XXVII Congresso Interamericano de Engenharia Sanitria e Ambiental

II-057 - COLIFORMES COMO INDICADORES DA QUALIDADE DA GUA: ALCANCE E LIMITAES

Rafael K.X. Bastos(1) Engenheiro Civil, Universidade Federal de Juiz de Fora. Especializao em Engenharia de Sade Pblica, ENSP/FIOCRUZ. Ph.D. em Engenharia Sanitria, University of Leeds, UK. Professor e pesquisador do Departamento de Engenharia Civil da Universidade Federal de Viosa (UFV). Chefe do Servio de Tratamento de gua da UFV. Paula Dias Bevilacqua Veterinria, Universidade Federal de Viosa. Mestrado em Epidemiologia, Universidade Federal de Minas Gerais. Doutorado em Epidemiologia. Universidade Federal de Minas Gerais. professora e pesquisadora do Departamento de Veterinria da Universidade Federal de Viosa (UFV). Lus Eduardo do Nascimento Tcnico do Servio de Tratamento de gua da UFV. Graduando em Qumica da UFV. Geisla R.M. Carvalho Estagiria do Servio de Tratamento de gua da UFV. Graduanda em Nutrio da UFV. Carolina Ventura da Silva Estagiria do Servio de Tratamento de gua da UFV. Graduanda em Nutrio da UFV. Endereo(1): Universidade Federal de Viosa - Departamento de Engenharia Civil - Viosa - MG - CEP: 36571-000 - Brasil - Tel: (31) 899-2356 - e-mail: rkxb@mail.ufv.br RESUMO Apresenta-se o resultado do monitoramento de guas superficiais e subterrneas no municpio de Viosa. Foram utilizadas duas tcnicas de laboratrio para a deteco de coliformes totais, fecais e E. coli: fermentao da lactose teste do indol e mtodo cromofluorognico. Os resultados obtidos, aliados ao conhecimento acumulado em microbiologia sanitria, fornecem subsdios para a discusso sobre a validade (alcance e limitaes) do emprego de bactrias do grupo coliforme como organismos indicadores da qualidade da gua e apontam para a necessidade de atualizao da legislao vigente (Resoluo CONAMA 20/86 e Portaria 36GM/90). Adicionalmente, inclui-se breves comentrios sobre vantagens e desvantagens das tcnicas de laboratrio utilizadas. PALAVRAS-CHAVE: Qualidade da gua, Organismos Indicadores, Coliformes.

INTRODUO No desenvolvimento do conceito de organismos indicadores de contaminao, por muito tempo prevaleceu o emprego da E. coli, isolada e inicialmente denominada de Bacterium coli por Theodor Escherichi em 1955. Entretanto, a busca por agilidade e simplicidade deu lugar utilizao disseminada dos coliformes e, mais tarde dos coliformes fecais, determinados pelo teste da termotolerncia, introduzidos por Eijkman em 1904 (MLLER e MOSSEL, 1982; HOFSTRA e HUISINTT VELD, 1988). Reconhecidamente, o grupo dos coliformes fecais totais inclui espcies de origem no-exclusivamente fecal, podendo ocorrer naturalmente no solo, na gua e em plantas (OMS, 1995). Apesar da denominao, o grupo dos coliformes fecais tambm inclui bactrias de origem no-exclusivamente fecal (BAGLEY e SEIDLER, 1977; DUNCAN e RAZELL, 1972) e, principalmente em pases de clima tropical, mesmo que originalmente introduzidas na gua por poluio fecal, podem adaptar-se ao meio aqutico (LOPEZ-TORREZ et al., 1977). Estes so apenas dois exemplos de que, apesar de ainda no existirem substitutos altura, o emprego indiscriminado dos coliformes como indicadores de contaminao pode levar super ou subavaliaes da segurana ou dos ricos sade, associados a uma determinada situao. luz do conhecimento acumulado em Microbiologia e Engenharia Sanitria (ex.: composio do grupo coliforme, tcnicas de deteco, caractersticas dos microrganismos indicadores e patognicos, remoo atravs de processos de tratamento de ABES - Associao Brasileira de Engenharia Sanitria e Ambiental 1

XXVII Congresso Interamericano de Engenharia Sanitria e Ambiental guas, etc.), discute-se o alcance e limitaes do emprego dos coliformes como indicadores da qualidade da gua, vis--vis s respectivas normas e padres vigentes. nfase especial dada ao emprego dos coliformes totais (CT), coliformes fecais (CF) e E. coli na avaliao da qualidade da gua in natura, cuja discusso ilustrada com resultados de anlises de amostras de fontes variadas, conduzidas no Laboratrio de Controle da Qualidade da gua do Servio de Tratamento de gua da Universidade Federal de Viosa (STA/UFV).

MATERIAIS E MTODOS Os resultados apresentados referem-se s amostras analisadas no STA/UFV de 1998 at o presente, incluindo: monitoramento de rotina do manancial de abastecimento, monitoramento de rotina da gua distribuda no campus universitrio, servios prestados a terceiros: amostras de guas subterrneas, gua superficiais e nascentes. As tcnicas de coleta obedeceram aos procedimentos prescritos no Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater (APHA, 1995). Para a deteco e quantificao de coliformes totais (CT), coliformes fecais (CF) e E. coli foi empregada a tcnica de tubos mltiplos, incluindo a tcnica de fermentao (APHA, 1995), deteco rpida de E. Coli (DHSS, 1982) e mtodo cromognico-fluorognico. Na tcnica da fermentao foram utilizados os seguintes meios de cultura: CT presuntivo-caldo lauril triptose (CLT); CT confirmativo-caldo verde brilhante (CVB); CF-caldo EC (EC). CT foram confirmados quando da produo de cido e gs em tubos contendo CVB, incubados 37oC por 24-48 h; CF foram confirmados quando da produo de cido e gs em tubos contendo EC, incubados 44oC por 24 h. A presena de E. coli foi considerada quando da produo de indol (detectada pela adio de reagente Kovacs) em tubos contendo gua de triptona (AT), incubados 44oC por 24 h. Na deteco de CT e E. coli atravs do mtodo cromognico-fluorognico foi utilizado o meio de cultura Fluorocult caldo LMX (Merck).

RESULTADOS E DISCUSSO Ocorrncia de Coliformes nas Amostras Analisadas Na Tabela 1 so apresentadas as mdias geomtricas de 100 amostras do manancial de abastecimento do STA/UFV; trata-se de um reservatrio de acumulao de manancial superficial, cuja bacia de captao pouco protegida e sujeita a diversas interferncias e atividades antrpicas, tais como, ocupao urbana e atividades agropecurias. As mdias da Tabela 1 referem-se amostras coletadas e analisadas separadamente (em diferentes momentos), por mtodos distintos, ao longo de um perodo de cerca de 29 meses. Tabela 1: Ocorrncia de coliformes no manancial de abastecimento. Mdia geomtrica (org./100 ml). Mtodo CT CF E. coli FL-In 1,5 x 103 6,7 x 102 1,9 x 102 CrF 1,0 x 103 3,2 x 102 CT: coliformes totais; CF: coliformes fecais; FL-In: fermentao da lactose, teste do indol e CrF: mtodo cromognico-fluorognico. Anlises estatsticas no revelaram diferenas significativas entre as mdias de coliformes totais (CT) (t = 1,30; p = 0,20) e E. coli (EC) (t = 1,55; p = 0,12) determinadas pelos dois mtodos, sugerindo que ambas apresentaram sensibilidade e especificidade similares. J as densidades de CT, CF e EC, determinadas pelo mtodo FL-In, apresentaram-se, respectivamente, em ordens de grandeza decrescente e significativas estatisticamente (t = 2,78; p = 0,0064; t = 6,66; p = 0,0006). O mesmo foi observado entre as densidades de CT e EC, determinadas pelo mtodo CrF (t = 3,40; p = 0,0016). O trabalho incluiu ainda o monitoramento de outras guas superficiais, que em conjunto com o manancial de abastecimento (Tabela 1), totalizaram mais de 200 amostras. Anlise de regresso revelaram as seguintes relaes entre as densidades de CT, CF e EC (Figuras 1 a 4). 2

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CF = 10 -0, 9649 CT1, 1713 R 2 = 0,768

4

CF/100ml

0 0 1 2 3 4 5 6

CT/100m l

Figura 1: Relao entre densidades de CT e CF, mtodo Fl-In.

EC = 10 -1,2029 CT1,0062 R 2 = 0,3139

EC/100ml

0 0 1 2 3 4 5

CT/100ml

Figura 2: Relao entre densidades de CT e EC, mtodo FL-In.

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EC = 10 CT 2 R = 0,5983

-0,732

1,0425

EC/100ml

0 0 1 2 3 4 5

CT/100ml

Figura 3: Relao entre densidades de CF e EC, mtodo FL-In.

6 5 4
EC/100ml
EC = 10-0,1186 CF0,7711 R 2 = 0,4145

3 2 1 0 0 -1
CF/100ml

Figura 4: Relao entre densidades de CT e EC, mtodo CrF. Guardadas as devidas ressalvas (significncia estatstica dos coeficientes das regresses e reprodutibilidade dos resultados), poder-se-ia especular que: as densidades de CT, CF e EC, determinadas pelo mtodo FL-In, tendem a apresentar-se, respectiva e sensivelmente, em ordem decrescente de 1 unidade logartmica (UL); pelo mesmo mtodo, medida que as densidades de CF se elevam, alargam-se as diferenas entre as densidades destes e de EC, ou seja, menos os CF so confirmados como E. coli; por sua vez, as densidades de CT e EC, determinadas pelo mtodo CrF, diferem entre si de, aproximadamente, 1 UL; quando os CT apresentam-se em densidades inferiores a 102org./100 ml, E. coli tende a apresentar-se em densidades nodetectveis; inversamente a presena de E. coli foi, preponderantemente, detectada em gua com CT > 103org./100 ml e, ou, CF > 102org./ml.

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XXVII Congresso Interamericano de Engenharia Sanitria e Ambiental As observaes acima permitem inferir sobre a superioridade do mtodo CrF (maior especificidade) na deteco de E. coli, sendo isto ilustrado tambm pelo melhor ajuste da reta EC x CT determinada por este mtodo; alm disso a anlise realizada refora os questionamentos acerca da validade do teste de termotolerncia como indicador de contaminao fecal. Entretanto, de acordo com os dados da Tabela 1, poder-se-ia especular que o teste de termotolerncia em simultaneidade com o teste do indol, comparados ao mtodo cromofluorognico, gardam certa equivalncia. De toda sorte, os resultados confirmam a sugesto do emprego de E. coli como um indicador mais preciso de contaminao e de seu respectivo nvel. Nas Tabelas 2, 3 e 4 so apresentados, respectivamente, os resultados de anlises de amostras de poos rasos escavados, poos profundos, minas e nascentes. Ainda que limitadas pelo pequeno nmero de amostras, algumas consideraes sobre guas subterrneas poderiam ser destacadas. Os CT e CF podem no apresentar qualquer significado sanitrio, principalmente quando presentes em baixas densidades; quanto mais protegida a fonte de gua, mais os coliformes totais e termotolerantes mantm o atributo de indicadores de contaminao; preponderantemente, E. coli foi detectada quando as densidades de CT e CF so mais elevadas e, ou, de ordens de grandeza prximas entre si. Tabela 2: Ocorrncia de coliformes em amostras de poos rasos escavados (org./100 ml). CT CF E. coli Mtodo CT CF E. coli Mtodo 1,8 NR ND CrF 1,1 x 102 ND ND FL-In 4,5 ND ND FL-In > 1,6 x 102 NR 3,5 x 102 FL-In 2 4,5 2,0 ND FL-In 1,8 x 10 ND ND CrF 1,7 x 101 ND ND FL-In 3,3 x 102 NR ND CrF 1 1,7 x 10 2,0 ND FL-In 4,9 x 102 NR ND CrF 2,1 x 101 1,1 x 101 2,0 FL-In 7,0 x 102 NR ND CrF 2,3 x 101 ND ND FL-In 7,9 x 102 NR ND CrF 3,3 x 101 1,1 x 101 4,5 FL-In 2,4 x 102 ND ND FL-In 4,8 x 101 3,7 ND FL-In 1,3 x 103 1,3 x 103 1,2 x 101 FL-In 1 1 3 3 4,9 x 10 4,9 x 10 ND FL-In > 1,6 x 10 > 1,6 x 10 4,5 FL-In 7,8 x 101 NR ND CrF 3,5 x 103 2,4 x 103 NR FL-In 7,9 x 101* 5,6 ND FL-In 3,5 x 103 NR 3,3 x 102 CrF *Teste presuntivo para CT; ND no-detectado; NR: no-realizado; FL-In: fermentao da lactose, teste do indol e CrF: mtodo cromognico-fluorognico.

Tabela 3: Ocorrncia de coliformes em amostras de poos profundos (org./100 ml). CT CF E. coli Mtodo 2,0 2,0 ND FL-In 2,0 2,0 2,0 FL-In 2,0 2,0 2,0 FL-In 4,5 ND ND FL-In NR ND CrF 2,0 x 101 1,3 x 101 ND FL-In 2,3 x 101 2,3 x 101 ND FL-In 2,3 x 101 4,5 2,0 FL-In 1,7 x 101 NR ND CrF 1,7 x 102 NR ND CrF 2,7 x 102 NR ND CrF 7,2 x 102 NR ND CrF 1,1 x 103 CT: coliformes totais; CF: coliformes fecais; ND: no-detectado; NR: no-realizado; FL-In: fermentao da lactose, teste do indol e CrF: mtodo cromognico-fluorognico.

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XXVII Congresso Interamericano de Engenharia Sanitria e Ambiental Tabela 4: Ocorrncia de coliformes em amostras de nascentes (org./100 ml). CT CF E. coli Mtodo 2,0 2,0 ND FL-In 3,6 NR ND CrF 4,0 1,8 ND FL-In NR ND CrF 1,1 x 101 6,1 ND FL-In 2,2 x 101* ND ND FL-In 2,3 x 101* 3,3 x 101 ND FL-In 4,9 x 101 1 3,3 x 101 ND FL-In 4,9 x 10 7,0 x 101 1,8 FL-In 1,1 x 102 ND ND FL-In 1,1 x 102 1,7 x 101 ND FL-In 1,3 x 102 2* 4,5 4,5 FL-In 1,4 x 10 3,2 x 101 ND FL-In 5,4 x 102 5,4 x 102 5,4 x 102 FL-In 5,4 x 102 2 2 9,2 x 10 9,2 x 102 FL-In 9,2 x 10 3,3 x 101 3,1 x 101 FL-In > 1,6 x 103* 9,2 x 102 5,4 x 102 FL-In > 1,6 x 103* NR 1,3 x 103 CrF > 1,6 x 104 * Teste presuntivo para CT; ND: no-detectado; NR: no-realizado; FL-In: fermentao da lactose, teste do indol e CrF: mtodo cromognico-fluorognico.

Breves Consideraes Acerca dos Mtodos Empregados na Deteco de Coliformes Os mtodos cromofluorognicos so reconhecidamente superiores em sensibilidade e especificidade na deteco de coliformes (CT) e E. coli (CERQUEIRA et al., 1999; CERQUEIRA e S HORTA, 1990), por serem baseados na hidrlise de substratos definidos por enzimas especficas das espcies (APHA, 1995). Adicionalmente, apresentam as grandes vantagens de dispensarem o emprego de temperatura elevada (44,5 0,2oC) (CERQUEIRA e S HORTA, 1990) e fornecerem leitura em 24 h, tanto para CT quanto para E. coli. CERQUEIRA et al. (1990) registraram cerca de 4% de resultados falso-negativos para E. coli em amostras de gua naturais; entretanto outros estudos indicam percentuais bem superiores em amostras de fezes humanas (Chang et al., citado por CERQUEIRA et al., 1999). Em contrapartida, as tcnicas baseadas na fermentao da lactose, alm de apresentarem sensibilidade e especificidade inferiores (maior ocorrncia de falso-positivos e negativos), so bem mais trabalhosas: requerem duas temperaturas de incubao (35,5 0,2oC para CT e 44,5 0,2oC para CF ou coliformes termotolerantes) e sucessivas repicagens, podendo totalizar 72 h para leitura conclusiva (APHA, 1995). A indicao de contaminao atravs do coliformes fecais tem sido amplamente questionada, uma vez que o teste da termotolerncia acaba por incluir algumas espcies de origem no-exclusivamente fecal, principalmente do gnero Klebsiella (COX et al., 1988), podendo resultar em at 15% de falso-positivos (CERQUEIRA et al., 1999). Por sua vez, na busca de agilidade na deteco de E. coli, tem-se, simplificadamente, definido este organismo como um coliforme termotolerante (capaz de fermentar a lactose 44oC), simultaneamente indol-positivo mesma temperatura (DHSS, 1982). Este teste simplificado no detecta, portanto, cerca de 10% de espcies de E. Coli lactose-negativas ou 3-5% de indol-negativas; alm disso espcies de Klebsiella oxytoca podem contribuir para resultados falso-indol-positivos (HOFSTRA e HUISINT VELD, 1988). Embora neste trabalho no se tenha desenvolvido experimentos comparativos entre os dois mtodos, no mbito, e to somente, dos resultados analisados, as tcnicas revelaram certa equivalncia na deteco de coliformes totais. O mesmo poderia ser dito em relao a E.coli, guardada a ressalva de indcios de maior especificidade do mtodo cromofluorognico. Os questionamentos acerca da validade do teste da termotolerncia so, aparentemente, reforados. Em que pesem as desvantagens de maior volume de trabalho ABES - Associao Brasileira de Engenharia Sanitria e Ambiental 6

XXVII Congresso Interamericano de Engenharia Sanitria e Ambiental e consumo de tempo, fica a sugesto de que os teste de deteco rpida de E. coli mantm aplicabilidade, o que pode revestir-se de especial importncia quando fatores econmicos revelarem-se limitantes.

Alcance e Limitaes do Emprego de Coliformes como Indicadores da Qualidade da gua Dadas as dificuldades de isolamento rotineiro de organismos patognicos em amostras ambientais, desde os primrdios da Microbiologia Sanitria sugere-se que a indicao de contaminao seja determinada, prioritria e rotineiramente, atravs de indicadores microbiolgicos da presena de material fecal no meioambiente. H dcadas, na verdade h mais de um sculo, os organismos que melhor tm cumprido este papel so as bactrias do grupo coliforme, classicamente definidas como: Coliformes (Totais): grupo de bactrias, em forma de bacilos, gram-negativas, no-esporuladas, aerbias ou anaerbias facultativas, oxidase-negativas, que fermentam a lactose com produo de cido, gs e aldedo dentro de 24-48 horas 35-37oC. Coliformes fecais: bactrias do grupo coliforme que fementam a lactose com produo de cido e gs dentro de 24 horas 44-45oC.

de se observar que tais definies revestem-se de significado apenas prtico-laboratorial, no guardando qualquer valor taxonmico; sugiram de subsequentes tentativas de diferenciar Bacterium coli (E. coli) de outras bactrias da famlia Enterobacteraceae (JONES, 1988) e, dentre estas, aquelas mais nitidamente associadas contaminao de origem fecal (HOFSTRA e HUISINT VELD, 1988). Neste sentido, surgiu a sub-classificao do grupo coli-aerogenes, ou coliformes e a definio de sua composio pelos gneros Escherichia, Klebsiella e Citrobacter (1956), posteriormente complementada pela incluso do gnero Enterobacter (MLLER e MOSSEL, 1982). Entretanto, a classificao taxonmica mais recente revela que o grupo mais heterogneo. Compreende, por exemplo, espcies como Enterobacter cloacae e Citrobacter freundii, encontradas tanto em fezes quanto em guas ricas em nutrientes, solos e matria orgnica em decomposio; ou ainda espcies como Serratia fonticola, Rahnella aquatilis e Buttiauxella agrestis, raramente encontradas em fezes, porm capazes de multiplicar-se em gua tratadas de qualidade razovel (OMS, 1995). Por isso, na avaliao da qualidade de guas naturais, os coliformes totais tm valor sanitrio limitado. Sua aplicao restringe-se praticamente avaliao da qualidade da gua tratada, onde sua presena pode indicar falhas no tratamento, uma possvel contaminao aps o tratamento ou, ainda a presena de nutrientes em excesso, por exemplo, nos reservatrios ou nas redes de distribuio. De forma anloga, o grupo dos coliformes fecais inclui diversas espcies de vida livre dos gneros Escherichia, klebsiella, Citrobacter, Enterobacter, e Proteus (CERQUEIRA et al., 1999). Portanto, a utilizao dos coliformes fecais na avaliao da qualidade de guas naturais, principalmente em pases de clima tropical, tambm tem sido questionda e a tendncia atual de se referir ao grupo como coliformes termotolerantes (DHSS, 1982; OMS, 1995). Apesar disso, e com base no fato de que dentre os cerca de 106108 coliformes fecais/100 ml, usualmente presentes nos esgotos sanitrios predomina a Escherichia coli (esta sim, uma bactria de origem fecal), estes organismos ainda tm sido largamente utilizados como indicadores de poluio de guas naturais. Por outro lado, pouco provvel que os coliformes fecais se desenvolvam em sistemas de distribuio, a menos que exista abundncia de nutrientes, ocorra ps-contaminao, que a temperatura da gua tratada seja inferior a 13oC e que no exista cloro residual livre (OMS, 1995) e, por isto, ainda guardam certa credibilidade como indicadores da qualidade da gua tratada e distribuda.

Avaliao da Qualidade da gua in natura Neste contexto, a interpretao bsica do emprego de organismos indicadores que sua presena atesta poluio de origem fecal e, portanto, o risco de contaminao, ou seja, da presena de patgenos.

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XXVII Congresso Interamericano de Engenharia Sanitria e Ambiental Para tanto, alguns requisitos, ou atributos dos organismos indicadores devem ser observados (CABELLI, 1978): Serem de origem exclusivamente fecal. Apresentarem maior resistncia que os patognicos aos efeitos adversos do meio ambiente. Apresentarem-se em maior nmero que os patognicos. No se reproduzirem no meio ambiente.

De fato, no h um nico organismo que satisfaa simultaneamente todas estas condies. Assim, na ausncia de um indicador ideal, deve-se trabalhar com o melhor indicador, que seria aquele que apresentasse melhor a correlao com os riscos de sade associados com a contaminao de um determinado ambiente. Reafirmando o j exposto, os coliformes totais (CT) carecem de maior significado sanitrio na avaliao da qualidade de guas naturais. O indicador mais preciso de contaminao fecal a E. coli. Mesmo em mananciais bem protegidos no se pode desconsiderar a importncia sanitria da deteco de E. coli (LIMA et al., 2000), pois, no mnimo, indicaria a contaminao de origem animal silvestre, os quais podem ser vetores de agentes patognicos ao ser humano. No obstante, pelo fato de que a presena de coliformes termotolerantes, na maioria das vezes, guarda melhor relao com a presena de E. coli, aliado a simplicidade das tcnicas laboratoriais de deteco, seu emprego ainda aceitvel (OMS, 1995). RAMETEKE et al. (1992), na ndia, encontraram que a quase totalidade dos coliformes termotolerantes isolados de guas superficiais eram E. coli, mas apenas aproximadamente a metade em guas subterrneas. O grau de contaminao das guas usualmente aferido com base na densidade de organismos indicadores, no presuposto de que h uma relao semi-quantitativa entre estas e a presena de patognicos. A legislao brasileira (Resoluo CONAMA 20/86) classifica as guas superficiais de acordo com seus usos, incorporando a lgica de padres de exigncia (densidade de organismos indicadores) proporcionais aos riscos potenciais de sade. Para a irrigao o critrio de classificao pode ser resumido como na Tabela 5. Tabela 5: Padres de qualidade de guas para irrigao (Resoluo CONAMA 20/86) Culturas Irrigadas Critrio/Padro* Hortalias consumidas cruas, frutas que se desenvolvem rente guas no devem ser poludas por fezes ao solo e, ou, so ingeridas sem remoo de pelcula. humanas. Outras hortalias e plantas frutferas. < 1.000 CF/100 ml < 5.000 CT/100 ml Culturas arbreas e cerealferas. < 4.000 CF/100 ml < 20.000 CT/100 ml * em 80% das amostras, mnimo de cinco amostras mensais. CT = coliformes totais; CF = coliformes fecais. Verifica-se uma aparente contradio ao se exigir para a Classe 1 (irrigao de hortalias e frutas que se desenvolvem rente ao solo) uma qualidade bacteriolgica similar aos padres de potabilidade (virtual ausncia de organismos indicadores), ao mesmo tempo que permitido a recreao com contato primrio em guas com at 1.000 CF/1000 ml. Para a Classe 2 (irrigao de hortalias e frutas que no so ingeridas cruas), o limite mximo passa a ser de 1.000 CF/100 ml, sendo que este nmero apresenta uma razo prtica de ser. Seno vejamos: considerando que o esgoto sanitrio bruto contm de 107-108 CF;100 ml (Von SPERLING, 1995), para que as guas de um corpo receptor mantenham 103 CF/100 ml, seria necessria uma diluio da ordem de 1:103; considerando agora que as bactrias patognicas encontram-se em densidades bem mais reduzidas no esgoto bruto, por exemplo, da ordem de 103 Salmonellae/100 ml, com tal fator de diluio, estas praticamente desapareceriam na gua, reduzindo o risco de exposio dos hospedeiros. De fato, diversos estudos constatam uma associao mais ntida entre a presena de Salmonellae e densidades de coliformes fecais, ou mais precisamente E. coli, acima de 103org./100 ml (MORIIGO et al., 1990; BASTOS e PERIN, 1995). Por sua vez, a exigncia para a classe seguinte (Classe 3 irrigao de culturas arbreas, cerealferas e forrageiras) de 4.000 CF/100 ml, alm da relao CT/CF, estabelecida em 5:1, no guardam qualquer ABES - Associao Brasileira de Engenharia Sanitria e Ambiental 8

XXVII Congresso Interamericano de Engenharia Sanitria e Ambiental sustentao. Diversos estudos demostram que riscos potenciais crescentes de sade so melhor avaliados atravs de incrementos graduais de densidades de indicadores em unidades logartmicas (UL). Neste trabalho foram reunidos indcios de que a deteco de E. coli tornou-se mais rara quando da presena de CT < 103org./100 ml, alm do que CT, CF e E. coli mostraram-se presentes em densidades decrescentes em ordens, sensivelmente de 1 UL. O exposto refora sugestes no sentido de que a legislao incorporasse as seguintes adequaes (BASTOS, 2000): Padro de 103 coliformes termotolerantes/100 ml, ou preferencialmente E. coli, como valor mximo permito para irrigao de hortalias e frutferas, em geral; Excluso dos coliformes totais como indicadores de contaminao, ou, no mnimo a reviso criteriosa das relaes CF/CT; Reviso dos padres gradualmente mais flexveis por classes, talvez em ordens de grandeza de unidades logartmicas (potncias de 10).

No que diz respeito s fontes de abastecimento para consumo humano (incluindo poos e nascentes), a simples deteco de E. coli deve ser interpretada como indicao de contaminao fecal, e portanto, de sua no potabilidade. O emprego de coliformes totais deve ser evitado, enquanto o de coliformes fecais (termotolerantes) o deve ser de forma criteriosa, com as ressalvas cabveis.

Avaliao da Eficincia do Tratamento da gua Neste caso, o emprego dos organismos indicadores deve partir do seguinte entendimento: a ausncia do organismo indicador indicaria a ausncia de patgenos, pela destruio e, ou, remoo de ambos atravs dos processos de tratamento. Neste sentido, para que um organismo cumpra o papel de indicador da eficincia do tratamento, torna-se necessrio que alm de ser mais resistente aos processos de tratamento que os patgenos, o mecanismo de remoo de ambos seja similar. Em linhas gerais, bactrias e vrus so destrudos por desinfeco, enquanto protozorios (preponderantemente) e helmintos (quase exclusivamente) so removidos por filtrao. Quanto resistncia aos agentes desinfetantes, tambm em linhas gerais, em ordem crescente apresentam-se as bactrias, vrus, protozorios e os helmintos, estes praticamente imunes. Assim sendo, rigorosamente, os coliformes s se prestam como indicadores da remoo de bactrias patognicas. Portanto, na aferio da qualidade bacteriolgica da gua tratada, a ausncia dos coliformes totais um indicador adequado e suficiente da eficincia do tratamento, uma vez que apresentam uma taxa de decaimento (inativao) similar ou superior dos coliformes termotolerantes e da E. coli (OMS, 1995). No que toca avaliao da qualidade virolgica e parasitolgia da gua tratada, torna-se necessrio o emprego de indicadores complementares no-biolgicos, exemplo do cloro residual e turbidez (BASTOS, 2000).

Avaliao da Qualidade da gua Distribuda Mesmo que o tratamento seja adequado, a gua pode muito bem deteriorar-se ao longo da distribuio. O isolamento de E. coli no sistema de distribuio um sinal inequvoco de recontaminao fecal e, por medida de segurana, assim tambm deve ser interpretada a deteco de coliformes termotolerantes. J o isolamento de coliformes totais, embora no guarde uma relao exclusiva com recontaminao de origem fecal, serve como indicador da integridade do sistema de distribuio. guas insuficientemente tratadas, por exemplo, sem a garantia de residual de cloro, ou infiltraes, podem permitir o acmulo de sedimentos, matria orgnica e promover o desenvolvimento de bactrias, incluindo aquelas do grupo coliforme que no E. coli ou termotolerantes.

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XXVII Congresso Interamericano de Engenharia Sanitria e Ambiental Por isso, na avaliao da qualidade da gua distribuda, em geral, tolera-se a deteco eventual de coliformes totais, mas requer-se a ausncia sistemtica de E. coli ou coliformes termotolerantes. Na Tabela 6 encontra-se um resumo dos padres bacteriolgicos de potatibilidade vigentes no Brasil (Portaria 36/GM, 1990) Tabela 10. Padres bacteriolgicos de potabilidade. Organismos Padro Exigido ------------------------------------------ gua para consumo humano em geral ----------------------------------------Coliformes fecais Ausncia em 100 ml ----------- gua no-canalizada usada comunitariamente sem tratamento (poos, nascentes e fontes) ---------Coliformes totais Ausncia em 100 ml em 95% das amostras; nas 5% restantes sero tolerados at 10 CT/100 ml desde que isso no ocorra em duas amostras consecutivas. -------------------------------- guas tratadas na entrada do sistema de distribuio --------------------------------Coliformes totais Ausncia em 100 ml. ----------------------------------------- gua tratada no sistema de distribuio ---------------------------------------Coliformes totais Ausncia em 100 ml em 95% das amostras, nas 5% restantes tolera-se at 3 CT/100 ml, desde que isso no ocorra em duas amostras consecutivas, coletadas sucessivamente no mesmo ponto. < 500 UFC/ml Contagem de bactrais heterotrficas5 ----------------------------------- gua sem tratamento no sistema de distribuio -----------------------------------Coliformes totais Ausncia em 100 ml em 98% das amostras, nas 2% restantes tolera-se at 3 CT/100 ml desde que isso no ocorra em duas amostras consecutivas, coletadas sucessivamente no mesmo ponto. Percebe-se nos padres estabelecidos uma traduo ntida do entendimento necessrio ao emprego dos organismos indicado. Entretanto, a legislao vigente merece algumas alteraes, tais como (FORMAGGIA et al., 1996): A no-permisso de sistemas de distribuio de gua para consumo humano sem tratamento; A pertinncia do estabelecimento de um padro nico de aceitao de coliformes totais, sendo a tendncia universal a aceitao da presena destes organismos em, no mximo, 5% das amostras; A pertinncia de explicitao da E. coli como o indicador de primeira escolha em qualquer situao e o no aceite de sua presena, assim como dos coliformes termotolerantes (margem de segurana), em qualquer hiptese; A excluso dos coliformes totais como indicadores da qualidade da gua de poos, nascentes e fontes.

CONSIDERAES FINAIS O avano do conhecimento em Microbiologia Sanitria, aplicados sobre, e parcialmente ilustrados pelos, resultados reunidos neste e outros trabalhos, permitem as seguintes observaes: O indicador mais preciso da poluio da gua por material fecal , em qualquer situao, a E. coli. Coliformes totais no so indicadores adequados da qualidade da gua in natura, guardando validade apenas como indicadores da qualidade da gua tratada. A presena de coliformes totais em baixas densidades pode ser desprovida de qualquer significado sanitrio, o mesmo valendo para os coliformes fecais. Coliformes no so indicadores plenos da eficincia do tratamento de gua e devem ser empregados com critrios e ressalvas. O termo coliformes fecais deve ser evitado, empregando-se, preferencialmente, coliformes termotolerantes.

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XXVII Congresso Interamericano de Engenharia Sanitria e Ambiental Quanto menos exposta a focos de poluio for um manancial, mais os coliformes totais e termotolerantes mantm o atributo de indicadores de contaminao e vice-versa. A legislao vigente, mais especificamente, a Portaria 36 (padres de potabilidade) e a Resoluo CONAMA 20/86 (enquadramento das guas superficiais) demandam anlises crticas e revises.

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