MTODOS POTENCIOMTRICOS PARA ANALIZAR CLORURO EN ORINA HUMANA Y SUERO FISIOLGICO.

Juan Camilo Calvo, Juan Felipe Vlez Departamento de Qumica, Facultad de Ciencias, Universidad del Valle, Agosto de 2011 Resumen En esta prctica se realizaron dos mtodos por los cuales podemos cuantificar cloruros en una muestra, en este caso la orina y suero fisiolgico, mtodos denominados potenciomtricos donde se mide una diferencia de potencial generado cuando se adiciona un agente titulante, nitrato de plata (AgNO 3), en la solucin que contena el cloruro. Para ello se utilizaron instrumentos como electrodos de referencia (Ag/AgCl), electrodo indicador (Ag) y un electrodo de in selectivo. Para el mtodo potenciomtrico que se us el electrodo indicador (Ag). La concentracin hallada de cloruro en la muestra de orina fueron de 179ppm y para el mtodo con el electrodo de in selectivo la concentracin de cloruro en la muestra de orina fue de 316,6ppm y para el suero fue de 390,9ppm dando un mejor resultado con el mtodo directo (in selectivo) ya que se acerc mucho ms al valor promedio de la orina humana (500 mg/L) [4]. Palabras Claves: Potenciometra; Electrodo; Potencial; Celda; Cloruros. 1. Introduccin La deteccin del punto equivalente en un mtodo analtico debe ser rpido, preciso y simple. Para ello se emplean sustancias llamadas indicadores, que se aaden en pequea cantidad a la disolucin que va a valorarse y que, por intercambio de alguna partcula especfica, permite la deteccin del punto equivalente. En el caso especfico de una valoracin cidobase, la partcula especfica que se mencion antes es el H+. Por lo tanto, estas sustancias indicadoras son sensibles al H+, de manera que por ganancia o prdida del mismo se transforman en otra sustancia que posee un color diferente de la de partida. Este cambio de color determinar el punto final de la valoracin. La aparicin de tcnicas instrumentales de anlisis permiti incorporar nuevas formas de deteccin del punto equivalente, que son ms exactas que las que utilizan sustancias indicadoras. Estas tcnicas determinan alguna propiedad fisicoqumica asociada a alguna especie qumica de inters para la determinacin que se est realizando. Para el caso de una reaccin cidobase, se utiliza el potencial elctrico como propiedad fisicoqumica a medir. El objetivo de una medicin potenciomtrica es obtener informacin acerca de la composicin de una solucin mediante la determinacin del potencial que se genera entre dos electrodos. Para obtener mediciones analticas vlidas en potenciometra, uno de los electrodos deber ser de potencial constante y que no sufra cambios entre uno y otro experimento. El electrodo que cumple esta condicin se conoce como electrodo de referencia. Debido a la estabilidad del electrodo de referencia, cualquier cambio en el potencial del sistema se deber a la contribucin del otro electrodo, llamado Electrodo Indicador. Los mtodos potenciomtricos estn basados en la medida de la diferencia de potencial entre dos electrodos introducidos en una solucin. Los electrodos y la solucin constituyen lo que se conoce con el nombre de celda electroqumica. El potencial entre ambos electrodos es normalmente medido con la ayuda de un equipo conocido como potencimetro. Uno de los electrodos involucrado en el proceso se denomina indicador, el cual tiene una respuesta respecto de una especie particular presente en el seno de la solucin y cuya actividad se mide durante el experimento y el otro recibe el nombre de referencia, cuya caracterstica ms importante es que el potencial de semicelda de este electrodo permanece siempre constante. El potencial de una celda electroqumica, viene dado por: ECelda = Eind Eref +El Ecel potencial de la celda electroqumica. Eind potencial de semicelda del electrodo indicador (funcin de la actividad de la especie).

Eref potencial de semicelda del electrodo de referencia (constante y conocido). El potencial de unin lquida. Los potenciales de semicelda de la mayora de los electrodos indicadores responden, como ya se ha comentado, a los cambios en la actividad de las especies a ser determinadas de acuerdo a la ecuacin de Nernst. As por ejemplo, un electrodo de plata introducido en una solucin de iones Ag+. Ag+ + e- Ag0 La ecuacin de Nernst,

En funcin de la concentracin molar de la especie electroatractiva:

valoraciones potenciomtricas y por otro las potenciometras directas. En breves palabras podemos decir que: Potenciometra directa es aquella en que los dos electrodos, indicador y referencia, estn introducidos en una solucin a analizar y cuya actividad es calculada por una lectura de potencial de la misma. La calibracin del electrodo indicador es totalmente necesaria y suele realizarse con soluciones de concentracin conocida. En las valoraciones potenciomtricas se valora una muestra con una solucin de concentracin conocida de agente valorante y se realiza un seguimiento del potencial entre el electrodo indicador y el electrodo de referencia. El punto final de la valoracin se observa cuando se produce un cambio brusco en el valor de ese potencial. Valoraciones Potenciomtricas Dentro de los mtodos potenciomtricos de anlisis nos encontramos con las valoraciones potenciomtricas, entendiendo por valoracin potenciomtrica, una valoracin basada en medidas de potenciales de un electrodo indicador adecuado en funcin del volumen de agente valorante adicionado. Una valoracin potenciomtrica implica dos tipos de reacciones:

Siendo fAg+ el coeficiente de actividad y [Ag+] la concentracin molar de la especie Ag+. Esta expresin de la ecuacin de Nernst puede escribirse en logaritmos de base 10 y a 25 C como:

Y por tanto el potencial de la celda electroqumica en todo momento vendra expresado por:

En condiciones normales, se considera que los potenciales del sistema Ag+/Ag0, el coeficiente de actividad y el potencial del electrodo de referencia as como el potencial de unin lquida son constantes durante el experimento y por lo tanto:

Una reaccin qumica clsica, base de la valoracin y que tiene lugar al reaccionar el reactivo valorante aadido a la solucin, o generado culombimtricamente, con la sustancia a valorar. Una o varias reacciones electroqumicas indicadoras de la actividad, concentracin, de la sustancia a valorar, del reactivo o de los productos de reaccin. De esta forma, el valor del potencial medido por el electrodo indicador vara a lo largo de la valoracin, traducindose el punto de equivalencia por la aparicin de un punto singular en la curva: potencial vs cantidad de reactivo aadido. La deteccin de este punto, punto final, puede establecerse mediante un mtodo directo. Mtodo directo: consiste en graficar los datos de potencial en funcin del volumen de reactivo. El punto de inflexin en la parte ascendente de la curva se estima visualmente y se toma como punto final [1].

Donde E0 es una constante que puede ser determinada por la calibracin con disoluciones estndar. La relacin lineal entre el Ecel y el logaritmo de la concentracin (o actividad, si el coeficiente de actividad no es constante) es la base de los mtodos analticos potenciomtricos. Tipos de Mediciones Potenciomtricas: Podemos dividir en dos grandes grupos los tipos de medidas potenciomtricas; por un lado las

Para el mtodo mediante un electrodo de in selectivo de comienzo se prepararon 100 mL de una solucin de 1000 ppm de Cl- y a partir de esta por dilucin se prepararon 25.00 mL de soluciones con concentraciones de 750, 500, 250 y 100 ppm. Con cada una de estas soluciones se transfirieron 20 mL a vasos de 50.00 mL con la adicin de 0.5 mL de NaNO3 a cada una. Para la toma de los potenciales se prepar el voltmetro con la conexin de los electrodos, el de referencia Ag/AgCl y el del ion selectivo de cloruros, y se sumergieron en las soluciones estndares comenzando con la de menor concentracin hasta la de mayor concentracin lavando con agua destilada cada vez que se vaya a cambiar de solucin. Para anotar el voltaje que diera el voltmetro fue necesario esperar por unos 3 min aproximadamente para que se estabilizara, para as tomar un correcto valor del potencial. Y por ltimo se tomaron 20.00 mL de las muestras de orina y suero transfirindolas a vasos de 50 mL adicionndoles 0.5 mL de NaNO3 5M que luego de igual forma que con los estndares, a las muestras de les sumergieron los electrodos para tomar los respectivos potenciales, claro est esperando que el valor que arrojaba el voltmetro se estabilizara para su respectiva anotacin. Los reactivos utilizados fueron NaNO3, AgNO3, HNO3 concentrado y NaCl analtico [2].

2. Metodologa experimental Para la determinacin de cloruros en las muestras de orina y suero realizaron dos mtodos: el argentomtrico y el mtodo mediante un electrodo de in selectivo. Primeramente se realiz la preparacin de cada una de estas muestras para el mtodo argentomtrico como para el mtodo mediante el in selectivo, tomando 2.0 mL de cada uno y transfirindolas a un matraz volumtrico de 50.0 mL para luego ser enrasado. En el mtodo argentomtrico se procedi con la estandarizacin del nitrato de plata (AgNO 3), solucin titulante, al 0.1M, se prepar 50 mL y con esta solucin se lleno una bureta de 25.0 mL. Luego se prepar otra solucin de NaCl lo suficiente para secar 5 mL de AgNO 3, que adems a esta se le adicion 1 gota de HNO3 concentrado y 0.5 mL de NaNO 3 5M. Ya con las soluciones preparadas se procedi con la toma de los potenciales, para ello se arm el sistema de titulacin que consista en el voltmetro y los dos electros, de referencia Ag/AgCl e indicador de Ag, introducindolos en la solucin de NaCl, la toma del voltaje era cuando se estabilizara este mismo cuando se adicionaba el AgNO3 en la solucin de NaCl. Para esta toma de los potenciales se adicionaba de a 0.4 mL de la solucin titulante hasta observar un cambio brusco en el voltmetro, al momento de observar este cambio se adicionaba de a 0.2 mL de la solucin titulante hasta observar que el cambio del voltaje no variara tanto y, a partir de ah se agregaban de a 0.5 mL, ms o menos 3.0 mL. Por ltimo con la muestras diluidas de orina y suero preparadas inicialmente, se tomaron 25.0 mL de cada una que se le adicionaron una gota de HNO3 concentrado y 0.5 mL de NaNO3 5M, para luego adicionar la solucin titulante y tomar los potenciales de cada adicin de la misma manera como se realiz con la solucin de NaCl.

3. Resultados y Discusin Tabla 1 Estandarizacin AgNO3

Potencial (V) 0,1 0,105 0,106 0,107 0,108 0,111 0,114 0,118 0,123 0,129 0,135 0,145 Volumen (mL) 0 0,2 0,4 0,6 0,8 1,3 1,8 2,3 2,8 3,3 3,8 4,3 AgNO3 Potencial (V) 0,169 0,184 0,225 0,333 0,379 0,389 0,396 0,4 0,405 0,407 0,411 0,159 Volumen (mL) 5 5,2 5,4 5,6 5,8 6 6,2 6,4 6,6 6,8 7 4,8 AgNO3

Grafica 1. Estandarizacin AgNO3

Para garantizar el punto final se saco la primera derivada. Tabla 1.1. curva de la primera derivada.
EV (VmL) 0.2 0.4 0.6 0.8 1.3 1.8 2.3 2.8 3.3 3.8 4.3 Volumen AgNO3 (mL) EV (VmL) 0.025 4.8 0.005 5 0.005 5.2 0.005 5.4 0.006 5.6 0.006 5.8 0.008 6 0.01 6.2 0.012 6.4 0.012 6.6 0.02 6.8 Volumen AgNO3 (mL) 0.028 0.05 0.075 0.205 0.54 0.23 0.05 0.035 0.02 0.025 0.01

Grafica 1.1. Curva de la primera derivada.

Tabla 2. Determinacin de cloruros (mtodo argentometrico), orina.

Potencial (V) 0,143 0,159 0,183 0,37 0,394 0,407 0,415 0,423 0,427 0,434 0,437 0,436 0,426 Volumen AgNO3 (mL) 0 0,5 1 1,5 1,7 1,9 2,1 2,3 2,5 2,9 3,3 3,7 4,1

Grafica 2. Determinacin de cloruros (mtodo argentometrico), orina.

Para garantizar el punto final se saco la primera derivada. Tabla 2.1. curva de la primera derivada.
EV (VmL) 0.032 0.048 0.374 0.12 0.065 0.04 0.04 0.02 0.0175 0.0075 Volumen AgNO3 (mL) 0.5 1 1.5 1.7 1.9 2.1 2.3 2.5 2.9 3.3

Grafica 2.1. Curva de la primera derivada.

Tabla 3. Curva de calibracion

Potencial (mV) 0.000386 0.000376 0.000367 0.000356 Log concentracin(p pm) 2 2.398 2.699 2.875

Grafica 3. Curva de calibracin

La ecuacin de linealizacin de la curva es:

Donde X es: log [Cl-] 1. Muestra de orina

2. Muestra suero

Tabla 4. Curva de calibracin.

Potencial (mV) 3860 3760 3670 3560 concentracin(p pm) 100 250 500 750

Grafica 4. Curva de calibracin. Potencial vs concentracin

DISCUSON Al analizar los resultados obtenidos y teniendo como referencia las graficas 1.1, 2.1 y 3 se puede decir que el mtodo argentomtrico como el mtodo de ion selectivo fueron efectivos, la razn para afirmar esto se debe a que con el mtodo argentomtrico cada uno de los procesos genero el punto de equivalencia de manera visible, pero para conocerlo con una mayor exactitud se saco la primera derivada de los datos, la teora dice, las medidas basadas en el volumen del valorante producen un cambio rpido del potencial cerca del punto de equivalencia [4], adems la deteccin del punto final se basa en el supuesto de que la curva de valoracin es simtrica en torno al punto de equivalencia y que la inflexin en la curva corresponde a ese punto. Este supuesto es vlido si el valorante y analto reaccin en proporcin 1:1 y la reaccin del electrodo es reversible; lo cual concuerda perfectamente con nuestros datos. Sin embargo el proceso requiere que el valorante del cual se dispone tenga una concentracin conocida y exacta, para garantizar esto se realizo la estandarizacin del valorante (AgNO3) con una solucin de NaCl dando una concentracin de

0.084M, realizndole un mtodo argentomtrico obteniendo un punto de equivalencia como lo muestra la grafica 1.1, a partir de estas graficas se encontr el volumen de AgNO 3 en el punto de equivalencia y con ste se encontr la concentracin del mismo; al adicionar el agente valorante a la solucin de NaCl ocurre una reaccin de precipitacin [3], donde se presenciaba como de un incoloridad de la solucin de NaCl viraba al adicionar el valorante a una tonalidad turbia con un precipitado (AgCl) en el fondo del vaso donde se llevaba a cabo esta reaccin (ver imagen 1). La siguiente ecuacin describe la reaccin: AgNO3 + NaCl NaNO3 + AgCl

Imagen1. Precipitacin de AgCl. Al confirmar que la concentracin del AgNO3 con el que se trabajo era la debida se procedi a determinar la concentracin de las muestras de orina y suero de la misma manera como se efectu la estandarizacin del AgNO 3 pero con la diferencia que ya no era NaCl sino la debida muestra diluida, y de igual manera la realizacin de los clculos necesarios para determinar la concentracin de cloruros en la orina obteniendo una concentracin de 0,00504M lo que equivale a 179mg/L, lo que indica una baja concentracin de cloruros en la orina pues, las excretas humanas y en general las de todos los organismos superiores, (la orina principalmente), poseen una concentracin de cloruros que es aproximadamente igual a la que se ingiere en los alimentos; si se supone que cada persona consume en promedio 2,5 gramos de in cloruro, por da, (g/persona/da), y que cada persona ingiere aproximadamente 5 litros de agua por da, entonces la concentracin de cloruros en la orina vendra a ser del orden de los 500 mg/L [4],cuando se realiz la medicin a la muestra de suero no fue posible encontrar los potenciales con los volmenes adecuados, ya que se present una inconsistencia en la medicin pues el potencial nunca se estabiliz para realizar la medicin, una deduccin a cerca del porqu fue que la solucin preparada de suero no estaba realmente a la concentracin adecuada o por el deterioro del electrodo. Con el mtodo de in selectivo se realiz una curva de calibracin (grafica 3) y con esta fue posible encontrar la concentracin de cloruro en la orina (316,6 ppm) y en el suero (390,9ppm), los cuales son datos confiables pues estos quedaron dentro de la curva. Si comparamos estos datos con el hecho de que la concentracin de cloruros en la orina es de 500mg/L, se puede decir que este mtodo es mucho ms eficiente que el argentomtrico pues las concentraciones fueron mucho ms cercanas a este valor de referencia, ya que la muestra se analiz directamente sin necesidad de adicin de otra sustancia como en el argentomtrico. 3.1 Solucin de Preguntas 1. Cul es el propsito del NaNO3? Evita que otras especies en la solucin que precipitan con el Nitrato de plata y que tienen Kps

muy cercanos al del AgCl cooprecipiten con el ion Cl-, ya que el NaNO 3 arrojando resultados ms altos que los reales [5]. 3. suponiendo que el resultado obtenido en la determinacin de cloruro en orina es el valor promedio de una muestra de 24 horas, estime cuantos miligramos de ion cloruro se excretan por da, si el volumen medio de orina diario es de 1500mL.comparar este valor con el consumo de cloruro de sodio recomendado en las dietas. El resultado obtenido en la determinacin de cloruros fue de 179mg/L, si se supone que es el valor promedio de una muestra de 24 horas en 1500mL se estimara una cantidad de mg igual a:

Entonces por da se excretara 269mg de ion cloruro. Si se compara este valor con el del consumo de cloruro de sodio recomendado seria: La organizacin mundial de la salud recomiendan no ingerir ms de 6 gramos por da, lo que equivale a 6000mg diarios, es decir que la cantidad de ion cloruro que se elimina diariamente en la orina es muy baja [6]. 4. Qu interferencias se podran presentar en las determinaciones mediante el uso de ion selectivo? Si en la muestra hay presentes iones que afecten al electrodo selectivo, este responder tanto a los iones de inters como a los interferentes. Por lo tanto es necesario garantizar que no hay especies interferentes antes de iniciar un anlisis. Si la especie a medir no est libre, es decir esta en lazada a otras especies o absorbida, no puede ser medida. En estos casos es necesario tratar previamente la muestra con tal de que el ion a medir se encuentre en forma libre [7]. 5. Los electrodos indicadores metlicos se clasifican en electrodos de primera especie, de segunda especie, de tercera especie y electrodos redox; establezca las principales diferencias entre estos cuatro tipos de electrodos metlicos. Los electrodos metlicos de primera clase estn en equilibrio directo con el catin que deriva del

electrodo metlico. En este caso interviene una nica reaccin. Los de segunda clase con frecuencia se puede conseguir que un metal responda a la actividad de un anin con el que forma un precipitado o un ion complejo estable. Se puede hacer, en ciertas circunstancias, que un electrodo metlico responda a un catin diferente; entonces se convierte en un electrodo de tercera clase. Por ltimo los electrodos construidos con platino, oro y paladio u otros metales inertes sirven frecuentemente como electrodos indicadores para sistemas oxido/reduccin. En estas aplicaciones, el electrodo inerte acta como una fuente o un sumidero de los electrones transferidos desde un sistema redox presente en la disolucin. [8] 4. Conclusiones 4.1. El mtodo de ion selectivo es ms exacto que el mtodo argentomtrico. 4.2. Para obtener un punto final de titulacin ms visible en el mtodo argentomtrico se hace necesario aplicar una segunda derivada. 5. Referencias [1]jhttp://webdelprofesor.ula.ve/ciencias/ymartin/ind ex_archivos/Guia%20de%20instrumental.pdf [2] Laboratorio de Anlisis Instrumental, Univalle, Facultad de Ciencias, Departamento de Qumica, Cali-Colombia, 1-5, 2011 [3] Daniel C. Harris, Anlisis Qumico Cuntico, Grupo Editorial Iberoamericana, Estados Unidos de Norteamrica, 67-91, 2001 [4] D.A. Skoog, D.M. West, F.J. Holler, Fundamentos de Qumica Analtica 8 edicin, Editorial Thomson, Mxico, 633-634, 2000. [5]nhttp://enciclopedia.us.es/index.php/Equilibrio_d e_solubilidad [6]nhttp://www.puntovital.cl/alimentacion/sana/nutri cion/sodio.htm [7]nhttp://www.crison.es/pdfs/04/crison_4_1.pdf