Inativao do Cromossomo X

(Monitor: Rafael S. Schwab)

Introduo

Dentre os 46 cromossomos compositores de nosso genoma, dois so determinantes na diferenciao sexual da espcie, o que gera situaes distintas: na primeira h duas cpias praticamente iguais de um mesmo cromossoma, que se convencionou chamar de X, originando o gentipo XX (ou 46;XX), que dar origem a um indivduo do sexo feminino. Em outra possibilidade, alm de um desses cromossomos X, pode haver a presena do menor cromossomo humano, o qual se convencionou chamar de Y. O gentipo que se obter ser XY (ou 46;XY), caracterizando o sexo masculino na espcie. Todavia, se o genoma feminino possui o dobro de cromossomos X, ento as mulheres deveriam produzir o dobro de protenas codificadas pelos genes presentes em X, em comparao ao homem. No entanto, sabe-se que isso no ocorre um exemplo disso a enzima glucose-6-fosfato desidrogenase (G6PD), expressa por genes presentes no cromossoma X, e que est em quantidades equivalentes em ambos os sexos.

Compensao de dose e Hiptese de Lyon

Pde-se perceber, portanto, que, de alguma maneira, a natureza proveio s clulas das mulheres de um mecanismo de compensao de dose. Nesse sentido, em 1959, o pesquisador Susumo Ohno descreveu que, em interfase celular, um dos cromossomos sexuais de fmeas de mamferos era diferente e tinha um aspecto de heterocromatina condensada. Tal feito auxiliaria Mary Lyon, dois anos depois, a propor o que se conhece hoje como Princpio da Inativao do X ou, simplesmente, Hiptese de Lyon. Em suma, o princpio possui trs pontos chave: 1. Em clulas somticas das fmeas de mamferos, apenas um cromossomo X ativo para o processo de transcrio (transcricionalmente ativo). O segundo heterocromtico (de diferenciao perceptvel no microscpio ptico graas

distinta colorao) e inativo. Alm disso, surge nas clulas interfsicas (momento no qual h descompactao do material gentico para incio da diviso celular e, logo, facilitao da percepo do cromossomo inativo) como uma cromatina sexual: o corpsculo de Barr. 2. A inativao comea a ocorrer na vida embrionria, aps a fertilizao, mas interrompida pelo desenvolvimento do embrio. O processo ento finalizado at cerca do 13 ao 16 dia (na etapa de blastocisto, o que, se no ocorrer, letal). 3. Aleatoriedade na deciso de qual cromossomo X ser inativado (materno, Xm ou paterno, Xp) com permanncia irrestrita dessa deciso aps ela ser tomada pela clula. Por isso, na massa celular bastocstica de cerca de menos de 100 clulas, em cada uma haver aleatoriedade na inativao do cromossomo, com alta possibilidade de manifestao de diferentes fentipos pelas clulas filhas (semelhante ao que ocorre no mosaicismo)

Processo da Inativao

Entretanto, apesar da imensa contribuio de Lyon cincia, o que inclusive lhe rendeu o Nobel de Medicina, ela no elucidou os mecanismos genticos tambm por causa dos conhecimentos de sua poca do processo. Hoje, nesse ponto, os estudos se encontram mais avanados: sabese que o processo de Inativao do cromossomo X um mecanismo epigentico, baseado na metilao (pela enzima DNA metiltranferase) de dinucleotdos CpG e alterao conformacional da estrutura de histonas (por acetilao). Alm disso, ao contrrio do que Lyon teorizou, nem todos os genes so passveis de inativao uma vez que, se fossem, o indivduo com gentipo 45;X0 (caracterstico da Sndrome de Turner), no apresentaria manifestao clnica alguma. Na verdade, estima-se que 10% a 15% dos genes, presentes no cromossomo X inativado, principalmente nas regies pseudoautossmicas, permanecem transcricionalmente ativos, a maioria em Xp (importncia clnica). Pensando-se nisso, seria interessante questionar como a clula consegue inativar apenas um de dois cromossomos teoricamente iguais. Nesse sentido, teoriza-se que exista um fator de bloqueio em quantidade suficiente para impedir a inativao de um cromossomo X dentro da clula, e de apenas um. Por isso mesmo, quando analisamos indivduos com gentipos como 47;

XXY (Sndrome de Klinefelter) ou a rara e rarssima aneuploidias derivantes dos gentipos 48; XXYY e 49; XXXXX podemos afirmar que, respectivamente, em cada clula haver um, um e quatro corpsculos de Barr. Para explicar o que foi citado anteriormente, lana-se mo das sequncias gnicas que formam o centro de inativao do X (XIC Xinactivation center), mapeado em Xq, prximo a banda Xq13. Tais sequncias, presentes no cromossomo X, controlam o silenciamento do cromossoma em questo. Um potencial fator de bloqueio atuaria nessa regio inibindo-a. Prova disso a ocorrncia de uma translocao de XIC para um cromossomo autossmico resultando na inativao deste enquanto, na via oposta, um cromossomo X sem essa regio permaneceria ativo. Em uma anlise mais especfica, um importante gene de RNA nocodificante presente em XIC, chamado transcritos especficos do X inativo (XIST X-inactive specific transcript), parece ser o lcus regulador para a inativao do X. Considera-se que este gene, transcrito apenas pelo X inativado, forma um RNA que se acopla em ntima associao com o cromossomo no ativo, formando o complexo RNA de XIST/corpsculo de Barr
e iniciando o processo da inativao.

Continuando a anlise dos genes inativados de X, podemos perceber que o silenciamento gnico vem acompanhado de altos nveis de DNA metilado, baixos nveis de histonas acetiladas, baixos nveis de metilao de lisina-4 da histona H3 e altos nveis de metilao de lisina-9 da mesma histona (em mecanismos epigenticos). Ainda pode-se citar a presena de uma variante de histonas, denominada macroH2A, ao longo dos nucleossomos do cromossomo inativado.

Consideraes Finais

Apesar do mecanismo de inativao do cromossomo citado no estar completamente elucidado, importante ter em mente alguns dados importantes de utilidade clnica. Entre eles a possvel no-aleatoriedade da inativao do X em caso da existncia de um cromossoma anormal (mutado, por exemplo), ou em translocaes entre X/autossomo. Pensando-se nas mutaes, pode haver uma seleo e inativao da variedade mutada (Lyonizao Seletiva), da

mesma forma que pode haver a inativao da cromossomo normal (Lyonizao Negativa), o que pode ocasionar em mulheres heterozigoto doenas ligadas ao X, como Daltonismo, Hemofilia, DMD,entre outras. No caso de translocao, a inativao no-aleatria acontece com a seguinte lgica: caso o produto do cromossomo X seja balanceado (sem perda ou acrscimo de material gentico), o outro cromossoma X ser inativado. Caso no seja balanceado (no- balanceado, portanto, com alta possibilidade da existncia de genes extras ou faltantes), o produto translocado ser o cromossomo inativado. Ressalta-se ainda que, nos casos de no aleatoriedade da inativao do X, considerado que todas as clulas possuem o mesmo cromossomo sexual ativo,
uma vez que a outra linhagem gentica ter grande desvantagem sobre a linhagem seletiva.

fundamental tambm citar a existncia da reativao do cromossomo X, previamente inativado na oocitognese. Isso ocorre na gametognese com a atuao da enzima 5-azacitidina, que inibe a metilao de citosina, associada com a diminuio da expresso do gene XIST. Tambm bom relembrar que, apesar de ser similar, a inativao do cromossomo X no um mosaicismo, uma vez que todas as clulas da fmea possuem o mesmo gentipo. Apesar disso, como elucidado anteriormente, tal processo pode gerar o aparecimento de diferentes fentipos em um mesmo indivduo. De posse desses vrios fentipos, percebemos que, mais do que um mecanismo de compensao de dose, o processo de inativao de um dos cromossomos sexuais em fmeas um fator evolutivo sujeito s presses seletivas do meio. Por isso mesmo, a antes inativao por imprinting gnico (que ocorria em mamferos primitivos), demonstra a melhor eficcia da aleatoriedade e tambm, se analisarmos nosso processo adaptativo, uma ddiva evolutiva concedida s mulheres.
Contudo, importante ressaltar que, apesar de ocupar regies de homologia terica, X e Y no so homlogos, por causa de sua diferena gentica de herana. No entanto, mesmo assim eles ainda possuem regies denominadas pseudoautossmicas, nas quais os genes presentes so herdados como genes autossmicos comuns.

Epigentica a parte da gentica que estuda a manifestao, ou no-manifestao, gnica que ocorre por alterao estrutural do DNA e no em sua sequncia e/ou nmero de nucleotdeos. Pode-se citar dois processos principais importantes no caso, a metilao (aumenta a compactao), que a adio de grupos metil a trechos especficos (no caso, pela DNA metiltransferase a dinucleotdeos CpG) e a acetilao que a adio de grupamentos acetil (no caso, com o objetivo de descompactao da estrutura de histonas).