UNIVERSIDADE FEDERAL DE GOIS ESCOLA DE VETERINRIA E ZOOTECNIA PROGRAMA DE PS-GRADUAO EM CINCIA ANIMAL

Disciplina: SEMINRIOS APLICADOS

FARMACOCINTICA: Conceitos bsicos aplicados medicina veterinria (Reviso de literatura)

Lria Queiroz Luz Hirano Orientador: Prof. Dr. Juan Carlos Duque Moreno

GOINIA 2011

LRIA QUEIROZ LUZ HIRANO

FARMACOCINTICA: Conceitos bsicos aplicados medicina veterinria (Reviso de literatura)

Seminrio apresentado junto Disciplina de Seminrios Aplicados do Programa de PsGraduao em Cincia Animal da Escola de Veterinria e Zootecnia da Universidade Federal de Gois. Nvel: Doutorado

rea de Concentrao: Patologia, Clnica e Cirurgia Animal

Linha de Pesquisa: Tcnicas Cirrgicas e Anestsicas, Patologia Clnica Cirrgica e Cirurgia Experimental

Orientador: Prof. Dr. Juan Carlos Duque Moreno - UFG

Comit de Orientao: Prof. Dr. Andr Luiz Quagliatto Santos FAMEV/UFU Prof Dr Rosangela Gonalves Peccini Machado FCF/UNESP

GOINIA 2011

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SUMRIO

1 INTRODUO ............................................................................................ 1 2 REVISO DE LITERATURA ....................................................................... . 3 2.1 Noes gerais sobre farmacocintica ...................................................... . 3 2.2 Absoro .................................................................................................. 5 2.3 Disposio ................................................................................................ 7 2.3.1 Distribuio............................................................................................ 8 2.3.2 Eliminao ............................................................................................. 11 2.3.2.1 Metabolizao .................................................................................... 11 2.3.2.2 Excreo ............................................................................................ 12 2.4 Tcnicas analticas aplicadas farmacocintica ...................................... 14 2.5 Delineamento do perfil farmacocintico.................................................... 15 2.5.1 Tipos de cintica ................................................................................... 15 2.5.2 Representao grfica .......................................................................... 17 2.5.3 Meia-vida ............................................................................................... 18 2.5.4 Concentrao plasmtica mxima e rea sob a curva .......................... 19 2.5.5 Biodisponibilidade e dose efetiva .......................................................... 20 2.6 Particularidades farmacocinticas na medicina veterinria ...................... 21 3 CONSIDERAES FINAIS ........................................................................ 24 REFERNCIAS .............................................................................................. 25

iii

LISTA DE FIGURAS

FIGURA 1 - Curva

de

decaimento

de

um

frmaco

no

modelo

monocompartimental de distribuio, em que o logaritmo natural da concentrao (lnC) varia em funo do tempo (t) ...................... 9

FIGURA 2 - Curva

de

decaimento

de

um

frmaco

com

modelo

tricompartimental de distribuio, na qual o logaritmo natural da concentrao (lnC) varia em funo do tempo (t). Os caracteres Kd, Kd e Kel representam as constantes de velocidade de distribuio rpida, lenta e de eliminao, respectivamente ........... 10

FIGURA 3 - Representao grfica das fases de absoro, concentrao sistmica mxima (Cmax) e eliminao de um frmaco com modelo cintico de 1 ordem ........................................................... 16

FIGURA 4 - Representao grfica semi-logartmica (esquerda) e cartesiana (direita) da concentrao plasmtica dos frmacos A (vermelho) e B (preto), em funo do tempo ........................................................ 17

FIGURA 5 - Representao grfica da concentrao plasmtica em funo do tempo, da cetamina associada ao midazolam, administrada em ces hgidos. A rea tracejada representa uma diviso do mtodo trapezide para o clculo da rea sob a curva ................................ 20

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LISTA DE ABREVIATURAS

AT ASC ASC1,2 B C CE Cl Clh Clr Cmax DE -dT dt ELISA EV fe h IV K Ka Kd Kel L ln lnC mg mol min mL n

quantidade de substncia que resta a ser transportada rea sob a curva de concentrao plasmtica rea sob a curva de concentrao plasmtica entre uma e duas horas biodisponibilidade concentrao plasmtica inicial concentrao plasmtica efetiva depurao depurao heptica depurao renal concentrao plasmtica mxima dose eficaz quantidade transportada intervalo de tempo ensaio imunoenzimtico extravascular frao do frmaco excretado inalterado na urina hora intravascular constante de velocidade constante de velocidade de absoro constante de velocidade de distribuio constante de velocidade de eliminao litro logaritmo natural logaritmo natural da concentrao miligrama micromol minuto mililitros nmero de meias-vidas

pKa PM t t1/2 tmax v Vd

cologaritmo da constante de dissociao do frmaco peso molecular tempo meia-vida tempo para atingir a concentrao plasmtica mxima velocidade de transporte volume aparente de distribuio

1 INTRODUO

Frequentemente os profissionais da rea da sade se deparam com dvidas acerca do emprego correto de termos farmacolgicos. Dentre esses est a utilizao da palavra frmaco ou droga, que de acordo com a portaria 344 da Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria (ANVISA, 1998), so sinnimos que designam qualquer substncia ou matria-prima que tenha finalidade

medicamentosa ou sanitria. Entretanto, alguns farmacologistas contra indicam o emprego do termo droga, pois afirmam que esse popularmente utilizado para determinar substncias entorpecentes ou que causam dependncia qumica (EDWARDS & LADER, 1994). Na literatura cientfica, ao abordar os compostos utilizados na terapia de pacientes, se preconiza a indicao da palavra frmaco ou princpio ativo, que corresponde substncia responsvel pela ao teraputica, com composio qumica e ao farmacolgica conhecidas. J o produto farmacutico

tecnicamente elaborado com finalidades profiltica, curativa, paliativa ou para fins de diagnstico denominado como medicamento (ANVISA, 1998). Em relao ao termo dosagem, esse significa o ato de dosar ou quantificar determinada matria e no deve ser empregado como sinnimo da palavra dose, que de origem grega dsis e expressa a ao de dar ou o que pode ser dado. Na farmacologia, a posologia utilizada para se referir frequncia de administrao de um frmaco e dose estabelecida (REZENDE, 2004). Determinar a posologia dos frmacos pelo mtodo de tentativa e erro uma prtica antiga que, por vezes, produzia resultados indesejados, seja pela ineficcia clnica devido quantificao insuficiente, ou pela ocorrncia de intoxicaes (DOKOUMETZIDIS & MACHERAS, 2006). Ao correlacionar a concentrao orgnica dos princpios ativos em funo do tempo, estudos farmacocinticos permitiram o estabelecimento de doses seguras e elucidaram o comportamento dos diferentes frmacos no organismo animal (BANAKAR, 1992; GINSKI & POLLI, 1999). Observa-se um avano nas pesquisas que visam substituir os mtodos in vivo de determinao da absoro de frmacos por tcnicas in vitro, esse

progresso ocorreu principalmente como reflexo do desenvolvimento na cultura de clulas e de sistemas acoplados de dissoluo e permeao. Entretanto, os mtodos in vitro requerem estudo e padronizao para o cultivo celular, alm de no reproduzirem adequadamente os mecanismos de transporte ativo das substncias (SOUZA et al., 2007). Quatro processos fundamentais compem o perfil farmacocintico no organismo: absoro, quando a via de administrao extravascular (EV), distribuio, biotransformao e excreo (RAMOS & SILVEIRA, 2001). A partir da compreenso desses eventos possvel estabelecer a relao cronolgica da dose, forma farmacutica, frequncia, via de administrao e a concentrao sistmica do frmaco, sendo que a farmacocintica clnica envolve a aplicao desses dados na terapia de pacientes (TOZER & ROWLAND, 2009). Apesar dos avanos no conhecimento global sobre farmacocintica e farmacodinmica, alguns desafios remanescem no mbito da medicina

veterinria, principalmente em relao s diferenas entre espcies, raas, linhagens, sexo e idade. A ocorrncia das particularidades inter e intra espcies se explica por diversas razes, como diferenas anatmicas, fisiolgicas, comportamentais e at mesmo pelas variaes genticas (TOUTAIN et al., 2010). A necessidade de se estabelecer posologias ideais para a otimizao da ao dos frmacos faz com que a farmacocintica seja uma ferramenta importante para a prtica da medicina veterinria. Por meio da compreenso do comportamento das substncias no organismo animal possvel promover terapias eficazes e prever a cintica de frmacos de constituio e metabolizao semelhantes em diversas espcies. Para a utilizao correta dos dados obtidos pelo estudo

farmacocintico, os principais processos devem ser compreendidos. Esta reviso de literatura foi elaborada com o objetivo de discorrer acerca dos conceitos bsicos da farmacocintica, abordando suas aplicaes na rotina do mdico veterinrio.

2 REVISO DE LITERATURA

2.1 Noes gerais sobre farmacocintica

A associao de pesquisas sobre a farmacodinmica (que evidencia a magnitude dos efeitos dos frmacos no organismo) com dados farmacocinticos, proporciona diversas vantagens. Dentre essas podem-se citar a compreenso dos motivos de ocorrncia de efeitos inesperados, antecipao de dados sobre a metabolizao e vias de transporte de substncias semelhantes s que foram previamente estudadas, determinao da dose ideal para um paciente singular e a previso de eventos que podem ocorrer devido mudana da posologia (TOZER & ROWLAND, 2009). REZENDE (2003) define a janela teraputica como os limites de concentrao de um frmaco no organismo em que este exera sua ao desejvel, sendo que a segurana na utilizao das substncias proporcional ao tamanho desse intervalo. Valores acima da margem superior aumentariam a probabilidade de ocorrncia ou intensificariam os efeitos adversos, e abaixo do limite inferior no seriam suficientes para a obteno da resposta pretendida. o tamanho da janela teraputica e a velocidade de eliminao que iro determinar a dose de manuteno e a frequncia de administrao dos medicamentos. Aps definida a posologia ideal para atingir o intervalo de concentrao sistmica pr-estabelecido, poucos eventos inesperados so observados, entretanto, esses podem ocorrer devido a fatores como, por exemplo, a variabilidade gentica (GOUVEIA, 2009). Atualmente, so utilizados estudos in vivo e in vitro que evidenciam o fato de que ao ser administrado, o princpio ativo migra do stio de entrada para o local de ao e para outros tecidos, principalmente para os rgos nos quais ser eliminado, como o fgado e o rim. Raramente se consegue determinar a concentrao do frmaco diretamente no stio de ao, por isso so utilizadas amostras alternativas, dentre as quais se destaca o plasma sanguneo. Pela ampla utilizao da amostra plasmtica no delineamento do perfil farmacocintico

das substncias, esta ser considerada como a base amostral nesta reviso (STORPIRTIS & CONSIGLIERI, 1995). Praticamente todos os fluidos orgnicos podem ser utilizados para anlise farmacocintica, como o caso do plasma, sangue, soro, leite e a urina. Em relao amostra sorolgica, sua obteno inclui a etapa de coagulao sangunea, o que pode envolver processos de hemlise e alterar os resultados. J o sangue total possui grande quantidade de clulas e protenas que tambm dificultam a predio da concentrao especfica do princpio ativo (TOZER & ROWLAND, 2009). De modo geral, consideram-se dois stios de administrao dos princpios ativos na farmacocintica. Na via intravascular (IV), a aplicao da substncia realizada diretamente no sangue arterial ou venoso. J o acesso EV, inclui as demais vias (intramuscular, oral, pulmonar, subcutnea, entre outras), nas quais aps a introduo sistmica, necessrio que o frmaco seja absorvido para que atinja o local de medida (TOZER & ROWLAND, 2009). A quantificao total do frmaco composta pelos valores da frao ligada a protenas e a livre, contudo, sabe-se que somente a ltima farmacologicamente ativa. Esse fato ocorre porque apenas a poro no ligada do princpio ativo capaz de atravessar as membranas biolgicas, se distribuir pelo organismo e alcanar os receptores nos quais deve exercer sua atividade farmacolgica (TOZER & ROWLAND, 2009). Assim, frequentemente as amostras so submetidas a tcnicas para a determinao especfica da frao livre do frmaco, como a ultrafiltrao e a dilise (QUEIROZ et al., 2001). Em condies normais, a relao percentual entre a frao do frmaco ligada a protenas e a livre fixa, por isso, quando esse valor foi previamente estimado, possvel quantificar qualquer uma dessas fraes. Entretanto, em situaes como na presena de outra substncia que desloca as ligaes do frmaco com protenas plasmticas, hipoproteinemia, gravidez e doenas hepticas e renais, a determinao da frao livre fundamental (TOZER & ROWLAND, 2009). A indstria farmacutica preconiza a produo de formulaes compostas por frmacos essencialmente puros e utiliza tcnicas analticas

especficas para a determinao de seus perfis farmacocinticos, de modo a assegurar a eficcia teraputica, segurana do paciente e a facilidade no processo de reproduo do produto. Alm disso, os mtodos analticos empregados devem especificar a substncia em questo de modo a diferenci-la de seus metablitos, que podem ou no ter propriedades semelhantes ao frmaco original (TOZER & ROWLAND, 2009). Recomendaes acerca da pureza dos frmacos so indicadas, inclusive, para ismeros pticos, como o caso do agente anestsico cetamina, um esteroismero comercializado principalmente na forma de racemato, com concentraes equivalentes dos dois enantimeros puros R(-) e S(+). Em acordo com as indicaes, trabalhos experimentais e ensaios clnicos demonstraram vantagens na utilizao do composto puro de cetamina S(+), com relatos do dobro da potncia anestsica e analgsica desse enantimero, quando comparado forma racmica e cetamina R(-), em ratos (PROESCHOLDT et al., 2001) e ovelhas (STRUMPER et al., 2004).

2.2 Absoro

TOZER & ROWLAND (2009) definem a absoro como o processo no qual um frmaco deixa seu local de administrao e alcana o fluxo sanguneo e pode ser avaliado por quatro parmetros farmacocinticos obtidos a partir da construo de uma curva da concentrao do frmaco pelo tempo: constante de velocidade de absoro (ka), concentrao plasmtica mxima (Cmax), tempo para atingir a concentrao plasmtica mxima (tmax) e rea sob a curva de concentrao plasmtica pelo tempo (ASC) (BOROUJERDI, 2002). Esse evento atrasa e reduz a Cmax do princpio ativo, pois a velocidade de alterao da concentrao de uma substncia administrada EV ser influenciada pelas velocidades de absoro e de eliminao (BOROUJERDI, 2002). A maior parte dos fatores que influenciam a amplitude e a velocidade de absoro dos frmacos ocorre na via oral, que, alm de ser a base para o estudo

farmacocintico de substncias administradas pela via EV, a mais utilizada na clnica veterinria (TOZER & ROWLAND, 2009). Dentre os fatores de variabilidade destacam-se os aspectos fisiolgicos como o tempo de esvaziamento gstrico e de trnsito intestinal, pois a presena de alimento atrasa a taxa de passagem e ainda pode alterar a biodisponibilidade (B) pela ocorrncia de ligaes entre o frmaco e os compostos alimentares (AULTON, 1996; MACHERAS & ARGYRAKIS, 1997). Outras fontes de variaes so a extenso da rea da superfcie de contato, a atividade enzimtica e a microbiota presente (ROUGE et al., 1996). Aps a administrao oral, a passagem da substncia pelo trato digestrio pode acarretar perda, principalmente pelo efeito de primeira passagem, que envolve vrios fatores como a decomposio e metabolizao enzimtica do frmaco no lmen gastrointestinal ou mesmo pelo metabolismo heptico, antes de sua absoro e ao farmacolgica sistmica. Nos casos em que essa perda muito extensa observa-se que o medicamento necessita de doses orais bastante superiores s intravenosas para alcanar o mesmo efeito teraputico (TOZER & ROWLAND, 2009). O transporte de frmacos para o interior da membrana intestinal pode ocorrer por mecanismos ativos, via transportadores, ou de forma passiva atravs dos entercitos (transcelular) ou de suas junes (paracelular) (BALIMANE et al., 2000). De acordo com KATSURA & INUI (2003) h vrias famlias de transportadores de frmacos que promovem a absoro, das quais se podem ressaltar os responsveis pelo transporte de di e tripeptdeos e antibiticos lactmicos, os transportadores de cido monocarboxlico que atuam na permeao de cido ltico e cido saliclico, os transportadores de nions e ons orgnicos e os que atuam no transporte de nucleosdeos purnicos e pirimidnicos. A passagem passiva de substncias pelas membranas est

diretamente relacionada ao pH, capacidade de dissociao do frmaco, representada pelo seu cologaritmo (pKa) e ao coeficiente de lipossolubilidade. Isso ocorre porque a maioria dos frmacos so cidos ou bases orgnicas fracas que se dissociam nos lquidos corporais de acordo com o pH do meio e o pKa. Aps a dissociao, a forma no dissociada dos compostos, que possui carga

neutra e lipossolvel, migra atravs das membranas, a favor de um gradiente de concentrao at atingir o estado de equilbrio entre os meios (FERNANDES 1994). Alm disso, o tamanho das partculas tambm afeta a extenso e a velocidade de absoro de um frmaco sempre que este transportado passivamente (DESESSO & JACOBSON, 2001). Em relao s formas farmacuticas slidas, administradas por via oral, essas sofrem influncia da velocidade e extenso de desintegrao e dissoluo dos compostos para que posteriormente possam ser transportadas (AULTON, 1996). H tambm os transportadores de efluxo, que funcionam como barreira absoro uma vez que carreiam os frmacos da membrana intestinal de volta para o lmen (KATSURA & INUI, 2003). Dentre os transportadores j conhecidos, muitos pertencem superfamlia que utiliza a energia proveniente do ATP para secretar frmacos contra um gradiente de concentrao. A mais importante dessas protenas, identificada no intestino a glicoprotena-P, devido sua ampla seletividade e significativa expresso entrica, alm disso, esta representa o produto da expresso do gene de multiresistncia a frmacos (JULIANO & LING, 1976).

2.3 Disposio

A disposio pode ser definida como todo processo cintico que ocorre com o frmaco aps sua absoro sistmica, quando a administrao ocorre por via EV ou aps a aplicao, nos casos em que a introduo foi IV. Pode-se dividila em dois eventos cinticos distintos, a distribuio e a eliminao (TOZER & ROWLAND, 2009).

2.3.1 Distribuio

Aps a administrao IV ou a absoro, o frmaco se distribui de maneira reversvel, do fluxo sanguneo para outros tecidos, que so denominados na farmacocintica de compartimentos. A velocidade de transporte das substncias para esses locais varia conforme a constante de velocidade de distribuio (Kd) e sofre interferncia de fatores fisiolgicos como a perfuso sangunea e caractersticas da membrana, assim como das propriedades fsicoqumicas do frmaco. Quanto maior a afinidade e extenso de ligao do frmaco s protenas plasmticas, por exemplo, menor ser seu acesso a outros compartimentos do organismo (WINTER, 2009). Para quantificar o processo de distribuio de um frmaco, deve-se calcular seu volume aparente de distribuio (Vd) que definido como a relao entre a concentrao plasmtica inicial (C) de uma substncia, logo aps sua distribuio e a dose total (DOSE) administrada (WINTER, 2009). Quando o Vd alto significa que a concentrao sangunea est diluda em funo da distribuio do frmaco, provavelmente muito lipossolvel, para outros compartimentos. Se por outro lado a substncia demonstra Vd baixo porque a quantidade no sangue permaneceu alta, o que caracteriza um frmaco hidrossolvel (FERNANDES, 1994). O valor de Vd, geralmente expresso em litros (L), pode ser calculado a partir da seguinte equao (TOZER & ROWLAND, 2009): Dose C FERNANDES (1994) afirma que o Vd influencia na determinao do nmero de compartimentos para o perfil farmacocintico das substncias. O compartimento central composto pelos rgos de alta perfuso sangunea como o corao e os pulmes. Em seguida, de acordo com a capacidade de disperso dos frmacos, que depende de fatores como a lipossolubulidade, ligao s protenas plasmticas, tamanho da molcula e pKa, esses penetraro nos compartimentos perifricos, ou seja, rgos de menor perfuso sangunea como a gordura e os msculos.

Vd =

Assim, o Vd total a somatria dos Vds de distribuio central e perifrico. Em associao com a concentrao alvo, o Vd pode ser utilizado para calcular a dose de ataque e a quantidade do frmaco no organismo em qualquer momento, e para estimar a viabilidade de se utilizar as tcnicas de hemoperfuso ou hemodilise na remoo de frmacos do organismo (BOROUJERDI, 2002). De acordo com a distribuio entre compartimentos, pode-se classificar a cintica do frmaco em trs modelos. O modelo monocompartimental (Figura 1) definido sempre que aps a administrao de uma substncia, sua concentrao inicial declinar de acordo com a constante de velocidade de eliminao (Kel), pois ao possuir caractersticas hidrossolveis marcantes, no h passagem do princpio ativo para outros compartimentos (TOZER & ROWLAND, 2009).

Frmaco

FIGURA 1 - Curva de decaimento de um frmaco no modelo monocompartimental de distribuio, em que o logaritmo natural da concentrao (lnC) varia em funo do tempo (t) (FERNANDES, 1994) Em se tratando de um nico compartimento, a distribuio do frmaco seguir uma equao uniexponencial que ao ser transposta para uma escala

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semi-logartmica de concentrao, formar uma reta o que indica que h apenas uma meia-vida (t1/2) de decaimento (FERNANDES, 1994). Os modelos bi e tricompartimental possuem grficos semelhantes, entretanto, no primeiro, o frmaco administrado diretamente no sangue ou compartimento central e a partir desses locais, h a distribuio tambm para o compartimento perifrico, com duas meias-vidas distintas em uma equao biexponencial. Em relao ao modelo tricompartimental (Figura 2), aps a aplicao do frmaco, ocorre uma fase inicial de distribuio rpida e posteriormente, uma de distribuio lenta, seguindo-se fase de eliminao, com uma equao triexponencial. Aps serem colocadas na forma logartmica, as equaes de ambos os modelos passam a ser de 1 grau (FERNANDES, 1994).

Kd

Kel

Kd

Frmaco

FIGURA 2 - Curva de decaimento de um frmaco com modelo tricompartimental de distribuio, na qual o logaritmo natural da concentrao (lnC) varia em funo do tempo (t). Os caracteres Kd, Kd e Kel representam as constantes de velocidade de distribuio rpida, lenta e de eliminao, respectivamente (FERNANDES, 1994)

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2.3.2 Eliminao

A perda irreversvel do frmaco do fluxo sanguneo denominada como eliminao e h dois processos que definem essa etapa cintica. No caso da metabolizao, ou biotransformao, ocorre a converso de uma espcie qumica em outra, j a excreo consiste na supresso irreversvel do frmaco inalterado do organismo (TOZER & ROWLAND, 2009). Os parmetros farmacocinticos relacionados ao processo de

eliminao so a Kel e a depurao, ou clearance (Cl) (WINTER, 2009). Depurao um termo indicativo da capacidade do organismo remover completamente uma determinada substncia de um volume especfico de sangue na unidade de tempo, representada ml/min ou L/h (TOUTAIN et al., 2010). A Cl calculada a partir da dose administrada e de ASC, que de acordo com TOZER & ROWLAND (2009) dada por: Dose ASC A Cl total avaliada pela somatria da sua ocorrncia em todos os locais do organismo, como fgado, rim, bile e outros.

Cl =

2.3.2.1 Metabolizao

O metabolismo pode originar produtos farmacologicamente ativos, inativos ou mesmo potencialmente txicos, os quais, de maneira geral, so mais facilmente eliminados pelo organismo por possuir maior hidrossolubilidade. No processo de metabolizao o frmaco submetido a reaes qumicas, geralmente mediadas por enzimas, e convertido em um ou mais metablitos diferentes do original, que tambm podem ser metabolizados. As reaes mais comuns do metabolismo de frmacos so classificadas como de fase I e de fase II (WINTER, 2009).

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As reaes de fase I englobam a oxidao, reduo ou hidrlise e originam metablitos mais polares do que os frmacos originais. Na oxidao observam-se os processos de dealquilao, hidroxilao, N oxidao e N hidroxilao, formao de sulfxido, desaminao, dessulfurao e passagem do radical -SH para SOH. Na hidrlise de steres e amidas ocorre o rompimento da ligao ster, com formao de cido e lcool. J na etapa de reduo h azorreduo ou nitrorreduo (FERNANDES, 1994). A maior polarizao do metablito resultante da fase I nem sempre suficiente para garantir sua excreo. Portanto, na fase II do metabolismo, esses compostos so submetidos a reaes de conjugao com pequenas molculas endgenas de alta polaridade e formam assim, conjugados altamente hidrossolveis que so excretados principalmente pela urina. Dentre os processos que englobam a fase II esto a glicuroconjugao, acetilao, conjugao com glicina e com sulfato e a O-, S- e N- metilao (FERNANDES, 1994). O fgado o principal e algumas vezes o nico stio de metabolizao de frmacos, todavia tambm pode ocorrer biotransformao em outros locais como nos rins, pele, pulmes, sangue e trato gastrointestinal. O complexo enzimtico CYP450 o principal responsvel pelo metabolismo de frmacos no organismo, mais propriamente pelas reaes de oxidao da fase I (CUMMINS et al., 2001). Segundo NELSON et al. (1996), as enzimas do citocromo P450 so classificadas de acordo com sua relao evolutiva. So conhecidas 18 famlias e 43 sub-famlias no homem, das quais apenas as famlias 1, 2 e 3 parecem estar envolvidas na biotransformao de frmacos (CUMMINS et al., 2001). A famlia CYP3A consiste em quatro sub-famlias, dentre as quais, a CYP3A4 a principal para o metabolismo heptico e mais abundante no fgado e no intestino humanos e equivale derivao CYP3A12 no co (SHIMADA et al., 1994).

2.3.2.2 Excreo Na maioria das espcies, substncias com peso molecular (PM) inferior a 300 mg/mol so eliminadas por depurao renal, principalmente por filtrao

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glomerular, j as superiores a 600 mg/mol so tipicamente excretadas pela bile. Para frmacos com PM entre 300 e 600 mg/mol, a forma de eliminao varia largamente entre as espcies que, em geral, so classificadas em trs grupos de acordo com a eficincia na excreo biliar. Coelhos, porquinhos-da-ndia e o homem so pouco eficientes na excreo de substncias via bile, em contraposio esto os ratos, ces e as galinhas que possuem essa via de eliminao altamente desenvolvida. O grupo intermedirio composto pelos gatos e os ovinos (TOUTAIN et al., 2010). Para garantir alta depurao pela bile, o frmaco deve ser polar, apresentar secreo ativa e ter peso molecular (PM) superior a 350 g/mol. O frmaco, juntamente com a bile, transferido via ducto biliar para o intestino delgado onde pode ser reabsorvido e completar o ciclo entero-heptico, entretanto, se permanecer no ambiente intestinal, ser eliminado juntamente com as fezes (TOZER & ROWLAND, 2009). No h diferenas anatmicas e fisiolgicas importantes entre as espcies de mamferos em relao funo renal, contudo variaes so encontradas em relao capacidade de concentrao e o pH urinrio. A capacidade de concentrao da urina relativamente baixa em sunos, na razo de 3:1 de plasma, j em gatos de 10:1, o que faz com que esses feldeos sejam propensos para formar clculos de oxalato de clcio (HOUSTON et al. 1985). Os rins so a principal via de excreo dos frmacos no organismo e os mecanismos envolvidos na eliminao renal so a filtrao glomerular, secreo tubular ativa e a difuso passiva (WINTER, 2009). Relacionadas ao processo de eliminao, a Kel e a Cl podem se alterar na presena da insuficincia renal, em caso de frmacos excretados fundamentalmente pelos rins, com consequncias sobre a t1/2 da substncia. A taxa de excreo renal facilmente determinada mediante a quantificao da frao excretada inalterada do frmaco na urina (fe). A partir dessa varivel h suporte para reajustar a posologia de medicamentos em pacientes com diferentes graus de alterao na funo renal. Os valores de fe situam-se entre 0, para frmacos que no sofrem excreo renal, e 1, como o

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caso da gentamicina, que possui excreo unicamente pelos rins. A fe pode ser estimada a partir de (TOZER & ROWLAND, 2009): fe = quantidade total excretada na urina DOSE

Em relao depurao renal (Clr), pode-se determin-la em L/h ou ml/min, por meio de fe e de Cl (TOZER & ROWLAND, 2009): fe Cl

Clr =

A partir da determinao de fe, consegue-se tambm obter a depurao heptica (Clh) em L/h ou mL/min (TOZER & ROWLAND, 2009):

Clh = (1-fe) x Cl

2.4 Tcnicas analticas aplicadas farmacocintica

Dentre as tcnicas utilizadas em estudos farmacocinticos com animais pode-se destacar a cromatografia lquida ou gasosa. Esses processos consistem na separao de componentes de misturas moleculares atravs de duas fases imiscveis, uma delas deslocando-se (fase mvel) em relao outra, que permanece estacionria e se constitui por um meio lquido, slido ou gelatinizado. Dentre os tipos de cromatografias, destaca-se a cromatografia lquida de alta eficincia, por sua preciso e rapidez nos resultados (SILVA, 2010). A partir da ionizao da amostra e de sua posterior filtrao, a espectometria fornece informaes estruturais e moleculares dos solutos avaliados. Outra vantagem a sensibilidade do espectmetro, que permite obter dados quantitativos em anlise vestigial, com elevada preciso e exatido.

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Atualmente, utiliza-se com frequncia a associao desse mtodo com as cromatografias (SILVA, 2010). Pela importncia da farmacocintica na medicina veterinria, esto sendo realizados estudos acerca da validao de novos mtodos bioanalticos para a deteco e quantificao precisa de compostos. Um exemplo a tcnica de ensaio imunoenzimtico (ELISA), utilizada de forma rotineira na determinao de frmacos em exames antidoping e avaliada por SOARES et al. (2007), na quantificao de cafena em plasma equino. Os autores compararam os resultados do teste ELISA com os obtidos na croamtografia gasosa e relataram coeficiente de correlao superior a 0,95.

2.5 Delineamento do perfil farmacocintico

Previamente realizao de um estudo farmacocintico, alguns fatores devem ser determinados, como a via e frequncia de administrao do frmaco, tipo de amostras e intervalo de tempo em que sero colhidas, mtodo analtico, espcie animal e incluso ou excluso de critrios adicionais, como por exemplo, a aplicao concomitante de outra substncia ou avaliao de indivduos enfermos (URSO et al., 2002).

2.5.1 Tipos de cintica

Para a maioria dos frmacos, observa-se que os eventos de absoro e eliminao se manifestam de acordo com a chamada cintica de primeira ordem. Esse perfil cintico se caracteriza pelo fato de que a velocidade de transporte (v) das substncias, expressa em mg/min ou ml/min, dependente da quantidade que resta para ser transportada (A) e de uma constante de velocidade (K) (FERNANDES, 1994):

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v=KxA

FIGURA 3 - Representao grfica das fases de absoro, concentrao sistmica mxima (Cmax) e eliminao de um frmaco com modelo cintico de 1 ordem

No caso da cintica de primeira ordem para um frmaco administrado EV, por exemplo, medida que o princpio ativo absorvido do stio de administrao (fase de absoro), a velocidade de absoro diminui, e simultaneamente, eleva-se a velocidade de eliminao devido ao aumento da concentrao da substncia no fluxo sanguneo. No momento em que essas duas variveis se igualam ocorre o plat ou Cmax e quando a velocidade de eliminao excede a de absoro, observa-se um declnio na concentrao plasmtica (fase de eliminao) (TOZER & ROWLAND, 2009). O comportamento dos frmacos tambm pode ocorrer com base na cintica de ordem zero, de forma que a velocidade de transporte da substncia permanea de forma constante, independente da quantidade que resta a ser absorvida. Do ponto de vista clnico, frmacos com absoro e eliminao do tipo cintica de ordem zero so mais difceis de serem utilizados, pois a ocorrncia de efeitos adversos por intoxicao ou mesmo devido perda de eficcia so mais comuns e imprevisveis (YACUBIAN, 2004).

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2.5.2 Representao grfica

Na representao grfica da concentrao plasmtica do frmaco pelo tempo, os dois principais mtodos utilizados so o papel milimetrado (cartesiano), no qual a disposio das variveis forma uma curva, e a forma semi-logartmica (Figura 3). Dentre as duas formas, a mais empregada a representao semilogartmica, na qual apenas os dados da ordenada so dispostos em escala de logaritmos. Esse mtodo facilita prever as concentraes em diferentes tempos uma vez que o decaimento da concentrao se d de forma linear (TOZER & ROWLAND, 2009). De acordo com URSO et al. (2002), a utilizao da plotagem semilogartmica se justifica pela ampliao da escala de concentraes, permitindo-se um melhor esboo dos dados, mesmo quando h faixas variadas de magnitude. Adicionalmente, a linearizao da curva de concentrao do frmaco pelo tempo auxilia na compreenso dos resultados e na determinao do modelo farmacocintico.

FIGURA 4 Representao grfica semi-logartmica (esquerda) e cartesiana (direita) da concentrao plasmtica dos frmacos A (vermelho) e B (preto), em funo do tempo (TOZER & ROWLAND, 2009)

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2.5.3 Meia-vida

Para se estabelecer os intervalos e o perodo total de avaliao farmacocintica deve-se levar em conta a escala de tempo dos eventos cinticos. Geralmente, realiza-se o acompanhamento da concentrao sistmica do frmaco por meio da sua meia-vida, que o tempo decorrido para que a concentrao do princpio ativo seja reduzida metade (BARCELLOS et al., 2009). A t1/2 um parmetro expresso em unidade de tempo (min, h, dias, semanas, etc), utilizado para expressar a evoluo cronolgica dos eventos farmacocinticos. A partir do grfico da curva de concentrao plasmtica pelo tempo possvel estimar-se a t1/2 de um frmaco e o nmero de t1/2s presentes em seu perfil farmacocintico, que variam de acordo com a via de administrao e nmero de compartimentos de sua distribuio (TOZER & ROWLAND, 2009). Contudo, dentre as diferentes t1/2s do frmaco, a principal a de eliminao, representada pela reta linear terminal de decaimento, conforme ilustrado na fase de eliminao da Figura 2 (URSO et al., 2002). Por meio das diferentes t1/2s expressas pelo frmaco, possvel determinar-se suas respectivas constantes de velocidade (Ka, Kd e Kel), uma vez que esses parmetros so estabelecidos pela equao (TOZER & ROWLAND, 2009): k = 0,693 t1/2

Em que k expressa na unidade de h-1 e representa as constantes de velocidade em geral. J o nmero 0,693 o logaritmo natural (ln) de 2, obtido por meio da integrao da equao de v, elaborada a partir da derivada da quantidade j transportada (-dT) em um pequeno intervalo de tempo (dt) (TOZER & ROWLAND, 2009): velocidade de transporte = - dT = K x A dt

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Aps estimar a t1/2 de um frmaco, possvel determinar o nmero de meias-vidas (n) que ocorreram em um determinado tempo e assim, estimar a frao que ainda resta a ser transportada AT, em mg ou mol (TOZER & ROWLAND, 2009): AT = (1/2)n

Geralmente,

atribui-se

que

10%

da

dose

seja

percentual

remanescente quando praticamente todo o frmaco foi removido do organismo e assim, esse tempo seria de 3,32 meias-vidas aps atingir Cmax (TOZER & ROWLAND, 2009).

2.5.4 Concentrao plasmtica mxima e rea sob a curva

A Cmax do frmaco estimada a partir da curva de concentrao pelo tempo e varia de acordo com a via de administrao, dose utilizada, tempo decorrido do incio da exposio, sua distribuio e eliminao. De acordo com a obteno das curvas de concentrao plasmtica do princpio ativo em funo do tempo, possvel obter dados fundamentais para a anlise farmacocintica, dentre as variveis destacam-se a Cmax, tmax e ASC, que a medida da exposio sistmica total (TOZER & ROWLAND, 2009). Em geral, a ASC, com unidade convencional em mg.h/L, obtida por meio do mtodo trapezoidal, no qual a concentrao total do frmaco dividida em partes de acordo com os tempos avaliados. Cada rea dividida calculada a partir da concentrao mdia multiplicada pelo seu intervalo de tempo e a somatria de todas as reas individuais determina a ASC total, que medida a partir do tempo zero ao infinito, representado pelo limite no qual a rea insignificante (TOZER & ROWLAND, 2009). Como exemplo, no caso da Figura 5, a rea do intervalo de tempo entre t1 e t2 (ASC1,2) seria calculada conforme a equao:

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ASC1,2 = (C2 C1) x (t2 t1) 2

C C1 1 C

C2

t 1

t 2

FIGURA 5 - Representao grfica da concentrao plasmtica em funo do tempo, da cetamina associada ao midazolam, administrada em ces hgidos. A rea tracejada representa uma diviso do mtodo trapezide para o clculo da rea sob a curva (Adaptado de AMORIM et al., 2008)

2.5.5 Biodisponibilidade e dose efetiva

A partir das caractersticas de migrao dos frmacos pode-se determinar sua B, que o primeiro dos muitos fatores que determinam a relao entre sua dose e a intensidade de ao. De acordo com RANG et al. (2004), a biodisponibilidade a proporo da substncia que permanece no fluxo sanguneo em uma aplicao IV ou que alcana a circulao sistmica aps a administrao EV. Seu valor obtido por meio da equao (TOZER & ROWLAND, 2009):

B = Cl x ASC

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Dose

TOUTAIN et al. (2010) citam que a partir da estimativa de Cl, B e da concentrao plasmtica efetiva (CE) de um frmaco possvel pressupor sua dose eficaz (DE), em mg, para determinada espcie, de acordo com a equao:

DE = Cl x CE B

2.6 Particularidades farmacocinticas na medicina veterinria

Na clnica

veterinria a variedade de espcies atendidas e,

consequentemente, os diferentes padres farmacodinmicos e farmacocinticos desencadeiam a necessidade de se elaborar mtodos seguros para a elaborao de posologias especficas para cada grupo. Na extrapolao alomtrica, uma das tcnicas mais utilizadas, se obtm a dose e a frequncia de administrao desejadas a partir do peso metablico do paciente e de dados conhecidos de outras espcies. No obstante, esse mtodo somente vlido para frmacos previamente adequados para outras espcies, alm de no prever diferenas individuais causadas por fatores extra metablicos como a variabilidade gentica, a idade e o sexo (RIVIERE et al.,1997). A maior variabilidade gentica dos ces em relao aos gatos diretamente proporcional ao tempo de domesticao desses animais. H atualmente mais de 400 raas caninas no mundo, nmero relacionado, principalmente criao e seleo de linhagens pelo homem (RIVIERE & PAPICH, 2009). Tal seletividade tambm desencadeou o aparecimento de diversidades em animais de laboratrio, como exemplo, PAULSON et al. (1999) citam a ocorrncia de disparidades na depurao do anti-inflamatrio celecoxibe em ces da raa beagle de diferentes linhagens laboratoriais e correlacionam tal fato principalmente variabilidade gentica devido a programas de reproduo laboratoriais.

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Dentro de uma mesma classe observam-se fortes similaridades entre seus representantes, porm dentre as diferenas marcantes entre os mamferos est o contedo e atividade das isoformas do CYP450. Um exemplo que os ces possuem o dobro da quantidade desse citocromo quando comparado aos ratos, mas a atividade enzimtica nos roedores superior quela dos caninos (BARIRIAN et al., 2006). Na prtica clnica, casos de bito por intoxicao podem ocorrer em cavalos expostos monensina, um coccidiosttico ionforo administrado em aves. Uma provvel razo para essa alta suscetibilidade a relativa incapacidade dos equinos em desmetilar compostos que no so substratos do citocromo CYP2D (NEBBIA et al., 2001). Variaes anatmicas denotam diferenas nos perfis farmacocinticos dos princpios ativos. A presena do sistema porta-renal em aves e rpteis faz com que o sangue da regio caudal ou inferior do organismo seja drenado diretamente para os rins, o que pode diminuir a biodisponibilidade dos frmacos pelo efeito de primeira passagem. Por isso, a administrao de frmacos nesses animais deve ser realizada nos msculos da parte anterior ou superior do corpo (RIVIERE & PAPICH, 2009). H grande proximidade do perfil farmacocintico entre as espcies em relao via subcutnea, entretanto os gatos possuem predisposio em desenvolver sarcomas induzidos por vacinas, devido formao de reaes fibrogranulomatosas locais. Esses eventos esto relacionados a transformaes malignas das clulas fibroblsticas associadas a uma reao inflamatria persistente (SGUIN, 2002). As diferenas farmacocinticas entre espcies de animais tambm esto associadas a seu comportamento. Na Sucia, foi relatada alta incidncia de colite em guas que praticavam coprofagia das fezes de seus potros, quando esses eram medicados com eritromicina para o tratamento contra Rodococcus equi (BAVERUD et al., 1998). Em um estudo sobre a biodisponibilidade da selamectina, um ectoparasiticida tpico, SARASOLA et al. (2002) observaram 4,4% de biodisponibilidade em ces, enquanto que nos gatos, essa foi de 74%. Os

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autores relacionaram a diferena principalmente ao hbito dos felinos em realizam a lambedura individual, o que provocou a ingesto do frmaco depositado na pele. Anlogos da prostaglandina so utilizados na induo do parto em animais por at trs dias. Nos sunos, a progesterona produzida pelo corpo lteo necessria para manter a gravidez, j no caso de ovinos, este hormnio originado pela placenta suficiente para estabelecer a prenhez por at dois meses, o que explica a possibilidade da utilizao de substncias que suprimem a liberao de progesterona pelo corpo lteo para provocar abortos em porcas, mas que no funcionam em ovinos em um perodo menor que 55 dias (TOUTAIN et al., 2010). Foram realizados estudos sobre as diferenas de biodisponibilidade de 43 frmacos com variaes fsico-qumicas e farmacolgicas entre o homem e o co. Observou-se que a correlao dessa varivel era insignificante para as duas espcies, o que indica que informaes farmacocinticas obtidas em um grupo no devem ser aplicadas ao outro (CHIOU et al. 2000).

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3 CONSIDERAES FINAIS

A farmacocintica clnica uma ferramenta importante na clnica veterinria para auxiliar no alcance da posologia ideal, alm de possibilitar a compreenso da ocorrncia de variaes entre as espcies. Mediante a elaborao de uma curva de concentrao sistmica de um frmaco pelo tempo, possvel definir dados importantes como sua t1/2, Cmax e tmax. Anlises de fluidos orgnicos como a urina permitem estimar o tipo predominante de excreo das substncias e o tempo em que estas so eliminadas. Adicionalmente, o emprego da farmacocintica na rea de produo importante, por exemplo, para garantir a qualidade do leite em animais que esto sendo medicados. Visto a gama de aplicaes da farmacocintica em medicina veterinria, vrios so os estudos acerca de novos mtodos analticos para a deteco e quantificao de frmacos. Atualmente, as principais tcnicas empregadas so a cromatografia, gasosa e lquida, e a espectometria, mas processos como o teste elisa possuem grande potencial para esse fim. Sabe-se que a ocorrncia de variaes inter e intra espcie se justifica por vrios fatores como a histria de domesticao, comportamento, gentica, variaes fisiolgicas e anatmicas, dentre outras. Por isso, o desenvolvimento de tcnicas farmacolgicas que possibilitam o entendimento dos mecanismos e causas dessas diferenas essencial para a segurana na determinao de posologias em grupos pouco estudados ou mesmo no emprego de novos frmacos na medicina veterinria.

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REFERNCIAS

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