima dependiente de PLP, al igual que las aminotransferasas, funciona formando un aminocido base de Schiff del PLP para facilitar la eliminacin del tomo de hidrgeno a del aminocido. En la reaccin de la serina deshidratasa, sin embargo, el carbanin Ca se degrada con la eliminacin del C-OH del aminocido, en vez de por tautomerizacin, de manera que el sustrato sufre eliminacin de H20 en vez de desaminacin. El producto de la deshidratacin, la enamina aminoacrilato, se tautomeriza no enzimticamente a la correspondiente imina, la que espontneamente se hidroliza a piruvato y amonaco.

L-Treonina

Cistena, Glicina
La cistena puede convertirse en piruvato a travs de varias rutas en las que el grupo sulfhidrilo se libera como H2S, SO4- o SCN. La glicina se convierte en serina mediante la accin de la enzima serina hidroximetil transferasa, otra enzima que contiene PLP. Esta enzima utiliza el N5,N10-metilntetrahidrofolato como donador del grupo hidroximetilo.

Glicina - Cistena

La glicina, en una reaccin opuesta a la seguida durante su sntesis, reacciona con el metilen-tetrahidrofolato para formar serina, la cual es degradada por la serina dehidratasa como ya vimos anteriormente. La glicina tambin puede reaccionar con NAD+ y tetrahidrofolato para producir C02 y NH4+. La glicina puede ser convertida a glioxalate, el cual a su vez puede ser oxidado a CO2 y H20 o convertido a oxalato. La cistena forma piruvato. El azufre, originalmente derivado de la metionina, es convertido a H2S04.

Aminocidos relacionados con el glutamato forman -cetoglutarato

A. B. C.

D.

E.

La glutamina es convertida a glutamato por la Glutaminasa liberando su nitrgeno amdico como NH4+. La prolina puede ser oxidada, lo cual provoca que su anillo se abra y se forme glutamato. La arginina puede ser hidrolisada por la Arginasa heptica, formando urea y ornitina. La ornitina puede ser transaminada con el semialdehdo glutmico, el cual puede ser oxidado a glutamato. La histidina puede ser convertida a formiminoglutamato (FIGLU). El grupo formimino es transferido al tetrahidrofolato (FH4), y los restantes cinco carbonos forman glutamato. El glutamato puede ser desaminado por la actividad de la glutamato deshidrogenasa o transaminado para formar cetoglutarato.

C B

Aminocidos que Forman Succinil-CoA

Cuatro aminocidos son convertidos a propionil-CoA, la cual es carboxilada formamdo metilmalonil-CoA en una reaccin que requiere Biotina como cofactor. La metilmalonil-CoA es rearreglada para formar succinil-CoA en una reaccin que requiere vitamina B12. (1) La treonina es convertida por la serina dehidratasa en NH4+ y cetobutirato, este ltimo es convertido a propionil-CoA por descarboxilacin oxidativa. En una reaccin diferente la treonina puede ser convertida a glicina y acetil-CoA. (2) La metionina es un provedor de grupos metilos para la sntesis de varios compuestos; su azufre es utilizado para formar cistena; los carbonos restantes forman succinil-CoA.

la metionina y el ATP forman S-adenosilmetionina (SAM), la cual puede donar un grupo metilo y formar homocistena. La homocistena es reconvertida a metionina aceptando un grupo metilo de la poza del tetrahidrofolato por medio de la vitamina B12. La homocistena puede tambin formar cistationina. La degradacin de la cistationina produce cistena, NH4+, y a-cetobutirato, el cual puede ser convertido a propionil-CoA.

(3) y (4) La valina y la isoleucina, dos de los tres aminocidos ramificados, forman succinil-CoA

Cuatro aminocidos son convertidos a propionil-CoA, la cual es carboxilada formando metilmalonil-CoA en una reaccin que requiere Biotina como cofactor. La metilmalonil-CoA es rearreglada para formar succinil-CoA en una reaccin que requiere vitamina B12. (1) La treonina es convertida por la serina dehidratasa en NH4+ y -cetobutirato, este ltimo es convertido a propionil-CoA por descarboxilacin oxidativa. En una reaccin diferente la treonina puede ser convertida a glicina y acetil-CoA. (2) La metionina es un provedor de grupos metilos para la sntesis de varios compuestos; su azufre es utilizado para formar cistena; los carbonos restantes forman succinil-CoA. (3) y (4) La valina y la isoleucina, dos de los tres aminocidos ramificados, forman succinil-CoA

Aminocidos Ramificados
La degradacin de los tres aminocidos ramificados empieza por una transaminacin seguida de una descarboxilacin oxidativa que cataliza el complejo enzimtico -cetoacido ramificado deshidrogenasa. Esta enzima, como la -cetoglutarato deshidrogenasa, requiere pirofosfato de tiamina, acido lipoico, coenzima-A, FAD, y NAD+.
La valina es eventualmente convertida en succinil-CoA va

propionil-CoA y metilmalonil-CoA. La isoleucina tambin forma succinil-CoA despus de que dos de sus carbonos son liberados como acetil-CoA.

Aminocidos que forman Fumarato

(1) La fenilalanina es convertida a tirosina por la fenilalanina hidroxilasa, en una reaccin que requiere tetrahidrobiopterina y 02 (2) La tirosina, obtenida de la dieta o por la hidroxilacin de la fenilalanina, es convertida a homogentisato, cuyo anillo aromtico es abierto y roto, formando fumarato y acetoacetato (3) El aspartato es convertido a fumarato durante su actuacin en el ciclo de la urea y en el ciclo de los nucletidos de purina : en el cual el aspartato reacciona con el IMP para dar origen al AMP liberando fumarato

Aminocidos que forman Oxaloacetato

El aspartato es transaminado para formar oxaloacetate. La asparagina pierde su nitrgeno amdico para formar NH4+, formando aspartato en una reaccin catalizada por la Arginasa.

Aminocidos que son convertidos a acetil-CoA o a acetoacetato

Cuatro aminocidos (lisina, treonina, isoleucina, y triptofano) pueden formar acetyl-CoA fenilalanina y tirosina forman acetoacetato. La leucina es degradada para formar ambos, acetoacetato y acetil-CoA

El organismo humano es incapaz de sintetizar cerca de la mitad de los veinte aminocidos comunes, pero sin ninguna excepcin los requiere indispensablemente a todos ellos para la sntesis de protenas y su funcionamiento normal. Un aminocido esencial es aquel que el organismo considerado (normalmente el humano, o en general los mamferos) requiere para su funcionamiento normal, pero no posee los recursos enzimticos necesarios para sintetizarlo, por lo que debe obtenerlo a partir de su alimentacin. Los aminocidos no esenciales son tambin necesarios para la sntesis de protenas y el funcionamiento del organismo, pero pueden ser sintetizados in vivo a partir de determinados metabolitos producidos dentro del organismo a partir de otros intermediarios metablicos. Existen aminocidos que son esenciales slo en determinadas situaciones patolgicas o en organismos jvenes y en desarrollo. A estos se les ha aplicado la denominacin convencional de "condicionalmente esenciales".

Fuentes de protena animal, como carne, peces, huevos y leche proveen todos los aminocidos esenciales. Numerosos alimentos vegetales muestran limitaciones importantes en su contenido de algn aminocido esencial. De ah la importancia de variar la dieta y mezclar varias fuentes de protenas. Dietas vegetarianas restrictas tambin exigen cuidado, y frecuentemente exigen la ingestin de algunos productos de origen animal, dieta ovolcteo-vegetariana o de suplementos alimenticios.

No esenciales
Alanina Asparagina Aspartato Glutamato Serina

Esenciales
Fenilalanina Histidina Isoleucina Leucina Lisina Metionina Treonina Triptofano Valina

Condicionalmente esenciales
Arginina Cistena Glicina Glutamina Prolina Tirosina

La mayora de las plantas y bacterias consigue sintetizar la totalidad de los aminocidos, no existiendo en estos organismos el concepto de "aminocido esencial".

Aminocidos agrupados de acuerdo a su precursor metablico -Cetoglutarato

Glutamato Glutamina Prolina Arginina

Piruvato
Alanina Valina Leucina Isoleucina

3-Fosfoglicerato
Serina Glicina Cistena

Fosfoenolpiruvato y Eritrosa-4-fosfato
Triptofano Fenilalanina Tirosina

Oxaloacetato
Aspartato Asparagina Metionina Treonina Lisina

Ribosa-5-fosfato
Histidina

Ciclo del cido Ctrico

Degradacin de aminocidos Rutas generales

Sntesis de Serina
CO 2 -

Gluclisis

Deshidrogenasa
NAD+ NADH + H+

CO 2 C=O CH2 OPO3-2

Glucosa

H C OH CH2 OPO3-2

3-Fosfoglicerato

3-Fosfo-hidroxi piuvato

Inhibe
CO 2
-

Glutamato
Transaminasa

-Cetoglutarato
CO 2 -

Fosfatasa
H C NH3
+

H C NH3 + CH2 OPO3-2

CH2 OH

Serina (Ser)

3-Fosfoserine
80

Formacin de GABA
NH3 +
-

O 2 CCH 2 CH 2 CHCO 2 Glutamato

Glutamato decarboxilasa

NH3 +
-

O 2 CCH 2 CH 2 CH 2
Gamma-aminobutirato (GABA)

CO2

GABA es un importante neurotransmisor inhibitorio. Drogas (como las benzodiazepinas) que aumentan los efectos inhibitorios del GABA son tiles en el tratamiento de la epilepsia

L-Glutamato

L--Glutamil-

fosfato

L-Glutamato-5

-semialdehdo

La prolina se sintetiza a partir del glutamato formando el semialdehdo glutmico como intermediario

L-Glutamato-5

-semialdehdo

1-Pirrolina-5 -Carboxilato

Ambas vas se encuentran ntimamente conectadas

TRANSULFURACIN Y METILACIN

Homocistinuria Rara; deficiencia de cistationina -sintetase Dislocacin del Cristalino Retraso Mental Osteoporosis Enfermedades Cardiovasculares muerte Niveles sanguneos altos de homocistena asociados con enfermedad cardiovascular El Folate aumenta la conversin de homocistena a metionina Por lo tanto puede tener relacin con una ingesta deficitaria de cido flico

90

El tomo de azufre de la metionina se convierte en el azufre de la cistena. El sulfato que se genera por el catabolismo de la cistena se excreta o es utilizado en varias vas metablicas. Las vas de transulfuracin y metilacin estn ntimamente relacionadas.

La tetrahidrobiopterina (tambin llamada sapropterina o BH4) es un cofactor esencial de las tres hidroxilasas de aminocidos aromticos:
Fenilalanina-4-hidroxilasa (para la conversin de fenilalanina a tirosina), Tirosina-3-hidroxilasa (para la conversin de tirosina a L-dopa), y Triptfano-5-hidroxilasa (para la conversin de triptfano a 5-hidroxitriptfano).

Tambin es esencial para la sntesis de xido ntrico mediante la xido ntrico sintasa. La tetrahidrobiopterina se sintetiza a partir de GTP mediante tres reacciones enzimticas (GTP ciclohidrolasa I, 6-piruvoil-tetrahidropterina sintasa, y sepiapterina reductasa).

En el curso de las reacciones en las que participa como cofactor, la tetrahidrobiopterina se oxida, produciendo dihidrobiopterina. Posteriormente esta es reducida nuevamente a tetrahidrobiopterina mediante la accin de la dihidropterina reductasa, que utiliza NADH como coenzima.

Dihidropterina Reductasa

Destino de la Fenilalanina de la dieta:

A protenas ~25% A Tirosina ~75%

Aspartato y Asparagina Biosntesis

Piridoxal, Mecanismo de Accin

Las rutas de biosntesis de los aminocidos valina e isoleucina utilizan las mismas cuatro enzimas:

La sntesis de isoleucina empieza con una reaccin de condensacin entre el -cetobutirato (un derivado de la treonina) y el piruvato. En la sntesis de valina este primer paso de condensacin se realiza entre dos molculas de piruvato. La leucina se sintetiza en una serie de reacciones que se inician con el -cetoisovalerato, el cual es un intermediario en la sntesis de valina.

Acetohidroxicido Sintasa, que requiere Tiamina Pirofosfato Acetohidroxicido Isomeroreductasa, que utiliza NADPH Dihidroxicido Dehidratasa Aminocido ramificado Glutamato Transaminasa, que requiere PLP

Biosntesis de Valina, Leucina e Isoleucina (1)

Biosntesis de Valina, Leucina e Isoleucina (2)

Biosntesis de Corismato. El corismato es un intermediario de la ruta

llamada del Chiquimato (shikimate pathway). La formacin del corismato comprende el cierre del intermediario -ceto-3-deoxiarabinoheptulosonate-7-fosfato formando un anillo. Subsecuentemente se tendrn que formar dos dobles enlaces. La cadena lateral del corismato se deriva del fosfoenolpiruvato (PEP). El corismato es tambin un precursor en la sntesis de los anillos aromticos presentes en los terpenoides mixtos Vgr. los tocoferoles, las ubiquinonas, y la plastoquinona En la lamina siguiente podemos ver el camino biosinttico de los aminocidos aromticos, triptofano, tirosina y fenilalanina a partir del corismato.

Aminocidos no proteicos: intermediarios metablicos

COO+

COO+

COO+

COO+

H 3N C H CH2 CH2 CH2 NH3+

H 3N C H CH2 CH2 CH2 NH

H 3N C H CH2 CH2 SH

H 3N C H CH2 CH2OH

O C NH2
Ornitina Citrulina

Homocistena

Homoserina