MaraMuniesaGallardo

ANLISISCONFLUIDOSSUPERCRTICOS:EXTRACCINY
CROMATOGRAFA
PRINCIPIOSBSICOSDELAEXTRACCINENFLUIDOSSUPERCRTICOSANALTICA:
Laextraccinconfluidossupercrticos(SFE)esunatcnicarelativamentenuevalaqueofrece
elanalistaunaalternativaparalapreparacindelasmuestrasantesdelanlisis,queesrpido
ymenospeligrosoambientalmentehablando.Enestetemasedescribalosprincipiosbsicos
queenvuelvenlaaplicacindelatcnicaparapreparacindemuestrasenqumicaanaltica.

PREPARACINDEMUESTRAENQUMICAANALTICA:
Tcnicasutilizadas:
- Filtracinydilucin
- Destilacinyextraccinlquidolquido
- cromatografadeexclusinydeadsorcin
- columnasdeextraccinenfaseslida
- Extraccinconfluidossupercrticos

La extraccin con fluidos supercrticos (SFE) es una tcnica particularmente rpida para la
eliminacindecompuestosnopolaresdecompuestosmoderadamentepolaresapartirdeuna
variedaddematricesdemuestra.

UTILIZACINDEFLUIDOSSUPERCRTICOSENEXTRACCINAESCALAANALTICA
Tienenvariasventajassobrelosmtodosdeextraccinconvencionales.Entreellasrequieren
menortiempoytienenunamejorprecisin,queporejemplolaextraccinSoxhlet.
CARACTERSTICASDELASFEANALTICA
La extraccin con fluidos supercrticos es una tcnica que emplea una fase fluida que tiene
propiedades intermedias entre un gas y un lquido, para llevar a cabo la solubilizacin de los
fluidos.
Ventajas:
- Viscosidades ms bajas y difusividades ms altas que los disolventes lquidos,
permitiendoasunatransferenciamseficientedelossolutos.
- Supoderdisolventesepuedeajustaratravsdelacompresinmecnicadelfluidode
extraccin
- una adecuada eleccin del fluido de extraccin permitir tambin llevar a cabo la
extraccinatemperaturasenbajas
EnlasaplicacioneseningenieradeSFEesimportantemaximizarelrendimientodelextractoa
travsdeungastomnimodeenerga.Adems,sedebetenercuidadoalminimizarlapresin
extraccinyaqueestoincrementaloscostosasociadosalaconstruccindeplantasdestinadas
a soportar altas presiones. Sin embargo, para fines analticos el tamao de la muestra o la
concentracindelanalitoobjetivoesgeneralmentemuchomenorqueenelcasodeingeniera.
Esto tiene dos implicaciones prcticas en SFE Analtica. Por un lado, la cantidad de gas de
extraccin requerido es considerablemente menor que en SFE a gran escala, por lo tanto un
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lquidobaratoynotxicopuedenserdescomprimidosenlaatmsferadespusdesuuso.En
segundo lugar, para extracciones cuyas cantidades de trazas de analito, pueden ser utilizadas
presionesdeextraccinmuchomsbajas.Sinembargo,paraciertasaplicacionesanalticasde
SFE, la consecucin de la mxima solubilidad puede ser deseable, por lo tanto son necesarias
densidadesdelosfluidosmsaltasconelfindeacortareltiempodelaextraccin.
LASPROPIEDADESDELOSFLUIDOSENSFE
Se debe elegir un fluido que solubilice mejor los solutos de inters y acelere el efecto de
extraccindelosanalitos.
1. Seleccindelfluidosupercrtico.
Losdosparmetrosimportantesalahoradeelegirelfluidosupercrticosonlatemperaturay
la presin crtica, ya que la presin crtica en principio determina la magnitud del poder
disolvente del fluido. La temperatura crtica del fluido ejerce su influencia tanto de manera
terica como prctica. Desde la perspectiva prctica, se debe considerar el efecto de la
temperaturadeextraccinenlaestabilidadtrmicadelosanalitos.Tericamente,ladensidad
mxima de extraccin de gas se obtiene mediante la seleccin de una temperatura de
extraccinqueestcercadelatemperaturacrticadelfluido.
El uso de fluidos especficos puede tambin mejorar la solubilidad de una clase particular de
analitosdurantelaSFE.
2. Propiedadesnicasdeldixidodecarbonosupercrtico
o Temperaturacrtica:31C
o Permite la extraccin a bajas temperaturas en compuestos lbiles
trmicamente
o Noinflamableeinodoro
o Relativamentebaratoydisponibleencantidadessatisfactorias
o Conlaventilacinadecuada,presentapocopeligroparaelanalista
o Extrae preferentemente compuestos no polares, puede exhibir un momento
dipolarinducido,quemejoralaextraccindesolutosmoderadamentepolares
enlafasefluida
o Engeneralesundisolventeexcelenteparalaextraccindesolutoslipfilosde
variasmatricesdemuestra.
3. ElusodecosolventesenSFE
Enalgunoscasos,sevuelvedeseableaadiruncosolventealfluidosupercrticoparamejorarla
solubilidad del analito en el medio de extraccin. Estos cosolventes son normalmente
disolventes orgnicos. La adicin de cosolventes no solo mejora la solubilidad de un analito,
sino que tambin en casos especficos mejorar el factor de separacin entre solutos ya que
estn divididos selectivamente en la fase del fluido supercrtico. Los factores mximos de
separacinsesuelenconseguirconlosnivelesdesolutobajosenlafasedelfluidosupercrtico.
La funcin de un cosolvente en una SFE a gran escala es principalmente la de aumentar la
solubilidaddecomponentesnovoltilesenlafasedelgascomprimidoyfacilitarlaseparacin
desolutodespusdelaextraccin.
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Elefectodeuncosolventeenparticularsedebedeterminarporobservacinexperimental.No
hayningunateoraquepuedapredecirsatisfactoriamenteelefectodelaadicindecosolvente
enlasolubilidaddelossolutosenunfluidosupercrtico.
Ademslaadicindeuncosolventepuedecambiarelpuntocrticodelamezclaconrespecto
delfluidosupercrtico puro.Porlotanto,esimportante conocerla magnitud deeste cambio
paraajustarlosparmetrosexperimentalesacordesconlarealizacindeunaextraccinenla
regindeunafase.Sedeberegularentonceslacantidaddecosolventeaadido.
OPTIMIZACINDELASCONDICIONESEXPERIMENTALESPARASFEANALTICA
Sehandesarrolladomuchasaproximacionestericasparapredecirlasolubilidaddelossolutos
en el medio supercrtico pero tienen un valor limitado para el analista debido a su al tiempo
requerido y la falta de influencia de la propiedad fsica de la matriz de la muestra que puede
tenerunefectosinrgicooderetrasoenlarecuperacindesolutos.
1. Objetivosdelaextraccin
Para elegir las condiciones optimas para llevar a cabo la SFE, se debe definir el objetivo
analtico,yaqueparamuchasaplicaciones,SFEnoesunatcnicaaltamentediscriminativa.De
hecho, SFE raramente permite el aislamiento de un analito especfico para la exclusin de
otros restos coextrados. Una forma de fraccionamiento sera simplemente variando la
temperaturaylapresindeextraccin.Estemtodoslodabuenosrendimientoscuandohay
diferencias significativas en el peso molecular o en la polaridad entre los componentes a ser
extrados.
La total extraccin de la matriz de mezcla por SFE requiere que el tiempo de extraccin sea
optimizado,debidoaquesehademostradoqueelfraccionamientodeunamezclaporSFEno
dependesolodelapresinytemperaturaexperimentales,sinotambindeltiempo.Eltiempo
requeridoparacompletarlaextraccindelamuestravaadependerdelamasadelamuestra
tomadaparalaextraccinydelniveldematerialextrableenlamuestra.
2. ParmetroscrticospertinentesdeSFE
a. Presin:(odensidad)ala queladisolucindeseadaseconviertemisciblecon
lafasedefluidosupercrtico
b. la condicin para obtener la mxima solubilidad del soluto en el fluido de
extraccin
c. laspropiedadesfsicasyqumicasdelossolutosquesonextraidos.Sobretodo
elpuntodefusinylapresindevapor.
En general, conocer la presin de miscibilidad y la solubilidad mxima para un fluido dado
definiraelrangodepotencialdepresionesparalaextraccinfraccionadadeloscomponentes.
Es importante conoces la presin de miscibilidad de los diferentes compuetos, porque puede
determinar la facilidad con la que se van a separar en principio, aunque por desgracia,
normalmente muchos compuestos tienen deferencias pequeas en sus presiones de
miscibilidad,porloqueunaSFEselectivaenlaprcticaesunpocomscompleja.

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3. AproximacintericaalaoptimizacindeSFE
Sedesarrollaunmtodomssimple,basadoenlacombinacindelateoradelosparmetros
de solubilidad con el concepto de parmetros de interaccin de FLoryHuggins, los cuales
explicanmuchasdelascaractersticasdestacadasdelaSFE.
Ecuacinutilizada:
_ = _
H
+ _
S
=
I

1
RI
(o
1
-o
2
)
2
+ _
S

Donde_es el parmetro de interaccin total;_

H
, _
S
son los parmetros de interaccin
entlpico y entrpico, respectivamente;o
1
, o
2
son los parmetros de solubilidad del fluido
supercrticoydelsoluto,respectivamente;yI

1
eselvolumenmolardelfluido.
Lasolubilidaddelfluidosupercrtico,o
1
,secalculaporelmtododeGiddings:
o
1
= 1.2SP
c
1 2
(

1
Iqud
)
Donde P
c
es la presin crtica del fluido,

es la densidad reducida del fluido supercrtico, y

1
Iqud
esladensidadreducidadelfluidocasilquido,cuandolascondicionesseacercanala
compresininfinita.
La presin de miscibilidad del soluto en la fase fluido supercrtico puede ser aproximada
empleando el concepto del parmetro de interaccin crtica de Flory, de tal forma que eel
parmetrodeinteraccincrticavendradadopor:
_
C
= (1 + x
1 2
)
2
2x
Dondex = I

2
I

1
siendoI

2
elvolumenmolardelsoluto.
IMPORTANCIADELOSDATOSSFCDERIVADOSPARALASFEANALTICA
La tcnica de cromatografa con fluidos supercrticos (SFC) puede ser usada
independientementedeSFE,sinembargo,enmuchoscasosSFCpuedeayudareneldesarrollo
delaSFE.Haydosreasgenricasdeaplicacinquevalelapenadestacar:enprimerlugarla
utilizacin de anlisis de SFC para obtener datos relevantes para analtica SFE, y en segundo
lugar las implicaciones de tales mediciones para el qumico analtico en el desarrollo del
mtodoSFE.
La literatura de SFC es una excelente fuente para la identificacin de compuestos que tienen
ms probabilidades de ser susceptibles de SFE, por lo tanto es capaz de proporcionar la
verificacininstantneadeladeextraccindeuncompuestoenparticular.Ademslosdatos
de retencin SFC han demostrado tener un valor predictivo en la determinacin de la
concentracin de cosolvente correcta que es requerida para la extraccin de herbicidas
trmicamentelbilesdediversasmatricesdemuestra.

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LAPRCTICADESFEANALTICA
Unapreguntaclavealaqueseenfrentaelanalistaserladesillevaracabolaextraccinenel
modo"offline",ocombinarlaetapadeextraccinconotratcnicaanaltica,loquefacilitaun
modo"online"deextraccin.Lacomplicacinconestemtodoonlineesquerequiereque
elanalistaentiendaycontrolemsdeunatcnicasimultneamente.
1. Equiposrequeridos
Ambos modos offline y online tienen una base comn en el equipamiento que se utiliza.
Hablandoengeneral,unextractorconfluidossupercrticosanalticoconsisteenunafuentede
fluido,unmdulodesuministrodefluido,undispositivoderegulacindecontrapresin,yun
colectorparaaprovecharelextractodespusdeSFE.Ellquidosesuministranormalmenteen
cilindrosdegasaaltapresin,quepuedenserequipadoscontubosinductores,sielfluidoes
bombeado en el aparato de SFE. En algunos casos, la presin del tanque de fluido se ha
encontrado que es suficiente para la realizacin de la SPE de niveles de trazas de sustancias
txicasapartirdematricesdemuestrasdiferentes.
2. Consideracionesexperimentales
Se debe considerar por ejemplo el efecto de la temperatura en el estado fsico del fluido
supercrticoylafaseresultanteenequilibrioesparticularmenteimportanteenlaejecucinde
SFE. Es muy importante para el sistema SFE calentar adecuadamente de modo que se
mantiene una sola fase antes de la descompresin y recogida de los solutos extrados. Si se
falla al mantener la condiciones isotrmicas en la celda de extraccin se pueden alcanzar
diferentes resultados; sin embargo, tales condiciones no son necesarias en todo el sistema,
paraevitarlaprecipitacinanalitoantesdesucapturaenlacorrientedefluido.Esimportante
precalentar el fluido supercrtico antes de introducirlo en la cmara de extraccin. Hay que
asegurarse tambin de calentar las vlvulas de descompresin y reguladores para que no
precipiteahelanalito.
Tanto la clula como los tubos asociados deben de ser inertes con respecto a las condiciones
deextraccin.
Otro parmetro crtico en el desarrollo de SFE es el diseo y la orientacin de la clula de
extraccin. El tamao de la clula de muestra debera ser lo suficientemente grande para
afrontar el problema analtico. Tambin es importante el diseo de la celda ya que algunas
permitenrecirculacindelfluidoextraidoatravsdelamatrizmuestraolatransmisindelgas
supercrtico a travs de una matriz acuosa. Tambin se han llegado ha encontrar datos
diferentesusandounamismaceldaenhorizontaloenvertical.
EsimportantetambincomprobarcuantofluidosenecesitarparacompletarlaSFE.
Ademspuedenocurrircambiosenlavelocidaddeflujodelfluidodurantelaextraccin.Estas
variacionespuedensermedidasconayudadeunmedidordeflujodemasa.

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EFECTOSMATRIZENSFE
La matriz de la muestra puede tener un efecto importante en los resultados que se obtienen
con SFE. Por desgracia, el conocimiento de la solubilidad de los analitos en fluidos
supercrticos no siempre permite una prediccin sobre la efectividad de la SFE para extraer
unamatrizparticular.
1. Efectosdelamatrizfsica
LamorfologafsicadelasustanciasometidaaSFEpuedetenerunainfluenciaimportanteenla
eficienciadelaextraccinylavelocidadconlaquesedesarrolla.Engeneralcuantomenores
eltamaodepartculadelasustancia,msrpidaycompletaeslaextraccin.
2. Cambiosqumicosenlamatrizdelamuestra
La composicin qumica de la matriz de la muestra puede tener un efecto potenciador o
retardador sobre los resultados que se obtienen con SFE. Uno de los parmetros que ms
influyeenlacomposicindelosextractosdefluidossupercrticoseselniveldehumedadenla
matrizdemuestra.Enmuestrasdetejidosbiolgicos,porejemplo,esteniveldehumedades
un punto de controversia entre diferentes investigadores. Si se deshidrata esta matriz
muestra, la SFE sera ms rpida debido a que las matrices altamente hidroflicas contactan
entreelfluidosupercrticoyelanalitoobjetivo.
3. Impactodelamatrizenlacinticadeextraccin
La tasa de extraccin de un soluto en una matriz utilizando un SFE es una funcin de su
solubilidadenlosmediosdecomunicacindefluidoylavelocidaddetransportedemasadela
salidadesolutodelamatrizdelamuestra.
Existencuatromecanismosdetransportedemasamayoritariosaconsiderar:
- Difusindelanalitoatravsdelvolumeninternodelamuestra
Si la fase que determina la velocidad es la difusin intraparticula, entonces la velocidad de
extraccin depender del tamao de partcula de la matriz de muestra. Algunas matrices al
exponerse al fluido supercrtico aumentan, facilitando asi el transporte de masa del analito
desdedentrodelamatrizdemuestra.
- Desorcinsuperficialdelanalito
El uso de cosolventes, como agua o mentanol, acelera frecuentemente la desorcin de un
analitodelasuperficiedelamatrizdelamuestra.
- Difusindelanalitoatravsdelacapalmitesuperficial
Esta tambin puede influir cinticamente en la extraccin de analito. Muchas muestras
slidaspromuevenlacondensacindeunacapasuperficialdelfluidodeextraccindensoenla
interfaselquidoslido.Lacinticadeltransporteatravsdeestacapadependerdelespesor
delapelculaydelreasuperficialtotal.
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- Transporteenlafasefluidosupercrtico
Este transporte esta gobernado por el coeficiente de difusin del analito en el medio fluido.
Estoscoeficientesdedifusindelossolutosenfluidossupercrticossonintermediosentrelos
que tienen en medio liquido y en medio gas. Este factor es independiente de la matriz de
muestra.
PROBLEMASYFUTURASINVESTIGACIONESNECESARIASENSFEANALTICA
ComparandoconlasextraccioneslquidasSFEtienemuchosmsfactoresexperimentalesque
controlar y entender para obtener resultados reproducibles, como por ejemplo la presin, la
temperatura,lavelocidaddelfluido,eltiempodeextraccin,etc.Ademslaoptimizacinde
estosparmetroshacequeeltiempoparaunproblemadeanlisisenparticularseamayorque
contcnicasdeextraccinconvencionales.
Las posibilidades de emplear SFE en qumica analtica son numerosas y parecen ser slo
parcialmentecontrarrestadasporlaslimitacionesmencionadas.