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Autores:
Aparicio G., Luís E.
Ibáñez M., Carlos E.
Matos C., Gustavo A.
Peñaloza V., César M.
Tutora:
Profesora Vera, Rosa
Laboratorio de Investigaciones Genéticas, UNET
RESUMEN
El trabajo se realizó para generar alternativas de producción de lechuga, utilizando
métodos que permitan reducir la contaminación ambiental y obtener productos de calidad
libre de agroquímicos y buen crecimiento y desarrollo. El objetivo fue determinar el efecto
de diferentes especies de Trichoderma spp., en el crecimiento y desarrollo del cultivo. Se
evaluaron tres cepas de Trichoderma disponibles en el Laboratorio de Investigaciones
Genéticas de la Universidad Nacional Experimental del Táchira (UNET), identificadas
con los siguientes Códigos: T. koningiopsis (LIG006), T. asperellum (LIG043) y T.
harzianum (LIG044). En condiciones de laboratorio se inocularon las semillas,
sumergiéndolas en una solución de esporas con la concentración 1 x 10 12 e/ml,
correspondiente a cada tratamiento y al testigo sólo agua; se evaluó el porcentaje de
germinación, crecimiento de la radícula y sobrevivencia de las plantas al momento del
trasplante. Luego de trasplantadas en bolsas, cada dos semanas se aplicó 50 ml/ bolsa de la
solución 1 x 108 e/ml, correspondiente a cada tratamiento, y se midió altura de las plantas
y número de hojas; al final del estudio se determinó el peso seco total. Todos los
tratamientos con Trichoderma spp, independientemente de la especie, estimularon la
germinación con respecto al testigo, sobresaliendo T. asperellum con 87,1%. El
crecimiento de la radícula fue afectado por la aplicación de Trichoderma spp durante los
primeros tres días de germinadas, sin embargo, la sobrevivencia de las plantas al momento
del trasplante fue superior cuando se aplicó el hongo. La altura promedio de las plantas y
número de hojas, fue similar para todos los tratamientos incluyendo el testigo. Los
resultados sugieren un efecto positivo del hongo, sobre la germinación y el desarrollo de
plantas de lechuga, especialmente con la especie T. harzianum, puesto que se alcanzaron
los mayores valores de peso seco.
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Introducción
Cabe agregar que la lechuga tiene buena aceptación en la dieta del venezolano. Es
un alimento que aporta muy pocas calorías, alto porcentaje de agua (90-95%), vitaminas
(fosfatos, provitamina A o beta-caroteno y cantidades apreciables de vitamina C -estas dos
últimas con acción antioxidante, relacionadas con la prevención de enfermedades
cardiovasculares e incluso ciertos tipos de cáncer), minerales (potasio, magnesio) y fibra
(necesaria para el buen funcionamiento intestinal). Las hojas externas de color más oscuro
son las más nutritivas que las blanquecinas del interior. La lechuga romana cultivada al
aire libre es la más rica en vitaminas. (Fundación EROSKI, 2006).
Por otra parte, el género Trichoderma está compuesto por un grupo de especies de
hongos saprofitos del suelo y de la madera y es ampliamente conocido por el efecto
antagónico contra un amplio rango de patógenos de plantas. De este microorganismo
existen más de 30 especies. La especie más utilizada en la agricultura es T. harzianum.
Otras especies reportadas como fitobenéficas son: T. hamatum, T. lignorum, T. virens, T.
viride y T. koningiopsis (Cubillos et al., 2009).
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Diferentes especies de Trichoderma son utilizadas para el control de hongos
patógenos del suelo, principalmente de los géneros Phytophthora, Rhizoctonia,
Sclerotium, Colletotrichum, Pythium y Fusarium, debido a su facilidad de aislamiento y
cultivo, crecimiento rápido en un gran número de sustratos, y al hecho de no atacar a las
plantas superiores (Cubillos et al., 2009).
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El interés científico respecto de la utilización de biocontroladores, se ha
expandido, debido a la preocupación pública acerca de los potenciales efectos dañinos de
algunos productos agroquímicos sobre la salud humana y la conservación del ambiente.
Existe además, la necesidad de controlar varias enfermedades, frente a las cuales no se
dispone de control total, sólo parcial, debido a que la resistencia en el hospedero es escasa
o nula; la rotación de cultivos es, en ocasiones, poco práctica o no rentable (Mendoza, SF).
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Domínguez (2007), llevó a cabo una investigación en la aldea Mesa de Palenque
Municipio Jáuregui Estado Táchira para evaluar el control químico y biológico para la
mancha púrpura (Alternaria porri) en ajo porro (Allium porrum). Se evaluaron cepas de
Trichoderma harzianum y Trichoderma koningii para controlar la A. porri, donde se
destacó el Trichoderma koningii tanto como controlador como en estimulante de
crecimiento en las plantas.
Por su parte, Jaimes (2008), realizó un estudio en variedades de tomate (cv. El cid
y cv. Leila), inoculando Trichoderma harzianum y Trichoderma koningii, sumergiendo las
plántulas antes del trasplante y en el suelo alrededor de las plantas 51 días después
trasplante y un testigo sin inoculación. Encontró mayor altura de la planta al inocular cv
Leila con Trichoderma koningii y en la evaluación del diámetro del tallo actuó de forma
significativa el Trichoderma koningii en ambas variedades.
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El éxito de las cepas de Trichoderma spp como agentes de biocontrol se debe a su
alta capacidad reproductiva, habilidad de sobrevivir bajo condiciones muy desfavorables,
eficiencia en la utilización de nutrientes, capacidad de modificar la rizósfera, fuerte
agresividad contra el hongo fitopatógeno, y eficiencia en la promoción del crecimiento de
las plantas y mecanismo de defensa (Benítez et al., 2004). Ha sido ampliamente utilizado
como biocontrolador de diversos hongos en el suelo.
Materiales y métodos
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Se evaluaron tres cepas de Trichoderma las cuales fueron suministradas por el
Laboratorio de Investigaciones Genéticas de la Universidad Nacional Experimental del
Táchira (UNET), identificadas con los siguientes Códigos: T. koningiopsis (Código LIG
006), T. asperellum (Código LIG 043) y T. harzianum (Código LIG 044). El trabajo
estuvo conformado por tres experimentos, tal como se especifican a continuación:
Se utilizó la variedad Parris Island COS (lechuga Romana). La planta tiene forma
alargada. Las hojas son grandes, gruesas y ligeramente arrugadas. La cabeza tiene forma
de cilindro. El corazón de la planta es amarillo cremoso uniforme. Alcanza la madurez
aproximadamente de 60-75 días. Es ideal para el Mercado Fresco, para cultivar en huertos
y aguanta el transporte. Esta es una variedad de lechuga Romana estándar y tiene una
resistencia media al virus del Mosaico.
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Se preparó el semillero en bandejas de 98 celdas. Antes de la siembra, las semillas
se sumergieron durante diez minutos en una solución de Trichoderma spp. con la
concentración de 1 x 1012 e/ml. Se utilizó un diseño experimental en bloques al azar para
los cuatro tratamiento (las tres cepas de Trichoderma spp. y un testigo sin tratar) y tres
repeticiones. La unidad experimental, estuvo conformada por cada bandeja contentiva de
98 plantas.
Trascurridos 24 días luego de la siembra, una vez que las plántulas alcanzaron
alrededor de 10 cm de altura, se procedió a realizar el trasplante a bolsas de 1 kilo de
capacidad previamente llenadas con sustrato. Como sustrato se utilizó una mezcla de suelo
traída de la Unidad Académica La Tuquerena, mezclada con lombricompost a base de
gallinaza y pasto picado ya procesado por la lombriz roja californiana, en proporción 3:1
(tres partes de tierra y una de materia orgánica). Se tomó una muestra de la mezcla y se
llevó al laboratorio de suelos de la UNET, para el análisis respectivo (textura: Franco
arenoso; materia orgánica: 2,31% (medio); pH: 4,87; fósforo: 3ppm (bajo); potasio:
80ppm (medio); calcio: 300ppm (bajo) y magnesio: 61ppm (bajo).
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Luego del trasplante, se realizó una primera aplicación de 25 ml/ bolsa de la
solución de 1 x 108 e/ml, correspondiente a cada tratamiento y al testigo solo agua. Luego
cada dos semanas y hasta la cosecha, se repitió el tratamiento aplicando 50 ml de la
solución respectiva/bolsa. Las variables evaluadas en esta etapa fueron la altura de las
plantas y el número de hojas; se realizaron registros cada quince días hasta el final del
ensayo (momento de la cosecha). Además, se determinó el peso fresco y el peso seco
(parte aérea y raíces) para cada uno de los tratamientos. Se evaluaron dos plantas por
unidad experimental. Para el peso seco, las plantas se colocaron en la estufa a 70°C,
durante 72 horas y luego se registró el peso seco (Peña, 2006).
Resultados y discusión
Germinación
Los datos obtenidos para determinar el porcentaje de germinación, muestran que todos los
tratamientos con Trichoderma spp, independientemente de la especie, incrementaron la
germinación de las semillas en 8,43%, 13,23% y 11,76% respectivamente para LIG006,
LIG043 y LIG044, con respecto al testigo que alcanzó 73,82%, (figura 1). El análisis de
varianza (Tabla 1) refleja diferencias altamente significativas entre los tratamientos
(p<0,01). Además se realizó la prueba de medias (Mínima Diferencia Significativa-LSD),
a través el cual se identificaron dos grupos homogéneos; el primero que incluye el testigo
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y el segundo los tratamientos con Trichoderma spp., entre los cuales no existen diferencias
estadísticamente significativas.
Estos resultados concuerdan con los de Gelvez (2004) quien con inoculaciones de
1x e/ml de Trichoderma lignorum, aumentó el porcentaje de germinación de
Capsicum annum, sin necesidad de la utilización de productos químicos. De igual manera,
Cubillos et al. (2009), encontraron incrementos en la germinación de semillas de
maracuyá con respecto al testigo, al ser tratadas con diferentes cepas de Trichoderma
harzianum.
Los resultados del tamaño de la radícula, luego de tres días de instalado el ensayo
de germinación, se muestran en la figura 2. Como puede apreciarse, el mayor crecimiento
se obtuvo con el testigo, seguido de T. koningiopsis, T. harzianum y finalmente T.
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asperellum. El ANOVA (Tabla 2) refleja diferencias altamente significativas entre los
tratamientos (p<0,01). La prueba de medias (Mínima Diferencia Significativa-LSD),
permitió identificar cuatro grupos; en este caso todos los tratamientos fueron
estadísticamente diferentes.
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Se determinó además, que la cantidad de plantas vivas, 24 días luego de la
siembra, fue mayor en las bandejas tratados con las distintas especies de Trichoderma spp
(LIG006 71,8%; LIG043 63,9%; LIG044 71,1%) en contraste con las del testigo (62,2%),
motivo por el cual puede aseverarse, que las plantas tratadas con las diferentes especies
del hongo, se adaptaron mejor en las condiciones del estudio.
Con respecto al número de hojas (figura 4), igualmente existe cierta tendencia en
las dos últimas observaciones, obteniéndose el mayor número de hojas en las plantas
tratadas con Trichoderma spp., sobresaliendo T. harzianum y T. koningiopsis, puesto que
presentaron la mayor cantidad de hojas al final del estudio. Estos resultados concuerdan
con los reportados por Domínguez (2007) y Jaimes (2008), quienes resaltan el efecto de
Trichoderma spp. como promotor del crecimiento en diferentes cultivos.
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Figura 3. Altura de las plantas, observaciones Figura 4. Crecimiento de las plantas (Número de
quincenales. hojas). Observaciones quincenales
T0 Testigo LIG 006 T. koningiopsis LIG 043 T. asperellum LIG 044 T. harzianum
Figura 5. Peso fresco obtenido para cada Figura 6. Peso seco obtenido para cada uno
uno de los tratamientos de los tratamientos
T0 Testigo LIG 006 T. koningiopsis LIG 043 T. asperellum LIG 044 T. harzianum
a
Letras iguales indica que no hay diferencias significativas (p<0,05)
ayb
Letras diferentes indica diferencias significativas (p<0,05)
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En el análisis realizado para el peso seco (Figura 6), la prueba de medias arrojó
diferencias significativas entre los tratamientos. Las plantas tratadas con T. harzianum,
alcanzaron los mayores valores de peso seco, esto corrobora el hecho de que T. harzianum
favorece efectivamente la acumulación de materia seca, esperando la obtención de un
producto con mayor calidad nutritiva.
CONCLUSIONES
4. La altura promedio de las plantas y número de hojas, obtenida para cada uno de los
tratamientos, fue similar para todos los tratamientos incluyendo el testigo,
destacándose T. harzianum y T. koningiopsis, puesto que presentaron los mayores
valores al final del estudio.
5. Aun cuando los análisis de peso fresco indican que no se presentaron diferencias
significativas entre los tratamientos, los análisis descriptivos indican que un mejor
una tendencia en los tratamientos con T. asperellum y T. harzianum.
6. Las plantas tratadas con T. harzianum, alcanzaron los mayores valores de peso
seco, obteniendose plantas con mayor valor nutritivo.
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REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
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promotor del crecimiento vegetal del maracuyá (Passiflora edulis var. flavicarpa
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Domínguez, C. (2007). Evaluación de control químico y biológico para a mancha púrpura
(Alternaria porri) en ajo porro (Allium porrum). Trabajo de Grado Ing. Agr.
Universidad Nacional Experimental del Táchira. San Cristóbal.
Fundación Eroski. (2006). Lechuga | Guía de Hortalizas y Verduras. Disponible en:
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Gelvez, W. (2004). Evaluación del efecto de diferentes concentraciones de esporas de
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Experimental del Táchira, San Cristóbal, estado Táchira.
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Universidad Nacional Experimental del Táchira. San Cristóbal.
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y Biofertilizantes, por su valiosa asesoría y apoyo durante la realización de la
investigación.
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