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CARACTERSTICAS GENERALES DE LOS DISTINTOS TIPOS DE RECEPTORES DE MEMBRANA MS IMPORTANTES 1. Receptores acoplados a canales de iones 2. Receptores acoplados a Protenas G 3. Receptores acoplados a Enzimas 4. Receptores de Citoquinas
Laura del Olmo Tipos ms importantes de receptores acoplados a canales de iones. Se pueden dividir en 2 grupos: (1) Aquellos que permiten el paso de CATIONES (+) producen una respuesta excitatoria. Acetilcolina Glutamato Serotonina ATP
(2) Aquellos que permiten el paso de ANIONES (-) generan respuestas inhibidoras de la seal. GABA (cido Gamma-AminoButrico) Glicina
Ejemplo para explicar el funcionamiento del canal: Receptor Nicotnico de acetilcolina (se llama nicotnico porque tambin se le puede unir nicotina)
Son receptores formados por varias subunidades proteicas (este en concreto tiene 5) que se disponen de forma concntrica. 2
Laura del Olmo Cada una de las subunidades (protenas independiente) est formada a su vez por protenas que tienen varios dominios transmembrana (trozos de la protena que estn atravesando completamente la membrana). *Los cilindros representan alfa-hlices. Va haber uno de los dominios que siempre estar orientado hacia el interior y hacia el centro. En el caso de este receptor la subunidad II es la que est orientada hacia el interiorcentro y posee residuos de leucina (aa hidrfobo). La presencia de las leucinas en la alfa-hlice del dominio de ese receptor hace que el canal pueda estar cerrado para que no pasen los iones.
Cuando el ligando se une al receptor (en este caso la acetilcolina) genera un pequeo cambio de conformacin que produce un mnimo cambio en las alfa-hlices, de manera que la leucina deja de estar orientada hacia el interior, disponindose ahora hacia la parte interna del propio canal (parte proteica del canal) y permitiendo que el canal est abierto. Los canales que permiten el paso de cationes/aniones suelen tener aminocidos cargados que evitan el paso de cationes/aniones que no debieran de pasar. Mutaciones puntuales en la estructura de la protena (por ejemplo cambios en las leucinas) producirn alteraciones tales como que el canal est permanentemente abierto. Como ya hemos dicho, las respuestas de este tipo de receptores acoplados a canales inicos son muy rpidas, de milisegundos, lo que significa que segn se abre el canal pasa el in y rpidamente se bloquea la respuesta. 3
Respuesta: algo ms lenta que en los receptores acoplados a canales Ligandos: gran variedad (distintos tamaos) y ejercen funciones o procesos de sealizacin muy distintos Accin: autocrina, paracrina, endocrina o sinptica (neurotransmisores) Procesos: regulan los sentidos (olor, vista, sabor), estn implicados en la contraccin cardaca y en procesos metablicos (regulacin de la liplisis) Unin (afinidad): media, con una KD que se encuentra en el rango nanomicromolar, es decir, con concentraciones mucho ms pequeas el receptor produce la respuesta 4
Funcionamiento (estructura):
La protena G es una protena integral transmembrana con varios dominios. Se encuentra en el interior y es inactiva cuando tiene unido GDP. Las protenas G tienen varias subunidades: SubU alfa: contiene el sitio de unin al nucletido de guanina (GDP/GTP) SubU beta y gamma: participan en la activacin y regulacin de la protena G
Cuando el ligando se une al receptor se produce un pequeo cambio de conformacin que se transmite a la parte interna del receptor, que tambin va a favorecer un cambio de conformacin en la protena G; entonces saldr el GDP y ya podr entrar el GTP en el sitio de unin que queda libre. Al unirse el GTP a la protena G sta queda activa, generndose un cambio de conformacin: se separa la subunidad alfa de las subunidades beta y gamma (liberacin de las subunidades reguladoras). La subunidad alfa se va a desplazar y se va a unir a la molcula efectora de la sealizacin, que est cerca de la membrana, activndola. La molcula efectora puede ser, en el caso de las protenas G: Un canal Una enzima
Una vez activado el efector la sealizacin ha de bloquearse. El GTP se hidroliza a GDP + Pi, quedando de nuevo el GDP en el sitio de unin de la protena G (estado inactivo). Esta reaccin es catalizada por una actividad GTPasa que contiene la propia protena G. La subunidad alfa ya puede volverse a unir con las subunidades reguladoras (beta y gamma) regresando a su conformacin inicial. Esto se denomina el CICLO DE LAS PROTENAS G y requiere un gasto de energa.
EFECTOS DE TOXINAS BACTERIANAS sobre estas vas de sealizacin: bloquean que se puedan reunificar la subunidad alfa con las subunidades reguladoras beta y gamma
Hay determinadas toxinas, como la botulnica o la del clera, que lo que hacen es que inhiben la actividad GTPasa de las protenas G, impidiendo su reunificacin con las subunidades reguladoras ( y ), quedando la va de sealizacin permanentemente activada. Como algunas de estas protenas G estn implicadas en la regulacin de la contraccin muscular del corazn, producen alteraciones en los ritmos cardacos pudiendo llegar a provocar un paro cardaco, ya que dejan el sistema permanentemente activado. En el clera la gastroenteritis que se produce se debe a la hiperactividad de uno de los canales inicos que hace que se eliminen grandes cantidades de agua por el intersticio.
Las vas ms importante de sealizacin son las de las protenas Gs y Gi, las que actan activando/inhibiendo a la adenilato ciclasa respectivamente. Cuando el ligando se une al receptor que tenga estas protenas G, stas se activan y se unen a la adenilato ciclasa alterando su actividad. 7
Laura del Olmo Uno de los factores de transcripcin que se regula por la accin de la PKA es CREB: factor de transcripcin de respuesta a AMPC. Cuando se fosforila por la PKA se dimeriza y en la forma dimrica se une al DNA y modula la transcripcin de distintos genes. Es decir, se une a ciertas secuencias de DNA o elementos de respuesta a AMPC mediante los cuales incrementa o reduce la transcripcin regulada por estos genes.
Caractersticas generales:
Efectos: mucho ms lentos, largos. El tiempo de duracin depende mucho del receptor y puede oscilar entre minutos y horas. Por ejemplo: si se activa la enzima tardar minutos; en cambio, si se activa la transcripcin tardar horas Procesos que regulan: estn implicados en la activacin/inhibicin de la expresin gnica, en la divisin celular, en la diferenciacin celular y tambin en los procesos de apoptosis Algunos tienen efectos muy importantes en la regulacin del metabolismo, como el RECEPTOR DE INSULINA, que pertenece a este grupo. Ligandos: protenas Unin (afinidad): alta, con una KD que suele oscilar en el rango picomolar (es decir, con concentraciones de 10-12 ya se estn produciendo efectos) 9
I.
Es uno de los ms importantes. Este tipo de receptores los presentan los factores de crecimiento (molculas que inducen la divisin celular) as como el receptor de insulina. Los receptores suelen ser monmeros que atraviesan la membrana en la porcin extracelular donde tienen la zona de unin al ligando; la porcin intracelular es la que posee la actividad cataltica tirosina-quinasa. El receptor de insulina es una excepcin porque ya se encuentra en las clulas en forma de dmero y el mero hecho de que se una la insulina (ligando) activa al receptor y hace que se fosforile. Para que el receptor se active es necesario que se unan dos molculas del ligando y estas subunidades se aproximen (cross linking").
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Laura del Olmo Una vez que se ha producido la activacin a travs de la autofosforilacin del receptor, las otras protenas nos pueden dar 2 vas distintas de sealizacin:
i.
En el caso concreto del receptor de insulina est implicado en los efectos metablicos de la hormona. Por ejemplo, regula el transporte de glucosa mediante la translocacin de los trasportadores GLUT-4 del interior a la membrana plasmtica (en musculo esqueltico o tejido adiposo preferentemente), activa la gluclisis, inhibe la liplisis Todas estas vas que regula la insulina lo har a travs de esta va de sealizacin de la PI3K. El receptor se autofosforila para activarse y luego se unen protenas adaptadoras que permitirn la unin de PI3K y que sea fosforilada por el receptor, lo que le va permitir actuar sobre su sustrato, los cuales son fosfolpidos de membrana, en particular el PI4,5-bisfosfato. Cuando acta la PI3K lo fosforila dando lugar al PI-3,4,5-trifosfato. La presencia de este PI-3,4,5-trifosfato permite que protenas que tienen dominios PH (dominios de unin a fosfolpidos) se puedan aproximar y unir a la membrana plasmtica.
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Laura del Olmo PROTENAS CON DOMINIOS PH: (1) PKD y (2) PKB Dos de las protenas que presentan estos dominios PH y que se unen al PI-3,4,5trifosfato en la membrana plasmtica son 2 quinasas: PKD y la PKB. La unin de la PKD a los inositoles de membrana la activa, y al activarse va a fosforilar a la PKB (como se han unido a la membrana van a estar fsicamente al lado). Cuando la PKB (tambin llamada AKT) se fosforila por un lado se activa y por otro se disocia de la membrana y se trasloca al interior de la clula, donde va a fosforilar a sus dianas.
ii.
VA DE LAS MAPK (Protena Activada por Mitgenos; factores que inducen la mitosis): RTK ras GTPasa
Es una va muy importante porque es la va que regula la mayor parte de los procesos de mitosis y divisin celular. Los factores de crecimiento sealizan a travs de esta va para inducir que la clula se divida. Estas vas de sealizacin en los tumores estn permanentemente activas, por lo que son rutas que tienen un inters muy alto sobre todo en el estudio molecular del cncer.
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Las MAPK son quinasas que finalmente inducen procesos de divisin celular y que se activan por mitgenos (factores que actan en el ciclo celular estimulando la divisin celular; factores de crecimiento). Hay distintos tipos de MAPK y se conocieron asociadas a procesos tumorales en los que se vea que su actividad era muy alta. 13
Laura del Olmo Tienen distintas dianas y la mayora activan factores de transcripcin y por tanto modulan la expresin gnica. Tambin fosforilan protenas produciendo la activacin de enzimas, cambios en la permeabilidad de las membranas... Las MAPK para ser activas tienen que ser fosforiladas por las MAPKK, las cuales tambin tienen que estar fosforiladas para ser activas por las MAPKKK. En muchas de las rutas la MAPKKK se activa por la protena G. MEK (MAPK) y Raf (MAPKK) son algunos de los nombres de las protenas que pertenecen a este grupo. Como se trata de fosforilaciones, en cada uno de estos pasos necesitamos ATP, lo que conlleva un gasto energtico muy grande (cuando una hormona se une a un receptor).
En un proceso tumoral se estar gastando mucho ATP ya que en los tumores estas vas de las MAPK estarn permanentemente activas.
II.
Este tipo de receptores atraviesa la membrana y tambin consta de 2 dominios: (1) Dominio extracelular sitio de unin al ligando (2) Dominio intracelular donde se localiza la enzima El receptor se tiene que unir al ligando para que se produzca un acercamiento entre dos receptores, se dimericen y as se active la enzima.
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Laura del Olmo La enzima GUANILATO-CICLASA cataliza la transformacin de GTP GMPC, el cual es un segundo mensajero que a su vez (de forma parecida al AMPC) activa a una quinasa, la PKG. Al igual que ocurra con el AMPC, tambin hay una enzima, la fosfodiesterasa, que elimina el GMPC transformndolo en 5-GMP, con lo que la va se parar. *La viagra inhibe la fosfodiesterasa, por lo que aumenta el GMPC pudiendo llegar a producirse un paro cardaco por la activacin permanente de la va. En resumen: I. II. III. IV. Activacin: acercamiento y dimerizacin de los receptores Guanilato-ciclasa: GTP GMPC GMPC: activacin de la PKG PKG: actuacin sobre distintas dianas (canales, enzimas, algn factor de transcripcin) Fosfodiesterasa (eliminacin del GMPC): GMPC 5-GMP
V.
o Musculatura lisa de los vasos vasodilatacin (disminucin de la TA) o Tbulos renales eliminacin de Na+
Una vez que se ha regulado la TA la fosfodiesterasa ha de eliminar el FNA. 15
4. RECEPTORES DE CITOQUINAS
*Citocinas o citoquinas: protenas que regulan la funcin de las clulas que las producen u otros tipos celulares.
Los receptores de citocinas tienen vas de sealizacin menos conocidas porque stas se conocen desde hace poco tiempo. Las citocinas son pptidos pequeos que pueden ser producidos por cualquier tipo celular, y dentro de todos esos grupos celulares, las que las producen en mayores cantidades son las clulas sanguneas. 16
Laura del Olmo Dentro del grupo de las citosinas encontramos: Interleuquinas (IL): regulan los procesos de diferenciacin de los leucocitos Interferones Factor de necrosis tumoral (TNF) Leptina
VA JAK/STAT
En general sus receptores presentan una va de sealizacin que se denomina VA JAK/STAT. Los receptores no son enzimas pero tras la unin de su ligando (citocina) van a activar a una enzima quinasa, la JAK (Janus Kinase). La JAK se autofosforila y fosforila al receptor, es decir, el receptor se fosforila por accin de la JAK. El hecho de fosforilar al receptor permite que aparezcan en l dominios de reconocimiento de fosfotirosinas y en uno de esos dominios se va a unir otra protena, la STAT (Seal Activadora y Transductora de la Transcripcin), que es un factor de transcripcin.
En resumen: I. II. III. Fosforilacin Separacin del receptor Dimerizacin. Para ello tiene que estar fosforilado. El dmero transloca al ncleo y all se abre a regiones especficas del DNA modulando la transcripcin.
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